Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

«Иркутский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации»

Кафедра гистологии, эмбриологии, цитологии

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ ПО ГИСТОЛОГИИ № 1 (3) ПО ТЕМАМ: « КРОВЬ», «ИММУННЫЙ ОТВЕТ»,

«КРОВЕТВОРЕНИЕ»

УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ ДЛЯ СТУДЕНТОВ

Иркутск

ИГМУ

2012

2

УДК 611-018.5(075.8) ББК 28.86я73 К 83

Рекомендовано ЦМК кафедр медико-биологического профиля ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России

(протокол № 2 от 05.11.2012 г.) Составители:

Л. С. Васильева – д-р биол. наук, проф., зав. каф. гистологии, эмбриологии, цитологии ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России

Л. А. Иванова – канд. биол. наук, доцент каф. гистологии, эмбриологии, цитологии ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России

Л. А. Украинская - канд. биол. наук, доцент каф. гистологии, эмбриологии, цитологии ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России

Рецензент: Т. И. Шалина – д-р мед. наук, профессор, зав. каф. анатомии человека ГБОУ ВПО ИГМУ

Минздрава России

К 83 Рабочая тетрадь по гистологии № 1 (3) по темам «Кровь», «Иммунный ответ», «Кроветворение» : учебно-методическое пособие / сост.: Л.С. Васильева, Л.А. Иванова, Л.А. Украинская, О.В.; ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России. - Иркутск: ИГМУ, 2012. – 32 с.

Пособие по изучению раздела «Общая гистология» в рамках дисциплины «Гистология, эмбриология, цитология» предназначено для работы на внеаудиторных и аудиторных занятиях по темам: «Кровь», «Иммунный ответ», «Кроветворение». Пособие содержит теоретический материал по изучаемым темам, задания и образцы оформления рабочей тетради на практических занятиях, задания для самоконтроля в процессе самостоятельной работы (в виде ситуационных задач и таблиц, которые помогают систематизировать новые теоретические знания).

Предназначено для студентов 1-2 курса ИГМУ, специальности: 060101 – Лечебное дело, 060103 – Педиатрия, 060201 – Стоматология, 060105 – Медико-профилактическое дело, 060601 – Медицинская биохимия.

УДК 611-018.5(075.8)

ББК 28.86я73 © Васильева Л. С., Иванова Л. А., Украинская Л. А. составление, 2012 © ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России, 2012

3

КРОВЬ

Цель занятия: изучить строение крови как ткани. Научиться диагностировать с помощью светового микроскопа форменные элементы крови.

Кровь и лимфа являются особыми разновидностями тканей мезенхимного происхождения, образующие внутреннюю среду организма. Кровь имеет жидкую консистенцию и состоит из плазмы и форменных элементов, состав которых в норме относительно постоянен. Количество крови у взрослого человека от 5 до 5,5 литров, что составляет примерно 1/13 часть массы тела. На плазму приходится 55-60%, на форменные элементы – 40-45%. При различных заболеваниях изменяются химические показатели крови, а также форма, размеры, количество и соотношение форменных элементов. Поэтому состояние крови имеет важное значение для диагностики заболеваний, служит одним из показателей их развития и эффективности лечения.

Функции крови Основная функция крови - перенос различных веществ, в том числе тех, с помощью

которых организм защищается от воздействий окружающей среды или регулирует функции отдельных органов. В зависимости от характера переносимых веществ различают следующие функции крови:

1. Трофическая (доставка питательных веществ от органов пищеварительного тракта, органов-депо или органов, где эти вещества образуются, к тканям, где они подвергаются дальнейшим превращениям).

2. Экскреторная (удаление продуктов обмена веществ: мочевины, креатинина, мочевой кислоты и др. в почки и другие органы (кожа, желудок) и участие в процессе образования мочи).

3. Дыхательная (транспорт кислорода от легочных альвеол к тканям и углекислого газа от тканей к легким).

4. Защитная (осуществляется веществами, обеспечивающими гуморальную защиту организма от инфекции и попадающих в кровь токсинов, доставка в ткани лейкоцитов, антител и фагоцитоз. Током крови удаляются и обезвреживаются продукты распада тканей, образующиеся при повреждении. К защитной функции крови относится ее способность к свертыванию и образованию тромба. В этом процессе принимают участие тромбоциты и факторы свертывания крови).

5. Гуморальная, регуляторная (доставка в ткани гормонов и др. биологически активных веществ, при помощи которых осуществляется регуляция функций отдельных клеток).

6. Гомеостатическая (поддержание постоянства внутренней среды - воды, газов, ионов, температуры тела и т.д.).

Плазма крови Плазма представляет собой межклеточное вещество жидкой консистенции,

состоящее из растворенных в ней углеводов, белков, а также других органических и минеральных соединений. Она имеет слабо щелочную реакцию (рН=7,36), на 90% состоит из воды и 10% сухого остатка, в котором от 6,6% до 8,5% белки - альбумины, глобулины, фибриноген, протромбин, белки комплемента. Белки плазмы обусловливают осмотическое давление, которое определяет обмен воды между кровью и тканями, поддерживают рН крови, обеспечивают ее вязкость, участвуют в свертывании крови, защитных реакциях, транспорте веществ и служат резервом аминокислот. В плазме всегда присутствуют специфические белки – ферменты, уровень которых изменяется при заболеваниях и распаде клеток соответствующих тканей и органов. Биохимический анализ белков крови широко используется в медицинской практике.

Форменные элементы К форменным элементам крови относятся эритроциты, лейкоциты и тромбоциты

(кровяные пластинки) (рис.1). Все форменные элементы образуются в органах кроветворения, имеют ограниченный срок жизни и погибают вне кровотока.

4

1 – эритроцит; 2 – сегментоядерный нейтрофил; 3 – палочкоядерный нейтрофил; 4 – юный нейтрофил

(метамиелоцит); 5 – эозинофил; 6 – базофил; 7 – большой лимфоцит; 8 – средний лимфоцит; 9 – малый лимфоцит; 10 – моноцит; 11- кровяные пластинки.

Рис.1. Форменные элементы крови человека в мазке. Окраска азур II–эозином (по Романовскому – Гимзе).

Эритроциты Эритроциты являются основным типом форменных элементов крови. Они имеют

форму двояковогнутого диска, поэтому центральная часть светлее периферической. На стекле выглядят плоскими, окрашиваются эозином в розовый цвет, т.е. обладают оксифилией. В норме 80-90% эритроцитов дискоциты, остальные могут быть круглые, серповидные, шиповатые и др. Увеличение числа эритроцитов разной формы связано с изменением структуры гемоглобина и называется пойкилоцитоз.

В нормальных условиях средний диаметр эритроцита 7,2 мкм. При распределении их по размерам (кривая Прайса-Джонса) можно выделить эритроциты диаметром менее 6 мкм (микроциты) и эритроциты диаметром 9-12 мкм (макроциты). Увеличение числа микро- и макроцитов называется анизоцитоз. В настоящее время в лабораториях измеряют не диаметр, а объем эритроцитов, что имеет диагностическое значение.

Эритроциты не содержат ядра и органоидов, состоят из 60% воды и 40% сухого остатка, 95% которого приходится на гемоглобин. В норме у человека 2 типа гемоглобина – HbА (у взрослых его 98%) и HbF (фетальный, у новорожденных 80%). Гемоглобин эритроцита, связанный с кислородом (оксигемоглобин), придает розовую окраску кожным покровам, в частности, губам. Отдавший кислород дезоксигемоглобин имеет пурпурный цвет, поэтому при нарушении оксигенации в легких отмечают некоторое посинение губ (цианоз) и бледность кожи. Угарный газ прочно соединяется с гемоглобином (карбоксигемоглобин), это соединение окрашивает губы в ярко-красный цвет. Состояние, при котором содержание гемоглобина в циркулирующей крови значительно снижено, называется анемией. Анемия возникает либо в результате усиленного разрушения эритроцитов, либо из-за уменьшения их образования.

Белково-липидная клеточная мембрана эритроцита снаружи имеет хорошо развитый гликокаликс, который образован олигосахаридами, входящими в состав гликолипидов, гликосфинголипидов и гликопротеидов мембран. Изнутри клеточная мембрана эритроцита имеет сеть филаментов из белка спектрина, формирующую своеобразный цитоскелет, который обеспечивает мембране прочность и гибкость. Доказано, что при наследственной аномалии спектрина эритроциты имеют сферическую форму.

Количество эритроцитов зависит от потребности организма в кислороде. В 1 л у мужчин содержится эритроцитов 3,9-5,5*1012; у женщин 3,5-5,0*1012; у новорожденных 6-8*1012. К 10-14 суткам жизни число эритроцитов снижается до нормы взрослого, с 3-6 месяцев становится минимальным (физиологическая анемия) и достигает нормы взрослого в период полового созревания. Средняя продолжительность жизни эритроцитов составляет

1

2

3

4

5

1

6 7

8

9

11

10

5

120-130 дней. В организме ежедневно разрушается около 200 млн. эритроцитов. При их старении происходят изменения в плазмолемме, снижается интенсивность гликолиза и соответственно содержание АТФ, и как следствие, отмечается нарушение газообменной функции. Разрушаются эритроциты в селезенке, где фагоцитируются макрофагами.

Эритроциты чувствительны к осмотическому давлению: в гипотонической среде набухают и лопаются (гемолиз). Клеточная мембрана при этом сохраняется как единое целое и образует так называемую «тень клетки». Гемолиз можно вызвать и некоторыми химическими веществами, например, растворителями жиров. Гемолитическими агентами также являются змеиный яд, богатый липолитическими ферментами и антитела, полученные введением эритроцитов в генетически отличающийся организм, например, переливанием резус-положительной крови резус-отрицательному пациенту.

Ретикулоциты (молодые эритроциты) В небольшой части эритроцитов (0,2-1%) в виде сеточки сохраняются остатки ядра и

органелл. Это молодые, незрелые формы эритроцитов – ретикулоциты, которые циркулируют в периферической крови не более суток, теряют «сеточку» и превращаются в зрелые формы. Ретикулоциты окрашиваются специальной окраской – бриллиант-крезилфиолетовым (рис. 2).

