免疫分析技术

第七节内分泌激素检测

•甲状腺激素检测

•肾上腺皮质、髓质激素检测

•性腺激素检测

•垂体激素

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甲状腺功能检测

•甲状腺素和游离甲状腺素 (TT4、 FT4)

•三碘甲状腺原氨酸和三碘甲状腺原氨酸• （ TT3、 FT3)

•促甲状腺激素（ TSH）•甲状腺结合球蛋白（ TBG）•甲状腺球蛋白抗体（ TGAB）•甲状腺微粒体抗体（ TMAB）

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下丘脑

TRH

垂体前叶

TSH

甲状腺

FT3

FT4

TT3

TT4TBG

( - )

( - )

( - )

( - )( - )

甲状腺轴激素的调节

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甲状腺激素的生物学作用

•促进生长发育

•对代谢的影响

•其它方面

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1.TT3、 FT3 、 TT4、 FT4

【临床意义】

甲亢:

TT3 、 FT3 增高常较TT4增高出现更早

TT3 、 FT3对轻型甲亢, 早期甲亢及甲亢治疗

后复发诊断更敏感

T3型甲亢诊断主要依赖于TT3 、 FT3

T4型甲亢诊断主要依赖于TT4, 、FT4

妊娠、病毒性肝炎、遗传性TBG增多症、某些药物

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TT3 、 FT3 、 TT4 、 FT4

甲减 :

TT4 、 FT4降低更明

显 , 早期 TT3可正常

TT4 、 FT4在甲减诊

断中起关键作用

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2.甲状腺素结合球蛋白（ TBG）

肝脏合成的酸性糖蛋白

[ 临床意义 ]

TBG升高：甲减、肝脏疾病、遗传性 TBG增多症

TBG降低：甲亢、遗传性 TBG减少症、肢端肥大

症

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3.血清促甲状腺激素 (TSH)测定

TSH是腺垂体释放一种糖蛋白

临床意义 :

•增高见于原发性甲低、桥本氏甲状腺炎甲低、甲状腺术

后甲低、继发性甲亢、 TSH不恰当分泌综合症 .

•减低见于各种原因所致继发行甲减、甲亢、肢端肥大症 .

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4.甲状腺过氧化物酶抗体 (TPOAb)

甲状腺球蛋白抗体 (TgAb)

是检测自身免疫性甲状腺疾病的最灵敏的指标，有较特异的相关性 .

【临床意义】

1. TPO 、 TgAb 异常在甲状腺机能减退过程中极为典型。

2 .其次 95%桥本氏甲状腺炎患者能够检测出 TPO 、 TgAb.

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甲功指标的诊断有效性1、甲亢

（1） 诊断的有效性： TSH>FT3>FT4>TT3>TT4

（ 2） T3型甲亢： FT3↑（ TT3↑）

2、甲减

诊断的有效性： TSH > >FT4 >TT4 > FT3>TT3

3、甲亢治疗

激素变化顺序 FT4（ TT4 ） ↓ → FT3（ TT3 ） ↓ → TSH ↑

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甲亢、甲减治疗的疗效监测1.FT3仍增高，无论 FT4是否正常，均为甲亢未控制

2.FT3正常，即使 FT4低于正常， TSH高，仍判断为甲亢已控制并无甲减，但应减少药量。

3.FT3 、 FT4都减低即可认为药源性甲减。

4.TSH的检测可作为甲减病人疗效观察和调节药量的指标，如 TSH恢复正常，则说明疗效满意。

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常见组合

甲功三项• TSH

• FT4

• FT3

甲功五项• TSH TGAB

• FT4 TMAB

• FT3

甲功八项 TSH TGAB TBG FT3 TT4

FT4 TMAB TT3

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肾上腺皮质、髓质激素检测

•皮质醇

•促肾上腺皮质激素 (ACTH)

•醛固酮 (ALD)

•儿茶酚胺（ CA）

•生长激素 (GH)

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皮质醇、 ACTH

1.皮质醇↑ ACTH↑：

下丘脑垂体瘤

2.皮质醇↑ ACTH ↓：

肾上腺皮质肿瘤

3.皮质醇↓ ACTH↑：

原发性肾上腺皮质功能减退

4.皮质醇↓ ACTH ↓

继发性肾上腺皮质功能减退

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醛固酮 (ALD)

1.升高

原发性：肾上腺皮质肿瘤

继发性：血容量减少，如特发性水肿、心

力衰竭、肝硬化腹水、高血压等。

2.降低：

肾上腺皮质功能减退症、垂体功能减退

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儿茶酚胺（ CA）

•肾上腺素、去甲肾上腺素、和多巴胺的总称

•升高：嗜铬细胞瘤、交感神经母细胞瘤

•降低：见于 Addison病

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生长激素（ GH）•升高：巨人症 •降低：侏儒症

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性腺功能检测

睾酮孕酮雌二醇促卵泡激素促黄体生成素泌乳素

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下丘脑 - 垂体 - 性腺轴

垂体

下丘脑

促性腺激素释放激素

LH, FSH 反馈调节

抑制素

刺激

靶器官

性激素

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1.睾酮 (testosterone)

