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DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE
LBCM FSB-USTHB
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MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
UNIVERSITE DES SCIENCES ET DE LA TECHNOLOGIE HOUARI BOUMEDIENE
FACULTE DES SCIENCES BIOLOGIQUES
LABORATOIRE DE BIOLOGIE CELLULAIRE ET MOLECULAIRE
EN PARTENARIAT AVEC L’ANDRS
DEUXIEME WORKSHOP
BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE
08 - 10 novembre 2009
SALLE POLYVALENTE DE L’USTHB
DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE
LBCM FSB-USTHB
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Les Biotechnologies : Innovations technologiques utilisant les Sciences du Vivant, sont devenues actuellement un carrefour incontournable à l’échelle internationale reliant les disciplines de la biologie cellulaire et moléculaire aux nouvelles technologies.
Technologies en plein essor, elles regroupent de nombreux
domaines d’activités dont celui de la santé humaine qui nous réunit aujourd’hui.
Utilisant les concepts fondamentaux de la biologie (biochimie,
microbiologie, génétique, pharmacologie, biophysique, biologie
moléculaire, ingénierie et bioinformatique) et les innovations
technologiques émanant de ces disciplines, les biotechnologies
permettent de:
1 - Préparer, tester et produire des bio-médicaments : vaccins, protéines
recombinantes, anticorps monoclonaux, thérapie cellulaire et génique,
cytokines, anti-cytokines, facteurs de croissance.
2 – Pronostiquer (bio-marqueurs), diagnostiquer et comprendre les
mécanismes des pathogénèses.
Science en plein essor, les Biotechnologies
constituent un enjeu stratégique majeur
dans l’économie.
DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE
LBCM FSB-USTHB
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COMITES
COMITE SCIENTIFIQUE
Professeur Laraba-Djebari Fatima Présidente-USTHB
Professeur Bakour Rabah USTHB
Professeur Djerdjouri Bahia USTHB
Professeur Touil-Boukoffa Chafia USTHB
Professeur Hacéne Hocine USTHB
Professeur Benazzoug Yasmina USTHB
Professeur Benlatrèche Chérifa Univ Mentouri
Professeur Satta Dalila Univ Mentouri
Professeur Mechakra Aïcha Univ Mentouri
Professeur Meraihi Zahia Univ Mentouri
Professeur Karam Nouredine USTO
Professeur Benboubétra Mohamed Univ Ferhat Abbas Sétif
Professeur Mati Abderahmane Univ M M Tizi ouzou
DR Hammoudi-Triki Djelila USTHB
DR Mohammedi-ladjali Kefia USTHB
DR Ouartsi Zohra UNIV-Annaba
DR Fazouane Fethia UMBB Boumerdes
DR Belkhodja Razika UMBB Boumerdes
DR Halouane Fatma UMBB Boumerdes
DR Oussedik-Oumehdi Habiba USTHB
DR Messai Yamina USTHB
DR Hamadouche-Benhassine Traki USTHB
DR Otmani-Marabout Kheira USTHB
DR Nateche-Métiaz Farida USTHB
COMITE ORGANISATION DR Adi-Bessalem Sonia
DR Benmalek Yamina
DR Mezioug Dalila
DR Izem Malika
DR Belguendouz Houda
DR Amri Manel
DR Mendil Amina
DR Bounaama Abdelkader
DR Boussag-Abib Lila
DR Abderahmani Ahmed
DR Sami-Merah Sassia
DR Messaoudène Djamel
DR Hadj-Rabia Yamina
DR Saci Amel
SECRETARIAT
DR Belkhelfa Mourad
Mr. Bouanane Ouramdane
DR Rafa Hayet
DR Chelghoum Hayet
www.usthb.dz
Contact: [email protected]
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SPONSORS
Remerciements
Tous nos remerciements vont à ceux qui ont accepté d’apporter
leur soutien financier à l’organisation de ce Workshop
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PROGRAMME
Dimanche 08 Novembre 2009
9 H 00 Allocutions d’ouverture : Monsieur le Recteur et Mme la Doyenne de la FSB
9 H 45 Présentation du Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire
PREMIERE SEANCE
Conférences thématiques
Modérateurs : Chentouf-Mentouri Z., Bakour R., Laraba-Djebari F.
10 H 00 Application de la Nanotechnologie dans les traitements de l’arthrite rhumatoïde.
Dr Mohamed Benderdour : Département de Pharmacologie, Université de Médecine, Montréal,
Canada.
10 H 30 Anticorps recombinant: Du gène au médicament anti-thrombotique.
Pr Philippe Billiald: Faculté de Pharmacie, Université Paris-Sud et Muséum National d’Histoire
Naturelle, Paris
11 H 00 Pause Café
11 H 30 Transcriptional effects of delivery systems: The effect of dendrimer architecture on EGFR mRNA
expression and on siRNA-mediated gene silencing activity.
Pr Mustapha Benboubetra. University of Sétif, Algeria.
DEUXIEME SEANCE
Session : Diagnostic- Pronostic- Biotechnologie.
Modérateurs : Benboubetra M., Hacene H., Touil-Boukoffa C.
12 H 00 Optimisation d’un Test d’Immuno-Diagnostic dans la Prise en Charge des patients envenimés.
Hammoudi-Triki, D., Mendil, A., Adi-Bessalem, S., Sami-Merah, S.et Laraba-Djebari, F, LBCM, FSB-
USTHB.
12 H 10 Génétique des affections neuromusculaires fréquentes en Algérie. Analyse moléculaire de plus d’un
millier de familles. Benhassine T., Hamadouche, T., Tazir,M, Chaouch M., Makri S., Grid D, Lévy N.,
De Sandre-Giovannoli A., Delague V., LeGuern E., Brice A., Koenig M., Moreira M., Vallat J.M.
LBCM, FSB-USTHB.
12 H 20 Diagnostic moléculaire de l’hémoglobine H en Algérie. H. Mesbah-Amroun , F. Rouabhi , R.
Ducrocq , J. Elion. LBCM, FSB-USTHB.
12 H 40 BRCA1 and BRCA2 mutation screening in Algerian patients with Hereditary Breast Cancer.
Cherbal., F. et collaborateurs, LBCM, FSB, USTHB.
12 H 50 Identification des gènes de prédisposition aux cancers colorectaux héréditaires non polyposiques,
HNPCC (Syndrome de Lynch) et mise en évidence du statut MSI (MicroSatellite Instability). Berkane
K.et Bouzid, K.FSB-USTHB.
13 H 00 Etude de quelques biomarqueurs du syndrome néphrotique. Benhamdi A., Mechakra A., Cheriti
N.. Constantine.
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13 H 10 Association entre-le polymorphisme du gène de l’Apolipoprteine E, le profil lipidique sérique et la
maladie d’Alzheimer. Amari H., Ouldjaoui A., Sifi K., Sifi Y. Kohil K., Hamri A et Abadi.
Laboratoire de génétique et biologie moléculaire, CHU et Université Mentouri Constantine
13H 20 Rôle des cytokines et la NO-synthase dans les désordres immunitaires associés à de la maladie
d’Alzheimer: Impact sur l’immunosurveillance des patients. Belkhelfa. M, Medjeber O.,Rafa H.,
Bouaziz S., Djeraba Z., Lammali A, Abdelouahab K, Abada-Bendib M., Touil-Boukoffa C. LBCM,
FSB-USTHB.
13 H 30 Mise en évidence des biomarqueurs du diabète dans la salive par les techniques d’électrophorèse.
Bellil Ines & Khelifi Douadi. Laboratoire de Génétique Biochimie et Biotechnologie Végétale,
Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Université Mentouri Constantine
13 H 40 Débat et Pause Déjeuner
TROISIEME SEANCE
Session : Biothérapie
Modérateurs : Billiad P., Benlatrèche C., Benderdour M.
14 H 40 Les Biomolécules de Venins : Outils de Diagnostic et de Thérapie dans l’Hémostase
Oussedik-Oumehdi H., Cherifi F., Saci A et Laraba-Djebari F., LBCM, FSB-USTHB.
14 H 50 Perspectives Immunothérapeutiques et Vaccinales dans les envenimations scorpioniques. Adi-
Bessalem S., Boussag-Abib L., Mendil A, Hammoudi-Triki D, Sami-Merah S., Billiald, P., et Laraba-
Djebari F, LBCM, FSB-USTHB.
15 H 00 Implication de la membrane lamellaire dans les stratégies d’échappement parasitaire et la pathogenèse
au cours de l’échinococcose humaine : Rôle anti-hydatique des Voies : IFN-gamma/NOSynthase2.
Amri M., Mezioug D., Bouaziz S., Abdi Zaki-S. e Touil-Boukoffa C, LBCM, FSB-USTHB.
15 H 10 Implication de l’IL-17, de l’IL-6, du TNF-α et de l’IL-10 dans les mécanismes de l’immuno-
modulation au cours des maladies inflammatoires chroniques de l’intestin : Action potentielle
thérapeutique de l’IL-10. H. Rafa, H. Saoula, A. Boutaleb F, Aftiss S., Nakmouche M.et Touil-
Boukoffa C., LBCM, FSB-USTHB.
15 H 20 Les activités anti-radicalaires d’une plante médicinale locale fraxinus angustifolia (le frêne). Laib Y. et
Atmani Djebbar, Bejaïa.
15 H 30 Les éléments mobiles de type mariner issus des organismes des sources hydrothermales océaniques :
étude et perspectives d’utilisation en thérapie génique.
Toumi N., Renault S., Casse N., Pradier E., Bigot Y. et Laulier M., Tebessa.
15 H 40 Apport des thérapies moléculaires ciblées dans la prise en charge des cancers colorectaux métastiques.
Expérience Algérienne. Berkane K, Oukkal, Mahfouf M.H., Terki N., Baba Ahmed R et Bouzid K,
FSB- USTHB et CPMC, Alger.
15 H 50-16 H00 Débat et Pause café
QUATRIEME SEANCE
Session : Posters (P1-P15) Modérateurs : Amroun-Mesbah H., Ait Lounis A., Hammoudi-Triki D.
16 H 10 -17 H 30 POSTERS (Diagnostic- Pronostic-Biotechnologie/Biothérapie)
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Lundi 09 Novembre 2009
CINQUIEME SEANCE
Session : Biochimie - Biotechnologie.
Modérateurs : Ammar-Khodja, Benhassine T., Benazoug Y., Hammoudi-Triki D.
9 H 00 L’hémoglobine source intarissable de connaissances.
Boudrahem-Addour N. LBCM, FSB-USTHB.
9 H 10 Effet de l’acide niflumique sur la physiologie mitochondriale et la prolifération des cellules ht-29.
Amrouche-Mekkioui I. et Djerdjouri B., LBCM, FSB-USTHB.
9 H 20 Colite ulcereuse au dextran sulfate - modulation du stress oxydatif par un anti-inflammatoire non
steroïdien, l’indometacine. Bounaama A. et Djerdjouri B.,
LBCM, FSB-USTHB.
9 H 30 Antidiabetic and antioxidant effect of aloin in streptozotocin-induced diabetic rats.
Kandouli C., Khelifi-Touhami F., Benlatreche C., Leulmi Z, Constantine.
9 H 40 Variation de l’Homocystéine et du Génotype C677T de la Méthylénetétrahydrofolate Réductase chez
l’Hypertendu. Otmane A., Makhelouf M., Bouamrane F., Zenati A, CHU de Bab El Oued.
9 H 50 Genetic Polymorphisms of N-Acetyltransférase 2 and Cardiovascular Disease
Khelil M, Djerdjouri B. et Tayebi B., LBCM, FSB-USTHB.
10 H 10 Description des Chromosomes de l’Outarde houbara Chlamydotis undulata undulata et Cartographie
Chromosomique Comparée: Première Etape de l’Analyse du Génome. Mahiddine L., Belhamra M.,
Boucekkine W., Ladjali-Mohammedi K. LBCM, FSB-USTHB, Centre Cynégétique de Zéralda,
Centre de Recherche Scientifique et Technique sur les Régions Arides, Université de Biskra, Direction
Générale des Forêts
10 H 20 Débat et Pause Café
SIXIEME SEANCE
Session Microbiologie-Biotechnologie
Modérateurs : Hacene H., Messai Y., Oussedik-Oumehdi H.
10 H 25 Etude moléculaire de la résistance d’Enterobacter sp aux céphalosporines à large spectre et aux
quinolones dans les hôpitaux d’Alger. Iabadene H., Messai Y., Allouache S., Verdet C., Arlet G et
Bakour R., LBCM, FSB-USTHB.
10 H 35 Gravité des mycobactérioses chez les patients immunodéprimés.
Nateche F, Lafoz C, Baraka S, Samper S et Khaled S, LBCM, FSB-USTHB.
10 H 35 Mise en évidence et essai de Caractérisation de molécules antifongique chez Bacillus thuringiensis.
Abderrahmani A., Nateche-Metiaz F., Hacene H. et Jacques P., LBCM, FSB-USTHB.
10 H 45 Etude phénotypique et génotypique de la virulence de souches hospitalières de Klebsiella pneumoniae.
Aissani R., Messai Y., Iabadene H., Alouache S., Arlet G.et Bakour R., LBCM, FSB-USTHB.
11 H 55 Débat
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SEPTIEME SEANCE
Session : Posters (P16 – P44)
Modérateurs : Benmalek Y., Natèche F., Oussedik-Oumehdi H.
12 H 15 POSTERS (Biochimie-Biotechnologie /Microbiologie-Biotechnologie)
13 H 00 Pause Déjeuner
HUITIEME SEANCE
Session : Microbiologie-Biotechnologie (suite)
Modérateurs : Ladjali-Mohammedi K., Nateche F., Othmani K.
14 H 00 Production d’esters d’alkyle d’acides gras par bioconversion microbienne d’une huile végétale. Z.
Hachaichi-Sadouk, A. Tazerouti, H. Hacene, LBCM-FSB, USTHB.
14 H 10 Profil de résistance aux métaux lourds chez Chryseobacterium solincola sp, nov.
Benmalek Y, Nateche-Metiaz F, Hachani B, Hambli A, Fardeau M-L et Hacene H.
LBCM, FSB-USTHB.
14 H 20 Influence des apports anthropiques sur l’évolution génétique des bactéries en milieu marin : cas de la
résistance aux antibiotiques dans les eaux portuaires d’Alger.
Alouache S., Anssour L., Messai Y., Iabadene H. et Bakour R., LBCM, FSB-USTHB.
14 H 30 Extraction et essai de caractérisation des substances antimicrobiennes produites par une souche
d’actinomycète halophile modérée. Djinni I., Souagui S., Kecha M. et Benallaoua S, Béjaia.
14 H 40 Débat
NEUVIEME SEANCE
Session: ATELIER
Modérateurs : Boudrahem N., Adi-Bessalem S., Aouf A. 15 H 00 Welcome to high definition genomics: Aouatef Ait- Lounis, Faculty of Biological sciences, USTHB,
Algeria
Introduction à la bio-informatique : Mesbab-Amroun Hemida, LBCM, FSB-USTHB
TABLES RONDES
16 H 00- 16 H 30 Table ronde 1
Débat autour des questions de l’heure, les progrès et les perspectives des grands thèmes de la
Biologie Cellulaire et Moléculaire et leurs implications dans les Biotechnologies en rapport
avec la santé Humaine.
16 H 30 - 17 H 00 Table Ronde 2
Réflexion autour de la création d’une Société Algérienne de Biochimie-Immunologie
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RESUMES DES COMMUNICATIONS
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CONFERENCES PLENIERES
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Application de la Nanotechnologie dans les traitements de l’arthrite rhumatoïde
Dr Mohamed BENDERDOUR Département de Pharmacologie, Université de Médecine, Montréal, Canada.
ABSTRACT
The musculoskeletal disorders such as rheumatoid arthritis (RA) and osteoarthritis (OA) are leading worldwide causes
of long-term function and work disability in both developed and developing countries. It exits conventional RA
treatment strategies. However, new forms of therapy such as biological therapy and gene therapy have been shown
initial promise. Biological therapy of RA is specially engineered medication which blocks the effects of pro-
inflammatory factors such as tumour necrosis factor-alpha (TNF) and interleukin 1 beta (IL-1). One example of RA
biological therapy is by using recombinant interleukin-1 receptor antagonist (IL-1Ra). But biological treatments are
costly, inconvenient, and only partially effective in many patients. Gene therapy offers a solution to controlled,
targeted and specific delivery of genetic material (DNA and RNA) to targeted cells, leading to treatments that are less
invasive, more effective and less expensive than existing modalities. Gene therapy with IL-1Ra which was effective in
reducing joint destruction in experimental RA models and clinical trials is an alternative strategy in arthritis.
Additional approaches include the use of siRNA to knock down pro inflammatory factor-TNFα. The gene transfer can
occur through two delivery systems: viral mediated or non-viral vectors. Viruses are obvious first choices as gene
delivery vehicles because they transfer their own genetic material and therapeutic genes very efficiently to the cells
they infect. Unfortunately, certain viral vectors (for example, adenoviruses) can elicit a robust cellular immune
response against viral and some transgenic proteins. Non-viral gene transfer systems offer several potential advantages
over virus vectors. They are non-infectious, relatively non immunogenic, have low acute toxicity, can accommodate
large DNA plasmids or RNA, and may be produced on a large scale. The main drawback with non-viral vector as a
gene carrier is its typically low transfection efficiency (e.g. chitosan) and high toxicity (e.g. polyethylenimine [PEI]).
One of our strategies to improve transfection rate is to take advantage of the passive diffusion of small size
nanoparticles through the nuclear pore. Another strategy for improving transfection efficiency is to take advantage of
the mechanism of folate uptake by cells to promote targeting and internalization.
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Anticorps recombinant: Du gène au médicament anti-thrombotique
Philippe BILLIALD1, Julien MUZARD
1,2, Muhammad ZAHID
1, Maxime BOUABDELLI
2, Martine
JANDROT-PERRUS2
1Université Paris-Sud 11, Faculté de Pharmacie et Muséum national d'Histoire naturelle, Paris (F)
2INSERM U698, Hôpital Bichat, Paris (F)
RESUME
Le contact des plaquettes avec la surface d'une lésion vasculaire et leur agrégation est un processus essentiel
pour la formation d'un thrombus stable dans des conditions de flux artériel, en particulier dans les artères
sténosées alors que dans les conditions de flux veineux, la coagulation est plus importante. Ce processus est
complexe et, mal contrôlé, il peut conduire à la formation d'un thrombus occlusif à l'origine d'accidents
ischémiques aigus, infarctus et accidents vasculaires cérébraux. L'association thrombose-remodelage
vasculaire est également responsable de lésions ischémiques chroniques: angor, ischémie des membres
inférieurs.
Les drogues antiplaquettaires classiquement utilisées agissent sur des étapes tardives de la formation du
thrombus en induisant parfois des effets secondaires graves de type saignement et déplétion plaquettaire.
Dans ce contexte, il serait intéressant de disposer de molécules antithrombotiques agissant sur une étape
précoce du processus. Ainsi, la glycoprotéine plaquettaire VI (GPVI), impliquée dans l'adhésion des
plaquettes sanguines à la matrice extracellulaire lésée et leur activation pourrait être une cible de choix.
Récemment, nous avons développé un fragment d'anticorps recombinant de haute affinité pour GPVI. Ce
fragment d'anticorps murin (mscFv) inhibe la liaison de GPVI au collagène ainsi que l'agrégation des
plaquettes sanguines induite par le collagène à la fois dans des conditions statiques et de flux artériel. Ce
scFv a ensuite été humanisé pour en réduire l'immunogénicité et plusieurs constructions ont été évaluées.
L'une d'entre elles conserve intactes les propriétés fonctionnelles de l'anticorps parentale. In vitro, elle inhibe
l'activation des plaquettes et leur agrégation induite par le collagène. La méthode employée est simple,
efficace et transférable à d'autres anticorps à potentiel thérapeutique.
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TRANSCRIPTIONAL EFFECTS OF DELIVERY SYSTEMS: THE EFFECT OF DENDRIMER
ARCHITECTURE ON EGFR mRNA EXPRESSION AND ON siRNA-MEDIATED GENE
SILENCING ACTIVITY
Mustapha BENBOUBETRA1,2
Andrew J. HOLLINS2, Yadi OMIDI
2,3 and Saghir AKHTAR
2,4
1Laboratory of Applied Biochemistry, Faculty of Sciences, University of Sétif, Algeria.
2Centre for Genome-based Therapeutics, Welsh School of Pharmacy, Cardiff University, Cardiff, UK;
3Department of Pharmaceutics, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran
4Department of Pharmacology and Toxicology, Faculty of Medicine, Kuwait University, Safat, Kuwait
ABSTRACT
RNA interference (RNAi) is an evolutionary conserved process for the regulation of gene expression. In
mammalian cells, RNAi-induced via short (21-23nt) duplexes of RNA, termed small interfering RNA
(siRNA), can elicit highly specific RNAi-mediated gene silencing providing the antisense strand of the
duplex is incorporated into a multi-protein RNA-induced silencing complex complex (RISC). Subsequent
hybridization with the targeted mRNA followed by its cleavage by argonaute-2, the endonuclease present in
RISC, leads to inhibition of target gene expression in vitro and in vivo. RNAi technology is being widely
used in studies of gene function, drug target validation as well as being explored for potential therapeutic use
in the clinic. Synthetic siRNA duplexes are polyanionic macromolecules that do not readily enter cells and
typically require the use of a delivery vector for effective gene silencing in cells. Choice of delivery systems
is usually made on its ability to enhance cellular uptake of siRNA. Here, we show that separate from their
effects on cell uptake, delivery systems can also exert changes in target gene expression that can be
exploited to significantly enhance siRNA potency. Here, we show that separate from their effects on cell uptake,
delivery systems can also exert changes in target gene.
Corresponding author:
E-mail: [email protected]
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COMMUNICATIONS ORALES
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SESSION: DIAGNOSTIC-PRONOSTIC-BIOTECHNOLOGE
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Optimisation d’un Test d’Immuno-Diagnostic dans la Prise en Charge des patients
envenimés
Djelila HAMMOUDI-TRIKI, Amina MENDIL, Sonia ADI-BESSALEM, Sassia SAMI-MERAH,
Fatima LARABA-DJEBARI
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la Technologie
« Houari Boumédienne » USTHB, Bab Ezzouar, Alger, Algérie et Laboratoire de Recherche et de Développement sur les Venins,
Institut Pasteur d’Algérie, Alger, Algérie.
E-mail : [email protected] - Fax: 00213 21 91 72 21
RESUME
L’envenimation scorpionique est une pathologie multifactorielle qui nécessite une prise en charge
rapide des personnes envenimées. La mise au point d’un test d’immunodiagnostic spécifique de type ELISA
sandwich permet 1) de doser le venin dans les sérums de patients envenimés, 2) d’évaluer une corrélation
avec la gravité de l’envenimation et 3) d’observer l’évolution de la concentration du venin.
Dans ce contexte, des anticorps sous forme de fragments F(ab’)2 spécifiques à la fraction toxique du
venin de scorpion sont purifiés par immunoaffinité et utilisés comme un marqueur de diagnostic dans les
liquides biologiques des patients. Un test ELISA de type sandwich, fiable, reproductible et sensible a été mis
au point au laboratoire pour le dosage des composants toxiques du venin dans les fluides biologiques. Une
étude rétrospective portant sur l’analyse clinique et informative de 182 dossiers de patients avec collecte de
leurs échantillons sériques a permis de classer les patients en deux grades cliniques: un grade mineur (grade
I) et un grade modéré (grade II). La détermination des concentrations sériques du venin à l’aide de ce test a
permis d’établir une corrélation étroite entre ces concentrations et les grades cliniques définis selon les
symptômes observés. Les patients présentant un taux élevé de venin sérique, sont les plus sévèrement
affectés.
La mise en place de ce test au chevet du patient devrait être exécutée dans les plus brefs délais car
cette pathologie accidentelle est une urgence médicale. La validation d’un test ELISA rapide pourrait être
une alternative innovante pour une prise en charge rapide. Des mises au point de ce test sont entreprises par
notre équipe afin de le rendre le plus rapide possible afin de permettre une utilisation plus rationnelle des
thérapeutiques et moins empirique.
Mots clés : Immuno-Diagnostic, Envenimation, Venin, Anticorps, ELISA, Gradation, thérapie.
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Génétique des affections neuromusculaires fréquentes en Algérie.
Analyse moléculaire de plus d’un millier de familles.
Benhassine, T.1, Hamadouche, T.
2, Tazir, M.
3, Chaouch, M.
4, Makri, S.
5, Grid, D.
6, Lévy, N.
7, De Sandre-
Giovannoli, A.7, Delague, V.
7, LeGuern, E.
8, Brice, A.
8, Koenig, M.
9, Moreira, M.
9, Vallat, J.M.
