Klostridit

Klostridit

- suuria grampositiivisia anaerobisia sauvoja

- itimuodossa kestvt happea, kuivuutta,

pakastamista ja keittolmptiloja

- maaperss ja lmminveristen suolistossa

- aiheuttavat ruoan, ympristn ja pistettvien

huumeiden vlityksell tarttuvia myrkytyksi ja

toksiinivlitteisi infektioita

A. Clostridium botulinum

1. klassinen botulismi

2. imevisbotulismi

3. haavabotulismi

B. Clostridium perfringens

1. klassinen ruokamyrkytys

2. enteritis necroticans

C. Clostridium tetani

1. jykkkouristus

D. Clostridium difficile

1. Clostridium difficile assossioitunut ripuli (CDAD)

A. Clostridium botulinum

1. Klassinen botulismi - ruokamyrkytys, riskielintarvikkeita erityisesti liha, kala, tyhjipakatut

tuotteet sek kotona siltyt tuotteet

- Clostridium botulinum eritt proteiinieksotoksiinia, joka on voimakkain

tunnettu myrkky (tappava annos: 0,1 ng/kg)

- neurotoksiinit syntetisoidaan inaktiivisena polypeptideina eli

protoksiineina (koko 150 kDa), jotka aktivoituvat, kun proteaasi pilkkoo

polypeptidiketjua

-C. botulinum jaetaan seitsemn serotyyppiin A-G kasvun aikana

tuottamiensa toksiinien antigeenisten ominaisuuksien perusteella, tyypit A,

B, E ja F aiheuttavat botulismia ihmisille

- mys muutamat muut klostridilajit (C. butyricum, C. barati) voivat tuottaa

samoja toksiineja kuin C. botulinum

Toimivassa muodossa botulinumtoksiini voi sitoutua

hermoston lihasliitoksiin ja est vlittjaine

asetyylikoliinia sisltvien vesikkelien irtoamisen. Koska

lihas ei saa en minknlaisia viestej hermosolulta, lihas

halvaantuu.

- toksiini imeytyy elimistn mahalaukussa ja ohutsuolessa, mist se levi koko kehoon, voi imeyty mys hengitysteitse

-

oireet alkavat 12-36 h kuluttua ruoan nauttimisesta

- botulismin ensimmisi oireita ovat uupumus, heikkous,

oksentaminen, sitten puhe- ja nielemisvaikeudet sek nkhirit

- hengityksen lamaantuminen voi lopulta johtaa kuolemaan

- kuolleisuus tautiin on n. 65 %, kehittyneiss maissa n. 10 %

- riskiryhm: vaarallinen kaikille

- yhdenkin henkiln sairastuminen botulismiin tulkitaan epidemiaksi

taudin vakavan luonteen takia

2009

Syyskuun alussa todettiin Ranskassa kolmella samaan

perheeseen kuuluvalla henkilll Clostridium botulinum -

bakteerin aiheuttama botulismi, jonka lhteeksi epiltiin

Suomesta ostettua lmminsavusiikaa. Tyhjipakattu kala

oli ostettu itsuomalaisesta vhittiskaupasta elokuun

lopussa, kuljetettu lentokoneella Ranskaan

yksityishenkiln toimesta ja syty kaksi viikkoa

myhemmin viimeisen kyttpivn. Matkan ajan kalaa

oli silytetty kylmlaukussa

tuntemattomassa lmptilassa 14 tunnin ajan ja tmn

jlkeen kotona jkaapissa. Ennen ruokailua kalaa ei

ollut kuumennettu.

2006

Clostridium botulinum aiheutti heinkuussa 2006 yhden

epidemian, jossa sairastui kaksi henkil samasta

perheest. Vlittjelintarvikeena oli

todennkisesti lmminsavusiika, joka oli ostettu

pakattuna paikallisesta marketista. Kalan viimeinen

kyttpiv oli viikon pst symisajankohdasta. Kalan

alkupermaa oli Kanada, se oli toimitettu Suomeen

pakastettuna. Sulatus ja savustus sek valmiin tuotteen

pakkaus tapahtui kotimaisessa laitoksessa.