升高 :

性早熟、睾丸间质细胞瘤、肾上腺皮质功能亢进、多囊卵巢综合征、肥胖症等。

降低：

睾丸不发育症、小睾丸、睾丸炎等

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2.雌二醇（ Estradiol ， E2 ）

E2升高

性早熟（真性或假性），卵巢肿瘤，睾丸瘤。

E2降低

原发性性腺发育不全（卵巢性），继发性性腺发育不全（下丘脑或垂体性 )

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3.孕酮（ Progesterone ， P）

P 上升： 葡萄胎、卵巢肿瘤、妊娠高血压综合征。

P 下降 黄体功能不全、原发或继发闭经、早产、流产、死胎。

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4.促卵泡激素（ FSH）

5.促黄体生成素（ LH）

FSH、 LH升高

原发性性腺功能低下，更年期综合症，多囊卵巢，垂体促性激素瘤。

FSH、 LH降低

继发性性腺功能低下。

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6.泌乳素（ Prolactin ， PRL ）PRL升高

下丘脑病变、垂体腺瘤

PRL降低

垂体功能减退

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第八章临床免疫学检查

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•一、免疫球蛋白检测

•二、血清补体检测

•三、细胞免疫检测

•四、肿瘤标志物检测

•五、自身抗体检测

•六、感染免疫检查

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免疫球蛋白检测 （ immunoglobin ， Ig）

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• 参考值（免疫比浊法） • IgG 7.6--16.6g/L• IgA 0.7--3.5 g/L• IgM 0.48--2.12 g/L• 临床意义• IgG IgA IgM IgE 疾病• ↑ ↑ ↑ ↑ 慢性感染、慢性肝炎、自身免疫病• ↑ N N N IgG 型 MM、高丙种球蛋白血症• N ↑ N N IgA 型 MM• N N ↑ N 巨球蛋白血症• N N N ↑ IgE 型 MM、过敏疾病、寄生虫感染

• ↓ ↓ ↓ ↓ 低丙种球蛋白血症、免疫缺陷病、 • 肾病、应用免疫抑制剂

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血清 M 蛋白的检测

M 蛋白是一种单克隆B 细胞异常增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的 Ig分子或其片段。【临床意义】 M 蛋白阳性提示单克隆免疫球蛋白增殖病。 见于： (1)MM：以 IgG型常见，其次为 IgA,IgD和 IgE罕见， 50% MM尿中可检测 BJP。 (2)巨球蛋白血症：血液存在大量的单克 隆 IgM。 80%为 κ轻链， 20%为 λ轻链 (3) 重链病、半分子病、恶性淋巴瘤。

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• 补体检测（ complementry ， C ）

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1 、总补体溶血活性测定 (total hemolytic complement activity,CH50)

总补体溶血活性测定—反应补体传统途径（ C1-C9）的活化程度。

原理 : 溶血素致敏的 SRBC+待测血清→ Ag-Ab

↓

溶 RBC←激活 C 参考值 50--100KU/L

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2 、补体 C3、 C 4 测定方法 免疫比浊法参考值 C3 1.14±0.54g/L 　 C 4 0.55±0.11g/L临床意义（ 1 ）补体↑多见于急性感染、传染病、肿瘤、排斥反应。

（ 2 ）补体↓a 先天性缺陷b 后天性缺陷　 合成↓：肝病、营养不良（合成原料不足） 消耗↑：肾小球肾炎、 SLE、大失血

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细胞免疫检测

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一淋巴细胞表面标志

（一）玫瑰花结形成实验

参考值 57---71%

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（二） T 分化抗原测定 （ cluster differentiation ）

参考值　 ＣＤ３　６１－８５％　　　　　　　ＣＤ４　２８－５８％ ＣＤ８　１９－４８％

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临床意义

1. T细胞总数的变化（ CD3）CD3↓见于： 免疫缺陷病 自身免疫病 病毒感染 恶性肿瘤 应用免疫抑制剂

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2.T细胞亚群的变化

• CD4↓见于： 免疫缺陷病 病毒感染 恶性肿瘤 应用免疫抑制剂• CD8↓见于 自身免疫病

• CD4 /CD8↓ AIDS

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3.CD3↑CD4↑CD8↑，同时伴 CD2↑ CD5↑ CD7↑，应考虑急性 T 淋巴细胞白血病。

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（三） B 细胞分化抗原测定

•参考值 CD19阳性率 11.76±3.73%•临床意义• CD19↑ 同时伴有 SmIg 、 HLA表达见于急性

• B 淋巴细胞白血病。 CD19↓见于无丙种球蛋白血症• 化疗或应用免疫抑制剂

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三 NK细胞测定1 ． NK细胞杀伤活性测定【临床意义 】 1.NK细胞活性↑：病毒感染早期、抗移植排斥反应、 应用干扰素。

