calculo del Bias

7/23/2019 calculo del Bias

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Validacin de los mtodos microbiolgicos

CARACTERISTICAS DE LOS RESULTADOSDE MEDICION DE METODOS

MICROBIOLOGICOS

Bqca. QM Alicia I. Cuesta,Consultora Internacional de la FAO


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Objetivos de la clase

Conceptos de precisin, veracidad o justeza y exactituden mtodos microbiolgicos.

Estudios de intercomparacin: tipos, caractersticasgenerales.

Incertidumbre de medicin: Concepto, clculo, expresinen le resultado.


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La naturaleza y la forma en que se comportan los

microorganismos determina las caractersticas delos resultados obtenidos por los mtodosmicrobiolgico.

En general la distribucin de los microorganismospodra describirse mediante modelos estadsticos,

como cantidad de microorganismos por unidad devolumen o peso ( Distribucin de Poisson)


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Qu caractersticas

tienen los resultados de medicinmtodos microbiolgicos

cuantitativos cuando los repito?

Qu caractersticas

Tienen que tener?


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Caractersticas de los resultados de medicinMETODOS MICROBIOLOGICOS

CUANTITATIVOSISO 5725 (trueness and precision) of measurementmethods and results

PRECISIN:proximidad entre resultados

de mediciones independientesdel mismo mensurando,

bajo condiciones estipuladas.


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PRECISIN:

Repetibilidad (r):

Grado de concordancia entre los resultados de sucesivasmediciones del mismo mesurandomediciones del mismo mesurando realizadas en lasmismas condiciones de medicin.(ISO Vocabulario internacional de trminos bsicos ygenerales de la metrologa: 1993)

Reproducibilidad (R):Grado de concordancia entre los resultados de sucesivasmediciones del mismo mesurandomediciones del mismo mesurando realizadas endiferentes condiciones de medicin.(ISO Vocabulario internacional de trminos bsicos ygenerales de la metrologa: 1993).


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PRECISIN:

Resultados imprecisosResultados precisos


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JUSTEZA O VERACIDAD (TRUENESS):

Grado de concordancia entre el promedio deuna gran serie de mediciones y el mesurando(ISO 5725).

Proximidad entre el promedio de una gran seriede mediciones y el valor de referencia.

SESGO (bias): resultado de la medicin menos elvalor de referencia o valor asignado.


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Valor verdadero: valor en consistencia con la

definicin de una magnitudConcepto abstracto,

no realizable en la prctica.

Error de medicin: resultado de la medicinmenos el valor verdadero.


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EXACTITUD

Definicin: es el grado de concordancia entre el

resultado de una medicin y el valor delmensurando

EXACTITUD

PRECISIN

+JUSTEZA


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Ejemplo:

Precisin. Justeza y Exactitud

Resultados precisos y justos:

exactos

Resultados precisos y No justos:No exactos

Resultados imprecisos y justos:No exactos

Resultados imprecisos y No justos:No exactos


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El laboratorio microbiolgico tiene la

responsabilidad de garantizar que losresultados que l produce sean exactos,validos y confiables

de modo de poder tomar una decisinacerca de la inocuidad y calidad sanitaria de

los alimentos.


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IncertidumbreEXACTITUD

Desviacin estndar

PRECISIN:

RepetibilidadReproducibilidad

Sesgo (bias),

desvio, error sistemtico

JUSTEZA O VERACIDAD(TRUENESS):

EXPRESINCUANTITATIVA

CARACTERSTICACUALITATIVA


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Cmo determino en la prctica el

VALOR VERDADERO?

Valor convencionalmente verdadero, o valor

asignado o valor de referencia (vREF).El valor asignado o valor de referencia loobtenemos de: Estudios intercomparacin (Ensayos de AptitudInterlaboratorio, Estudios colaborativos)o

Cepas de referencia certificadas(2da opcin es difcil de obtener en microbiologa)


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DESVIO (BIAS)

Clculo en la prctica es:

Resultado de la medicin menos elvalor de referencia o asignado.

BIAS= x- vREF


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Ensayos de Aptitud InterlaboratorioMtodos cuantitativos (Proficiency

Testing) :


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ESTUDIOS DE

INTERCOMPARACIN :

La intercomparacin es una herramienta muy

valiosa como evaluacin externa cuantitativade la calidad de los laboratorios.

Ejemplo ensayos de aptitud interlaboratorio. Norma en las que se basan el laboratorio proveedor deinterlaboratorio: Gua ILAC G13 o ISO 43.

Anlisis de resultados de los interlaboratorios:

Z-score ISO/DIS13528 Statistical methods for use inproficiency testing by interlaboratory comparisons.


