perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id PENGARUH EKSTRAK .../Pengaruh... · Salah satu contoh obat yang dapat menimbulkan kerusakan hepar adalah parasetamol (Mehta, 2010). Parasetamol

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

PENGARUH EKSTRAK DAUN KATUK (Sauropus androgynus) SEBAGAI

HEPATOPROTEKTOR TERHADAP KADAR SGPT TIKUS PUTIH

(Rattus norvegicus) YANG DIPAPAR PARASETAMOL

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

LANNY MARGARETHA BARUTU

G0008120

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

Surakarta

2011


commit to user

ABSTRAK

Lanny Margaretha Barutu, G0008120, 2011. Pengaruh Ekstrak Daun Katuk (Sauropus androgynus) sebagai Hepatoprotektor terhadap Kadar SGPT Tikus Putih (Rattus norvegicus) yang dipapar Parasetamol. Fakultas Kedokteran Universitas sebelas Maret, Surakarta.

Latar Belakang: Penelitian tentang herbal mulai dikembangkan untuk pengobatan, salah satunya adalah untuk perlindungan hepar yang merupakan organ yang rentan mengalami kerusakan. Tanaman herbal daun katuk memiliki kandungan antioksidan yang tinggi dan dapat digunakan sebagai pelindung hepar.

Tujuan Penelitian: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) sebagai hepatoprotektor terhadap penurunan SGPT tikus putih yang dipapar parasetamol.

Metode Penelitian: Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik dengan the posttest-only group design. Dua puluh delapan tikus jantan galur Wistar dengan umur ± 2 bulan dibagi menjadi 4 kelompok. Kelompok pertama sebagai kelompok kontrol, kelompok P1 diberi paparan parasetamol, sedangkan kelompok P2 dan P3 diberi paparan parasetamol serta ekstrak daun katuk dengan dosis 12,15 mg/150 gr BB dan 24,30 mg/150 gr BB. Perlakuan diberikan selama 13 hari berturut-turut. Pada hari ke-14, darah tikus diambil dan diukur kadar SGPT dengan metode International Federation Clinical Chemistry (IFCC) . Pengamatan dilakukan dengan membandingkan hasil kadar SGPT pada tiap kelompok. Hasil penelitian dianalisis dengan uji ANOVA yang dilanjutkan dengan Post Hoc Test dengan bantuan program SPSS for Windows versi 19.

Hasil Penelitian: Dengan uji ANOVA terdapat perbedaan kadar SGPT yang signifikan dengan nilai p = 0,034 (p < 0,05) pada keempat kelompok sampel, namun berdasar hasil uji Post Hoc Test Dunnett T3 tidak ada beda signifikan antarkelompok perlakuan.

Simpulan Penelitian: Pemberian ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) dapat mencegah peningkatan kadar SGPT tikus putih (Rattus norvegicus) namun tidak signifikan secara statistik. Tidak dapat disimpulkan terdapat perbedaan ekstrak daun katuk antara dosis 12,15 mg/150 gr BB dengan dosis 24,30 mg/150 gr BB.

Kata Kunci: Daun Katuk (Sauropus androgynus), SGPT, Tikus Putih (Rattus

norvegicus)

iv


commit to user

DAFTAR ISI

PRAKATA ........................................................................................................................ vi

DAFTAR ISI ..................................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL ............................................................................................................. ix

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................................ x

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................................... xi

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................................. 1

A. Latar Belakang Masalah ................................................................................. 1

B. Perumusan Masalah ........................................................................................ 3

C. Tujuan Penelitian ............................................................................................ 4

D. Manfaat Penelitian .......................................................................................... 4

BAB II LANDASAN TEORI ........................................................................................... 5

A. Tinjuan Pustaka ............................................................................................... 5

1. Daun Katuk (Sauropus androgynus) ........................................................ 5

2. Hepar ......................................................................................................... 7

3. Parasetamol ............................................................................................... 9

4. Mekanisme Kerusakan Hepar Akibat Paparan Parasetamol ..................... 10

5. Stres Oksidatif ........................................................................................... 11

6. Antioksidan ............................................................................................... 14

7. Daun Katuk sebagai Antioksidan ............................................................. 16

B. Kerangka Berpikir ........................................................................................... 20

vii


commit to user

C. Hipotesis ......................................................................................................... 21

BAB III METODE PENELITIAN ................................................................................... 22

A. Jenis penelitian ................................................................................................ 22

B. Lokasi dan Waktu Penelitian .......................................................................... 22

C. Subjek Penelitian ............................................................................................ 22

D. Teknik Sampling ............................................................................................. 23

E. Desain Penelitian ............................................................................................ 23

F. Identifikasi Variabel Penelitian ...................................................................... 24

G. Definisi Operasional Variabel Penelitian ....................................................... 25

H. Alat dan Bahan Penelitian ............................................................................... 25

I. Cara Kerja ....................................................................................................... 26

J. Teknik Analisis Data ...................................................................................... 29

BAB IV HASIL PENELITIAN ........................................................................................ 31

A. Hasil Penelitian .............................................................................................. 31

B. Analisis Data .................................................................................................. 32

BAB V PEMBAHASAN .................................................................................................. 34

BAB VI SIMPULAN DAN SARAN ............................................................................... 39

A. Simpulan ......................................................................................................... 39

B. Saran ............................................................................................................... 39

DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 40

LAMPIRAN

viii


commit to user

1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Hepar merupakan organ terbesar pada tubuh yang berfungsi sebagai

tempat pembentukan empedu, pembentukan faktor koagulasi, dan pusat

metabolisme karbohidrat, protein, lemak, hormon, dan zat kimia (Guyton and

Hall, 2007). Sebagai pusat metabolisme di tubuh, hepar rentan sekali untuk

terpapar zat kimia yang bersifat toksik sehingga menimbulkan kerusakan

hepar. Kerusakan hepar sulit untuk disembuhkan dan dikembalikan fungsinya

seperti semula. Zat kimia dapat berupa senyawa-senyawa obat yang luas

digunakan di masyarakat. Salah satu contoh obat yang dapat menimbulkan

kerusakan hepar adalah parasetamol (Mehta, 2010).

Parasetamol (asetaminofen) telah digunakan sejak tahun 1893 sebagai

obat dengan efek antipiretik dan analgesik. Ketika diminum dalam dosis terapi,

parasetamol telah terbukti aman, namun apabila dikonsumsi dengan dosis

tunggal dan berlebih dapat menimbulkan efek yang membahayakan (Wilmana

dan Gunawan, 2007).

Efek samping dari parasetamol yang berlebihan berasal dari hasil

metabolitnya. Sebagian besar parasetamol dikonversi melalui metabolisme

konjugasi dengan sulfat dan glukoronat, dan sebagian kecil lainnya teroksidasi

melalui sistem enzim sitokrom P 450. Sitokrom P 450 3 A 4 dan sitokrom P

450 2 E 1 mengkonversi sekitar 5 % dari parasetamol menjadi metabolit

perantara yang sangat reaktif, N-asetil-p-benzoquinoneimine (NAPQI). N-

1


commit to user

2

asetil-p-benzoquinoneimine memiliki waktu paruh yang pendek kemudian akan

dikonjugasi oleh glutation dan diskskresikan (Farrel, 2010). Ketika parasetamol

diminum overdosis, jalur sulfat dan glukoronat menjadi jenuh sehingga jalur

detoksifikasi parasetamol lebih banyak dilakukan oleh sitokrom P 450,

akibatnya NAPQI menjadi sangat banyak dan pasokan glutation untuk sel

hepar berkurang. Ketika terjadi pengurangan 70 % glutation, NAPQI yang

masih dalam bentuk racun dalam hepar dapat bereaksi dengan molekul

membran sel, mengakibatkan kerusakan dan kematian sel hepar dan akhirnya

menyebabkan nekrosis hepar akut (Farrel, 2010).