Рис.2. Ретикулоциты. Разновидности зернисто-сетчатой субстанции:

I –вид клубка; II, III – отдельные нити в виде розетки; IV – в виде зернышек.

Уменьшение количества ретикулоцитов указывает на ослабление функций красного костного мозга и плохую регенерацию «красной» крови. Увеличение количества ретикулоцитов характерно для некоторых видов анемий.

Нормальный состав эритроцитов

Ретикулоциты Дискоциты 80-90 %, Пойкилоциты Микроциты Макроциты 0,2 – 1 % нормоциты 75 % 10-20 % 25 %

Кровяные пластинки (тромбоциты)

В кровотоке кровяные пластинки имеют вид мелких бесцветных телец округлой, овальной или веретеновидной формы размером 2-3 мкм. Это не клетки, а безъядерные фрагменты гигантских клеток костного мозга - мегакариоцитов. При окраске мазков крови азур II – эозином в кровяных пластинках выявляются 2 части: 1 - гиаломер - периферическая, стекловидная, слабо базофильная, гомогенная, содержит много микротрубочек, 2 - хромомер - центральная, более темная, содержащая скопление метахроматически окрашенных (лиловых) гранул. В гранулах содержатся гистамин, серотонин, тромбопластин, ферменты свертывания крови, регуляторные белки, ионы Са и Mg. Тромбоциты имеют рецепторы к факторам свертывания крови, легко склеиваются (агглютинируют) и сразу же разрушаются, при этом выделяют содержимое гранул и запускают реакции свертывания крови. Недостаток тромбоцитов или их устойчивость к

6

распаду тормозят свертывание крови. При окрашивании крови по методу Романовского-Гимзы в популяции тромбоцитов различают 5 основных видов кровяных пластинок: юные – с базофильным гиаломером и единичными азурофильными гранулами (1-5%) зрелые – с оксифильным гиаломером и хорошо развитой азурофильной зернистостью в

грануломере (88%) старые – с более темным гиаломером и грануломером (4%) дегенеративные – с серовато-синим гиаломером и грануломером (2%) гигантские формы раздражения – с розовато-сиреневым гиаломером и фиолетовым

грануломером (2%) Живут кровяные пластинки 9-10 дней, разрушаются в селезенке и легких. Ежедневно

обновляется до 15% тромбоцитов.

Лейкоциты

Лейкоциты – белые кровяные клетки. В свежей крови они бесцветны, что отличает их от окрашенных эритроцитов, имеют ядра и органоиды. Все виды лейкоцитов способны к амебоидному движению, благодаря чему они могут мигрировать через стенку кровеносных сосудов. Лейкоциты обладают положительным хемотаксисом по отношению к бактериальным токсинам, продуктам распада бактерий или клеток организма. Средняя продолжительность пребывания лейкоцитов (гранулоцитов) в кровяном русле не более 8-12 часов, после чего они мигрируют в ткани, где выполняют свои защитные функции. У взрослых в 1 л крови содержится от 4 до 10*109 лейкоцитов, у новорожденных - 10-30*109, у грудничков от 6 до 22*109. При различных отклонениях от нормального состояния количество лейкоцитов может увеличиваться (лейкоцитоз) или уменьшаться (лейкопения).

Лейкоциты выполняют защитные функции, обеспечивая фагоцитоз микробов, инородных веществ и продуктов распада клеток (гранулоциты и моноциты); участвуя в иммунных реакциях организма (моноциты и лимфоциты).

По морфологическим признакам и биологической роли лейкоциты подразделяют на 2 большие группы – это гранулоциты (зернистые) и агранулоциты (незернистые). У зернистых лейкоцитов сегментированные ядра, в цитоплазме выявляется специфическая зернистость (эозинофильная, базофильная или нейтрофильная). В соответствии с окраской специфической зернистости различают эозинофилы, базофилы и нейтрофилы. Кроме того, все гранулоциты содержат в цитоплазме первичную неспецифическую азурофильную зернистость (первичные лизосомы). В процессе дифференцировки клетки чем старше она становится, тем меньше в ней лизосом, но больше специфических гранул и сегментов в ядре.

Гранулоциты (эозинофилы, базофилы и нейтрофилы) - дифференцированные специализированные клетки (делиться не могут); содержат в цитоплазме гранулы, имеют дольчатое (сегментированное) ядро, способны к фагоцитозу, но фагоцитируют, выйдя из кровотока, в окружающие сосуд ткани. Разрушаясь, гранулоциты выделяют ферменты и биологически активные вещества, влияющие на ткани и проницаемость капилляров.

Нейтрофилы Нейтрофилы – самая многочисленная группа лейкоцитов, содержание в крови 45-

75% от общего числа лейкоцитов. Имеют округлую форму, диаметр на мазке 10-12 мкм. Ядро сегментировано. В цитоплазме много гликогена и мелкая зернистость - специфическая слабооксифильная и неспецифическая азурофильная. Неспецифических гранул 10-20%, их размер 0,4-0,8 мкм - это лизосомы, содержат миелопероксидазу и гидролитические ферменты (кислая фосфатаза,кислая протеаза и др.). Специфических гранул 80-90%, они мелкие, пылевидные, размером до 0,3 мкм, содержат лизоцим, лактоферрин, щелочную фосфатазу, катионные белки, поэтому их окраска слабо оксифильная. В крови присутствуют нейтрофилы разной степени зрелости, они отличаются по форме ядер:

с бобовидным ядром - юные (метамиелоциты) до 1% палочкоядерные 1-5% сегментоядерные 40-70% (3-5 сегментов в ядре).

7

У женщин ядро нейтрофила содержит спирализованную Х-хромосому, которая видна в виде барабанной палочки - тельце Барра. Основная функция нейтрофильных гранулоцитов - это антибактериальная защита и участие в воспалительных реакциях. Они фагоцитируют микроорганизмы и мелкие чужеродные частицы, поэтому их называют микрофагами; разрушают бактерии и поврежденную при воспалении ткань путем секреции супероксида кислорода и лизосомальных ферментов, а также выполняют функцию дезинтоксикации. Живут от 5 до 9 суток, в крови находятся 8-12 часов, далее мигрируют в соединительную ткань.

При инфекции и воспалении нейтрофилы активируются для фагоцитоза и поглощают много кислорода (так называемый респираторный взрыв). При этом образуется много перекиси и супероксида кислорода, которые разрушают бактерии. Такая вспышка активности бывает у нейтрофилов только 1 раз, после этого они погибают и образуют гной. В популяции нейтрофилов здоровых людей в возрасте от 18 до 45 лет фагоцитирующие клетки составляют 69-99%. Этот показатель называют фагоцитарной активностью. Другой показатель - фагоцитарный индекс оценивает число частиц, поглощенных одной клеткой. Для нейтрофилов он равен 12-23.

При инфекции и воспалении значительно усиливается выброс нейтрофилов в кровь - возникает нейтрофильный лейкоцитоз, в крови увеличивается количество молодых форм клеток – сдвиг лейкоцитарной формулы влево, что говорит об усилении кроветворения, т.е. резервы красного костного мозга не исчерпаны, прогноз благоприятный. При нарушении кроветворения в крови увеличивается количество старых нейтрофилов с гиперсегментированным ядром (>5 сегментов) – происходит сдвиг лейкоцитарной формулы вправо, т.е. резервы костного мозга исчерпаны, поэтому прогноз неблагоприятный.

Базофилы Базофильные гранулоциты – самые малочисленные, составляют от 0,5 до 1% от

общего числа лейкоцитов. Диаметр в мазке 11-12 мкм. В цитоплазме содержится небольшое количество органелл, ядро сегментировано, но почти не видно, т.к. цитоплазма забита крупными лиловыми гранулами размером около 1 мкм. Это специфическая зернистость, которая окрашивается синим азуром-II метахроматически (не в тон красителя). Это обусловлено высоким содержанием в гранулах гепарина. С гепарином связаны гистамин и серотонин, которые увеличивают проницаемость мелких сосудов и межклеточного вещества, усиливают миграцию лейкоцитов в ткань, стимулируют фагоцитоз и сокращение гладких миоцитов - все это направлено на защиту организма против повреждения. Но при токсико-аллергических состояниях секреция гистамина базофилами патологически усиливается. Гепарин почти во всех реакциях является антагонистом гистамина. Он подавляет активность ферментов, снижает свертывание крови, проницаемость сосудов и основного вещества ткани, связывает гистамин и уменьшает аллергические реакции. Кроме того, в гранулах есть пероксидаза и анафилаксин. Анафилаксин – это комплекс белков, который выделяется при аллергии и вызывает быстрый отёк (Квинке). Базофилы крови по содержимому гранул и биологическому действию сходны с тучными клетками соединительной ткани. Те и другие имеют на плазмолемме рецепторы к иммуноглобулинам класса Е, которые могут образовываться в организме в результате бурной иммунной реакции на различные антигены – аллергены. Ig Е через рецепторы фиксируются на этих клетках и при повторном контакте с тем же аллергеном связываются с ним. В результате гранулы с гистамином выходят из клеток. Проявлением воздействия больших доз гистамина могут быть мгновенные высыпания, волдыри, отеки и удушье, вплоть до анафилактического шока со смертельным исходом. Базофилы могут принимать участие в кожной реакции гиперчувствительности замедленного типа на введение антигенов разного происхождения, а также в образовании инфильтратов в других органах (дыхательных путях и почках). Как и другие гранулоциты, они способны к фагоцитозу и образованию биооксидантов (Н2О2 и О2). Таким образом, функцией базофилов является дезинтоксикация, регуляция процессов свертывания крови и проницаемости сосудов, а также участие в иммунных и аллергических

8

реакциях. В крови базофилы находятся от 1 до 2 суток, в тканях погибают быстро; срок их жизни неизвестен.