Vanhempia epidemioita

1981 kaksi saksalaisturistia sairastuivat sytyn

silykemaksapasteijaa

1999 yksi henkil sairastui siian mdist

Botulismin hoito:

- trivalentti ABE-antitoksiini (annettava ennen oireiden

alkua)

- ruoansulatuskanava tyhjennetn

- suolistoon jneet bakteerit hvitetn penisilliinill

- respiraattorihoito

- ennustus sit huonompi mit nopeammin oireet ilmenevt

- toipuminen voi kest kuukausia

- odotetaan uusien hermo-lihasliitosten muodostumista

- pienin annoksina puhdistettua botulinumtoksiinia voidaan

kytt keskushermostoperisten lihaston stelyhiriihin

liittyvien tautien hoidossa, kosmeettinen kytt, biologinen

sodankynti

2. Imevisbotulismi

- C. botulinum tuottaa toksiinia vauvan ruoansulatuskanavassa (n. 80 itit /g)

- riskielintarvikkeita hunaja, vihannekset ja hedelmt

- alle puolivuotiaat herkempi saamaan imevisbotulismin;

kehittymtn suolistofloora ja ruoansulatuskanavan korkeampi pH

mahdollistavat bakteeri-itiiden kasvun ja toksiinin tuoton suolistossa

- oireita ummetus, lihasten veltostuminen, itkun vaimeus

- oireet ovat yllttvn lievi, ja kuolleisuus vain muutama prosentti,

aiheuttaa ktkytkuolemia

- tehohoidolla saadaan yleens pelastettua

3. Haavabotulismi

- C. botulinumin itiit psee haavaan, jossa ne itvt

- taudinkuva muistuttaa jykkkouristusta

- suonensisisten huumeiden kytt

- tapauksia havaittu Amerikassa, Euroopassa harvinainen

CLOSTRIDIUM BOTULINUM

Hiirill tehtv analyysi

CLOSTRIDIUM BOTULINUM

PCR/PFGE/ELISA M. Lindstrm Suomessa tutkinut menetelm: kytettn 4 primeriparia, jotka ovat

spesifisi botuliinin neurotoksiineille A, B, E tai F. Neljn serotyypin samanaikainen tunnistus mahdollinen.

ELISA valmis pivss kun toksiinia nytteess Toimintakykyisten solujen kasvatus ja toksiinia tuottavien geenien tunnistus PCR:ll

B. Clostridium perfringens

1. Klassinen ruokamyrkytys

- C. perfringensin tyyppi A:n erittm enterotoksiini viime

vuosina yleisin raportoitu ruokamyrkytysten aiheuttaja

Suomessa

- riskielintarvikkeita liha ja kala, eptydellisesti kypsennetyt,

hitaasti jhdytetyt, liian korkeassa lmptilassa silytetyt ja

eptydellisesti kuumennetut elintarvikkeet

- taudin aiheuttava annos 10^6 - 10^8 solua

- itmisaika 8-24 h

- C. perfringens solut lisntyvt ruoassa, osa soluista kuolee mahan happamuudessa, mutta jotkut solut silyvt elossa ohutsuoleen, jossa

ne alkavat lisnty

- kun bakteerisolu itii, muodostuu myrkytyksen aiheuttavaa CPE-

enterotoksiinia, jos kannassa on sit koodaava cpe-geeni (vain 5 %

kannoista)

- CPE-toksiini vahingoittaa ohutsuolen pinnan epiteelisoluja

tekemll reiki solukalvoihin, jolloin pienet molekyylit kuten anionit,

kationit ja orgaaniset hapot vuotavat ulos

- oireita vatsakivut, pahoinvointi ja voimakas ripuli, jotka kestvt 1-2

piv, vanhuksilla C. perfingens voi aiheuttaa pitkittynytt ripulia

- enterotoksiini voidaan osoittaa ulosteesta

2. Enteritis necroticans (pigbel)

- Clostridium perfingens tyyppi C:n erittm -

enterotoksiini voi aiheuttaa vakavan enteritis

necroticansin (kuolioinen suolistotulehdus)