Indikator adanya kerusakan hepar adalah terjadinya peningkatan

enzim-enzim hepar seperti alanin transaminase atau Serum Glutamat Piruvat

Transaminase (SGPT) dan aspartat transaminase atau Serum Glutamat

Oksaloasetat Transaminase (SGOT) (Panjaitan et al., 2007). Serum glutamat

piruvat transaminae dianggap lebih spesifik daripada SGOT karena SGPT

paling banyak ditemukan di dalam hepar, sedangkan SGOT terdapat juga di

jantung, otot rangka, otak dan ginjal. Peningkatan kadar enzim ini terjadi bila

ada pelepasan enzim secara intraseluler ke dalam darah yang disebabkan

nekrosis sel-sel hepar atau adanya kerusakan hepar secara akut (Widyatmoko,

2009).

Untuk mencegah terjadinya efek buruk dari radikal bebas, maka tubuh

memerlukan antioksidan yang merupakan senyawa kimia dengan sifat

reduktor. Penggunaan antioksidan alami sudah mulai marak akhir-akhir ini

seiring dengan semakin besarnya pemahaman masyarakat tentang peranannya


commit to user

3

dalam menghambat penyakit degeneratif seperti penyakit jantung,

arteriosklerosis, kanker, serta penuaan (Gunawan, 2010).

Daun katuk (Sauropus androgynus) sudah banyak dikenal orang

Indonesia dan banyak digunakan sebagai sayuran. Tanaman ini juga banyak

digunakan untuk melancarkan air susu ibu, obat borok, bisul, deman, dan darah

kotor. Daun katuk mengandung berbagai jenis vitamin dan mineral.

Kandungan vitamin C daun katuk lebih tinggi daripada jeruk. Kandungan

vitamin A, kalsium, dan flavonoid juga tinggi (Anonim, 2009).

Penelitian yang dilakukan oleh Sa’roni (2004) menyebutkan bahwa

tablet ekstrak daun katuk dengan dosis 900 mg/hari sudah efektif untuk

meningkatkan produksi ASI. Namun, sejauh ini manfaat pemberian ekstrak

daun katuk sebagai hepatoprotektor belum diketahui.

Berdasarkan latar belakang di atas, maka penulis ingin melakukan

penelitian untuk mengetahui manfaat lain pemberian ekstrak daun katuk

(Sauropus androgynus) yaitu sebagai hepatoprotektor yang dinilai berdasarkan

kadar SGPT tikus putih yang dipapar parasetamol dengan analisis

menggunakan metode International Federation Clinical Chemistry (IFCC).

B. Perumusan Masalah

Apakah pemberian ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) dapat

digunakan sebagai hepatoprotektor untuk mencegah kenaikan kadar SGPT

tikus putih yang dipapar parasetamol?


commit to user

4

C. Tujuan Penelitian

Untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun katuk (Sauropus

androgynus) sebagai hepatoprotektor terhadap penurunan SGPT tikus putih

yang dipapar parasetamol.

D. Manfaat Penelitian

1. Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat dipakai sebagai bahan informasi

dan bahan kajian mengenai pengaruh ekstrak daun katuk sebagai

hepatoprotektor.

2. Manfaat Aplikatif

Penelitian ini diharapkan dapat dipakai sebagai bahan acuan untuk

penelitian lebih lanjut, misalnya penelitian dengan subjek manusia.


commit to user

5

BAB II

LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka

1. Daun Katuk (Sauropus androgynus)

a. Klasifikasi

Kingdom : Plantae

Super Divisi : Spermatophyta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Sub kelas : Rosidae

Ordo : Euphorbiales

Famili : Euphorbiaceae

Genus : Sauropus

Spesies : Sauropus androgynus (L.) Merr.

(Plantamor, 2011)

b. Deskripsi Tumbuhan

Gambar 1. Daun Katuk (Sehat alam,, 2009).

5


commit to user

6

Tanaman herbal daun katuk merupakan tanaman perdu yang

tingginya bisa mencapai 3,5 meter. Tanaman daun katuk banyak

terdapat di Asia Tenggara. Tanaman ini tumbuh baik di dataran rendah

hingga 1.300 dpl. Daun katuk termasuk dalam suku menir-meniran

(Phyllanthaceae) dan sekerabat dengan menteng bumi dan ceremai

(Herbal, 2010).

Tanaman katuk tumbuh menahun (parennial), berbentuk semak

perdu dengan ketinggian antara 2,5 - 5 meter, dan merumpun. Susunan

morfologi tanaman katuk terdiri atas akar, batang, daun, bunga, buah,

dan biji. Buahnya berbentuk kecil dan berwarna putih. Daun katuk

kecil, dengan warna hijau gelap, panjangnya 5 - 6 cm. Bunga tanaman

daun katuk berwarna merah gelap atau kuning dengan bercak merah

gelap (Herbal, 2010).

Sistem perakaran tanaman katuk menyebar ke segala arah dan

dapat mencapai kedalaman antara 30 - 50 cm. Batang tanaman tumbuh

tegak dan berkayu. Pada stadium muda, batang tanaman berwarna hijau

dan setelah tua berubah menjadi kelabu keputih-putihan (Herbal, 2010).

c. Kandungan Kimia

Daun katuk mengandung energi (59 kkal/100 gr), protein (4,8

gr/100 gr), lemak (1 gr/100 gr), karbohidrat (11 gr/100 gr), dan air (17

gr/100 gr). Vitamin A yang didapat dari 100 gr daun Katuk adalah

10.370 SI, vitamin C ( 239 mg/100 gr), dan vitamin B1 (0,1 mg/100 gr).


commit to user

7

Kadar serat per 100 gram daun katuk 1,5 gram. Komposisi mineral pada

daun katuk juga tinggi, yaitu dominan kalsium (204 mg/100 gr), fosfor

(83 mg/100 gr), dan besi (2,7 mg/100 gr). Daun katuk mengandung

banyak flavonoid (831,70 mg/100 gr) (Herbal, 2010). Berdasarkan

penelitian yang dilakukan Zuhra (2008) didapatkan bahwa golongan

flavonoid utama yang terdapat dalam daun katuk adalah golongan

flavonol OH-3 tersulih atau golongan flavon.

2. Hepar

Hepar merupakan organ terbesar dalam tubuh yang beratnya rata-

rata 1,5 kg (Junqueira, 2007). Hepar menempati sebagian besar kuadran

kanan atas abdomen (hypochondriaca dextra) dan sebagian epigastrica.

Hepar memiliki dua lobus utama, lobus dextra dan sinistra (Price dan

Wilson, 2006).

Hepar mempunyai banyak faal metabolik. Hepar berfungsi dalam

metabolisme karbohidrat, lemak, dan protein, serta memiliki fungsi dalam

pembentukan empedu. Hepar juga mempunyai fungsi pertahanan tubuh,

baik dalam detoksifikasi maupun dalam fungsi imunitas (Price dan Wilson,

2006).

Sel hepar sering sekali mengalami kerusakan. Kerusakan hepar

akibat infeksi, obat, ataupun virus dapat menyebabkan kerusakan menetap

pada sel hepar yang berakibat pada peradangan (hepatitis) ataupun


commit to user

8

kematian sel (nekrosis). Salah satu penyebab kerusakan hepar adalah

senyawa radikal bebas (Sood, 2009).

