BAB IV
PEMBAHASAN
IV.1 Hasil PengamatanPembahasan
Praktikum kali ini dilakukan percobaan Kromatografi Lapis Tipis
(KLT) dengan tujuan untuk mengetahui kandungan senyawa dan nilai Rf
yang terdapat dalam ekstrak hasil soxhlet bulu babi (Diadema
setosum) dimana nilai Rf ini merupakan nilai yang didapatkan dari
jarak yang ditempuh senyawa dengan jarak yang ditempuh oleh
kombinasi pelarut yang digunakan (Azizah, 2008).
Penentuan senyawa ini dengan menggunakan menggunakan beberapa
pelarut baik yang bersifat polar berupa metanol dan nonpolar berupa
etil asetat dan n-heksan. Langkah pertama yang dilakukan adalah
membersihkan semua alat yang akan digunakan dengan alkohol 70 %
dengan tujuan membebas lemakkan alat tersebut. Kemudian ditimbang
ekstrak kental bulu babi (Diadema setosum). Dilarutkan ekstrak
kental dengan metanol secukupnya. Selanjutnya di buat perbandingan
pelarut antara pelarut polar (metanol) dan nonpolar (etil asetat
dan n-heksan). Perbandingan pelarut yang digunakan adalah metanol
dan etil asetat serta metanol dann-heksan dengan perbandingan
kombinasi pelarut berturut-turut adalah 4:2 dan 4:2. Dari
perbandingan yang ditentukan, diukur masing-masing pelarut sesuai
kombinasi pelarut yang digunakan, dimasukan kombinasi pelarut ke
dalam masing-masing chamber yang telah disiapkan sebelumnya.
Setelah itu, dijenuhkan masing-masing chamber tersebut menggunakan
tissue yang sebelumnya telah digunting kecil dan memanjang dengan
tujuan untuk mempercepat proses elusi (Bernasioni, 2005). Proses
penjenuhan ini dihentikan ketika pelarut tersebut telah membasahi
tissue sepanjang tissue yang digunakan.
Disamping itu, disiapkan plat KLT berupa plat aluminium dengan
panjang 5 cm dan dibuat batas bawah dan batas atas plat tersebut
masing-masing 0,5 cm. Selanjutnya ketika proses penjenuhan chamber
selesai, maka dilakukan penotolon ekstrak yang sudah diencerkan
sebelumnya terhadap plat aluminium menggunakan pipa kapiler.
Penotolon ini dilakukan tepat pada bagian tengah garis batas bawah
plat, dan dimasukkan kedalam chamber dengan syarat jangan sampai
mencelupkan plat tersebut ke dalam pelarut melewati garis batas
bawah yang sudah ditandai sebelumnya. Setelah itu, chamber ditutup
dan dilakukan pengamatan terhadap senyawa yang terbentuk sampai
pada waktu pelarut tersebut akan membasahi garis batas atas tetapi
jangan sampai melewati garis batas atas tersebut.
Setelah waktu tersebut tercapai, maka plat diangkat dan
dikeluarkan dari chamber, dilihat noda yang terbentuk dengan
menggunakan spektofotometer. Dari hasil pengamatan noda yang
dilakukan, dalam praktikum ini tidak ditemukan noda pada plat KLT.
Menurut sastrohamidjojo (2004) yang menyatakan bahwa. apabila tidak
ditemukan noda maka bisa disemprotkan dengan menggunakan asam
sulfat.
Dalam percobaan ini tidak ditemukan noda, hal ini mungkin
diakibatkan oleh adanya beberapa kemungkinan kesalahan yang terjadi
selama proses yang dilakukan berupa teralalu encernya sampel yang
dibuat, penotolon yang kurang tepat, serta kurang teliti dalam
memperhatikan tercelupnya garis batas bawah ke dalam pelarut yang
digunakan.Azizah, U. dkk. 2008. Panduan Praktikum Mata Kuliah Kimia
Analitik II: Dasar-Dasar Pemisahan Kimia. Surabaya: Universitas
Negeri Surabaya
Bernaseoni, G. 2005. Teknologi Kimia. Jakarta: PT Padya
Pranita
Sastrohamidjojo, Hardjono. 2004. Teknik Pemisahan Kromatografi.
Yogyakarta: UGM Press