Эозинофилы У взрослых в крови содержится от 1-5% эозинофилов, у детей 1-2%. Для

эозинофилов характерны суточные колебания – максимальное количество их в крови содержится ночью, минимальное – утром. Диаметр их на мазке составляет 12-15 мкм. По степени зрелости они, как и нейтрофилы, могут быть сегментоядерные (2-5 сегментов), палочкоядерные и юные. Среди органелл заметно развиты рибосомы, митохондрии и комплекс Гольджи. Ядро эозинофилов сегментировано, чаще 2-х-лопастное. В цитоплазме выявляются крупные ацидофильные гранулы размером 0,5-1,5 мкм. В гранулах содержатся пластинчатые кристаллы (кристаллоид) щелочного белка, богатого аргинином. Он обладает антипаразитарным действием: растворяет кутикулу червей, а также нейтрализует гепарин. Кроме того, в гранулах много гидролитических ферментов: пероксидаза, коллагеназа, гистаминаза, арилсульфатаза. Эозинофилы обладают хемотаксисом по отношению к гистамину, лимфокинам, комплексам антиген-антитело. Клетки малоподвижны, почти не фагоцитируют. В крови эозинофилы находятся от 3 до 8 часов, в тканях – от 8 до 12 суток.

При аллергии и паразитарных заболеваниях количество эозинофилов в крови повышается, развивается эозинофилия, что является диагностическим признаком. При стрессе эозинофилы выходят из крови в ткани, и их количество в крови резко падает - развивается эозинопения (признак стресса).

Таким образом, функции эозинофилов можно определить как ограничение местных воспалительных реакций, противопаразитарную защиту, участие в обезвреживании ядов и токсинов.

Агранулоциты Подразделяются на лимфоциты и моноциты. Группа незернистых лейкоцитов

характеризуется наличием несегментированных ядер и отсутствием специфической зернистости в цитоплазме. Они относятся к иммунокомпетентным клеткам и осуществляют иммунный ответ организма.

Лимфоциты Лимфоциты, включающие множество различных клонов, осуществляют функцию

иммунологического надзора, участвуют в обеспечении нормального внутриутробного развития, нормальной дифференцировки и функционировании тканевых систем, отторжения трансплантантов и других антигенов, защиты от опухолей и инфекции.

Лимфоциты в крови взрослых людей составляют 20-35% от общего числа лейкоцитов, у ребенка в 1 год - 54,5%, в 5 лет - 44,5%, т.к. идет становление иммунной системы. Ядро лимфоцитов крупное, круглое или с вдавлениями, очень плотное. Цитоплазма базофильная, в ней много рибосом, есть лизосомы, небольшое количество митохондрий и комплекс Гольджи.

Лимфоциты отличаются по размерам и функциям. По размерам их делят на малые (4,5-7 мкм, с узким ободком базофильной цитоплазмы вокруг плотного ядра), средние (7-10 мкм, цитоплазмы больше, ядро светлее), большие (10-16 мкм, цитоплазмы много, слабо базофильная, хорошо видна азурофильная зернистость). Малые лимфоциты бывают светлые и темные. В светлых лимфоцитах содержится много лизосом, в темных - много рибосом. Из всех лимфоцитов: малых 90%, средних около 3%, больших 5-10%. У детей больших лимфоцитов до 20%. Среди малых лимфоцитов есть небольшой процент стволовых клеток, мигрирующих из костного мозга в ткани.

По функциям лимфоциты делят на 3 группы: Т-лимфоциты, В-лимфоциты и естественные клетки-киллеры (ЕКК). Т- и В-лимфоциты морфологически неотличимы, но имеют разные мембранные рецепторы.

Т-лимфоциты Т-лимфоцитов в крови 70-80%. Выделяют 4 вида Т-лимфоцитов:

Т-хелперы – Тh(CD4+) Тs Т-супрессоры(CD8)

9

Тk Т-киллеры(CD8) Тm Т-памяти (CD8)

Т-хелперы (Тh-CD4+) – это малые лимфоциты, образуются в тимусе, циркулируют в крови, могут выходить в ткани. Принимают антиген (АГ) от антиген-представляющих клеток (А-клеток), с помощью своих рецепторов делают АГ узнаваемым для других лимфоцитов. Кроме того Т-хелперы выделяют цитокины, которые стимулируют бласттрансформацию и образование клонов лимфоцитов, специфичных для данного АГ. Роль Т-хелперов наглядно выступает при заболевании СПИД. Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) проникает в Т-хелперы, поражая их через специфические рецепторы. После заражения вирусом, клон Т-хелпера не может дать нормальное количество клеток. В-лимфоциты лишаются необходимых хелперных факторов и не дифференцируются в плазматические клетки. Нарушается гуморальный иммунитет. Макрофаги также поражаются этим вирусом, но в меньших количествах. Тем не менее, они фиксируют вирус на плазмалемме и при воздействиях с лимфоцитами заражают новые клетки.

Т-супрессоры (Тs-CD8) не дают развиться избыточному иммунному ответу, подавляют Т-хелперов. При их недостатке развиваются аллергии, при избытке - опухоли. Образуются в тимусе, быстро мигрируют по крови в периферические лимфоидные органы (селезенку, лимфоузлы), где под действием антигенов превращаются в бластные формы (бласттрансформация) и образуют Т-киллеров и Т-памяти. Бласттрансформация – это трансформация лимфоцитов в лимфобласты под влиянием антигенов.

Т-памяти (Тm-CD8+) - это малые лимфоциты, запоминают антиген (АГ) и быстро запускают образование Т-киллеров при вторичном попадании АГ в организм. Образуются под влиянием АГ в периферических лимфоидных органах, циркулируют в крови, осуществляют иммунный надзор.

Т-киллеры (Тk-CD8+) образуются в периферических лимфоидных органах и быстро мигрируют в ткани, поэтому в крови единичны. В тканях они убивают чужие антигенные клетки (опухоли, трансплантаты), выделяя фактор некроза опухоли (лимфотоксин) и белки перфорины. Т-киллеры не могут сами узнавать АГ и нуждаются в помощи А-клеток и Т-хелперов. Т-киллеры вступают в контакт с клеткой-мишенью, в результате которого ее клеточная мембрана начинает пропускать внутрь воду, и клетка погибает. Во время контакта киллерные клетки выделяют гранулы белка перфорина, который встраивается в плазмалемму клетки-мишени и формирует ионные каналы, через которые выходят соли и входит вода. Механизм уничтожения клеток-мишений сходен с таковым при гуморальном иммунном ответе: в первом случае в построении ионных каналов участвуют белки комплемента, во втором – перфорин.

B-лимфоциты В-лимфоцитов в крови около 20%. Различают 3 вида:

В0-наивные Вm (памяти) плазмоциты

В-наивные (В0, CD-19,20,21,22,23) образуются в костном мозге, в крови их очень мало, они быстро мигрируют в периферические лимфоидные органы, где превращаются в бласты и образуют плазмоциты и В-памяти.

В-памяти (Вm) – это малые лимфоциты, циркулируют в крови, запоминают АГ и при его повторном попадании в организм стимулируют образование плазмоцитов.

Плазмоциты – образуются под действием антигена из В-наивных в периферических лимфоидных органах, выходят в кровь и лимфу, быстро выселяются из сосудов в ткани, где секретируют антитела (иммуноглобулины - Ig) к антигенам. В здоровом организме плазмоциты составляют около 1% от общего количества лимфоцитов. При хронических воспалительных процессах их количество резко возрастает.

Естественные клетки-киллеры ЕКК, NK (0-лимфоциты, CD-16,56,57) - большие зернистые лимфоциты, образуются

в костном мозге из СК, циркулируют в крови, составляют 5-10%. В цитоплазме много лизосом, а при активации появляются редкие крупные слабо-оксифильные гранулы с

10

перфоринами. ЕКК узнают и убивают раковые клетки, которые еще не стали антигенными. Это киллеры-одиночки, они не нуждаются в помощи других лимфоцитов. Они не имеют специфичных для антигенов рецепторов, которые есть у Т- и В-лимфоцитов. Увеличивают активность под действием интерлейкинов и интерферонов. Дефект ЕКК является причиной хронической инфекции. В раннем детстве ЕКК в крови много, до 20%, т.к. другие механизмы иммунной защиты еще не сформированы.

В крови человека преобладают Т-лимфоциты. На протяжении от 7 до 80 лет их доля среди всех лимфоцитов снижается в среднем от 70 до 55%. Содержание В-лимфоцитов, наоборот, повышается от 25 до 30%, а ЕКК изменяется от 5 до 15%. У взрослых количество лимфоцитов возрастает при хронических инфекциях и интоксикациях (туберкулез, тиреотоксикоз, хроническое воспаление) и уменьшается при стрессе, т.к. глюкокортикоиды надпочечников разрушают Т-лимфоциты, поэтому при частых стрессах развиваются аллергии (при разрушении Т-супрессоров) или опухоль (при разрушении Т-хелперов).

Моноциты Моноциты - это самые крупные клетки крови, диаметр на мазке 18-20 мкм. Ядро

рыхлое, бобовидное, круглое или лопастное. Цитоплазма слабо базофильна, занимает 0,5-0,7 объема клетки, в ней имеется множество пиноцитозных везикул и лизосом (в виде мелкой азурофильной неспецифической зернистости), а также небольшие по размеру митохондрии. Для моноцитов характерно наличие пальцеобразных выростов цитоплазмы и образование фагоцитарных вакуолей. В цитоплазме содержатся такие ферменты, как неспецифическая эстераза, лизоцим, пероксидаза и поверхностный фермент 5-нуклеотидаза. В норме у взрослого человека содержится 3-8% моноцитов, у новорожденного 8-14%, у грудничков 11,5%. Моноциты выселяются из крови в ткани и дифференцируются в тканевые макрофаги, т.е. макрофаги всех органов развиваются из моноцитов крови. На основании этого сформулировано представление о мононуклеарной фагоцитарной системе (МФС), объединяющей моноциты крови и макрофаги различных органов (альвеол легкого, костного мозга, лимфатических узлов, селезенки, печени и др.). Клетки этой системы характеризуются происхождением из промоноцитов костного мозга, способностью прикрепляться к поверхности стекла, ативностью пиноцитоза и иммунного фагоцитоза, наличием на мембране рецепторов для иммуноглобулинов и комплемента. В крови моноциты находятся до 4,5 суток, где выполняют 2 функции: фагоцитоз и участие в иммунном ответе организма.