Enzim-enzim yang terdapat di dalam sel hepar akan terlepas ke

dalam sirkulasi sistemik jika mengalami kerusakan. Kerusakan hepar

ditandai dengan adanya peningkatan kadar Serum Glutamate Oksaloasetat

Transaminase (SGOT), Serum Glutamate Piruvat Transaminase (SGPT),

alkali fosfatase (ALP), bilirubin total, dan protein total dalam serum

(Panjaitan et al., 2007).

Pengujian kadar SGPT dan SGOT sebagai indikasi kerusakan hepar

sampai saat ini dianggap paling praktis. Serum glutamate piruvat

transaminase terdapat di sitoplasma sel hepar (20 %) dan mitokondria sel

hepar (80 %), sedangkan SGPT hanya terdapat di sitoplasma (Giannini et

al., 2005). Pemeriksaan SGPT merupakan indikator yang spesifik terhadap

tes fungsi hepar sebab SGPT lebih dominan di hepar sedangkan SGOT

banyak terdapat pada jaringan terutama jantung, otot rangka, ginjal, dan

otak (Price dan Wilson, 2006).

Beberapa senyawa telah dibuktikan melalui penelitian ilmiah dapat

menjaga fungsi hepar, baik sebagai hepatoprotektor ataupun sebagai obat

ketika kerusakan hepar telah terjadi. Contoh senyawa tersebut adalah

karotenoid, vitamin A, vitamin C, dan vitamin E, senyawa polifenol,

flavonoid, dan kondroitin sulfat (Ha et al., 2003).


commit to user

9

3. Parasetamol

Parasetamol telah banyak digunakan dalam masyarakat sebagai obat

analgesik dan antipiretik.

a. Farmakodinamik

Efek analgesik parasetamol serupa dengan salisilat yaitu

menghilangkan atau mengurangi nyeri ringan sampai sedang.

Parasetamol menurunkan suhu tubuh dengan mekanisme yang diduga

juga berdasarkan efek sentral sepert salisilat (Wilmana dan Gunawan,

2007).

Efek antiinflamasinya sangat lemah, oleh karena itu parasetamol

tidak digunakan sebagai antireumatik. Efek iritasi, erosi, dan

perdarahan lambung tidak terlihat, demikian juga gangguan pernafasan

dan keseimbangan asam basa (Wilmana dan Gunawan, 2007).

b. Farmakokinetik

Parasetamol diabsorpsi cepat dan sempurna melalui saluran cerna.

Konsentrasi tertinggi dalam plasma dicapai dalam waktu ½ jam dan

masa paruh plasma antara 1 - 3 jam. Obat ini tersebar ke seluruh cairan

tubuh. Dalam plasma, 25 % parasetamol terikat protein plasma.

Parasetamol dimetabolisme oleh enzim mikrosom hepar. Sebagian

parasetamol (80 %) dikonjugasi dengan asam glukoronat dan sebagian

kecil lainnya dengan asam sulfat. Obat ini diekskresi melalui ginjal,

sebagian kecil sebagai parasetamol (3 %) dan sebagian besar dalam

bentuk terkonjugasi (Wilmana dan Gunawan, 2007).


commit to user

10

c. Indikasi

Khasiatnya analgetik dan antipiretik, tetapi tidak antiradang. Efek

analgetisnya diperkuat oleh kodein dan kafein (Tjay dan Raharja,

2002). Obat ini berguna untuk nyeri ringan sampai sedang seperti sakit

kepala, mialgia, nyeri persalinan, dan keadaan lain di mana aspirin

efektif sebagai analgesik. Parasetamol tidak efektif untuk mengatasi

inflamasi seperti artritis reumatoid, meskipun dapat dipakai sebagai

obat tambahan analgesik dalam terapi anti inflamasi (Katzung, 2002).

d. Efek Samping

Efek samping yang sering terjadi antara lain reaksi hipersensitivitas

dan kelainan darah (Tjay dan Raharja, 2002). Efek merugikan paling

serius akibat overdosis parasetamol akut berupa nekrosis hepar yang

fatal (Hardman et al., 2008). Hepatotoksisitas dapat terjadi pada

pemberian dosis tunggal 10 - 15 gram (200 - 250 mg/ kg BB)

parasetamol (Wilmana dan Gunawan, 2007).

4. Mekanisme Kerusakan sel hepar Akibat Paparan Parasetamol

Toksisitas dapat terjadi apabila terdapat overdosis akut dan

penggunaan dosis tunggal maksimal. Hepatotoksisitas tidak terjadi sebagai

akibat langsung dari parasetamol, tetapi melalui metabolitnya, yaitu N-

acetyl-p-benzoquinoneimine (NAPQI). N-acetyl-p-benzoquinoneimine

didetoksifikasi oleh glutation (GSH) yang kemudian membentuk konjugasi

parasetamol-GSH (Sood, 2009). Ketika terjadi dosis toksis parasetamol,

glutation hepar total menurun hingga 90 %, akibatnya metabolit parasetamol


commit to user

11

tersebut berikatan kovalen dengan protein selular. Ikatan kovalen antara

metabolit parasetamol dan protein menyebabkan sel kehilangan fungsi atau

aktivitasnya bahkan terjadi kematian sel dan lisis. Target organel sel

utamanya adalah mitokondria yang berperan dalam produksi energi serta

kontrol ion selular, sehingga terjadi transisi permeabilitas mitokondria.

Akibatnya adalah penurunan adenosine triphosphate (ATP), peningkatan

Ca2+ yang bersifat oksidan, aktivasi protease dan endonuklease, serta

kerusakan rantai DNA (James et al., 2003).

5. Stres Oksidatif

Oksigen merupakan substansi esensial karena perannya yang begitu

besar bagi metabolisme sel untuk menghasilkan energi bagi kehidupan sel

(Gitawati, 1995).

Oksigen juga memiliki potensi toksik, karena selain mendorong

terjadinya reduksi oksigen yang bertahap untuk membentuk ATP dalam

rantai transpor elektron, juga menyebabkan terbentuknya radikal oksigen

dan senyawa oksigen reaktif [Reactive Oxygen Species (ROS)] yang mampu

menyebabkan cedera sel. Contoh senyawa oksigen reaktif antara lain adalah

radikal superoksida, radikal hidroksil, hidrogen peroksida, dan radikal

peroksida. Proses-proses yang secara alami menghasilkan senyawa oksigen

reaktif adalah rantai respirasi mitokondria, reaksi oksidase, maupun pada

peristiwa fagositosis oleh granulosit sistem imun (Videla, 2009).


commit to user

12

Stres oksidatif adalah ketidakseimbangan antara produksi oksigen

reaktif dengan kemampuan sistem biologik tubuh untuk mendetoksifikasi

senyawa reaktif atau memperbaiki kerusakan sel (Otero et al., 2009).

Keadaan ini menyebabkan kelebihan radikal bebas yang akan bereaksi

dengan lemak, protein, dan asam nukleat seluler, sehingga terjadi kerusakan

lokal dan disfungsi organ tertentu. Jika stres oksidatif ini berlangsung lama,

akan menyebabkan kerusakan sel atau jaringan (Gitawati, 1995).

Stres oksidatif disebabkan oleh radikal bebas yang berlebihan. Radikal

bebas yang merupakan spesies kimiawi dengan satu elektron tak

berpasangan di orbital terluar menyebabkan radikal bebas sangat tidak stabil

dan mudah bereaksi dengan zat kimia organik maupun anorganik. Sifat ini

menimbulkan perubahan kimiawi dan dapat merusak berbagai komponen

sel. Tiga reaksi yang paling relevan dengan jejas sel yang diperantarai

radikal bebas yaitu peroksidasi lipid membran, fragmentasi DNA, dan

ikatan silang protein (Robbins et al. 2007).