2.NK细胞活性↓：恶肿、免疫缺陷病、免疫抑制剂。

3.肿瘤疗效观察及预后评价。

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四 细胞因子检测1.IL-2 测定： IL-2活性的检测已成为评价机体免疫功能的重要指标。

【临床意义】对急性排斥反应和免疫性疾病有诊 断意义，可作为病情观察和药物检 测的一项指标。 IL-2↑ ：见于自身免疫性疾病（ SLE 、活动性 RA ） 、再障、 MM、排斥反应。

IL-2↓：见于免疫缺陷病（ AIDS）、某些病毒感染

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2.TNF测定：有炎症介质作用；抗感染效应；引起肿瘤组织出血、坏死和杀伤作用。

【临床意义】血中的 TNF水平增高对某些感染性疾病的病情观察有价值。

3.IFN测定：是宿主细胞受病毒感染后产生的一种非特异广谱抗病毒因子，具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、控制细胞增殖的作用。

【临床意义 】 IFN↑ ：见于 SLE 、非活动性 RA 、恶肿早期、急性病

毒性感染、再障。 IFN↓ ：见于乙肝及携带者、哮喘、活动性 RA

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肿瘤标志物检测

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定义： 肿瘤细胞合成、释放或由机体对肿瘤细胞反产生的一类物质 .

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应用范围

一、临床应用 肿瘤患者的辅助诊断、疗效判断、病情检测、预后评估、评价手术、放疗、化疗是否有效。反映手术是否根除，判断肿瘤有无复发和转移。

二、肿瘤高危人群的定期筛查三、肿瘤分子流行病学调查及肿瘤标志物生物学研究。

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1 、甲种胎儿球蛋白（ alpha fetoprotein, APF)

• 胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白，胎儿血浆中 AFP值可达 3000μg/L,周岁婴儿浓度接近成人水平，一般健康成人血浆 AFP浓度低于 20μg/L。

• 临床意义 原发性肝细胞癌 生殖腺胚胎癌，胃癌，胰腺癌 病毒性肝炎，肝硬化 妇女妊娠 3 个月后开始升高， 7-8个月达到高峰 , 分娩后 3 周恢复正常。

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2.癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)

• CEA是由胎儿早期的消化管及某些组织合成的一种富含多糖的蛋白复合物 , 是一种广谱肿瘤标志物

• CEA的检测： EIA 、 RIA 参考值＜5μg/L

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临床意义

(1)消化道恶性肿瘤：胃肠道恶性肿瘤均可增高(2)非消化道恶性肿瘤：如卵巢癌、乳腺癌、肺癌等也有不同程度升高。

(3)非肿瘤性疾病增高：良性肿瘤、大量吸烟、妊娠也可增高。

(4)CEA与其它肿瘤标志物结合测定可以提高对癌症的检出率。

检测胸、腹水或胃液的 CEA含量对鉴别诊断有意义

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3 、癌抗原 125测定（ CA-125） 癌抗原 125（ CA125）是存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内的糖蛋白

类相关抗原，作为卵巢癌的辅助诊断是个重要的标志物。 [ 参考值 ]

【临床意义 】

卵巢癌患者血清中 CA125水平明显升高。 其它恶性肿瘤也有一定阳性率，如宫颈癌、乳腺癌、消化道癌肿、肺癌等。

非恶性肿瘤，如子宫内肌瘤、卵巢囊肿、肝炎、肝硬化等疾病也有不同程度升高。

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4 、癌抗原 15-3（ CA15-3）

CA15-3 是乳腺细胞上皮表面糖蛋白的变异因为对乳腺癌有一定的特异性，尤其晚期乳腺癌 100%，故作为诊断乳腺癌的重要标志物。

【临床意义 】（ 1 ）乳腺癌患者常有 CA15-3升高（ 2 ）其它恶性肿瘤，如肺癌、肾癌、结肠 癌胰腺癌、卵巢癌、子宫癌、原发性 肝癌等也有不同程度的阳性率

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5.糖链抗原 19-9（ CA19-9） 在消化道腺癌病人血清中的浓度可明显升高，是胰腺癌和

胆管癌的肿瘤标志物。 6.前列腺特异性抗原 (Prostate specific antigen， PSA)

复合型 PSA,游离型 PSA(f-PSA),前列腺癌患者可见血清 PSA浓度升高。

7.神经元特异性烯醇化(neuronspecificenolase， NSE)

小细胞肺癌患者 NSE水平明显高于肺腺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌等非小细胞肺癌患者

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首选标志物　　　　对应疾病 ＡＦＰ　　　　　 肝癌

ＣＥＡ　　　　　　　　结肠癌

ＰＳＡ　　　 前列腺癌

ＮＳＥ　　　　　　　 小细胞肺癌

CA125　　　　　　 卵巢癌

CA153　　　 乳腺癌　

CA199　 胰腺癌