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Proveedor de estudios colaborativos

Prepara las muestras con diferentes niveles de

analito.

Establece el protocolo que deben cumplir los

participantes de la intercomparacin.Instructivo de anlisis de muestra, fecha derealizacin anlisis y envo de los resultados, etc.

Enva las muestras.


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Ejecucin de los ensayos de aptitud:

Los resultados obtenidos por los laboratorios participantes

deben ser enviados al organizador quien los evala.

Es fundamental enviarmuestras homogneas

y estables

Se realizan ensayos y pruebas estadsticas antes delenvo para asegurar la homogeneidad y estabilidad del

material enviado.

El organizador confecciona y enva un informe con informacinsobre el anlisis y evaluacin de los resultados

de todos los laboratorios participantes.


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Segn el objetivo que persiguenpodemos tener diferentes tipos de

estudios de intercomparacin :

Ejercicios de ensayos de aptitudinterlaboratorio.

Estudios colaborativos.

Estudios de certificacin.


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ENSAYOS DE APTITUD INTERLABORATORIO:

Estn abiertos a todos los laboratorios que quieranparticipar y pueden ser obligatorios debido a procesos deacreditacin.

Nos permiten evaluar la aptitud de un laboratorio pararealizar el ensayo.

Se usa como herramienta de ASEGURAMIENTO DECALIDAD DE LOS RESULTADOS DEL ENSAYO.


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ESTUDIOS COLABORATIVOS:

Estn dirigidos a laboratorios especializados,

con experiencia y calidad reconocida.Estos laboratorios son seleccionados por elorganismo que gestiona el ejercicio.

Cada laboratorio debe seguir en forma estrictaun protocolo previamente consensuado pararealizar el mtodo.

Los estudios colaborativos permitenVALIDAR MTODOS.


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ESTUDIOS DE CERTIFICACIN:

Estn dirigidos a laboratorios especializados,

con experiencia y calidad reconocida.

Estos laboratorios son seleccionados por el

organismo que gestiona el ejercicio.

Los estudios de certificacin tienen como

objetivo la PREPARACIN (y posteriorcomercializacin) DE MATERIALES DEREFERENCIA CERTIFICADOS.


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Evaluacin de los resultados obtenidos

en los estudios de intercomparacinmtodos cuantitativos:

Eliminacin de los valores aberrantes segnGrubbs y Cochran Norma ISO-FIL 135B:1991.

Prueba de Z score. ISO/DIS13528 Statisticalmethods for use in proficiency testing byinterlaboratory comparisons.


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LOG 10

En microbiologa

los valores de ufc/ml o g

se distribuyen dando

una curva asimtrica.Para normalizarla se usa

logaritmo en base 10.

La distribucin Normal

est definida

por y

DISTRIBUCION NORMAL

-2

-

+

+2

68%

95,5%

16%

2,25%

16%

2,25%


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ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE

MEDICIN EN MICROBIOLOGA

Definicin: la incertidumbre de medicin es un

parmetro asociado al resultado de la medicin,que caracteriza la dispersin de los valoresque podran ser razonablemente asignados al

mesurando.

NOS PERMITE TENER CONOCER ALMESURANDO.


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ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE

MEDICIN EN MICROBIOLOGA

Los laboratorios de ensayo deben tener y deben aplicarprocedimientos para estimar la incertidumbre de medicin.

La estimacin de las incertidumbres en las medidas yresultados en los laboratorios de microbiologa de

alimentos es parte importante del control de calidad internode los resultados obtenidos.

Es una indicacin cuantitativa de la calidad del resultado

INDICA LA CALIDAD DE LA MEDICINDa idea de la confiabilidad del resultado.


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INCERTIDUMBRE????Pregunta: Qu es el resultado de una medicincuantitativa?Respuestas:1.Un registro de calidad.2.Un criterio de aceptacin rechazo.

3.Una comparacin.4.Un nmero ( unidades)5.Ninguna de las anteriores es correcta.

Respuesta correcta es la 5:no es un nmero sino unintervalo de nmeros.


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A Declaracin de no cumplimiento con la

especificacin.

BC

Limitarse a informar

los resultados ysu incertidumbre(INDETERMINADO)

D Declaracin de cumplimiento con la especificacin.


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Un laboratorio de ensayo

competente debe estar encondiciones de poder brindar unaafirmacin sobre la incertidumbre de

los resultados de los ensayosrealizados


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Primer Paso:IDENTIFICACIN DE LAS

FUENTES DE INCERTIDUMBRE:Se enumeran las posibles fuentes de incertidumbre quepueden afectar el resultado de un ensayo:1. TCNICAS/INSTRUMENTOS.