Гемограмма. Лейкоцитарная формула В медицинской практике анализу крови придают большое значение. При этом

составляют гемограмму и лейкоцитарную формулу. Гемограмма включает основные показатели:

1. Содержание форменных элементов в 1 литре крови: эритроцитов 4-5,5 x 1012 лейкоцитов 3-10 x 109 тромбоцитов 1,3-4 x 1011

2. Гематокрит (доля форменных элементов) -30-35% 3. Гемоглобин (Hb) - 130-160 г/л 4. СОЭ (скорость оседания эритроцитов) 4-20 мм/час

Лейкоцитарная формула - процентное соотношение всех лейкоцитов крови: гранулоциты нейтрофильные 45-75%, эозинофильные 1-5%, базофильные до 1%; агранулоциты: лимфоциты 20-35%, моноциты 3-8%.

У новорождённых соотношение форменных элементов крови почти как у взрослых. Постепенно число лимфоцитов возрастает, а нейтрофилов – падает (в 6-ти дневном возрасте оно уравнивается: первый физиологический перекрёст), и до 5 лет преобладает лимфоидная кровь. Новое снижение количества лимфоцитов и повышение нейтрофилов приводит к выравниванию обоих показателей к 5 годам (происходит второй перекрёст). Постепенное снижение числа лимфоцитов и повышение числа нейтрофилов продолжается

11

до полового созревания, когда содержание этих видов лейкоцитов достигает нормы взрослого человека (табл. 1).

Таблица 1. Возрастные отличия состава форменных элементов крови

Показатели крови новорожденного Эритроциты 6 – 8 *1012 в 1 л. Лейкоциты 10 – 30 *109 в 1 л.. Кровяные пластинки 200 – 250 *109 в 1 л.. Базофилы Эозинофилы Нейтрофилы – всего 60 – 65% Лимфоциты Моноциты

Юные Палочко-ядерные

Сегменто-ядерные

- 0,5 – 8% 0,5 – 1% 1 – 5% 58 – 59% 20 – 35% 8 – 14%

Средние показатели крови ребенка в 1 год Эритроциты 4,55*1012 в 1 л. Лейкоциты 10,5*109 в 1 л. Кровяные пластинки 243*109 в 1 л. Базофилы Эозинофилы Нейтрофилы – всего 60 – 65% Лимфоциты Моноциты

Юные Палочко-ядерные

Сегменто-ядерные

0,5 1,5% - 3, 5% 28 % 54,5% 11,5%

Средние показатели крови ребенка в 5 лет Эритроциты 4,89*1012 в 1 л Лейкоциты 10,2 *109 в 1 л. Кровяные пластинки 200 – 300 *109 в 1 л Базофилы Эозинофилы Нейтрофилы – всего 60 – 65% Лимфоциты Моноциты

Юные Палочко-ядерные

Сегменто-ядерные

0,5 1,0% - 4% 40,5% 44,5% 9%

Показатели крови взрослого Эритроциты: муж. 3,9- 5,6 *1012 в 1 л.; жен. 3,5-5,0 *1012 в 1 л.. Лейкоциты 4-10 *109 в 1 л.. Кровяные пластинки 130-400*109 в 1 л.. Базофилы Эозинофилы Нейтрофилы – всего 60 – 65% Лимфоциты Моноциты

Юные Палочко-ядерные

Сегменто-ядерные

0,01-1% 1-5% 0,5 – 1% 1 – 5% 45-70% 20 – 35% 3-8%

Препарат № 1. Мазок крови человека.

Окраска азур II–эозином (по Романовскому-Гимзе). Демонстрационный с зарисовкой. Форменные элементы крови изучают на мазках, окрашенных специальными

красителями, которые избирательно выявляют ядра, цитоплазму и ее включения. Классический метод окрашивания форменных элементов крови, который послужил основой для их классификации, является метод Д. Л. Романовского (1891 г). Он основан на способности клеток крови воспринимать красители азур II и эозин. Содержимое цитоплазмы форменных элементов (органеллы, включения) различно по физико-химическим свойствам, т.е. имеет либо кислые, либо основные свободные радикалы и, соответственно, окрашивается основными или кислыми красителями.

Для выявления сетчатых структур ретикулоцитов используется специальное окрашивание бриллиант-крезилфиолетовым красителем (крезилвиолет), который окрашивает ретикулоциты в сине-зеленый цвет. Бол. ув. (табл.2). Рассмотреть препарат – мазок крови (пользоваться только микровинтом!). В поле зрения микроскопа стрелка направлена на определенную клетку, которую следует зарисовать. Здесь же прилагается цветной рисунок форменного элемента.

12

ЗАДАНИЕ по теме «Кровь» В тетради для практических занятий начертить таблицу № 2.

В графе «Краткая характеристика» сделать описание каждого форменного элемента по следующей схеме: 1. Процентное содержание (%) 2. Размер 3. Форма ядра, окраска цитоплазмы 4. Наличие в цитоплазме зернистости (для лейкоцитов)– неспецифической и специфической:

а) % содержание б) размер гранул в) содержание гранул

5. Функции 6. Продолжительность жизни: а) в крови, б) в соединительной ткани

Таблица №2 Название форменного элемента Краткая характеристика

Эритроцит. Ретикулоцит (молодой эритроцит)

Нейтрофил

Эозинофил

Базофил

13

Лимфоцит большой (ЕКК)

Лимфоцит средний

Лимфоцит малый

Моноцит

Кровяные пластинки

Зарисовать форменные элементы крови и обозначить: эритроцит - ретикулоцит; гранулоциты: нейтрофил, эозинофил, базофил; агранулоциты: лимфоцит большой (ЕКК), лимфоцит средний, лимфоцит малый, моноцит; кровяные пластинки (тромбоциты).

ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ: В тетради написать гемограмму и лейкоцитарную формулу.

14

ИММУННЫЙ ОТВЕТ

Иммунной системой называют совокупность лимфоидных органов, тканей и клеток, обеспечивающих механизмы иммунитета. Иммунная система распознает генетически чужеродные агенты - антигены (АГ).

Иммунный ответ – это специфическая реакция организма, направленная на уничтожение антигена (АГ).

Антиген (АГ) – это генетически чужеродное вещество, способное вызвать иммунный ответ. Антигенами могут быть микроорганизмы, чужеродные в генетическом отношении клетки или ткани, продукты жизнедеятельности чужеродных клеток – белки, полисахариды, нуклеопротеиды и др. Обычно антигены локализуются на мембранах клеток, причем, антигенными свойствами обладает не вся молекула антигена, а только специфическая структура наружной части, которая называется детерминантной группой. Число детерминантных групп на поверхности клетки может быть очень большим.

Иммунный ответ осуществляют иммунокомпетентные клетки - макрофаги и лимфоциты. Они узнают свои и чужие клетки по опознавательным белкам цитолеммы, которые называются "молекулы главного комплекса гистосовместимости" 1 класса (МГКГ). Эти белки уникальны для каждого организма и есть в цитолемме всех клеток. Моноциты и макрофаги в иммунном ответе выполняют 2 функции:

1- узнают антиген (по отсутствию МГКГ-1 класса), перерабатывают его и передают лимфоцитам, поэтому их называют антиген-представляющими или А-клетками;

2 - А-клетки под действием антигена выделяют цитокины (клеточные "гормоны"), которые являются активаторами для лимфоцитов и др. клеток. Некоторые цитокины (интерлейкины, фактор некроза опухоли, интерфероны) являются эндогенными пирогенами, которые с кровью попадают в нервный центр терморегуляции гипоталамуса и вызывают повышение температуры организма.

Лимфоциты - это центральные клетки в иммунном ответе. Согласно клонально-селекционной теории иммунитета, в организме образуются клоны лимфоцитов, генетически запрограммированные уничтожать определенный антиген. В зависимости от природы антигена различают 2 вида иммунного ответа: гуморальный (связывание антигенных белков антителами-иммуноглобулинами) и клеточный (уничтожение антигенных клеток). Клеточный иммунитет осуществляют тимус-зависимые Т-лимфоциты, образующиеся в тимусе. Гуморальный иммунитет осуществляют бурса-зависимые В-лимфоциты, образующиеся у человека в красном костном мозге. Иммунный ответ может быть первичным (антиген в организм попал впервые) и вторичным (при повторном попадании антигена).

Гуморальный иммунный ответ При гуморальном иммунном ответе кооперируются А-клетки, Т-хелперы-2 и В-

наивные лимфоциты (см. рис.3). Первичный иммунный ответ развивается при попадании АГ в организм, где он

захватывается антиген-представляющими клетками (А-клетками), находящимися в тканях и крови. А-клетки частично переваривают АГ, расщепляют его на фрагменты и освобождают в тканевую жидкость, кровь и лимфу. Оттуда их захватывают Т-хелперы-2, образуют комплекс «антиген-рецептор», которые опять освобождаются в тканевую жидкость, кровь и лимфу. Далее макрофаги снимают с поверхности Т-хелпера2 антигенрецепторные комплексы, концентрируют их на своей поверхности в виде «обоймы» и передают В-наивному лимфоциту.

В-наивный лимфоцит не способен реагировать на единичные молекулы антигена, для его активации необходима подготовленная Т-хелпером-2 и макрофагами «обойма» молекул антигена. Одновременно Т-хелперы-2 выделяют лимфокины, которые вместе с обоймой из антигенов стимулируют В-наивные лимфоциты к бласттрансформации и образованию плазмоцитов и В-лимфоцитов памяти.

15

Рис.3. Схема гуморального иммунного ответа

Вторичный иммунный ответ развивается при вторичном попадании АГ в организм, при этом бласттрансформация включается и А-клетками, и В-лимфоцитами памяти. Потомки активированного В-наивного лимфоцита заканчивают свою дифференцировку, преобразуясь через стадию плазмобластов в плазмоциты, которые секретирует антитела.

Антитела (АТ)- это иммуноглобулины (Ig), они способны специфически соединяться с антигеном. Иммуноглобулины (Ig) одного класса состоят из двух частей: общей неизменной части (Fc- фрагмент) и отличающейся части, специфичной для каждого антигена. Антитела (Ig), оседая на микроорганизмах, фиксируют на них особые белки плазмы крови – систему комплемента. Белки системы комплемента встраиваются в клеточную оболочку и формируют ионные каналы, пропускающие воду, что приводит к набуханию и гибели клетки-мишени; в результате микробы погибают.

