A.O.R.N. “GAETANO RUMMO” – BENEVENTO

Dipartimento Materno - InfantileUnità Operativa Complessa di Genetica Medica

La Genetica Medica:un universo in espansione…

Novità diagnostiche

23 ottobre 2010

Matteo Della Monica

ClassificazioneLe malattie genetiche possono essere distinte in:

• Cromosomiche– Numeriche– Strutturali

• Monogeniche– Autosomiche

• Dominanti• Recessive

– X-linked• Dominanti• Recessive

• Multifattoriali• Mitocondriali

Mendeliane Cromosomiche Mitocondriali

16777 3000 (infinite) < 100

Quante sono le malattie genetiche?

Quante sono le sindromi genetiche?

Numero elevato e crescente ( POSSUM 5.5 2800 condizioni)• Ogni mese “nuove” segnalazioni sulle riviste scientifiche

specializzate

• Distinguiamo:- Condizioni ben note (es S. di Down)- Condizioni discretamente note (es S.di Williams)- Single case report

Citogenetica

I Citogenetica classica

Cariotipo standard

Cariotipo ad alta risoluzione

Il cariotipo standard

Cariotipo ad alta risoluzione

CitogeneticaII Citogenetica molecolare

FISH– Painting / Sonde alfoidi / Sonde locus-specifiche– Riarrangiamenti criptici subtelomerici “Telomeri”

FISH multicolor– SKY e M-FISH– M-Band

array-CHG

FISH

• Diagnosi di sindromi da microdelezione

• Definizione di anomalie complesse

• Definizione dei punti di rottura di traslocazioni

• Individuazione di riarrangiamenti criptici

subtelomerici

• Identificazione/caratterizzazione di markers

sovrannumerari/cromosomi ad anello

Indicazioni alla FISH

Sindrome di Williams

s. di Williams (LSI ELN – Controllo)

• ELN (elastina). Le delezioni che coinvolgono ELN sono responsabili delle anomalie del tessuto connettivo, comprese le anomalie cardiovascolari

• LIMK1 (lim kinase 1). Espressa nel cervello. Delezioni implicate nelle anomalie della costruzione visuospaziale

• GTF2I (general transcription factor 2, I). Delezioni potrebbero avere un effetto negativo sul QI

• STX1A (syntaxin 1A). Coinvolta nel rilascio di neurotrasmettitori e nella secrezione di insulina. Potrebbe avere un ruolo nel diabete

• BAZ1B (bromodomain adjacent to a leucine zipper 1B). Siccome lega il recettore per la vitamina B si è ipotizzato un ruolo nell’ipercalcemia

• CYLN2 (cytoplasmic linker 2). Fortemente espresso nel cervello. Si è ipotizzato un suo ruolo nelle anomalie cerebellari

• GTF2IRD1 (membro della famiglia TF2-I). Coinvolto nelle caratteristiche cranio-facciali

• NCF1 (neutrophil cytosolic factor 1). Codifica un componente del sistema di ossidazine del NADPH. Delezioni sono associate a diminuzione del rischio di sviluppare ipertensione. E’ deleto nel 40% dei pazienti con WS

Da: Meyer-Lindenberg et al (2006) Nature Reviews Neuroscience 7:380–393 (modificata)

Sindrome Velo-Cardio-Faciale

LSI N25

LSI ARSA

A

B

LSI DiGeorge / VCFS Region

LSI ARSA

Male 46,XX

FISH PERINFERTILITA’IN MASCHIO

46,XY

Sindromi diagnosticabili mediante FISH Microdelezioni diagnosticate solo mediante FISH• Williams del ( 7) (q11.2q11.2) (elastina)• “Velocardiofaciale” del (22) (q11.2q11.2)

Microdelezioni diagnosticabili anche mediante FISH• Prader-Willi del (15) (q11.2q11.2)• Angelman del (15) (q11.2q11.2)• Miller-Dieker del (17) (p13.3p13.3)• Sotos del ( 5) (5q35)

Microdelezioni diagnosticate dalla FISH dopo citogenetica tradizionale• Wolf-Hirschhorn del ( 4) (p15)• Crid-du-chat del ( 5) (p15)• Smith-Magenis del (17) (p11.2p11.2)

Microduplicazioni• Charcot-Marie-Tooth 1A dup (17) (p11.2p11.2)• Pelizaeus-Merzbacher dup ( X) (q22q22)

Riarrangiamenti cromosomici subtelomerici“Telomeri”

Riarrangiamenti criptici subtelomerici

• Ritardo mentale medio-grave familiare +/- dismorfismi

• Quadro sindromico di natura non identificata

• Quadro sindromico di natura non identificata/RM

isolato e poliabortività

Indicazioni

FISH MULTICOLOR

• SKY (Spectral KarYotiping)utilizza una serie di sonde specifiche con quantità variabile di fluorocromi con spettro di emissione dall’UV all’IR

• M-FISH (Multiplex-FISH)utilizzando miscela di fluorocromi consente di visualizzare 27 sonde specifiche

Sono utili nello studio dei riarrangiamenti cromosomici complessi edella patologia oncologica