PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIrepository.usd.ac.id/8509/1/138114047_full.pdf · INSULIN (Tithonia Diversifolia (Hemsley) A. Gray ) PADA TIKUS JANTAN GALUR SPRAGUE DAWLEY

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG INFUSA DAUN

INSULIN (Tithonia Diversifolia (Hemsley) A. Gray ) PADA TIKUS JANTAN

GALUR SPRAGUE DAWLEY TERINDUKSI KARBON

TETRAKLORIDA

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Oleh:

Veronica Olivia Gita Puspa Dewi

NIM : 138114047

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2016

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

i

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG INFUSA DAUN

INSULIN (Tithonia Diversifolia (Hemsley) A. Gray ) PADA TIKUS JANTAN

GALUR SPRAGUE DAWLEY TERINDUKSI KARBON

TETRAKLORIDA

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Oleh:

Veronica Olivia Gita Puspa Dewi

NIM : 138114047

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2016


ii


iii


iv

HALAMAN PERSEMBAHAN

SEGALA PERKARA DAPAT KUTANGGUNG DI DALAM DIA

YANG MEMBERI KEKUATAN KEPADAKU

(FILIPI 4:13)

DON’T WORRY ABOUT ANYTHING, INSTEAD PRAY ABOUT

EVERYTHING. TELL GOD WHAT YOU NEED AND THANK HIM FOR

ALL HE HAS DONE

(PHILIPPIANS 4:16)

Kupersembahkan skripsi ini untuk….

Allah Bapa, Tuhan Yesus Kristus, dan Bunda Maria

sumber kekuatan dan pengharapanku.

Mama , Papa, Niken, Cinta dan Alan

Orang terdekat yang selalu memberi semangat dan kasih sayang,

Sahabat dan teman-teman tersayang

Almamaterku


v


vi


vii

PRAKATA

Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat-Nya penulis dapat

menyelesaikan penulisan skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif Jangka

Panjang Infusa Daun Insulin (Tithonia Diversifolia (Hemsley) A. Gray ) pada

Tikus Jantan Galur Sprague Dawley Terinduksi Karbon Tetraklorida”.

Skipsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana

Farmasi di Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

Penulis menyadari bahwa dalam proses pelaksanaan hingga akhir proses

skripsi ini banyak pihak yang telah memberi bimbingan, bantuan dan dukungan.

Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terimakasih

kepada :

1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma

2. Ketua Program Studi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma

3. Ibu Yunita Linawati, S.Si.,M.Sc.,Apt. sebagai Dosen Pembimbing

sekaligus Dosen Penguji skripsi yang telah banyak memberikan bantuan,

bimbingan, masukan dan koreksi selama proses penyelesaian skripsi.

4. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. sebagai Dosen Penguji skripsi atas

bantuan dan masukan demi kemajuan skripsi ini.

5. Bapak Christianus Heru, Apt. sebagai Dosen Penguji skripsi atas bantuan

dan masukan demi kemajuan skripsi ini.

6. Ibu Dr. Dewi Setyaningsih, M.Sc.Apt. selaku kepala Laboratorium

Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan semua

fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.

7. Bapak Heru, Bapak Suparjiman, dan Bapak Kayatno selaku laboran

bagian Farmakologi-Toksikologi, Imono, dan Biokimia, serta Bapak

Wagiran selaku laboran Farmakognosi-Fitokimia.

8. Mama, Papa Niken, Alan dan Cinta atas doa, dukungan dan kasih sayang

yang selalu dicurahkan.


viii

9. Rekan-rekan penelitian “Bertiga Aja” Anggun Dwi Karina dan Karina

Anindita S. atas kerjasama, perjuangan dan suka duka dalam

menyelesaikan skripsi ini.

10. Sahabat “Kemlinthi” Sridea, Yoke, Priscil, dan Nardo yang selalu

memberi hiburan.

11. Orang-orang yang selalu mendukung dan memberi semangat, Kak Gama,

Mbak Retha, Mbak Dita, Mbak Desi, Mbak Yulita, Bintang, Novera dan

Rara.

12. Seluruh teman-teman angkatan 2013 atas semangat dan dukungan yang

diberikan.