По специфичности все иммуноглобулины делят на 5 классов: IgG, IgМ, IgА, IgЕ, IgD, IgG. В большом количестве вырабатывается при вторичном иммунном ответе, очень

специфичен к АГ. Нейтрализует бактериальные токсины вирусов, служит опсонином при фагоцитозе. Опсонины - это вещества, которые соединяются с фагоцитируемой частицей или клеткой и стимулируют ее поглощение фагоцитом. Опсонинами являются некоторые фракции системы комплемента, белки, полисахариды, АГ.

IgМ. Вырабатывается при первичном иммунном ответе, менее специфичен к АГ. Служит опсонином при фагоцитозе, активирует лизис клеток, нейтрализует токсичные АГ.

IgА. Является барьерным иммуноглобулином, содержится в слюне, слезах, слизистом секрете пищеварительного тракта, дыхательных и мочеполовых путях.

IgЕ. В большом количестве вырабатывается при глистной инвазии и аллергии. Защищает от паразитов, стимулирует секрецию гистамина базофилами и тучными клетками.

IgD. Это эмбриональный иммуноглобулин, содержится у новорожденных, а также на поверхности развивающихся В-лимфоцитов. Его роль не достаточно изучена.

16

Клеточный иммунный ответ

При клеточном иммунном ответе кооперируются А-клетки, Т-хелперы-1 и Т-супрессоры (см. рис.4).

Первичный иммунный ответ осуществляется при распознавании чужеродных клеток антиген-представляющими клетками, которые частично перерабатывают ее и передают Т-супрессорам. Т-супрессоры, за счет содержащихся на их поверхности специфических рецепторов, обладают способностью снимать антиген с поверхности макрофага, связываясь с ним. Одновременно макрофаги секретируют цитокины, стимулирующие Т-хелперов-1 к секреции своих цитокинов, которые тоже активируют Т-супрессоры. В результате Т-супрессоры вступают в бласттрансформацию, размножаются и образуют клетки памяти и Т-киллеры. Т-памяти запоминают информацию о данном АГ, а Т-киллеры уничтожают АГ.

Вторичный иммунный ответ запускается и А-клетками, и Т-лимфоцитами памяти, которые при повторной встрече с АГ включают бласттрансформацию Т-супрессоров с последующим клонированием Т-лимфоцитов памяти и Т-киллеров. Т-киллеры уничтожают антигенные клетки путем секреции цитолитических белков – перфорина и фактора некроза опухоли (ФНО или лимфотоксин). Они вступают в контакт с клеткой – мишенью, в результате которого ее клеточная мембрана меняет структуру. Во время контакта клетки-киллеры выделяют с лимфотоксином и гранулы с белком перфорином. Лимфотоксин активирует в клетках-мишенях программу апоптоза, а перфорин встраивается в плазмолемму клетки-мишени и формирует ионные каналы. Через эти каналы из клетки выходят соли, а в клетку поступает вода, в результате клетка-мишень набухает и погибает. Полагают, что так убивают не только Т-киллеры, но и естественные клетки- киллеры (ЕКК).

Рис.4. Схема клеточного иммунного ответа

Итак, иммунный ответ реализуется в результате кооперации антиген-представляющих клеток (А-клеток) и лимфоцитов. В его развитии можно выделить 5 этапов:

17

1. Распознавание АГ - осуществляется антиген-представляющими клетками (макрофагами), которые присутствуют в тканях, в крови и захватывают АГ.

2. Представление АГ Т-хелперам - А-клетки расщепляют АГ на фрагменты, которые освобождают во внутреннюю среду. Эти фрагменты АГ становятся узнаваемыми для рецепторов Т-хелперов, которых существует 2 вида: Тх-1 включают клеточный иммунный ответ, Тх-2 - гуморальный. Тх-1 после контакта с фрагментами АГ выделяют цитокины, которые действуют на Тсупрессоры (СД8). Тх-2 захватывают фрагменты АГ, образуют комплексы "АГ-рецептор", а затем освобождают эти комплексы в кровь, лимфу или тканевую жидкость. Оттуда их захватывают В-наивные лимфоциты, которые могут их узнавать.

3. Бласттрансформация - Под действием цитокинов и комплексов "АГ-рецептор" Т-супрессоры или В-наивные лимфоциты в периферических лимфоидных органах превращаются в Т- или В-лимфобласты и начинают размножаться.

4. Клонирование лимфоцитов, специфичных для данного антигена - При клеточном иммунном ответе Т-лимфобласты делятся, при этом образуются Т-киллеры и Т-лимфоциты памяти. При гуморальном иммунном ответе В-лимфобласты клонируют большое количество плазмоцитов и В-лимфоцитов памяти.

5. Уничтожение антигена – Т- лимфоциты - киллеры убивают чужеродные клетки (ФНО и перфоринами), осуществляя клеточный иммунитет. Плазмоциты секретируют Ig (антитела), которые связывают АГ, образуя иммунные комплексы "антиген-антитело", осуществляя гуморальный иммунитет.

Естественные клетки–киллеры (ЕКК) в клеточной кооперации не участвуют. В настоящее время их рассматривают как главные клетки, осуществляющие противоопухолевую защиту. Они сами распознают опухолевые клетки-мишени и уничтожают их, секретируя белок перфорин.

СИТУАЦИОННЫЕ ЗАДАЧИ

КРОВЬ

1. В условном эксперименте в стенке желточного мешка на раннем этапе эмбриогенеза экспериментальным путем разрушена мезенхима. Каковы последствия данного эксперимента?

2. При гетеротрансплантации органов обнаружено отторжение трансплантанта. Какие клетки крови обеспечивают этот процесс?

3. У больного взята кровь для анализа. Данные первого анализа показывают абсолютное содержание эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов в 1 мкл крови, данные второго анализа – процентное соотношение лейкоцитов в крови. Как называется первая и вторая формулы?

4. При анализе крови больного обнаружено стойкое повышение количества эритроцитов, Как называется это явление?

5. У больного при анализе крови обнаружено стойкое снижение количества эритроцитов. Как называется это явление?

6. У ребенка диагностирована глистная инвазия. Какие изменения в лейкоцитарной формуле следует ожидать?

7. В лейкоцитарной формуле больного повышен процент сегментоядерных нейтрофилов и нет юных и палочкоядерных нейтрофилов. Как называется данное состояние лейкоцитарной формулы и когда наблюдается?

8. В лейкоцитарной формуле больного повышен процент юных и палочкоядерных нейтрофилов и уменьшено содержание сегментоядерных нейтрофилов. Как называется данное состояние лейкоцитарной формулы и когда наблюдается?

18

9. Лейкоцитарная формула больного указывает на эозинофилию. О чем могут свидетельствовать эти изменения крови?

10. В организме больного начался острый воспалительный процесс. Какие изменения можно ожидать в гемограмме?

11. Известно, что плазматические клетки вырабатывают специфические антитела на данный антиген. При введении антигена количество плазматических клеток увеличивается. За счет деления каких клеток происходит увеличение числа плазмоцитов?

12. В условном эксперименте у нейтрофила удалили лизосомы. Как это отразится на функции нейтрофила?

13. Под действием токсина нарушен синтез фибриногена. Какая функция крови при этом изменится?

14. При анализе крови больного обнаружено резкое снижение количества эритроцитов. Как называется это явление и какие функции крови изменяются при этом?

15. Если у человека взять на анализ кровь вскоре после выполнения тяжелой физической работы, то гемограмма будет отличаться от нормальной. Количество каких форменных элементов в связи с этим изменится и каким образом?

16. При повреждении кожных покровов у больного наблюдалось более более длительное, чем в норме, кровотечение из раневой поверхности. Недостаток каких форменных элементов крови может обуславливать удлинение времени кровотечения?

17. У больного в результате травмы произошло обильное кровотечение. Через несколько дней у пострадавшего был сделан анализ крови. Как изменилось количество и состав эритроцитов? Какие изменения наблюдаются в лейкоцитарной формуле?

18. На месте преступления были обнаружены следы крови преступника. Судебная экспертиза дала заключение, что преступление совершено женщиной. Какие клетки крови были подвергнуты анализу? Какой морфологический признак в этих клетках позволил идентифицировать пол преступника?

19. При анализе крови у больного обнаружено, что количество дискоцитов составляет – 60%, а количество других форм эритроцитов – 40%. Как называется данное явление?

20. При анализе крови у больного обнаружено, что содержание нормоцитов составляет – 65%, а микро- и макроцитов –35%. Как называется данное явление?

21. Исследовали кровь у жителей высокогорья и равнинной местности. Какие различия в гемограмме наблюдаются и почему?

ИММУННЫЙ ОТВЕТ.

22. У больного в результате длительного инфекционного процесса снизилась фагоцитарная способность макрофагов и уменьшилось количество гемоглобина в крови. Объясните, почему снизился гемоглобин.

23. В крови больного повышено содержание иммуноглобулинов М и G. О чем это свидетельствует?

24. Что произойдет с эритроцитами резус-положительной донорской крови, если ее влить реципиенту, имеющему резус-отрицательную кровь? Почему?

25. При лейкозе в крови появляются миелоциты с антигенной цитолеммой. С нарушением функций каких клеток костного мозга это связано?

26. При лейкозе в крови появляются миелоциты, увеличивается количество лимфоцитов и возрастает концентрация иммуных комплексов «антиген-антитело». Почему увеличивается концентрация иммунных комплексов?

19

27. В крови больного увеличено количества лимфоцитов, среди которых 30 % составляют средние лимфоциты. Какой процесс лимфопоэза нарушен в организме? В каком состоянии иммунитет у этого больного?

28. У больного нарушен антигензависимый лимфопоэз (процесс бласттрансформации и производства эффекторных лимфоцитов). С помощью каких веществ можно стимулировать этот процесс?

29. Анализ крови 6-ти месячного ребенка показал, что 20 % от всех лимфоцитов составляют большие зернистые лимфоциты. Это норма или патология? Поясните ответ.

КРОВЕТВОРЕНИЕ (Гемопоэз)

Различают 2 вида кроветворения:

1) эмбриональный гемопоэз - это гистогенез, образование крови как ткани, 2) постэмбриональный гемопоэз – это физиологическая регенерация крови, восполнение форменных элементов взамен утраченных.