10
1 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, F.S.B., U.S.T.H.B., Alger,
2 Laboratoire de Biologie Moléculaire, F.S.,
U.M.B.B., Boumerdes, 3 Service de Neurologie, C.H.U. Alger Centre, Alger,
4 Service de Neurologie, C.H.U. Ben Aknoun,
Alger, 5 Service de Neurologie, E.H.S. Ali Aït-Idir, Alger,
6 Généthon, Paris,
7 Inserm u_910, Marseille,
8 Inserm u_679, Paris,
9
I.G.B.M.C., Strasbourg, 10
C.H.U.R. Limoges, Limoges
RESUME
Dans le cadre de notre étude, près d’un millier de familles atteintes d’affections neuromusculaires (atrophies
musculaires spinales, neuropathies héréditaires sensitivo-motrices, dystrophies musculaires progressives, ataxies à
transmission récessive, ...) ont été explorées au plan moléculaire, avec pour finalité l’instauration et la mise en place
d’un diagnostic génétique précis in situ en vue de répondre aux attentes des cliniciens et des familles demandeuses.
Le choix de ces maladies héréditaires était motivé par leur forte prévalence dans notre pays, posant ainsi un grave
problème de santé publique, mais également en vue de collaborer à l’effort international visant à clarifier la nosologie
de ces affections.
La collaboration multidisciplinaire engageant un réseau de généticiens, cliniciens et anatomopathologistes a ainsi
permis d’engranger un nombre impressionnant de données, notamment l’identification de nouveaux loci/gènes
responsables de nouvelles formes de ces affections neuromusculaires, mais également la caractérisation de nouvelles
altérations mutationnelles, parfois spécifiques à notre pays, avec tout ce que cela entraîne en terme d’épidémiologie
génétique et de corrélation phénotype-génotype.
Les données obtenues ont ainsi permis de prendre une sorte de cliché photographique des ces maladies héréditaires
dans notre pays, seul garant de la mise en place d’une approche de criblage moléculaire rationnelle et adaptée au
contexte de consanguinité y prévalant, et ainsi de poser les jalons d’une meilleure prise en charge de ces pathologies
sur un plan génétique.
Mots-clés : Maladies neuromusculaires, Criblage moléculaire, Diagnostic génétique
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DIAGNOSTIC MOLECULAIRE DE L’HEMOGLOBINOSE H EN ALGERIE
Hamida Mesbah-Amroun ab
; Fatiha Rouabhi c; Rolande Ducrocq
d; Jacques Elion
be
aUniversité des Sciences et de la Technologie Houari Boumedi ne (USTHB), Faculté des Sciences Biologiques Alger, Algérie.
bInserm U763, Hôpital Robert Debr , Paris, France.
cCentre de Transfusions Sanguine, Hôpital Mustapha-Bacha, Algiers, Algeria.
dAP-HP, Département de Génétique, Hôpital Robert Debré, Paris, France
eUniversité Paris Diderot - Paris 7, Faculté de Médecine, Paris, France
RESUME
L’hémoglobinose H (Hbose H) est un syndrome thalassémique, présentant une anémie hémolytique
caractérisée par la présence d’une hémoglobine anormale, l’hémoglobine H (β4). Le déterminisme génétique
de l’ Hbose H est connu : c’est une α-thalassémie correspondant à la délétion/inactivation de trois gènes α
par locus diploïde (αα/αα).
La caractérisation génotypique a été réalisée chez 19 individus répartis sur 6 familles différentes, comportant
chacune au moins un propositus (Hbose H).
Dix mutations méditerranéennes (délétionnelles et non délétionnelles) ont été recherchées. Cette recherche
ciblée basée sur l’utilisation des techniques de Southern, PCR (GAP-PCR, PCR-RFLP) et séquençage direct,
nous a permit d’identifier 5 génotypes Hbose H différents, preuve d’une hétérogénéité génétique.
Nos résultats montrent que l’utilisation de la technique de PCR (GAP-PCR) couplée à l’utilisation des
enzymes de restriction (PCR-RFLP) comme stratégie de dépistage suffit pour identifier les mutations α-
thalassémiques retrouvées dans notre échantillon.
L’intégration de ces techniques dans les stratégies de dépistage en milieu clinique contribuera sans aucun
doute à l’amélioration du diagnostic des α-thalassémies et des autres hémoglobinopathies associées (β-
thalassémies, drépanocytose).
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BRCA1 and BRCA2 mutations screening in Algerian patients with Hereditary Breast
Cancer
Farid Cherbal1
, Dounia Amet Errahmane Houamel1, Nadjet Salhi
1, Anita Chikh
1, Karima Ait Hami
1,
Lamia Talaoubrid, Karima Akli1, Ibtissem Derouiche
1, Rabah Bakour
1, Traki Benhassine
1, Yamina Messai
1,
Ouardia Kareb1, Lydia Igoudjilene
1, Saida Adane
2, Kada Boualga
3, Ahmed Cherifi
4, Abdelaziz Melboucy
5,
Salim Bahayou6, Veronica Sciretta
7, Chantal Souverain
7, Bruno Pardo
7, Gaelle Benais-Pont
7 and Philippe
Maillet7.
1Unit of Genetics, LMCB, FBS, University of Sciences and Technology Houari Boumediene, Algiers, Algeria,
2Central Hospital
of Algiers, Algeria, 3Anti Cancer Center, Blida, Algeria,
4Senology Clinic, Ouargla, Algeria,
5Senology Clinic "Les Amandiers"
Mekla, Tizi Ouzou, Algeria, 6Clinic of Radiology, Ghardaia, Algeria,
7Laboratory of Molecular Oncology, Department of
Genetics and Laboratory Medicine, Geneva University Hospitals, Geneva, Switzerland.
Corresponding author: Farid Cherbal, E-mail:[email protected], work phone: 21321247950/64 extension 911, Fax: 21321247217
Abstract:
Background: Breast cancer is the leading cause of cancer death in women in Algeria. The
contribution of BRCA1 and BRCA2 mutations to hereditary breast cancer in Algerian population is largely
unknown. Here, we describe analysis of BRCA1 and BRCA2 genes in 45 individuals from 37 families from
an Algerian cohort with a personal and family history suggestive of genetic predisposition to breast cancer.
Methods: The approach used is based on BRCA1 and BRCA2 mutations screening by High-Resolution
Melting (HRM) curve analysis followed by direct sequencing.
Results: Three distinct pathogenic mutations, c.83_84delTG/ p.Leu28ArgfsX12 c.181T>G/Cys61Gly,
c.798_799delTT/p.Ser267LysfsX19 were detected in BRCA1 gene. Moreover 16 unclassified variants and
polymorphisms were detected in BRCA1 gene (6 described for the first time).
Two pathogenic mutations, c.1310_1313delAAGA/p.Lys437IlefsX22 and
c.5722_5723delCT/p.Leu1908ArgfsX2 and 37 unclassified variants and polymorphisms (15 never described
before) were identified in BRCA2 gene.
Conclusions: For the first time, we used HRM analysis to identify BRCA1 and BRCA2 mutations in
Algerian patients with a personal and family history suggestive of genetic predisposition to breast cancer.
The implications of these new findings in regard to genetic testing and counseling are substantial for
the
Algerian population.
Keywords Algeria. BRCA1. BRCA2. Hereditary breast cancer. Mutation analysis. Unknown Variants
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Identification des gènes de prédisposition aux cancers colorectaux héréditaires non
polyposiques, HNPCC( (Syndrome de Lynch) et mise en evidence du statut MSI
(MicroSatellite Instability).
K. Berkane 1-2
et K.Bouzid2
1 Faculté des Sciences Biologiques, USTHB, Alger. 2- Laboratoire d’Oncologie Moléculaire Fondamentale et Appliqué, Service
d’Oncologie Médicale (LOMFA), CPMC, Alger.
RESUME
La plupart des cancers (90 à95 %) surviennent dans un contexte sporadique, sans cause apparente alors que
d’autres apparaissent dans un contexte familial (5 à 10%). Dans ce contexte familial, une prédisposition
héréditaire est retrouvée. Avec de fortes traditions d’endogamie et de consanguinité, la fréquence des
cancers familiaux serait plus élevée dans les familles Algériennes que dans les familles occidentales. Les
avancées récentes de la Biologie Moléculaire permettent l’identification des personnes porteuses d’une
prédisposition héréditaire à certains cancers. L’identification des gènes de prédisposition aux cancers
colorectaux, permet de réaliser un diagnostic précoce (diagnostic moléculaire) et dépistage ciblé d’une
population à très haut risque de développer un cancer et leur assure une prise en charge optimale selon les
recommandations internationales de surveillance préconisées par l’Organisation Mondiale de la Sante
(OMS) et l’Union Internationale contre le Cancer (UICC). De Octobre 2001 a Janvier 2005, 76 patients
atteints de cancer colorectal et répondant aux critères d’Amsterdam II (critères de sélection des cancers
familiaux) ou cas index ont été admis au service d’Oncologie Médicale pour prise en charge thérapeutique ;
ces cas index subissent un prélèvement sanguin pour les recherches mutationnelles au niveau des gènes h
MLH1 et h MSH2 le plus souvent impliqués dans le syndrome. Une mutation au niveau du gène h MLH1 a
été retrouvée (exon 13, codon 516) dans 80% des cas étudiés. Le statut MSI a été déterminé chez tous les
patients.
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ETUDE DE QUELQUES BIOMARQUEURS DU SYNDROME NEPHROTIQUE
1,2BENHAMDI Asma,
1 MECHAKRA Aicha,
2CHERITI Nadjia.
1Laboratoire de Biologie et Environnement, Université Mentouri, Constantine ;
2Laboratoire de Biochimie, Clinique rénale, Daksi, Constantine. Email : [email protected]
Résumé
Le syndrome néphrotique est la néphropathie glomérulaire la plus fréquente dans le monde, surtout chez les
enfants. Il est lié à une augmentation de la perméabilité glomérulaire qui est à l’origine de plusieurs
complications et se caractérise par une protéinurie, une hypoprotidémie et une hyperlipidémie.
Dans ce travail, nous avons étudié les principaux biomarqueurs de ce syndrome (protides totaux, albumine,
transferrine, IgG, cholestérol, triglycérides, HDL et LDL).
La protéinurie dosée par méthode colorimétrique est observée chez l’ensemble des malades échantillons.
La séparation des protéines sériques des patients de différents âges par électrophorèse sur acétate de
cellulose montre des modifications de la répartition des fractions. Les protéines sériques spécifiques
dosées par des méthodes colorimétriques et immunoturbidimétriques révèlent une diminution de leurs
concentrations. Les lipides et lipoprotéines dosés par des méthodes enzymatiques et d’immunoinhibition
traduisent une augmentation significative de leurs concentrations.
L’étude de ces biomarqueurs prouve leur intérêt dans le diagnostic du syndrome néphrotique et montre leurs
rôles dans la survenue des complications de la maladie.
Mots clés : Biomarqueurs, syndrome néphrotique, électrophorèse, albumine, transferrine, IgG, lipides.
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Association entre le polymorphisme du gène de l’Apolipoprteine E, le profile lipidique
sérique et la maladie d’Alzheimer.
AMARI HANANE, OULDJAOUI A, SIFI K, SIFI Y, KOHIL K, HAMRI A, ABADI N.
Les objectifs principaux du travail :
1- déterminer les fréquences allélique et génotypique du gène de l’apoE dans la population nord constantinoise.
2- Etudier l’association entre ce polymorphisme et la maladie d’Alzheimer sur notre population
3- Etudier l’association entre le profile lipidique sérique (taux de cholestérol total, HDL, LDL, et triglycérides) et
la maladie d’Alzheimer.
RESUME
La maladie d’Alzheimer est la première cause des démences du sujet âgé, c’est une maladie neurodégénérative
irréversible, son expression est le résultat de multiples facteurs génétiques et environnementaux. L’apolipoprotéine E
constituée de 299 AA joue un rôle physiologique majeur dans la régulation du métabolisme lipidique et l’homéostasie
des lipoprotéines, et joue aussi un rôle important dans la réparation neuronale.
De nombreuses équipes ont étudié l’association entre le polymorphisme de l’apoE et risque de la maladie
d’Alzheimer, et l’allèle e4 a était identifié comme un facteur de susceptibilité génétique pour la MA dans divers
groupes ethniques. L’allèle ε 4 augmente le risque de la MA et baisse considérablement l’âge de début de la maladie,
et il existe une relation entre le nombre d’allèles 4 et l’incidence de la MA ; le risque est plus élevé pour les sujets
porteurs de deux allèles ε 4 que pour les porteurs d'un seul allèle indiquant un effet-dose associé à cet allèle. Mais la
contribution de l’allèle ε 4 dans le développement de la MA, n’est pas le même dans tous les groupes ethniques à
travers le monde.
Dans Cette étude on a examiné l’association entre le polymorphisme du gène de l’apoE, le profil lipidique
sérique et la MA chez des malades, et des sujets contrôles habitants la région nord-constantinoise.
Population et méthodes :
Notre étude cas témoins a porté sur 114 sujets dont 60 témoins (30 Femmes et 30 Hommes avec une moyenne
d’âge de 67,17 ± 10,84 ans ) et 54 patients (25 Femmes et 29 Hommes avec une moyenne d’âge de 73,47 ± 7,61)
remplissant les critères du diagnostic de M.A probable selon les critères du DSM IV (Diagnostic and statistical
Manual of Mental Disorders Fourth Edition), et ceux de la NINCDS-ADRDA (National Institute of Neurological and
Communicative Disorders and Stroke-Alzheimer Disease and Related Disorders Association)
Les malades ont été recrutés au niveau du service de neurologie CHU de Constantine et en consultation
privée (Skikda, Constantine). Les malades sont exclus s’ils présentent une autre forme de démence voir une démence
vasculaire ou tumorale et les témoins sont choisis parmi des sujets sains volontaires des deux sexes présentant un âge
supérieur à 60 ans, ayant été recruté au niveau des maisons de retraite de Constantine (Hamma Bouziane) et de
Skikda. Tous les sujets (malades et témoins) ont été choisis sur la base de leurs histoires médicales et après examens
physique. Leurs fonctions cognitives sont évaluées par le Mini Mental State Examination (MMSE).
Méthodes :
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Le sang veineux est prélevé après un jeûne d'au moins 10 heures. Nous avons recueilli 10 mL sur EDTA pour
l'étude moléculaire et 5 mL sur héparinate de lithium pour le bilan biochimique. Le cholestérol total le cholestérol-
LDL et HDL et les triglycérides sont dosés en utilisant les procédures enzymatiques standards sur l'automate
(technicon RA et Opera systems N° de ref.T01-2801-56). Pour le génotypage de l'apo E, l'ADN est extrait à partir des
leucocytes selon la technique de Miller et al. , et l'exon 4 du gène de l'apo E est amplifié par PCR (Taq DNA
polymérase). Nous avons utilisé les mêmes conditions opératoires et les mêmes amorces (OD 5’-ATG GCG CTG
AGG CCG CGC TC-3’ ; (20pb) OG 5’-AAC AAC TGA CCC CGG TGG CG-3’ (20pb).) que celles décrites par
Tsai et al. . Les produits de PCR sont digérés par cinq unités de HhaI, puis les produits de RFLP sont séparés par
électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de marqueurs de poids moléculaire. La détermination du
génotype de l'apo E est réalisée en comparant le profil de restriction des patients aux combinaisons de fragments
décrites par Hixson et Vernier.
Analyses statistiques :
Le traitement des données et l'analyse statistique sont réalisées par le logiciel Epi info version 6.0. Les
statistiques descriptives sont utilisées pour déterminer les caractéristiques de la population, et l'analyse de corrélation
pour établir la relation entre les différents paramètres. Par ailleurs, la comparaison des fréquences allèliques et
génotypiques entre malades et témoins est réalisée en utilisant le teste de χ2 et Fisher’s. Les odd ratios (OR)
représentants une mesure d'association épidémiologique entre les différents génotypes et la maladie sont calculées, le
Seuil de significativité statistique est retenue p <0.05.
Résultats
Nos résultats montrent que la fréquence allèlique de l’allèle ε 4 est significativement supérieurs chez les
malades que chez le groupe témoins (27,80% versus 12,3% ; p< 0.05), de plus les OR des sujets homozygotes et
hétérozygotes pour l’allèle e4 étaient de 2,24( [0,97-5,21] p<0.05) et 6,71([0,65-116] p<0.05) respectivement. Ces
données indiquent que l’allèle ε4 augmente le risque de la maladie d’Alzheimer, dans notre population d’une manière
dépendante de sa dose.
Les sujet MA présentaient des taux significativement supérieurs de cholestérol (1,75 ± 0,37 versus 1,22 ±
0,29*, p<0.05) et de C-LDL (1,10 ± 0,32 versus 1,91 ± 0,37*, p<0.05) mais seulement chez les hommes, et des taux
significativement inférieurs de C-HDL dans les deux sexes, hommes (0,44 ± 0,07 versus 0,42 ± 0,08*, p<0.05),
femmes (0,47 ± 0,08 versus 0,37 ± 0,08*, p<0.05). Ces résultats indiquent que les sujets porteurs de l’allèle ε4 avec
des taux élevés de cholestérol et de C-LDL, et des taux bas de C-HDL sont plus susceptibles de développer une
maladie d’Alzheimer.
Le lien entre marqueurs biologiques du métabolisme lipidique et risque de maladie d’Alzheimer est incertain
et demeure un sujet de controverse. Pendant les 15 dernières années, plusieurs études épidémiologiques suggère que
des taux élevé de cholestérol plasmatique peut contribuer dans la pathogenèse de la MA
Dans la présente étude, on a trouvé que le groupe MA avait des taux significativement inférieur de C-HDL, et
des taux supérieur de cholestérol totale et C-LDL, par rapport au groupe contrôle. Nos résultats concordent avec des
études récentes, comme celle de Hall et al, qui ont trouvé que des taux élevés de cholestérol et C-LDL étaient associés
a l’augmentation du risque de la MA dans la population africaine âgée de plus de 70ans indépendamment du
polymorphisme de l’apoE.
Conclusion :
En conclusion, l’allèle ε4 est associé à l’augmentation du risque de la maladie d’Alzheimer dans notre population
d’une manière dépendante de sa dose. En revanche le rôle protecteur de l’allèle ε2 dans la maladie d’Alzheimer n’est
pas évident et reste à démontrer. Les taux élevés de cholestérol et de C-LDL et des niveaux bas de C-HDL, semblent
également favoriser le développement de la MA dans la population nord constantinoise.
Mais L’Algérie avec sa diversité historique, géographique, culturelle et linguistique, présente une large diversité
génétique, ainsi, des études additionnelles avec de plus grands échantillons sont nécessaires pour clarifier la
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contribution réelle de l’APOE et du profil lipidique dans le développement de la maladie d’Alzheimer dans
différentes populations algériennes.
Nos résultats nous permettent de confirmer la suggestion selon laquelle l’allèle ε4 et le profil lipidique peuvent
être utilisés comme biomarqueurs de la maladie d’Alzheimer et considérés comme un complément au diagnostic
clinique de la MA chez les sujets déments, chez lesquels la découverte d'un allèle epsilon4 à une valeur prédictive
positive de 94 à 98 %.
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Rôle des cytokines et la NO-synthase dans les désordres immunitaires associés à de la
maladie d’Alzheimer : Impact sur l’immunosurveillance des patients
M Belkhelfa1., O Medjeber
1., H Rafa
1., S Bouaziz
1., Z Djeraba
1., A Lammali
1., K Abdelouahab
1., M
Abada-Bendib2., C Touil-Boukoffa
1.
1: Équipe Cytokine et NO Synthase; Immunité et Pathogénie, LBCM (FSB/USTHB). 2: Service de Neurologie/Hôpital de Bab El
Oued.
La maladie d’Alzheimer est une des pathologies neurodégénératives les plus fréquentes chez le sujet âgé.
Cependant, l’étiologie de cette maladie n’est que partiellement connue. Les principales caractéristiques
histopathologiques ciblent l’installation des plaques séniles extracellulaires et la dégénérescence
neurofibrillaire associées à une importante perte neuronale. Elle se caractérise par trois phases selon
l’évolution et la sévérité des symptômes.
Les objectifs de notre travail portent sur le rôle des cytokines (IFNγ, TNFα, IL-13, IL-6 et IL-17) et du
monoxyde d’azote dans les désordres immunitaire associés à l’évolution de la pathologie en vue de cibler un
bio marqueur de phase de cette pathologie. Cette étude est réalisée sur des patients suivis au service de
Neurologie/Hôpital de Bab El Oued.
Nos résultats suggèrent que l’inflammation périphérique est une composante active au niveau cérébral se
caractérisant notamment par une expression accrue d’une cytokine marqueur de la voie Th1, l’IFNγ, dont
l’action est potentialisée par le TNFα, en particulier dans la phase précoce de la maladie. Cette augmentation
est en étroite relation avec la production substantielle du NO, mettant en jeu l’induction de la NOS2. A
l’inverse, la phase intermédiaire caractérisée par un état pseudo-stationnaire des malades indique une action
significative de l’IL13 dans la régulation négative de la NOS2. La phase avancée est caractérisée par une
corrélation positive entre la production importante du NO, l’action de l’IL6 et une cytokine de la voie Th17
(IL17).
Ces résultats pourraient ainsi contribuer dans le diagnostic précoce et l’immunosurveillance des
patients atteints de la maladie d’Alzheimer.
Mots clés : cytokine, Alzheimer, NO-Synthase, démence, neuroinflammation
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Mise en évidence des biomarqueurs du diabète dans la salive par les techniques
d’électrophorèse
Bellil Ines, Khelifi Douadi
Laboratoire de Génétique Biochimie et Biotechnologie Végétale, Département de Biochimie Microbiologie, Faculté des Sciences
de la Nature et de la Vie, Université Mentouri Constantine
Résumé
Parmi les marqueurs moléculaires, les marqueurs protéiques sont les premiers à avoir été utilisés. Ils sont le
produit direct des gènes. Plus d’un 1/3 de protéines de la salive se trouvent dans le sang et sont similaires aux
protéines sanguines et dont le rôle a déjà été établi. Une majorité de ces protéines salivaires font partie du système
central d’alerte du corps face aux maladies et représentent de ce fait un bon outil diagnostic. Pour cela, une population
de patients diabétiques de type I (n = 4) âgés de 16 à 38 et de type II (n = 8) âgés de 51 à 81 dont la pathologie datait
plus de 5 ans avec une glycémie à jeun supérieure à 1.26g/l et présentant une bonne hygiène buccale a été retenue pour
le prélèvement de la salive. Cette population a été comparée à un sujet sain sans pathologies connues. Les protéines
salivaires ont été extraites et séparées par la technique d’électrophorèse mono et bidimensionnelle sur gel de
polyacrylamide. L’électrophorèse monodimensionnelle pour les protéines réduites et non réduites dans des conditions
naturantes et dénaturantes a fourni des diagrammes protéiques clairs et reproductibles mais elle ne nous pas permis de
diagnostiquer le diabète par la détection qualitative ou quantitative d’un biomarqueur. L’utilisation de la
bidimensionnelle PAGE 8.8 / SDS- PAGE a permis de mettre en évidence la présence de 6 spots chez le diabétique
type II et qui sont absents chez le témoin. Aussi une nette différence a été observée dans les spots communs qui sont
surexprimés chez le patient diabétique. Ces différences d’expression sont autant de facteurs d’intérêt (biomarqueur)
pour l’analyse de l’influence du diabète sur la composition en protéines salivaires, celles-ci étant susceptibles d’être
spécifiquement exprimées ou inhibées au cours de cette pathologie. Ces protéines salivaires variantes pouvant être
secondairement caractérisées par spectroscopie de masse et étudiées, afin de déterminer si elles sont vraiment
susceptibles d’être considérées comme marqueurs du diabète. Cette mise en évidence de spots spécifiques et /ou
variants au cours d’une pathologie telle que le diabète, ouvre des champs d’investigation nouveaux tant dans le
domaine du diagnostic (mise en évidence éventuelle de marqueurs) que dans le suivi de ces pathologies.
Mots clés : Biomarqueur, diabète, salive, électrophorèse, diagnostic
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SESSION: BIOTHERAPIE
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Les Biomolécules de Venins : Outils de Diagnostic et de Thérapie dans l’Hémostase
Habiba OUSSEDIK-OUMEHDI., Fatah CHERIFI. Amel SACI, et Fatima LARABA-DJEBARI.
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, USTHB Bab Ezzouar, Alger, Algérie.
Laboratoire de Recherche et Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.
E-mail : [email protected] - Fax: 00213 21 91 72 21
RESUME
Les constituants des venins de Viperidae renferment deux catégories de composants d’action
antagoniste, agissant par activation ou inhibition des facteurs de coagulation et de l’agrégation plaquettaire.
Ces protéinases, capables de cliver les facteurs de coagulation avec une haute spécificité, sont réparties en
sérine protéinases et en métalloprotéinases. Les biomolécules des venins de serpents présentent un grand
intérêt aussi bien fondamental, diagnostique que thérapeutique. Ils constituent de précieux outils pour la
compréhension des différents mécanismes de l’hémostase et sont également utilisés dans le diagnostic des
dysfonctionnements liés aux facteurs de coagulation à l’instar des enzymes de venins à activité « thrombin-
like » (SVTLE) qui sont utilisées pour le dépistage des fibrinogénopathies. Les venins sont également
utilisés en diagnostic pour l’analyse des différents facteurs de coagulation (facteurs V, VII, X, le facteur 3
plaquettaire, la protéine C et le facteur de Will brand). Sur le plan thérapeutique, les SVLTE sont largement
utilisés comme traitements anticoagulants. Dans cette optique, la purification de plusieurs molécules des
venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina a été effectuée. Certaines des molécules purifiées agissent
sur l’hémostase, tel que la RP34, une sérine-protéinase de type thrombine, constituée de deux sous-unités de
48.5 kDa. Une autre sérine-protéinase de type thrombine a été purifiée. L’afaâcytine, d’un poids moléculaire
de 40 kDa, présente des propriétés fibrinase et fibrinogènase. Elle active le facteur X et libère la
sérotonine en agissant sur l’agrégation plaquettaire. Une autre molécule de 70 kDa a été purifiée, et présente
une activité pro-coagulante, fibrinogénase.