13. Semua pihak yang tidak bisa disebutkan satu persatu yang turut membantu

penyelesaian skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa banyak kesalahan dan kekurangan dalam penulisan

skripsi ini. Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun

agar penulisan skripsi ini menjadi lebih baik. Akhir kata, semoga skripsi ini dapat

bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan terutama di bidang farmasi.

Penulis,


ix

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................................................................................. i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................. iii

HALAMAN PERSEMBAHAN .......................................................................... iv

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ............................................................... v

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH ................. vi

PRAKATA .......................................................................................................... vii

DAFTAR ISI ........................................................................................................ ix

DAFTAR TABEL ................................................................................................. x

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xi

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xii

ABSTRAK ......................................................................................................... xiii

ABSTRACT ....................................................................................................... xiv

PENDAHULUAN ................................................................................................ 1

METODE PENELITIAN ...................................................................................... 2

HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................................. 4

KESIMPULAN ................................................................................................... 13

SARAN ............................................................................................................... 13

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 14

LAMPIRAN ........................................................................................................ 16

BIOGRAFI PENULIS ........................................................................................ 46


x

DAFTAR TABEL

Tabel I. Purata Aktivitas SGPT±SE dan SGOT±SE

Jam ke- 0, 24, dan 48 ........................................................................ 5

Tabel II. Hasil Uji Post Hoc Aktivitas SGPT±SE Jam ke 0, 24, dan 48 ........ 5

Tabel III. Hasil Uji Post Hoc Aktivitas SGOT±SE Jam ke 0, 24, dan 48 ....... 6

Tabel IV. Purata Aktivitas SGPT±SE dan SGOT±SE Kelompok

Perlakuan .......................................................................................... 7

Tabel V. Hasil Uji Post Hoc Aktivitas SGPT±SE pada Kelompok

Perlakuan .......................................................................................... 8

Tabel VI. Hasil Uji Post Hoc Aktivitas SGOT±SE Kelompok

Perlakuan .......................................................................................... 8

Tabel VII. Purata Aktivitas SGPT±SE dan SGOT±SE Jam ke-0 dan 24

Setelah Pemberian Olive Oil 2,0 mL/kgBB ..................................... 9

Tabel VIII. Hasil Paired Sampel Test SGPT±SE Jam ke 0 dan 24

Setelah Pemberian Olive Oil 2,0 mL/kgBB ..................................... 9

Tabel IX. Hasil Paired Sampel Test SGOT±SE Jam ke 0 dan 24

Setelah Pemberian Olive Oil 2,0 mL/kgBB ................................... 10


xi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Diagram Batang Aktivitas SGPT Pemberian CCl4

Dosis 2,0 mL/kgBB .............................................................................. 6

Gambar 2. Diagram Batang Aktivitas SGOT Pemberian CCl4

Dosis 2,0 mL/kgBB .............................................................................. 6

Gambar 3. Diagram Batang Purata Aktivitas SGPT±SE Kelompok

Perlakuan ............................................................................................... 8

Gambar 4. Diagram Batang Purata Aktivitas SGOT±SE Kelompok

Perlakuan ............................................................................................... 9

Gambar 5. Diagram Batang Aktivitas SGPT±SE Pemberian Olive Oil

Dosis 2,0 mL/kgBB ........................................................................... 10

Gambar 6. Diagram Batang Aktivitas SGOT±SE Pemberian Olive Oil

Dosis 2,0 mL/kgBB ........................................................................... 10


xii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto serbuk daun ............................................................................. 17

Lampiran 2. Foto pembuatan infusa daun ............................................................. 17

Lampiran 3. Foto infusa daun ............................................................................... 17

Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi tanaman ........................................... 18

Lampiran 5. Surat legalitas penggunaan aplikasi SPSS ........................................ 18

Lampiran 6. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics Committee

(MHREC) ...................................................................................... 19

Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas SGPT pada uji pendahuluan

dosis hepatotoksin karbon tetraklorida 2,0 mL/kgBB .................... 20

Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas SGOT pada uji pendahuluan dosis

hepatotoksin karbon tetraklorida 2,0 mL/kgBB ............................... 23

Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas SGPT pada kelompok kontrol

olive oil 2,0 mL/kgBB ..................................................................... 26

Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas SGOT pada kelompok kontrol

olive oil 2,0 mL/kgBB .................................................................. 28

Lampiran 11. Analisis statistik aktivitas SGPT pada kelompok perlakuan

Infusa setelah induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB .................. 30

