离子和药物对离体蟾蜍心脏活动的影响Effects of Several Drugs and Extracellular Ions on

Isolated Toad Heart

陆源（ luyuan@zju.edu.cn)

浙江大学医学院

• 了解离体心脏灌流的方法• 观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾

蜍心脏活动的影响，探讨钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏作用的机制。

实验目的 (Objectives) ：

离体心脏灌流法

八木氏法   Langendorff 法 Straub 法

Langendorff

1. 材料 (Materials)

婚垫

雄蟾

1.1 实验动物（ laboratory animal) 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种， Zhuoshan Toad ）

雄性蟾蜍皮肤光滑，前肢趾上有黑色婚垫，会鸣叫。雌性蟾蜍皮肤粗糙，无婚垫，不会鸣叫。

雄蟾

雌蟾

1.1 实验动物 中华蟾蜍（ Zhuoshan Toad ）1.2 药品与试剂 肾上腺素（ adrenaline hydrochloride ） , 乙酰胆碱

（ acetylcholine chloride ），普萘洛尔（ propranolol

hydrochloride ） , 阿托品（ atropine sulfate ），氯化钾，氯化钙，任氏液（ Ringer’s solution ）。

1. 材料 (Materials)

1.3 仪器和装置 RM6240 多道生理信号采集处理系统 ( 成都仪器厂）， JZJ01 张力换能器 ( 成都仪器厂）。

1.1 实验动物 中华蟾蜍（ Zhuoshan Toad ）1.2 药品与试剂肾上腺素（ adrenaline hydrochloride ） , 乙酰胆碱

（ acetylcholine chloride ），普萘洛尔（ propranolol

hydrochloride ） , 阿托品（ atropine sulfate ），氯化钾，氯化钙，任氏液（ Ringer’s solution ）。

1. 材料 (Materials)

RM6240 多道生理信号采集处理系统 张力换能器

2.1 仪器连接和参数 张力换能器接 RM6240 多道生理信号采集处理系统第 1 通道 , RM6240 多道生理信号采集处理系统采样频率：400Hz ，时间常数：直流，滤波： 30Hz ，灵敏度： 1g 。

2. 方法 (Methods)

2.2 离体蟾蜍心脏标本制备 蟾蜍毁脑脊髓，蟾蜍仰卧于蛙板，打开蟾蜍胸腔，暴露心脏，结扎下腔静脉，靠头端结扎右主动脉，在左、右主动脉下穿线，在右主动脉根部剪一斜口，将插管插入动脉圆锥， 在心室收缩时将插管插入心室，结扎固定，游离心脏。

2.3 心脏与换能器连接 将蛙心插管固定在夹具上，蛙心夹连线通过滑轮连至张力换能器。蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，调节微调使心脏舒张期至 1g 。

2.4 向插管中加入 1ml 任氏液，心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线 45s 。

2.5 无钙任氏液 1ml 替换插管内的任氏液，心搏曲线稳定后记录 45s 。

2.6 用任氏液洗脱 3 次，加入 1ml 任氏液，待曲线稳定 45s 后，向灌流液中加 0.045M CaCl2 溶液 25l ，心搏曲线稳定后记

录 45s 。2.7 用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入 1ml 任氏液，

待曲线稳定 45s 后，在任氏液中加 0.2M KCl 溶液 25l ，心搏曲线稳定后记录 45s 。

2.8 用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入 1ml 任氏液，待曲线稳定 45s 后，在任氏液中加 6×10-5 M 的 adrenaline

（ Adr ）溶液 10l ，心搏曲线稳定后记录 45s 。

2.9 用任氏液洗脱数次，收缩曲线基本恢复后，加入 1ml 任氏液，待曲线稳定 45s 后，在任氏液中加 5×10-4 M

propranolol （ Pro ）溶液 10l ，心搏曲线稳定后记录 45s ，再加入 6×10-5 M 的 Adr 溶液 10l ，心搏曲线稳定后记录 45s 。

2.10 用新鲜任氏液换洗数次，加入 1ml 任氏液，待曲线稳定后记录45s ，在任氏液中加 6×10-6 M 的 acetylcholine （ ACh ）溶液15l ，心搏曲线稳定后记录 45s 。

2.11 用新鲜任氏液换洗数次，加入 1ml 任氏液，待曲线稳定后记录45s ，加 2×10 –4 M atropine （ Atr ） 15 l ，心搏曲线稳定后记录45s 。再在任氏液中加 6×10-6 M 的 acetylcholine （ ACh ）溶液15l ，心搏曲线稳定后记录 45s 。

2.11 数据测量 测量各项处理前后的心率（ heart rate ， HR) 、心脏舒张末张力（ end diastolic tension ， EDT) 、心脏收缩末期张力 (end systolic tension ， EST) 。

2.12 统计方法 结果以 x s 表示，统计采用 Student t test 方法。

EDT

EST