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MANUAL DE OPERACIÓN MANUAL DE FOTOGRAFIA DIGITAL Laboratorio de Botánica Marina

MANUAL DE OPERACIÓN DE FOTOGRAFIA DIGITAL.pdfmodelo de microscopio Axionstar Plus, además de constituye un software alternativo al Image-Pro Plus. Ejecución de AxioVision y calibración

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MANUAL DE OPERACIÓN MANUAL DE FOTOGRAFIA DIGITAL

L a b o r a t o r i o d e B o t á n i c a M a r i n a

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1.- Partes principales cámara Canon PowerShot A620

La cámara Canon PowerShot A620 es una camara digital que esta montada en

un equipo de microscopia y que permite obtener imágenes digitales de

muestras de cortes histológicos de tejido algal para su estudio y análisis.

Figura 1. Detalle de partes superior de la cámara digital Canon PowerShot A620. A) Botón de encendido y apagado, B) Selector o dial de modo de disparo, C) Palanca de zoom, D) Botón de disparo. Figura 2. Detalle de partes posterior de la cámara digital Canon PowerShot A620. A) Conmutador de modo, B) Botón de display, C) Botón Menú, D) Botón

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A B

A

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C L

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A B

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de exposición/borrado de imágenes, E) Botón función/establecer, F) Pantalla LCD, G) Botón imprimir/compartir. Figura 3. Detalle de partes lateral de la cámara digital Canon PowerShot A620. A) Ranura de tarjeta de memoria, B) Terminal de entrada CC, C) Terminal de salida de audio y video. Especificaciones técnicas:

Marca: Canon

Modelo: PowerShot A620

Sensor: CCD 1/1.8", 7.1 Megapixels

Imagen: 3072 x 2304, 2592 x 1944, 2048 x 1536, 1600 x 1200, 1024 x

768, 640 x 480 pixels

Focal Equivalente: F2.8 – F4.1

Zoom: 4x óptico 4x digital

ISO equivalente: auto / manual / 50/100/ 200/ 400

Distancia y modo macro: Tipo de autoenfoque: 9 puntos de enfoque o

central

Rango de enfoque normal: 45 cm a infinito.

Rango de enfoque macro: 1cm a 45cm (Angular), 25cm a 45cm (TELE)

Formato de fichero: JPEG, TIFF, RAW, DCF (Exif 2.2), DPOF, PIM

G

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A B

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2.- Operación de cámara digital a través de disparo remoto

Software CameraWindows®.

Este software es de exclusividad del modelo de microscopio Axionstar Plus. Es

un sistema exclusivo de la tecnología Carl Zeiss y sirve como una plataforma de

disparo remoto e interfaz de transferencia de imágenes. Esta plataforma nos

entrega las mismas de opciones del menú principal desplegado en el monitor de

la cámara. La ventaja de emplear la plataforma de disparo remoto es la poder

emplear el zoom digital, sumando mayor aumento al multiplicarse por el del

objetivo del microscopio. La posibilidad de no perder resolución en la imagen

producto del empleo del zoom digital puede reducirse seleccionando calidad de

imagen superiores (L3072x2304).

Ejecución de CameraWindows® y disparo remoto.

El primer paso constituye abrir aplicación CameraWindows®. Para su activación

debe antes de encender la cámara cambiar al modo play (Fig. 2A) además

tiene que estar conectada vía puerto USB con el ordenador. Una vez encendida

la cámara se desplegará un menú en la pantalla (Fig. 4).

Figura 4. Ventana de inicio CameraWindows®.

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Una vez abierto el menú el usuario tiene la posibilidad de configurar el fichero

de destino de las fotografías que obtendrán, además de fijar el prefijo (fecha,

año) que tendrán las imágenes obtenidas. Para ello se debe hacer clic en

Preferencias, y luego se desplegará una ventana de opciones (Fig. 5).

Figura 5. Ventana de opciones de almacenamiento y nombre de fichero de

CameraWindows®.

Finalmente se deberá hacer clic en la lengüeta Disparo Remoto para iniciar la

ventana de visualización de la cámara. Una vez seleccionado el disparo remoto

se abrirá una ventana en la cual mostrará la muestra montada en el

microscopio. Usted debe abrir el lente mediante el zoom óptico de la cámara.

Dirigirse en CameraWindows a la barra de comando de zoom óptico y llevarla

hasta que la imagen se vea abierta en el monitor (Fig. 6A). También es posible

pedir al software que la imagen se despliegue ciertas ventanas o que se oculten

otras permitiendo ahorrar espacio en el monitor.

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Figura 6. Ventana de disparo remoto de CameraWindows®. A) barra de

comando de zoom óptico.

Configuración de calidad de imagen en disparo remoto.

Usted puede ajustar el tamaño de imagen (Fig. 7A) y ajustes de captura (Fig.

7B) mediante el menú integrado en disparo remoto.

Figura 7. Ventana de disparo remoto de CameraWindows®. A) Selección de

tamaño, B) Ajuste de captura.

A

A

B

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3.- Fotometría digital a través de AxioVision

Software AxioVision 4.6.3.

Este software permite al usuario realizar medidas de muestras fotografiadas

mediante el uso de CameraWindows®. Este software es de exclusividad del

modelo de microscopio Axionstar Plus, además de constituye un software

alternativo al Image-Pro Plus.