Lampiran 12. Analisis statistik aktivitas SGOT pada kelompok perlakuan

Infusa setelah induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB .................. 37

Lampiran 13. Perhitungan Dosis ........................................................................... 44

Lampiran 14. Perhitungan efek hepatoprotektif ................................................... 44

Lampiran 15. Perhitungan konversi dosis daun untuk manusia............................ 45

Lampiran 16. Penetapan kadar air serbuk daun Tithonia diversifolia

(Hemsley) A.Gray .......................................................................... 45


xiii

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif pemberian jangka

panjang daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray pada tikus jantan galur

Sprague Dawley terinduksi karbon tetraklorida berdasarkan penurunan aktivitas

SGPT dan SGOT. Penelitian ini bersifat ekperimental murni dengan rancangan

acak lengkap pola searah. Hewan uji yang digunakan yaitu tikus jantan, umur 2-3

bulan dengan berat ±150-250 gram. Tiga puluh tikus dibagi acak dalam 6

kelompok perlakuan. Kelompok I merupakan kontrol hepatotoksin karbon

tetraklorida 2,0 mL/kgBB dan pencuplikan darah pada jam ke-24 setelah

pemberian karbon tetraklorida. Kelompok II merupakan kontrol negatif olive oil

2,0 mL/kgBB dan pencuplikan darah pada jam ke-24 setelah pemberian olive oil.

Kelompok III merupakan kontrol infusa dosis 3,0 g/kgBB yang diberikan selama

6 hari berturut-turut dan pencuplikan darah pada hari ke-7. Kelompok IV-IV

merupakan perlakuan dosis infusa diberi infusa daun Tithonia diversifolia

(Hemsley) A. Gray dengan dosis 0,75; 1,5; 3,0 g/kgBB secara p.o selama 6 hari

berturut-turut dan hari ke-7 diberi karbon tetraklorida dosis 2,0 mL/kgBB.

Pengambilan darah dilakukan setelah 24 jam melalui sinus orbitalis, lalu

dilakukan pengukuran aktivitas SGPT dan SGOT. Aktivitas SGPT dan SGOT

dianalisis dengan metode Saphiro Wilk dan diperoleh distribusi data tiap

kelompok normal maka dilanjutkan dengan analisis one way ANOVA 95% dan

dilanjutkan uji Post Hoc. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian infusa

daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray memiliki efek hepatoprotektif pada

tikus yang terinduksi karbon tetraklorida.

Kata kunci :Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray, hepatoprotektif, infusa,

karbontetraklorida, SGPT dan SGOT


xiv

ABSTRACT

The purpose of this research was to investigate the hepatoprotective effect of long

term infusion of insulin (Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray leaf in Spague

Dawley rats inducted by carbon tetrachloride based on the decreased SGPT and

SGOT activities. This research was purely experimental research with

randomized complete direct sampling design. This research used male Spague

Dawley rats, age about 2 to 3 months, and 150-250 gram weight. Thirty rats were

divided randomly into six group. Group I was the control of 2,0 mL/kgBW

carbon tetrachloride as a hepatotoxic and blood collected at 24th

hour after

administration of carbon tetrachloride. Group II was the negative control of 2,0

mL/kgBW olive oil and blood collected at 24th

hour after administration of olive

oil. Group III was given the highest dose of infusion of insulin (Tithonia

diversifolia (Hemsley) for six days in a row and blood collected on 7th

day. Group

IV-VI were provided with infusion with three rangkings of dose 0.75; 1.5; and 3.0

g/kgBW for six days in a row and on the 7th

day carbon tetrachloride was granted.

The blood sampel from all grups was obtained by sinus orbitalis after 24 th

hours

application for measured the serum transaminase (SGPT and SGOT) activities.

The obtained data SGPT and SGOT activities was analyzed using Saphiro-Wilk,

and since the data distribution of each group was normal, one-way ANOVA with

95% significancy level and continued with Post Hoc test. Based on the research, it

can be concluded that infusion of insulin (Tithonia diversifolia (Hemsley) A.

Gray leaf has a hepatoprotective effect upon carbon tetrachloride-inducted hepatic

damage in rats.

