APLICACIÓN DE METODO PICO DE FLAUTA PARA CULTIVO DE HONGOS Y OBSERVACION DE LOS MISMOS AL MICROSCOPIO

Práctico: 5 Fecha: 18/03/2015

Integrantes: Romina Franco

Rina Tanaka

Johana Sosa

Patricia Alvarenga

En la clase práctica de la fecha se llevaron a cabo las siguientes actividades: la implementación del método de la cinta para la observación de hongos en el microscopio, el aislamiento en picos de flauta, previamente preparados, de los hongos observados y la preparación de los nuevos pico de flauta que posteriormente se utilizaron para el repique dichos hongos.

Método de la cinta: Es un método rápido para observar microscópicamente los hongos sin alterar el arreglo de sus conidias.

Una de las desventajas es que si la cinta transparente no se presiona con suficiente firmeza sobre la superficie de la colonia, la muestra no es adecuada, ya que al no quedar bien adherida la cinta, las esporas o las hifas no se pueden identificar

Procedimiento1. Colocar sobre un portaobjetos una gota de solución de lactofenol no

demasiado grande para evitar que el cubreobjetos flote y la preparación quede demasiado gruesa.

2. Cortar un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente 2cm.

3. Tocar con el lado adhesivo de la cinta la superficie de la fruta o el pan enmohecidos o el borde de una colonia de hongo de un cultivo.

4. Pegar la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos.5. Eliminar el colorante sobrante con un papel de filtro.6. Observar al microscopio

Los hongos se extrajeron de un trozo de pan que bajo condiciones adecuadas de temperatura y humedad, sirvió de sustrato para que dichos hongos pudieran crecer y reproducirse.

Observaciones microscópicas

Trozo de pan utilizado para la extracción de los hongos

observados

Siembra en “Pico de flauta”: para obtener una mayor superficie de cultivo, se deja enfriar el agar dentro de un tubo de ensayo inclinado, debidamente esterilizado y manipulado en las formas establecidas

La siembra por puntura en agar inclinado o pico de flauta se realiza de la siguiente manera:

Se toma el organismo que se quiere en este caso aislar con una ansa de siembra esterilizada en la llama del mechero

Introducir el ansa dentro del agar sin tocar el fondo o las paredes del tubo

Retirarlo suavemente y sembrar en estrías por la superficie en pico de flauta

Preparación de nuevos medios de cultivo: para el posterior repique de los organismos aislados, se procedió a la preparación de un nuevo medio de cultivo para lo cual se utilizaron los siguientes materiales:

1 vaso de precipitado 4 Erlenmeyer 1 vidrio reloj 1 probeta 1 cuchara/espátula 20 tubos de ensayo 20 tapones de algodón

El medio seleccionado para el repique es el P.D.A. (Potato Dextrose Agar), la cantidad de polvo de P.D.A. utilizado fue de 12.6 gr para 300ml de líquido que fue disuelto según las indicaciones que mostraba el envase y luego distribuido en los 20 tubos de ensayo con una cantidad de 15 ml del líquido para cada uno. Los tubos fueron tapados y autoclavados. Al final del proceso de autoclavado fueron colocados de forma horizontal con un cierto ángulo de inclinación, para que, al enfriarse queden formados los pico de flauta.

Pico de flauta ya preparado, listo para la

siembra