EFEK ANALGESIK EKSTRAK METANOL-AIR DAUNMacaranga tanarius L. PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh:

Aryanti Prima Andini

NIM: 078114080

FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA2010

EFEK ANALGESIK EKSTRAK METANOLMacaranga tanarius

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

i

EFEK ANALGESIK EKSTRAK METANOL-AIRMacaranga tanarius L. PADA MENCIT BETINA GALUR

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Oleh:

Aryanti Prima Andini

NIM : 078114080

FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA2010

AIR DAUNL. PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

ii

iii

iv

HALAMAN PERSEMBAHAN

“Kan kubayar mahal segala usahaku

dengan pengakhiran yang indah”

Karya ini kupersembahkan untuk :

Allah SWT sumber kekuatanku,

keluargaku tercinta motivatorku,

pembimbingku tercinta Phebe Hendra,

penyemangatku Dina Wulandari dan Andreas Arry Mahendra,

seluruh warga dan rekan Farmasi USD, dan Almamaterku

Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

v

vi

vii

viii

ix

x

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL………………………………………………………........... i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING……………………………......... ii

HALAMAN PENGESAHAN……………………………………………............. iii

HALAMAN PERSEMBAHAN…………………………………………….......... iv

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI …………………………......... v

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA………..………………………………... vi

PRAKATA…………………………………………………………………........... vii

DAFTAR ISI………………………………………………………………........... x

DAFTAR TABEL…………………………………………………………............ xiii

DAFTAR GAMBAR............................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………………............ xv

INTISARI…………………………………………………………………............. xvi

ABSTRACT………………………………………………………………................xvii

BAB I. PENGANTAR……………………………………………......................... 1

A. Latar Belakang…………………………………………..………………............ 1

1. Permasalahan.......…………………………………......……….................... 4

2. Keaslian Penelitian…………………………………………….......………. 4

3. Manfaat Penelitian…………………………………………………………. 5

B. Tujuan Penelitian.................................................................................................. 6

1. Tujuan umum….............................................................................................6

xi

2. Tujuan khusus................................................................................................ 6

BAB II. PENELAHAAN PUSTAKA..................................................................... 7

A. Tanaman M. tanarius ........................................................................................... 7

1. Keterangan botani ......................................................................................... 7

2. Morfologi....................................................................................................... 7

3. Kandungan kimia…………………………………………….......................7

4. Khasiat dan kegunaan .................................................................................. 9

5. Ekologi penyebaran dan budidaya ............................................................... 9

B. Metode Penyarian................................................................................................. 10

C. Nyeri..................................................................................................................... 11

D. Analgesik.............................................................................................................. 15

E. Metode Pengujian Efek Analgesik....................................................................... 15

F. Asetosal………………………............................................................................. 17

G. Landasan Teori..................................................................................................... 17

H. Hipotesis .............................................................................................................. 19

BAB III. METODE PENELITIAN......................................................................... 20

A. Jenis dan Rancangan Penelitian........................................................................... 20

B. Variabel dan Definisi Operasional....................................................................... 20

1. Variabel………..……………………………………………....................... 20

2. Definisi operasional ..................................................................................... 21

C. Bahan Penelitian.................................................................................................. 23

D. Alat Penelitian..................................................................................................... 24

xii

E. Tata Cara Penelitian ............................................................................................ 25

F. Tata Cara Analisis Hasil .......................................................................................31

BAB IV . HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 32

A. Hasil Determinasi Tanaman................................................................................. 32

B. Hasil Penimbangan Bobot Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius.................... 32

C. Hasil Uji Pendahuluan Analgesik........................................................................ 33

D. Hasil Uji Efek Analgesik Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius...................... 40

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN................................................................ 55

A. Kesimpulan.......................................................................................................... 55

B. Saran.................................................................................................................... 55

DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................. 56

LAMPIRAN............................................................................................................ 59

BIOGRAFI PENULIS.......................................................................................... 77

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel I Rata-rata jumlah geliat pada penetapan dosis asam asetat....................... 36

Tabel II Hasil Uji Scheffe jumlah geliat mencit pada penetapan dosis asam

asetat........................................................................................................ 37

Tabel III Rata-rata jumlah geliat pada berbagai selang waktu pemberian asam

asetat........................................................................................................ 38

Tabel IV Hasil uji Scheffe jumlah geliat pada penetapan selang waktu pemberian

asam asetat............................................................................................... 39

Tabel V Rata-rata jumlah geliat dan persen proteksi pada pengujian efek

analgesik pada seluruh kelompok ........................................................ 41

Tabel VI Hasil uji Scheffe persen proteksi pada pengujian efek analgesik pada

seluruh kelompok.................................................................................. 44

Tabel VII Hasil perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol positif

pada uji efek analgesik....................................................................... 47

Tabel VIII Hasil uji Scheffe perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol

positif pada uji efek analgesik............................................................ 49

xiv

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur senyawa dalam daun M. tanarius.............................................. 8

Gambar 2. Struktur asetosal…………..................................................................... 17

Gambar 3. Diagram batang rata-rata jumlah geliat pada penetapan dosis asam

asetat........................................................................................................ 36

Gambar 4. Grafik rata-rata jumlah geliat pada orientasi selang waktu pemberian

asam asetat............................................................................................ 39

Gambar 5. (a). Grafik rata-rata jumlah geliat pada pengujian efek analgesik seluruh

kelompok……………………………………………………............ 42

(b). Grafik persen proteksi geliat pada pengujian efek analgesik seluruh

kelompok……………………………………………………............ 42

Gambar 6. Diagram batang perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol

positif pada ujiefek analgesik............................................................... 48

Gambar 7. Grafik persamaan garis ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius.. 50

Gambar 8. Gambar perpindahan elektron ikatan α-β unsaturated pada

macarangiosida A……………………………………………………...51

Gambar 9. Mekanisme pelepasan mediator nyeri dan inflamasi…………………53

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto daun M. tanarius...........................................................................59

Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air daun M. tanarius......................................... 59

Lampiran 3. Foto larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius.............................. 59

Lampiran 4. Foto geliat mencit yang memenuhi syarat............................................ 59

Lampiran 5. Penetapan dosis asam asetat berserta hasil analisis statistiknya........... 60

Lampiran 6. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat berserta hasil analisis

statistiknya........................................................................................... 62

Lampiran 7. Hasil kelompok uji efek analgesik berserta hasil analisis statistiknya..64

Lampiran 8. Hasil persen proteksi geliat pada uji efek analgesik berserta hasil

analisis statistiknya..............................................................................67

Lampiran 9. Hasil perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol positif pada uji

efek analgesik......................................................................................70

Lampiran 10. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol-air daun M.

tanarius................................................................................................73

Lampiran 11. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius........................74

Lampiran 12. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M. tanarius..................74

Lampiran 13. Surat keterangan determinasi tanaman M. tanarius…........................75

Lampiran 14. Surat keterangan hewan uji………………………….........................76

xvi

INTISARI

Peran tanaman obat dalam penanganan nyeri semakin meningkat belakanganini, terlebih dengan adanya issue back to nature. Penelitian ini bertujuan untukmengetahui apakah ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek analgesik,persen proteksi, perubahan persen proteksi dan ED50.

Penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan rancangan acaklengkap pola satu arah. Metode penelitian yang digunakan adalah metode rangsangkimia dengan penginduksi asam asetat. Mencit betina sehat, galur Swiss secara acakdibagi menjadi 5 kelompok. Setiap kelompok terdiri dari 5 hewan uji. Kelompok Iadalah CMC Na 1% dosis 6.400 mg/KgBB. Kelompok II adalah asetosal dosis 91mg/KgBB. Kelompok III, IV dan V berturut-turut adalah ekstrak metanol-air M.tanarius pada dosis 711; 2.133 dan 6.400 mg/ KgBB. Data dievaluasi denganANOVA satu arah, dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk membandingkan rata-ratadari setiap kelompok dosis dengan kelompok kontrol.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metanol-air dari daun M.tanarius mempunyai efek analgesik. Persen proteksi ekstrak metanol-air dari daun M.tanarius pada dosis 711; 2.133 dan 6.400 mg/KgBB berturut-turut adalah 31,4; 62,1dan 82,2 persen. Perubahan persen proteksi ekstrak metanol-air dari daun M. tanariuspada dosis 711; 2.133 dan 6.400 mg/KgBB berturut-turut adalah -48,1; 2,7 dan 35,9persen. ED50 dari ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah 1.470 mg/kgBB.

Kata kunci: efek analgesik, ekstrak metanol-air daun M. tanarius

xvii

ABSTRACT

Recently the role of medicine plant increasingly important in pain treatment,in fact, it mainly promoted by back to nature issue. This study aimed at knowingwhether the methanol-water extract of M. tanarius leaf has analgesic effect, thepercent protection, the change in percent protection and ED50.

This was a experimental study with one way-complete-random design. Thestudy method used was acetic acid induced. Healthy female mice of Swiss strain wererandomly divided into 5 group of 5 animals in each. Group I received CMC Na 1% atdose of 6,400 mg/KgBW. Group II received asetosal at dose of 91 mg/KgBW. GroupIII, IV and V received respectively, the methanol-water extract of M. tanarius leaf atdose of 711; 2,133 and 6,400 mg/KgBW. Data were evaluated by one-way ANOVA,followed by Scheffe test to compare the mean of each dose group with the controlgroup.

Result of the study suggesting that the methanol-water extract of M. tanariusleaf has analgesic effect. Percent protection of the methanol-water extract of M.tanarius leaf at dose of 711; 2,133 and 6,400 mg/KgBW were 31.4; 62.1 and 82.2percent, respectively. The change in percent protection of the methanol-water extractof M. tanarius leaf at dose of 711; 2,133 and 6,400 mg/KgBW were -48.1; 2.7 and35.9 percent, respectively. ED50 of the methanol-water extract of M. tanarius leaf is1,470 mg/kgBW.

Keywords: analgesic effect, methanol-water extract of M. tanarius leaf

1

BAB IPENGANTAR

A. Latar Belakang

Nyeri dapat digambarkan sebagai pengalaman sensorik dan emosional

yang tidak menyenangkan berkaitan dengan kerusakan jaringan (Price dan

Wilson, 2005). Nyeri merupakan keluhan utama yang membawa pasien ke dokter

(Dewoto, 2006) dan kondisi yang menimbulkan rasa tidak nyaman pada penderita.

Dilaporkan timbulnya nyeri pada pasien dengan penyakit serius di rumah sakit

sebesar 50% (DiPiro, Tabert, Yee, Matzke, Wells dan Posey, 2008). Munculnya

rasa nyeri menimbulkan dampak yang tidak menguntungkan bagi penderitanya.

Salah satu solusi untuk mengatasi rasa nyeri tersebut dengan mengembangkan

berbagai upaya pengobatan (Soedibyo, 1998).

Tujuan keseluruhan pengobatan nyeri adalah mengurangi nyeri

semaksimal mungkin dengan meminimalkan kemungkinan efek samping (Price

dan Wilson, 2005). Terapi farmakologis yang dapat digunakan dalam mengatasi

nyeri di masyarakat menggunakan obat yang memiliki efek analgesik, seperti

parasetamol dan asetosal. Hanya saja asetosal kini jarang digunakan karena efek

sampingnya yang relatif tinggi. Katzung (2004) melaporkan pada dosis biasa,

asetosal atau asam asetilsalisilat dapat menyebabkan gangguan lambung. Kerja

obat ini adalah menghambat prostaglandin G/H synthase dan meredakan nyeri

ringan sampai sedang yang sebabnya beragam, tetapi tidak efektif untuk nyeri

organ dalam (viceral pain).

2

Asetosal (asam asetilsalisilat atau aspirin) memiliki mekanisme kerja

sebagai antiinflamasi, antipiretik dan analgesik. Sebagai analgesik sangat efektif

mengurangi nyeri intensitas ringan-sedang melalui efeknya pada inflamasi, yang

mungkin menghambat rangsang nyeri pada tingkat subkorteks (Dewoto, 2006)

sehingga diketahui asetosal memiliki efek analgesik.

Selain menggunakan obat sintetik, ada kemungkinan masyarakat

mengatasi nyeri dengan menggunakan tumbuhan sebagai alternatif pengobatan,

dikarenakan semakin mahalnya biaya kesehatan termasuk biaya pengobatan.

Selain itu, muncul kecenderungan masyarakat untuk mengatasi penyakit dengan

memanfaatkan tumbuhan sekitar yang mungkin berkhasiat (back to nature) karena

dianggap relatif lebih aman daripada produk obat sintetik sehingga lebih

menguntungkan bagi masyarakat. Oleh karena itu, banyak dilakukan penelitian

efek analgesik suatu tumbuhan sebagai alternatif pengobatan guna mendapatkan

informasi yang bermanfaat bagi pengembangan dunia pengobatan.

M. tanarius yang dikenal sebagai tumbuhan perintis yang tumbuh lebih

dahulu dibanding tumbuhan lain dan juga diketahui sebagai tumbuhan bersemut

(Phommart, Sutthivaiyakit, Chimnoi, Ruchirawat dan Sutthivaiyakit, 2005)

mungkin jarang dikenal oleh sebagian besar masyarakat Indonesia. M. tanarius

adalah pohon yang berdaun hijau memiliki ketinggian 4-5 meter ditemukan di

daerah bersemak di sepanjang Asia Selatan dan Timur, khususnya bagian Selatan

Cina, Korea dan Jepang (Phommart, dkk, 2005) telah banyak dilaporkan terkait

kandungan senyawanya baik pada bagian daun, batang maupun buahnya.

3

Ekstrak n-heksan dan kloroform dari daun M. tanarius dilaporkan

mengandung nymphaeol dan tanariflavanon sebagai antioksidan terhadap uji

DPPH serta nymphaeol B sebagai agen antiinflamasi pada uji siklooksigenase-2

(Phommart, dkk, 2005). Matsunami, Takamori, Shinzato, Aramoto, Kondo,

Otsuka, dkk (2006) melaporkan 4 kandungan baru dari M. tanarius yaitu

macarangiosida A-D, dan malofenol B, yang diisolasi dari ekstrak metanol M.

tanarius. Matsunami, Otsuka, Kondo, Shinzato, Kawahata, Yamaguchi, dkk

(2009) melaporkan bahwa macarangiosida A-C dan malofenol B menunjukkan

aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH. Kandungan senyawa

macarangiosida A-C dan malofenol B diketahui merupakan golongan senyawa

glikosida.

Robinson (1995) melaporkan bahwa glikosida lebih mudah larut dalam

air. Bila digunakan penyari kombinasi antara metanol dan air sebagai pelarut,

dimungkinkan tidak hanya kandungan senyawa macarangiosida A-C dan

malofenol B yang dapat tersari melainkan adanya kandungan glikosida lain yang

diharapkan memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas dapat tertarik semakin

banyak. Hal ini diakibatkan karena penggunaan penyari metanol dan air memiliki

sifat yang lebih polar bila dibandingkan metanol absolut. Bila penyari yang

digunakan semakin polar diharapkan kandungan glikosida yang larut dan tersari

semakin banyak sehingga efek penangkapan radikal bebas juga semakin besar.

