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PRÁCTICA N° 07: OBSERVACIÓN DE ORGANELOS Y CROMOSOMAS CITOPLASMÁTICOS BIOLOGIA GENERAL Mamani Paulo Yulia – Paucar Díaz Alonso – Quiliche Veramendez Wilder 19-6-2014 UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE INGENIERIA E.A.P. INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

Observacion de Organelos y Cromosomas Citoplasmaticos

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PRÁCTICA N° 07: OBSERVACIÓN DE ORGANELOS Y CROMOSOMAS CITOPLASMÁTICOSBIOLOGIA GENERAL

Mamani Paulo Yulia – Paucar Díaz Alonso – Quiliche Veramendez Wilder

19-6-2014

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE INGENIERIA

E.A.P. INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

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PRÁCTICA N° 07: OBSERVACIÓN DE ORGANELOS Y CROMOSOMAS CITOPLASMÁTICOS

PRÁCTICA N° 07

OBSERVACIÓN DE ORGANELOS Y CROMOSOMAS CITOPLASMÁTICOS

I. INTRODUCCION

Todos los organismos vivos presentamos una característica en común; <<están constituidos por células >>; el estudio de estas pequeñas unidades estructurales y funcionales han ido avanzado conforme se fue desarrollando las técnicas de microscopía óptica y electrónica, que, junto con la capacidad de obtener cultivos y fraccionamiento de los componentes celulares, han supuesto un punto clave en la Biología celular.

Después del descubrimiento de las células en 1831 – 1838 y la adaptando los microscopios; se pudo observar con mayor precisión a cada una de las partes de la célula como a los denominados orgánulos llamados también organelas, organelos o mejor << elementos celulares >>, a las diferentes estructuras suspendidas en el citoplasma de una célula eucariota, que tienen una forma y unas funciones especializadas bien definidas y diferenciadas. (La célula procariota normalmente carece de orgánulos). ( Oram Hummer – 2003)

Las células tienen componentes esenciales y comunes; presenta una membrana plasmática que las aísla del medio que las rodea y constituye la principal «barrera selectiva» para el intercambio de sustancias con el exterior; el cual presenta una organización estructural muy compleja. El estudio de este compartimiento con el microscopio electrónico revela una asombrosa red de membranas. Y en el interior tenemos el citoplasma; contiene a los organelos, siendo imprescindibles para el correcto funcionamiento de la célula. La célula procariota puede presentar algunas estructuras exclusivas, como los cromatóforos (colaboran en la fotosíntesis). (Robertis – 2001).

Los orgánulos se clasifican en dos grupos: Orgánulos auto genéticos, desarrollados filogenética y ontogenéticamente de la complejización de estructuras previas, basándose en su capacidad para sostener estructuras membranosas complejas, así como para realizar desplazamientos internos y cambios de localización, orientación o forma de sus partes. Orgánulos de origen endosimbiótico, procedentes de la simbiosis con otros organismos. Incorporados a la célula eucariota inicialmente como bacterias endosimbiontes. Los orgánulos de origen endosimbiótico tienen su propio genoma, su propia maquinaria de síntesis proteica, incluidos ribosomas.

Todos los organelos están compuestos por sacos formados por una membrana simple, dentro de las cuales los materiales pueden ser químicamente degradados.

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II. OBJETIVOS

Reconocer el citoplasma y el núcleo de células de mucosa labial. Distinguir los organelos citoplasmáticos en láminas preparadas. Recocer las diversas formas, tamaño y ubicación del núcleo en células. Evidenciar la presencia de los cromosomas

III. MATERIALES

Proporcionados por el laboratorio- 3 microscopios compuestos- 1 microscopio digital- 3 pipetas pasteur.- 3 mecheros- Laminas preparadas de cortes histológicos de organelos citoplasmáticos:

mitocondrias, complejo de golgi, vellosidades intestinales, etc.- Láminas preparadas de cromosomas de raíz de cebolla.- 12 láminas portaobjetos - 12 laminillas portaobjetos- Azul de metileno en frasco con gotero.- Lugol en frasco con gotero.- 10ml. De alcohol yodado.- Agua destilada.