Mots clefs : Venins ; Viperidae ; Biomolécules ; Hémostase ; Diagnostic ; Thérapie ; Thrombin-like.
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Perspectives Immunothérapeutiques et Vaccinales
dans les envenimations scorpioniques
Adi-Bessalem S., Boussag-Abib L., Mendil A, Hammoudi-Triki, D, Sami-Merah S., Billiald, P., et
Laraba-Djebari F.
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la Technologie
« Houari Boumediene » EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algérie
Laboratoire de - Recherche et de Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.
Muséum National d’Histoire Naturelle EA4105. 75005
E-mail: [email protected] Fax: 00213 21 33 60 77
RESUME
Classiquement l’immunothérapie consiste à administrer aux patients envenimés des anticorps
polyclonaux obtenus après hyper-immunisation des animaux. La toxicité élevée des toxines des venins de
scorpions constitue une difficulté majeure dans la préparation des immun-sérums et s’accompagne souvent
de détérioration de la santé des animaux producteurs.
Deux approches technologiques ont été envisagées dans notre équipe pour augmenter l'activité
spécifique des immun-sérums produits, réduire la toxicité de l'immunogène utilisé et réaliser des essais
d’immunoprotection chez un modèle expérimental.
La détoxification du venin ou de sa fraction toxique par irradiation gamma jusqu’à 20 DL50
constitue une des approches abordées pour aboutir à une meilleure prévention. Ces antigènes atténués
anavenin préservent leur pouvoir antigénique et immunogénique. Des essais de vaccination réalisée chez
l’animal préalablement immunisé avec ces antigènes détoxifiés montrent une protection de 100 % de
protection contre des doses létales de venin natif d’Aah.
La deuxième approche consiste à identifier des peptides synthétiques analogues à la toxine AaH II
après criblage d’une banque aléatoire de dodécapeptides. Utilisés comme antigènes dans un protocole
d’immunisation, ces peptides dépourvus de toxicité sont capables d’induire la production d’anticorps
spécifiques. L’immunoréactivité des anticorps vis à vis du venin d’Aah est confirmé par des tests
immunologiques et par résonance plasmonique de surface.
Ces approches d’immunoprotection pourraient être d’un apport certain dans l’immunothérapie mais surtout
dans la vaccinothérapie.
Mots clés : Venin, détoxification, peptide synthétique, Immunothérapie, Vaccinothérapie.
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Implication de la membrane lamellaire dans les stratégies d’échappement parasitaire et
la pathogenèse au cours de l’échinococcose humaine : Rôle anti-hydatique des Voies :
IFN-gamma/NOSynthase2
Amri Manel, Mezioug Dalila, Bouaziz Samia, Abdi Zaki-Sofiane & Touil-Boukoffa Chafia.
Equipe « Cytokines et NOSynthases », LBCM, FSB-USTHB, Alger.
RESUME
L’hydatidose causée par la forme larvaire du taenia Echinococcus granulosus est endémique en Algérie et
contraint à un traitement lourd essentiellement chirurgical. La survie du parasite est essentiellement due à la
présence de la couche externe du kyste hydatique : la membrane lamellaire. Cette dernière constitue une
barrière physique efficace vis à vis de la réponse immunitaire de l’hôte.
Dans notre étude, nous nous sommes intéressés à situer le rôle joué par la membrane lamellaire dans la
relation mise en place entre ce macroparasite et le système immunitaire de l’hôte. Nous avons évalué
l’implication de la membrane lamellaire dans la régulation de deux voies antagonistes Th1/iNOS et
Treg/Arginase au niveau des cultures de PBMC de sujets hydatiques. Parallèlement à cette étude, nous
avons également évalué l’effet de l’IFN-γ (marqueur Th1) et de l’IL-10 (marqueur Treg) sur la viabilité des
protoscolex (forme larvaire du parasite) en coculture avec les PBMC de sujets hydatiques (Amri et al.,
2007* & 2009**).
Nos résultats montrent que l’extrait de membrane lamellaire diminue la production d’IFN-γ/ NO. A
l’inverse, il augmente la production d’IL-10 et l’activité de l’arginase. Nos résultats montrent également que
l’IFN-γ possède une activité scolicide en coculture. A l’opposé, l’IL-10 semble réguler négativement
l’activité parasiticide des macrophages via l’inhibition de la production du NO.
L’ensemble de ces données suggère que la couche lamellaire joue un rôle essentiel dans les mécanismes
d’échappement mis en jeu par le parasite à travers l’inhibition des voies IFN-γ/iNOS et l’activation accrue
des voies Treg/Arginase. Nos résultats ouvrent des perspectives quant au choix d’une biomolécule
efficace dans la thérapie anti-hydatique.
* Amri M., Aït Aïssa S., Belguendouz H., Mezioug D. & Touil-Boukoffa C. In Vitro Antihydatic Action of Gamma Interferon
(IFN-γ) is Dependent on Nitric Oxide (NO) pathway. Journal of Interferon & Cytokine Research, 2007; 27(9): 781-787.
**Amri M., Mezioug D. & Touil-Boukoffa C. Involvement of IL-10 and IL-4 in evasion strategies of Echinococcus granulosus to
host immune response. Journal of European Cytokines network, 2009; 20(2): 83-86.
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Implication de l’IL-17, de l’IL-6, du TNF-α et de l’IL-10 dans les mécanismes de
l’immuno-modulation au cours des maladies inflammatoires chroniques de l’intestin :
Action potentielle thérapeutique de l’IL-10
Hayet Rafa 1, Houria Saoula
2, Amira F Boutaleb
2, Saida. Aftiss
2, M’hamed Nakmouche
2, Chafia
Touil-Boukoffa 1.
1: Equipe: Cytokines et NOSynthases, Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques,
USTHB, Alger. 2: Service de gastrœntérologie, CHU Maillot, Alger.
RESUME
Les maladies inflammatoires chroniques intestinales (MICI) sont des affections résultant de l’inflammation
chronique d’une partie de la paroi intestinale. Les déviations auto-immunes associées à ces pathologies sont la
résultante d’un déséquilibre des voies de régulation immunitaires. Le monoxyde d’azote (NO) joue un rôle
essentiel dans les réponses immunitaires et les réactions inflammatoires. Il est essentiellement synthétisé par la
NOS inductible (l’iNOS), enzyme induite sous l’effet de plusieurs cytokines. Dans le présent travail, nous nous
sommes intéressés à l’étude de la production du NO in vivo et ex vivo chez des patients atteints des MICI en
phase active. L’activité de l’iNOS a été déterminée au niveau des biopsies coliques provenant des patients
atteints les pathologies considérées. Cette étude a été complétée par l’étude de la modulation de l’iNOS au
niveau des cultures de PBMC par le TNF-α, l’IL-17, l’IL-6 et l’IL-10. Nous avons observé une corrélation
positive entre la production sérique de NO et l’activité de l’iNOS au niveau des biopsies coliques. Les résultats
obtenus montrent également une augmentation des taux de NO pour les deux catégories de patients après
stimulation des PBMC par l’IL-17, l’IL-6 et le TNF- α. A l’inverse, l’IL-10 a induit une diminution de la
production du NO. L’IL-17, l’IL-6 et le TNF-α semblent exercer des effets similaires dans l’induction de
l’iNOS au cours de ces deux pathologies. Notre étude souligne le rôle direct de NO dans l’immuno-
inflammation associée aux ulcérations coliques. L’IL-10 serait en faveur de l’utilisation thérapeutique de cette
molécule dans le traitement des patients atteints des MICI.
Mots clés : Maladies inflammatoires chroniques de l’intestin, IL-17, TNF-α, IL-6, IL-10, Monoxyde d’azote.
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LES ACTIVITES ANTI-RADICALAIRES D’UNE PLANTE MEDICINALE LOCALE
FRAXINUS ANGUSTIFOLIA (LE FRENE)
Laib yasmina et Atmani djebbar
Université de Bejaïa, Targa Ouzemour.
Les activités anti-radicalaires des extraits ; éthanolique, éthyle acétate, aqueux de l’éthyle acétate,
hexane, chloroforme et aqueux de chloroforme du Fraxinus angustifolia (feuilles et écorce) ont été étudiés
a l’aide de méthodes spectro photométriques in vitro. Leur teneur en phénols totaux et en flavonoïdes a été
également déterminée .Les résultats obtenus apportent que tous les extraits ont une forte activité
scavenger sur le radicale 1,1-diphényl-2-picryhydrazyl (DPPH) Avec un taux d’inhibition de 96.01% et
de91.74 pour les extraits aqueux de chloroforme écorce et feuilles respectivement et un taux de95.33% et
de 92.03 pour les 2 extraits éthanoliques, écorce et feuilles respectivement ( a 100ug /ml) de même pour le
peroxyde d’hydrogène(H2O2) l’inhibition été de 79.89% et 79.35% pour les 2 extraits éthyle acétate,82%
pour l’extrait aqueux de l’éthyle acétate des feuilles et 78% pour l’extrait hexane de l’écorce. Le radicale
hydroxyl (OH°) été généré avec le système EDTA-FeCL3. H2O2, et en présence du TBA comme révélateur
des produits de dégradation du désoxyribose(MDA), une faible capacité anti-hydroxyl été enregistrée pour
les extraits aqueux contrairement a leurs activités anti –DPPH et anti- H2O2 , les extraits éthanolique et
hexane des feuilles avaient des taux d’inhibitions respectifs de: 77.56%, 70% et 59.56%, 55.21 % pour les
extraits éthanolique et hexane de l’écorce. Une comparaison été faite entre les IC50 des extraits et celles des
standards (catéchine, acide gallique, acide ascorbique), une corrélation été effectuée entre la teneur en
phénols totaux et en flavonoïdes et entre les différentes activités anti radicalaires.
Mots clés : Fraxinus, DPPH, hydroxyl OH°, désoxyribose...
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Les éléments mobiles de type mariner issus des organismes des sources hydrothermales
océaniques : étude et perspectives d’utilisation en thérapie génique
Nassima Toumi1.2.3
, Sylvaine Renault3, Nathalie Casse
2, Elisabeth Pradier
2, Yves Bigot
3 et Marc
Laulier2.
[1] Université Cheikh Larbi Tébéssi , Route de constantine 12200 Tébéssa
[2] Laboratoire de Biologie et de Génétique Évolutive, E.A. 3565, Université du Maine, Avenue Olivier Messiaen, 72085 Le
Mans, France.
[3] Laboratoire d’étude des parasites génétiques (EA3868), Université François Rabelais, UFR de Sciences et Techniques, Parc de
Grandmont, Avenue monge 37200 Tours
Les éléments mobiles (transposons) sont des séquences d’ADN capables de se déplacer dans le génome. Ce
déplacement est généralement assuré par une protéine (transposase) codée par le transposon lui-même. Les
transposons sont actuellement étudiés comme outils de transgènèse et de mutagenèse en thérapie génique. Ils offrent
plusieurs avantages par rapports aux autres techniques de transfert de gène (taille de transgène, contrôle de
l’intégration du transgène, etc …).
Les transposons de type mariner sont ubiquiste chez les eucaryotes et ils ont une structure simple ce qui fait
d’eux des bons candidats en biotechnologie.
Au Laboratoire de Biologie et Génétique Evolutive (LBGE), nous travaillons sur des transposons de type
mariner issus des organismes des sources hydrothermales océaniques.
A l’heure actuelle le LBGE possèdent plus de 50 séquences de type mariner chez plusieurs espèces. Parmi ces
séquences, 5 ont un cadre de lecture ouvert (ORF) pour le gène de la transposase. Nous avons réalisé une étude de la
fonctionnalité de l’élément Alvcmar1 issu de l’annélide hydrothermal Alvinella caudata.
L’analyse in silico de cet élément révèle qu’il est capable de coder deux isoformes de la transposase. Une première
isoforme qui est constituée d’un ORF qui correspond à une transposase de 350 acides aminés ». La seconde isoforme
possède dans sa région N-teminale une extension de 30aa. Afin d’étudier l’activité de ces isoformes, les protéines
correspondantes ont été produites en bactérie. On a pu montrer, par la technique de gel retard, qu’elles reconnaissent et
se fixent spécifiquement aux ITR d’Alvcmar1. Cette technique a pu montrer également des événements de coupure
produits par ces transposases à différentes températures (4°C, 15°C, 30°C et 50°C). Parallèlement, des tests de
transposition en bactérie ont révélé une activité faible de ces deux isoformes.
Nos perspectives consistent à optimiser cet élément par mutagenèse dirigée afin d’obtenir un élément plus
performant qui peut être utilisé comme vecteur de transfert de gène.
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Apport des thérapies moléculaires ciblées dans la prise en charge des cancers
colorectaux métastiques . Expérience Algérienne
K. Berkane 1-2
M.Oukkal2, H.Mahfouf
2, N.Terki
3, R.Baba Ahmed
4 et K. Bouzid
2
1- Faculté des Sciences Biologiques, USTHB, 2- Service d’Oncologie Medicale, 3- Service d’Anatomie Pathologique, CPMC et
4- Service d’Anatomie Pathologique EHS Lamine Debaghine, BEO, Alger.
RESUME
Le cancer colorectal est une pathologie grave et pose un véritable problème de santé publique. L’incidence
est régulièrement croissante dans le monde. L’émergence des thérapies moléculaires ciblées (TMC) apporte
un réel espoir en terme de survie pour des patients où un plafond thérapeutique semblait être atteint et où le
pronostic a brève échéance était réservé. Ces TMC se révèlent ciblées à double titre : elles ciblent un
mécanisme impliqué dans le processus de l’oncogenèse et elles ne visent qu’une catégorie de patients. Les
mutations du gène Kras se révèlent prédictives d’une réponse à ces anticorps monoclonaux dirigés contre le
récepteur du facteur de croissance de l’Epidermal Growth Factor (EGFR). De Septembre 2005 à Juin 2006,
46 patients atteints de cancer colorectal métastatique sont admis au service pour prise en charge. Les
mutations au niveau du gène KRAS sont recherchées pour les patients en échec thérapeutique. La forme
Wild type a été retouvée chez 75,6% de nos patients et où un traitement anti-EGFR a été préconisé ; une
survie sans progression de la maladie de 12,5 mois a été retrouvée par rapport aux patients sous
cytotoxiques classiques. Les mécanismes impliqués dans les processus de l’Oncogenèse sont loin d’être
complètement élucidés chez l’Homme puisqu’une résistance à ce traitement est de nouveau observée. La
recherche d’autres facteurs prédictifs de réponse est en cours de réalisation.
L’intégration de ces techniques dans les stratégies de dépistage en milieu clinique contribuera sans aucun
doute à l’amélioration du diagnostic des α-thalassémies et des autres hémoglobinopathies associées (β-
thalassémies, drépanocytose).
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SESSION: BIOCHIMIE-BIOTECHNOLOGIE
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L’hémoglobine source intarissable de connaissances
Boudrahem-Addour N Laboratoire de biologie moléculaire et cellulaire, Faculté des sciences biologiques,
USTHB, Bab Ezzouar Alger.
RESUME
L’hémoglobine réunit à son actif un tableau de performances exceptionnelles. C’est une maladie de
l’hémoglobine, la drépanocytose qui a été la première maladie moléculaire identifiée en 1949. Première
séquence protéique, première structure tridimensionnelle. C’est aussi la protéine qui présente le plus grands
nombre de variants. L’ensemble de ces travaux a permis les premières interprétations structure/fonction.
A l’ère de la biologie moléculaire, l’hémoglobine a gardé sa position de leader. Les gènes de globine ont
été les premiers gènes humains analysés dans leur structure et leur environnement chromosomique. Ils sont
considérés comme un système modèle d’étude des mécanismes de la spécificité tissulaire d’expression des
gènes chez les vertébrés. Parallèlement, de très nombreuses mutations ont été identifiées responsables des
syndromes thalassémiques. L’utilisation de méthodologies de plus en plus sophistiquées a contribué à la
précocité et à la standardisation du diagnostic moléculaire et à une réflexion profonde sur les aspects
éthiques de ce geste.
L’hémoglobine a aussi été un outil précieux dans les études de génétique de populations. La comparaison
des études réalisées en Algérie avec d’autres dans le monde permet de retracer les mouvements de
population. Le caractère endogame constaté favorise les affections génétiques à transmission autosomique
récessive. Il y a sans doute à ce niveau une politique de santé publique à mettre en place. Le phénomène de
sélection par le Plasmodium falciparum sur les hémoglobinopathies s’avère s’exercer sur d’autres gènes tels
que les gènes HLA du CMH, les cytokines et les gènes des molécules d’Adhérence.
En thérapeutique, des étapes de la physiopathologie ont été ciblées par l’utilisation d’agents
pharmacologiques inducteurs de l’Hémoglobine fœtale.
Les paradigmes actuels concernent le rôle de l’hémoglobine dans le transport du monoxyde d’azote, la
régulation complexe des familles de gènes de globine au cours du développement et l’implication des gènes
modificateurs dans l’hétérogénéité clinique. Quand à la thérapie génique, elle est encore à l’échelle de la
recherche fondamentale.
A l’aube de la médecine moléculaire, l’hémoglobine continue de nous entraîner sous son sillage. Fidèle à
elle-même cette molécule ne cessera de nous apporter la lumière…..
Mots clés : Hémoglobine, molécule modèle
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EFFET DE L’ACIDE NIFLUMIQUE SUR LA PHYSIOLOGIE
MITOCHONDRIALE ET LA PROLIFERATION DES CELLULES HT-29
I. Amrouche-Mekkioui 1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
La cyclooxygénase 2 (COX-2), une enzyme qui produit hydrolyse l’acide arachidonique en prostanoïdes, a
été impliquée dans la cancérogenèse colique. Elle intervient en inhibant l’apoptose, dont la phase
effectrice consiste en l'ouverture des pores de transition de perméabilité mitochondriale (PTPC) et la
libération de protéines apoptogènes.
L’acide niflumique (Nif) est un anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS), qui inhibe les deux isoforme de
cyclooxygénases avec un effet préférentiel sur la COX-2.
Nous avons étudié l’effet de l’acide niflumique (Nif) sur la physiologie des mitochondries de foie de rat
(gonflement et respiration), sur la prolifération des cellules HT-29 (lignée épithéliale intestinale dérivées de
cancer colique humain) et la libération d’IL-8 induites par le TNFα et le PMA.
Nos résultats montrent que le Nif provoque l’ouverture des pores de transition de perméabilité (PTPC, 100-
150µM) et découple la phosphorylation oxydative des mitochondries (10-150µM). Le LPS multiplie leur
taux de prolifération par un facteur de 3.5 à J4. Le Nif 250 µM a un pouvoir anti prolifératif sur ces cellules.
Le Nif (50-100µM) augmente la production d’IL-8 par les cellules HT-29 en absence et en présence de
TNFα, alors qu’à des doses plus élevées il semble avoir l’effet inverse (250 à 750µM). Le Nif n’a aucun
effet sur la production d’IL-8 stimulée par le PMA. Le Nif possède un effet anti prolifératif potentiel.
Mots clés : HT-29, AINS, mitochondrie, IL-8, TNFα, PMA.
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COLITE ULCEREUSE AU DEXTRAN SULFATE - MODULATION DU STRESS
OXYDATIF PAR UN ANTI-INFLAMMATOIRE NON STEROÏDIEN,
L’INDOMETACINE
A. Bounaama1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
La colite ulcéreuse est une inflammation chronique du colon qui augmente le risque de développement du
cancer colorectal. Cet effet est fortement lié à l’induction d’un stress oxydatif dans la muqueuse colique.
Dans ce travail, l’effet de l’indométacine un anti-inflammatoire non stéroïdien présentant un effet inhibiteur
sur le développement du cancer colorectal, a été recherché sur la modulation du stress oxydatif associé à une
colite ulcéreuse expérimentale induite par le dextran sulfate sodium (DSS).
Deux cycles de DSS successifs ont été réalisés. L’administration du DSS (3%) par voie orale pendant 7 jours
suivie d’une administration de l’eau du robinet pendant 14 jours définit un cycle de DSS.
Les taux de malondialdehyde (MDA), de glutathion réduit (GSH), de monoxyde d’azote (NO) et de
l’activité catalase ont été mesurés dans les homogénats de colons prélevés des souris soumises aux
différents traitements.
Les résultats obtenus montrent que le DSS a induit une augmentation du taux de GSH, du MDA et du NO
respectivement avec des facteurs de 1.40, 1.65 et de 4.43 des taux témoins. L’indométacine a rétabli le taux
de GSH et de MDA aux valeurs témoins, sans réduire le taux de NO. Par ailleurs, l’activité catalase diffère
peu de la valeur témoin après traitement au DSS seul ou en présence d’indométacine. L’indométacine a
partiellement neutralisé l’inflammation chronique de la muqueuse intestinale induite par le DSS, en
réduisant notamment l’infiltrat cellulaire.
Mots clés : stress oxydatif, colite, dextran sodium sulfate, indométacine, malondialdehyde, monoxyde d’azote, GSH,
catalase.
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ANTIDIABETIC AND ANTIOXIDANT EFFECT OF ALOIN IN
STREPTOZOTOCIN-INDUCED DIABETIC RATS.
C. Kandouli (1)
, F. Khelifi-Touhami (1)
, C. Benlatreche (2)
, Z. Leulmi (3)
.
(1)Laboratoire de biologie animale. Département de biologie animale .Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie .Université
Mentouri, Constantine 25000, Algérie. (2)Laboratoire de biochimie CHU IBN BADIS, Constantine 25000.Algérie. (3)
Laboratoire de génie microbiologique et applications.
ABSTRACT
Hyperglycemia not only generates reactive oxygen species but also attenuates antioxidant mechanisms
creating a state of oxidative stress. Oxidative stress is thought to play crucial role in development of
complications associates a diabetes. Many plants were evaluated to overcome this problem. Aloe (Liliaceae)
is widely used in North Africa folk medicine to treat various diseases including diabetes. Aloe contains
many active ingredients, but the best known is aloin.The purpose of this study was to investigate the
possible antidiabetic, hypolipidemic and antioxidant effect of aloin, with the daily amount of 30 mg/kg,
during three weeks, in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats (30 mg/kg body weight) for three weeks.
Serum glucose level was measured weekly. At the end, total cholesterol, triglycerides and HDL-cholesterol
were examined in serum and reduced glutathione (GSH), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS),
superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) were evaluated in homogenates of liver and kidney. Oral
administration of aloin for three weeks resulted in a significant reduction in blood glucose and a decrease in
serum total cholesterol and triglycerides but no change in the level of HDL was observed. The aloin also
resulted in decreased free radical formation in studied tissues (liver and Kidney). The decrease in
thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and the increase in the activities of superoxide dismutase
(SOD), catalase (CAT) and reduced glutathione (GSH) suggest that aloin has antioxidant properties in
addition to its antidiabetic effect. The result of this experimental study indicates that aloin at 30 mg/kg body
weight possesses antidiabetic and antioxidant activity. However other experimental research is necessary to
determine the mechanisms involved in these effects.
Keywords: Aloin; Streptozotocin; Diabetes; glycemia; Oxidative stress; Antioxidants.
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Variation de l’Homocystéine et du Génotype C677T de
la Méthylénetétrahydrofolate Réductase chez l’Hypertendu
A.Otmane1, M.Makrelouf
1, F.Bouamrane
3, A.Zenati
1
Laboratoire Central de Biologie CHU de Bab El Oued1 . Service de Médecine Interne Hôpital de Bainem
3 Alger 16000 Algérie
Correspondance:[email protected]
RESUME
L’hyperhomocystéinémie représente un facteur de risque indépendant de pathologie cardiovasculaires et
athérothrombotiques. La régulation du taux de cet acide aminé est sous la dépendance de facteurs
physiologiques (âge, sexe), nutritionnels (statut vitaminique) et génétiques (déficit ou mutation des enzymes
impliqués dans son métabolisme).
Dans ce travail nous étudions la mutation ponctuelle C677T de la MTHFR (Méthylènetétrahydrofolate
réductase) une des enzymes clé du métabolisme de l’homocystéine, dans le but d’étudier sa répartition chez
une cohorte Algérienne de patients hypertendus. Ils s’agit d’une étude rétrospective conduite au CHU de
Bab El Oued d’Alger, 67 patients hypertendus sont inclus, d’âge moyen 55.31 13.35 ans, ils sont comparés
à 30 sujets témoins d’âge moyen 53.9 14.34 ans.L’homocystéine totale plasmatique a été dosée par
technique FPIA : Fluorescence Polarization Immunoassay. Le génotype C677T de la MTHFR a été réalisé
par la méthode PCR sur Light Cycler.