Membran sel hampir seluruhnya terdiri dari protein dan lipid. Struktur

dasarnya ialah sebuah lapisan lipid bilayer dan di antara lapisan lipid bilayer

tersebut terdapat molekul besar protein globular. Sedangkan struktur dasar

dari lapisan lipid bilayer sendiri terdiri atas molekul-molekul fosfolipid

(Guyton dan Hall, 2007). Komponen terpenting membran sel adalah

fosfolipid, glikolipid, dan kolesterol. Dua komponen pertama mengandung

asam lemak tak jenuh yang sangat rawan terhadap serangan-serangan

radikal terutama radikal hidroksil dan menimbulkan reaksi rantai yang


commit to user

13

dikenal dengan nama peroksidasi lipid dan menyebabkan kerusakan

membran sel sehingga membahayakan kehidupan sel (Suryohudoyo, 2000).

Perubahan permeabilitas membran yang disebabkan peroksida lipid

mengakibatkan pengaturan ion, nutrisi sel, dan volume intra-ekstrasel

menjadi terganggu dan pada akhirnya proses metabolisme sel secara

keseluruhan menjadi terganggu (Robbins et al., 2007).

Perusakan DNA oleh radikal bebas juga dapat terjadi karena reaksi

dengan radikal hidroksil (OHˉ) yang terbentuk di dalam inti sel. Stres

oksidatif dapat memicu pelepasan ion logam di dalam sel, yang akan

berikatan dengan DNA. Ion logam tersebut dapat mengkatalis terbentuknya

OH- dari H2O2 melalui reaksi donor elektron dari ion logam kepada H2O2.

Hidroksil yang terbentuk kemudian akan segera bereaksi dengan molekul

terdekat, yang tidak lain adalah DNA itu sendiri, menyebabkan terjadinya

kerusakan DNA (Halliwell dan Gutteridge, 2001).

Bila kerusakan tidak terlalu parah, maka masih bisa diperbaiki oleh

sistem perbaikan DNA (DNA repair system). Namun apabila kerusakan

terlalu parah, misalnya DNA terputus-putus di berbagai tempat, maka

kerusakan tersebut tak dapat diperbaiki dan replikasi sel akan terganggu.

DNA yang tidak dapat diperbaiki ini sering justru menimbulkan mutasi

karena dalam memperbaiki DNA cenderung membuat kesalahan

(Suryohudoyo, 2000).

Radikal bebas juga akan mencetuskan ikatan silang protein yang

diperantarai sulfhidril, menyebabkan peningkatan kecepatan degradasi atau


commit to user

14

hilangnya aktivitas enzimatik. Reaksi radikal bebas juga bisa secara

langsung menyebabkan fragmentasi polipeptida (Robbins et al.,2007).

Radikal bebas memang tidak stabil, dan umumnya rusak secara

spontan. Sel juga membentuk beberapa sistem enzimatik dan non enzimatik

untuk menonaktifkan radikal bebas yaitu melalui kerja superoksida

dismutase (SOD), glutation (GSH) peroksidase, katalase, dan antioksidan

(Robbins et al., 2007).

Superoksida dismutase terdapat dalam sitosol dan mitokondria.

Enzim ini dapat mengkonversi 2 molekul superoksida menjadi hidrogen

peroksida dan oksigen. Dismutasi anion superoksida menjadi hidrogen

peroksida dan oksigen ini sering disebut sebagai pertahanan pertama

terhadap stres oksidatif karena superoksida merupakan inisiator kuat

berbagai reaksi berantai. Glutation (GSH) peroksidase akan melindungi sel

supaya tidak mengalami jejas dengan mengatalisis perusakan radikal bebas

[2OH- + 2GSH → 2H2O + GSSG (glutation homodimer)]. Katalase terdapat

dalam peroksisom dan akan mendegradasi hidrogen peroksida (2H2O2→ O2

+ 2H2O). Antioksidan endogen atau eksogen (misal: vitamin E, A, C, serta

β-karoten) juga dapat menghambat pembentukan radikal bebas atau

mengikat radikal bebas ketika selesai dibentuk (Robbins et al.,2007).

6. Antioksidan

Terdapat dua bentuk reaksi kimia, oksidasi dan reduksi. Oksidasi

adalah pelepasan elektron sedangkan pada reduksi terjadi penambahan


commit to user

15

jumlah elektron. Oksidasi dan reduksi selalu berpasangan, ketika salah satu

atom atau molekul teroksidasi maka yang lain akan tereduksi. Molekul yang

sangat reaktif seperti radikal bebas, dapat mengoksidasi molekul yang stabil

dan merubahnya menjadi bagian yang tidak stabil (McDermott, 2000).

Cara kerja senyawa antioksidan adalah bereaksi dengan radikal bebas

reaktif membentuk radikal bebas tak reaktif yang relatif stabil. Antioksidan

menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang

dimiliki radikal bebas, dan menghambat terjadinya reaksi berantai dari

pembentukan radikal bebas (McDermott, 2000).

Tubuh manusia menghasilkan senyawa antioksidan, tetapi jumlahnya

sering kali tidak cukup untuk menetralkan radikal bebas yang masuk ke

dalam. Glutation adalah salah satu antioksidan alami yang dibentuk oleh

tubuh. Glutation memiliki peran penting dalam fungsi biologis, termasuk

transport membran, detoksifikasi, dan perlindungan sel dari radikal bebas

(Adams, 2009).

Berdasarkan cara kerjanya dapat digolongkan menjadi tiga kelompok

yaitu: antioksidan primer, sekunder, dan tersier. Antioksidan primer ialah

golongan antioksidan yang berfungsi untuk mencegah pembentukan radikal

bebas baru dan mengubah radikal bebas yang ada menjadi molekul yang

berkurang dampak negatifnya sebelum radikal bebas ini sempat bereaksi,

misalnya enzim SOD dan selenium. Antioksidan sekunder ialah golongan

antioksidan yang berfungsi menangkap senyawa serta mencegah terjadinya

reaksi berantai, misalnya vitamin E, vitamin C, beta karoten, asam sitrat,


commit to user

16

bilirubin, dan albumin. Antioksidan tersier adalah golongan antioksidan

yang berfungsi memperbaiki kerusakan sel-sel dan jaringan tubuh yang

disebabkan radikal bebas (Nurwati, 2007).

Secara alami beberapa jenis tumbuhan merupakan sumber

antioksidan, hal ini dapat ditemukan pada beberapa jenis sayuran, buah-

buahan segar, beberapa jenis tumbuhan, dan rempah-rempah. Jenis

antioksidan yang dapat ditemukan pada tumbuhan antara lain adalah asam

lemak omega-3, beta karoten, alfa tokoferol, asam askorbat, dan glutation

(Simopoulos, 2004).

7. Daun Katuk sebagai Antioksidan

Pada penelitian ini digunakan parasetamol sebagai induktor

kerusakan hati. Partasetamol adalah obat analgetik dan antipiretik yang

sering digunakan dan tidak berbahaya bila dosisnya tidak berlebihan, namun

dapat menyebabkan hepatotoksisitas apabila dikonsumsi dalam dosis

berlebihan (Farrell, 2010).