Proporcionados por el alumno- 01 caja de palitos de mondadientes.- Franela, 01 bisturí y 03 navajas nuevas.- 03 lancetas hematológicas.- Sangre de pollo.- Sangre de lagartija.- 01 cebolla pequeña.

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IV. METODOS

OBSERVACION DE ORGANELOS CITOPLASMATICOS Observación de cloroplastos y estomas:

- Retira una parte pequeña de la epidermis de la hoja de puerro o elodea y llévala sobre una lámina portaobjeto en el que se colocó dos gotas de agua.

- Colocamos la lamina cubre objeto y examinamos la preparación al microscopio.

Observación de vacuolas: - Utilizando un escalpelo, corta en dos mitades el tomate.- Obtén, ayudándote de unas pinzas, un trozo de pulpa de tomate de

unos 2mm de grosor.- Deposítalo en el centro de un portaobjetos sin poner agua.- Coloca encima un cubreobjetos y comprime suavemente con los

dedos hasta obtener un completo aplastamiento del fragmento de pulpa de tomate.

- Lleva la preparación a la platina del microscopio y realiza una observación con pequeños aumentos. Selecciona el mejor grupo de células y pasa a mayores aumentos.

Observación de mitocondrias en células renales: - Coloca la lámina preparada conteniendo el corte histológico de

células renales e identifica una célula renal con el objetivo de 10x.

Observación de complejo de Golgi: - Coloca la lámina preparada conteniendo preparado histológico de

epidídimo de rata e identifica con el objetivo de 10x las células del tejido.

Observación de chapa estriada: - Coloca la lámina preparada de un corte histológico de intestino

delgado (yeyuno) y con el objetivo de 10x identifica las vellosidades intestinales.

Observación de neurofibrillas en medula espinal: - Coloca una lámina preparada de un corte histológico de medula

espinal y con objetivo de 10x.

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OBSERVACION DE LAS PARTES DE UNA CELULA Reconocimiento del citoplasma y núcleo en tejido epidérmico de cebolla:

- Separar una de las hojas interna de la cebolla y desprender la tenue membrana que está adherida por su cara inferior cóncava.

- Depositar el fragmento de membrana en un porta con unas gotas de alcohol para desengrasar las muestras y lavar con agua. Pon el porta sobre la cubeta de tinción para que caiga en ella el agua y los colorantes. Si es preciso, estirar el trozo de epidermis con ayuda de dos agujas enmangadas.

- Escurrir el agua, añadir unas gotas de azul de metileno sobre la membrana y dejar actuar durante 5 minutos aproximadamente.

- Con el cuentagotas bañar la epidermis con agua abundante hasta que no suelte colorante.

- Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al microscopio.

Reconocimiento del citoplasma y núcleo en células de mucosa labial: - Raspa suavemente la cara interna de la mejilla con un palito de

mondadientes limpio y deposita el contenido en el centro de una lámina portaobjetos.

- Coloca una gota de agua encima del contenido anterior y homogenizado completamente. Luego con la ayuda de otra lamina realiza el extendido similar a un frotis de sangre.

- Seca la lámina a temperatura ambiente y agrega sobre la preparación hecha 4 a 5 gotas de azul de metileno, dejando actuar durante 3 minutos.

- Lavar ligeramente la lámina con agua de caño, hasta que no salga más colorante del lavado.

- Seca la lámina frente a un mechero.- Coloca la lámina coloreada en el microscopio y con el objetivo de

10x busca un campo microscópico en donde las células estén bien teñidas y nítidas.

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V. RESULTADOS

OBSERVACION DE ORGANELOS CITOPLASMATICOS Observación de cloroplastos y estomas:

Corte longitudinal- hecho en fresco: AUMENTO 10XSe observó células alargadas constituidas por pequeñas células redondas de color verde

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Observación de vacuolas:

Corte transversal- hecho en fresco: Aumento 10xSe observó un color negro dentro de las cuales se observa células pequeñas en algunas partes. Su forma es alargada.