Les résultats obtenus ont montré que l’hyperhomocystéinémie est plus marquée chez les hypertendus 12.89
6.71 µmol/l, versus 10.35 2.38 µmol/l dans le groupe témoin (p<0.05). Chez les hypertendus les
fréquences génotypiques sont respectivement : 37% CC ,60% CT et 3%TT, cependant dans le groupe
témoin le génotype TT n’a pas été retrouvé, les génotypes CC et CT représentent respectivement 40% et
60%. La distribution mondiale du génotype C677T est très hétérogène; bien que notre travail soit
préliminaire, les premiers résultats retrouvent une fréquence génotypique de 2.5%, celle de l’allèleT est de
32.5%.
Nos connaissances actuelles concernant l’influence de facteurs environnementaux sur le déterminant
génétique s’avèrent incomplètes.
Cette étude devra être poursuivie par d’autres investigations essentiellement le dosage des vitamines du
groupe B (B6, B9, B12).
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GENETIC POLYMORPHISMS OF N-ACETYLTRANSFERASE 2 AND
CARDIOVASCULAR DISEASES
M. Khelil1*
, Bahia Djerdjouri1, Bouchentouf Tayebi
2,
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la Technologie
« Houari Boumédienne » USTHB, Bab Ezzouar, BP: 32 El- Alia. 16111, Alger, Algérie
RESUME
La N-acétyltransférase 2 (NAT2) est un enzyme du métabolisme des xénobiotiques. NAT2 est polymorphe
et ce polymorphisme a été associé à une différence interindividuelle dans la réponse aux médicaments. En
outre, ce polymorphisme a aussi été associé à la modification du risque des maladies multifactorielles. Notre
but a été d’une part de déterminer la capacité d’acétylation chez une population Algérienne afin de
déterminer une dose thérapeutique efficace et moins toxique par rapport à la dose standard. D’autre part,
nous avons testé la relation entre le polymorphisme génétique de l’enzyme NAT2 et les maladies
cardiovasculaires. 200 sujets (50 patients avec une hypertension artérielle, 50 patients ayant présenté un
accident vasculaire cérébral et 100 témoins) ont été enrôlés dans cette étude. Le génotype NAT2 a été
déterminé par la méthode PCR-RFLP. Nos résultats ont montré une différence significative entre patients et
témoins pour l’haplotype NAT2*5F (P =0.032; OR = 0.44). Aucune différence significative n’a été observée
pour les autres haplotypes, ni pour les génotypes et phénotypes. La proportion d’acétyleurs lents et rapides a
été d’environ 50% aussi bien chez les malades que chez les témoins. En conclusion, nous pouvons suggérer
qu’il y aurait autant de métaboliseurs rapides que de métaboliseurs lents chez la population de patients
étudiés. En outre, l’haplotype NAT2*5F semblerait être un facteur protecteur contre les maladies
cardiovasculaires étudiées.
Mots clés : Maladies cardiovasculaires N- acétyltransférase, polymorphisme.
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Description des Chromosomes de l’Outarde houbara Chlamydotis undulata undulata et
Cartographie Chromosomique Comparée:
Première Etape de l’Analyse du Génome
Mahiddine L.,* Belhamra M.,** Boucekkine W.,*** Ladjali-Mohammedi K.* * Laboratoire de Génétique du Développement, FSB, USTHB
([email protected]; [email protected])
** Centre Cynégétique de Zéralda, Centre de Recherche Scientifique et Technique sur les Régions Arides, Université de Biskra
*** Direction Générale des Forêts ([email protected])
Résumé
Certains réarrangements chromosomiques se sont produits durant l’évolution entre les génomes aviaires et
humains mais plusieurs groupes de synténies restent conservés. Ceci a été observé dans plusieurs familles de
gènes impliqués dans des fonctions biologiques extrêmement importantes. C’est pour ces raisons que les
génomes aviaires constituent un excellent modèle d’évolution et leur connaissance commence par leurs
descriptions et l’accumulation d’informations. En effet, une de ces étapes est l’analyse des différents
caryotypes aviaires et l’établissement de la cartographie chromosomique comparée.
Parmi les nombreuses espèces aviaires qui figurent comme étant vulnérables dans la liste rouge établie en
2004 par L’Union Internationale pour la Conservation de la Nature (UICN), on retrouve l’Outarde houbara
Chlamydotis undulata undulata qui est un oiseau rare, appartenant à l’ordre des Gruiformes, emblématique
des grands espaces steppiques et désertiques de l’Afrique du Nord et du Moyen Orient.
La situation très préoccupante de cette espèce en Algérie nous incite à entamer, rapidement, une étude de
son génome ainsi que la mise en place d’une base de données afin de contribuer à sa préservation. Ainsi,
nous proposons pour la première fois le caryotype de l’Outarde houbara en bandes morphologiques GTG et
dynamiques RBG obtenu après la réalisation d’une culture des précurseurs érythrocytaires à partir d’un
jeune mâle. Des doubles synchronisations du cycle cellulaire avec l’incorporation du BrdU, analogue
structural de la thymidine, lors de la réplication de l’ADN ont été réalisées et nous ont permis d’obtenir des
chromosomes allongés en prométaphase.
La comparaison individuelle des huit premières paires chromosomiques et les chromosomes sexuels ZZ
avec les chromosomes du poulet, a révélé la présence de similitudes entre la morphologie et le motif des
bandes pour les 6 premiers macrochromosomes et le chromosome sexuel Z. A l’inverse, les chromosomes 7
et 8 sont nettement différents chez ces deux espèces qui semblent avoir divergés après des réarrangements
chromosomiques qui se sont produit durant l’évolution des oiseaux.
Mots clés : Outarde houbara, Chlamydotis undulata undulata, espèce menace d’extinction, précurseurs
érythrocytaires, double synchronisation, génome aviaire, caryotype, chromosomes, bandes GTG et RBG,
cartographie comparée.
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SESSION: MICROBIOLOGIE-BIOTECHNOLOGIE
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Etude moléculaire de la résistance d’Enterobacter sp aux céphalosporines à large
spectre et aux quinolones dans les hôpitaux d’Alger
Hassen IABADENEa, Yamina MESSAI
a, Souhila ALOUACHE
a, Charlotte VERDET
b, Guillaume
ARLETb et Rabah BAKOUR
a
a- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Génétique, Faculté des Sciences Biologiques, Université des
Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger
b- Université Paris VI, Faculté de Médecine Pierre et Marie Curie, Laboratoire de Bactériologie, UPRES EA 2392, Paris, France
Résumé :
L’étude a porté sur Enterobacter sp (n=149) isolés dans les hôpitaux d’Alger. L’antibiogramme, les tests
d’antagonisme et de synergie ont permis de distinguer 2 groupes de souches :
- Sensibles aux céphalosporines de 3ème
et 4ème
génération (C3G/C4G) : 114 souches se répartissant en phénotypes «
pénicillinase haut niveau » (n=21) et « céphalosporinase naturelle » (n=93).
- Résistantes aux C3G/C4G : 35 souches assignées aux phénotypes « béta-lactamases à spectre élargi » (n=25) et
céphalosporinase acquise (n=10).
La caractérisation moléculaire de la résistance a confirmé :
- Le phénotype BLSE avec la présence des allèles blaCTX-M (CTX-M-15 : n=11, CTX-M-3 : n=9), blaSHV-12 (n=4) et
blaVEB-1 (n=1) portés respectivement par des plasmides auto-transférables Inc/rep L/M de 80kb et Inc/rep HI2 de
150kb, et non conjugatif Inc/rep FII de 60kb. Les souches SHV-12+ coproduisent des céphalosporinases plasmidiques
(pAmpC) de type DHA-1 localisées sur un plasmide Inc/rep A/C de 100kb .
- La dérépression chez le reste des souches de la céphalosporinase chromosomique suite à des mutations dans les
gènes régulateurs ampR et ampD.
La recherche des déterminants qnr a montré la présence des allèles qnrS1, qnrB1 et qnrB4 chez 5 souches BLSE+
produisant CTX-M-15 ou SHV-12.
Cette étude a montré la prédominance des BLSE CTX-M et l’association des déterminants qnr à ceux des BLSE, ainsi
qu’elle a mis en évidence pour la première fois les pAmpC en Algérie et le type DHA-1 chez Enterobacter cloacae.
Mots clés : Enterobacter, BLSE, QNR, Algérie.
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Gravité des mycobactérioses chez les patients immunodéprimés.
Nateche F1.2*
, Lafoz C3, Baraka S
2, Samper S
3 et Khaled S
2.
1 Laboratoire de biologie moléculaire et cellulaire, FSB, USTHB. ALGER.. ALGER.
2 Laboratoire central, EHS EL HADI FLICI Ex EL KETTAR. ALGER
3 Laboratoire de mycobactériologie, faculté de médecine, université de ZARAGOSSE. ESPAGNE. * [email protected]
Résumé
Objectif : cette étude démontre la vulnérabilité des patients HIV positifs aux mycobactéries atypiques ou
non tuberculeuse (MNT). Ainsi, 312 produits pathologiques ont été investigués.
Méthodes :
L’identification classique des souches atypiques ou MNT a été faite sur la base des tests classiques : Etude
macroscopique des colonies ; présence de pigments ; temps de croissance ; tests physiologiques et
biochimiques ; ainsi que la résistance à l’isoniazide, le TCH et le PNB.L’identification moléculaire a été
réalisée par une PCR avec l’ ARNr 16S de Mycobacterium tuberculosis, et la technique de PRA (PCR
restriction analysis). L’analyse des fragments de restriction sont comparés avec la base des données du site :
http://app.chuv.ch/prasit.
Résultats :
Touts les isolats ont été identifiés comme appartenant au complexe M. tuberculosis à part 10 souches
provenant de 9 patients ont donné des réactions atypiques.
Il est important de souligner que 6 patients sont positifs pour le VIH. En effet, le p value de 0.0001 met en
évidence l’étroite relation entre les souches atypiques et le statut VIH.
5 espèces différentes ont été mises en évidence :
- M. intracellulare type 2 avec 5 souches.
- M. nonchromogenicum type 2 avec une souche.
- M. lentiflavum type 4 avec une souche.
- M. fortuitum type 1 avec 2 souches.
- M. chaloneae type 1 avec une souche.
Dans ce cas, la thérapie est problématique vu le haut niveau de résistance de ces souches aux molécules
antituberculeuses particulièrement à l’isoniazide et la rifampicine. En effet, 7/10 souches sont
multirésistantes dans le cas de notre étude.
La technique PRA est non fastidieuse et non onéreuse, elle est à recommander dans les laboratoires de
mycobactériologie afin de dresser un diagnostic juste et surtout précoce.
Conclusion :
Les mycobactéries affectent plus les malades positifs pour le VIH que les patients séronégatifs, Le p value
de 0.0001 met en évidence l’étroite relation entre les souches atypiques et le statut VIH.
Mots clés : Mycobacterium, VIH, PCR restriction analysis, multirésistance.
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Mise en évidence et essai de Caractérisation de molécules antifongique chez Bacillus
thuringiensis
Abderrahmani Ahmed1, Nateche-Metiaz Farida
1, Hacene Hocine
1et Jacques Philippe
2.
1) Laboratoire BCM Equipe Microbiologie Faculté des Sciences Biologiques -USTHB.BP 32 .El alia. 16111 .Alger Algérie.
2) Laboratoire Probiogem Polytech’lille. Avenue Langevin.USTL1 .Lille. 59655. France
Résumé
Une collection de soixante rhizobactéries appartenant au laboratoire de microbiologie et identifiées
comme étant des souches de Bacillus thuringiensis a été testée vis-à-vis de cinq champignons mycéliens :
Mucor roxii, Rhizopus nigricans, Penicillium roquefortii, Aspergillus niger et Fusarium oxysporum.
L’investigation avec ces mycètes révèle une bonne activité antagoniste. En effet, l’analyse par
spectrométrie de masse de type Matrix-assisted laser desorption-ionisation time of fligt ( MALDI TOF) de la
souche B. thuringiensis (FvBj6) qui a présenté le spectre le plus large a permis de retrouver deux pics
importants avec des masses de 906 et 1065 correspondant respectivement à la kurstakine et à l’iturine A ou
à la mycosubtiline.
Outre, le pic 906 aurait un intérêt systématique puisqu’il est retrouvé chez les souches de Bacillus
thuringiensis uniquement et peut être considéré comme un bio marqueur et serait responsable de l’activité
antifongique. En plus de son activité entomocide, Bacillus thuringiensis peut être un prometteur candidat
pour une utilisation contre les pathologies antifongiques.
Mots clés : Bacillus thuringiensis, activité antifongique, Maldi tof, kurstakine, biomarqueur antifongique.
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Etude phénotypique et génotypique de la virulence de souches hospitalières de
Klebsiella pneumoniae
Radia AISSANIa,
Yamina MESSAIa, Hassen IABADENE
a, Souhila ALOUACHE
a, Guillaume
ARLETb et Rabah BAKOUR
a
a- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Génétique, Faculté des Sciences Biologiques, Université des
Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger
b- Université Paris VI, Faculté de Médecine Pierre et Marie Curie, Laboratoire de Bactériologie, UPRES EA 2392, Paris,
France
Résumé
Klebsiella pneumoniae est une bactérie pathogène opportuniste causant des infections nosocomiales et
communautaires. Sa pathogénicité est liée à l’expression de plusieurs facteurs de virulence: capsule, adhésines,
sidérophores et protectines/invasines. Les principales manifestations cliniques sont la pneumonie, la septicémie,
l’infection des plaies et du tractus urinaire. L’émergence de souches productrices de β-lactamases à spectre élargi
plasmidiques (BLSE) a compliqué la situation.
La recherche de facteurs de virulence sur 39 souches cliniques productrices de BLSE a montré l’ubiquité des gènes
fimH(100%), mrkD(95%) et ycfM(95%) codant les fimbriae1, les fimbriae3 et une protéine putative de liaison à la
fibronectine. Le gène kpn codant une adhésine FimH-like est présent chez 69% des souches. Les capsules produites ne
sont pas de types antigéniques K1, K2 et K5. 90% des souches sont phénotypiquement résistantes au sérum et les
gènes traT, rmpA et magA, parmi ceux susceptibles de conférer cette résistance, sont absents excepté chez 3 souches.
Toutes les souches sont positives pour le gène entB de l’entérobactine, ceux de biosynthèse et de capture de la
yersiniabactine (irp1, irp2, ybtS, fyuA) sont présents chez 56% des souches et seules 8% des souches sont positives
pour le gène iutA de l’opéron de l’aérobactine. La production de sidérophores a été confirmée par la méthode de co-
culture en milieu appauvri en fer. La combinaison des facteurs de virulence a permis de distinguer 9 pathotypes dont 3
sont prédominants.
Cette étude a révélé la virulence des souches de K. pneumoniae sévissant dans les hôpitaux d’Alger.
Mots clés: Klebsiella pneumoniae, virulence, béta-lactamases
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SESSION: MICROBIOLOGIE-BIOTECHNOLOGIE
(Suite)
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PRODUCTION D’ESTERS D’ALKYLE D’ACIDES GRAS PAR BIOCONVERSION
MICROBIENNE D’UNE HUILE VEGETALE
Z. HACHAICHI-SADOUK1, 2
, A. TAZEROUTI2, H. HACENE
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques,
2Laboratoire de Chimie Organique Appliquée, Faculté de Chimie,
Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediène,
BP 32 El Alia, 16111 Bab Ezzouar, Alger, Algérie.
Résumé-
Les esters d’alkyle d’acides gras issus de la transestérification d’huiles végétales constituent des matières
premières intermédiaires très recherchées par les industries pharmaceutiques. En 2007, le « Committee for
medicinal products for human use » de l’ « European medicines agency » par exemple, désigne les esters
d’acides gras comme excipients aptes à solubiliser et/ou à faciliter la pénétration des formulations
transdermiques.
Cette transestérification peut être réalisée soit, par voie chimique conventionnelle, soit par voie
enzymatique, ou par biotransformation au cours de la fermentation microbienne (whole cells).
La bioconversion d’une huile de tourteau d’olives avec une souche du genre Rhodococcus a été
effectuée dans notre laboratoire: l’analyse du produit brut par CG et CG/MS/IE a révélé la présence d’esters
méthyliques et éthyliques d’acides gras. Les bandes caractéristiques des esters ont été confirmées par IR.
Mots clés: Bioconversion, Rhodococcus rhodochrous. Huile végétale, Esters d’alkyle d’acides gras.
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Profil de résistance aux métaux lourds chez Chryseobacterium solincola sp, nov.,
Benmalek1 Y, Nateche-Metiaz
1 F, Hachani
1 B, Hambli
1 A, Fardeau
2 M-L & AHacene
1 H
1 Laboratoire de Microbiologie, Département de BCM, Faculté des sciences biologiques, Université des Sciences et de
Technologie Houari Boumediene, Bab Ezzouar, Alger, Algérie.
2
Laboratoire de Microbiologie IRD, UMR D180, Microbiologie et Biotechnologie des Environnements Chauds, Universités de
Provence et de la Méditerranée, ESIL, Case 925, 163 Avenue de Luminy, 13288 Marseille Cedex 09, France
Corresponding author: [email protected]
RESUME
Les métaux lourds sont des éléments métalliques de masse volumique ≥ 5g/cm3. Certains sont essentiels pour le bon
fonctionnement des différentes activités cellulaires (Fe,Cu, Ni, Zn,Co..), par contre d’autres sont très toxiques même à
de très faibles concentrations (Hg, Cd, Pb...). Ils sont naturellement présents dans l’environnement sous forme de
traces, mais le développement de la technologie a significativement augmenté leur taux et leur disponibilité. Ils
peuvent se concentrer le long de la chaîne alimentaire et s’accumuler dans quelques organes de l’homme et de
l’animal. Ils sont tous neurotoxiques, avec certains cancérigènes. Pour cette raison, plusieurs procédés de
biotechnologie de l’environnement ont été développés dans le but d’éliminer ou de diminuer la concentration de
ces éléments minéraux très toxiques dans notre environnement.
Dans cette optique, on a étudié la résistance vis à vis 7 sels métalliques (plomb, chrome, zinc, nickel, cadmium,
cuivre, cobalt) chez Chryseobacterium solincola sp, nov., par la suite on a procédé à la détermination du support
génétique par les techniques du transfert génétique (conjugaison), et le curage.
Les résultats obtenus montrent que cette bactérie est poly résistante et les CMIs déterminées sont considérables
avec des chiffres de l’ordre de 500 ug/ml (Pb), 350ug/ml (Cr), 300ug/ml (Zn et Ni), 150ug/ml (Cd), 75ug/ml (Cu et
Co). Aucun transfert génétique n’a eu lieu entre notre souche et la souche réceptrice E coli K 12. Pour le curage 3
clones sont obtenus avec des fréquences différentes. Deux clones avec l’agent curant SDS dont un a perdu le
caractère de résistance aux Zn et Na Cl, et l’autre le caractère de résistance au ZN seulement avec une fréquence de
1.33x10-2
. Pour le 2ème
agent curant (acide nalidixique), un seul clone est obtenu qui a montré une perte de 3
caractères de résistance à la fois (Pb, Zn, Na Cl), avec une fréquence de 0.66x 10
-2 .
Sur la base des résultats obtenus, cette bactérie est très intéressante, et peut être appliquée dans les différents procédés
de biotechnologie de l’environnement.
Mots clés : Chryseobacterium solincola, résistance, métaux lourds, gènes de résistance.
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Influence des apports anthropiques sur l’évolution génétique des bactéries en milieu
marin : cas de la résistance aux antibiotiques dans les eaux portuaires d’Alger
Souhila ALOUACHE, Lynda ANSSOUR, Yamina MESSAI, Hassen IABADENE
et Rabah BAKOUR Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Génétique, Faculté des Sciences Biologiques, Université des
Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger
RESUME
L’étude a porté sur la détection de la résistance aux béta-lactamines chez les bactéries à Gram- dans les eaux
portuaires polluées d’Alger. Trente cinq souches ont été sélectionnées sur la base de leur résistance aux
céphalosporines à large spectre médiée par des béta-lactamases à spectre étendu (BLSE). Ces souches se répartissent
en 20 Citrobacter freundii, 6 Aeromonas hydrophila, 6 Vibrio fluvialis (17%), 1 Citrobacter braaki (2,86%), 1
Bordetella sp. (2,86%) et 1 E. coli (2,86%). Le typage moléculaire par ERIC-PCR des souches d’Aeromonas et de
Vibrio a révélé des génotypes différents, tandis qu’on a noté le caractère clonal de 17 souches sur les 20 de
Citrobacter freundii. Les BLSE identifiées sont principalement de type CTXM-3 et CTXM-15, avec la présence des
types PER-1 et VEB-1 ; leurs gènes sont localisés, respectivement, sur des plasmides de 85kb autotransférable, 10kb
mobilisable et >128kb non transférable.
Ces souches identifiées sont allochtones et autochtones du milieu marin, elles ont été décrites comme agents
étiologiques d’infections opportunistes et les BLSE détectées sont de même type que celles retrouvées en clinique. Ces
données peuvent être indicatives de l’influence des apports anthropiques biotiques et abiotiques sur l’évolution
génétique des bactéries marines, par les transferts génétiques in situ et la pression de sélection. Ainsi, outre le maintien
confirmé de la résistance aux antibiotiques dans le milieu marin, ce dernier peut même jouer un rôle dans son
exacerbation.
Mots clés: Bactéries à Gram-, milieu marin, résistance, antibiotiques
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Extraction et essai de caractérisation des substances antimicrobiennes
produites par une souche d’actinomycète halophile modérée.
DJINNI Ibtissem1, SOUAGUI Samiha
1, KECHA Mouloud
1 et BENALLAOUA Said
1.
1Laboratoire de Biochimie Microbienne / LMA, FSNV, Université A.MIRA, 06000 Bejaia- Algérie
e-mail : [email protected]
RESUME
Face à la résurgence des maladies infectieuses déjà connues (paludisme, tuberculose, etc.) et à
l’apparition de nouvelles autres encore plus mortelles (telles que le SIDA, la grippe aviaire, etc.) mais
également le phénomène de multirésistance bactérienne qui connaît une augmentation ces dernières années,
sont devenues la préoccupation majeure des industries pharmaceutiques et de la communauté médicale tant
du point de vue de la mise en évidence de nouvelles molécules, sûres mais également efficaces que de celui
du mécanisme d’action et activité biologique.
L’une des stratégies adoptées est l’isolement et l’identification de souches d’actinomycètes
productrices d’antimicrobiens issus des environnements peu communs voir extrêmes.
Sur un total de 35 souches modérément halophiles isolées de la région de Béjaia, l’isolat S17 a été
sélectionné pour son importante activité à la fois antibactérienne et antifongique vis-à-vis de 6 bactéries, de
3 champignons filamenteux et d’une levure.
Les activités antibactériennes et antifongiques de cet isolat sont extraites, aussi bien à partir du
mycélium qu’à partir des filtrats de cultures, par cinq solvants de polarité croissante. Des résultats positifs
ont été obtenus uniquement avec les filtrats de culture.
Les extraits organiques bruts de la souche S17 ont fait objet d’une semi purification sur plaque de gel
de silice (CCM) afin de déterminer le meilleur système d’élution, de ce fait, le système éthanol-
ammoniaque-eau (60/20/20) s’est révélé être le meilleur.
Des révélations chimiques et une étude spectroscopique ont été réalisées sur les extraits bruts de ces
filtrats de culture et les résultats indiquent l’absence de composés polyèniques mais aussi, que nos
substances semblent avoir des propriétés analogues aux molécules de type polyéthers dont les
caractéristiques biologiques et physicochimiques semblent coïncider avec nos résultats : action exclusive sur
les bactéries à Gram +, champignons filamenteux et levures, et réaction intense avec la vanilline-H2SO4.
Mots clés : Actinomycètes halophiles, isolement, activité antibiotique, Streptomyces.
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ATELIER
BIOTECHNOLOGIE ET BIOINFORMATIQUE
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Welcome to High Definition Genomics
Aouatef Ait-Lounis Faculté des Sciences Biologiques, USTHB
Abstract. Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a technique for assaying protein–DNA binding in vivo.
In a ChIP experiment for DNA-binding proteins, DNA fragments associated with a specific protein are
enriched. The DNA-binding protein is crosslinked to DNA in vivo by treating cells with formaldehyde and
the chromatin is sheared by sonication into small fragments, which are generally in the 200–600 bp range.
An antibody specific to the protein of interest is used to immunoprecipitate the DNA–protein complex.
Finally, the crosslinks are reversed and the released DNA is assayed to determine the sequences bound by
the protein. The introduction of microarrays allowed the fragments obtained from ChIP to be identified by
hybridization to a microarray (ChIP–chip), therefore enabling a genome-scale view of DNA–protein
interactions. In ChIP–seq, the DNA fragments of interest are sequenced directly instead of being hybridized
on an array. ChIP-chip and ChIP–seq experiments generate large quantities of data, and effective
computational analysis will be crucial for uncovering biological mechanisms. Genome-wide mapping of
protein–DNA interactions is essential for a full understanding of transcriptional regulation. A precise map of
binding sites for transcription factors, core transcriptional machinery and other DNA-binding proteins is
vital for deciphering the gene regulatory networks that underlie various biological processes.