- ruoasta saadut bakteerit erittvt toksiinia, mik

johtaa paralyysiin, verenpurkaumiin ja alueellisiin

kuolioihin varsinkin ohutsuolessa

- oireet: oksentaminen, ripuli, kovat vatsakivut,

verenvuoto

- harvinainen

Clostridium perfringens

Clostridium perfringens maljaus

TSC Agar (Tryptose Sulfite Cycloserine Agar) tuottaa mustia peskkeit

sykloserini est muiden bakteerien

kasvua polymyksiini ja kanamysiini lisksi

bakteeriflooran estoon

TSC

Clostridium perfringens PCR ja mikroarray

Mikroarray-tekniikka, jossa vasta-aineilla

tunnistetaan C. perfingens toksiinit

C. Clostridium tetani

1. Jykkkouristus eli tetanus

- C. tetani tuottaa kahta myrkky, tetanoslysiinia ja

tetanospasmiinia, joista jlkimmist sanotaan

tetanustoksiiniksi

- tetanustoksiini hermomyrkky ja toiseksi vahvin myrkky

botuliinitoksiinin jlkeen

- bakteeri voi joutua haavaan, jossa se alkaa lisnty

anaerobisissa olosuhteissa

- infektio on paikallinen, mutta toksiini levi

verenkierron ja lymfakierron vlityksell sek suoraan

hermosikeit pitkin selkytimeen ja aivorunkoon

- toksiini vaikuttaa keskushermoston hermosynapseihin ja motorisiin

ptelevyihin, est inhiboivien

vlittjaineiden (esim. glysiini)

vapautumiseen, jolloin lihaksen

relaksaatio estyy ja seuraa

lihaskouristuksia

- itmisaika pivist kuukausiin

- alussa lihaskouristuksia haavan

lhell, levi leuan lihaksiin ja

kaikkialle tahdonalaisiin lihaksiin

- jykkkouristus johtaa

hoitamattomana lhes aina

kuolemaan, hoidettujen kuolleisuus

10-30 %

- ehkistn rokotuksilla

Clostridium tetani

C. tetani levinneisyys

Clostridium tetani mritys

Geeniteknisesti IgG-ELISA:lla mritetn IgG luokan

vasta-aineilla

Hiiritesti

Clostridium tetani, hiiritesti

Hiirelle vasempaan takajalkaan ruiskutettu tetanus toksiinia

Clostridium difficile (4000-6000 tapausta/v)

Eristys CDS (CLOSTRIDIUM DIFFICILE

SELECTIVE) agarilla, joka sislt D-cycloserinia ja

Cefoksitinia

Clostridium difficile

Clostridium difficile -associated diarrhea (CDAD) Diagnostisia testej CDAD:in

mrittmiseksi on markkinoilla. Ne perustuvat toksiinin B (cytotoxin assay) tai toksiinien A and B (immunoassay) geenitekniseen mritykseen.

Pikatesti: Clostridium difficile Toxin A detection

of C.DIFFICILE TOXIN A in faeces with

Rapydtest

10 15 min.

Lhteet:

Austin, J.W. ja Dodds K.L. 1997. Clostridium botulinum. Teoksessa: Food Microbiology. ASM Press. Sivut 288-304.

Hielm, S. Klostridit, maan hiljaiset. Teoksessa: M. Salkinoja Salonen (toim.). Mikrobiologian perusteita. Mikrobiologian

julkaisuja 49/2000. Mikrobiologian osasto, Soveltavan kemian ja mikrobiologian laitos, Helsingin yliopisto. Sivut 652-

655.

Jousimies-Somer, H. ja Ristola, M. 2003. Clostridium-lajit. Teoksessa: P. Huovinen (toim.). Mikrobiologia ja

infektiosairaudet. Kirja 1. Kustannus Oy Duodecim. Sivut 228-236.

Madigan, M.T. 2003. Brock Biology of Microorganism. Pearson Educational.

Opas elintarvikkeiden ja talousveden mikrobiologisista vaaroista. EVI- EELA Opas 1/2003. Sivut 37-44.

McClane B.A. 1997. Clostridium perfringens. Teoksessa: Food Microbiology. ASM Press. Sivut 305-326.

Salkinoja-Salonen, M. Klostridien toksiinit. Teoksessa: M. Salkinoja Salonen (toim.). Mikrobiologian perusteita.

Mikrobiologian julkaisuja 49/2000. Mikrobiologian osasto, Soveltavan kemian ja mikrobiologian laitos, Helsingin

yliopisto. Sivut 548-549.

Kuvat:

http://www.agen.ufl.edu/~chyn/age2062/lect/lect_25/FG19_012.GIF

http://wwwuser.gwdg.de/~hbruegg/ct/tetanus2.gif

http://www.agen.ufl.edu/~chyn/age2062/lect/lect_25/FG19_011.GIF

Lhteet

Lindstrm, Miia; Keto, Riikka; Markkula, Annukka; Nevas, Mari; Hielm,

Sebastian; Korkeala, Hannu. Multiplex PCR Assay for Detection and

Identification of Clostridium botulinum Types A, B, E, and... Applied &

Environmental Microbiology, Dec 2001, Vol. 67 Issue 12, p5694, 6p, 4

charts, 1bw; (AN 6063605)

http://www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-17.html

www.google.fi