Эмбриональный гемопоэз (гистогенез крови)

Эмбриональное кроветворение начинается в мезенхиме желточного мешка, где образуются первые стволовые клетки (СКК) и из них - клетки крови и сосуды. Затем СКК по сосудам переселяются в тело зародыша: сначала в печень, затем в тимус, селезенку, лимфоузлы и красный костный мозг.

В эмбриональный период в гемопоэзе можно выделить 3 основных этапа, последовательно сменяющих друг друга:

1 - Мезобластический, когда начинается развитие клеток крови во внезародышевых органах – мезенхиме стенки желточного мешка, хориона, и появляется первая генерация СКК;

2 - Печеночный, который начинается в печени с 5-6 недели развития, когда печень становится основным органом гемопоэза; в ней образуется вторая генерация СКК. Кроветворение в печени достигает максимума через 5 месяцев и завершается перед рождением. Стволовые клетки крови, образующиеся в печени, заселяют тимус, селезенку и лимфатические узлы;

3 - Медуллярный (костномозговой), начинается с 10 недели эмбриогенеза и постепенно нарастает к рождению, здесь появляется третья генерация стволовых клеток крови. После рождения красный костный мозг становится центральным органом кроветворения.

В стенке ЖЕЛТОЧНОГО МЕШКА на 2-3 неделе развития мезенхимные клетки сближаются и образуют кровяные островки (рис. 5). Внутри островков клетки теряют отростки, округляются и дифференцируются в СКК. Клетки мезенхимы, окружающие такие островки, уплощаются и дают начало тканям стенки сосудов: внутренние клетки дифференцируются в клетки эндотелия, наружные - в гладкомышечные и соединительно-тканные. Островки быстро увеличиваются в размерах, образуют тяжи, которые сливаются между собой.

Гемопоэз начинается внутри формирующихся сосудов – интраваскулярно. В первую очередь, чтобы обеспечить зародыш О2, образуются эритроциты, причем сразу двумя способами – быстрым мегалобластическим и медленным нормобластическим (рис.6). Часть СК дифференцируются в первичные эритробласты (рис.7). Это крупные клетки, 18-20 мкм, с базофильной цитоплазмой и рыхлым ядром с крупными ядрышками. Часть из них делятся и дифференцируются в базофильные эритробласты, которые накапливают много РНК (поэтому их окраска темно-базофильная). Эти клетки уже не делятся, а только дифференцируются, их размер не меняется. В них начинается синтез Hb, по мере его накопления усиливается оксифилия цитоплазмы, а базофилия уменьшается, т.к. синтез белков уменьшается и РНК становится меньше. Цитоплазма окрашивается и азуром, и эозином, т.е. полихромно, и клетки называются полихроматофильными эритробластами. С

20

дальнейшим накоплением в цитоплазме Hb окраска становится ярко оксифильной, и клетки называются оксифильными эритробластами. По мере дифференцировки клетки ядро постепенно уплотняется и сморщивается, происходит пикноз ядра, затем оно распадается на фрагменты и выталкивается из клетки, т.е. происходит кариорексис. У некоторых клеток ядро остается. Образовавшиеся клетки имеют крупные размеры и называются первичные гигантские эритроциты – мегалоциты. Они могут быть ядерные и безъядерные. Такой тип кроветворения называется мегалобластическим. Этим путем эритроциты производятся быстро (за 1-2 суток) и способны быстро обеспечить зародыш кислородом, но они слишком крупные, не проходят по мелким сосудам, живут 2-3 дня и погибают. Их обломки фагоцитируются клетками эндотелия сосудов.

Рис.6. Мегалобластический и нормобластический эмбриональный гемопоэз.

Рис. 5. Кроветворение в стенке желточного мешка: 1- мезенхимные клетки; 2- эндотелий стенки сосудов; 3- первичные кровяные клетки-бласты; 4- митотическое деление бластов.

21

Параллельно здесь же идет нормобластический гемопоэз - это более длительное производство мелких долгоживущих эритроцитов (7-9 суток). Часть первичных эритробластов не вступает в дифференцировку, а продолжает размножаться и дает потомство вторичных эритробластов (рис.8). Они делятся и образуют базофильные нормобласты, которые тоже делятся (2-3 раза) и дают потомство полихроматофильных нормобластов. Они тоже могут поделиться, и, по мере накопления Hb, превращаются в оксифильные нормобласты. С каждым делением дочерние клетки становятся мельче материнских, поэтому оксифильный нормобласт мелкий, диаметром около 9 мкм. После выталкивания ядра из него получается полноценный мелкий вторичный эритроцит, живущий 2-3 месяца

Образование гранулоцитов в желточном мешке происходит вне сосудов, экстраваскулярно, из мезенхимных клеток, окружающих сосуд. Вокруг сосудов мезенхимных клеток округляются и накапливают неспецифическую зернистость - лизосомы, а затем в одних клетках появляется ацидофильная зернистость, в других клетках нейтрофильная. Образуется небольшое количество эозинофилов и нейтрофилов, которые через стенку сосуда попадают в кровь.

Рис. 7. Поперечный срез кровяного островка зародыша кролика 8,5 суток: 1- полость сосуда, 2- эндотелий, 3-интраваскулярные кровяные клетки, 4- делящаяся клетка, 5-формирование первичного эритробласта, 6-энтодерма, 7- висцеральный листок мезодермы.

Рис. 8 Развитие вторичных эритробластов в сосуде зародыша кролика 13,5 суток: 1- эндотелий, 2- проэритробласты, 3-базофильные эритробласты, 4- полихроматофильные

эритробласты, 5-оксифильные эритробласты, 6-оксифильный эритробласт с

пикнотическим ядром, 7- обособление ядра от

оксифильного эритробласта,

8- вытолкнутое ядро нормобласта,

9- вторичный эритроцит.

22

В теле зародыша клетки крови в этот период не образуются. Часть СКК остается в недифференцированном состоянии, из мезенхимных кровяных

островков они тоже мигрируют через стенку сосудов, с кровью переносятся в тело зародыша и попадают в печень, а затем в другие кроветворные органы, где из них будут образовываться клетки крови в тканях, окружающих сосуды, т.е. гемопоэз в теле зародыша идет экстраваскулярно (рис.9)..

Желточный мешок к концу 4-5 недели эмбриогенеза редуцируется, и органом

кроветворения становится ПЕЧЕНЬ, в ней из СК образуются бласты, а из них через те же стадии образуются эритроциты, эозинофилы, нейтрофилы и, кроме этого, гигантские клетки мегакариоциты, которые производят тромбоцитов. На 4-6 неделе параллельно начинается гемопоэз в тимусе и селезенке. В ТИМУСЕ из СК начинают развиваться Т-лимфоциты, которые позже разносятся кровью и заселяют периферические кроветворные органы. СЕЛЕЗЕНКА в первой половине эмбриогенеза является универсальным органом кроветворения. В ней образуются все виды клеток крови, кроме базофилов. Во второй половине эмбриогенеза образование эритроцитов и гранулоцитов почти прекращается, и начинает преобладать образование лимфоцитов. В конце 2-го месяца закладываются ЛИМФОУЗЛЫ. Сначала они тоже являются универсальными органами кроветворения (образуют все клетки крови), но уже с 16 недели образование эритроцитов, гранулоцитов и мегакариоцитов постепенно затухает, в лимфоузлы заселяются Т- и В-лимфоциты из тимуса и костного мозга, начинают размножаться и дифференцироваться в конечные формы лимфоцитов. К рождению в лимфоузлах образуются только лимфоциты, но иногда у новорожденных в них бывают очаги гранулоцитарного кроветворения. КОСТНЫЙ МОЗГ закладывается на 2 месяце, сначала в нем из СК образуются клетки костной ткани, формирующие кости, а на 3 месяце в костных полостях начинается гемопоэз (рис.5). Вначале образуются эритроциты и гранулоциты (кроме базофилов), затем остальные клетки.

Таким образом, в крови зародыша со 2-3 недели развития последовательно появляются: эритроциты, затем эозинофилы и нейтрофилы, затем тромбоциты, затем моноциты и лимфоциты, и лишь после рождения появляются базофилы.

К рождению кроветворение в печени полностью прекращается, остальные органы сохраняют кроветворную функцию в течение всей жизни человека. Костный мозг становится главным кроветворным органом (рис.10).

Рис. 9. Кроветворение в костном мозге зародыша человека с длиной тела 77см. Экстраваскулярное развитие клеток крови: 1- эндотелий сосуда, 2- бласты, 3-нейтрофильные гранулоциты, 4- эозинофильные миелоцит.

23

Рис.10. Кроветворная функция органов гемопоэза в эмбриональный и

постэмбриональный периоды.

Постэмбриональный гемопоэз

Постэмбриональный гемопоэз является физиологической регенерацией крови, которая восполняет естественную убыль утративших способность к делению дифференцированных форменных элементов крови. Костный мозг является универсальным органом кроветворения и сохраняет резерв СК (стволовых клеток); в тимусе образуются Т-лимфоциты (хелперы и супрессоры); в селезенке, лимфоузлах и лимфоидных фолликулах слизистых оболочек образуются конечные формы Т- и В-лимфоцитов (Т-киллеры и Т-памяти, В-памяти и плазмоциты).

В кроветворных органах строму, т.е. опору, для клеток гемопоэза составляет ретикулярная соединительная ткань, а в тимусе – ретикулярный эпителий. Отростчатые клетки стромы образуют сеть, в петлях которой располагаются клетки гемопоэза. В разных кроветворных органах клетки стромы создают особое микроокружение, направляют развитие стволовых клеток по определенному пути. Клетки стромы фагоцитируют неполноценные и погибшие клетки и контролируют выход зрелых клеток в общий кровоток. Незрелые клетки крови еще не сформировали МГКГ 1 класса, поэтому имеют в своей цитолемме антигенные белки, по которым клетки стромы узнают их, связывают и не выпускают в кровоток. В процессе созревания клеток крови их цитолемма перестраивается, лишается антигенных свойств, и клетка выпускается в кровоток. При лейкозе этот контроль нарушается, и в кровь выходят бласты с антигенной цитолеммой, что резко ухудшает заболевание.