Radikal bebas merupakan substansi yang berperan dalam proses

timbulnya nyeri. Tjay dan Rahardja (2007) melaporkan bahwa ada kaitan antara

penangkapan radikal bebas dengan penghambatan pembentukan mediator nyeri

4

dan peradangan (inflamasi) melalui jalur siklooksigenase dan lipooksigenase. Bila

radikal bebas ditangkap maka dimungkinkan proses timbulnya nyeri terhambat.

Oleh karena itu, dalam penelitian ini akan dilakukan uji efek analgesik

ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss. Penelitian

ini menggunakan penyari kombinasi antara metanol-air (metanol 50%) didasarkan

pada sifat glikosida yang larut dalam air dan adanya penelitian Matsunami, dkk

(2006; 2009), dilaporkan menggunakan penyari metanol diperoleh kandungan

macarangiosida A-C dan malofenol B yang diketahui memiliki aktivitas

penangkapan radikal bebas yang dapat menghambat proses timbulnya nyeri.

1. Permasalahan

a. Apakah ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada

mencit betina galur Swiss?

b. Berapa besar persen proteksi geliat ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada

mencit betina galur Swiss?

c. Berapa besar perubahan persen proteksi geliat ekstrak metanol-air daun M.

tanarius pada mencit betina galur Swiss?

d. Berapa besar ED50 dari ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit

betina galur Swiss?

2. Keaslian penelitian

Penelitian terdahulu terkait konstituen dari daun M. tanarius memiliki

kandungan senyawa diantaranya glukosida yang dinamai macarangiosida A-C dan

malofenol B, yang diisolasi dari ekstrak metanol daun M. tanarius. Senyawa

5

tersebut menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH (Matsunami,

dkk, 2006; 2009).

Phommart, dkk (2005) melaporkan dari daun M. tanarius ditemukan 3

kandungan senyawa baru yaitu tanarifuranonol, tanariflavanon C, dan

tanariflavanon D bersama dengan 7 kandungan yang telah diketahui yaitu

nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanon B, blumenol A

(vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol dan annuionon).

Penelitian terkait pengujian daun M. tanarius melaporkan kandungan

ekstrak metanol M. tanarius berupa corilagin mallotinic acid, chebulagic acid dan

novel ellagitannin (macatannin A) mempunyai aktivitas menghambat α-

glukosidase (Puteri dan Kawabata, 2010).

Ekstrak n-heksan dari daun M. tanarius dilaporkan mengandung

nymphaeol dan tanariflavanon sebagai antioksidan terhadap uji DPPH serta

nymphaeol B sebagai agen antiinflamasi pada uji siklooksigenase-2 (Phommart,

dkk, 2005).

Sejauh pengamatan penulis, penelitian tentang efek analgesik ekstrak

metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss belum pernah

dilakukan.

3. Manfaat Penelitian

a. Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi yang bermanfaat

tentang kegunaan daun M. tanarius yang dapat dimanfaatkan sebagai

analgesik.

6

b. Manfaat praktis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi terkait efek, besar

persen proteksi geliat, besar perubahan persen proteksi geliat dan besar ED50

ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

Penelitian ini dapat memberikan informasi tentang kegunaan tumbuhan

sebagai analgesik terutama daun M. tanarius.

2. Tujuan khusus

a. Untuk mengetahui efek analgesik ekstrak metanol-air daun M. tanarius

pada mencit betina galur Swiss.

b. Untuk mengetahui besar persen proteksi geliat dari ekstrak metanol-air

daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.

c. Untuk mengetahui besar perubahan persen proteksi geliat ekstrak metanol-

air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.

d. Untuk mengetahui besar ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada

mencit betina galur Swiss.

7

BAB IIPENELAAHAN PUSTAKA

A. M. tanarius

1. Keterangan Botani

Macaranga tanarius termasuk dalam famili euphorbiaceae. Tanaman ini

dikenal dengan beberapa nama daerah antara lain Tutup Ancur (Jawa), Mapu

(Batak), Mara (Sunda) (Anonim, 2010a).

2. Morfologi tumbuhan

M. tanarius merupakan pohon kecil sampai sedang, dengan dahan agak

besar. Daun berseling, agak membundar, dengan stipula besar yang luruh.

Perbungaan malai di ketiak, bunga ditutupi oleh daun gagang. Buah kapsul

berkokus 2, ada kelenjar kekuningan di luarnya. Biji membulat dan menggelembur

(Anonim, 2010a).

3. Kandungan kimia

Dilaporkan 4 kandungan dari daun M. tanarius glukosida, dinamai

macarangiosida A-D, bersama dengan malofenol B, lauroside E, methyl brevifolin

carboxylate, dan hyperin dan isoquercitrin (Matsunami, dkk, 2006), serta lignan

glukosida, pinoresinol, dan megastigman glukosida, dinamai macarangiosida E

dan F, bersama dengan 15 komponen lain yang telah diketahui dilaporkan terdapat

pada daun M. tanarius (Matsunami, dkk, 2009). Uji kimia tanin dalam daun M.

tanarius dilaporkan mengandung 7 hydrolyzable tannin (Lin, Nonaka dan

8

Nishioka, 1990). Dari daun M. tanarius dilaporkan dan diidentifikasi bahwa

ditemukan 3 kandungan senyawa baru yaitu tanarifuranonol, tanariflavanon C, dan

tanariflavanon D bersama dengan 7 kandungan yang telah diketahui yaitu

nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanon B, blumenol A

(vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol dan annuionon). Struktur

senyawa tanariflavanon C dan D, nymphaeol A, B dan C, malofenol B serta

macarangiosida A-C (gambar 1).

Tanariflavanon C Tanariflavanon D Nymphaeol A

Nymphaeol B Nymphaeol C Malofenol B

Macarangiosida A Macarangiosida B Macarangiosida C

Gambar 1. Struktur senyawa dalam daun M. tanarius(Phommart dkk, 2005 dan Matsunami dkk, 2006).

9

4. Khasiat dan kegunaan

Secara tradisional daun M. tanarius digunakan sebagai fermentasi pada

tempe dan pakan hewan (Puteri dan Kawabata, 2010). Daun M. tanarius kaya

akan tanin dan digunakan sebagai obat di masyarakat seperti obat diare, luka dan

juga sebagai antiseptik (Lin, dkk, 1990). Dalam pengobatan tradisional di

Malaysia dan Thailand, dekok akar Macaranga digunakan sebagai antipiretik dan

antitusif. Akar keringnya digunakan sebagai agen emetik, sementara daun

segarnya digunakan sebagai penutup luka guna mencegah terjadinya inflamasi. Di

Cina jenis Macaranga ini menjadi tumbuhan yang komersil, yang dijadikan

sebagai produk minuman kesehatan (Lim, Lim, Yule, 2009).

5. Ekologi penyebaran dan budidaya

Tumbuhan M. tanarius tersebar luas, dari Kepulauan Andaman dan Nicobar,

Indo-Cina, Cina Selatan, Taiwan dan Kepulauan Ryukyu, seluruh Malesia,

sampai ke Australia Utara dan Timur dan Melanesia. Jenis ini umum dijumpai di

daratan Asia Tenggara (Thailand Selatan, Semenanjung Malaya), dan pada

banyak pulau di Malesia (yaitu Sumatra, Borneo, Kepulauan Sunda Kecil,

Sulawesi, Nugini, seluruh Kepulauan Filipina) (Anonim, 2010a). Tumbuhan ini

dapat ditemukan disepanjang Asia Timur dan Selatan, khususnya Cina Selatan,

Korea dan Jepang (Matsunami, dkk, 2006).

10

B. Metode Penyarian

Penyarian merupakan peristiwa pemindahan massa. Zat aktif yang semula

berada di dalam sel ditarik oleh cairan penyari, sehingga terjadi larutan zat aktif

dalam cairan penyari tersebut. Secara umum penyarian dapat dibedakan menjadi

infundasi, maserasi dan perkolasi (Depkes RI, 1986).

Infundasi merupakan proses penyarian yang umumnya digunakan untuk

menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Penyarian

dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah tercemar oleh kuman

dan kapang. Oleh karena itu, sari yang diperoleh dengan cara ini tidak boleh disimpan

lebih dari 24 jam. Infus adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi

simplisia nabati dengan air pada suhu 900C selama 15 menit (Depkes RI, 1986).

Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana. Maserasi dilakukan

dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari akan

menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif,

zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif

di dalam dan di luar sel, maka larutan yang terpekat didesak keluar. Peristiwa tersebut

berulang sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar dan di

dalam sel (Depkes RI, 1986).

Perkolasi merupakan cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan

cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi. Prinsip perkolasi adalah

simplisia ditempatkan dalam suatu bejana silinder yang di bagian bawahnya diberi

sekat berpori. Cairan penyari dialirkan dari atas ke bawah melalui serbuk tersebut dan

11

akan melarutkan zat aktif dari sel-sel yang dilalui sampai mencapai keadaan jenuh

(Depkes RI, 1986).

Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif

dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua

atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan

sedemikian rupa hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Depkes RI, 1995).

C. Nyeri

1. Definisi

Nyeri adalah perasaan yang dipicu oleh sistem saraf. Nyeri dapat

menyakitkan atau membahayakan penderitanya. Rasa nyeri ini mungkin dapat

muncul dan pergi seketika atau mungkin konstan. Penderita mungkin merasa nyeri di

satu daerah tubuh, seperti punggung, perut atau dada atau mungkin merasa sakit di

seluruh tubuh. Nyeri dapat membantu dalam mendiagnosis suatu masalah kesehatan.

Setelah penderita diterapi, rasa nyeri biasanya hilang. Namun, terkadang rasa nyeri

itu berlangsung selama mingguan, bulanan atau bahkan tahunan. Kondisi ini disebut

nyeri kronis. Nyeri kronis disebabkan oleh penyebab yang berkelanjutan, seperti

kanker atau arthritis atau terkadang penyebabnya tidak diketahui. Ada banyak cara

untuk mengobati rasa nyeri. Pengobatan bervariasi tergantung pada penyebab rasa

nyeri, seperti obat penghilang rasa nyeri, akupunktur dan operasi (Dugdale, 2009).

Nyeri adalah perasaan sensoris dan emosional yang tidak nyaman, berkaitan

dengan (ancaman) kerusakan jaringan. Nyeri merupakan suatu perasaan subjektif

12

pribadi dan ambang toleransi nyeri berbeda-beda bagi setiap orang. Rasa nyeri dalam

kebanyakan hal hanya merupakan suatu gejala yang berfungsi sebagai isyarat bahaya

tentang adanya gangguan di jaringan, seperti peradangan, infeksi atau kejang otot

(Tjay dan Rahardja, 2007).

2. Terjadinya nyeri

Nyeri disebabkan oleh rangsangan mekanis, kimiawi dan fisis (kalor, listrik)

dapat menimbulkan kerusakan pada jaringan. Rangsangan tersebut memicu pelepasan

zat-zat tertentu yang disebut mediator nyeri, antara lain histamin, bradikinin,

leukotrien dan prostaglandin. Semua mediator nyeri itu merangsang reseptor nyeri

(nociceptor) di ujung-ujung saraf bebas di kulit, mukosa serta jaringan lain dan

demikian menimbulkan antara lain reaksi radang dan kejang. Nociceptor juga

terdapat di seluruh jaringan dan organ tubuh, terkecuali SSP. Dari tempat ini

rangsangan disalurkan ke otak melalui jaringan yang kemudian diteruskan ke pusat

nyeri di otak, dimana dirasakan sebagai nyeri (Tjay dan Rahardja, 2007).

Nyeri timbul dari sejumlah kondisi. Cedera adalah penyebab utama, tetapi

rasa nyeri mungkin juga hasil dari suatu penyakit. Nyeri dapat menyertai kondisi

psikologis seperti depresi, atau mungkin terjadi bahkan tanpa adanya pemicu yang

dikenali. (Anonim, 2010b).

13

3. Klasifikasi

Penggolongan nyeri berdasarkan DiPiro dkk (2008) yaitu:

a. Nyeri akut

Nyeri akut dapat menjadi proses peringatan fisiologis individu dari adanya

penyakit dan situasi berbahaya. Penyebab umum nyeri akut termasuk pembedahan,

penyakit akut, trauma, akivitas, dan prosedur medis.

b. Nyeri kronik

Dalam kondisi normal, nyeri akut menghilang cepat karena adanya proses

penyembuhan dengan mengurangi produksi rangsangan nyeri. Namun, dalam

beberapa kasus, nyeri tetap terjadi selama berbulan-bulan sampai bertahun-tahun,

yang mengarah ke keadaan nyeri kronis dengan karakteristik yang sangat berbeda

dengan nyeri akut.

4. Mekanisme nyeri

Proses penghantaran nyeri terdiri dari 4 tahap yaitu stimulasi, transmisi,

persepsi nyeri dan modulasi.

a. Stimulasi

Sensasi nyeri dimulai dengan pembebasan reseptor nyeri akibat

rangsangan mekanis, panas, dan kimia. Adanya rangsangan tersebut (noxius

stimuli) akan menyebabkan lepasnya bradikinin, K+, prostaglandin, histamin,

leukotrien, serotonin dan substansi P. Aktivasi reseptor menimbulkan aksi

potensial yang ditransmisikan sepanjang serabut saraf aferen menuju sumsum

tulang belakang.

14

b. Transmisi

Transmisi rangsang nyeri terjadi di serabut aferen A dan C. Serabut

saraf aferen tersebut merangsang serabut nyeri di berbagai lamina spinal

cord’s dorsal horn melepaskan berbagai neurotransmiter termasuk glutamat,

substansi P, dan kalsitonin.

c. Persepsi nyeri

Persepsi nyeri adalah titik utama transmisi impuls nyeri. Otak akan

mengartikan sinyal nyeri dengan batas tertentu, sedangkan fungsi kognitif dan

tingkah laku akan memodifikasi nyeri sehingga tidak menjadi lebih parah.

Relaksasi, pengalihan, meditasi dan berkhayal dapat mengurangi rasa nyeri.

Sebaliknya, perubahan biokimia saraf yang terjadi pada keadaan seperti

depresi dan stres dapat memperburuk rasa nyeri.

d. Modulasi

Modulasi nyeri melalui sejumlah proses yang kompleks. Diketahui

bahwa sistem opiat endogen terdiri dari berbagai neurotransmiter (seperti

enkhepalin, dinorfin, dan -endorfin dan reseptor-reseptor ( seperti μ, , dan

) yang ditemukan dalam sistem saraf pusat. Opioid endogen berikatan

dengan reseptor opioid dan mengantarkan transmisi rangsang nyeri (DiPiro

dkk, 2008).

15

D. Analgesik

Schmitz, Lepper dan Heidrich (2009) mengatakan bahwa analgesik adalah

zat-zat yang pada dosis terapetik meringankan atau menekan rasa nyeri. Analgesik

dapat dibedakan menjadi dua golongan berdasarkan kerja farmakologisnya:

1. Analgesik non narkotik (perifer) yang terdiri dari obat-obat yang tidak bersifat

narkotik dan tidak bekerja sentral. Analgesik antiradang termasuk kedalam

kelompok ini.