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Observación de mitocondrias en células renales:

Corte histológico- preparado: Aumento 40xLám. N° 24- riñón: Col. Fosfatuz- mallorySe observa que la célula es de color rojo y forma irregular con algunas partes de color blanco y además de presentar manchitas negras.

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Observación de complejo de Golgi:

Corte histológico- preparado: Aumento 10xLám. 72. Col: EocinaSe observó que la célula es de forma alargada con color rosado claro y partes blancas con pequeños puntos negros.

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Observación de chapa estriada:

Lám. N° 2. Col. H/E: Aumento 10xSe observó la célula con forma alargada y plana, además de su color rosado.

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Observación de neurofibrillas en medula espinal:

Lám. N° 18. Col. Luxol/ Fast Blue: Aumento 40xSe observó la célula de forma escamosa con color azul y puntos rojizos.

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OBSERVACION DE LAS PARTES DE UNA CELULA Reconocimiento del citoplasma y núcleo en tejido epidérmico de cebolla:

Se utilizó la tinción de azul de metileno: Aumento 40xForma ovalada entre cortada plana con puntos que vienen a ser los núcleos.

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Reconocimiento del citoplasma y núcleo en células de mucosa labial:

Se observa el citoplasma y el núcleo coloreados.

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Adicionalmente observamos las fases de la división celular:

Profase

Anafase

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Metafase

Telofase

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VI. DISCUSION

http://www.slideshare.net/utebo6b/la-celula-549285

El corcho está formado en realidad por membranas de células muertas. La membrana es la cubierta exterior de la célula, en el corcho una vez muerta la célula, esta se descompone quedando solo la membrana celular.

Las células de corcho son poliedros de 14 caras de 10 a 7 0 micras longitud y 10 a 50 micras Ø (otoño –primave) , con una pared celular formada por 3 membranas.

http://departamento.us.es/dfarmaco/docs/practicas/farmacognosia/practica-01.pdf

Las células pétreas son células muertas de parénquima con formas muy variadas y con las paredes engrosadas lignificadas. Pueden encontrarse aisladas o en grupos.

Tipos de células pétreas:

1. Células pequeñas, isodiamétricas, con paredes gruesas y pequeño lumen. Se pueden localizar en tejidos parenquimáticos de la corteza, floema etc. (Corteza de Cascara Sagrada)

2. Aisladas o agrupadas en pequeños grupos, de formas y tamaños muy variados, con paredes muy engrosados y lumen bastante amplio (Corteza de Canela)

3. Ramificadas y de formas diversas, generalmente aisladas (Astroescleritos de Hoja de Te)

4. Fusiformes, con lumen muy ancho (Raíz de Acónito).

http://iteistasprimaria.ning.com/profiles/blogs/la-celula-1

Las células isodiametricas son aquellas que poseen tres ejes aproximadamente iguales. Esta clase de células es común en algunos vegetales. De tres dimensiones casi iguales

Esféricas.- como óvulos y los cocos (bacterias) Ovoides.- como las levaduras. Cubicas.- como en el folículo tiroideo.

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http://lacelula3.wikispaces.com/FORMAS+DE+LA+C%C3%89LULA

Las células aplanadas son aquellas las cuales sus dimensiones son mayores que el grosor. Generalmente forman tejidos de revestimiento, como las células epiteliales.

http://www.slideshare.net/rigoberto24/la-celula-7649240

Las células alargadas son aquellas en las cuales un eje es mayor que los otros dos. Estas células forman parte de ciertas mucosas que tapizan el tubo digestivo; otro ejemplo tenemos en las fibras musculares.

http://www.diclib.com/cgibin/d1.cgi?l=es&st=1&page=showid&start=0&base=es_wiki_10&id=37757&letter=#.U6DZmyhLMmQ

Son flageladas las células que tienen flagelos, apéndices locomotores que baten el líquido circundante con un movimiento generalmente helicoidal. Hay dos clases de flagelos, que sólo tienen en común el papel que cumplen.