Унитарная теория кроветворения

Впервые представление о родоначальных клетках крови сформулировал в начале ХХ века А.А. Максимов. Он высказал мысль, что все клетки крови образуются из стволовых клеток, которые по своей морфологии сходны с лимфоцитами. Позже это подтвердилось в экспериментах методом колониеобразования: в культуре ткани стволовые клетки образуют колонии различных клеток крови. Исследования клеточного состава колонной позволило выявить почти все ряды дифференцировки клеток крови.

24

Процесс образования эритроцитов называется эритропоэз, гранулоцитов - миелопоэз, лимфоцитов – лимфопоэз и т.д. Из стволовых клеток (СКК) образуются 2 линии полипотентных полустволовых клеток (ПСК). Одна линия дает начало мультипотентной клетке – родоначальнице гранулоцитарного, эритроцитарного, моноцитарного и мегакариоцитарного ряда гемопоэза; вторая линия дает начало мультипотентной клетке – родоначальнице лимфопоэза.

Из них под действием колониестимулирующих факторов (КСФ) образуются 8 унипотентных клеток-предшественников - КОЕ (колониеобразующие единицы): 1) КОЕ-М (моноцитов), 2) КОЕ-Гн (нейтрофилов), 3) КОЕ-Эо (эозинофилов), 4) КОЕ-Б (базофилов), 5) КОЕ-Мег (мегакариоцитов), 6) БОЕ-Э (бурстообразующая ед. - взрывообразующая, из которой под влиянием Ил-3, вырабатываемого макрофагами и Т-лимфоцитами, образуется КОЕ-Э - эритроцитов), 7) пре-Т-клетка (предшественник Т-лимфоцитов), 8) пре-В-клетка (предшественник В-лимфоцитов). СК, ПСК и КОЕ морфологически не отличаются (рис.11).

Рис.11. Костномозговые клетки-предшественники всех гемопоэтических рядов

дифференцировки. Из унипотентных клеток под влиянием микроокружения и гемопоэтинов образуются

бласты, они морфологически одинаковы, отличаются только набором ферментов (в миелобластах пероксидаза, в монобластах лизосомальные ферменты). Бласты через несколько стадий созревают в конечные формы – циты (рис.12).

Процесс развития стволовых клеток в зрелые форменные элементы крови складывается из пролиферации (размножения), дифференцировки и созревания. В процессе дифференцировки происходят качественные изменения экспрессии (активации) генов, проявлением этого является белковый синтез. Именно поэтому каждый этап характеризуется своим набором белков клеточной дифференцировки. Так, в созревающих эритроцитах накапливается гемоглобин, в гранулоцитах – специфические гранулы, изменяется клеточная поверхность, появляется способность к амебоидному движению и фагоцитозу.

25

Эритропоэз – образование эритроцитов Клетки эритропоэтического ряда составляют от 20 до 30% всех клеток костного

мозга. Эритропоэз у человека и млекопитающих протекает в костном мозге в особых

эритробластических островках, впервые описанных французским гематологом М. Бесси в 1958 году. Эритробластический островок состоит из макрофага (макрофаги приносят железо в костный мозг), окруженного одним или несколькими кольцами эритроидных клеток, развивающихся из унипотентной колониеобразующей единицы эритроцита (КОЕ-Э), вступившей в контакт с макрофагом. Размножение КОЕ-Э стимулируется продуктами распада эритроцитов и эритропоэтинами, которые вырабатываются в почках и печени в ответ на гипоксию (недостаток кислорода). Образование эритроцита идет 7-10 дней через стадии: проэритробласт, базофильный эритробласт, полихроматофильный, затем оксифильный эритробласт, ретикулоцит, эритроцит. Все бласты, кроме оксифильных, делятся митозом, в каждом поколении уменьшается размер клетки. В сутки образуется 1% эритроцитов - до 300 млрд клеток.

Со стадии проэритробласта клетки могут быть идентифицированы по морфологическим признакам. Последовательные изменения заключаются в накоплении в цитоплазме базофильного эритробласта всех видов РНК для обеспечения синтеза гемоглобина. Следующая стадия - это накопление гемоглобина (полихроматофильный эритробласт), при этом, ядро уплотняется, ядрышко исчезает, уменьшается содержание РНК. Далее образуется оксифильный эритробласт, который утрачивает способность к делению и выбрасывает ядро, превращается в ретикулоцит (молодой эритроцит), который дозревает и в норме (до 1%) может выходить в кровоток.

Проэритробласты составляют около 6% от числа эритроидных клеток человека. Их диаметр 13-15 мкм, значительная часть клетки занята ядром. Цитоплазма базофильная, вокруг ядра имеется светлая перинуклеарная зона (отличительный признак от других бластов), выявлены свободные рибосомы, полирибосомы и митохондрии. Комплекс Гольджи и ГЭС отсутствуют. Ядро содержит от 1 до 5 ядрышек, отличается тонкой структурой хроматина.

Базофильные эритробласты (около 14%) мельче, чем проэритробласт, диаметр клетки 10-12 мкм. Цитоплазма окрашивается резко базофильно, т.к. в ней содержатся многочисленные полирибосомы, а также митохондрии и комплекс Гольджи. На этой стадии отмечен самый высокий уровень синтеза гемоглобина.

Полихроматофильные эритробласты – самые многочисленные клетки (76%). Их диаметр составляет 8-11 мкм. Цитоплазма по мере накопления гемоглобина окрашивается в синеватый цвет с розовым оттенком как основными, так и кислыми красителями (полихромно). Ядро уплотняется, уменьшается в размерах. На этой стадии заканчивается синтез РНК. Это последние клетки в эритроидном ряду, способные к делению.

Оксифильные эритробласты составляют около 3% от числа эритроидных клеток, 7-9 мкм в диаметре, с пикнотическим ядром, которое на этой стадии выбрасывается из клетки. Цитоплазма заполнена гемоглобином и не содержит органелл. После выброса ядра оксифильные эритробласты проходят стадию ретикулоцита. В норме из костного мозга в кровоток поступают только эритроциты и ретикулоциты.

Различают 2 вида эритропоэза. 1 вид - гомобластический - нормальный, когда новые эритроциты образуются из оксифильных нормобластов. 2 вид – гетеробластический – патологический (после больших кровопотерь или отравлений, которые сопровождаются гемолизом), когда эритроциты образуются из разных эритробластов (не только оксифильных, но и из полихроматофильных и даже базофильных – тогда в крови выявляется макроцитоз, а при гемолизе и микроцитоз).

Рис.12. Конечные этапы дифференцировки клеток крови.

Бласты

Дифференциру-ющиеся клетки

Зрелые (конечные) клетки

Гранулоцитопоэз (миелопоэз). Развитие нейтрофилов, эозинофилов, базофилов

Гранулоцитопоэз стимулируется гранулопоэтинами (КСФ, Ил-3, Ил-4 для базофилов, Ил-5 для эозинофилов). Развитие гранулоцита идет 14 суток через стадии: миелобласт, промиелоцит, 3 типа миелоцитов (базофильный, эозинофильный, нейтрофильный), 3 типа метамиелоцитов (базофильный, эозинофильный, нейтрофильный), палочкоядерные, затем сегментоядерные гранулоциты.

Миелобласты – клетки диаметром 10-25 мкм с большим ядром и 2-4 ядрышками. Хроматин диффузно-гранулярной формы с небольшим уплотнением вблизи ядерной мембраны. В цитоплазме располагаются многочисленные митохондрии и полирибосомы, хорошо развит комплекс Гольджи и АЭС, встречаются мелкие азурофильные гранулы и фибриллы. В миелобластах обнаруживаются все цитохимические признаки (ферменты), характерные для гранулоцитов.

Промиелоциты имеют диаметр 20-25 мкм. Ядро округлое, содержит ядрышко, диффузно-гранулярный хроматин. Цитоплазма слабо базофильная, содержит ЭПС и рибосомы. Характерным признаком промиелоцита является накопление в цитоплазме неспецифической зернистости (лизосомы). Специфическая зернистость отсутствует. Промиелоциты способны к митотическому делению.

Миелоциты значительно мельче по размерам, их диаметр составляет от 14 до 16 мкм. Ядра миелоцитов овальные, с чередованием темных и светлых участков. В некоторых клетках выявляются ядрышки. Цитоплазма заполнена специфическими гранулами, соответствующими направлению дифференцировки (нейтрофильными, базофильными, эозинофильными). Миелоциты также способны к митотическому делению и обладают способностью фагоцитировать. С каждым делением клетки миелопоэза становятся мельче.

Метамиелоциты или юные лейкоциты, имеют диаметр 10-14 мкм. По наличию специфической зернистости, количество которой нарастает, метамиелоциты подразделяют на нейтрофильные, базофильные и эозинофильные. Основным морфологическим признаком является подковообразная форма ядра. Хроматин выявляется в виде компактных узлов, создающих характерный узор из чередующихся темных и светлых участков. Клетки приобретают подвижность, утрачивают способность к митотическому делению и образованию гранул.

Палочкоядерные и сегментоядерные гранулоциты. Ядра палочкоядерных гранулоцитов имеют форму жгута или палочки с четким чередованием компактных и светлых участков хроматина. У сегментоядерных гранулоцитов ядро состоит из нескольких сегментов, связанных друг с другом. В цитоплазме содержатся гранулы специфической зернистости. Палочкоядерные и сегментоядерные гранулоциты остаются в костном мозге еще 5-7 суток, составляя значительный резерв, который в 2-3 раза превосходит число молодых клеток и в 30 раз превышает число циркулирующих гранулоцитов. В сутки образуется до 5 млрд гранулоцитов.

У взрослого человека самыми активно размножающимися клетками являются миелоциты. Именно они обеспечивают потребность организма в гранулоцитах, что наблюдается при гомобластическом миелопоэзе (в норме). При гетеробластическом миелопоэзе (после кровопотерь) - вовлекаются более молодые формы.

Тромбоцитопоэз - образование кровяных пластинок

Тромбоцитопоэз стимулируется тромбоцитопенией (низкое содержание в крови тромбоцитов) и тромбопоэтинами, которые образуются в печени. Тромбоциты образуются в течение 10 дней: из мегакариобласта через стадию промегакариоцита образуются гигантские (40-120 мкм) полиплоидные клетки мегакариоциты, от которых отделяются фрагменты цитоплазмы с гранулами - тромбоциты. При митозе делятся

28

только ядра, которые в телофазе снова сливаются. В результате клетка увеличивается в размере и становится полиплоидной.