2. Analgesik narkotik, khusus digunakan untuk menghalau rasa nyeri hebat seperti,

fractura dan kanker.

Atas dasar dasar cara kerjanya, obat-obat ini dibagi dalam 3 kelompok yaitu:

a. Agonis opiat, cara kerja obat ini sama dengan morfin, hanya berlainan

mengenai potensi dan lama kerjanya, efek samping, dan resiko akan

ketergantungan fisik.

b. Antagonis opiat, bila digunakan sebagai analgesik, obat ini dapat menduduki

salah satu reseptor.

c. Campuran, zat ini dengan kerja mengikat pada reseptor opioid, tetapi tidak

atau hanya sedikit mengaktivasi daya kerjanya (Tjay dan Rahardja, 2007).

E. Metode Pengujian Efek Analgesik

Metode-metode pengujian aktivitas analgesik dilakukan dengan menilai

kemampuan zat uji untuk menekan atau menghilangkan rasa nyeri yang diinduksi

pada hewan percobaan (mencit, tikus, marmot), yang meliputi induksi secara

16

mekanik, termik, elektrik, dan secara kima. Metode pengujian dengan menginduksi

nyeri secara mekanik atau termik lebih sesuai untuk mengevaluasi obat-obat

analgesik kuat. Pada umumnya daya analgesik dinilai pada hewan dengan mengukur

besarnya peningkatan stimulus nyeri atau jangka waktu ketahanan hewan terhadap

stimulus nyeri atau juga peranan frekuensi respon nyeri (Pyitomedika, 1991).

Turner (1965) melaporkan bahwa metode rangsang kimia menggunakan zat

kimia yang diinjeksikan pada hewan uji secara intraperitoneal, sehingga akan

menimbulkan nyeri. Beberapa zat kimia yang biasanya digunakan antara lain asam

asetat dan fenil kuinon. Metode ini sederhana, reproducible (dapat diulang-ulang

hasilnya), dan cukup peka untuk menguji senyawa analgesik dengan daya analgesik

lemah, namun mempunyai kekurangan yaitu masalah kespesifikasinya. Oleh karena

itu metode ini sering digunakan untuk penapisan (screening). Efek analgesik dapat

dievaluasi menggunakan persen proteksi geliat.

% proteksi geliat = (100 – [(P/K) x 100])%

P : jumlah kumulatif geliat mencit yang diberi perlakuan.K: jumlah kumulatif geliat mencit kelompok kontrol.

17

F. Asetosal

Gambar 2. Struktur asetosal (Helmenstine, 2010).

Asetosal (gambar 2) merupakan ester salisilat dari asam, berbentuk kristal putih

seperti batang atau jarum dan berbau. Sedikit larut dalam air, sangat larut dalam

alkohol. Nilai pKa dari asetosal adalah 3,5. Termasuk dalam golongan analgesik non-

narkotik. Indikasi dari asetosal adalah sebagai pereda nyeri, sakit kepala, nyeri ringan

lain yang berhubungan dengan adanya inflamasi, nyeri ringan sampai sedang setelah

operasi, melahirkan, sakit gigi, dismenore (Anonim, 2010c).

G. Landasan Teori

Matsunami dkk, (2006) melaporkan kandungan dari M. tanarius yaitu

macarangiosida A-D, dan malofenol B, yang diisolasi dari ekstrak metanol daun M.

tanarius. Penelitian terbaru dari Matsunami dkk, (2009) melaporkan kandungan

lignan glukosida yang diisolasi dari daun M. tanarius mempunyai aktivitas

antioksidan terhadap penangkapan DPPH.

Robinson (1995) melaporkan bahwa glikosida lebih mudah larut dalam air.

Bila digunakan penyari kombinasi antara metanol dan air sebagai pelarut,

18

dimungkinkan tidak hanya kandungan senyawa macarangiosida A-C dan malofenol B

yang dapat tersari melainkan adanya kandungan glikosida lainnya yang memiliki

aktivitas penangkapan radikal bebas dapat tertarik semakin banyak. Hal ini

diakibatkan karena penggunaan penyari metanol dan air memiliki sifat yang lebih

polar bila dibandingkan metanol absolut. Bila penyari yang digunakan semakin polar

diharapkan kandungan glikosida yang larut dan tersari semakin banyak sehingga efek

penangkapan radikal bebas juga semakin besar.

Tjay dan Rahardja (2007) melaporkan bahwa ada kaitan antara penangkapan

radikal bebas dengan penghambatan pembentukan mediator nyeri dan peradangan

(inflamasi). Bila radikal bebas ditangkap dimungkinkan proses perubahan asam

arakidonat menjadi endoperoksida dan asam hidroperoksida melalui jalur

siklooksigenase dan lipooksigenase akan terhambat sehingga mediator nyeri dan

peradangan tidak akan terbentuk serta tidak akan terjadi nyeri.

Banyak metode yang dapat dilakukan untuk menguji efek analgesik, namun

untuk skrining awal untuk penapisan farmakologi cukup menggunakan metode

rangsang kimia. Asam asetat digunakan sebagai iritan yang dapat merusak jaringan

secara lokal. Setelah pemberian asam asetat secara intraperitoneal terjadi perubahan

pH di dalam rongga perut berakibat terjadinya pelepasan ion H+ dari asam asetat

sehingga menyebabkan luka pada membran sel. Fosfolipid dari membran sel akan

melepaskan asam arakhidonat yang pada akhirnya akan membentuk prostaglandin

dan menimbulkan nyeri (Wilmana, 1995). Metode ini digunakan karena cakupan

untuk menguji efek analgesik cukup luas, sehingga walaupun belum diketahui secara

19

spesifik bagaimana mekanisme efeknya, tetap dapat terlihat efeknya melalui metode

ini.

H. Hipotesis

Ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada mencit

betina galur Swiss.

20

BAB IIIMETODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

Jenis penelitian ini adalah eksperimental murni dengan rancangan penelitian

acak lengkap pola satu arah.

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional

1. Variabel utama

a. Variabel bebas

Variabel bebas penelitian ini adalah dosis ekstrak metanol-air daun M.

tanarius. Dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang digunakan adalah jumlah

miligram ekstrak metanol-air daun M. tanarius tiap kilogram berat badan hewan uji.

b. Variabel tergantung

Variabel tergantung penelitian ini adalah persen proteksi geliat ekstrak

metanol-air daun M. tanarius. Persen proteksi geliat ekstrak metanol-air daun M.

tanarius adalah kemampuan yang dimiliki ekstrak metanol-air daun M. tanarius

untuk mengurangi rasa nyeri dengan ditandai adanya penurunan jumlah geliat pada

hewan uji.

2. Variabel pengacau

a. Variabel pengacau terkendali

1) Galur hewan uji adalah mencit dengan galur Swiss.

2) Jenis kelamin hewan uji adalah mencit betina.

21

3) Umur hewan uji antara 2-3 bulan.

4) Berat badan hewan uji antara 20-30 gram.

5) Waktu pengamatan antara 08.00-14.00.

6) Cara pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada hewan uji secara

peroral.

7) Kondisi hewan uji: sehat.

8) Tempat pemanenan daun M. tanarius: kebun obat Fakultas Farmasi Universitas

Sanata Dharma Yogyakarta.

9) Waktu pemanenan daun M. tanarius: Maret 2010.

b. Variabel pengacau tak terkendali

1) Ketahanan mencit yaitu kemampuan mencit untuk menahan rasa sakit.

2) Variasi biologis yaitu kemampuan absorbsi, distribusi, metabolisme dan

ekskresi dari mencit betina terhadap ekstrak metanol-air daun M. tanarius.

3. Definisi operasional

a. Daun M. tanarius adalah daun yang diambil dari tanaman M. tanarius,

memiliki daun yang berwarna hijau, tidak berlubang, segar, tidak terlalu tua

dan muda (diambil daun yang berada tidak dipangkal dan diujung batang).

b. Ekstrak metanol-air daun M. tanarius berupa ekstrak kental yang diperoleh

dengan mengekstraksi serbuk kering daun M. tanarius seberat 10,0 gram yang

dilarutkan dalam 100 ml pelarut metanol 50% secara maserasi selama 72 jam,

dengan putaran 140 rpm. Kemudian disaring dengan kertas saring dan

22

diuapkan di oven selama 24 jam pada suhu 50oC, hingga diperoleh bobot

ekstrak tetap dengan susut pengeringan sebesar 0%.

c. Larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius pekat adalah larutan dengan

konsentrasi 38,4% yang diperoleh dengan cara melarutkan ekstrak metanol-air

daun M. tanarius seberat 1,92 gram dengan CMC Na 1% ke dalam labu ukur

5 ml.

d. Dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah sejumlah berat ekstrak

metanol-air daun M. tanarius tiap satuan berat badan hewan uji dengan satuan

mg/KgBB.

e. Geliat didefinisikan bila mencit menarik kedua kaki belakang ke belakang

dengan mengempiskan perutnya sehingga permukaan perut menempel pada

alas tempat berpijak mencit tersebut.

f. Persen proteksi geliat terhadap rangsang kimia adalah seratus dikurangi

jumlah kumulatif geliat kelompok perlakuan dibagi rata-rata jumlah kumulatif

geliat kelompok kontrol dikali 100 persen.

g. Uji daya analgesik menggunakan metode rangsang kimia yaitu suatu metode

uji daya analgesik menggunakan rangsang kimia berupa zat kimia asam asetat

1% yang diberikan secara intraperitoneal pada mencit yang sudah diberi

senyawa uji secara oral pada selang waktu tertentu. Respon nyeri pada mencit

adalah geliat berupa kontraksi perut disertai kedua kaki belakang dan perut

menempel pada tempat perlakuan (lantai). Geliat diamati setiap 5 menit

selama 1 jam. Adanya efek analgesik ditunjukkan dengan penurunan jumlah

23

geliat sebesar 50% dari kontrol negatif. Semakin sedikit geliat semakin besar

efek analgesiknya.

C. Bahan Penelitian

a. Hewan uji: mencit betina galur Swiss dengan berat badan 20-30 gram dengan

umur 2-3 bulan, yang diperoleh dari Lembaga Pusat Penelitian dan Teknologi

(LPPT), Universitas Gajah Mada Yogyakarta.

b. Bahan uji: daun M. tanarius diperoleh dari kebun obat, Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma Yogyakarta yang di panen pada bulan Maret 2010.

c. Metanol (Merck) dan diperoleh dari Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia

Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

d. Asetosal (Merck) sebagai kontrol positif diperoleh dari Laboratorium

Farmakologi-Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma

Yogyakarta.

e. Carboxymethylcellulose-natrium (Dai-Ichi Seiyaku Co., Ltd), sebagai

pensuspensi asetosal diperoleh dari Laboratorium Farmakologi Fakultas

Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

f. Asam asetat glasial (Merck) sebagai perangsang nyeri, diperoleh dari

Laboratorium Farmakologi-Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata

Dharma Yogyakarta.

g. Aquadest diperoleh dari Laboratorium Farmakologi-Toksikologi Fakultas

Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

24

D. Alat Penelitian

1. Alat ekstraksi

a. Oven (Memmert)

b. Mesin penyerbuk (Retsch)

c. Ayakan

d. Seperangkat alat gelas berupa bekker glass, erlenmeyer, gelas ukur, labu ukur,

cawan porselen, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrek Iwaki Glass)

e. Shaker

2. Alat uji geliat

a. Kotak kaca tempat pengamatan geliat

b. Stopwatch (Olympic)

c. Jarum yang digunakan untuk pemberian peroral, berupa jarum yang ujungnya

berbentuk bulat dan berlubang di bagian tengah (Terumo)

d. Spuit injeksi yang memiliki ujung runcing dan digunakan untuk pemberian

secara intraperitoneal (Terumo)

3. Lain-lain

a. Neraca analitik (Metler Toledo AB 204, Germany)

b. Timbangan

c. Kamera digital

25

E. Tata Cara Penelitian

1. Determinasi tanaman

Determinasi tanaman M. tanarius menggunakan biji, bunga, daun, buah

dan batang yang dilakukan secara benar sesuai dengan buku acuan (Koorders dan

Valeton,1918). Determinasi tanaman dilakukan di Laboratorium Farmakognosi

Fitokimia, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

2. Pengumpulan bahan

Daun M. tanarius diperoleh dari kebun obat Fakultas Farmasi Universitas

Sanata Dharma Yogyakarta yang di panen pada bulan Maret 2010. Daun yang

diambil adalah daun segar berwarna hijau, tidak berlubang dan tidak terlalu tua

dan muda (diambil daun yang berada tidak dipangkal dan diujung batang).

3. Pembuatan simplisia

Pembuatan simplisia daun M. tanarius yang telah dikumpulkan, dicuci

dengan air mengalir, kemudian ditiriskan pada sinar matahari, untuk meniadakan

air pada daun. Selanjutnya daun dikeringkan kembali menggunakan oven pada

suhu 500C selama 24 jam dan diserbuk menggunakan mesin penyerbuk di

Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata

Dharma. Kemudian serbuk simplisia diayak menggunakan ayakan nomor 40

selama 15 menit.

4. Pembuatan ekstrak kental

Pembuatan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dilakukan dengan cara

menyari serbuk kering daun M. tanarius secara maserasi. Sebelum dilakukan

26

ekstraksi, daun M. tanarius diserbuk terlebih dahulu. Hal ini bertujuan agar

kandungan fitokimia dalam daun M. tanarius lebih mudah terekstrak karena luas

permukaan serbuk yang kontak dengan pelarut semakin besar. Serbuk daun M.

tanarius seberat 10,0 gram direndam dengan 100 ml pelarut metanol 50% di dalam

erlenmeyer selama 72 jam (Puteri dan Kawabata, 2010) dengan kecepatan 140 rpm

pada suhu kamar. Perendaman ini bertujuan agar senyawa kimia yang terkandung

dalam tumbuhan dapat larut dalam pelarut. Setelah perendaman, hasil maserasi

tersebut disaring dengan kertas saring. Hasil saringan dipindahkan ke cawan

porselen yang telah ditimbang sebelumnya, dengan maksud untuk mempermudah

perhitungan rendemen ekstrak kental yang akan diperoleh. Selanjutnya, cawan

porselen yang berisi hasil maserasi tersebut dimasukkan dalam oven untuk

diuapkan selama 24 jam dengan suhu 500C agar mendapatkan ekstrak metanol-air

daun M. tanarius yang kental dengan bobot ekstrak yang tetap.

5. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak

Ekstrak metanol-air daun M. tanarius kental dihitung rata-rata

rendemennya dari ke-6 replikasi yang telah dibuat.