● Los flagelos bacterianos, propias de eubacterias. Pueden ser muy numerosos y distribuirse según distintas pautas. Por ejemplo, se llama peritricas a las bacterias cubiertas de flagelos en toda su superficie; y lofotricas a las que presentan flagelos sólo hacia los extremos. Los flagelos bacterianos giran como una hélice. ● Los flagelos eucarióticos, que son semejantes a cilios, pero mucho más largos y con un movimiento helicoidal o de látigo (en un plano). En eucariontes los flagelos son estructuras poco numerosas, uno o dos por célula, con la excepción de los protistas unicelulares del grupo de los hipermastiginos. Se distingue a las células acrocontas, que nadan con su flagelo o flagelos por delante, de las opistocontas, donde el cuerpo celular avanza por delante del flagelo. Esta última condición, evolutivamente más moderna, caracteriza a la rama evolutiva que reúne a los reinos hongos (Fungí) y animales (Animalia). Es la que observamos, sin ir más lejos, en los espermatozoides animales (incluidos, desde luego, los humanos).

http://tejidomuscular.galeon.com/productos1032292.html

El músculo estriado está formado por células con las siguientes características:

Son células muy largas, gruesas, de diámetro uniforme. Núcleo: excéntrico, ovoide aplanado, cromatina laxa, con o sin

nucléolo evidente, numerosos por cada célula.

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Citoplasma: estriado (los miofilamentos de actina y miosina están ordenados periódicamente), con bandas oscuras y claras.

El músculo estriado esquelético, por lo general, es voluntario, sujeto a la “ley del todo o nada”.

Se localiza en músculos voluntarios.

http://www.luventicus.org/articulos/04N001/index.html

La neurona está compuesta por un cuerpo neuronal, en el que se hallan el núcleo, que dirige toda la actividad celular, y unas ramificaciones llamadas dendritas (denominadas dendritas receptoras por ser las que reciben la información en la sinapsis). Al cuerpo neuronal lo sigue una prolongación llamada axón (por lo general la más larga de las prolongaciones que posee la neurona). Su función es transmitir la información del núcleo a las dendritas emisoras (que conforman el teledendrón). Éstas, a su vez, uniendo sus botones sinápticos con los de las dendritas receptoras de la neurona siguiente, comunican la información recibida.

Universidad Autónoma de Coahuila

Los glóbulos rojos son células sin núcleo, bicóncavos (esta forma facilita su función de intercambio) y con mucha hemoglobina en su interior. Su membrana es semipermeable, permite el libre paso de agua a través de ella, pero restringe el paso de cierto solutos, como: Cl, K, Na, principalmente. La fragilidad osmótica del eritrocito depende de características como la edad del eritrocito, su tamaño, forma y las demás condiciones propias de la estructura interna de la célula.

Los eritrocitos suspendidos en una solución isotónica (solución salina o suero fisiológico) no se alteran ya que el agua no atraviesa la membrana en ningún sentido, por ser una solución iso-osmótica.

Si suspendemos a los eritrocitos en una solución hipertónica (de concentración iónica superior al citoplasma celular), la salida de agua del interior de la célula al exterior producirá un plegamiento de la membrana (deshidratación), que le dará al eritrocito un aspecto de célula arrugada, a estos se les llaman eritrocitos crepados.