Hepatotoksisitas berhubungan dengan produksi metabolit yang

sangat reaktif yaitu NAPQI. Peningkatan produksi NAPQI akan

menyebabkan akumulasi NAPQI intraseluler (Dephour et al., 1999). N-

asetil-p-benzoquinoneimine kemudian bereaksi dengan glutation

membentuk konjugat 3 – gluthatione - Syl yang diekskresi lewat urin dan

empedu. Jumlah NAPQI yang berlebihan menyebabkan glutation dalam

hepar habis dan NAPQI bereaksi dengan makromolekul dalam sel hepar


commit to user

17

misalnya protein dan lipid membran sel sehingga menyebabkan kerusakan

hepar (Song Chow Lin et al., 1995). Sel hepar yang rusak melepaskan

faktor-faktor yang menarik dan mengaktivasi makrofag hepar menyebabkan

nekrosis sel (Dehpour et al., 1999). Sel hepar yang rusak akan melepaskan

enzim-enzim yang menandai kerusakan tersebut di antaranya SGPT dan

SGOT (Amirudin, 2007). Serum glutamate piruvat transaminase ditemukan

dalam jumlah sedikit pada otot jantung, ginjal, serta otot rangka, sehingga

lebih efektif untuk mendiagnosis destruksi hepatoselular dibanding dengan

SGOT dan akan meningkat lebih khas daripada SGOT dalam kasus nekrosis

hari (Kee, 2007).

Kandungan daun katuk yang dapat digunakan sebagai antioksidan

adalah flavonoid, vitamin C, dan vitamin A. Flavonoid termasuk metabolit

sekunder tumbuhan yang merupakan golongan terbesar senyawa fenol alam.

Flavonoid merupakan antioksidan yang memberikan perlindungan terhadap

agen oksidatif dan radikal bebas. Sebagai antioksidan, flavonoid akan

menangkap radikal bebas dengan melepaskan atom hidrogen dari gugus

hidroksilnya. Pemberian atom hidrogen ini menyebabkan radikal bebas

menjadi stabil dan berhenti melakukan gerakan radikal, sehingga tidak

merusak lipida, protein dan DNA (Nurwati, 2007). Flavonoid juga akan

melindungi sel melalui mekanisme yang lain, yaitu dengan meningkatkan

kadar glutation (WHFoods, 2011).


commit to user

18

Gambar 2. Struktur Flavonoid (C28H34O15)

Vitamin C dalam daun katuk mampu berperan sebagai antioksidan

pemecah rantai yang hidrofilik. Vitamin C juga merupakan prooksidan yaitu

zat yang selain berfungsi sebagai antioksidan juga sebagai oksidan yang

kurang reaktif. Asam askorbatnya sendiri setelah teroksidasi akan menjadi

radikal dehidroaskorbat dan kemudian akan menjadi asam askorbat kembali

setelah mendapat ion hidrogen dari NADH atau pembawa hidrogen lainnya.

Vitamin C sangat efektif sebagai antioksidan pada konsentrasi tinggi.

Pemberian dosis tinggi vitamin C akan mengurangi lipid peroksida sebab

vitamin C akan mereduksi ion ferro menjadi ion ferri, sedangkan rasio ion

ferro/ion ferri berpengaruh pada proses terjadinya lipid peroksidasi

(Nurwati, 2007).

Gambar 3. Struktur Vitamin C (C6H8O6)

Vitamin A berfungsi untuk penjagaan integritas sel epitelial membran

mukosa gastrointestinal, kornea, pernapasan, saluran genitourinaria, dan

juga integritas kulit. Kandungan vitamin A yang tinggi dalam daun katuk ini

dapat mempertahankan integritas seluler dan mengurangi kerusakan sel

(Kee, 2007).


commit to user

19

Ekstrak dauk katuk juga mengandung kalsium yang terkenal karena

perannya dalam mempertahankan kekuatan dan kepadatan tulang. Namun,

kalsium juga banyak berperan dalam banyak aktivitas fisiologis yang tidak

berhubungan dengan tulang, misalnya penganturan aktivitas enzim, fungsi

membran sel, konduksi saraf, dan kontraksi otot (WHFoods, 2011).

Berdasarkan mekanisme perlindungan sel yang dijelaskan di atas,

maka kerusakan sel lebih lanjut dapat dicegah dan dihalangi. Flavonoid

sebagai antioksidan akan meningkatkan total antioxidant untuk

berkonjugasi dengan NAPQI dan tidak terjadi ikatan antara NAPQI dengan

makromolekul hepatosit (Fraschini, 2002). Ketika kerusakan sel terhambat

maka kadar SPGT sebagai indikator kerusakan sel-sel hepar akan normal

dan lebih rendah dibanding kadar SGPT hepar yang telah terganggu oleh

NAPQI.


commit to user

20

B. Kerangka Pemikiran

Memperkuat integritas sel

Parasetamol dosis berlebih

Ikatan kovalen dgn makromolekul

hepar

Ekstrak Daun Katuk

Meningkatkan NAPQI

(elektrofilik)

Deplesi glutathione

Bioaktivasi sitokrom P450

Kerusakan makromolekul

Lipid peroxide

Radical Oxygen Species (ROS)

Stres oksidatif

Kerusakan sel hepar SGPT

Peningkatan Total Antioxidant Status

(TAS)

Kerusakan sel hati hepar

Faktor-faktor lain yang dapat menyebabkan kerusakan sel hati: - Obat-obatan - Infeksi mikroorganisme - Virus

Tikus Putih

Diberi paparan

Flavonoid

Meningkatkan glutation

Vitamin C Vitamin A

Kalsium

Donor elektron

Keterangan:

: memacu

: menghambat


commit to user

21

C. Hipotesis

Pemberian ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) dapat digunakan

sebagai hepatoprotektor untuk mencegah kenaikan kadar SGPT tikus putih



commit to user

22

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik.

B. Lokasi Penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran

Universitas Sebelas Maret Surakarta.

C. Subjek Penelitian

Subjek penelitian adalah tikus putih (Rattus norvegicus) galur Wistar

dengan jenis kelamin jantan, umur 6-8 minggu, berat badan kurang lebih

150 gram, dan sehat.

Sampel akan di bagi dalam empat kelompok. Jumlah sampel dihitung

dengan rumus Federer:

(k-1) (n-1) > 15

(4-1) (n-1) > 15

3 ( n-1) > 15

3n > 15+3

n > 6

Keterangan :

k : Jumlah kelompok

n : Jumlah sampel dalam tiap kelompok (Purawisastra, 2001)

22


commit to user

23

Peneliti menggunakan 7 ( n > 6) ekor tikus putih untuk tiap kelompok,

sehingga jumlah sampel dalam penelitian ini adalah 28 ekor tikus putih

(Rattus norvegicus).

D. Teknik Sampling

Pengambilan sampel hewan uji dilakukan dengan non probability

incidental sampling, sedangkan pembagian subjek ke dalam kelompok

menggunakan randomisasi.

E. Desain Penelitian

Rancangan penelitian ini adalah the posttest only control group design

(Taufiqqurohman, 2003).

KK : (-) O0

KP1: (X 1) O1

KP2: (X 2) O2

KP3 :(X 3) O3

Keterangan :

KK : (-) = Kelompok kontrol tanpa diberi ekstrak daun katuk maupun

parasetamol.

KP1: (X1) = Kelompok perlakuan I yang diberi parasetamol tanpa

diberi ekstrak daun katuk.

KP2:(X2) = Kelompok perlakuan II yang diberi parasetamol dan diberi

ekstrak daun katuk dosis I (12,15 mg/150 gr BB tikus)

Sampel Tikus

Putih 28 ekor

Bandingkan dengan uji

statistik


commit to user

24

KP3 : (X 3) = Kelompok perlakuan III yang diberi parasetamol dan

diberi ekstrak daun katuk dosis II (24,30 mg/150 gr BB

tikus)

O0 = Kadar SGPT tikus kelompok kontrol.

O1 = Kadar SGPT tikus KP1.

O2 = Kadar SGPT tikus KP2.