Rendemen ekstrak = Berat cawan ekstrak kental − berat cawan kosong

Rata− rata rendemen =Rep. 1 + Rep. 2 + Rep. 3 + Rep. 4 + Rep. 5 + Rep. 6

6

Setelah didapat rata-rata rendemennya maka dapat ditetapkan konsentrasi

ekstrak. Konsentrasi yang digunakan adalah konsentrasi terpekat yang dapat dibuat

dan dapat dimasukkan serta dikeluarkan dari spuit oral 1 ml adalah dengan cara

27

melarutkan ekstrak percawan yaitu 1,92 gram dalam labu ukur terkecil dengan

pelarut yang sesuai yaitu CMC Na 1%. Labu ukur terkecil yang tersedia yaitu labu

ukur 5 ml sehingga dapat ditetapkan konsentrasi ekstrak metanol-air dari daun M.

tanarius sebesar 0,384 g/ml atau 384 mg/ml atau 38,4% b/v.

6. Penetapan dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Dasar penetapan peringkat:

a. Bobot tertinggi mencit

b. Separuh dari volume maksimal pemberian cairan secara peroral yaitu ½ ml

Penetapan dosis tertinggi ekstrak metanol-air daun M. tanarius:

D × BB = C × V

D × 0,03 KgBB = 384mg

ml × 0,5 ml

D = 6.400 mg/KgBB

Dua dosis lainnya diperoleh dengan menurunkan 3 dan 6 kalinya dari

dosis tertinggi sehingga didapatkan dosis 2.133 mg/KgBB dan 711 mg/KgBB.

Dosis yang digunakan dalam penelitian adalah 6.400; 2.133; dan 711 mg/KgBB.

7. Penyiapan hewan uji

Hewan uji yang digunakan adalah mencit betina galur Swiss, umur 2-3

bulan dan memiliki berat badan 20-30 gram. Mencit yang digunakan sebanyak 25

mencit terbagi secara acak dalam 5 kelompok. Kelompok I adalah kontrol negatif

CMC Na 1% dosis 6.400 mg/KgBB, kelompok II adalah kontrol positif dengan

asetosal dosis 91 mg/KgBB dan kelompok III, IV dan V berturut-turut adalah

28

kelompok perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dengan peringkat dosis

711 mg/KgBB, 2.133 mg/KgBB dan 6.400 mg/KgBB yang diberikan secara

peroral. Sebelum digunakan, mencit dipuasakan dahulu selama 24 jam namun

tetap diberi minum.

8. Pembuatan sediaan

a. Larutan asam asetat 1% v/v sebanyak 25,0 ml

Larutan asam asetat dibuat dengan cara pengenceran dari larutan asam

asetat glasial 100% v/v dengan volume pengambilan dihitung dengan

menggunakan rumus:

volume1 x konsentrasi1 = volume2 x konsentrasi2

Sebanyak 0,25 ml asam asetat glasial 100% diencerkan dengan

aquadest hingga volume 25,0 ml menggunakan labu ukur 25 ml.

b. Larutan CMC Na 1% sebanyak 100,0 ml

Larutan CMC Na 1% dibuat dengan cara menimbang 1,0 g serbuk

CMC Na kemudian ditaburkan di atas permukaan air panas sedikit demi

sedikit sehingga seluruhnya menutupi bagian atas permukaan air secara

merata, lalu biarkan mengembang. Larutan yang terbentuk diaduk kemudian

dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml dan tambahkan aquadest hingga tanda

batas 100 ml kemudian gojog.

c. Suspensi asetosal 1% 25 ml dalam CMC Na 1%

Suspensi asetosal 1% dibuat dengan mensuspensikan 250,0 mg

asetosal dengan CMC Na 1% dalam labu ukur 25 ml.

29

d. Pembuatan larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Ekstrak metanol-air kental daun M. tanarius seberat 1,92 gram

dilarutkan dengan CMC Na 1 % pada labu ukur 5 ml. Sebelum disuntikan

pada hewan uji, labu ukur digojog agar homogen.

9. Penetapan dosis asam asetat 1%

Larutan asam asetat 1% digunakan sebagai senyawa penginduksi rasa

nyeri pada mencit. Larutan asam asetat 1% diberikan pada 3 kelompok mencit

dengan dosis berbeda yaitu 25, 50 dan 75 mg/KgBB. Dari ketiga dosis tersebut

dicari dosis optimum yang dapat menimbulkan respon nyeri berupa geliat yang

dapat diamati sehingga memudahkan pengamatan.

10. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat

Selang waktu pemberian asam asetat ditentukan untuk mengetahui waktu

dimana senyawa uji telah terabsorbsi dengan optimal sehingga dapat segera

menimbulkan efek. Penentuan selang waktu ini dilakukan dengan menggunakan

asetosal 91 mg/KgBB dengan variasi selang waktu yang dilakukan adalah 5, 10

dan 15 menit. Dari ketiga selang waktu tersebut dicari selang waktu optimum yang

dapat menimbulkan respon nyeri berupa geliat yang dapat diamati sehingga

memudahkan pengamatan.

11. Penetapan dosis asetosal

Kontrol positif yang digunakan adalah asetosal sehingga asetosal harus

memberikan respon pengurangan geliat. Dosis asetosal yang digunakan dalam

penelitian ini adalah dosis lazim yaitu 0,5 g atau 500 mg yang kemudian

30

dikonversikan pada mencit sehingga dosisnya dapat dihitung sebagai berikut.

Berat badan manusia Indonesia adalah 50 Kg. Faktor konversi dengan pedoman

manusia Eropa 70 Kg adalah (70:50)x 500 g= 700 mg. Konversi dari manusia 70

Kg ke mencit 20 g adalah 0,0026 x 700 = 1,82 mg. Maka dosis asetosal adalah

1,82 mg: 20 g= 0,091 mg/gBB atau 91 mg/KgBB diperoleh dosis 91 mg/KgBB.

Menurut penelitian terdahulu Handara (2006); Riadiani (2006) dan Tusthi (2007)

penetapan dosis asetosal 91 mg/KgBB.

12. Perlakuan hewan uji

Sebelum perlakuan dilakukan, mencit terlebih dahulu dipuasakan selama

24 jam dengan tetap diberi minum. Hal ini bertujuan untuk mengurangi pengaruh

makanan terhadap hasil uji. Mencit yang digunakan sebanyak 25 mencit yang

terbagi secara acak dalam 5 kelompok. Kelompok I adalah kontrol negatif CMC

Na 1% dosis 6.400 mg/KgBB, kelompok II adalah kontrol positif dengan asetosal

dosis 91 mg/KgBB dan kelompok III, IV dan V berturut-turut adalah kelompok

perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dengan peringkat dosis 711, 2.133

dan 6.400 mg/KgBB yang diberikan secara peroral. Setelah selang waktu tertentu

hasil orientasi, mencit diberikan rangsang kimia berupa asam asetat 1% secara

intraperitonial dengan dosis hasil orientasi kemudian respon geliat diamati dan

dicatat tiap selang waktu 5 menit selama 1 jam.

13. Penentuan % proteksi geliat

Efek analgesik atau persen proteksi geliat terhadap CMCNa 1% (kontrol

negatif) dapat dihitung dengan menggunakan persamaan berikut:

31

% Proteksi geliat = 100 − [(P

K) × 100%]

Keterangan: P = jumlah kumulatif geliat mencit yang diberi perlakuanK = jumlah kumulatif geliat mencit kelompok kontrol

Untuk melihat perubahan persen proteksi masing-masing perlakuan

terhadap asetosal (kontrol positif) dapat dihitung dengan persamaan berikut:

Perubahan % proteksi geliat = ([A − B

B] × 100%)

Keterangan: A = persen efek analgesik setiap kelompok perlakuanB = persen efek analgesik rata-rata kontrol positif

F. Tata Cara Analisis Hasil

Setelah melalui proses di atas, data yang terkumpul dari pengamatan

geliat tiap 5 menit selama 1 jam pada masing-masing kelompok dianalisis dengan

Kolmogorov-Smirnov untuk melihat normalitas distribusi data. Jika ternyata data

terdistribusi normal maka dilanjutkan dengan ANOVA satu arah dengan taraf

kepercayaan 95% untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan antar kelompok.

Kemudian dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk melihat perbedaan antar kelompok

bermakna (signifikan) (p<0,05) atau tidak bermakna (tidak signifikan) (p>0,05).

32

BAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Determinasi Tanaman

Bahan yang akan diteliti pada penelitian ini adalah daun dari tanaman M.

tanarius. Sebelum daun M. tanarius ini digunakan dalam pengujian efek analgesik

maka diperlukan determinasi tanaman untuk memastikan bahwa tanaman yang

digunakan adalah benar-benar tanaman M. tanarius, yang biasa dimanfaatkan

masyarakat Indonesia sebagai pakan ternak hewan. Bagian tanaman yang digunakan

dalam determinasi adalah bagian batang, daun, biji, buah dan bunga.

Determinasi dilakukan secara benar sesuai dengan buku acuan dan hasil

determinasi sesuai dengan yang diharapkan hingga katagori jenis (species)

membuktikan bahwa yang dideterminasi adalah benar M. tanarius.

B. Hasil Penimbangan Bobot Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius

Metode yang digunakan dalam pembuatan ekstrak metanol-air daun M.

tanarius adalah metode penyarian maserasi. Metode maserasi digunakan karena

pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana. Selain itu, metode ini digunakan

untuk penyarian simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan

penyari. Cairan penyari yang digunakan adalah metanol-air (50:50) dan diketahui

bahwa senyawa hipotesis yaitu golongan glikosida fenolik dapat larut di dalam air.

33

Standarisasi yang dilakukan pada ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah

penimbangan bobot ekstrak hingga diperoleh bobot tetap dengan susut pengeringan

0%. Parameter non-spesifik yaitu parameter susut pengeringan digunakan dengan

maksud untuk mengukur sisa zat setelah pengeringan pada temperatur 50ºC. Cawan

berisi ekstrak ditimbang setiap 1 jam sampai diperoleh berat ekstrak konstan. Hal

tersebut dilakukan untuk memberikan batasan maksimal (rentang) tentang besarnya

senyawa yang hilang pada proses pengeringan karena hal ini dapat mempengaruhi

bobot ekstrak yang didapat sehingga akan mempengaruhi konsentrasi ekstrak dan

dosis yang akan digunakan pada hewan uji.

Dari proses pengeringan diperoleh bobot ekstrak tetap (tidak ada perubahan

bobot ekstrak) pada jam ke-23 dan ke-24 dan susut pengeringan ekstrak metanol-air

daun M. tanarius pada jam ke-23 dan ke-24 sebesar 0% sehingga diketahui bahwa

tidak ada pelarut penyari yang masih tersisa. Oleh karena itu, pada penelitian ini

digunakan waktu pengeringan selama 24 jam untuk mendapatkan bobot ekstrak yang

tetap.

C. Hasil Uji Pendahuluan

Uji pendahuluan dilakukan sebelum pengujian efek analgesik dari ekstrak

metanol-air daun M. tanarius. Uji pendahuluan perlu dilakukan untuk menetapkan

hal-hal yang akan dilakukan pada pengujian yang sebenarnya, agar didapat hasil yang

34

lebih valid dan akurat. Adapun uji pendahuluan tersebut meliputi penetapan kriteria

geliat, penetapan dosis asam asetat dan selang waktu pemberian asam asetat.

Pada uji pendahuluan ini digunakan subjek uji dengan ketentuan yang sama

dengan subjek uji yang digunakan pada uji yang sebenarnya yaitu mencit betina,

galur Swiss, umur 2-3 bulan dan berat badan 20-30 gram. Hewan uji dipuasakan

terlebih dahulu selama 24 jam tidak diberi pakan namun tetap diberi minum.

1. Penentuan kriteria geliat

Penentuan kriteria geliat perlu dilakukan agar geliat yang diamati dapat

seragam sehingga pengamatan menjadi lebih mudah dan spesifik serta data yang

didapat menjadi lebih valid. Gerakan mencit yang dianggap sebagai geliat adalah

apabila mencit menarik kedua kaki belakang ke belakang dengan mengempiskan

perutnya sehingga permukaan perut menempel pada alas tempat berpijak mencit

tersebut, yaitu alas pada kotak kaca tempat pengamatan. Respon geliat yang timbul

merupakan akibat dari pemberian asam asetat 1% dengan dosis 50 mg/KgBB secara

intraperitonial yang dapat mengiritasi jaringan sehingga menyebabkan jaringan rusak

dan mengakibatkan timbulnya rasa sakit berupa respon geliat.

2. Penetapan dosis asam asetat

Uji analgesik pada penelitian ini menggunakan metode induksi rangsang

kimia. Dalam metode ini, senyawa penginduksi nyeri yang diinjeksikan adalah asam

asetat secara intraperitoneal pada mencit putih betina dengan selang waktu tertentu.

35

Orientasi terhadap dosis asam asetat bertujuan untuk mendapatkan dosis

asam asetat yang memberikan jumlah geliat yang optimal agar dapat diamati

sehingga pengamatan menjadi lebih mudah. Asam asetat adalah suatu iritan yang

merusak jaringan secara lokal, yang menyebabkan nyeri pada rongga perut. Hal itu

disebabkan oleh kenaikan ion H+

akibat turunnya pH di bawah 6 yang menyebabkan

membran sel luka. Luka pada membran sel ini akan mengaktifkan enzim fosfolipase

pada fosfolipid membran sel sehingga menghasilkan asam arakidonat yang akhirnya

akan membentuk prostaglandin. Terbentuknya prostaglandin ini akan meningkatkan

sensitivitas reseptor nyeri sehingga mencit akan memberikan respon dengan cara

menggeliat untuk menyesuaikan keadaan yang dirasakannya.

Pada penetapan dosis asam asetat digunakan tiga peringkat dosis yaitu 25, 50

dan 75 mg/KgBB dengan konsentrasi asam asetat yang digunakan didasarkan pada

penelitian yang telah dilakukan sebelumnya, yaitu 1% (Putra, 2003). Masing-masing

dosis diujikan pada 3 ekor hewan uji kemudian respon geliat diamati tiap 5 menit

selama 1 jam. Hasil jumlah geliat pada penetapan dosis asam asetat serta hasil

analisis statistiknya dapat dilihat pada lampiran serta ringkasannya dapat dilihat pada

tabel 1.

36

Tabel 1. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan ujipada penetapan dosis asam asetat

Kelompok Perlakuan (mg/KgBB) Rata-rata jumlah geliat (X + SE)25 28,0 + 4,050 85,0 + 6,375 87,8 + 1,8

Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)

Rata-rata jumlah kumulatif geliat yang muncul pada penentuan dosis asam

asetat dapat pula disajikan dalam bentuk diagram batang pada gambar 3.

Gambar 3. Rata-rata jumlah kumulatif geliat hewan ujipada penetapan dosis asam asetat

Dari hasil tersebut dapat dilihat bahwa semakin bertambah dosis asam asetat

maka geliat yang terjadi juga semakin banyak. Untuk melihat adanya perbedaan pada

ketiga kelompok tersebut dilakukan analisis variansi satu arah. Berdasarkan hasil

analisis variansi satu arah rata-rata jumlah kumulatif geliat penentuan dosis asam

37

asetat diperoleh probabilitasnya adalah 0,000 (< 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa

pada ketiga kelompok dosis tersebut terdapat perbedaan sehingga dilanjutkan ke uji

Scheffe untuk mengetahui perbedaan tersebut bermakna atau tidak. Hasil uji Scheffe

rata-rata jumlah kumulatif geliat penentuan dosis asam asetat dapat dilihat pada tabel

II.