Si suspendemos a los eritrocitos en una solución hipotónica (de concentración iónica menor al citoplasma celular), tenderá a entrar agua en la célula y se hinchará (esferocitos) y la hemoglobina puede salir de la célula a través de los poros de la membrana. Los hematíes se hinchan y si observamos a éstos al microscopio, son grandes, incoloros y con poco contraste, se les llama fantasmas (antes de que se rompan). Posteriormente se produce la rotura de la membrana, estalla y se dará la hemólisis, en caso de que el descenso osmótico sea muy intenso. En condiciones

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normales, un glóbulo rojo puede aceptar sin hemolizarse una entrada de agua que incremente su volumen en un 70% como máximo.

http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/celula/

Las células vegetales tienen una pared rígida de celulosa, que le brinda protección, sin impedir la difusión de agua y iones desde el medio ambiente hacia la membrana plasmática, que es la verdadera barrera de permeabilidad de la célula. Una pared celular primaria típica, de una dicotiledónea está formada por 25-30 % de celulosa, 15-25 % de hemicelulosa, 35 % de pectina y 5-10 % de proteínas (extensinas y lectinas), en base al peso seco. La constitución molecular y estructural precisa de la pared celular, depende del tipo de célula, tejido y especie vegetal.

http://www.xuletas.es/ficha/organelos-citoplasmaticos/

Los organelos citoplasmáticos están formado x cisternas , adheridos a ellos ribosomas que intervienen en la síntesis de proteínas.

http://www.botanica.cnba.uba.ar/Pakete/3er/LaCelula/Cloroplastos.htm

Los cloroplastos son orgánulos con forma de disco, de entre 4 y 6 m de diámetro y 10 m o más de longitud. Aparecen en mayor cantidad en las células de las hojas, lugar en el cual parece que pueden orientarse hacia la luz. Es posible que en una célula haya entre cuarenta y cincuenta cloroplastos, y en cada milímetro cuadrado de la superficie de la hoja hay 500.000 cloroplastos. Cada cloroplasto está recubierto por una membrana doble. El cloroplasto contiene en su interior una sustancia básica denominada estroma, la cual está atravesada por una red compleja de discos conectados entre sí, llamados lamelas. Muchas de las lamelas se encuentran apiladas como si fueran platillos; a estas pilas se les llama grana.

http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema13/13-4estomas.htm

Las estomas son grupos de dos o más células epidérmicas especializadas cuya función es regular el intercambio gaseoso y la transpiración.

http://linux.ajusco.upn.mx/fotosintesis/vacuola.html

Las vacuolas son sacos limitados por membrana, llenos de agua con varios azúcares, sales, proteínas, y otros nutrientes disueltos en ella. Cada célula vegetal contiene una sola vacuola de gran tamaño que usualmente ocupa la mayor parte del espacio interior de la célula. Son un componente típico del protoplasto vegetal. En una célula adulta las vacuolas ocupan casi todo el interior de la célula limitando el

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protoplasma a una delgada capa parietal. A veces hay varias vacuolas y el citoplasma se presenta como una red de finos cordones conectados a la delgada capa de citoplasma que rodea al núcleo.

http://www.elergonomista.com/biologia/mitd.htm

Las mitocondrias son orgánulos presentes en todas las células eucariotas que acumulan en forma de ATP la energía liberada por la oxidación enzimática de las moléculas nutritivas. Organelos rodeadas de 2 membranas del tamaño aproximado de una bacteria. Contienen ADN y realizan la fosforilación oxidativa por lo que producen la mayor parte del ATP de las células eucariotas.

http://benitobios.blogspot.com/2007/10/complejo-de-golgi.html

El complejo de Golgi tiene morfología característica que consiste en cisternas aplanadas, discoides con rebordes amplios relacionados con vesículas emergentes. Realiza funciones específicas, tales como la distribución de proteínas y lípidos que reciben del retículo endoplásmico, algunas de estas proteínas son enzimas que serán enviadas a los lisosomas. Transforma las proteínas y los residuos de carbohidratos para formar glucoproteínas presentes en la superficie externa de la membrana de muchas células.

http://neuroanatomia.info/neurofibrillas.html

Las neurofibrillas, según se ven con el microscopio óptico después de la tinción con plata, son numerosas y discurren paralelas entre sí a través del cuerpo celular hacia las neuritas. Con el microscopio electrónico las neurofibrillas pueden verse como haces de neurofilamentos, cada uno de los cuales mide aproximadamente 10 nm de diámetro. Los neurofilamentos forman el componente principal del citoesqueleto. Desde el punto de vista químico los neurofilamentos son muy estables y pertenecen a la familia de la citoqueratina.