O3 = Kadar SGPT tikus KP3

Pengamatan kadar SGPT dilakukan pada hari ke-14

F. Identifikasi Variabel Penelitian

1. Variabel Bebas: ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus)

2. Variabel Terikat: kadar SGPT tikus putih

3. Variabel luar :

a. dapat dikendalikan :

1) makanan dan minuman

2) jenis kelamin

3) usia

4) berat badan

b. tidak dapat dikendalikan :

1) sistem imun hewan uji

2) kondisi psikologis hewan uji/stres


commit to user

25

G. Definisi Operasional Variabel Penelitian

1. Ekstrak daun katuk

Ekstrak daun katuk yang dipakai dalam penelitian ini diperoleh dari

LPPT UGM. Pembuatan ekstrak menggunakan metode perkolasi dengan

cairan penyari ethanol 70 %. Ekstrak daun katuk ini diberikan peroral

sekali dalam sehari menggunakan sonde lambung. Dalam penelitian ini

digunakan dua dosis ekstrak daun katuk, yakni 12,15 mg/ 150 gr BB

tikus dan 24,30 mg/ 150 gr BB tikus dalam 1 hari. Ekstrak daun katuk ini

diberikan selama 13 hari.

Skala variabel ekstrak daun katuk merupakan skala ordinal.

2. Kadar SGPT

Kadar Serum Glutamate Piruvat Transaminase (SGPT) ditentukan

dengan menggunakan alat Model 902 Automatic Analyzer Hitachi.

Pengambilan darah tikus dilakukan dengan menggunakan mikrokapiler

melalui sinus orbitalis.

Skala variable kadar SGPT merupakan skala rasio.

H. Alat dan Bahan Penelitian

1. Alat

a. Kandang tikus putih beserta kelengkapan pemberian makan. Ukuran:

35 cm x 25 cm x 12 cm

b. Timbangan tikus (DAEMA)

c. Tabung mikrokapiler untuk mengambil sampel darah. Panjang tabung

75 mm dan diameter 1,5 mm


commit to user

26

d. Sonde lambung ukuran 3 ml dengan ketelitian 0,1 ml

2. Bahan

a. Ekstrak daun katuk

b. Parasetamol

c. Makanan pelet (AD II)

d. Aquades

I. Cara Kerja

1. Langkah I: Persiapan Hewan Uji

Penelitian dilakukan menggunakan tikus putih (Rattus norvegicus)

jantan sebagai hewan uji. Tikus jantan dapat memberikan hasil

penelitian yang lebih stabil karena tidak dipengaruhi oleh adanya siklus

mentruasi dan kehamilan (hormonal) seperti pada tikus betina. Tikus

jantan juga memiliki kecepatan metabolisme yang lebih cepat dan

kondisi biologis yang lebih stabil.

Sampel tikus putih dibagi menjadi 4 kelompok masing-masing 7

ekor secara acak (random sederhana). Sampel dilakukan adaptasi di

Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret

selama 7 hari dengan diberi makan pelet dan minum air.

2. Langkah II: Pemberian Ekstrak Daun Katuk

Pada penelitian yang pernah dilakukan dengan menggunakan daun

katuk, disebutkan bahwa konsumsi ekstrak daun katuk yang dipakai

adalah 900 mg (Sa’roni, 2004). Maka dapat disimpulkan bahwa dosis

yang dibutuhkan tikus putih dengan angka konversi 0,018 terhadap


commit to user

27

manusia dengan berat manusia 70 Kg adalah 0,018 x 900 mg = 16,2

mg/200 gr BB tikus putih. Ekstrak daun katuk yang didapat dari LPPT

UGM adalah sebanyak 54,24 gr dan dilarutkan dalam pelarut CMC

(Carboxy methyl Cellulose) 0,5 %, maka agar didapatkan 12,15 mg/mL

dan 24,30 mg/mL, ekstrak daun katuk dilarutkan dengan penambahan

CMC 0,5 %.

Pengenceran:

Dosis I : 12,150 mg/mL (untuk tikus BB 150 gram)

2,340 gram ekstrak daun katuk ditambah CMC 0,5 %

diaduk sampai homogen sampai volume 200 mL.

Dosis II : 24,3 (untuk tikus BB 150 gram)

4,860 gram ekstrak daun katuk ditambah CMC 0,5 %

diaduk sampai homogen sampai volumen 200 mL.

Tikus putih yang akan diberi perlakuan dipuasakan dahulu

selama 5 jam untuk mengosongkan lambungnya

3. Langkah III: Pemberian parasetamol

Parasetamol adalah obat yang dapat mengakibatkan

hepatotoksisitas. Dosis toksis parasetamol pada manusia adalah 10 - 15

gram (Wilmana, 2007). Dosis toksik yang akan dipakai adalah 15 gr,

maka dosis parasetamol untuk tikus putih berdasarkan tabel konversi

manusia dengan berat badan 70 kg dan faktor konversi tikus putih 0,018

adalah 0,018 x 15 gr = 0,27 gr/200 gr BB tikus putih (Azizi, 2009).


commit to user

28

Suspensi parasetamol dibuat dengan cara melarutkan parasetamol ke

dalam CMC 0,5 %.

Ǵ逛ꅐޘ150 Ǵ逛ꅐޘǴ逛ꅐ200ޘ0,27 实0,202ޘǴ逛ꅐ Jika pada pemberian parasetamol dilarutkan dengan CMC 0,5 %

dan suspensi parasetamol yang dibutuhkan sebanyak 50 ml, maka

parasetamol yang dibutuhkan sebanyak:

50ꅐ癸 ꅐ癸Ǵ逛ꅐ1ޘ0,202 实10,125ޘǴ逛ꅐ Jadi untuk mendapatkan dosis 0,202 gr/150 gr BB tikus putih,

10,125 gram parasetamol dilarutkan dengan 50 ml CMC 0,5 %.

4. Langkah IV: Perlakuan Hewan Uji

Hewan uji yang telah dibagi dalam empat kelompok diberi

perlakuan berbeda dengan langkah sebagai berikut:

a. Kelompok kontrol (KK), terdiri dari 7 ekor tikus putih yang diberi

diet standar, yaitu pelet dan air selama 13 hari.

b. Kelompok perlakuan I (KP1), terdiri dari 7 ekor tikus putih yang

diberi diet standar, yaitu pelet dan air selama 13 hari. Pada hari ke 11

– 13, diberikan 1 ml suspensi parasetamol per oral dengan dosis

0,202 gr/150 gr BB per hari.

c. Kelompok perlakuan II (KP2), terdiri dari 7 ekor tikus putih yang

diberi diet standar, yaitu pelet dan air serta 1 ml larutan ekstrak daun

katuk per oral dengan dosis 12,15 mg/150 g BB selama 13 hari. Pada


commit to user

29

hari ke 11 – 13, diberikan 1 ml suspensi parasetamol per oral dengan

dosis 0,202 gr/150 gr BB per hari satu jam setelah pemberian ekstrak

daun katuk.

d. Kelompok perlakuan III (KP3), terdiri dari 7 ekor tikus putih yang

diberi diet standar, yaitu pelet dan air serta 2 ml larutan ekstrak daun

katuk per oral dengan dosis 24,30 mg/150 gr BB selama 13 hari.

Pada hari ke 11 – 13, diberikan 1 ml suspensi parasetamol per oral

dengan dosis 0,202 gr/150 gr BB satu jam setelah pemberian ekstrak

daun katuk.

5. Langkah V: Pengukuran hasil

Pada hari ke-14 setelah perlakuan dengan ekstrak daun katuk

semua tikus diambil darahnya menggunakan tabung mikrokapiler

sebanyak 2 ml.