Tabel II. Hasil uji Scheffe rata-rata jumlah kumulatif geliatpada penentuan dosis asam asetat

Kelompok Dosis (mg/KgBB) 25 50 7525 - B B50 B - TB75 B TB -

Keterangan :B = Berbeda bermakna (p < 0,05)TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)

Hasil uji Scheffe menunjukkan bahwa pemberian asam asetat dosis 25

mg/KgBB berbeda bermakna dengan dosis 50 mg/KgBB maupun 75 mg/KgBB.

Namun dosis 50 mg/KgBB berbeda tidak bermakna dengan dosis 75 mg/KgBB. Hal

ini berarti, dosis 50 mg/KgBB dan dosis 75 mg/KgBB menunjukkan perbedaan

jumlah geliat yang tidak bermakna. Dari hasil tersebut maka pada penelitian ini

digunakan asam asetat dosis 50 mg/KgBB karena dosis tersebut adalah dosis

optimum yang telah memberikan geliat yang dapat diamati sehingga pengamatan

menjadi lebih mudah.

3. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat

Yang dimaksud selang waktu pemberian asam asetat adalah jarak antara

pemberian zat uji secara peroral dengan saat pemberian injeksi asam asetat secara

38

intraperitoneal. Penentuan selang waktu pemberian asam asetat dilakukan untuk

mengetahui waktu yang tepat agar asetosal (kontrol positif) dan larutan ekstrak

metanol-air daun M. tanarius (senyawa uji) dapat memberikan efek yang optimal.

Aksi kerja senyawa tersebut ditunjukkan dengan adanya penurunan pada jumlah

geliat yang diamati. Pada selang waktu tersebut, diharapkan zat uji telah diabsorbsi

sehingga dapat memberikan efek analgesiknya.

Pada penentuan selang waktu pemberian asam asetat ini digunakan asetosal

dosis 500 mg yaitu dosis yang lazim digunakan. Dosis ini kemudian dikonversikan

pada mencit menjadi 91 mg/KgBB. Asam asetat yang digunakan adalah dosis hasil

orientasi yaitu 50 mg/KgBB. Adapun variasi selang waktu yang diujikan adalah 5, 10

dan 15 menit. Rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit selama 60 menit pada

berbagai selang waktu dapat dilihat pada tabel III.

Tabel III. Rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit pada berbagai selang waktumenggunakan asetosal dosis 91 mg/KgBB dan asam asetat dosis 50 mg/KgBB

Kelompok Jumlah geliat (X + SE)5 menit 67,7 + 3,310 menit 45,0 + 1,715 menit 37,3 + 1,3

Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)

Rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit selama 1 jam pada penentuan

selang waktu pemberian asam asetat dosis 50 mg/KgBB dapat pula disajikan dalam

grafik pada gambar 4.

39

Gambar 4. Grafik rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit selama 1 jampada penentuan selang waktu pemberian asam asetat dosis 50 mg/KgBB

Dari hasil tersebut dapat dilihat bahwa semakin lama selang waktu

pemberian asam asetat maka geliat yang terjadi juga semakin berkurang. Untuk

melihat adanya perbedaan pada ketiga kelompok tersebut dilakukan analisis variansi

satu arah. Berdasarkan hasil analisis variansi satu arah diperoleh probabilitasnya

adalah 0,000 (< 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa pada ketiga kelompok selang

waktu tersebut terdapat perbedaan sehingga dilanjutkan ke uji Scheffe untuk

mengetahui perbedaan tersebut bermakna atau tidak. Hasil uji Scheffe rata-rata

jumlah kumulatif geliat penentuan selang waktu pemberian asam asetat dapat dilihat

pada tabel IV.

Tabel IV. Hasil uji Scheffe rata-rata jumlah kumulatif geliat penentuan selang waktupemberian asam asetat dosis 50 mg/KgBB

Kelompok perlakuan selangwaktu pemberian (menit)

5 10 15

5 - B B10 B - TB15 B TB -

Keterangan :B = Berbeda bermakna (p < 0,05)TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)

40

Hasil uji Scheffe menunjukkan bahwa kelompok selang waktu pemberian 5

menit berbeda bermakna dengan selang waktu pemberian 10 menit maupun 15 menit.

Kelompok selang waktu 10 menit berbeda bermakna dengan selang waktu 5 menit

namun berbeda tidak bermakna dengan selang waktu 15 menit.

Jumlah geliat pada selang waktu 5 menit masih terlalu banyak, hal ini

mungkin disebabkan asetosal belum bekerja secara optimal. Sedangkan pada selang

waktu pemberian 10 dan 15 menit terdapat perbedaan jumlah geliat yang tidak

bermakna. Dari hasil tersebut maka pada penelitian ini digunakan asam asetat selang

waktu 15 menit karena dilihat dari rata-rata jumlah geliat pada menit ke-15 lebih

sedikit daripada menit ke-10 sehingga selang waktu 15 menit adalah selang waktu

optimum yang sudah cukup menimbulkan geliat yang dapat diamati.

Pemilihan selang waktu 15 menit berarti asam asetat diberikan pada 15

menit setelah pemberian asetosal 91 mg/KgBB. Selain itu, penetapan selang waktu

ini juga berlaku untuk kelompok kontrol negatif dan kelompok senyawa uji.

D. Hasil Uji Efek Analgesik Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius

Pengujian efek analgesik ekstrak metanol-air daun M. tanarius dilakukan

sesuai dengan ketentuan yang diperoleh pada uji pendahuluan. Dari uji pendahuluan

yang telah dilakukan, diperoleh zat penginduksi nyeri yang digunakan adalah asam

asetat 1% 50 mg/KgBB. Kontrol positif yang digunakan adalah asetosal 91

mg/KgBB, yang diberikan 15 menit sebelum pemberian asam asetat 50 mg/KgBB.

41

Dengan menggunakan hasil orientasi, diperoleh rata-rata kumulatif jumlah geliat pada

kelompok perlakuan dengan tiga peringkat dosis ekstrak metanol-air daun M.

tanarius (EDM) berurut-urut yaitu 711 mg/KgBB, 2.133 mg/KgBB dan 6.400

mg/KgBB beserta kelompok kontrol negatif CMC Na 1% 6.400 mg/KgBB dan

kontrol positif asetosal 91 mg/KgBB. Data-data tersebut kemudian dianalisis secara

statistik dan akan diperoleh persen proteksi senyawa uji terhadap nyeri yang

dibandingkan dengan kontrol negatif (tabel V).

Tabel V. Hasil rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit dan persen proteksipada pengujian efek analgesik kelompok uji kontrol negatif, positif dan

3 peringkat dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius (EDM)

Kelompok UjiJumlahsubjek

uji

Rata-ratajumlah geliat

(X + SE)

Rata-ratapersen proteksi

(X + SE)CMC Na 1% 6.400 mg/KgBB 5 97,6 + 2,2 -0,0+ 2,3Asetosal 91 mg/KgBB 5 38,6 + 2,3 60,5+ 2,4EDM 711 mg/KgBB 5 67,0 + 2,8 31,4 + 2,9EDM 2.133 mg/KgBB 5 37,0 + 2,7 62,1 + 2,7EDM 6.400 mg/Kg BB 5 17,4 + 1,0 82,2 + 1,1

Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)EDM = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Rata-rata jumlah kumulatif geliat mencit dan persen proteksi pada pengujian

efek analgesik seluruh kelompok uji dapat pula disajikan dalam bentuk diagram

batang pada gambar 5.

42

(a)

(b)Gambar 5.(a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada pengujian efek analgesikkelompok uji yaitu kelompok kontrol negatif, kontrol positif, peringkat dosis EDM(b) Diagram batang rata-rata persen proteksi pada pengujian efek analgesik kelompokuji yaitu kelompok kontrol negatif, kontrol positif, peringkat dosis EDM

43

Dari hasil tersebut dapat terlihat bahwa rata-rata jumlah geliat berbanding

terbalik dengan rata-rata proteksi geliat. Semakin banyak geliat berarti semakin kecil

proteksi geliat atau daya analgesiknya. Pada kelompok kontrol negatif memiliki rata-

rata jumlah geliat yang paling banyak yaitu 97,6 +2,2 disebabkan karena kontrol

negatif CMC Na 1% 6.400 mg/KgBB tidak memiliki kemampuan dalam mengatasi

nyeri sehingga geliat yang dihasilkan paling banyak.

Pada kelompok kontrol positif asetosal 91 mg/KgBB menunjukkan jumlah

geliat yang lebih kecil dibandingkan dengan kontrol negatif CMC Na 1% 6.400

mg/KgBB yaitu 38,6+2,3. Hal ini berarti asetosal 91 mg/KgBB yang diketahui

sebagai obat analgesik mampu mengatasi nyeri sehingga geliat yang dihasilkan lebih

sedikit dibandingkan kontrol negatif.

Pada kelompok perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dari dosis

terendah hingga tertinggi berturut-turut menunjukkan jumlah geliat yang dihasilkan

semakin kecil yaitu 67,0+2,8; 37,0+2,7 dan 17,4+1,0. Hal ini menunjukkan bahwa

semakin tinggi dosis dari ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang diberikan pada

hewan uji maka semakin kecil pula geliat yang dihasilkan yang menunjukkan bahwa

ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki kemampuan dalam mengatasi nyeri.

Persen proteksi geliat pada masing-masing kelompok uji kemudian dianalisis

menggunakan analisis variansi satu arah dengan taraf kepercayaan 95% untuk melihat

apakah diantara kelompok perlakuan mempunyai perbedaan atau tidak. Berdasarkan

hasil analisis variansi satu arah diperoleh probabilitasnya adalah 0,000 (< 0,05). Hal

44

ini menunjukkan bahwa pada kelima kelompok uji tersebut terdapat perbedaan

sehingga dilanjutkan ke uji Scheffe untuk mengetahui perbedaan tersebut bermakna

atau tidak. Hasil uji Scheffe persen proteksi pada pengujian efek analgesik seluruh

kelompok uji pada tabel VI.

Tabel VI. Hasil uji Scheffe persen proteksi pada pengujian efek analgesik kelompok ujikontrol negatif, positif dan 3 peringkat dosis ekstrak metanol-air

daun M. tanarius (EDM)

KelompokCMC Na 1%

6.400mg/KgBBAsetosal

91mg/KgBBEDM

711mg/KgBBEDM

2.133mg/KgBBEDM

6.400mg/KgBBCMC Na1%6.400mg/KgBB

- B B B B

Asetosal 91mg/KgBB B - B TB BEDM 711 mg/KgBB B B - B BEDM 2.133 mg/KgBB B TB B - BEDM 6.400mg/Kg BB B B B B -

Keterangan :TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)B = Berbeda bermakna (p < 0,05)EDM = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Besar persen proteksi kelompok ekstrak metanol-air daun M. tanarius 711

mg/KgBB, 2.1333 mg/KgBB dan 6.400 mg/KgBB berturut-turut adalah 31,4%,

62,1%, 82,2%. Hasil uji Scheffe menunjukkan bahwa kelompok kontrol negatif CMC

Na 1% 6.400 mg/KgBB memiliki perbedaan yang bermakna dengan kelompok

kontrol positif asetosal 91 mg/KgBB dan ketiga kelompok senyawa uji ekstrak

metanol-air daun M. tanarius. Hal ini menunjukkan bahwa kontrol negatif yaitu CMC

Na 1% 6.400 mg/KgBB tidak memiliki efek analgesik yang ditunjukkan dengan

persen proteksi yang kecil yaitu -0,0+ 2.3.

Pada kelompok kontrol positif yaitu asetosal 91 mg/KgBB dan ketiga

perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius terjadi proteksi terhadap nyeri yang

45

ditunjukkan dengan berkurangnya respon geliat mencit dibandingkan dengan

kelompok kontrol negatif CMC Na 1% 6.400 mg/KgBB.

Uji Scheffe menunjukkan bahwa diantara kelompok kontrol positif asetosal

91 mg/KgBB dengan kelompok ekstrak metanol-air daun M. tanarius 2.133

mg/KgBB terdapat perbedaan persen proteksi yang tidak bermakna. Oleh karena itu

dapat dikatakan bahwa antara ekstrak metanol-air daun M. tanarius 2.133 mg/KgBB

memberikan efek yang sebanding dengan kontrol positif asetosal 91 mg/KgBB.

Dari analisis data diketahui bahwa asetosal 91 mg/KgBB terhadap ekstrak

metanol-air daun M. tanarius 711 mg/KgBB dan 6.400 mg/KgBB menunjukkan

perbedaan yang bermakna. Hal ini dikarenakan ekstrak metanol-air daun M. tanarius

dosis terendah yaitu 711 mg/KgBB memiliki persen proteksi 31,4+2,9 yang jauh

lebih kecil dibandingkan persen proteksi asetosal 91 mg/KgBB yaitu 60,5+2,4.

Sedangkan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dosis tertinggi yaitu 6.400

mg/KgBB memiliki persen proteksi 82,2 + 1,1 yang jauh lebih besar dibandingkan

asetosal 91 mg/KgBB.

Hal ini menunjukkan bahwa dosis 711 mg/KgBB kurang dapat menghambat

nyeri dibandingkan dosis 2.133 mg/KgBB dan dosis 6.400 mg/KgBB. Dapat

dikatakan bahwa pada dosis yang terendah ekstrak daun M. tanarius 711 mg/KgBB

tidak memberikan efek penghambatan nyeri sekuat dosis 2.133 mg/KgBB atau 6.400

mg/KgBB. Hal ini diduga karena jumlah kandungan zat aktif yang terdapat pada

ekstrak metanol-air daun M. tanarius belum cukup untuk menimbulkan efek

46

analgesik pada hewan uji maka dibutuhkan dosis yang lebih besar untuk

mendapatkan efek penghambatan nyeri yang maksimal.

Suatu senyawa uji dikatakan memiliki efek analgesik jika mampu

mengurangi ≥50% dari jumlah geliat pada kelompok kontrol negatif (Pyitomedika,

1991). Oleh karena itu, dari ketiga dosis ekstrak maka dosis 2.133 dan 6.400

mg/KgBB yang memenuhi syarat untuk dapat dikatakan memiliki efek analgesik

karena memiliki persen proteksi geliat atau penghambatan nyeri lebih dari 50%

sedangkan dosis 711 mg/KgBB tidak memiliki efek analgesik karena persen proteksi

geliat tidak lebih dari 50%, kemungkinan dosis ini terlalu kecil untuk menimbulkan

efek analgesik. Hal ini dapat disebabkan karena digunakan penyari kombinasi antara

metanol-air (50:50), yang belum diketahui secara pasti kandungan glikosida yang

dapat larut dan tertarik serta paling dominan dari ekstrak tersebut, sehingga

dimungkinkan bahwa kandungan dalam kombinasi tersebut akan menurunkan

aktivitas penangkapan radikal bebas yang dapat berpengaruh pada pengunaan dosis

ekstrak yang kecil. Oleh karena itu, dapat dilakukan pengembangan lebih lanjut

terkait pengguna penyari yang berbeda yang diharapkan dapat menarik senyawa yang

memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas yang lebih kuat sehingga penggunaan

ekstrak pada dosis kecil dapat pula dijangkau.