Keyword :Tithonia diversifolia (Hemsley A. Gray, hepatoprotective, infusion,

carbon tetrachloride, SGPT and SGOT


1

PENDAHULUAN

Hati merupakan organ vital terbesar dalam tubuh manusia yang terletak di rongga

abdomen sebelah kanan (Pearce, 2011). Hati berperan sebagai pemetabolisme karbohidrat,

protein, lemak, hormon, dan zat kimia asing (Guyton dan Hall, 2006). Peran sebagai

pemetabolisme menyebabkan hati rentan mengalami kerusakan akibat paparan zat seperti

obat, bahan kimia, alkohol, toksin, atau infeksi virus (Timbrell, 2008). Berdasarkan data

World Health Organisation (2004), sirosis hati merupakan penyebab kematian ke-18 di

dunia dengan jumlah kematian 800.000 kasus. Kerusakan hati akan mengganggu proses

metabolisme dalam tubuh maka sudah seharusnya hati mendapatkan perhatian besar.

Namun, hingga saat ini belum ada obat yang spesifik untuk pengobatan kerusakan hati.

Keterbatasan obat ini memicu munculnya penelitian mengenai obat-obatan dari alam. Saat

ini, penelitian dan penggunaan tanaman sebagai obat herbal untuk hepatoprotektif

mengalami kemajuan dan menjadi perhatian karena ketersediaanya yang luas, efek

samping yang rendah dan terbukti bermanfaat (Xiao, Fai So, Liong dan Tipoe, 2013).

Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray merupakan tanaman berkhasiat dari Meksiko

yang banyak tumbuh di Indonesia. Menurut Zirconia, dkk. (2015) daun Tithonia

diversifolia (Hemsley) A. Gray memiliki kandungan metabolit flavonoid. Flavonoid

merupakan senyawa fenolik yang berperan sebagai antioksidan (Amanatie, 2015). Ekstrak

dan fraksi daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray berpotensi sebagai antioksidan

(Hanifa, Yani, dan Livia, 2015). Aktivitas antioksidan inilah yang mendasari suatu

tanaman memiliki efek hepatoprotektif.

Senyawa model yang digunakan yaitu karbon tetraklorida (CCl4). CCl4 dimetabolisme

oleh sitokrom P450 2E1 menjadi radikal bebas triklorometil. Triklorometil dengan oksigen

akan membentuk radikal triklorometilperoxi yang dapat lipid membran retikulum

endoplasmik dengan kecepatan melebihi radikal bebas triklorometil sehingga

menyebabkan perlemakan hati dan akhirnya menyebabkan kematian sel (Timbrell, 2008).

Penelitian ini menggunakan sediaan infusa karena menyesuaikan dengan kebiasaan

masyarakat dalam mengkonsumsi obat tradisional dan senyawa flavonoid yang akan

diambil dapat larut dalam air (Amanatie, 2015). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui

efek hepatoprotektif pemberian jangka panjang infusa daun Tithonia diversifolia

(Hemsley) A. Gray pada tikus jantan galur Sprague Dawley terinduksi karbon tetraklorida.


2

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi tentang tanaman yang memiliki efek

hepatoprotektif.

METODOLOGI

Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak

lengkap pola searah.

Alat dan Bahan

Bahan kimia yang digunakan adalah reagen Serum Glutamic Pyruvic Transaminase

(SGPT) dan Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase (SGOT), aquades, karbon

tetraklorida dan olive oil. Alat yang digunakan adalah oven, penyerbuk, ayakan nomor 40,

panci infusa, termometer, beaker glass, gelas ukur, batang pengaduk, labu ukur, hot plate,

sentrifuge, timbangan analitik, kain flannel, moisture balance, Architectcsystem, tabung

Eppendorf, spuit injeksi p.o dan syringe, spuit i.p. dan syringe.

Metode

Penelitian ini mengukur penurunan aktivitas Serum Glutamic Pyruvic Transaminase

(SGPT) dan Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase (SGOT) tikus terinduksi karbon

tetraklorida yang sebelumnya diproteksi dengan infusa daun Tithonia diversifolia

(Hemsley) A. Gray. Subjek penelitian menggunakan tikus jantan galur Sprague Dawley

dari Laboratorium Hayati Imono, berat badan 150-250 gram, dan umur 2-3 bulan. Bahan

uji yang digunakan adalah daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray dari Merapi

Farma, Kaliurang, Yogyakarta.