Pemeriksaaan SGPT menggunakan metode IFCC (International

Federation Clinical Chemistry) dengan alat Model 902 Automatic

Analyzer Hitachi di Laboratorium Klinik Budi Sehat Surakarta.


commit to user

30

Skema Rancangan Penelitian

J. Teknik Analisis Data Statistik

Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan Uji Oneway

Analysis of Variant (ANOVA). Jika terdapat perbedaan yang bermakna

maka dilanjutkan dengan Post Hoc Test. Derajat kemaknaan yang

digunakan adalah α = 0,05 (Riwidikdo, 2007).

Sampel 28 ekor tikus putih

Adaptasi sampel 7 hari

P e r l a k u a n h a r i k e 1 – 1 3

Kelompok Kontrol

Kelompok Perlakuan 1



Dipuasakan ± 5 jam

1 ml CMC 0,5 % 1 ml larutan ekstrak daun katuk dosis

12,15 mg/150 gr BB

1 ml larutan ekstrak daun katuk dosis

24,30 mg/150 gr BB

P e r l a k u a n h a r i 1 1 - 1 3

Parasetamol dosis toksik 0,202 gr/ 150 gr BB tikus putih dalam suspense 1 ml setelah 1 jam pemberian ekstrak

Pada hari ke-14 dilakukan analisis kadar SGPT Tikus putih


commit to user

31

BAB IV

HASIL PENELITIAN

A. Hasil Penelitian

Penelitian ini menggunakan 28 ekor tikus putih (Rattus norvegicus), galur

Wistar, jenis kelamin jantan, usia 6 - 8 minggu, berat badan ±150 gram, dan

sehat. Tikus-tikus tersebut dibagi secara acak menjadi 4 kelompok yaitu

kelompok I yang menjadi kelompok kontrol, kelompok II yang diberi

parasetamol, kelompok III yang diberi parasetamol dan ekstrak daun katuk

dosis 12,15 mg/150 gr BB, dan kelompok IV yang diberi parasetamol dan

ekstrak daun katuk dosis 24,30 mg/2150 gr BB.

Sebelum dilakukan pemberian perlakuan, keempat kelompok tikus

diadaptasikan selama 1 minggu dan diukur berat badannya. Rerata berat badan

tikus adalah 150 gram. Pada hari ke-14 keempat kelompok tikus diambil

sampel darah dan diperiksa kadar SGPT dengan metode International

Federation Clinical Chemistry (IFCC).

Tabel 1. Kadar SGPT Tikus Putih Setelah Pemberian Perlakuan

Kelompok N Rerata Kadar SGPT ± SB ( IU/L)

Kelompok I 7 97,77 ± 16,74

Kelompok II 7 279,41 ± 188,94

Kelompok III 7 223,87 ± 145,86

Kelompok IV 7 129,53 ± 24,93

31


commit to user

32

Sumber: Data primer 2011

Gambar 4. Diagram Batang Perbedaan Rerata kadar SGPT Tikus Setelah Pemberian Perlakuan pada Kelompok I, Kelompok II, Kelompok III, dan Kelompok IV.

Rerata kadar SGPT tikus putih pada gambar 4 menunjukkan hasil

pemeriksaan SGPT setelah perlakuan. Kadar SGPT tertinggi terlihat pada

kelompok II, sedangkan kadar SGPT terendah yaitu kelompok I. Hasil rerata

kadar SGPT di atas kemudian dianalisis secara statistik untuk mengetahui

apakah perbedaan tersebut signifikan.

B. Analisis Data

Analisis data hasil penelitian ini dilakukan dengan menggunakan bantuan

program SPSS for Windows versi 19.0. Uji normalitas terhadap data primer

hasil penelitian dilakukan untuk mengetahui sebaran data penelitian. Oleh

karena jumlah data sampel pada penelitian ini kurang dari 50 data sampel,

peneliti melakukan uji normalitas menggunakan uji Shapiro-Wilk. Dari hasil

uji normalitas data Shaphiro-Wilk didapatkan bahwa sebaran data memiliki

distribusi yang tidak normal (Lampiran 8).

0

50

100

150

200

250

300

Kelompok I Kelompok II Kelompok III Kelompok IV

Kadar SGPT


commit to user

33

Hasil uji homogenitas varians data penelitian dengan menggunakan

Levene test menunjukkan nilai p = 0,001 (p < 0,05), sehingga dapat

diasumsikan bahwa data kadar SGPT tikus putih tidak homogen.

Berdasarkan hasil uji ANOVA yang dilakukan terhadap seluruh

kelompok sampel dalam lampiran 10, diperoleh nilai probabilitas adalah 0,034

(p < 0,05). Ho ditolak dan H1 diterima sehingga terdapat perbedaan rerata

kadar SGPT yang bermakna secara statistik setelah pemberian perlakuan di

antara keempat kelompok.

Untuk mengetahui lebih jelas letak perbedaan yang bermakna di antara

kelompok sampel, maka peneliti melanjutkan analisis data menggunakan Post

Hoc Test. Dari analisis Post Hoc Test didapatkan hasil sebagai berikut:

Tabel 2. Hasil Post Hoc Test (Dunnett T3) Kadar SGPT Tikus Putih

Kelompok

Pembanding

Kelompok yang

Dibandingkan

Nilai P Keterangan

Kelompok 1 Kelompok 2 .191 Tidak Signifikan






Sumber: Data primer 2011


commit to user

34

BAB V

PEMBAHASAN

Penelitian pengaruh ekstrak daun katuk (Sauropus androgynous) sebagai

hepatoprotektor terhadap kadar SGPT tikus putih (Rattus norvegicus) yang

dipapar parasetamol menggunakan 4 kelompok tikus masing-masing 7 ekor tikus

yang diberi perlakuan berbeda. Untuk menilai apakah terdapat perbedaan yang

signifikan antara kadar SGPT pada antarkelompok, maka kadar SGPT keempat

kelompok dianalisis secara statistik dengan uji normalitas dan uji homogenitas

lalu dilanjutkan dengan uji ANOVA.

Kelompok perlakuan I yang mendapat paparan suspensi parasetamol

selama 13 hari memiliki kadar SGPT paling tinggi yaitu 279,41 IU/L. Tingginya

kadar SGPT pada kelompok ini terjadi karena kerusakan sel hepar yang

disebabkan oleh paparan parasetamol dosis toksis. Parasetamol memiliki hasil

metabolisme yang merupakan radikal bebas bagi tubuh yaitu N-asetyl-p-

benzoquinoneimine (NAPQI) (Farrel, 2010). Ketika terjadi dosis toksis

parasetamol, glutation hepar sangat menurun sehingga NAPQI berikatan kovalen

dengan protein selular dan menyebabkan sel kehilangan fungsi atau aktivitasnya

bahkan lisis.

Target organel sel utama adalah mitokondria sehingga produksi energi

serta kontrol ion selular terganggu (James et al., 2003). Adanya kerusakan sel-sel

hepar karena proses di atas akan menyebabkan enzim SGPT yang terdapat dalam

sel hepar terlepas ke dalam sirkulasi sistemik yang tampak dengan meningkatnya

kadar SGPT darah (Panjaitan et al., 2007).

34


commit to user

35

Kelompok perlakuan II yaitu kelompok yang diberi ekstrak daun katuk

dosis 12,15 mg/150 gr BB dan parasetamol memiliki rerata kadar SGPT 223,87

IU/L. Kelompok ini pada awalnya diperkirakan akan menunjukkan kadar SGPT

yang jauh lebih rendah daripada kelompok perlakuan I. Hasilnya, walaupun kadar

SGPT kelompok ini lebih rendah dari kelompok perlakuan I namun tidak

menunjukkan penurunan kadar SGPT yang bermakna secara statistik. Hal ini

dimungkinkan karena pemberian ekstrak daun katuk dosis I masih kurang adekuat

sebagai hepatoprotektor.