Pada penelitian ini digunakan penyari kombinasi antara metanol-air,

diketahui bahwa metanol bersifat toksik pada kadar tertentu sehingga dibutuhkan

parameter sisa pelarut yaitu dengan menentukan kandungan sisa pelarut metanol-air.

47

Tujuan digunakan parameter ini yaitu untuk memberikan jaminan bahwa selama

proses ekstraksi tidak meninggalkan sisa pelarut metanol-air yang memang

seharusnya tidak diperbolehkan ada.

Berdasarkan hasil perhitungan persen proteksi kemudian dihitung perubahan

persen efek analgesik ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap kontrol positif

asetosal 91 mg/KgBB. Rata-rata perubahan persen efek analgesik kelompok kontrol

negatif dan kelompok ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap kontrol positif

asetosal 91 mg/KgBB pada pengujian efek analgesik seluruh kelompok uji pada tabel

VII.

Tabel VII. Rata-rata perubahan persen efek analgesik kelompok kontrol negatif dankelompok ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap

kontrol positif asetosal pada pengujian efek analgesik

Kelompok Uji Rata-rata perubahan persen proteksi (X + SE)CMC Na 1% 6400 mg/Kg -100,0 + 3,8Asetosal 91 mg/KgBB 0,0+ 3,9EDM 711 mg/KgBB -48,1+ 4,8EDM 2133 mg/KgBB +2,7+ 4,5EDM 6400 mg/Kg BB +35,9 + 1,7

Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)EDM = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Rata-rata perubahan persen efek analgesik kelompok kontrol negatif dan

kelompok ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap kontrol positif asetosal 91

mg/KgBB pada pengujian efek analgesik seluruh kelompok uji dapat pula disajikan

dalam bentuk diagram batang seperti gambar 6.

48

Gambar 6. Perubahan persen proteksi geliat pada kelompok perlakuan kontrol negatifdan kelompok ekstrak metanol-air daun M. tanarius terhadap kontrol positif asetosal

pada pengujian efek analgesik

Perubahan persen efek analgesik kelompok perlakuan kemudian dianalisis

menggunakan analisis variansi satu arah untuk melihat apakah diantara kelompok uji

memiliki perbedaan. Berdasarkan hasil analisis variansi satu arah diperoleh

probabilitasnya adalah 0,000 (< 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa pada kelima

kelompok uji tersebut terdapat perbedaan sehingga dilanjutkan ke uji Scheffe untuk

mengetahui perbedaan tersebut bermakna atau tidak. Hasil uji Scheffe perubahan

persen proteksi pada pengujian efek analgesik seluruh kelompok terhadap kontrol

positif dapat dilihat pada tabel VIII.

49

Tabel VIII. Hasil uji Scheffe perubahan persen proteksi kelompok perlakuan kontrolnegatif dan kelompok ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius terhadap kontrol

positif asetosal pada pengujian efek analgesik

KelompokCMC Na 1%

6.400mg/KgBBAsetosal

91mg/KgBBEDM

711 mg/KgBBEDM

2.133mg/KgBBEDM

6.400mg/KgBBCMC Na1% 6.400mg/KgBB - B B B BAsetosal 91mg/KgBB B - B TB BEDM 711 mg/KgBB B B - B BEDM 2.133mg/KgBB B TB B - BEDM 6.400mg/KgBB B B B B -

Keterangan :TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)B = Berbeda bermakna (p < 0,05)EDM = Ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Kontrol negatif CMC Na 1% dosis 6.400mg/KgBB dengan perubahan

persen proteksi geliat -100,0+3,8 memiliki perbedaan 100% dengan kontrol positif

asetosal 91 mg/KgBB 0,0+ 3,9. Hal ini disebabkan tidak terjadi penghambatan

rangsang nyeri dalam kontrol negatif, sehingga diketahui kontrol negatif tersebut

dikatakan tidak memiliki efek analgesik.

Pada kelompok perlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius dalam

berbagai dosis, angka tertinggi dimiliki oleh kelompok dosis 6.400 mg/KgBB yaitu

sebesar 35,9 + 1,7% dan diikuti selanjutnya oleh dosis 2.133 mg/KgBB yaitu sebesar

2,7+ 4,5. Hal ini menunjukkan bahwa perubahan persen proteksi geliat kedua dosis

tersebut telah mendekati bahkan melebihi 35,9 dan 2,7 kali daripada kontrol positif

asetosal 91 mg/KgBB yaitu 0,0+ 3,9, yang berarti mampu menurunkan jumlah geliat

lebih banyak sehingga lebih efektif dibandingkan asetosal 91 mg/KgBB. Sedangkan

untuk dosis 711 mg/KgBB yaitu sebesar -48,1+4,8% tidak memiliki kemampuan

menghambat nyeri yang sebanding dengan asetosal 91 mg/KgBB. Hal ini dapat

disebabkan karena pada dosis ini kandungan senyawa aktif yang berefek analgesik

masih terlalu sedikit sehingga efek yang timbul

maksimal.

Pada penelitian ini dapat juga diperoleh besar

dosis yang menyebabkan dimana 50% populasi menimbulkan efek analgesik yang

dihitung secara ekstrapolasi. Adapun persamaan regresi linear yang didapat yaitu y=

53,23x-118,6 dengan r= 0,985. Persamaan ini didapat dengan cara memplotkan log

dosis vs persen proteksi geliat. Dari persamaan tersebut didapatkan ED

metanol-air daun M. tanarius

Gambar 7. Persamaan garis

Pada penelitian ini digunakan konsentrasi ekstrak metanol

tanarius terpekat yang dapat dibuat dengan dosis paling tinggi yaitu

mg/KgBB. Bila dosis ini dikonversikan kepada manusia

sebesar 92,4 ml ekstrak

masih terlalu sedikit sehingga efek yang timbul untuk menghambat geliat

Pada penelitian ini dapat juga diperoleh besar Effective Dose

dosis yang menyebabkan dimana 50% populasi menimbulkan efek analgesik yang

dihitung secara ekstrapolasi. Adapun persamaan regresi linear yang didapat yaitu y=

118,6 dengan r= 0,985. Persamaan ini didapat dengan cara memplotkan log

sen proteksi geliat. Dari persamaan tersebut didapatkan ED

M. tanarius sebesar 1.470 mg/KgBB.

Gambar 7. Persamaan garis ED50 ekstrak metanol-air daun

Pada penelitian ini digunakan konsentrasi ekstrak metanol

terpekat yang dapat dibuat dengan dosis paling tinggi yaitu

mg/KgBB. Bila dosis ini dikonversikan kepada manusia 50 Kg didapatkan dosis

ekstrak atau 190 gram serbuk, dosis ini terlalu tinggi sehingga perlu

50

untuk menghambat geliat tidak

Effective Dose 50 (ED50) yaitu

dosis yang menyebabkan dimana 50% populasi menimbulkan efek analgesik yang

dihitung secara ekstrapolasi. Adapun persamaan regresi linear yang didapat yaitu y=

118,6 dengan r= 0,985. Persamaan ini didapat dengan cara memplotkan log

sen proteksi geliat. Dari persamaan tersebut didapatkan ED50 ekstrak

air daun M. tanarius

Pada penelitian ini digunakan konsentrasi ekstrak metanol-air daun M.

terpekat yang dapat dibuat dengan dosis paling tinggi yaitu sebesar 6.400

50 Kg didapatkan dosis

au 190 gram serbuk, dosis ini terlalu tinggi sehingga perlu

dilakukan uji toksisitas

keamanan bila ekstrak ini digunakan pada manusia.

Kandungan

dan dapat memberikan efek analgesik adalah

didalamnya yaitu mal

struktur memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas

karbonil (C=O) dengan ikatan rangkap terkonjugasi

unsaturated. Ciri khas dari i

ikatan phi sekaligus, diketahui bahwa elektron pada ikatan sigma kuat sedangkan

elektron pada ikatan phi lemah, se

atau berpindah. Jika ikatan

perpindahan elektron seperti pada gambar 8

Gambar 8. Perpindahan elektron ikatan

Atom C pada posisi β

elektron pada ikatan phi. Kemungkinan besar

menangkap radikal bebas

dilakukan uji toksisitas ekstrak metanol-air daun M. tanarius

keamanan bila ekstrak ini digunakan pada manusia.

Kandungan kimia ekstrak metanol-air daun M. tanarius

dan dapat memberikan efek analgesik adalah golongan glikosida

malofenol B dan macarangiosida A yang diketahui

struktur memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas dikarenakan adanya gugus

dengan ikatan rangkap terkonjugasi dan memiliki ikatan

Ciri khas dari ikatan α-β unsaturated yaitu memiliki ikatan sigma dan

phi sekaligus, diketahui bahwa elektron pada ikatan sigma kuat sedangkan

ikatan phi lemah, sehingga elektron pada ikatan phi dapat melompat

. Jika ikatan α-β unsaturated terprotonasi, maka akan terjadi

n elektron seperti pada gambar 8.

Perpindahan elektron ikatan α-β unsaturated pada macarangiosida A.

Atom C pada posisi β akan bermuatan positif. Hal ini dikarenakan adanya lompatan

elektron pada ikatan phi. Kemungkinan besar, atom C pada posisi

menangkap radikal bebas.

O O-a

b

α

β

51

anarius untuk menjamin

M. tanarius yang diduga larut

glikosida dari senyawa

ng diketahui dari pendekatan

akan adanya gugus

memiliki ikatan α-β

yaitu memiliki ikatan sigma dan

phi sekaligus, diketahui bahwa elektron pada ikatan sigma kuat sedangkan

tron pada ikatan phi dapat melompat

terprotonasi, maka akan terjadi

pada macarangiosida A.

akan bermuatan positif. Hal ini dikarenakan adanya lompatan

atom C pada posisi β inilah yang akan

+-OH

52

Sumber utama radikal bebas diantaranya pada proses sintesis prostaglandin.

Radikal bebas yang berlebihan akan menyebabkan kerusakan jaringan sehingga

menimbulkan nyeri. Dalam proses nyeri dan peradangan, radikal bebas terbentuk

ketika asam arakhidonat dikonversi menjadi endoperoksida melalui jalur

siklooksigenase dan hidroperoksida melalui jalur lipooksigenase sehingga terjadi

pelepasan mediator nyeri dan inflamasi.

Ketika terjadi kerusakan jaringan, jumlah radikal bebas meningkat seiring

dengan peningkatan produksi peroksida, padahal diketahui tubuh memproduksi

antioksidan endogen yang terbatas seperti superoksida dismutase (SOD) yang bekerja

menstabilkan radikal bebas. Apabila jumlah radikal bebas semakin banyak, maka

antioksidan endogen tidak mampu lagi mengatasinya secara efektif sehingga

dibutuhkan antioksidan dari luar (eksogen). Adanya senyawa macarangiosida A dan

malofenol B sebagai antioksidan dapat menangkap radikal bebas tersebut yang

diduga dapat menghambat jalur siklooksigenase dan lipooksigenase sehingga asam

arakhidonat tidak akan dikonversi menjadi endoperoksida dan asam hidroperoksida.

Dengan demikian pelepasan mediator nyeri dan inflamasi dapat dihambat sehingga

tidak akan terjadi nyeri.

Gambar 9. Mekanisme pelepasan mediator nyeri dan inflamasi

Nyeri timbul oleh karena aktivasi dan sensitisasi sistem nosiseptif, baik

perifer maupun sentral. Dalam keadaan normal, reseptor

keadaan patologis, misalnya inflamasi, nosiseptor menjadi sensitif bahkan

hipersensitif. Adanya pencederaan jaringan akan membebaskan berbagai jenis

mediator inflamasi, seperti prostaglandin, bradikinin, histamin dan sebagainya.

Mediator inflamasi dapat mengaktivasi nosiseptor yang menyebabkan munculnya

nyeri (Lelo, Hidayat dan Juli, 2004).

. Mekanisme pelepasan mediator nyeri dan inflamasi (Tjay dan Rahardja, 2007)

Nyeri timbul oleh karena aktivasi dan sensitisasi sistem nosiseptif, baik

perifer maupun sentral. Dalam keadaan normal, reseptor tersebut tidak aktif. Dalam

keadaan patologis, misalnya inflamasi, nosiseptor menjadi sensitif bahkan

hipersensitif. Adanya pencederaan jaringan akan membebaskan berbagai jenis

mediator inflamasi, seperti prostaglandin, bradikinin, histamin dan sebagainya.

Mediator inflamasi dapat mengaktivasi nosiseptor yang menyebabkan munculnya

nyeri (Lelo, Hidayat dan Juli, 2004).

53

(Tjay dan Rahardja, 2007).

Nyeri timbul oleh karena aktivasi dan sensitisasi sistem nosiseptif, baik

tersebut tidak aktif. Dalam

keadaan patologis, misalnya inflamasi, nosiseptor menjadi sensitif bahkan

hipersensitif. Adanya pencederaan jaringan akan membebaskan berbagai jenis

mediator inflamasi, seperti prostaglandin, bradikinin, histamin dan sebagainya.

Mediator inflamasi dapat mengaktivasi nosiseptor yang menyebabkan munculnya

54

Akan tetapi perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk memastikan

senyawa aktif yang bertanggung jawab dalam efek analgesik tersebut. Hal ini

dikarenakan belum adanya informasi yang mencantumkan tentang efek analgesik dari

tanaman M. tanarius, khususnya bagian daunnya sehingga senyawa aktif yang

bertanggung jawab atas efek analgesiknya juga belum dapat dipastikan.

Penelitian ini merupakan skrining awal yang menunjukkan bahwa daun M.

tanarius yang biasa hanya dijadikan pakan ternak hewan ternyata memiliki efek

analgesik. Hal ini memberikan bukti bahwa daun M. tanarius berpotensi untuk

dijadikan sebagai salah satu tanaman alternatif pengobatan yang dapat digunakan

sebagai analgesik.

55

BAB VKESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

1. Ekstrak metanol-air daun M. tanarius mempunyai efek analgesik terhadap

mencit betina galur Swiss.

2. Besar persen proteksi ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada dosis

711, 2.133 dan 6.400 mg/KgBB berturut-turut adalah 41,94; 67,94 dan

84,92%.

3. Besar perubahan persen proteksi ekstrak metanol-air daun M. tanarius

pada dosis 711, 2.133 dan 6.400 mg/KgBB berturut-turut adalah -48,1;

+2,7; dan +35,9%.

4. Besar ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah 1.470 mg/KgBB

B. Saran

1. Penelitian efek analgesik daun M. tanarius dengan jenis penyari berbeda,

yang kemudian dibandingkan aktivitas analgesik.