Asociadas:al material de referencia. a la uniformidad de la distribucin de losmicroorganismos en la muestra

a la exactitud de los equipos utilizados para establecermedida de masa y volumen. al mezclado de las muestras. al volumen usado.

a la calidad de medio de cultivoa las condiciones de incubacina la lectura e interpretacin de los resultadosa las pruebas confirmatorias


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IDENTIFICACIN DE LAS

FUENTES DE INCERTIDUMBRE (cont) :

2. HUMANAS:

Asociadas:a la lectura de placas.

a la experiencia y pericia del personal en la

interpretacin de los resultados. a la reproducibilidad de las determinaciones por cambiode observadores, a los instrumentos u otros elementos.


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IDENTIFICACIN DE LAS

FUENTES DE INCERTIDUMBRE (cont)

3. AMBIENTALES:

Asociadas: a las condiciones atmosfricas, temperatura y humedad,polvo.

a las contaminaciones biolgicas.

a las vibraciones.

interferencias electromagnticas.


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Segundo Paso:

Formas de clculo Incertidumbre :

CUANTIFICACIN DE CADACOMPONENTE DE LA INCERTIDUMBRE.

CASO 1:Para la cuantificacin de la incertidumbre se tieneen cuenta los componentes tipo A y tipo B:

Evaluacin tipo A: Evaluacin estadstica de laincertidumbre estndar.Se estima una desviacin estndar, la cual se obtiene

estadsticamente utilizando mediciones repetidas, actuales o previas.Evaluacin tipo B: Evaluacin no estadstica de laincertidumbre estndar.Se utiliza toda la informacin disponible para calcular la variabilidad decada fuente de incertidumbre


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Fuentes de informacin para el

clculo:

Datos obtenidos de mediciones previas.

Especificaciones del fabricante.

Datos provenientes de los certificados de calibracin.

Datos tomados de manuales, registros, etc.

Experiencia o conocimiento general del comportamientoy propiedades relevantes de los materiales einstrumentos.


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Formas de clculo Incertidumbre

(cont):

CASO 2: Se calcula la incertidumbre estndarconsiderando los datos de validacin y aseguramiento decalidad del mtodo:

La incertidumbre se estima combinando cuadrticamente

la desviacin estndar repetibilidad (Sr) y dereproducibilidad (SR)


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Formas de clculo Incertidumbre (cont):Para el caso 1 y 2:La contribucin de los distintos componentes de laincertidumbre deben quedar expresados como un desvo

estndar

Tercer Paso:INCERTIDUMBRE COMBINADA (uc): es la raz de las

varianzas totales.Ejemplo: caso 2uc=Sr2+SR2

Cuarto Paso:INCERTIDUMBRE EXPANDIDA (Ue): es la incertidumbretotal uc multiplicada por el factor k = 2.Ue= uc x k


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Cuarto Paso (cont):Expresin del resultado de un ensayoy su incertidumbre asociada:

El resultado (Rdo) se expresa asociado a la Ue.

De la siguiente manera:

Rdo + Ue (es un intervalo)


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Expresin de la Incertidumbre

en microbiologa

Ejemplo: Recuentototal en leche en polvo

x

ucR

Resultados

UeR

1.1 x 104 ufc/g

12% ufc/g

24% ufc/g

1.1 0.3 x 104 ufc/g

0.8 x 104 a 1.4 x 104 ufc/g

1.1 x 104 24% ufc/g

Documentos para


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Documentos paraEstimacin de la incertidumbre de

medicin en microbiologaReferencias:

EURACHEM / CITAC Guide. Quantifying Uncertainty in AnalyticalMeasurement.

CAEAL. Policy on the Estimation of Uncertainty of Measurement inEnvironmental Testing.

NMKL Procedure N 8 (1999) Measurement of uncertainty in microbiologicalexamination of foods.

UKAS Publication ref: LAB 12. The Expression of Uncertainty in Testing.

Seppo 1. Niemela Uncertainty of quantitative determinations derived bycultivation of microorganisms Publication J3/2002ADVISORYCOMMISSIONFOR METROLOGY Chemistry Section Expert Group for Microbiology


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Con una frecuencia establecida por el laboratoriose revisa, se incorporan nuevos datos y serecalcula la incertidumbre para cada parmetro.

Se elabora un informe conteniendo toda lainformacin relacionada con el clculo y losresultados obtenidos de incertidumbre para el

ensayo.


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El clculo de la precisin y exactitud de un mtodomicrobiolgico cuantitativo, nos indica la calidadde la medicin realizada por el laboratorio y, por lotanto, nos da idea de la confiabilidad de losresultados.

Como veremos ms adelante, dicho clculo sepuede realizar usando los datos obtenidos de los

estudios de validacin y aseguramiento decalidad.


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Graciasporsuatencin

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