Мегакариобласты - митотически делящиеся клетки, сходные по морфологическим признакам с другими бластными формами, но в них видны некоторые признаки начинающейся цитоплазматической дифференцировки: развитие комплекса Гольджи, ЭПС, появление впячиваний клеточной мембраны, участвующей в построении открытой тубулярной системы.

Промегакариоциты – более крупные полиплоидные клетки диаметром 30-50 мкм. Ядро крупное, полиплоидное, бобовидное или кольцевидное с мелкозернистым хроматином окружено зоной гликозаминогликанов. Цитоплазма базофильная, содержит азурофильные гранулы. Хорошо выражены органеллы синтеза и очень мелкая специфическая зернистость.

Мегакариоциты. Зрелые мегакариоциты имеют диаметр 40-120 мкм. Выделяют оксифильные и базофильные формы (проходящие заключительный эндомитоз и тромбоцитоотделение). В цитоплазме зрелых мегакариоцитов выделяется демаркационная мембранная система, которая образует ограничительные мембраны будущих кровяных пластинок. Тромбоцитопоэз происходит путем отделения участков цитоплазмы от мегакариоцитов. Каждый мегакариоцит производит от двух до восьми тысяч тромбоцитов.

Моноцитопоэз – образование моноцитов и макрофагов

Моноцитопоэз стимулируется КСФактором моноцитов-макрофагов. Идет в 3 стадии: монобласт, промоноцит, моноцит.

Монобласт, близок по строению к миелобласту. Однако ядро его значительно варьирует по форме: от округлого до бобовидного и даже дольчатого, а полоска цитоплазмы более широкая, слабобазофильная. Хроматин в ядре мелко дисперсный, имеются ядрышки.

Промоноциты определяют по более грубой и рыхлой структуре ядра с остатками ядрышек. Ядра отличаются полиморфизмом. В цитоплазме появляется мелкая пылевидная неспецифическая зернистость, характерная для клеток этого ряда (лизосомы). Они проходят два деления и превращаются в моноциты.

Моноциты также отличаются полиморфизмом ядер, которые могут быть бобовидными, подковообразными, причудливо изогнутыми и дольчатыми. Хроматин небольшой плотности. Образование моноцитов в костном мозге человека протекает в 2 раза быстрее, чем гранулоцитов. В кровотоке моноциты находятся в среднем 12 часов, далее выходят в ткани, где превращаются в макрофаги, время жизни которых в среднем 27 суток. Макрофаги способны к пролиферации (размножению).

Лимфоцитопоэз - образование лимфоцитов и плазмоцитов

Лимфоцитопоэз идет в 2 этапа. 1 этап – антигеннезависимый, проходит в центральных органах - костном мозге и тимусе. Пре-В-клетка остается в костном мозге, а пре-Т-клетка переселяется в тимус. Из них образуются лимфобласты, затем пролимфоциты. Затем в костном мозге из В-пролимфоцитов образуются В-наивные, а в тимусе из Т.пролимфоцитов - Т-хелперы и Т-супрессоры. 2 этап – антигензависимый, проходит под действием антигенов в периферических кроветворных органах, где Т-супрессоры и В-наивные лимфоциты превращаются в Т-лимфобласты и плазмобласты, из них образуются пролимфоциты и проплазмоциты. Из Т-пролимфоцитов образуются Т-киллеры и Т-памяти; из В-пролимфоцитов и проплазмоцитов - В-памяти и плазмоциты. Образование Т-лимфоцитов стимулируют Ил-2, Ил-4, Ил-6, В-лимфоцитов – те же и Ил-5.

ЕКК, предположительно, образуются в костном мозге и печени.

29

Лимфобласты морфологически похожи на другие бласты. Диаметр клетки – 20-22 мкм. Ядро округлое с равномерно распределенным хроматином в виде сетки, содержит от 1 до 3 ядрышек. Цитоплазма имеет различную степень базофилии.

Пролимфоциты имеют диаметр 11-12 мкм. Ядро бледное с более высоким содержанием гетерохроматина, выглядит рыхлым, содержит ядрышко. Цитоплазма окрашивается слабо базофильно, содержит азурофильные включения, комплекс Гольджи.

Лимфоциты имеют более плотное ядро и небольшой объем цитоплазмы. Особенностью лимфоцитопоэза является бласттрансформация - способность дифференцированных клеток (лимфоцитов) превращаться в бластные формы. (См. раздел « Кровь»).

Препарат № 2. Мазок красного костного мозга.

Окраска азур II – эозином (по Романовскому-Гимзе). Демострационный с зарисовкой.

Бол.ув. (табл. 3). При рассмотрении препарата следует пользоваться только микровинтом. В поле зрения микроскопа видны клетки красного костного мозга. Стрелка указывает на определенную клетку, которую следует зарисовать. Рисунок клетки прилагается.

Заполнить таблицу: Дать краткое описание клетки в таблице и сделать соответствующие обозначения, руководствуясь вышеизложенным описанием клеток.

Название клетки Краткая характеристика

ПСК (полустволовая клетка)

Промиелоцит

Миелоцит эозинофильный

Метамиелоцит

эозинофильный

Эритробласт базофильный

30

Эритробласт

полихроматофильный

Эритробласт оксифильный

Мегакариоцит

СИТУАЦИОННЫЕ ЗАДАЧИ.

1. У больного в крови обнаружен нейтрофильный лейкоцитоз. Какие изменения костномозгового кроветворения можно ожидать? Изменится ли костномозговой резерв сегментоядерных нейтрофилов?

2. У больного после острой кровопотери в крови обнаружен эритроцитарный макроцитоз. Какие изменения произошли в красном костном мозге?

3. У больного при хронической кровопотере в крови обнаружен эритроцитарный макроцитоз. Какие изменения можно ожидать в структуре желтого костного мозга?

4. Клетки крови поместили в питательную среду. Через несколько дней на питательной среде появились колонии клеток эритропоэза и миелопоэза. Какие клетки крови размножились и образовали эти колонии? Опишите морфологические признаки этих клеток.

5. У больного диагностирована гемолитическая анемия, количество эритроцитов в крови снижено. Как изменится гемопоэз в красном костном мозге? Почему?

6. В крови больного обнаружены нейтрофильные метамиелоциты и много палочкоядерных нейтрофилов. Какая функция красного костного мозга изменилась? Какой процесс развивается в организме?

7. В крови больного обнаружена лейкопения. Какие вещества способны стимулировать лейкопоэз и повысить количество лейкоцитов в крови?

8. У больного в крови уменьшено количество кровяных пластинок и снижена свертываемость крови. Какой вид гемопоэза в красном костном мозге нарушен?

9. При лейкозе в крови появляются миелоциты. С нарушением функций каких клеток костного мозга это связано?

31

10. В крови больного увеличено количества лимфоцитов, среди которых 30 % составляют средние лимфоциты. Какой процесс лимфопоэза нарушен в организме?

11. У больного (взрослого) в формуле крови 40 % нейтрофилов и 40% лимфоцитов. Можно ли сделать вывод об угнетении нейтрофилопоэза? Поясните свой ответ.

12. У больного (взрослого) в формуле крови 40 % нейтрофилов и 40% лимфоцитов. Можно ли сделать вывод об активации лимфопоэза? Поясните свой ответ.

13. У больного нарушен антигензависимый лимфопоэз (процесс бласттрансформации и производства эффекторных лимфоцитов). С помощью каких веществ можно стимулировать этот процесс?

14. У ребенка диагностирована глистная инвазия. Как на нее отреагирует красный костный мозг?

Литература для самоподготовки.

Основная:

1. Гистология, цитология и эмбриология: учебник / ред Ю.И.Афанасьев. - : изд., перераб. и доп.- М.: Медицина, 2006.- 768 с.

2. Быков В.Л.Частная гистология (краткий обзорный курс): учебник /В.П.Быков – СПб.: Сотис. 2007.-304 с

3. Атлас микроскопического и ультрамикроскопического строения клеток, тканей и органов: учебн. пособие /В.Г.Елисеев, Ю.И.Афанасьев, Е.Ф.Котовский, А.Н.Яцковский -5 изд., перераб. доп. М.: Медицина, 2004. – 448 с.:ил.

Дополнительная:

1. Быков В.Л Цитология и общая гистология. Функциональная морфология клеток и тканей человека: учебник /В.Л.Быков. СПб: Сотис 2007. – 520 с

2. Гарстукова Л.Г. Наглядная гистология (общая и частная): уч. пособие /Л.Г.Гарстукова, С.Л.Кузнецов, В.Г.Деревянко. – М.: МИА, 2008.- 204 с

3. Гистология: атлас для практических занятий: учебное пособие /Н.В.Бойчук, Р.Р.Исламов, С.Л.Кузнецов, Ю.А.Челышев.- М.: ГЭОТАР – МЕДИА, 2008.- 160 с

4. Кузнецов С.Л. Атлас по гистологии, цитологии и эмбриологии: атлас: учеб.пособие/ С.Л.Кузнецов, Н.Н..Мушкамбаров, В.Л.Горячкина. – 2-е изд.доп. и перераб. - М.: МИА 2006. - 376с.

5. Кузнецов С.Л. Гистология, цитология и эмбриология: учебник /С.Л.Кузнецов, Н.Мушкамбаров. – М.: МИА 2007.- 600 с.

32

Учебное издание

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ ПО ГИСТОЛОГИИ № 1 (3) ПО ТЕМАМ: « КРОВЬ», «ИММУННЫЙ ОТВЕТ»,

«КРОВЕТВОРЕНИЕ»

Составители:

Васильева Людмила Сергеевна Иванова Любовь Алексеевна,

Украинская Людмила Анатольевна, .

Подписано в печать 5.11.2012. Формат 60х84 1/16. Тираж 500 экз. Заказ № 312. Гарнитура Times New Roman.

Бумага офсетная. Печать трафаретная. Усл.печ.л.5,35. Отпечатано в ООО «Документ-Сервис», г.Иркутск, ул. Карла Маркса, 22, оф.51.