2. Perlu dilakukan penelitian mengenai standarisasi sisa penyari ekstrak.

3. Penelitian mengenai toksisitas ekstrak metanol-air daun M. tanarius.

4. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai senyawa yang

bertanggung jawab terhadap efek analgesik dari ekstrak metanol-air daun

M. tanarius.

56

DAFTAR PUSTAKA

Depkes RI, 1986, Sediaan Galenik, 25, Departemen Kesehatan Republik Indonesia,Jakarta

Pyitomedika, 1991, Penapisan Farmakologi Pengujian Fitokimia dan PengujianKlinik, 49, Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alami Pyitomedika, Jakarta

Depkes RI, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, 31, Departemen KesehatanRepublik Indonesia, Jakarta

Anonim,2010a,Prosea-Macarangatanarius,http://www.proseanet.org/prohati4/browser.php?docsid=162, diakses tanggal19 Maret 2010

Anonim, 2010b, Pain, http://medical-dictionary.thefreedictionary.com/Pain, diaksestanggal 24 November 2010

Anonim, 2010c, Informasi Obat Asetosal,http://diskes.jabarprov.go.id/index.php?mod=pubInformasiObat&idMenuKiri=45&idSelected=1&idObat=18&page, diakses tanggal 24 November 2010

Dewoto, H. R., 2006, Nyeri pada Sistem Muskuloskeletal, Departemen Farmakologi& Terapeutik FKUI

Dipiro, J.T., Tabert, R. L., Yee, G. C., Matzke, G. R., Wells, B. G., dan Posey, M.,2008, Pharmacotherapy: A Patiphysiologic Approach, 991, Appleton andLange, USA

Dugdale, D.C., 2009, Pain, http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/pain.html, diaksestanggal 22 November 2010

Handara, P. D., 2006, Efek Analgesik Infusa Batang Brotowali (Tinospora crispa (L)Miers.) Pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Universitas Sanata DharmaYogyakarta

Helmenstine, A. M., 2010, Aspirin or Acetylsalicylic Acidhttp://chemistry.about.com/od/medicalhealth/ig/DrugPhotoGallery/Aspirin.-1VJ.htm, diakses tanggal 22 November 2010

57

Katzung, B. G., 2004, Farmakologi Dasar dan Klinik, Buku 2, Edisi 8, 449,diterjemahkan oleh Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran UniversitasAirlangga, Salemba Medika, Jakarta

Koorders, S.H., dan Th. Valeton, 1918, Atlas Der Baumarten Von Java, Buch undSteindruckerei von Fa. P. W. M. TRAP, Leiden

Lim, T.Y., Lim, Y.Y., Yule, C. M., 2009, Evaluation of Antioxidant, antibacterialand anti-tyrosinase activities of Four Macaranga species, Food Chemistry,114, 594-599

Lin, J.H., Nonaka, G., dan Nishioka, I., 1990, Tannins and Related Compounds.XCIV.1)Isolation and Characterization of Seven New Hydrolyzable Tanninsfrom the Leaves of Macarangan tanarius (L.) MUEL(L.), et ARG., Chem.Pharm. Bul(L.) 38 (5) 1218-1223

Lelo, A., Hidayat, D.S., dan Juli, S., 2004, Penggunaan Anti-Inflamasi Non-SteroidYang Rasional Pada Penanggulangan Nyeri Rematik, Fakultas KedokteranBagian Farmakologi dan Terapeutik Universitas Sumatera Utara

Matsunami, K., Takamori, I., Shinzato, T., Aramoto, M., Kondo,K., Otsuka, H., dkk2006, Radical-Scavenging Activities of New Megastigmane Glucosides fromMacaranga tanarius (L.) MÜL(L.)-ARG., Chem. Pharm. Bul(L.) 54(10)1403—1407

Matsunami, K., Otsuka, H., Kondo, K., Shinzato, T., Kawahata, M., Yamaguchi, K.,dkk 2009, Absolute configuration of (+)-pinoresinol 4-O-[600-O-galloyl]-b-D-glucopyranoside, macarangiosides E, and F isolated from the leaves ofMacaranga tanarius, Phytochemistry 70 (2009) 1277–1285

Phommart, S., Sutthivaiyakit, P., Chimnoi, N., Ruchirawat, S., dan Sutthivaiyakit, S.,2005, Constituents of the Leaves of Macaranga tanarius, J. Nat. Prod., 68,927-930

Price, S.A., dan Wilson, L. M., 2005, Pathophysiology: Clinical Concepts of DiseaseProcesses, diterjemahkan oleh Pendit, B. U., dkk., Edisi 6, Vol.2, 1063, EGC,Jakarta

Puteri, M.G., dan Kawabata, J. 2010, Novel α-glucosidase inhibitors from Macarangatanarius leaves, food chemistry, 123 (2010), 384-389

58

Putra, D.K., 2003, Efek Analgesik Air Perasan Umbi Wortel (Daucus carota L.) padaMencit Putih Betina ( kajian terhadap lama masa pemberian), Skripsi,Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

Riadiani, R. P., 2006, Efek Analgesik Ekstrak Petroleum Eter Daun Senggani(Melastoma polyanthum BI.) Pada Mencit Putih Betina, Skripsi, UniversitasSanata Dharma Yogyakarta

Robinson, T., 1995, The Organic Constituents of Higher Plants, 6 th edition,diterjemahkan oleh Padmawinata, K., 191, Penerbit ITB, Bandung

Schmitz, G., Lepper, H., dan Heidrich, M., 2009, Pharmacards: LernkartensystemPharmakologie und Toxikologie, diterjemahkan oleh Setiadi, L., Edisi III,226, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta

Soedibyo, M., 1998, Alam Sumber Kesehatan Manfaat dan Kegunaan, 352, BalaiPustaka, Jakarta

Tjay, T. H., dan Rahardja, K., 2007, Obat-obat Penting: Khasiat penggunaan danEfek-efek Sampingnya, Edisi VI, Cetakan ke-1, 310-312, DepartemenKesehatan Republik Indonesia, Jakarta

Turner, R. A., 1965, Screening Method in Pharmacology, Vol I, 160, Academic Press,New York

Tusthi, G. N. T., 2007, Uji Efek Analgesik Ekstrak Etanol Daun Senggani(Melastoma polyanthum BI.) Pada Mencit Putih Betina, Skripsi, UniversitasSanata Dharma Yogyakarta

Wilmana, E. M., 1995, Analgesik Anti inflamasi Non Steroid dan Obat Pirai dalamGaniswara, S. G., 1995, Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, 210-212, BagianFarmakologi Fakutas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta

LAMPIRAN

59

LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto daun M. tanarius (Anonim, 2010a)

Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Lampiran 3. Foto larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Lampiran 4. Foto geliat mencit yang memenuhi definisi operasional

60

Lampiran 5. Penetapan dosis asam asetat berserta hasil analisis statistiknya

NPar Tests

Descriptive Statistics

N Mean Std. Deviation Minimum Maximum

Orientasi dosis asam asetat 9 2.0000 .86603 1.00 3.00

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

Orientasi dosis asam asetat

N 9

Mean 2.0000Normal Parametersa,,b

Std. Deviation .86603

Absolute .209

Positive .209

Most Extreme Differences

Negative -.209

Kolmogorov-Smirnov Z .628

Asymp. Sig. (2-tailed) .826

a. Test distribution is Normal.

b. Calculated from data.

Oneway

Descriptives

Jumlah geliat

95% ConfidenceInterval for Mean

N MeanStd.

Deviation Std. ErrorLowerBound

UpperBound Minimum Maximum

25mg/kgBB

3 28.0000 7.00000 4.04145 10.6110 45.3890 20.00 33.00

50mg/kgBB

3 85.0000 10.81665 6.24500 58.1299 111.8701 76.00 97.00

75mg/kgBB

3 87.6667 3.05505 1.76383 80.0775 95.2558 85.00 91.00

Total 9 66.8889 29.93094 9.97698 43.8819 89.8958 20.00 97.00

ANOVA

Jumlah geliat

Sum of Squares Df Mean Square F Sig.

Between Groups 6816.222 2 3408.111 58.314 .000

Within Groups 350.667 6 58.444

Total 7166.889 8

61

Post Hoc Tests

Multiple Comparison

Scheffe

95% Confidence Interval(I) orientasidosis asamasetat

(J)orientasidosis asamasetat

MeanDifference

(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

50mg/kgBB

-57.00000* 6.24203 .000 -77.0198 -36.980225 mg/kgBB

75mg/kgBB

-59.66667* 6.24203 .000 -79.6865 -39.6469

25mg/kgBB

57.00000* 6.24203 .000 36.9802 77.019850 mg/kgBB

75mg/kgBB

-2.66667 6.24203 .914 -22.6865 17.3531

25mg/kgBB

59.66667* 6.24203 .000 39.6469 79.686575 mg/kgBB

50mg/kgBB

2.66667 6.24203 .914 -17.3531 22.6865

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Homogeneous Subsets

Jumlah geliat

Scheffea

Subset for alpha = 0.05Orientasidosis asamasetat N 1 2

25 mg/kgBB 3 28.0000

50 mg/kgBB 3 85.0000

75 mg/kgBB 3 87.6667

Sig. 1.000 .914

Means for groups in homogeneous subsetsare displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size =3,000.

62

Lampiran 6. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat berserta hasil analisisstatistiknyaNPar Tests

Descriptive Statistics

N Mean Std. Deviation Minimum Maximum

Orientasi selang waktupemberian asam asetat

9 2.0000 .86603 1.00 3.00

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

Orientasi selang waktu pemberianasam asetat

N 9

Mean 2.0000Normal Parametersa,,b

Std. Deviation .86603

Absolute .209

Positive .209

Most Extreme Differences

Negative -.209

Kolmogorov-Smirnov Z .628

Asymp. Sig. (2-tailed) .826

a. Test distribution is Normal.

b. Calculated from data.

Oneway

Descriptives

Jumlah geliat

95% Confidence Intervalfor Mean

N MeanStd.

DeviationStd.

ErrorLowerBound Upper Bound Minimum Maximum

5 menit 3 67.6667 5.77350 3.33333 53.3245 82.0088 61.00 71.00

10 menit 3 45.0000 3.00000 1.73205 37.5476 52.4524 42.00 48.00

15 menit 3 37.3333 2.30940 1.33333 31.5965 43.0702 36.00 40.00

Total 9 50.0000 14.08900 4.69633 39.1702 60.8298 36.00 71.00

ANOVA

Jumlah geliat

Sum of Squares Df Mean Square F Sig.

Between Groups 1492.667 2 746.333 46.972 .000

Within Groups 95.333 6 15.889

Total 1588.000 8

63

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Jumlah geliatScheffe

95% Confidence Interval(I) orientasiselangwaktupemberianasam asetat

(J) orientasiselangwaktupemberianasam asetat

Mean Difference(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

10 menit 22.66667* 3.25463 .001 12.2282 33.10515 menit

15 menit 30.33333* 3.25463 .000 19.8949 40.7718

5 menit -22.66667* 3.25463 .001 -33.1051 -12.228210 menit

15 menit 7.66667 3.25463 .140 -2.7718 18.1051

5 menit -30.33333* 3.25463 .000 -40.7718 -19.894915 menit

10 menit -7.66667 3.25463 .140 -18.1051 2.7718

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Homogeneous Subsets

Jumlah geliat

Scheffea

Subset for alpha = 0.05Orientasi selang waktupemberian asam asetat N 1 2

15 menit 3 37.3333

10 menit 3 45.0000

5 menit 3 67.6667

Sig. .140 1.000

Means for groups in homogeneous subsets aredisplayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.

64

Lampiran 7. Hasil kelompok uji efek analgesik berserta hasil analisis statistiknyaNPar Tests

Descriptive Statistics

N Mean Std. Deviation Minimum Maximum

Perlakuan 25 3.0000 1.44338 1.00 5.00

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

perlakuan

N 25

Mean 3.0000Normal Parametersa,,b

Std. Deviation 1.44338

Absolute .156

Positive .156

Most Extreme Differences

Negative -.156

Kolmogorov-Smirnov Z .779

Asymp. Sig. (2-tailed) .579

a. Test distribution is Normal.

b. Calculated from data.

Oneway

Descriptives

jumlah_geliat

95% ConfidenceInterval for Mean

N MeanStd.

DeviationStd.

ErrorLowerBound

UpperBound Minimum Maximum

kontrol negatifCMC Na 1%

5 97.6000 4.97996 2.22711 91.4166 103.7834 94.00 106.00

kontrol positifasetosal

5 38.6000 5.17687 2.31517 32.1721 45.0279 34.00 47.00

EDM dosis 711mg/kgBB

5 67.0000 6.28490 2.81069 59.1963 74.8037 60.00 75.00

EDM dosis 2133mg/kgBB

5 37.0000 5.95819 2.66458 29.6019 44.3981 31.00 45.00

EDM dosis 6400mg/kgBB

5 17.4000 2.30217 1.02956 14.5415 20.2585 15.00 21.00

Total 25 51.5200 28.90519 5.78104 39.5885 63.4515 15.00 106.00

65

ANOVA

Jumlah geliat

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 19524.640 4 4881.160 185.033 .000

Within Groups 527.600 20 26.380

Total 20052.240 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Scheffe

95% ConfidenceInterval

(I) perlakuan (J) perlakuan

MeanDifferenc

e (I-J) Std. Error Sig.LowerBound

UpperBound

kontrol positifasetosal

59.00000* 3.24838 .000 48.0013 69.9987

EDM dosis 711mg/kgBB

30.60000* 3.24838 .000 19.6013 41.5987

EDM dosis2133 mg/kgBB

60.60000* 3.24838 .000 49.6013 71.5987

kontrol negatif CMC Na1%

EDM dosis6400 mg/kgBB

80.20000* 3.24838 .000 69.2013 91.1987

kontrol negatifCMC Na 1%

-59.00000*

3.24838 .000 -69.9987 -48.0013

EDM dosis 711mg/kgBB

-28.40000*

3.24838 .000 -39.3987 -17.4013

EDM dosis2133 mg/kgBB

1.60000 3.24838 .993 -9.3987 12.5987

kontrol positif asetosal

EDM dosis6400 mg/kgBB

21.20000* 3.24838 .000 10.2013 32.1987

kontrol negatifCMC Na 1%

-30.60000*

3.24838 .000 -41.5987 -19.6013

kontrol positifasetosal

28.40000* 3.24838 .000 17.4013 39.3987

EDM dosis2133 mg/kgBB

30.00000* 3.24838 .000 19.0013 40.9987

EDM dosis 711 mg/kgBB

EDM dosis6400 mg/kgBB

49.60000* 3.24838 .000 38.6013 60.5987

EDM dosis 2133mg/kgBB

kontrol negatifCMC Na 1%

-60.60000*

3.24838 .000 -71.5987 -49.6013

66

kontrol positifasetosal

-1.60000 3.24838 .993 -12.5987 9.3987

EDM dosis 711mg/kgBB

-30.00000*

3.24838 .000 -40.9987 -19.0013

EDM dosis6400 mg/kgBB

19.60000* 3.24838 .000 8.6013 30.5987

kontrol negatifCMC Na 1%

-80.20000*

3.24838 .000 -91.1987 -69.2013

kontrol positifasetosal

-21.20000*

3.24838 .000 -32.1987 -10.2013

EDM dosis 711mg/kgBB

-49.60000*

3.24838 .000 -60.5987 -38.6013

EDM dosis 6400mg/kgBB

EDM dosis2133 mg/kgBB

-19.60000*

3.24838 .000 -30.5987 -8.6013

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Homogeneous Subsets

Jumlah geliat

Scheffea

Subset for alpha = 0.05

Perlakuan N 1 2 3 4

EDM dosis 6400 mg/kgBB 5 17.4000

EDM dosis 2133 mg/kgBB 5 37.0000

kontrol positif asetosal 5 38.6000

EDM dosis 711 mg/kgBB 5 67.0000

kontrol negatif CMC Na 1% 5 97.6000

Sig. 1.000 .993 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

67

Lampiran 8. Hasil persen proteksi geliat pada kelompok uji efek analgesik berserta hasilanalisis statistiknyaNPar Tests

Descriptive Statistics

N Mean Std. Deviation Minimum Maximum

Persen proteksi geliat 25 3.0000 1.44338 1.00 5.00

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

persen_proteksi_geliat

N 25

Mean 3.0000Normal Parametersa,,b

Std. Deviation 1.44338

Absolute .156

Positive .156

Most Extreme Differences

Negative -.156

Kolmogorov-Smirnov Z .779

Asymp. Sig. (2-tailed) .579

a. Test distribution is Normal.

b. Calculated from data.