www.ehowenespanol.com/estructura-celular-cebolla-sobre_39247/

En las células de cebolla los azulejos se ven muy similares a los ladrillos rectangulares colocados de manera equilibrada. Las paredes rígidas combinadas con la presión del agua dentro de la célula dan fuerza y rigidez, dando a las plantas la estructura necesaria para resistir la gravedad y la presión. Las paredes celulares y la

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presión del agua contenida tanto en el citoplasma y más particularmente en la vacuola son los que dan a la cebolla su substancia sólida y corte afilado.

http://rbastom08.blogspot.com/2010/05/forma-tamano-numero-y-posicion-del.html

El núcleo celular es casi siempre una estructura esferoidal, relativamente grande cuando se compara con otros organelos citoplasmáticos (mitocondrias, cloroplastos, ribosomas), llegando a medir desde 1 hasta 20 micras. Su volumen guarda cierta proporcionalidad con el citoplasma. Tiende a ocupar una posición central, pero en las células adultas de las plantas se ve desplazado a la perisferia por el volumen del vacuoma (conjunto de vacuolas).

VII. CONCLUSIONES

Se pudo distinguir los organelos citoplasmáticos como son las mitocondrias, las vacuolas, cloroplastos, estomas, etc.

Reconocimos las diversas formas, tamaño y ubicación del núcleo en las células, ya que estas se encuentran ubicadas en distintas partes de la célula como en la parte central, etc.

También pudimos evidenciar la presencia de los cromosomas en las distintas láminas preparadas.

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VIII. CUESTIONARIO1. ¿Qué tipo de coloración es la que se hizo con la mucosa labial? Fue

simple o diferencial, explique su respuesta.

El tipo de coloración fue azul intenso, debido al azul de metileno, fue simple porque presentó una sola coloración.

2. ¿Cómo se realiza una coloración neutra o Wright?

La coloración neutra o coloración de Wright es utilizada para teñir células de frotis de sangre o de médula ósea.La coloración de Wright es una modificación de la tinción de Romanowsky que se utiliza en la tinción diferencial de elementos celulares de la sangre.

3. Utilizando una cartulina pegue las partes de un cromosoma del cariotipo humano, corte y pegue en su informe.

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4. ¿Por qué es importante el estudio del núcleo y de los cromosomas, desde el punto de vista biológico?

El núcleo dirige las actividades de la célula y en él tienen lugar procesos tan importantes como la autoduplicación del ADN o replicación, antes de comenzar la división celular, y la trascripción o producción de los distintos tipos de ARN, que servirán para la síntesis de proteínas.Los cromosomas son los portadores de la mayor parte del material genético y condicionan la organización de la vida y las características hereditarias de cada especie.

5. De cinco ejemplos de como el conocimiento de los organelos citoplasmáticos, núcleo y cromosomas se puede aplicar a su especialidad.

Se puede utilizar para elaborar diversos elementos con total garantía y calidad como:

Bebidas Conservas Industria panificadora

Además se puede utilizar para verificar el estado de alimentos, es decir, verificar que se encuentren en buen estado.

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6. Haga un cuadro en donde señale las diferentes formas, tamaño y posición del núcleo en la célula.

ORGANISMO AL QUE

PERTENECE LA CÉLULA

FORMA TAMAÑO POSICIÓN DIBUJO DE LA CÉLULA

HOJA DE JACINTO alargada Regular Centro

CELULAS RENALES regular Pequeño Superior

derecha

EPIDIDIMO Alargada Pequeño intermedio

derecha

YEYUNO Alargada plana Grande Inferior

MEDULA ESPINAL escamosa Milimetricas Centro

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RAIZ DE CEBOLLA

Redonda variada con

alargadapequeño Intermedio

izquierdo