Key words: Chromatin immunoprecipitation – ChIPchip and microarray – ChIPSeq - transcription factor -
protein−DNA interaction.
Résumé . L’immunoprécipitation de la chromatine, appelée également « ChIP » (pour « Chromatin
ImmunoPrecipitation ») est une technique qui permet d’identifier les sites de liaison d’un facteur de
transcription sur l’ADN in situ. Le ChIP consiste à purifier des complexes ADN-protéines liés après un
traitement par du formaldéhyde. Après fixation de la chromatine (de l’ADN et des protéines qui lui sont
associées) par un traitement au formaldéhyde, l’ADN est clivé en fragments de 200 à 600 paires de bases par
sonication. La protéine d’intérêt, un facteur de transcription par exemple, est ensuite immunoprécipitée et
l’ADN auquel elle était liée est récupéré, purifié et amplifié par PCR avec des amorces choisies,
complémentaires des régions promotrices d’intérêt. L’apparition des puces à haute densité ou des nouvelles
techniques de séquençage ont permis de cartographier à l’échelle du génome les sites d’interaction entre
l’ADN et des protéines régulant l’expression des gènes. La technologie de ChIP sur puces à ADN (ChIP-on-
chip) ou par séquençage massif (ChIP-seq) récemment proposée offre des perspectives intéressantes dans le
domaine de la régulation génique. Ces méthodologies reposent sur des analyses 'Genome-wide' qui demande
des traitements bioinformatiques multiples, pas toujours bien définis (e.g. pour ChIP-seq).
Mots clés : Immunoprécipitation de la chromatine – ChIPchip –Puce ADN- ChIPSeq – Facteurs de
transcriptions – Interaction ADN protéine.
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COMMUNICATIONS AFFICHEES
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P1
Action du peroxynitrite dans les altérations cellulaires et tissulaires induites par
l’antigène S, lors des uveites.
Lahmar-Belguendouz K1, 2
, Belguendouz H 1., et Touil- Boukoffa C
1.
1 : Equipe Cytokines et NO Synthases-LBCM- F.S.B-U.S.T.H.B.
2 : Département des sciences de la nature, Université de Tebessa.
RESUME
L’uvéite est un terme englobant une multitude de maladies inflammatoires de la tunique uvéale de l’œil
pouvant conduire à la cécité. Elle peut être d’étiologie auto-immune. La protéine majeure impliquée dans l’initiation
des uvéites auto-immunes est l’antigène S (Ag-S), localisé essentiellement dans les photorécepteurs. Des travaux
précédents réalisés par notre équipe, ont montré que les explants rétiniens sains mis en culture en présence de l’Ag-S
subissaient des altérations cellulaires et structurales et produisaient du monoxyde d’azote (NO) quantifié à travers ses
dérivés à savoir les nitrites et les nitrates. Le peroxynitrite, une autre molécule dérivée du NO résultant de la réaction
de ce dernier avec l’O2- au niveau des sites inflammatoires, est connue pour sa toxicité cellulaire et tissulaire au cours
de différentes pathologies.
Afin de situer l’effet du peroxynitrite et de l’antigène S au niveau des différentes tuniques oculaires, des
explants oculaires bovins sains ont été mis en culture en présence d’un donneur de peroxynitrite (SIN-1) à des
concentrations croissantes de 100-500 µM pendant 24h et 48h et d’autres explants en présence de l’Ag-S à une
concentration de 10 µg et 20 µg /ml pendant la même durée. Les résultats obtenus ont montré de hautes similitudes
entre les altérations induites par l’Ag-S et celles induites par le peroxynitrite en particulier, au niveau de la cornée, la
rétine et la choroïde.
A travers nos résultats, Il apparaît que le peroxynitrite joue un rôle déterminant dans la genèse des lésions
symptomatiques de l’uvéite et pourrait être utilisé comme bio-marqueur de l’évolution de la maladie.
Mots clés : uvéite, monoxyde d’azote, peroxynitrite.
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P2
In vitro “Nitric Oxide and Steroid Hormones” relationship during Behçet Disease: Role
in patients physiopathological status
M.L. Ahmedi1, H. Belguendouz
1, D. Messaoudene
1, K. Lahmar- Belguendouz
1, D. Hartani
2, C. Touil-
Boukoffa1
1'cytokines and NO Synthases' team, LBCM- FSB,-USTHB, Algiers, Algeria,
2Clinique d'ophtalmologie,
CHU Mustapha Bacha, Algiers, Algeria
RESUME
Behçet disease (BD) is a systemic chronic inflammatory disorder that is considered as vasculitis. It is
characterized by significant elevation in nitric oxide (NO) levels both in vivo and in vitro. The sex ratio
(male to female) is 3/1. However, despite of this fact, literature didn't report any differences in sexual
hormones levels between patients with BD and control subjects. In order to investigate in vivo steroid
hormones levels and their effect on NO production during BD, 85 patients with BD (66 men, 19 women)
and 35 control subjects (20 men, 15 women) were included in this study. Plasma steroid hormones
(progesterone, testosterone and cortisol) were evaluated by immunoassay (Biomérieux, France). PBMC
were cultured in RPMI 1640 with 5% FBS, 2 mM of glutamine in presence of either testosterone (1ng/ml),
oestradiol (40pg/ml) or cortisol (100ng/ml). NO levels in cultures supernatants were estimated by modified
Griess method. We found that Testosterone and progesterone levels had no significant differences between
patients and controls (p=0.23, p=0.52). In contrast, cortisol showed significant diminution during BD when
compared to controls (p< 0.01). The cellular response to oestradiol and cortisol showed a significant
reduction in NO rates (p< 0.05) while testosterone significantly increased its production (p< 0.05). In
conclusion, our results showed normal sex hormones levels. However, their effect on NO production
suggests that BD physiopathology is more reliable to cellular response. Reduced corticosteroid production
during BD may contribute to the exacerbated inflammatory status as cortisol inhibited NO formation.
Mots clés: Steroid Hormons, Nitric Oxide, Behcet Disease
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P3
Mise en place d’un modèle d’uvéite auto-immune expérimentale induite par l’IRBP :
Implication du monoxyde d’azote
Arroul-Lammali Amina, Djeraba Zineb, Belguendouz Houda, Messaoudène Djamel
& Touil-Boukoffa Chafia. Equipe « Cytokines et NOSynthases » FSB-USTHB
RESUME
L’uvéite est une inflammation intraoculaire formant l’une des manifestations cliniques les plus sévères de la maladie
de Behçet. L’IRBP, auto-antigène rétinien, a été impliqué dans la physiopathologie de cette affection. Plusieurs
travaux ont démontré une production élevée de monoxyde d'azote (NO) au cours de la pathologie. Nous avons donc
été amenés à la mise au point d’un modèle expérimental, afin de vérifier l'implication de cette bio-molécule.
A cet effet, nous avons induit l’uvéite auto-immune expérimentale (UAE) chez le rat Wistar par l’IRBP. La production
du NO in vivo dans les plasmas, in vitro au niveau des surnageants de culture des splénocytes et localement, au niveau
des yeux de rats Wistar immunisés par l’IRBP a également fait l’objet de notre étude.
Nos résultats montrent que la souche Wistar utilisée dans les expérimentations est sensible à l’induction de l’UAE par
l’IRBP. En effet, une inflammation intraoculaire ainsi qu’une désorganisation de l’architecture de la rétine ont été
observées. La production du NO in vivo, in vitro et localement a montré une augmentation significative en
comparaison avec les rats témoins et contrôle (CFA+PBS). De plus, le pic de production du NO précède celui de
l’apparition de l’uvéite et des désordres histopathologiques au niveau des rétines.
Nos résultats suggèrent l’implication du NO durant les phases précoce et aigue de l’UAE et le situent en tant que
marqueur clé de mauvais pronostic dans le suivi des manifestations inflammatoires observées lors de l’atteinte
oculaire associée à la maladie de Behçet.
Mots clés : Uvéite auto-immune expérimentale/ rat Wistar/ IRBP/ monoxyde d’azote.
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P4
Mise en place d’un modèle d’uvéite auto-immune expérimentale induite par l’antigène-
S : Implication du Monoxyde d’azote.
Djeraba, Z., Arroul-Lammali, A., Belguendouz, H., Messaoudene, D., Touil-Boukoffa, C
Equipe ‘’ Cytokines et NO Synthase’’. LBCM-FSB-USTHB.
RESUME
L’uvéite, constitue l’une des manifestations les plus sévères du syndrome de Behçet. L’Ag S, protéine
rétinienne, a été fortement incriminée dans la physiopathologie de cette affection. Elle est utilisée chez différents
modèles expérimentaux, afin d’induire l’uvéite auto-immune expérimentale (UAE), modèle de l’uvéite humaine.
La production du monoxyde d’azote (NO) au cours de l’UAE a été fortement discutée par plusieurs travaux chez
l’homme et sur un modèle animal utilisant le rat Lewis.
Nos objectifs ont porté sur la mise au point d’un modèle expérimental d’uvéite Behçet induite chez le rat Wistar en
utilisant comme effecteur l’Ag S. L’évolution de la production in vivo et in situ du NO a été poursuivie sur ce modèle
établi au préalable. Une étude histologique du tissu neuro-rétinien a été réalisée en parallèle afin d’y localiser les effets
délétères de l’Ag S et sa relation avec la production du NO. Nos résultats ont montré une augmentation significative
des taux du NO dans les plasmas et les homogénats des yeux des rats Wistar traités avec l’Ag S ; avec une différence
de production selon les phases cliniques de l’UAE. L’Ag S a induit des effets délétères notables sur le tissu neuro-
rétinien des rats Wistar traités et la couche des photorécepteurs semble en être la plus sensible.
Une production maximale de NO a été observée durant la phase précédant les altérations touchant le tissu neuro-
rétinien. Le NO pourrait constituer un bio-marqueur de mauvais pronostic au cours de cette affection. Ainsi, le stress
oxydatif, pourrait être considéré comme l’étape pathologique initiale menant à la destruction des photorécepteurs.
Mots clés : l’uvéite auto-immune expérimentale, Ag S, le monoxyde d’azote, destruction des photorécepteurs.
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P5
Analyse de l’expression des protéines symplekine et -catenine impliquées dans les
jonctions urothéliales tumorales.
Aslane M* ., Baz H. Laboratoire de biologie physiologie cellulaire et moléculaire. Ecole Normale Supérieure (ENS de Kouba, Alger- Algérie).
* Département de biologie moléculaire et cellulaire-Université de Mouloud Mammeri (Tizi-Ouzou- Algérie). [email protected]
RESUME
La symplekine et la -catenine sont des protéines localisées au niveau des jonctions cellulaire, font
partie d’un complexe protéique cytoplasmique lié à la surface interne des jonctions, ces deux protéines
participent à l’échafaudage par leur liaison au cytosquelette.
Pendant la prolifération cellulaire la symplekine et la -catenine ont été localisées dans le noyau liées à
des complexes de protéines nucléaires intervenant dans la régulation de la transcription génétique.
La progression tumorale est marquée par une évolution du degré de l’indifférenciation cellulaire, qui
est le témoin d’une désorganisation remarquable des jonctions intercellulaires et une perte de l’ancrage à la
matrice cellulaire.
Nous nous somme posé la question, si l’altération au niveau des jonctions cellulaires pendant la
progression des carcinomes urothéliaux s’exprime par une variation d’expression de la symplekine et de
la -catenine.
Notre étude a consisté à analyser l’expression de la symplekine et de la -catenine par électrophorèse
sur gèle de polyacrilamide SDS-page, réalisée sur des biopsies humaines de tumeurs de la vessie de
différents grades de malignité déterminés par une coloration à l’Hématoxyline éosine.
Nos résultats ont montré que les taux d’expression de la symplekine et de la -catenine dans le
cytoplasme diminuent progressivement en fonction de l’évolution du grade tumorale.
Ceci nous a permis de suggérer que ces deux protéines se détachent des jonctions et migrent vers le
noyau afin d’activer la prolifération cellulaire. La symplekine et la -catenine peuvent servir de facteurs
pronostiques d’évolution tumorale et cibles pour une thérapie génique.
Mots clés : symplekine, -catenine, cancers urothéliaux, jonction cellulaire, indifférenciation cellulaire.
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APPORT DE LA RADIOBIOLOGIE DANS LA THERAPIE ANTIVENIMEUSE OPHIDIENNE
Bennacef-Heffar N., Boukhalfa-Abib H., Oussedik-Oumehdi H et Laraba-Djebari F Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la Technologie
« Houari Boumédienne » Bab Ezzouar, Alger, Algérie.
Laboratoire de Recherche et de Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.
E-mail: [email protected] - Fax: 00213 21 91 72 21
Résumé
La toxicité des venins de serpents constitue une difficulté majeure dans la préparation des sérums
anti-vipérins efficaces pour le traitement des envenimations ophidiennes. L’irradiation gamma a été
appliquée pour améliorer la qualité des immun-sérums.
Les venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina ont été irradiés en utilisant deux doses de
rayons gamma (1 et 2 kGy) émises par le Cobalt (60
Co). Après irradiation, la toxicité de ces venins est
atténuée jusqu’à 10 DL50.
La filtration moléculaire des différents venins irradiés a permis d’obtenir des profils
chromatographiques totalement modifiés par rapport à ceux des venins natifs. De même, l'analyse
électrophorétique des venins natifs et irradiés par SDS-PAGE, révèle une hétérogénéité dans
l'électrophorégramme des échantillons irradiés.
L’étude biochimique de l’activité protéolytique des venins de Cerastes cerastes et de Vipera
lebetina, a révélé une diminution de cette activité enzymatique. Cette réduction est dose-dépendante. En
outre, l’activité phospholipasique du venin de Vipera lebetina s’est révélée radiosensible car totalement
abolie après l’application de la dose de 2 kGy, alors que cette activité est radiorésistante pour le venin de
Cerastes cerastes aux doses appliquées.
D’autre part, l’irradiation gamma semble préserver les propriétés immunologiques des molécules des
venins de serpents. En effet, l’immunisation de lapins avec les différents venins détoxifiés (1 et 2 kGy) a
permis d’obtenir des immun-sérums ayant des titres en anticorps élevés et une meilleure neutralisation de la
toxicité des venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina. De plus, les résultats du Western blot ont
révélé que les anticorps anti-venins détoxifiés ont une meilleure immunoréactivité avec les différents
constituants des venins natifs comparés à ceux des anti-venins natifs.
Mots clés : Venin, Viperidae, Irradiation gamma, Détoxification, Immunogénicité.
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Détoxification des contituants du venin d’Androctonus australis hector par irradiation
gamma : Approche Immunoprotective
Boussag-Abib Lila et Laraba-Djebari Fatima Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, USTHB.
Laboratoire de Recherche et Développement sur les Venins Institut Pasteur d’Algérie.
Courriel: [email protected]
RESUME
Le développement d’une protection efficace et sélective contre la toxicité des venins de scorpion est d’une très
grande importance clinique. Il est donc nécessaire de développer des techniques qui pourraient réduire la toxicité des
venins tout en gardant leur pouvoir immunogénique.
L’application des rayonnements ionisants gamma a été employé avec succès pour détoxifier le venin
d’Androctonus australis hector toute en préservant ses propriétés immunogéniques et antigéniques (Abib et Laraba-
Djebari, 2003).
Ces caractéristiques nouvelles des composants du venin d’Aah après irradiation, permet d’ouvrir des
perspectives dans les essais d’immunoprotection. Des expérimentations ont été réalisées sur des animaux
préalablement immunisés avec le venin ou sa fraction toxique Ftox-G50 irradiés, après 1, 3 et 6 mois ces animaux sont
envenimées avec le venin natif. Un mois après l’immunisation avec les deux immunogènes non toxiques, il a été
observé une protection quasi-totale des animaux contre des doses de 3 DL50. Ce pouvoir protecteur des animaux
persiste à 3 mois et à 6 mois après immunisation avec le venin irradié et ce jusqu’à une dose de 5 DL50 et 4 DL50 du
venin natif respectivement.
Une meilleure protection est observée lorsque les animaux sont immunisés avec la fraction Ftox-G50 ou le
pouvoir protecteur atteint des doses de 4 DL50, 10 DL50 et 8 DL50 respectivement à 1, 3 et à 6 mois après
immunisation.
L’immunoprotection observée est probablement due à la présence et à la persistance des anticorps
neutralisants circulants dans l’organisme des animaux immunisés.
Mots clés : Venin, Fraction Ftox-G50, Irradiation gamma, Immunoprotection.
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DETOXIFICATION DE LA TOXINE BOTULIQUE PAR RAYONNEMENT GAMMA : PRODUCTION
D’ANTICORPS
AMROUCHE Lynda, MERAD Asma-Saida et LARABA –DJEBARI Fatima
Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, faculté des sciences biologiques, USTHB.Bab Ezzouar, Alger,
Laboratoire de Recherche et développement sur les venins Institut Pasteur d’Algérie.
Centre National de Référence des anaérobies et du botulisme de l’Institut Pasteur d’Algérie.
RESUME
Les toxines botuliques se divisent en sept (07) toxinotypes (A, B, C, D E, F et G). La toxine A est la forme la plus
grave. Une confirmation rapide en cas de suspicion clinique est indispensable. Notre étude a pour but principal de
développer des techniques de production d’anticorps neutralisants. Ces anticorps seront utilisés pour le typage des
toxines et l’identification rapide des clostridies toxinogènes.
Une souche de Clostridium botulinum de Type A 453+ particulièrement virulente a été isolée et identifiée à partir du
fromage fondu.
La toxine BoNT A est produite sur bouillon TGY. Après purification partielle, cet antigène a servi à la préparation
d’immuns sérums.
Par un procédé d’irradiation gamma en utilisant la source 60
Co, la toxicité de la BoNT A est atténuée avec différentes
doses d’irradiation.
La caractérisation immunologique des immuns sérums obtenus après hyperimmunisation de lapins avec la BoNT A
irradiée à 20 KGy révèle que les propriétés immunologiques de la toxine sont résistants aux rayonnements ionisants
gamma. Ces immun-sérums présentent un titre et une capacité neutralisante plus élevés que ceux obtenus avec la
toxine native.
Mots clés : Toxine botulique A, irradiation gamma, propriétés immunologiques, immuns sérums, titre neutralisant
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Les anticorps polyvalents : Leur utilisation en Immunothérapie antiscorpionique
Mendil A., Adi-Bessalem S., Saidi H., Sami-Merah S., Hammoudi-Triki D. et Laraba-Djebari F. Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, USTHB Bab Ezzouar, Alger, Algérie.
Laboratoire de Recherche et Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.
RESUME
En Algérie, l’immun sérum produit par l’Institut Pasteur d’Algérie est un sérum monovalent dirigé contre les
molécules d’un seul venin qui est celui d’Androctonus australis hector. La difficulté d’identification du scorpion
incriminé lors d’une piqure, tant par les victimes que par le personnel de santé nous a conduit à préparer un sérum
polyvalent qui pourrait être d’indication plus large et plus performante.
Après préparation et purification d’un immun-sérum dirigé contre trois espèces endémiques (Androctonus australis
hector, Buthus occitanus tunetanus et Androctonus ameurexi), les anticorps obtenus sous forme de fragments F(ab’)2
ont été caractérisés. Leur capacité neutralisante des désordres histopathologiques et biochimiques a été évaluée.
Cet immun-sérum polyvalent semble être doué d’une importante capacité neutralisante. En effet, son
administration 30 minutes après envenimation, permet une restauration quasi-totale des structures tissulaires
altérées (myocarde, parenchyme pulmonaire et hépatique) avec normalisation des activités enzymatiques
sériques (GOT/GPT, LDH et CPK), et réduction des perturbations des paramètres métaboliques (glycémie,
urée, créatinine, cholestérol) induites par les venins.
Les résultats expérimentaux ont montré que l’immun sérum constitué de fragments F(ab')2 polyvalents
administrés dans un délai rapide (30 min) est capable de neutraliser la quasi-totalité des altérations observées
suite à l’envenimation. Il en ressort de cette étude, que cet immun-sérum pourrait être d’un grand apport
pour couvrir tous les polymorphismes existant dans notre pays.
Mots clés : Venin, Anticorps polyvalents, Immunothérapie, physiopathologie, Métabolisme.
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Formats d’anticorps : Utilisation dans un schéma thérapeutique après envenimation
expérimentale
Sami-Merah S, Adi-Bessalem S., Mendil A, Hammoudi-Triki, D et Laraba-Djebari F.
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la Technologie
« Houari Boumediene » EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algérie
Laboratoire de - Recherche et de Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.
RESUME
La taille des anticorps utilisés actuellement en immunothérapie est souvent un sujet de controverses. Leur
efficacité à neutraliser les toxines souvent de petite taille est une des difficultés majeures à surmonter dans les cas
cliniques les plus sévères.
Dans l’immunothérapie actuelle, le choix du type de fragments d´anticorps à utiliser (F(ab’)2 ou Fab) est un
grand débat autour duquel les chercheurs essayent de justifier leur utilisation en se basant sur leurs propriétés
pharmacocinétiques. les fragments F(ab’)2 diffuse légèrement dans le compartiment tissulaire et sont lentement
éliminés. Alors que les fragments Fab présentent une meilleure diffusibilité et sont rapidement éliminés. Ces
avantages et inconvénients respectifs des deux fragments laissent les producteurs et les cliniciens départagés pour le
choix de la molécule neutralisante.
L’efficacité de différentes préparations d’anticorps (fragments Fab, fragments F(ab’)2 anti-FtoxG-50 ou leur
association F(ab’)2/Fab) dans la neutralisation des effets physiopathologiques induits par le venin d´Androctonus
australis hector a été testée. L’administration de ces molécules 30 min après envenimation des animaux permet, une
neutralisation des toxines, une réparation des désordres tissulaire et métabolique avec rétablissement du processus
inflammatoire.
L’utilisation de chaque molécule d’anticorps seule permet une neutralisation des toxines circulantes au niveau
du sérum, du cœur et du pancréas. Elle permet également la neutralisation des œdèmes, des hémorragies et de la
leucocytose péritonéale ainsi qu´une normalisation des taux de l’IL-6 et des activités enzymatiques (CK, LDH et
EPO). Il semble cependant que la combinaison des deux types de fragments F(ab’)2/Fab présente une meilleure
efficacité dans la neutralisation de toutes les perturbations causées par les constituants toxiques du venin.
L´administration de l´immunothérapie sous forme d´un mélange des deux fragments Fab, F(ab´)2 pourrait être
une alternative dans le traitement des cas sévèrement envenimés par le venin d’Aah.
Mots clés : Venin, Toxine Aah II, Inflammation, Immunotherapie
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Action des cytokines Th1 (IFN-/ IL-12/) sur les scolex d’Echinococcus granulosus :
Immunosurveillance et nouvelle approche thérapeutique
Mezioug Dalila ; Amri Manel ; Bouaziz Samia & Touil-Boukoffa Chafia
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire- Faculté des Sciences Biologiques- Université des
Sciences et de la Technologie Houari Boumediene. Alger. Equipe « Cytokines et NOSynthases »
RESUME
L’ hydatidose est une affection parasitaire provoquée par le développement chez l‘homme et divers
mammifères de la forme larvaire d’Echinococcus granulosus vivant à l’état adulte dans le tube digestif de
certains mammifères carnivores essentiellement le chien. En Algérie, l’hydatidose est endémique et
représente par sa fréquence un véritable fléau. Malgré l’apparition, au cours des dernières années, de
médicaments de plus en plus actifs sur les larves de Cestodes, l’hydatidose relève encore largement de la
chirurgie. Le système immunitaire stimulé au cours des parasitoses peut être responsable de réactions
adverses ou inappropriées parfois sévères. En vue de situer l’implication du rapport Th1/Th2 dans
l’évolution de la pathologie, une analyse du profil cytokinique chez les patients atteints d’hydatidose a été
réalisée in vivo et in vitro. Les résultats obtenus montrent que les teneurs sériques en IFN-, IL-12 et IL-18
mesurées chez les patients atteints d’hydatidose à localisations fréquentes et répondant à une évolution
classique, sont nettement supérieures à celles observées chez les porteurs de localisations rares ou des
formes « à complications », chez lesquels une production substantielle en Il-4, IL-10 et IL-13 a été
détectée. Ces résultats indiquent que la production des cytokines Th1 est prédictive d’un bon pronostic, celle
des cytokines Th2 laisse envisager des formes d’évolution chronique ou des formes « à complications ». Ces
résultats ont été confortés par une étude in vitro portant sur l’étude de l’effet des cytokines Th1 : IFN-γ,
TNF-α, IL-12 et des cytokines Th2 : IL-4, IL-10 sur la viabilité des protoscolex en coculture avec les PBMC
et les monocytes/macrophages de patients hydatique. Un état de souffrance et de dégénérescence très
prononcée des protoscolex a été observé avec les cytokines Th1 associées à une production substantielle en
monoxyde d’azote. Cependant, un état de résistance des protoscolex a été observé avec les cytokines Th2.
Nos résultats suggèrent le rôle immuno protecteur des cytokines Th1 en particulier pour l’IFN-γ et l’IL-12.