Oneway

Descriptives

Jumlah geliat

95% Confidence Intervalfor Mean

N Mean Std. Deviation Std. ErrorLowerBound Upper Bound Minimum Maximum

kontrolnegatif CMCNa 1%

5 -.0000012 5.10241918 2.28187123 -6.3354914 6.3354890 -8.60656 3.68853

kontrol positifasetosal

5 60.4508160 5.30417092 2.37209735 53.8648179 67.0368141 51.84426 65.16393

EDM dosis711 mg/kgBB

5 31.3524600 6.43944830 2.87980883 23.3568289 39.3480911 23.15574 38.52459

EDM dosis2133mg/kgBB

5 62.0901600 6.10469948 2.73010460 54.5101744 69.6701456 53.89344 68.23770

EDM dosis6400mg/kgBB

5 82.1721340 2.35878332 1.05487997 79.2433177 85.1009503 78.48361 84.63115

Total 25 47.2131138 29.61597338 5.92319468 34.9882408 59.4379867 -8.60656 84.63115

68

ANOVA

Jumlah geliat

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 20496.675 4 5124.169 185.033 .000

Within Groups 553.866 20 27.693

Total 21050.541 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Scheffe

95% Confidence Interval

(I) persen proteksigeliat

(J) persenproteksi geliat

MeanDifference

(I-J) Std. Error Sig.LowerBound Upper Bound

kontrol positifasetosal

-60.45081720* 3.32826224 .000 -71.7199837 -49.1816507

EDM dosis 711mg/kgBB

-31.35246120* 3.32826224 .000 -42.6216277 -20.0832947

EDM dosis 2133mg/kgBB

-62.09016120* 3.32826224 .000 -73.3593277 -50.8209947

kontrol negatifCMC Na 1%

EDM dosis 6400mg/kgBB

-82.17213520* 3.32826224 .000 -93.4413017 -70.9029687

kontrol negatifCMC Na 1%

60.45081720* 3.32826224 .000 49.1816507 71.7199837

EDM dosis 711mg/kgBB

29.09835600* 3.32826224 .000 17.8291895 40.3675225

EDM dosis 2133mg/kgBB

-1.63934400 3.32826224 .993 -12.9085105 9.6298225

kontrol positifasetosal

EDM dosis 6400mg/kgBB

-21.72131800* 3.32826224 .000 -32.9904845 -10.4521515

kontrol negatifCMC Na 1%

31.35246120* 3.32826224 .000 20.0832947 42.6216277

kontrol positifasetosal

-29.09835600* 3.32826224 .000 -40.3675225 -17.8291895

EDM dosis 2133mg/kgBB

-30.73770000* 3.32826224 .000 -42.0068665 -19.4685335

EDM dosis 711mg/kgBB

EDM dosis 6400mg/kgBB

-50.81967400* 3.32826224 .000 -62.0888405 -39.5505075

kontrol negatifCMC Na 1%

62.09016120* 3.32826224 .000 50.8209947 73.3593277EDM dosis 2133mg/kgBB

kontrol positifasetosal

1.63934400 3.32826224 .993 -9.6298225 12.9085105

69

Homogeneous Subsets

Jumlah geliat

Scheffea

Subset for alpha = 0.05

Persen proteksi geliat N 1 2 3 4

kontrol negatif CMC Na 1% 5 -.0000012

EDM dosis 711 mg/kgBB 5 31.3524600

kontrol positif asetosal 5 60.4508160

EDM dosis 2133 mg/kgBB 5 62.0901600

EDM dosis 6400 mg/kgBB 5 82.1721340

Sig. 1.000 1.000 .993 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

EDM dosis 711mg/kgBB

30.73770000* 3.32826224 .000 19.4685335 42.0068665

EDM dosis 6400mg/kgBB

-20.08197400* 3.32826224 .000 -31.3511405 -8.8128075

kontrol negatifCMC Na 1%

82.17213520* 3.32826224 .000 70.9029687 93.4413017

kontrol positifasetosal

21.72131800* 3.32826224 .000 10.4521515 32.9904845

EDM dosis 711mg/kgBB

50.81967400* 3.32826224 .000 39.5505075 62.0888405

EDM dosis 6400mg/kgBB

EDM dosis 2133mg/kgBB

20.08197400* 3.32826224 .000 8.8128075 31.3511405

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

70

Lampiran 9. Hasil perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol positif uji efekanalgesik berserta hasil analisis statistiknyaNPar Tests

Descriptive Statistics

N Mean Std. Deviation Minimum Maximum

Perubahan persen proteksigeliat

25 3.0000 1.44338 1.00 5.00

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

Perubahanpersen proteksi

geliat

N 25

Mean 3.0000Normal Parametersa,,b

Std. Deviation 1.44338

Absolute .156

Positive .156

Most Extreme Differences

Negative -.156

Kolmogorov-Smirnov Z .779

Asymp. Sig. (2-tailed) .579

a. Test distribution is Normal.

b. Calculated from data.

Oneway

Descriptives

Jumlah geliat

95% Confidence Interval forMean

N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum

kontrol negatifCMC Na 1%

5 -100.0000060 8.44061787 3.77475906 -110.4804173 -89.5195947 -114.23730 -93.89830

kontrol positifasetosal

5 .0000320 8.77436165 3.92401382 -10.8947770 10.8948410 -14.23726 7.79665

EDM dosis 711mg/kgBB

5 -48.1355760 10.65238037 4.76388933 -61.3622532 -34.9088988 -61.69490 -36.27117

EDM dosis 2133mg/kgBB

5 2.7119030 10.09863336 4.51624613 -9.8272065 15.2510125 -10.84743 12.88140

EDM dosis 6400mg/kgBB

5 35.9314200 3.90132988 1.74472776 31.0872791 40.7755609 29.83060 40.00000

Total 25 -21.8984454 48.99165368 9.79833074 -42.1212061 -1.6756847 -114.23730 40.00000

71

ANOVA

Jumlah geliat

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 56088.733 4 14022.183 185.033 .000

Within Groups 1515.638 20 75.782

Total 57604.371 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

jumlah_geliatScheffe

95% Confidence Interval

(I)perubahan_persen_proteksi_geliat

(J)perubahan_persen_proteksi_geliat

MeanDifference (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

kontrolpositifasetosal

-100.00003800* 5.50570199 .000 -118.6417999 -81.3582761

EDMdosis 711mg/kgBB

-51.86443000* 5.50570199 .000 -70.5061919 -33.2226681

EDMdosis 2133mg/kgBB

-102.71190900* 5.50570199 .000 -121.3536709 -84.0701471

kontrol negatif CMC Na 1%

EDMdosis 6400mg/kgBB

-135.93142600* 5.50570199 .000 -154.5731879 -117.2896641

kontrolnegatifCMC Na1%

100.00003800* 5.50570199 .000 81.3582761 118.6417999

EDMdosis 711mg/kgBB

48.13560800* 5.50570199 .000 29.4938461 66.7773699

EDMdosis 2133mg/kgBB

-2.71187100 5.50570199 .993 -21.3536329 15.9298909

kontrol positif asetosal

EDMdosis 6400mg/kgBB

-35.93138800* 5.50570199 .000 -54.5731499 -17.2896261

72

kontrolnegatifCMC Na1%

51.86443000* 5.50570199 .000 33.2226681 70.5061919

kontrolpositifasetosal

-48.13560800* 5.50570199 .000 -66.7773699 -29.4938461

EDMdosis 2133mg/kgBB

-50.84747900* 5.50570199 .000 -69.4892409 -32.2057171

EDM dosis 711 mg/kgBB

EDMdosis 6400mg/kgBB

-84.06699600* 5.50570199 .000 -102.7087579 -65.4252341

kontrolnegatifCMC Na1%

102.71190900* 5.50570199 .000 84.0701471 121.3536709

kontrolpositifasetosal

2.71187100 5.50570199 .993 -15.9298909 21.3536329

EDMdosis 711mg/kgBB

50.84747900* 5.50570199 .000 32.2057171 69.4892409

EDM dosis 2133 mg/kgBB

EDMdosis 6400mg/kgBB

-33.21951700* 5.50570199 .000 -51.8612789 -14.5777551

kontrolnegatifCMC Na1%

135.93142600* 5.50570199 .000 117.2896641 154.5731879

kontrolpositifasetosal

35.93138800* 5.50570199 .000 17.2896261 54.5731499

EDMdosis 711mg/kgBB

84.06699600* 5.50570199 .000 65.4252341 102.7087579

EDM dosis 6400 mg/kgBB

EDMdosis 2133mg/kgBB

33.21951700* 5.50570199 .000 14.5777551 51.8612789

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

73

Homogeneous Subsets

Jumlah geliat

Scheffea

Subset for alpha = 0.05Perubahan persen proteksigeliat N 1 2 3 4

kontrol negatif CMC Na 1% 5 -100.0000060

EDM dosis 711 mg/kgBB 5 -48.1355760

kontrol positif asetosal 5 .0000320

EDM dosis 2133 mg/kgBB 5 2.7119030

EDM dosis 6400 mg/kgBB 5 35.9314200

Sig. 1.000 1.000 .993 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Lampiran 10. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol daun Macarangatanarius (L.) kelompok perlakuan

Dasar penetapan peringkat dosis: Bobot tertinggi mencit = 30 g Konsentrasi ekstrak metanol daun Macaranga tanarius yang dapat disedot dan

dikeluarkan lewat spuit peroral = 38,4 % atau 384 mg/ml Pemberian cairan secara per oral maksimal 1 ml, digunakan separuhnya saja

menjadi 0,5 mlDengan dasar tersebut maka ditetapkan dosis tertinggi

V x C = BB x DVolume Pemberian x Konsentrasi = Berat badan x Dosis

0,5 ml x 384 mg/ml = 30g BB x DosisDosis = 6,4 mg/gBB

= 6400 mg/kgBB (dosis tertinggi)- Untuk dua peringkat dosis di bawahnya, dosis tertinggi ini dibagi 3 kemudian

dibagi 3 lagi sehingga diperoleh 3 peringkat dosis : 6400 mg/kgBB; 2133mg/kgBB; 711 mg/kgBB.

- Perhitungan konversi dosis dari mencit ke manusia- Faktor konversi dari mencit 20 gram ke manusia 70 kg = 387,9- Rata-rata berat badan manusia Indonesia = 50 kg- Dosis untuk mencit = 6400 mg/kgBB= 6,4 g/kgBB

= 0,0064 g/g BB mencit= 0,128 g / 20 g BB mencit

- Dosis untuk manusia = 387,9 x 0,128 g = 49,6512 g / 70 kgBB manusia= 35,4651 g/ 50 kgBB manusia

74

Lampiran 11. Hasil rendemen ektrak metanol-air daun M. tanarius

Keterangan Cawan 1 Cawan 2 Cawan 3 Cawan 4 Cawan 5 Cawan 6

Cawan kosong 55,93 56,60 52,77 47,09 56,60 76,97

Cawan+ekstrak

57,75 58,64 54,74 49,03 58,53 78,79

Rendemen 1,82 2,04 1,97 1,94 1,93 1,82

Lampiran 12. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Cawan beratcawankosong

Jam ke 010.00

515.00

1020.00

2107.00

2208.00

2309.00

2410.00

1 55,93 113,64 86,64 59,64 57,88 57,78 57,75 57,75

2 47,09 108,04 79,24 50,24 50.00 49,05 49,03 49,03

3 56,60

Beratekstrak

121,30 90,30 60,28 59.05 58,55 58,53 58,53

75

Lampiran 13. Surat Determinasi Tanaman M. tanarius

76

Lampiran 14. Surat Keterangan Hewan Uji

77

BIOGRAFI PENULIS

Penulis skripsi dengan judul “Efek Analgesik Ekstrak

Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L. pada Mencit

Betina Galur Swiss” memiliki nama lengkap Aryanti Prima

Andini, merupakan putra kedua dari empat bersaudara dalam

keluarga Aswadi Heri Susanto dan Daissy Asoka Sakti. Penulis dilahirkan di

Palembang pada 10 Juni 1989. Pendidikan formal yang telah ditempuh, yaitu

mengawali masa pendidikannya di TK Katholik Nusa Indah Palembang (1994-1995),

kemudian melanjutkan pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD Islam Al-Husna

Palembang (1995-1998), SDN 132 Palembang (1998-2001). Pendidikan Sekolah

Lanjutan Tingkat Pertama ditempuh oleh penulis di SLTPN 38 Palembang (2001-

2004), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat menengah atas di SMA Xaverius II

Palembang (2004-2007). Penulis kemudian melanjutkan pendidikan sarjana di

Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2007. Semasa menempuh kuliah,

penulis aktif dalam berbagai kepanitiaan baik dalam fakultas maupun di luar fakultas.

Penulis pernah menjadi koordinator UKM Universitas Sanata Dharma dalam bidang

Pengabdian Masyarakat tahun 2007, anggota Dana dan Usaha (DDU) Jaringan

Mahasiswa Kesehatan Indonesia (JMKI) tahun 2007, redaktur buletin farmasi

fakultas Pharmaholic tahun 2007. Penulis pernah menjadi pemenang Program

Kreativitas Mahasiswa Dikti bidang penelitian pada tahun 2009 dan bidang

pengabdian masyarakat 2010. Penulis juga terlibat dalam kepanitian hari HIV-AIDS

2008 sebagai konseptor, kepanitiaan Inisiasi Universitas Sanata Dharma (Insadha)

2009 sebagai anggota ceramah dan diskusi (cerdisk). Penulis pernah menjadi asisten

praktikum Biokimia (2008 dan 2009) dan Toksikologi Dasar (2010).