Ejecución de AxioVision y calibración del software.

Para abrir la aplicación haga doble clic en acceso directo de AxioVision 4.6.3

en el escritorio. Una vez abierto el programa debe calibrarlo para cada uno de

los objetivos del microscopio AxioPlus Zeiss. La calibración se realiza mediante

fotografías tomadas al portaobjeto graduado Nikon (1000 µm) con las distintas

combinaciones de objetivos del microscopio. Posteriormente diríjase en el menú

superior a Open Image y seleccione la calibración que desea trabajar (Fig. 8).

Figura 8. Ventana de menú para selección de imagen para calibración.

La calibración deberá realizarse para todos los objetivos del microscopio a partir

de sus correspondientes imágenes obtenidas con casa uno de los objetivos. Una

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vez seleccionada la imagen a utilizar para la calibración correspondiente diríjase

al menú superior y seleccione Mesure y posteriormente a Scalings (Fig. 9).

Figura 9. Ventana de configuración de calibración de imagen de porta objeto

graduado.

En la ventana de calibración se deberá selección New para incorporar la

calibración a utilizar. El programa le solicitará seleccionar la imagen que esta

abierta, para luego hacer clic en Next. Posteriormente deberá seleccionar el

tipo de método para calibración para el cual seleccionará Single distance (Fig.

10A).

Figura 10. Ventana de selección de método para calibración.

A

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A continuación se desplegará un cursor móvil (Fig. 11A), el cual deberá se

superpuesto sobre la reglilla de la foto que tiene una medida conocida y deberá

ingresar dicho valor en micrones (Fig. 11B), para luego insertar un nombre a

esta calibración. Se recomienda nombrar en función del objetivo con el cual fue

obtenida la foto. Una vez realizado lo anterior deberá presionar Finish.

Realización de medidas de longitud con AxioVision.

A través de AxiVision es posible realizar determinación de medidas longitud,

área de una imagen obtenida a través de CameraWindows®. Para lo anterior se

deberá previamente haber realizado el proceso de calibración y seleccionar la

calibración en función del objetivo en el cual se ha obtenido la imagen en la

cual se quiere realizar las mediciones. Para lo anterior seleccione presione

Open Image, y seleccione la imagen a trabajar. Posteriormente desde el menú

superior presione Workarea, y se desplegara un sub-menú a la izquierda de la

pantalla, en el cual usted deberá seleccionar Scalings. Una vez seleccionado

aparecerá una ventana de las calibraciones disponible, en la cual seleccionará

en función del objetivo en la cual obtuvo la imagen a trabajar. Una vez

seleccionado debe presionar Activate (Fig. 12A) y luego Apply to image (Fig.

12B).

A

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Figura 12. Ventana de activación y selección de calibración para realización de

mediciones. A) Botón activate, B) Botón Apply to image.

Una vez aplicado la calibración a la imagen una confirmación (ticket verde) se

posicionará por delante de la calibración deseada. En ese momento cualquier

medición realizada en la imagen a trabajar se realizará en función de dicha

calibración. Para realizar mediciones deberá dirigirse al menú superior y

seleccionar el tipo de medición que se desea realizar (Fig. 13).

Figura 13. Menú de selección de medición a realizar sobre la imagen.

A

B

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Una vez seleccionado el tipo de medición el cursor se transformará, con el cual

deberá desplazar con el botón izquierdo de mouse presionado sobre el sector

que desea realizar la medición. Posteriormente soltando el botón del mouse

aparecerá el valor de la medición sobre la imagen (Fig. 14).

Figura 14. Display de resultado de medición realizada sobre la imagen de

trabajo.

El valor mostrado en pantalla es posible eliminarlo seleccionando el ítem y

presionando en el menú superior el botón Cut (Fig. 15)

Figura 15. Selección y borrado de medición realizada en imagen de trabajo.

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A Inserción de barra de escala referencial en imagen.

Para insertar una barra de escala referencial en la imagen (Fig. 16) se debe

presionar el botón Scale bar en el menú superior. Una vez presionado dicho

botón se debe arrastrar el mouse con el botón izquierdo presionado hasta la

escala deseada. Dicha escala se desarrollará en base a la calibración realizada

inicialmente.

Figura 15. Selección y borrado de medición realizada en imagen de trabajo.

La escala referencial es posible editarla en tamaño, color y tipo de fuente. Para

ello se debe posicionar sobre la barra y seleccionarla con el puntero del mouse

y presionar con el botón derecho de mouse. Posteriormente se abrirá un menú

de edición en el cual deberá seleccionar la opción Preferences. Una vez

finalizado los cambios es posible guardar la imagen. Para lo anterior deberá

dirigirse al menú superior y hacer clic en File y luego presionar Save as.

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Observaciones:

Una vez finalizado el trabajo debe cerciorarse de apagar la cámara.

Recuerde grabar todas las imágenes obtenidas en dispositivos como

disco duros externos o pendrive, debido a que el equipo es utilizado por

otros usuarios, lo que no garantiza que sus archivos no sean borrados

No altere las calibraciones guardadas en el equipo, y asegurarse que se

esté empleando la calibración acorde al objetivo utilizado.