Ces données suggèrent que le parasite Echinococcus granulosus induit une immunosuppression par le biais
des cytokines Th2 avec probablement l’implication d’un système de régulation via les Treg ; il est possible
que par ce mécanisme, que le parasite se protège des réponses immunitaires de l’organisme qui l’héberge. Il
échapperait ainsi aux réponses immunitaires. Ces résultats soulignent le rôle clé de l’utilisation du ratio
Th1/Th2 dans l’établissement d’un diagnostic précoce, dans l’immuno surveillance des patients et
permettent d’envisager de nouvelles stratégies thérapeutiques.
Mots clés : Hydatidose ; Cytokines ; stratégies thérapeutiques
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EFFET PREVENTIF DES ANTICORPS ANTI NEUTROPHILES
ET DE L’ACIDE CAFEIQUE
DANS UNE TOXICITE HEPATIQUE DE PIROXICAM
Z. Khiari 1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB).
Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111,
Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
Le but de cette étude est de rechercher l’effet des anticorps anti-neutrophiles de rats (IgG anti-PN) et de l’acide
caféique (CA), un inhibiteur non sélectif de la 5-lipooxygénase, sur l’infiltration des polynucléaires neutrophiles
(PN), lors d’une hépatotoxicité de piroxicam.
La toxicité a été induite par administration des doses toxiques D45 et D90 de piroxicam, un anti-inflammatoire non
stéroïdien non sélectif, à des rats blancs de souche wistar. Ce gavage est précédé ou non d'une injection
intrapéritonéale d’IgG anti-PN de rats ou d'une solution de CA 50mg/Kg. Les dosages des marqueurs du stress
oxydatif réalisés sur les homogénats hépatiques 6 heures après l’induction de la toxicité, ont montré une augmentation
de l’activité myéloperoxydase (enzyme marqueur de l’infiltration leucocytaire), et du taux de malondialdéhyde d’un
facteur de 2.5 après administration de la D45, et avec des facteurs de 7 et 5 respectivement après administration de la
D90 comparés à leurs témoins respectifs. L’activité catalase est réduite avec des facteurs de 0.62 et 0.36
respectivement avec les doses D45 et D90 de piroxicam. Le stress oxydatif s'est traduit par une stéatonécrose, une
nécrose et une importante infiltration des PN au niveau du tissu hépatique.
La neutralisation de l'infiltration des PN par les IgG anti-PN et le CA est associée à une prévention des atteintes
biochimiques et histologiques induites par les doses toxiques de piroxicam.
Mots clés : Piroxicam, hépatotoxicité, polynucléaires neutrophiles, anticorps anti-neutrophiles de rats, acide
caféique.
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Apport de la phytothérapie dans l’échinococcose murine
Samia Bouaziz, Manel Amri, Hadjira Zekri-Ariba, Dalila Mezioug & Chafia Touil-Boukoffa
Equipe : Cytokines & NO Synthases, LBCM-FSB-USTHB, Alger, Algérie
RESUME
La chirurgie reste le traitement de choix de l’hydatidose humaine malgré l’existence de quelques essais de
chimiothérapie. Nous nous sommes intéressés dans ce sens, à la recherche de nouvelles options
thérapeutiques en utilisant une stratégie phytothérapeutique . Ainsi, l’étude de l'effet de l’extrait aqueux
de graines de nigelle et de gingembre sur l’évolution d’une échinococcose expérimentale chez la souris
Mus musculus a été entreprise. Après infestation par injection intra-péritonéale de 2000 protscolexes /
souris, le traitement à été administré à une concentration de 1mg/ml. Après 7 mois d’infestation, une
diminution significative du taux d'enkystement a été notée chez les groupes traités. Nous avons observé
une régression importante après phytothérapie, la moyenne calculée du taux d’enkystement chez les
groupes traités est respectivement de 5 et 4. A l’inverse, la moyenne d’enkystement enregistrée chez les
témoins positifs est de 12,4. Notre étude montre le potentiel scolicidal du gingembre et des graines de
nigelle in vivo. Toutefois, l’identification des composés responsables de l’effet scolicidal apparait
nécessaire.
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Action Potentielle anti-Diabétique de Crataegus azarolus
Zidi Sourour1 & Henchiri Chérifa
1
Laboratoire de Biochimie, Département de Biochimie,
Université Badji Mokhtar, Annaba
RESUME
Crataegus azarolus est une plante appartenant à la famille des Rosacées, traditionnellement utilisée aussi
bien dans les pays arabes que dans la région d’El Tarf à l’est de l’Algérie, pour le traitement du diabète.
Des rats Wistar albinos rendus diabétiques par injection intra-péritonéale d’Alloxane et recevant un
régime standard ont été traités avec l’extrait aqueux obtenu par infusion des feuilles aux doses de 150(d1) et
300 mg/kg (d2) et par la metformine (28 mg/kg de poids corporel), deux fois par jour. Le traitement a
commencé 72 heures après injection de l’Alloxane et la confirmation de l’hyperglycémie.
Les résultats obtenus relatifs à la mesure de la glycémie à jeun, avant et après sacrifice ont révélé
qu’après un traitement de 12 jours, la dose d1 a engendré un effet correcteur du diabète supérieur à celui de
la dose d2 et de la metformine. Une réduction significative des glycémies mesurées ( p<0, 001) et de
certains paramètres :lipides totaux (p<0,01), triglycérides(p<0,05), cholestérol total(p<0,01), LDL(p<0,01),
urée(p<0,01) et créatinine(p<0,01) a été observée. Parallèlement une augmentation non significative du
taux des HDL chez les individus diabétiques traités a été relevée. L’étude histologique du pancréas des rats
diabétiques a montré que Crataegus azarolus aux deux doses de l'extrait d1 et d2 a exercé une restauration
des îlots de Langerhans lésés au préalable par l'effet de l’Alloxane. La présence résiduelle de l’insuline dans
le sang a confirmé cet effet. L’étude parallèle phytochimique de l’extrait a été entreprise et a révélé la
présence de principes actifs tels que les flavonoïdes, les triterpènes et les saponosides qui pourraient être à
l’origine de l’effet antidiabétique observé.
Les résultats obtenus suggèrent le rôle potentiel thérapeutique de Crataegus azarolus
.
Mots clés : Diabète, Plantes Médicinales, Phytothérapie, Alloxane, Antidiabétiques,
Pharmacognosie.
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CYTOTOXICITE INDUITE PAR LE VENIN D’ANDROCTONUS AUSTRALIS HECTOR
SES TOXINES PURIFIEES
Bekkari Nadjia, Hammoudi-Triki Djelila, *Martin-Eauclaire Marie France et **Laraba-Djebari Fatima
- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la
Technologie « Houari Boumediene » EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algérie
- Laboratoire de - Recherche et de Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie. 3 CNRS UMR3132 CRN2M, IFR Jean-Roche, Université de la Méditerranée, Faculté de Médecine Nord, Bd Pierre Dramard,
13916, Marseille, Cedex 20, France
**Corresponding author: E-mail: [email protected]
RESUME
La toxicité de venin de scorpion, est liée aux neurotoxines qui affectent le fonctionnement des canaux ioniques
des cellules excitables et induisent une libération massive de neurotransmetteurs. Les symptômes associés à ces
perturbations sont variables allant de l’hyper, hypothermie, défaillances cardiaques et évolution dans les cas sévères
avec un œdème pulmonaire. Les symptômes sont liés à un syndrome inflammatoire
Le venin d’Androctonus australis hector (AaH) induit des perturbations du métabolisme général avec des
augmentations sériques des médiateurs marqueurs de la cytotoxicité et de l’inflammation.
L’étude de l’implication du venin et de ses composants toxiques, fraction FtoxG50 et toxines purifiées, AaH I
et AaH II dans l’induction de l’activité lytique du complément et l’augmentation des taux sériques des cytokines a été
entreprise pour expliquer les mécanismes de cette pathogénèse afin de proposer une thérapie symptomatique qui serait
complémentaire à l’immunothérapie.
Le système du complément sérique est activé par le venin d’AaH, sa fraction FtoxG50 et ses toxines AahI et
AaHII en deux phases, la première phase d’activation est atteinte avec un taux maximum à 3 H, la deuxième phase
apparait à 24 H. Cette activité est moins importante au niveau pulmonaire, le premier pic est précoce et apparait à 1 H,
le second étant plus tardif (48 H). Au niveau hépatique, l’activité lytique apparait en une seule phase retardée.
Cependant, l’augmentation du taux des cytokines, pro-inflammatoires (IL1 et 6), anti-inflammatoire (IL10), de
la molécule d’adhésion (ICAM) au niveau hépatique est accentuée sous l’effet de la toxine AaHII.
L’activité lytique du complément est inhibée par un antagoniste des récepteurs muscarinique de l’acétyle
choline de (l’atropine), aucun effet n’est observé avec un antagoniste des récepteurs β1et β2 adrénergiques (le
propranolol). Ces résultats pourraient nous être utiles pour comprendre les mécanismes par lesquels la cytotoxicité est
induite par le venin ou ses composants moléculaires.
Mots Clés : Venin, Toxines, Système du Complément, Inflammation, traitements.
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Biodisponibilité et rôle hépato-protecteur du lycopène chez le Rat Wistar.
Yefsah-Idres A.1, 2
, Benazzoug Y.2, Othmani K.
2, Djenane N.
3, Sifer R.
3
1. Institut National Agronomique, Alger (Algérie).
2. BRMEC, Laboratoire BCM (FCB/USTHB), Alger (Algérie)
3. Laboratoire de Biologie, CHU de Tizi-Ouzou (Algérie)
RESUME
Le rôle des espèces réactives de l’oxygène (ROS) et les dommages des biomolécules sont les axes
principaux de la recherche actuelle liée aux maladies chroniques. Plusieurs auteurs ont montré le rôle des
antioxydants, en particulier les caroténoïdes, dans la protection de l’organisme agissant comme agents
inactivant les ROS.
Dans ce travail, nous nous sommes intéressés à la biodisponibilité et au rôle du lycopène au niveau
hépatique. L’expérimentation a porté sur des rats Wistar répartis en 4 lots.
Le protocole expérimental comporte la détermination du poids corporel et de l’indice hépato-somatique
(IHS), le dosage du lycopène sérique et tissulaire (par HPLC), une étude histologique (fixation au Bouin
aqueux, coloration à l’hématoxyline-éosine) et un dosage sérique de certaines enzymes du bilan hépatique.
Nos résultats ne montrent pas de variations importantes du poids corporel mais la détermination de l’IHS a
mis en évidence une hypertrophie du foie. Le dosage du lycopène au niveau hépatique a été prouvé.
L’étude histologique a permis d’observes une désorganisation de la structure du parenchyme hépatique et
des lésions de type stéatose chez les rats intoxiqués au CCl4. Les observations effectuées montrent que
l’administration de lycopène réduit ces altérations. Le dosage de certaines enzymes hépatiques confirme les
altérations cellulaires et tissulaires observées avec le CCl4. Une réduction du taux de ces enzymes est notée
chez les rats intoxiqués et traités au lycopène.
En conclusion, cette étude met en exergue d’une part la biodisponibilité du lycopène et d’autre part son rôle
hépato-protecteur.
Mots clés : Lycopène -Biodisponibilité -Altérations hépatiques -Rats.
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Hyperhomocystéinémie et processus athéroscléreux chez Psammomys obesus
Zerrouk F.1 ; Hamdis N.
1 ; Othmani-Mecif K.
1 ; Khedis L.
1 ; Chaouad B.
1 ; Ghoul A.
1 ; Rezkallah N.
2 ;
Neggazi S. 2
; Boumaza S.2
; Berdja S2. ; Aouichat-Bouguerra S.
2 ; Cherifi M.
3 ; Benazzoug Y.
1
1BR. MEC ;
2PPCM. FSB/USTHB. BEZ. Alger ;
3Lab. Bioch. Parnet .HDey Alger
RESUME
Actuellement, il est bien établi que l’hyperhomocystéinémie modérée est un facteur de risque des maladies
cardiovasculaires dont l’athérosclérose.
L’objectif de ce travail, est de mettre en évidence les troubles biochimiques et histologiques liés à une surcharge en
méthionine chez le rat des sables, Psammomys obesus.
La méthionine est administrée par injection intra-péritonéale à raison de 70 mg/Kg de poids corporel / jour pendant 6
mois.
Cette administration semble affecter l’ensemble des paramètres biochimiques plasmatiques. Par ailleurs,
l’homocystéinémie augmente d’un facteur 7,6 au terme de l’expérimentation. L’étude biochimique est complétée par
une élecrophorèse horizontale des lipoprotéines plasmatiques de Psammomys obesus soumis à la méthionine pendant
3 mois. L’analyse des lipidogrammes met en évidence un déséquilibre des fractions lipoprotéiques marqué par une
importante diminution de 70% des HDL et une augmentation de 35% des VLDL-LDL associée à l’apparition de la
lipoprotéine (a).
Les changements structuraux révélés par les techniques histologiques et histochimiques appropriées montrent que
l’hyperhomocystéinémie altère l’organisation et la structure des différentes couches du cœur et de l’aorte. Ces
altérations sont représentées par des agrégations sanguines, une hypertrophie de l’endothélium, une modification de la
composition de la matrice extracellulaire marquée par une accumulation de collagènes et de protéoglycannes, et une
désorganisation de la trame élastique aortique. Un épaississement de l’épicarde et de l’adventice est observé.
Nos résultats montrent que les altérations engendrées par une hyperhomocystéinémie perturbent non seulement la
biochimie plasmatique mais également et fortement la structure cellulaire et tissulaire de la paroi cardiaque et
vasculaire.
Mots-clés : hyperhomocystéinémie, athérosclérose, Psammomys.
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Corrélation hyperhomocystéinémie - désordres lipidiques plasmatiques et tissulaires,
chez le rat Wistar Rattus norvegicus.
Ghoul A1. ; Fernane A
1. ; Taghlit A
1. ; Othmani K
1. ; Chaouad B
1. ; Zerrouk F
1. ; Cherifi M
3.; Griene L
4. ;
Yargui L 5. ;
Aouichat-Bouguerra S
2. ; Benazzoug Y
1.
1. Biochimie & remodelage de la matrice extracellulaire. LBCM. FSB/USTHB BP32 El Alia. Bab Ezzouar.16111. Alger. Algérie
2. Physiopathologie cellulaire & moléculaire. LBPO. FSB/USTHB BP32 El Alia. Bab Ezzouar.16111. Alger. Algérie
3. Laboratoire de biochimie Hôpital Parnet. Hussein Dey.Alger.
4. Laboratoire d’endocrinologie.CPMC .Hôpital Mustapha. Alger.
5. Laboratoire central de l’hôpital Mustapha Bacha. Alger
RESUME
Plusieurs mécanismes ont été avancés, dont la théorie lipidique, pour expliquer les propriétés athérogènes de
l’homocystéine (McCully 1969). Nous avons précédemment montré que l’hyperhomocystéinémie constituait un f
acteur de risque des maladies cardiovasculaires.
Nous nous sommes proposé d’établir la corrélation hyperhomocystéinémie - statut lipidique.
Les rats Wistar sont répartis en un lot témoin et un lot soumis à une administration de méthionine à raison de 200
mg/Kg de poids corporel / jour pendant 6 mois.
Le suivi des animaux a comporté une pesée hebdomadaire et des ponctions sanguines mensuelles pour le dosage de
l’homocystéine (méthode FPIA), du cholestérol total et des triglycérides (méthode enzymatique colorimétrique).
Les lipoprotéines plasmatiques ont fait l’objet d’une analyse grâce à une électrophorèse horizontale sur gel d’agarose.
En fin d’expérimentation, les rats sont sacrifiés, le testicule, objet de ce travail, est prélevé, rapidement pesé et
immergé dans le Folch pour évaluer les lipides totaux.
Nos résultats montrent, que l’administration chronique de méthionine pendant 6 mois engendre chez le rat Wistar, une
hyperhomocystéinémie modérée. Celle-ci ne semble pas affecter le poids corporel ainsi que le poids moyen du
testicule.
Nous avons enregistré des fluctuations similaires des lipides plasmatiques (cholestérol total et triglycérides) dans les 2
groupes de rats. Par contre l’analyse des lipoprotéines plasmatiques met en évidence chez les rats expérimentés, une
diminution des particules protectrices associée à une augmentation des particules athérogènes.
En conclusion, nos résultats montreraient que l’athérogénicité de l’homocystéine serait médiée en partie par la
détérioration du statut lipidique. Mots clés : Athérosclérose–Hyperhomocytéinémie-Lipides
Folch J.; Lees M and Stanly G.H.S. (1957). A simple method for the isolation on purification of total lipids from animal tissues. J. Biol. Chem., 226: 497-509.
McCully K.S. (1969). Vascular pathology of homocysteinemia: implications for the pathogenesis of arteriosclerosis. Am. J. Pathol., 56 : 111–128.
Richmond W.(1973). Preparation and proprieties of cholesterol oxidase from Nocardia sp.And its application to the enzymatic assay of total cholesterol in serum. Clin. Chem., 19 : 1350 – 1356.
Yong D. L.; Pestaner L.; Gillerman V. (1975). Effects of drugs on clinical laboratory tests.Clin. Chem., 21: 1D-432D
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HYPERHOMOCYSTEINEMIE, SYSTEME CARDIOVASCULAIRE, GESTATION
K. Othmani-Mecif 1
, L. Khedis 1, F. Zerrouk
1, B. Chaouad
1, A. Ghoul
1, A. Fernane
1, A.Taghlit
1, A.
Yargui 2, S. Aouichat
3, Y. Benazzoug
1.
1. MEC, BCM, FSB ;
2 Lab. Biochimie, CHU M. Bacha ;
3PCM, LBPO, FSB /USTHB, Alger
RESUME
L’hyperhomocystéinémie induite par surcharge en méthionine constitue un facteur de risque de maladies
cardiovasculaires. Au cours de la gestation, les vaisseaux sanguins sont soumis aux stress physique et
biochimique. Peu de travaux portent sur la triade homocystéine-vaisseaux sanguins- gestation. Notre travail
évalue l’influence de l’état gestationnel sur le système cardiovasculaire éprouvé par
l’hyperhomocystéinémie induite.
L’expérimentation consiste à administrer de la Met (500 mg/jour) pendant 3 mois ; quatre lots de lapins
adultes (n=8 chacun) sont constitués : lot témoins non gestantes (TNG), lot témoins gestantes (TG), lot non
gestantes avec Met (NGM) et lot gestantes avec Met (GM). L’excès de Met élève la teneur en homocystéine
de 1000 % pour le lot NGM et de 12% pour les GM. Le rapport des lipoprotéines β/ α atteint la valeur 3,07
vs 2,17 sous l’effet de la Met (NGM) (p<0,01) alors qu’il est réduit chez les GM (2,44 vs 2,37).
La Met en surcharge réduit l’activité de la lactate DHase et de la phosphatase acide chez les NGM, la teneur
lipidique chez les GM vs TG (90 ± 31 µg/mg vs 190 ± 70 µg/mg) (p<0,05), les triglycérides accumulés au
cours de la gestation et la teneur en cholestérol aortique pour ce lot (GM) (p<0,05). Par contre, l’excès de
Met provoque chez les NGM, une légère augmentation des triglycérides, une modification de la structure
aortique au niveau de l’intima et de la média (néointima). Une importante désorganisation du tissu cardiaque
est observée, avec apparition d’espaces entre les cardiomyocytes et fibrose interstitielle.
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Hyperhomocystéinémie induite par une hypothyroïdie et processus athéroscléreux
chez Psammomys obesus
Chaouad B1, Neggazi S
2, Sahraoui A
2, Zerrouk F
1, Ghoul A
1, Othmani-Mecif K
1, Cherifi M
3, Griene
L4, Aouichat-Bouguerra S
2, Benazzoug Y
1
1 BRMEC et 2 PPCM, FSB/USTHB Bab Ezzouar, Alger.
3 Lab. Bioch, Hôpital Parnet, Alger.
4 Hormonologie CPMC. CHU Mustapha Alger.
RESUME
L'hypothyroïdie est un facteur de risque des maladies cardiovasculaires associée à une hyperhomocystéinémie et
hypercholestérolémie.
Objectif : Nous avons étudié la relation hypothyroïdie-hyperhomocystéinémie-et processus athéroscléreux chez le Rat
des sables (Psammomys obesus).
Méthodes : Les Rats des sables sont répartis en un lot témoin nourri de plantes halophiles et un lot traité recevant le
même régime alimentaire associé à une administration orale de carbimazole (0,03%) pendant 6 mois. L’ensemble des
animaux a fait l’objet de prélèvements sanguins en vue du dosage de certains paramètres biochimiques plasmatiques
(cholestérol, homocystéine), d’hormones thyroïdiennes et de l’analyse des lipoprotéines par électrophorèse
horizontale. Les techniques histologiques réalisées en fin d’expérimentation ont permis une étude histo-
morphométrique de la paroi aortique de Psammomys obesus.
Résultats : Nos résultats montrent chez les animaux hyperhomocystéinémiques, une diminution de la T3 et T4, une
hyperhomocystéinémie et une hypercholestérolémie, une diminution des HDL associée à une augmentation des LDL-
VLDL.
L’analyse histologique de l’aorte a mis en évidence chez les rats des sables hyperhomocystéinémiques, une importante
agrégation sanguine et des altérations cellulaires (changement d’orientation des cellules musculaires lisses,
prolifération des fibroblastes adventiciels). La composition de la matrice extracellulaire est modifiée par une
accumulation de collagènes et de protéoglycannes, une désorganisation et dégradation de la trame élastique.
L’ensemble des altérations observées caractérise l’installation d’un processus athéroscléreux.
Conclusion : Les résultats obtenus montrent que l’hypothyroïdie constitue un facteur de risque des maladies
cardiovasculaires chez le rat des sables, Psammomys obesus, via une hyperhomocystéinémie et une
hypercholestérolémie.
Mots clés : Athérosclérose-Hyperhomocystéinémie-Hypothyroïdie
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MODULATION PARTIELLE PAR L’ASPIRINE DU STRESS OXYDATIF ET DE
LA TOXICITE MITOCHONDRIALE
DANS UN MODELE DE DEFAILLANCE CARDIAQUE A L’ISOPRENALINE
M. Izem-Meziane1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
Le stress oxydatif et le dysfonctionnement mitochondrial sont impliqués dans la pathogenèse des maladies
cardiovasculaires. L'aspirine reste l’anti-agrégant plaquettaire le plus utilisé en clinique.
Nous avons étudié l’effet de l’aspirine sur un modèle expérimental de défaillance myocardique (Infarctus du
myocarde) induite par l’isoprenaline chez le rat Wistar.
Les rats reçoivent 30 mg/kg d’aspirine par voie orale une heure avant l’administration de 150 mg/kg d’isoprénaline
par voie sous cutanée. Les ventricules gauche (VG) sont prélevés, les dosages de l’activité de la myeloperoxydase
(MPO), du monoxyde d’azote (NO) et du malondialdéhyde (MDA), de l’activité catalase et du taux de GSH ont été
mesurés.
Les taux de MDA et de NO et l’activité MPO doublent chez les rats traités par l’isoprenaline comparés aux contrôles.
Ils sont respectivement de 2,17±0,15 vs 0,94±0,05 nmoles/ mg de protéines ; 11,32±0,82 vs 5,58±0,31 μM H2O2/min/
mg de protéines et 13,91±1,34 vs 6,77 ± 0,56 μM/mg de protéines.
Le taux de GSH et de catalase chez les rats traités par l’isoprenaline diminue comparés au témoins avec
respectivement 24,74±1,11 vs 15,44±0,33 nmoles/mg de protéines et 21,96±0,84 vs 10,25±0,71 U /mg de prot pour la
catalase).
Le stress oxydatif implique un dysfonctionnement mitochondrial, traduit par une augmentation de la perméabilité
mitochondriale comparativement aux témoins (0,10±0,01 vs 0,026±0,003 UDO / mg de protéines/5min).
L’asprine 30 mg/kg contrôle partiellement le stress oxydatif en réduisant l’activité MPO et le gonflement
mitochondrial de de près de 50%/ au traité isoprénaline et
Mots clés : Aspirine, isoprenaline, infarctus du myocarde, mitochondrie, stress oxydatif.
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LA PRODUCTION D’ANIONS SUPEROXYDE ET DE MONOXYDE D’AZOTE
PAR LES POLYNUCLEAIRES NEUTROPHILES DE SOURIS BALB/c EST
MODULEE DIFFEREMMENT PAR LEISHMANIA INFANTUM LEM 75
N. Tounsi1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences
et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
Le contrôle efficace de l’infestation leishmanienne repose sur une production adaptée des espèces réactives
de l’oxygène (ROS) et de l’azote par les Leucocytes neutrophiles et macrophages.
Les polynucléaires neutrophiles (PN) inflammatoires de souris BALB/c sont obtenus par après une
peritonite au thioglycollate de sodium 3%. Leur activité bactéricide a été mesurée en présence de
Leishmania infantum, LEM75 (Laboratoire National de Référence des Leishmanies, Institut Pasteur, Alger),
par la methode de réduction du cytochrome C exogène par les anions O2- à 550nm et le dosage des nitrites
(NO) dans les surnageants de culture (Méthode de Griess).
