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La gestion des déchets Biochimie
Laurence Chavant
Gestion des déchets lors d’une séance de Tp de Biochimie
Gestion des déchets niveau de la commande
Repérage des déchets : leur nature
Traitement possible des déchets au lycée ?
(Protocole élimination des déchets)
Oui
• Rapide / simple : Elève durant séance
• Long / complexe : Personnel de laboratoire
Sur la commande :
Les besoins pour le traitement :
- Matériels
- Réactifs
Non
Stockage dans « Bidons » avec étiquette appropriée
(Aide au tri des déchets chimiques)
Sur la commande :
- Nombre de « bidons ».
- L’étiquette appropriée avec nom du composé.
Documents destinés aux élèves
Fiche technique « Détermination de l’étiquette présente sur le bidon ».
Dans la salle : « Aide au tri des déchets chimiques »
Sur protocole : Symbole : Devenir des produits sur la paillasse.
Tableau : Elimination des déchets de l’analyse à compléter.
Gestion des déchets par les élèves
Devenir des produits sur la paillasse
Produit à remettre dans le flacon initial
Symboles dans le protocole
Repérage des déchets de la manipulation
Gestion des déchets par les élèves
Elimination des déchets de l’analyse
Tableau à compléter
Les déchets Moyens d’élimination
Répérage : Lieu de production
Protocole Nature du déchet
Principe
Traitement : Oui : Décrire le moyen Non : « Bidon » avec étiquette appropriée
Gestion des déchets par élèvesExemple : Dosage des chlorures
Le protocole :
- Etalonnage de la solution nitrate d’argent par méthode de Mohr : pesée indirecte
- Dosage des chlorures par méthode de Charpentier et Volhard.
Exemple : Dosage des chlorures
Evier
Etalonnage : AgNO3 par la méthode de Mohr, pesée indirecte
Les déchets Moyens d’élimination
NaCl
AgCl en milieu neutre
Laisser sédimenter le précipité une nuit :
- Surnageant : évier
- Précipité : « Bidon » déchet inorganique toxique : Ag+
Exemple : Dosage des chlorures
Dosage : Chlorure par la méthode de Charpentier et Volhard
Les déchets Moyens d’élimination
AgCl AgSCN
milieu acide
Neutralisation et sédimentation Dégagement vapeurs irritantes
« Bidon » déchet inorganique toxique : argent, thiocyanate et milieu acideNH4SCN (burette)
AgNO3 (burette et pipette jaugée)
Lavage verrerie thiosulfate
Gestion des déchets : Réduction de volume
Quelques pistes
Diminution volume en colorimétrie Essais en diminuant proportionnellement l’ensemble des réactifs et étalon de la méthode colorimétrique.
Méthode Littérature PratiquéMéthode 3,5DNS
Etude B-fructosidase
- 3 mL milieu enzymatique
- 2 mL 3.5 DNS
- 15 mL d’eau distillée
- 1,5 mL milieu enzymatique
- 1 mL 3.5 DNS
- 7,5 mL d’eau distillée
Dosage des nitrites (diazotation)
- 10 mL (étalon et diluant)
- 0,2 mL réactif
- 5 mL (étalon et diluant)
- 0,1 mL réactif
Dosage du Phosphore
Méthode de Briggs
- 7 mL (étalon et diluant)- 1 mL Réactif 1- 1 mL Réactif 2- 1 mL Réactif 3
- 2 mL (étalon et diluant)- 2 mL triréactif (V/V/V)
Diminution des déchets : CCM des acides aminés Solvant :
Volume préparé nécessaire à 2 groupes de 16 élèves (1L). Récupérer et stocker en flacon fermé. Utiliser par les groupes suivants dans la semaine.
Révélateur à la ninhydrine (pinceau) Composition : 0,6 g de ninhydrine
6 mL d’acide éthanoïquen-butanol qsp 200 mL
En flacon brun fermé le réactif est stable plusieurs mois à + 4°C .
Dimension des plaques : CCM (« secondaire ») Séparation des AA lors chromatographie échange d’ions/Identification
des AA par CCM : plaque de 4 cm x 4cm
Diminution des déchets : Fractionnement des protéines sériques par sulfate d’ammonium
Préparation de la fraction « globulines » - Dans un tube à centrifuger, placé dans de la glace, introduire : - 5 mL de sérum - 5 mL de sulfate d’ammonium à 100 % (goutte à goutte). - Mélanger, laisser reposer 10 minutes. - Centrifuger 10 min à 4500 rpm (Jouan , E96).
- Dans un tube Eppendorf de 1,5 mL , placé dans de la glace, introduire : - 0,5 mL de sérum dilué (= Unitrol dilué au ½) - 0,5 mL de sulfate d’ammonium à 100 % (goutte à goutte). - Mélanger, laisser reposer 10 minutes. - Centrifuger 5 min à 10 000 rpm (microcentrifugeuse).
La fraction obtenue est la fraction de globuline. On cherche à obtenir un volume total proche de 1 mL Noter le volume exacte obtenu soit VG.
Diminution des déchets : Fractionnement des protéines sériques par sulfate d’ammonium
Dosage des protéines par la méthode au Biuret 1 mL de solution étalon ou fractions à doser. 4 mL de réactif du biuret.
0,5 mL de solution étalon ou fractions à doser. 2 mL de réactif du biuret.