Kelompok perlakuan III yaitu kelompok yang diberi ekstrak daun katuk

dosis II dan suspensi parasetamol memiliki rerata kadar SGPT 129,53 IU/L. Pada

kelompok ini tampak efek NAPQI sebagai agen hepatotoksik dicegah dengan

pemberian ekstrak daun katuk yang mengandung flavonoid, vitamin C, vitamin A,

dan kalsium yang telah banyak diteliti sebagai antioksidan kuat. Antioksidan

mampu mengubah oksidan menjadi molekul yang tidak berbahaya. Antioksidan

juga mampu mencegah pembentukan radikal bebas dan memperbaiki kerusakan

yang ditimbulkannya (Nurwati, 2007).

Hasil uji ANOVA menunjukkan nilai p = 0,034 (p < 0,05), Ho ditolak

sehingga terdapat perbedaan rerata kadar SGPT yang signifikan secara statistik di

antara keempat kelompok hewan coba. Data kemudian diolah dengan

menggunakan Post Hoc Test dan tidak didapatkan perbedaan rerata kadar SGPT

yang signifikan antara masing-masing kelompok.

Berdasarkan hasil analisis statistik di atas, tidak didapatkan perbedaan

yang bermakna antara kelompok I dengan kelompok II, antara kelompok I dengan


commit to user

36

kelompok III, antara kelompok I dengan kelompok IV, antara kelompok II dengan

III, antara kelompok II dengan IV, dan antara kelompok III dengan IV, sehingga

pada penelitian ini tidak dapat disimpulkan bahwa pemberian ektrak daun katuk

dapat mencegah kenaikan kadar SGPT tikus putih. Sebenarnya terdapat

penurunan rerata kadar SGPT pada kelompok ekstrak daun katuk dosis 12,15

mg/150 gr BB tikus dan dosis 24,30 mg/150 gr BB jika dibandingkan dengan

kelompok parasetamol namun hasil tersebut tidak signifikan secara statistik.

Bila diinjau dari aktivitas ekstrak daun katuk, efek proteksi yang

ditimbulkan oleh ekstrak daun katuk ini karena kandungan zat antioksidan yang

dikandungnya, terutama flavonoid. Flavonoid merupakan antioksidan yang

memberikan perlindungan dari agen oksidatif dan radikal bebas dengan cara

melepas atom hidrogen dari gugus hidroksilnya dan menangkap radikal bebas

(Nurwati, 2007). Flavonoid juga melindungi sel dengan cara meningkatkan

glutation (WHFoods, 2011). Dengan sifat flavonoid yang demikian, maka

flavonoid akan mencegah ikatan antara NAPQI dengan protein selular hepar dan

kerusakan hepar lebih lanjut tidak terjadi. Menurut penelitian Eti Yerizel (1998),

terdapat efek hepatoprotektor yang nyata dari senyawa flavonoid.

Ekstrak daun katuk juga memiliki kandungan vitamin C (Herbal, 2010).

Vitamin C akan mengurangi lipid peroksidasi akibat stres oksidatif yang

berpotensi menimbulkan kerusakan lebih lanjut (Nurwati, 2007). Ekstrak daun

katuk juga mengandung vitamin A dan kalsium yang dapat memperkuat integritas

sel (WHFoods).


commit to user

37

Adanya berbagai kandungan zat antioksidan dalam ekstrak daun katuk di

atas dapat melindungi serta meningkatkan kemampuan tubuh dalam mencegah

kerusakan dan kematian sel akibat stres oksidatif yang ditimbulkan dari paparan

radikal bebas NAPQI hasil metabolit parasetamol sehingga kerusakan sel hepar

dapat ditekan. Hal ini dibuktikan dengan kadar SGPT pada kelompok perlakuan

yang mendapat ekstrak daun katuk lebih rendah dari kelompok yang hanya

mendapat paparan parasetamol. Walaupun rerata kadar SGPT kelompok yang

mendapat ekstrak daun katuk lebih rendah daripada kelompok yang hanya

mendapat parasetamol, hasil perhitungan statistik menunjukkan nilai probabilitas

yang tidak signifikan.

Berdasarkan teori, seharusnya kelompok tikus putih yang mendapat

ekstrak daun katuk dosis 12,15 mg/150 gr BB tikus dan 24,30 mg/ 150 gr BB

tikus mampu menunjukkan efek mencegah kenaikan kadar SGPT yang signifikan

bila dibandingkan dengan kelompok tikus putih yang hanya mendapatkan

parasetamol. Hal ini diduga karena zat-zat bioaktif yang terkandung dalam larutan

ekstrak daun katuk yang dipakai dalam penelitian ini mengalami kerusakan akibat

fase penyimpanan yang kurang tepat. Pembuatan larutan ekstrak daun katuk yang

diencerkan dari sediaan ekstrak daun katuk kental oleh peneliti dibuat untuk

dipakai dalam perlakuan selama 7 hari, sehingga dimungkinkan fase penyimpanan

ini merusak kandungan antioksidan dan zat-zat bioaktif lainnya, karena

antioksidan akan berfungsi dengan baik bila diberikan dalam bentuk siap pakai

atau langsung dari proses pembuatan larutannya (Filippone,2010). Tikus putih

yang digunakan dalam penelitian ini juga sangat dimungkinkan mengalami stres


commit to user

38

yang cukup tinggi. Hal ini bisa disebabkan karena kondisi ruangan yang kurang

ideal bagi tikus untuk hidup. Ventilasi ruangan yang kurang baik dapat

menyebabkan tikus menjadi stres. Penyondean suspensi parasetamol dan ekstrak

daun katuk selama 13 hari yang diberikan secara oral juga turut berperan dalam

menyebabkan tikus menjadi stres. Stres akan menyebabkan ujung-ujung saraf

mengirimkan sinyal ke hipofisis sebagai alarm, selanjutnya mengirimkan

sinyalnya ke kelenjar anak ginjal untuk melepaskan hormon kortisol. Kortisol

mempunyai efek menghambat sistem imun sehingga tubuh semakin rentan

terhadap penyakit (Corwin, 1996).


commit to user

39

BAB VI

SIMPULAN DAN SARAN

A. SIMPULAN

1. Pemberian ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) tidak signifikan

untuk mencegah kenaikan kadar SGPT tikus putih (Rattus norvegicus)


2. Tidak ada perbedaan pengaruh pemberian ekstrak daun katuk

(Sauropus androgynus) yang signifikan antara dosis 12,15 mg/150

gram BB/hari dengan dosis 24,30 mg/150 gram BB/hari.

B. SARAN

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai efek hepatoprotektor

ekstrak daun katuk dengan variasi dosis dan waktu pemberian ektrak

yang berbeda.

2. Diharapkan dapat dilakukan penelitian tentang pengaruh ekstrak daun

katuk dan paparan parasetamol terhadap parameter kerusakan hepar

lainnya, seperti bilirubin total, alkali fosfatase (ALP), dan albumin

total dalam serum.

3. Perlu diperhatikan mengenai fase penyimpanan ekstrak daun katuk

yang benar.

4. Kadar zat antioksidan dalam ekstrak daun katuk dapat diketahui

dengan metode spektofotometri

5. Perlu disediakan tempat perlakuan penelitian yang kondusif.

39

Documents

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id PENGARUH EKSTRAK .../Pengaruh... · Salah satu contoh obat yang dapat menimbulkan kerusakan hepar adalah parasetamol (Mehta, 2010). Parasetamol