Les résultats montrent que le taux d’O2- basal (28,87±0,03 nM de Cytc réduit /10
6 PN), est augmenté de 186%, après
incubation de 106 PN pendant 1 h avec 4x10
6 promastigotes de L. infantum, LEM75. La production d’O2
- par les PN
préalablement incubés avec L. infantum, LEM75 est potentialisée de 347% par une stimulation de 30 min avec 160
nM de phorbol 12 myristate, 13 acetate (PMA).
La production de NO dans le surnageant de culture des PN incubés avec 4x106
parasites est inhibée de 34.67% par
rapport à celle de PN prétraités 24 h avec 160 nM de PMA seul (Activité résiduelle de 65.33% ±0. 027 µM NO2-/ 10
6
PN).
L’ensemble de ces résultats montrent que les leishmanies internalisées interfèrent sélectivement avec l’activité
iNOsynthase des PN, sans modifier la production d‘anion superoxyde par la NADPH oxydase, impliquant les
protéines kinases c conventionnelles.
Mots clés : LEISHMANIA INFANTUM LEM 75, Leucocytes neutrophiles, anion superoxyde, monoxyde d’azote.
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EFFET PREVENTIF DE L’ASPIRINE SUR LE STRESS OXYDATIF
INDUIT PAR ESCHERICHIA COLI, CHEZ LE RAT BLANC
I. Rahim1, M. Izem
1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
Notre travail avait pour objectif d’étudier le rôle de l’aspirine dans la prévention du stress oxydatif induit par un choc
septique par Escherichia coli inactivée au niveau du ventricule gauche.
Le choc septique a été induit chez les rats blancs par deux injections, en intrapéritonéale, d’une dose subléthale de 1,5
109 UFC/kg d’Escherichia coli inactivée.
Les résultats obtenus montrent une augmentation de près de 194% du taux du monoxyde d’azote (NO) et de 98% le
taux de malondialdehyde (MDA) comparés taux mesurés dans les homogénats de ventricules gauches témoins, 48
heures après induction du choc septique.
Le prétraitement par l’aspirine 30 mg/kg, 1 heure avant l’induction du choc septique prévient le stress oxydatif.
L’aspirine diminue de près de 86,3% et de 43,5% respectivement, les taux de NO et de MDA, comparés aux taux
mesurés dans les ventricules gauches des rats septiques.
Ces résultats suggèrent que la défaillance cardiaque au cours du choc septique à E. coli inactivée, implique un stress
oxydatif caractérisé par une augmentation du taux de NO et du MDA.
L’aspirine un AINS, inhibiteur sélectif de la cyclo-oxygénase-1, permet de prévenir le stress oxydatif induit par E.coli
inactivée au niveau du ventricule gauche.
Mots clés : Choc septique, Escherichia coli, stress oxydatif, malondialdehyde, monoxyde d’azote, aspirine.
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MODULATION PHARMACOLOGIQUE DU STRESS OXYDATIF INDUIT
CHEZ DES SOURIS BALB/C PAR LEISHMANIA MAJOR (LIPA 1126)
- ETUDE A L’AIDE DU DICLOFENAC-NA ET DE LA QUERCETINE
R. Belkhelfa-Slimani 1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des
Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
Une leishmaniose cutanée expérimentale induite par le parasite Leishmania major chez des souris BALB/c a
été modulée par le diclofénac-Na (Diclo-Na) et la quercétine (Qr).
Les souris sont infectées au niveau de la patte postérieure gauche par 3 x 106 promastigotes Leishmania
major (MHOM/DZ/2000/LIPA1126, Leishmania, Institut Pasteur, Alger). A la 4ème
semaine post infection,
les souris ont reçu 4mg/kg/j de Diclo-Na (lot1), 25 mg/kg /jour de Qr (lot 2) ou du NaCl 0.9% (lot 4).
Le volume des pattes des souris infectées augmente parallèlement à l’activité arginase qui augmente de
351% (p≤0,01) après 9 semaines d’infection. Au contraire, le taux des nitrites est réduit de 36% (p≤0,02).
Le diclo-Na et la Qr réduisent respectivement, la taille de l’œdème plantaire à 94,26% et 76,87% et la
charge parasitaire à 28 % et 36 %. L’activité arginase à 54% et 42%. Le taux des nitrites (activité iNO
synthase) est restauré à 75% et 83%, après 8 semaines ((p≤0,001).
Le diclo-Na ne réduit pas l’infiltration des PN (activité myeloperoxydase, MPO) et des macrophages
(activité α-naphtyl acétate estérase, NAE), alors que la Qr réduit le taux de cellules inflammatoires dans les
tissus infectés. Ces effets sont confirmés par l’étude histologique des pattes et ganglions lymphatiques. Les activités anti oxydantes du diclo-Na et de la Qr ont réduit le stress oxydatif dépendant des phagocytes, les lésions
et le taux de parasitisme des tissus infectés.
Mots clés : Leishmania major; DiclofénacNa; Quercétine; Arginase; Myeloperoxydase, NO synthase, α-naphtyl
acétate estérase.
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EFFET DE L’ACIDE NIFLUMIQUE SUR LA PHYSIOLOGIE
MITOCHONDRIALE ET LA PROLIFERATION DES CELLULES HT-29
I. Amrouche-Mekkioui 1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
La cyclooxygénase 2 (COX-2), une enzyme qui produit hydrolyse l’acide arachidonique en prostanoïdes, a
été impliquée dans la cancérogenèse colique. Elle intervient en inhibant l’apoptose, dont la phase
effectrice consiste en l'ouverture des pores de transition de perméabilité mitochondriale (PTPC) et la
libération de protéines apoptogènes.
L’acide niflumique (Nif) est un anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS), qui inhibe les deux isoforme de
cyclooxygénases avec un effet préférentiel sur la COX-2.
Nous avons étudié l’effet de l’acide niflumique (Nif) sur la physiologie des mitochondries de foie de rat
(gonflement et respiration), sur la prolifération des cellules HT-29 (lignée épithéliale intestinale dérivées de
cancer colique humain) et la libération d’IL-8 induites par le TNFα et le PMA.
Nos résultats montrent que le Nif provoque l’ouverture des pores de transition de perméabilité (PTPC, 100-
150µM) et découple la phosphorylation oxydative des mitochondries (10-150µM). Le LPS multiplie leur
taux de prolifération par un facteur de 3.5 à J4. Le Nif 250 µM a un pouvoir anti prolifératif sur ces cellules.
Le Nif (50-100µM) augmente la production d’IL-8 par les cellules HT-29 en absence et en présence de
TNFα, alors qu’à des doses plus élevées il semble avoir l’effet inverse (250 à 750µM). Le Nif n’a aucun
effet sur la production d’IL-8 stimulée par le PMA. Le Nif possède un effet anti prolifératif potentiel.
Mots clés : HT-29, AINS, mitochondrie, IL-8, TNFα, PMA.
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EFFET PROTECTEUR DE LA N-ACETYL CYSTEINE
DANS UNE COLITE INDUITE PAR L’ACIDE ACETIQUE
A. Tchakal 1, Z. Khiari
1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques(FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB).
BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
TEL/FAX: 021. 24. 79. 50 à 64 postes 942; 021. 24. 72. 17
RESUME
La perturbation de l’homéostasie redox (ou stress oxydatif) a été impliqué dans la pathogenèse de la colite ulcérative
humaine.
Le but de cette étude est de rechercher l’effet protecteur de la N-Acétyl Cystéine (NAC), un antioxydant et précurseur
du glutathion sur l’inflammation colique.
Des souris blanches (Mus musculatus, souche Swiss) d’un poids de 22 ±2g reparties en 3 lots de 4 souris, ont reçu
une injection intra-rectale d’une solution d’acide acétique (5%) préparée dans de l’eau physiologique (NaCl 9‰),
précédée ou non d’une injection intra-péritonéale de NAC 150mg/kg, 30 minutes avant l’induction de la colite.
Les activités enzymatiques myeloperoxydase, MPO (enzyme marqueur de l’infiltration leucocytaire), le taux de
malondialdehyde, MDA (marqueur de la peroxydation lipidique), le taux du monoxyde d’azote, NO ont été mesurés
dans les homogénats coliques parallèlement à une étude histologique, 18 heures après l’induction de la colite.
Les taux de NO et de MDA et l’activité MPO ont significativement augmenté de 1,56, 2,57 et 2,7 fois, par rapport
aux témoins respectifs.
Le traitement avec 150mg/kg de NAC 30 minutes avant l’injection de l’acide acétique, révèle une
diminution significative des taux de NO, MDA et de l’activité MPO coliques de 30%, 50% et 44,57%,
respectivement. L’effet protecteur de la NAC a été confirmé par l’étude histologique.
Mots clés : Stress oxydatif, colite, acide acétique, N acétyl cystéine, malondialdehyde, myeloperoxydase, monoxyde
d’azote.
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L’APOCYNINE, UN INHIBITEUR DE LA NADPH OXYDASE DES PHAGOCYTES,
RESTAURE LA BALANCE REDOX
DANS UNE COLITE AU TNBS CHEZ LA SOURIS BALB/C
N. Rebbah1, S. Mouzaoui
1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
Le disfonctionnement du système immunitaire de la muqueuse ainsi que le stress oxydatif induit par le déséquilibre
du rapport oxydant/anti-oxydant, conduisent à l’altération de l’intégrité et de la fonction du tissu intestinal.
Dans ce travail, l’apocynine, un flavonoïde antioxydant a été utilisée pour moduler le stress oxydatif dans un
modèle expérimental de colite ulcéreuse induit in vivo par l’acide trinitrobenzène sulfonique 30mg/kg.
L’effet protecteur de l’apocynine sur les atteintes de la paroi intestinale engendrées par le TNBS, a été évalué par
une étude biochimique (dosage du taux de malondialdehyde MDA, de l’activité myeloperoxydase MPO, de
l’activité catalase CAT et du taux de glutathion GSH), parallèlement à une étude histopathologique. L’évolution de
la CU est étudiée selon un protocole de 3, 7 et 10J.
Le TNBS 30mg/kg a induit une inflammation du colon, caractérisée par une infiltration de leucocytes neutrophiles
(PN). Le relargage des enzymes granulaires comme la MPO, dont le taux est augmenté de 37% par rapport aux
témoins induit une peroxydation sévère du tissu colique (≈100%). Parallèlement, la colite est associée à une
inhibition l’activité CAT (33%) et une déplétion du taux de GSH (31%), marqueurs du système antioxydant.
Le traitement avec l’apocynine 25 mg/kg réduit le taux de MDA et l’activité MPO et restaure l’activité CAT et le
taux de GSH. Ceci suggère que l’inhibition sélective de la NADPH oxydase 2 (NOX2), une enzyme
caractéristique des phagocytes par l’apocynine réduit l’inflammation et les dommages tissulaires engendrés par le
TNBS.
Mots clés : Colite ulcéreuse, stress oxydatif, TNBS, apocynine.
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COLITE A L’ACIDE TRINITROBENZENE SULFONIQUE.
CARACTERISATION A L’AIDE D’UN ANTIOXYDANT, LA CURCUMINE
S. Mouzaoui1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
Dans cette étude l’effet de la curcumine (CUR), une molécule antioxydante a été recherchée dans la modulation d’une
colite chronique induite expérimentalement par l’acide trinitrobezène sulfonique (TNBS) chez des souris de souche
Swiss.
L’instillation rectale d’une dose de TNBS 30 mg/kg, entraîne une mortalité de 27% au 14ème
jour. Ce taux de mortalité
est nul après une administration quotidienne de 25mg/kg de curcumine administrée par voie intra péritonéale.
Le taux des nitrites, marqueur de l’activité NO synthase (NOS), malonyldialdehyde (MDA, marqueur de la
peroxydation des lipides) et de l’activité Myeloperoxydase (MPO, marqueur de l’infiltration des polynucléaires
neutrophiles, PN) mesurés dans les homogénats du colon sont respectivement 5, 4 et 8 fois supérieurs aux taux basals
(4.351±1.696 µM de nitrites/mg de protéines, 0.016±0.002 DO 532nm éq MDA/mg de protéines et 0.064±0.010 DO 460
nm éq MPO/min/mg de protéines) 14 jours après instillation du TNBS.
A partir de 7ème
jour, le stress oxydatif induit par le TNBS est efficacement contrôlé après le traitement des souris
avec la curcumine.
La curcumine restaure partiellement l’activité catalase réduite à 80% par le TNBS (activité contrôle : 1.015±0.056
U/mg de protéine) à partir de 3ème
jour du traitement, par contre le taux physiologique de GSH (soit 0.523±0.075 DO
12nm/mg de protéine) n’est rétabli qu’après 14 jours. Ces résultats ont été confirmés par l’étude histologique.
Ces résultats suggèrent que la curcumine, a rétabli l’équilibre des systèmes prooxydants/antioxydants en faveur de ces
derniers, dans une colite au TNBS, un modèle expérimental de la maladie de Crohn.
Mots clés : Acide trinitrobenzène sulfonique, curcumine, stress oxydant.
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UTILITE DES CELLULES VERO DANS LA CARACTERISATION
DE LA TOXICITE DE L’INDOMETACINE.
MODULATION PAR LA N ACETYL CYSTEINE ET LA QUERCETINE
O. Limane2,3
, M. Driss2,3
, N. Touabti3, L. Ait Said
3, M. Segouani
3 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences
et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger). 2Faculté des génies des procédés pharmaceutique
3Institut Pasteur, Dely Ibrahim, Alger
RESUME
L'indométacine ou acide chlorobenzoyl métoxy méthyl indol acétique est un anti-inflammatoire non stéroïdien, qui
agit par inhibition non sélective des cyclooxygénase 1 et 2 (COX-1/-2). Ces effets pro apototiques et anti prolifératifs
sont attribués à une activité indépendante des cyclooxygénases.
Le but de cette étude est de caractériser la toxicité de l'indométacine sur une lignée de cellules dérivées de rein de
singe (VERO). L'implication du stress oxydatif a été recherché à l'aide d’un antioxydant naturel la quercétine (Qr) et
d’un scavenger des espèces réactives de l’oxygène (ROS) et précurseur du glutathion, la N-Acétyl-Cystéine (NAC).
L’incubation des cellules VERO 24h avec des concentrations croissantes d’indométacine (100-500 µM), a induit une
augmentation dose dépendante de la production de nitrites et de malondialdehyde (MDA), marqueurs du stress
oxydatif et la réduction parallèle du taux de GSH et de l’activité catalase. La toxicité est confirmée par le relargage
dose dépendant de la lactate déshydrogénase (LDH).
La quercétine 15 µM et la NAC 50 µM ont totalement neutralisé les taux des nitrites et de MDA et restauré les
systèmes de défense antioxydants (GSH, catalase). Cet effet protecteur est inversement proportionnel aux
concentrations excessives d’indométacine.
Par ailleurs, les deux antioxydants testés exercent par elles mêmes un effet pro oxydant dose dépendant, qui vient se
surajouter à la toxicité de l’indométacine. Cette observation suggère une utilisation modérée et contrôlée des
molécules anti oxydantes naturelles, en particulier dans les chimiothérapies caractérisées par une production
excessives de ROS.
Mots clés : Indométacine, cellules VERO, stress oxydatif, quercétine, N-Acétyl-Cystéine
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EFFET MODULATEUR DE L’ACIDE CAFEIQUE SUR UNE
COLITE ULCEREUSE CHRONIQUE AU DEXTRAN SULFATE SODIUM
A. Cherallah1, I. Amrouche-Mekkioui
1 et B. Djerdjouri
1
1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).
RESUME
La colite ulcéreuse est une maladie inflammatoire chronique du côlon. Bien que son étiologie reste inconnue, la
perturbation des systèmes pro-oxydants et antioxydants semble jouer un rôle clé dans sa physiopathologie.
Le but de notre travail a été d’étudier l’effet de l’acide caféique 50 mg/kg sur une colite ulcéreuse chronique induite
chez les souris mus musculus avec du dextran sulfate sodium (DSS) 5%.
L’intensité des lésions de la muqueuse colique a été estimé après l’application de deux cycles successifs de DSS 5%
par une étude histopathologique et le dosage des marqueurs du stress oxydatif (myeloperoxydase MPO,
malondialdéhyde MDA et activité catalase CAT).
Après l’administration de deux cycles de DSS 5%, nos résultats ont révélé une augmentation de l’activité MPO (1,71
fois), signe d’une forte infiltration leucocytaire et visible sur les coupes histologiques. Une augmentation du taux de
MDA (2 fois) ainsi qu’une diminution de l’activité CAT (1,27 fois) ont également été noté.
L’acide caféique 50mg/kg a protégé de façon significative les souris au cours de l’administration de deux cycles de
DSS 5% par ces propriétés d’inhibition de la 5-LOX, par son effet scavenger sur les espèces réactives de l’oxygène
(ROS) et par sa capacité à interrompre les réactions en chaîne de la peroxydation lipidique.
Mots clés : Colite ulcéreuse, dextran sulfate sodium, acide caféique.
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des chromosomes de la caille des blés Coturnix coturnix dans le cadre d’une
Contribution à sa Préservation *
KARTOUT Y.,* BELHAMRA M.** et LADJALI-MOHAMMEDI. K.*
*Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, Faculté des sciences biologiques (FSB), Université des Sciences et
de la Technologie Houari Boumediene (USTHB)
**Centre Cynégétique de Zéralda, Centre de la Recherche Scientifique et Technique sur les Régions Arides
(CRSTRA), Université de Biskra
Résumé
La caille des blés Coturnix coturnix coturnix, appelée caille Européenne, est un petit oiseau nicheur et
migrateur. Elle fréquente en Algérie le Tell, les Hautes Altitudes et le Sahara Septentrional. Un déclin important du
nombre de cailles a été signalé au cours de ces 30 dernières années partout en Europe ainsi qu’en Algérie. Cette
situation est due à l’apparition de plusieurs facteurs défavorables à son maintien tels que la chasse excessive et la
pollution génétique. Cette espèce cynégétique est menacée de disparition. Une prise de conscience générale a motivé
sa double inscription juridique en 1979 (convention de Bonn et de Berne) pour sa protection.
L’objet de ce travail est de contribuer à la préservation de cette espèce en entamant la description de son
génome et d’établir, pour la première fois en Algérie, des chromosomes à haute résolution. Nous avons ainsi réalisé
des cultures de fibroblastes issus d’organes d’embryons et d’animaux adultes. Ainsi, nous avons établi le caryotype de
la caille des blés. Nous avons ensuite effectué des comparaisons avec des espèces aviaires connues telles que la poule
domestique Gallus domesticus et la caille japonaise Coturnix japonica.
Le nombre diploïde est approximativement égal à 78 chromosomes tout comme la caille japonaise et la poule
domestique. Des caryotypes en bandes GTG et RBG sont proposés. Ils correspondent seulement aux huit premières
paires d’autosomes ainsi que la paire de chromosomes sexuels (ZZ ou ZW). Les microchromosomes, comme pour
tous les oiseaux, sont extrêmement difficiles à identifier. Les résultats obtenus sont très semblables au caryotype de la
caille japonaise.
MOTS CLES : Caille des blés, Coturnix coturnix, espèce menacée, embryon, animal adulte, culture cellulaire,
chromosomes, haute résolution, caryotype, étude génomique comparée.
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Etude du Caryotype et Cartographie Chromosomique Comparée d’Une Espèce
Menacée : la Perdrix gambra Alectoris barbara*
OUCHIA S.,* BELHAMRA M.** et LADJALI –MOHAMMEDI K.*
*Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire
Faculté des sciences biologiques (FSB)
Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB)
**Centre Cynégétique de Zéralda, Centre de la Recherche Scientifique et Technique sur les Régions Arides (CRSTRA),
Université de Biskra
[email protected]; [email protected]; [email protected]
RESUME
Les progrès et les connaissances accumulés grâce à l’étude des génomes aviaires ont permis de
détecter des homologies de séquences avec les mammifères et l’homme concernant plusieurs familles de
gènes. C’est pour toutes ces raisons que l’étude des différents caryotypes aviaires constitue une étape
importante dans l’établissement des cartographies chromosomiques comparées.
En effet, parmi les espèces aviaires endémiques de l’Afrique du Nord la perdrix gambra Alectoris
barbara est l’homologue des perdrix rouges et bartavelles Européennes. Elle est très prisée pour sa chaire et
soumise à des textes de lois permettant son exploitation par l’exercice de la chasse. Cependant, la pratique
anarchique de la chasse, cumulée à la dégradation des biotopes et l’épandage excessif des pesticides, ont
conduit au déclin alarmant des populations de perdrix locales. Le projet « Perdrix gambra », lancé par le
Centre Cynégétique de Zéralda, vise à obtenir une souche capable de se reproduire en captivité, puis de
réaliser un suivi démographique des populations naturelles après les lâchers de repeuplement.
Dans ce présent travail, nous contribuons à la préservation de la Perdrix gambra par une étude
cytogénétique, menée pour la première fois en Algérie sur cette espèce locale. Nous avons ainsi établi le
caryotype à haute résolution et décrit les huit premières paires chromosomiques ainsi que les chromosomes
sexuels Z et W à partir de cultures cellulaires issues d’embryons et d’animaux adultes. Le nombre diploïde a
été établi à 2n= 78 comme pour la plupart des espèces appartenant à cette famille.
Cette étude permettra par la suite de déceler d’éventuelles anomalies chromosomiques successibles de
conduire à long terme au déclin de l’espèce. Des études comparatives, aussi bien cytogénétiques que
phylogénétiques, seront également possibles avec d’autres espèces connues telles que la Poule domestique
Gallus domesticus, et d’autres espèces locales étudiées pour la première fois au Laboratoire de Génétique du
Développement (perdrix choukar, caille des blés, tourterelle des bois et outarde houbara).
Mots clés : Perdrix gambra, espèce endémique, cultures cellulaires, embryons, animaux adultes, caryotype,
chromosomes à haute résolution, génome aviaire, cartographie comparée.
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Glucotoxicité et remodelage de la matrice extracellulaire des fibroblastes
adventitiels en culture de Psammomys obesus
Berdja S1Neggazi S
1., Hamlat N., Boumaza S
1., Smail L
1., Sahraoui H
1., Benazzoug Y
2., Kacimi
G3., Haffaf E
4 ., Boudrissa A
5., Aouichat-Bouguerra
S1.(1)PPCM, (2) BRME, FSB, USTHB ; (3) Laboratoire de Biochimie, HCA, Alger, (4) Service de Médecine nucléaire,
HCA, Alger. (5). Unité de parasitologie, Institut Pasteur, Sidi [email protected]
RESUME
Introduction : L’hyperglycémie chronique induit des désordres métaboliques et des altérations intra et
extracellulaires. Ces dernières sont marquées par l’activation des voies des polyols, de la protéine kinase
C, des produits terminaux de glycation accentuant le stress oxydatif, marqueur de l’évolution des
complications cardiovasculaires.
Méthodes : les fibroblastes sont mis en culture par la méthode des explants. La glucotoxicité est induite
par incubation des fibroblastes en présence de D-glucose à 0.4% et 0.6% pendant 7 jours. L’évaluation
des nitrites totaux et du malonaldehyde est réalisée dans le compartiment intracellulaire. La prolifération
des cellules est évaluée par comptage. Les collagènes totaux du compartiment extracellulaire sont
caractérisés par SDS-PAGE.
Résultats : La prolifération montre une augmentation très hautement significative comparativement aux
témoins correspondants. Le malonaldéhyde et les nitrites totaux sont, dose dépendante, très
significativement augmentés. De même, la quantification des chaînes α2 (I) et α1 (I+III) des collagènes I
et III contenus dans le compartiment extracellulaire montre une augmentation sensible, dose dépendante.
Conclusion : L’induction d’une glucotoxicité in vitro, par addition de D glucose à des doses
supraphysiologiques, instaure un stress oxydatif, une augmentation de la prolifération liée à l’activation
cellulaire et une augmentation des collagènes en relation avec un remodelage important de la matrice
extracellulaire aortique. Toutes ces altérations sont des facteurs qui induisent et accélèrent les
complications cardiovasculaires. Une perspective thérapeutique comporterait deux volets : un volet
diététique et un volet pharmacologique.
Mots clés : Psammomys obesus, fibroblaste advetitiel, subculture, glucotoxicité, stress oxydant
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Cytotoxicité in vitro du peroxyde d’hydrogène sur des fibroblastes aortiques
de Psammomys obesus
Boumaza S1 ([email protected])., Neggazi S
1., Hamlat N., Sahraoui H
1., Berdja S
1., Smail L
1.,
Benazzoug Y2., Kacimi G
3., Aouichat Bouguerra S
1.
(1) PPCM, (2) BRME, FSB, USTHB ; (3) Lab de Bioch. HCA, Alger.
Introduction : il est établi que les espèces réactives à l’oxygène induisent des dommages oxydatifs
cellulaires. Ces derniers sont impliqués dans les pathologies cardiovasculaires qui constituent un réel
problème de santé publique. Dans notre étude nous nous sommes proposés d’induire un stress oxydatif par
le peroxyde d’hydrogène sur les fibroblastes aortiques en culture secondaire, de Psammomys obesus.
