22/04/2008

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Seminario N° 2Microbiología General

Microscopia y Tinciones

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Límite de resolución

Antony van Leeuwenhoek

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4

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En objetivos secos:

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5

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Revolver

Ocular

Cabezal

Microscopio óptico

Objetivos

Macrométrico

Micrométrico C d d

Platina

Ajuste de

la platina

Brazo

Base

Micrométrico

Fuente de

luz

Condensador

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S")G$)N0)

Microscopía de campo claro

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Microscopía de campo oscuro

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Microscopía de contraste de fases! !"#W+%0'% 5+9%0%#$+4( &%X2%^4( %# %1 # N 14 5%#(+545

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Microscopía de Interferencia Diferencial (Nomarski)

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Y?2-2)8+'"<+2")28F+80+V"22)8[-0)/)

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Microscopía de fluorescencia

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Microscopía Confocal! Y)')#"F)F F+ %U<+/+$ 2) "0)N+/ +/ &+##"%/+& ;'2)/%&>#%/<$%2)/F% 2) '$%G-/F"F)F F+2 +&'?#"0+/B

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Microscopía Confocal

vs

Microscopía de fluorescencia

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MICROSCOPIODE LUZ

MICROSCOPIOELECTRONICO

Microscopía electrónica

Iluminación Haz de luz Haz de electrones

Longitud de onda 2000 Å - 7500 Å 370 nm

Lentes Vidrio Electromagnéticas

Medio Atmósfera Vacío

Resolución 0,2 um = 200 nm 0,0003 um = 0,3 nm

Magnificación 10 x - 2000 x 100 x - 450000 xMagnificación 10 x 2000 x 100 x 450000 x

Focalización Mecánica Eléctrica

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Microscopio electrónico de transmisión

Microscopio electrónico de barrido

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Microscopio de Fuerza Atómica

(AFM)

Microscopio de túnel de barrido

(Tunneling)

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PreparaciónPreparación de extendidos

y tinciones

Colorantes

Benzeno

+

Cromoforo

Solvente orgánico sin color

Grupo químico que imparteColor al solvente

Cromógeno

Colorante

+

Auxocromo

Grupo químico que permite la iniciacióndel cromóforo permitiendo la formaciónde sales y la unión a fibras y tejidos

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Tinción Simple Se utiliza para la visualización de lamorfología, el tamaño y la disposición

Tipos de

tinciones

Tinción Diferencial

g , y p

Separa entre grupos

Visualización de

Gram

Ácido alcohol resistentes

Flagelos

Cápsulaestructuras

Cápsula

Esporas

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Preparación de p

un extendido

Tinción simple (procedimiento)

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Tinción negativa (procedimiento)

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Tinción de Gram

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Tinción de GramGram

Tinción de Ziehl-Neelsen

(BAAR)

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Tinción de Esporas (Schaeffer-Fulton)

Tinción de Esporas (Dorner)

Tinción de Cápsula

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Manipulación de cultivos