Matériel et méthodes : En culture secondaire, les fibroblastes sont exposés à H2O2 1,2 et 30 mM pendant
24 h. La prolifération cellulaire est évaluée par comptage. Une étude morphologique est réalisée après
coloration à l’acridine orange. La quantification du malonaldéhyde et des nitrites totaux est effectuée dans
les compartiments extra- et intracellulaires.
Résultats : Nos résultats montrent une diminution dose dépendante de la prolifération des fibroblastes
incubés en présence de H2O2. Le malonaldéhyde et les nitrites totaux montrent une augmentation dose
dépendante très hautement significative dans les deux compartiments comparativement aux témoins
correspondants. La coloration à l’acridine orange a montré que les cellules soumises à H2O2 produisent une
fluorescence importante dans la région perinucléaire marquant une hypercondensation de la chromatine
associée à des bourgeonnements de la membrane plasmique caractérisant l’apoptose cellulaire.
Conclusion : le peroxyde d’hydrogène est un puissant oxydant induisant des altérations biochimiques et
morphologiques. De même, les acides gras polyinsaturés des membranes cellulaires seraient très affectés par
le stress oxydatif puisque le malonaldéhyde est retrouvé dans le compartiment extracellulaire. Les nitrites
sont à l’origine de la formation du peroxynitrite, radical cytotoxique majeur de l’apoptose.
Mots clés : stress oxydant, fibroblastes adventitiel, apoptose.
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Production de xylanases de Jonesia sp. sur milieux à base de xylane commercial et de
déchets agricoles.
Boucherba Nawel
1, Duchiron Francis
2, Copinet Estelle
2 et Benallaoua Said
1
1-Laboratoire de Microbiologie Appliquée/ Biochimie Microbienne, Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie ,Université de
Bejaia Route de Targa ouzemmour 06000 , Algérie. 2-Laboratoire de Microbiologie Industrielle, UFR Sciences, Université de Reims Champagne-Ardenne , Moulin de la Housse, BP
1039 , 51687 Reims, France.
Les crises successives du pétrole, l’épuisement progressif des sources d’énergies fossiles et leurs
inconvénients écologiques ont conduit les pays industrialisés à rechercher et à développer de nouvelles
sources de carburant qui seraient la ressource privilégiée pour remplacer le pétrole ou tout du moins
l’économiser : le bioéthanol de deuxième génération est probablement la solution .L’Algérie étant un pays
producteur de pétrole devrait suivre cette démarche pour des raisons stratégiques, en plus la valorisation de
la biomasse végétale a aussi un impact écologique très intéressant qui consiste à réduire les émissions de gaz
à effet de serre.
Le xylane étant un polysaccharide abondant dans les résidus agricoles, son hydrolyse nécessite l'intervention
de xylanases, ces dernières ont été isolé chez les actinomycètes notamment le genre Streptomyces.
Dans ce travail nous présentons une toute première description d'une xylanase produite par l'espèce Jonesia
sp. isolée à Béjaia, l’identification de la souche a été réalisé par le séquencage de l’ARN 16s, l’activité
enzymatique la plus élevée a été détectée à la fin de la phase exponentielle après 35h de fermentation dans
un milieu contenant le xylane de bouleau comme seule source de carbone.
Un suivi de la biomasse bactérienne et de l’activité xylanolytique de la souche Jonesia sp. a été réalisé
pendant 10 jours sur milieux contenant la paille, le son de blé et la pulpe de tomate comme substituant du
xylane de bouleau (xylane commercial), les concentrations testées sont à raison de 0,5, 1 et 2%.
L’expérience a montré que la meilleure activité xylanolytique est obtenue avec la paille de blé à 2% après 9
jours de fermentation, l’activité enzymatique a été estimée à 11,97 U/ml, ces résultats sont en corrélation
avec ceux obtenus avec la biomasse bactérienne.
L’effet de La variation du taux d’inoculation de 1 à 5% sur l’activité enzymatique a montré qu’un taux de
3% donne la meilleure activité xylanolytique sur milieu à base de paille de blé à raison de 2%.
Mots clés : production xylanases, résidus agricoles, Jonesia sp.
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Résistance bactérienne aux antibiotiques : Approche par la biologie structurale
Ahmed Meksem1,2
et Fatima Laraba-Djebari2*
1. .Métaux & Micro-organismes : Chimie, Biologie & Applications, Département Récepteur et Protéines Membranaires, Institut de Recherches
de l’Ecole de Biotechnologie de Strasbourg
Ecole Supérieure de Biotechnologie de Strasbourg, Université de Strasbourg, France
2. Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire
Biomolécules-Mode d’Action : Immunodiagnostic et Immunothérapie, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la
Technologie Houari Boumediène, Alger, Algérie
Résumé
Le transport actif de l’hème, des complexes fer-sidérophore, du saccharose… à travers la membrane externe
de bactéries à Gram-négatif fait intervenir des transporteurs TonB-dépendants (TBDTs). Les TBDTs sont formés de
deux domaines caractéristiques : un domaine bouchon et un tonneau β transmembranaire à 22 brins antiparallèles, le
domaine bouchon ferme le lumen du tonneau. L’énergie nécessaire au transport actif par les TBDTs est dérivée de la
force proton-motrice suite à une interaction entre la TonB-box du TBDT et la protéine TonB du complexe TonB-
ExbB-ExbD de la membrane cytoplasmique. Les TBDTs peuvent être utilisés pour véhiculer des antibiotiques sous
forme de complexes, fer-sidérophore-antibiotique. La membrane externe ne constitue plus une barrière sélective pour
l’entrée de ces antibiotiques, mais facilite et augmente leur taux d’entrée grâce à ce transport actif.
Nous nous sommes intéressés à un transporteur appartenant à cette famille de protéines membranaires, FetA :
TBDT de l’énantio-pyocheline de Pseudomonas fluorescens.
Nous avons mis en place et optimisé une stratégie de clonage, de surexpression, de purification et de
cristallisation. Cette stratégie nous a permis de cristalliser le récepteur, dans plusieurs conditions de cristallisation avec
différents détergents, et d’enregistrer des données de diffraction. Ainsi, nous avons résolue sa structure sous sa forme
apo à 3,2 Å.
FetA adopte le même repliement que les autres TBDTs en deux domaines caractéristiques
bouchon. L'analyse structurale révèle une grande flexibilité des boucles extracellulaires. Bien que le transporteur ne
soit pas lié à son ligand, la TonB-box n'est pas visible dans la carte de densité électronique, et donc dans la structure
3D, alors que sa flexibilité est supposée très importante pour échanger des interactions avec la protéine TonB de la
membrane interne pour le transfert d'énergie. Cette observation suppose que d'autres régions périplamiques de FetA
sont impliquées dans des interactions avec le complexe TonB-ExbB-ExbD de la membrane interne.
Les données structurales serviront pour développer des stratégies thérapeutiques innovantes de lutte contre la
résistance bactérienne aux antibiotiques « synthèse de conjugués antibiotique-EPch » ciblant l’approvisionnement en
fer de Pseudomonas fluorescens sans incidence sur l’hôte.
Mots clés : TBDTs, transport du fer, antibiorésistance, FetA, Structure 3D.
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LES MICRO-ORGANISMES HALOPHILES ET LEURS POTENTIALITES BIOTECHNOLOGIQUES
MEKNACI R., HADJ RABIA Y. et HACENE H.
Laboratoire de Microbiologie, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la technologie Houari-
Boumédiène, Alger-Algérie. [email protected]
RESUME
Au cours des 30 dernières années, nous avons assisté à la découverte d'une extraordinaire diversité de
microorganismes habitant des milieux que l'on croyait auparavant hostiles à la vie.
On a baptisé comme « extrêmophiles » ces micro-organismes limites du vivant, qui se développent optimalement dans
des environnements où les conditions physico-chimiques sont insoutenables pour le reste des êtres vivants. Ces
conditions mettent à l'épreuve les propriétés de stabilité et de fonctionnalité des macromolécules biologiques.
24 souches appartenant aux Archaebactéries Halophiles extrêmes qui font partie du groupe des micro-organismes
extrémophiles ont été isolées à partir de la Sebkha d’El Goléa située au Sahara Algérien.
Les interactions entre ces dernières ont mis en évidence 9 souches présentant une activité antagoniste contre au moins
un isolat du même domaine. Il s’agirait vraisemblablement d’activités dues à des substances du type Halocines déjà
connues chez les Archaebactéries Halophiles.
Deux souches productrices de substances antimicrobiennes potentiellement intéressantes ont été étudiées de
manière approfondie et leurs produits ont été caractérisés.
Leur purification et caractérisation par diverses techniques chromatographique, biologique et physicochimique ont
permis d’obtenir des composés de nature protéique, exerçant un effet bactéricide et présentant un spectre d’action
centré sur les germes phylogénétiquement proches des souches productrices.
Ce type de molécules est connu pour être efficace dans la conservation des produits alimentaires conservés par salage,
dans l’industrie du cuir et également pour avoir des potentialités d’être utilisé comme agent chimiothérapeutiques
actifs contre les agents pathogènes humains et animaux.
Mots clés : les Archaebactéries halophiles, les Halocines, Environnements extrêmes.
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P38
Apport des outils moléculaires dans l’étude épidémiologique des souches de
Mycobacterium tuberculosis isolées de patients VIH positifs.
Nateche F1-2
*, Mechouet F2, Baraka S
2, Gavin Benavent P
3, Lopez-Calleja A
3, Samper S
3 et Khaled S
2.
1 laboratoire de biologie moléculaire et cellulaire, FSB, USTHB. ALGER.
2 Laboratoire central, EHS EL HADI FLICI. ALGER
3 Laboratoire de mycobactériologie, faculté de médecine, université de ZARAGOSSE. ESPAGNE.
Objectif :
Cette étude se focalise sur la caractérisation moléculaire des souches de M.tuberculosis isolées de patients infectés par
le VIH dans un hôpital spécialisé en maladies infectieuses à Alger.
Matériel et Méthodes :
312 isolats cliniques sont colligés entre la période allant de 2000 jusqu’à 2006, 34 proviennent de patients VIH
positifs.
L’identification des souches a été réalisée par les tests biochimiques classiques.
Le genotypage a été abordé par les techniques de spoligotyping et RFLP-IS6110.
Résultats :
Parmi les 34 souches, 28 sont génotypées. La technique de spoligotypage offre un taux d’homologie fluctuant entre
100% à 40% avec une prédominance des familles H (haarlem) ; LAM (Latino-américain-méditerranéen) et enfin la
famille ubiquitaire T.
L’analyse des résultats par technique RFLP ne met pas en évidence de corrélation entre les types de profils de
restriction des souches et le statut sérologique des patients.
Parmi ces souches, nous attirons l’attention sur la mise en évidence d’une souche de profil ST1 ou famille Beijing
chez un patient algérien et de 4 souches de profil ST61 famille LAM-CAM chez 4 patients originaires de pays sub-
sahariens.
Conclusion :
Cette étude révèle des spoligotypes similaires aux génotypes de M.tuberculosis circulantes dans notre environnement.
Outre, l’installation de nouveaux génotypes à Alger est à souligner.
Mots clés : M.tuberculosis, VIH, spoligotyping, RFLP-IS6110.
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P39
Effet antibactérien de Lactococcus lactis à l’égard de Staphylococcus aureus résistant
aux antibiotiques isolé de lait de vaches mammiteuses dans un fromage au lait cru.
Keramane Badria, Titeli Fatiha, Sadoun Djamila
Laboratoire de Microbiologie Appliquée, Université A Mira de Bejaïa
E-mail : [email protected]
Résumé
Cette étude avait pour objectif de mettre en évidence le pouvoir antagoniste de Lactococcus lactis à
l’égard de Staphylococcus aureus isolé de lait de vaches atteintes de mammites, et de démontrer l’intérêt de
cet antagonisme dans la production de fromages au lait cru par une croissance simultanée des deux souches.
Un isolement et une identification de souches de S. aureus à partir de différents laits mammiteux
avant pendant et après le traitement aux antibiotiques sont menés.
Parallèlement, des souches de Lc. lactis sont isolées, purifiées et identifiées à partir de différents
échantillons de lait cru. Les souches de Lc. lactis sont alors criblées pour leur effet antibactérien, à l’égard
de S. aureus résistant aux antibiotiques par le test des spots.
Enfin, un suivi de l’activité antibactérienne potentielle de Lc. lactis à l’égard de S. aureus est réalisé
dans du lait écrémé.
11 souches de Staphylococcus aureus ont été isolées et identifiées à partir de lait mammiteux. Sur 59
souches de bactéries lactiques isolées 14 ont été identifiées comme appartenant à l’espèce Lactococcus
lactis, dont 10 présentaient une bonne activité antibactérienne à l’égard de S aureus isolé de lait de vaches
mammiteuses.
Les résultats du suivi de la croissance de S. aureus en culture mixte avec Lc. lactis dans le lait et le
fromage, ont montré que la croissance de S. aureus est très significativement inhibée dans le fromage en
présence de Lc. lactis.
Mots clés : Staphylococcus aureus, mammites, Antagonisme, Lactococcus lactis, fromage au lait cru.
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P40
EVALUATION DE LA TOXICITE DES BLOOMS A MYCROCYSTIS SP.
A.Ouartsi & D.Chekireb Université Badji Mokhtar, Faculté des Sciences, Département de Biochimie, Annaba 23000 Algérie,
Résumé :
L'apparition fréquente de blooms toxiques à cyanobactéries au niveau des plans d'eau se produit à différents
endroits dans le monde. Ce problème est d’autant plus sérieux que les espèces occasionnant les blooms peuvent
produire des cyanotoxines qui sont potentiellement hépatotoxiques et/ou neurotoxiques. La présence dans les
retenues servant à la production d'eau potable et/ou à l'irrigation de cyanobactéries productrices de toxines
constitue donc une menace sanitaire sérieuse.
Dans ce contexte, des études physico-chimiques et biologiques ont été réalisées, pour la 1ère fois, dans le
barrage Mexa situé au Nord-Est de l'Algérie, afin d'y rechercher des cyanobactéries potentiellement toxiques. Les
microcystines ont été spécialement recherchées. L'échantillonnage a été effectué durant 10 mois de mars à
décembre 2007.
L'examen microscopique du phytoplancton montre la présence de 8 genres de cyanobactéries dont 6 sont
productrices de toxines. Parmi ces dernières, le genre Microcystis sp. prolifère régulièrement et domine le
phytoplancton au mois de novembre et décembre, avec une densité cellulaire maximale de 2,1x106 cellules.ml
-1
Les teneurs de microcystines intracellulaires déterminées par le test immunologique ELISA montrent que les
valeurs les plus élevées atteignent 0,77 µg.L-1
au mois de novembre. De plus, ces valeurs sont en concordance
avec les densités cellulaires du genre Microcystis sp. et de la concentration maximale de chlorophylle (a) obtenue.
Parallèlement, des cultures du genre Microcystis sp. sur milieu BG11, ont été menées et révèlent l'existence de 2
morphoespèces se distinguant par la taille de leurs cellules. L’approche par des méthodes génomiques permettra,
par la suite, l’identification de ces souches.
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P41
ISOLEMENT ET IDENTIFICATION CLASSIQUE ET MOLECULAIRE
D’ESPECES D’ACTINOBACTERIESPRODUCTRICES DE MOLECULES
ANTAGONISTES.
HADJ-RABIA Y., MEKNACI R. et HACENE H
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RESUME
L’évolution constante de la résistance bactérienne aux antibiotiques, l’émergence de nouvelles maladies
infectieuses ainsi que de plusieurs types de cancer demeurant sans traitement efficace justifient la recherche intensive
de nouvelles molécules bioactives.Ainsi, l’une des stratégies suivies dans ce domaine de recherche consiste à isoler
des souches d’actinobactéries extrêmophiles connues pour être la principale source naturelle de métabolites bioactifs à
partir d’écosystèmes ou environnements peu ou pas étudiés essentiellement les écosystèmes dont l’un des facteurs
environnementaux est extrême (salinité, pH, et température).Dans nos travaux de recherches, nous nous sommes
intéressés au facteur de la salinité et cela en analysant des échantillons aussi bien solides que liquides provenant de
différentes sebkhas du Sahara Algérien. Ainsi, l’analyse de ces échantillons nous a permis d’isoler 12 isolats
d’actinobactéries sur des milieux sélectifs fortement salés.Les isolats obtenus ont été soumis à un screening pour la
production de molécules bioactives en choisissant comme cibles des bactéries de référence ainsi que des
Archaebactéries halophiles.L’activité antagoniste des souches isolées a été mise en évidence par la technique de
diffusion sur gélose par les cylindres d’agar. Ceci, nous a permis de sélectionner deux souches les plus actives. Les
produits actifs ont été extraits, localisés par des méthodes chromatographiques et partiellement caractérisés.Une
identification approfondie des deux souches a été effectuée par les méthodes classique (morphologiques,
physiologiques et biochimiques) et moléculaire. En effet, le séquençage partiel de l’ARNr16S a révélé que les deux
souches sélectionnées appartenaient à deux genres différents à savoir Saccharomonospora et Nocardiopsis et que
l’une d’entre elles présente un taux de similarité de 97% avec Saccharomonospora halophila ce qui laisse suggérer
qu’il s’agirait, très probablement, d’une nouvelle espèce halophile.
Mots clés : Actinobactéries, Sebkha, halophiles, antibiotiques.
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Typage moléculaire des plasmides de souches d’entérobactéries multirésistantes aux
antibiotiques, isolées des eaux usées
Farida BOUFROUCHE et Rabah BAKOUR Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Génétique, Faculté des Sciences Biologiques,
Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger
RESUME
L’évaluation de la sensibilité aux antibiotiques de 89 souches d’entérobactéries isolées des eaux usées a montré une
multirésistance avec une moyenne de 20 résistances pour 34 antibiotiques testés. Le rôle des plasmides dans ces
phénotypes est prépondérant. Le culot plasmidique des souches comporte 0 à 9 plasmides avec des tailles variant de 2
à 120 kb. Le replicon-typing des plasmides par hybridation moléculaire a permis de les assigner majoritairement aux
groupes d’incompatibilité ubiquitaires IncFI, Com9 et IncQ et moins fréquemment aux groupes HI2 et IncU. La
comparaison de plasmides de même taille de différentes espèces par leurs profils de restriction a montré une similarité
entre certains, ce qui peut-être indicatif de transferts génétiques in situ.
Mots-Clés : entérobactéries, plasmides, résistance, antibiotiques, eau
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Culture d’Arthrospira platensis (Spirulina platensis) sur eaux carbonatées et production
de pigments phycocyanine et xanthophylles.
CHEKIREB Djamel & OUARTSI Akila
Université Badji Mokhtar Annaba - Faculté des Sciences
Département de Biochimie – BP 12 El-Hadjar Annaba Algérie
RESUME Arthrospira platensis (Spirulina platensis) est une cyanobactérie photosynthétique se développant
dans des eaux riches en carbonates. Elle est consommée par les populations du Tchad et du Mexique, et
possède une valeur nutritionnelle très élevée. Sa composition chimique montre une grande richesse en
nutriments tels que minéraux, protéines, provitamines, acides gras polyinsaturés. Elle renferme des pigments
de type chlorophylle « a », β - carotènes et surtout phycocyanine. La phycocyanine possède une activité
biologique importante, elle est utilisée dans le domaine médical comme antioxydant, anti-inflammatoire et
anti-tumorale et aussi comme hépatoprotecteur et détoxifiant.Notre travail consiste à cultiver in vitro
Arthrospira platensis sur des milieux à base d’eaux carbonatées provenant des sources thermales de
Constantine et de Guelma ; d’évaluer la croissance de cette algue et de comparer avec les milieux de culture
classiques pour cyanobactéries (Spir, Zarrouk et BG11). La nature et la composition en pigments de la
biomasse obtenue sont des paramètres biotechnologiques importants, il s’agit de déterminer les teneurs en
chlorophylle « a » et en phycocyanine (et estimer son taux de pureté). Une séparation chromatographique
des extraits bruts est effectuée pour identifier la nature des pigments produits . Les résultats obtenus sont
satisfaisants ; une croissance maximale de A. platensis est obtenue sur milieu à base d’eau thermale de
Constantine comparable au milieu de culture « Spir ». Pour ce qui est de l’eau de Guelma, la croissance est
légèrement plus faible, mais demeure intéressante. La production de phycocyanine dépend fortement de la
composition du milieu de culture utilisé. Les valeurs obtenues de la pureté de la phycocyanine (exprimée en
%) dans les différents milieux varient de 0.5 à 2.18. Le maximum est obtenu avec le milieu Spir (2.18 %) et
une valeur très intéressante est obtenue avec l’eau de Guelma (1.7 %). Les pigments révélés par CCM
montrent une production de xanthophylles, de chlorophylle et d’autres pigments sur les milieux de
Constantine et de Guelma. Les quantités sont comparables à celles obtenues avec les milieux classiques.
Mots clés : Arthrospira, pigments, phycocynine, xanthophylles
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APPROCHES MOLECULAIRES DE LA DIVERSITE BACTERIENNE D’UNE
SOURCE CHAUDE TERRESTRE ALGERIENNE
A. Bouanane1 , B. Ollivier2, ML. Fardeau 2 et H.Hacene1.
1- Laboratoire de Biologie cellulaire et moléculaire (Microbiologie), USTHB .
2-IRD UMR 180 Extremophiles, Université de Provence et de la Méditerranée, Marseille.
Contact : [email protected]
Un intérêt considérable est porté aux microorganismes thermophiles et hyper thermophiles associés aux sources
chaudes de différentes aires géothermales. En effet longtemps considérées comme impropres au développement de la
vie, les sources hydrothermales terrestres se sont révélées être le réservoir de consortia bactériens originaux. De
nouvelles lignées phylogénétiques d’espèces inconnues ont été déterminées grâce aux techniques moléculaires et au
choix de l’ARN 16 S comme marquer évolutif.
L’Algérie compte un grand nombre de sources thermo minérales. La majeure partie de ses sources est localisée dans
l’est algérien. Elles sont classées en eaux sulfureuses, ferrugineuses, chlorurées, sodiques, sulfatées ou carbonatées.
Les eaux de hammam chellala sont réputées pour être des plus chaudes au monde avec une température de 98°C à leur
point d’émergence.
Notre étude consiste à caractériser la diversité de la flore indigène d’une eau prélevée d’une source chaude située à
l’Est Algérien par les techniques moléculaires (16S, DGGE, Clonage, ARDRA et hybridation) et non moléculaires
(cultures et isolement aérobie et anaérobie) d’écologie microbienne.
Mots clé : Source chaude- Ecologie moléculaire- Diversité bactérienne.
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AUTEURS :
- CONFERENCES*,
- COMMUNICATIONS ORALES**
- COMMUNICATIONS AFFICHEES***
1 Abderrahmani
Ahmed ** 2 Adi-Bessalem Sonia ** 3 Ahmedi
Mohamed Laïd ***
4 Aissani
Radia ** 5 Ait-Lounis Aouatef ** 6 Alouache Souhila ** 7 Amari Hanane ** 8 Amri Manel ** 9 Amrouche Lynda *** 11 Amrouche-Mekkioui Ilhem ** 10 Aslane M *** 12 Bekkari Nadjia *** 13 Belkhelfa
Mourad **
14 Belkhelfa-Slimani Radia *** 15 Bellil Ines ** 16 Benboubetra
Mustapha *
17 Benderdour Mohamed * 18 Benhamadi Asma ** 19 Benhassine Traki ** 20 Berdja S 21 Benmalek Yamina ** 22 Bennacef-Heffar Nouara *** 23 Berkane Kinza ** 24 Billiald
Philippe *
25 Bouanane Amel 26 Bouaziz Samia *** 27 Boucherba
Nawel **
28 Boudrahem- Addour Nassima ** 29 Boufrouche Farida *** 30 Bounaama. Abdelkader ** 31 Boussag-Abib Lila *** 32 Chaouad B *** 33 Cherallah Amira *** 34 Cherbal
Farid **
35 Djeraba, Zineb ***
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36 Djinni
Ibtissem ** 37 Ghoul A *** 38 Hachaichi-Sadok Zohra ** 39 Hammoudi-Triki Djelila ** 40 Izem-Meziane
Malika ***
41 Kandouli. C ** 42 Kartout Y ** 43 Keramane Badria *** 44 Khelil
Malika **
45 Khiari Zineb *** 46 Lahmar-Belguendouz Karima *** 47 Laib Yasmina ** 48 Lammali Amina ** 49 Limane
O. ***
50 Mahiddine L ** 51 Meknaci Rima *** 52 Meksem
Ahmed ***
53 Mendil Amina *** 54 Mesbah-Amroun Hamida ** 55 Messai
Yamina **
56 Mezioug
Dalila *** 57 Mouzaoui.
Souad ***
58 Nateche Farida ** 59 Othmani-Mecif
Kheira ***
60 Otmane A. ** 61 Ouartsi
Akila ***
62 Ouchia S *** 63 Oussedik-Oumehdi Habiba ** 64 Rafa Hayet ** 65 Rahim
Ibtissem ***
66 Rebbah
Nesrine *** 67 Saïdi Hadjer *** 68 Sami-Merah Sassia *** 69 Tchakal. A *** 70 Toumi
Nassima
71 Tounsi Nabila *** 72 Yefsah-Idres A *** 73 Zerrouk F 74 Zidi
Sourour ***
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