Determinasi Tanaman Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray

Determinasi tanaman Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray dilakukan dengan

mencocokkan ciri-ciri tanaman yang diperoleh dari Merapi Farma, Kaliurang, Yogyakarta

dengan buku determinasi. Determinasi dilakukan di Fakultas Biologi Farmasi Universitas

Gadjah Mada. Bagian tanaman yang dideterminasi antara lain batang, daun, dan bunga.

Pengumpulan, Pengeringan, dan Pembuataan Infusa

Daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray yang dipanen 2-3 bulan setelah masa

tanam. Daun dicuci dan diangin-anginkan. Daun dijemur dengan ditutupin kain hitam

selama satu minggu lalu dioven pada suhu 500

C selama 20 jam. Setelah benar-benar

kering, daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray diserbuk dan diayak menggunakan

mesh nomor 40 untuk mendapat serbuk yang lebih halus dan ukuran partikel seragam.


3

Serbuk daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray sebanyak 15 gram, dibasahi

dengan 30 mL akuades lalu dimasukkan ke dalam panci infusa dan ditambah akuades

hingga 100 mL. Campuran dipanaskan selama 15 menit terhitung saat suhu 90˚C sambil

sesekali diaduk. Infusa disaring selagi panas menggunakan kain flannel (Badan Pengawas

Obat dan Makanan, 2010).

Penetapan Kadar Air Serbuk Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray

Uji kadar air dilakukan di Laboratorium FTS Padat. Serbuk kering daun Tithonia

diversifolia (Hemsley) A. Gray dimasukkan ke dalam moisture balance sebanyak 200 mg

kemudian diratakan. Serbuk dipanaskan hingga suhu 1200

C dan ditunggu hingga satu

menit terhitung dari suhu mencapai 1200

C. Kadar air akan tertera pada moisture balance

dan dilakukan 3 kali replikasi. Kadar air yang memenuhi persyaratan standarisasi yaitu

kurang dari 10 % (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).

Pembuatan Larutan Karbon Tetraklorida Konsentrasi 50%

Larutan karbon tetraklorida dibuat dengan konsentrasi 50% dengan perbandingan

volume karbon tetraklorida dan pelarut (olive oil), yakni 1:1 (Janakat dan Al-Merie, 2002).

Uji Pendahuluan

a. Penetapan Dosis Infusa Daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A.Gray

Dosis ditentukan berdasarkan konsentrasi tertinggi infusa yang dapat di spuit

dan tidak menyebabkan kematian. Konsentrasi yang didapatkan yaitu 15%

sehingga didapatkan dosis tertinggi 3,0 g/kgBB berdasarkan volume pemberian

maksimal (5 mL) dan bobot tikus tertinggi (250g). Dosis yang digunakan pada

penelitian ini dibuat 3 peringkat dosis yaitu 0,75; 1,5; dan 3,0 g/kgBB.

D x BB = C x V

Ket : D = dosis tertinggi (g/kgBB) C = konsentrasi infusa (g/mL)

BB = berat badan tikus (kg) V = volume pemberian maksimal (5 mL)

b. Penetapan Dosis Hepatotoksik Karbon Tetraklorida

Karbon tetraklorida diinduksikan pada 5 ekor tikus jantan dengan dosis 2,0

mL/kgBB yang diberikan secara ip (Janakat dan Al-Merie, 2002).

c. Penetapan Waktu Cuplikan Darah

Penetapan waktu pencuplikan darah ditentukan melalui orientasi dengan 3 ekor

tikus. Darah tikus diambil melalui sinus orbitaslis menggunakan pipa kapiler pada

jam ke-0, 24, dan 48 setelah pemberian karbon tetraklorida. Kemudian dilakukan

pengukuran aktivitas SGPT dan SGOT.


4

Perlakuan Hewan Uji

Sebanyak 30 ekor tikus dibagi secara acak ke dalam 6 kelompok, masing-masing 5

ekor tikus. Kelompok I (kontrol hepatotoksik) diberi larutan karbon tetraklorida 2,0 mL/kg

secara i.p. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil 2,0 mL/kg secara i.p. Kelompok

III (kontrol infusa) diberikan infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray 3,0

g/kgBB secara p.o selama 6 hari berturut-turut. Kelompok IV-VI diberi infusa daun

Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray dengan dosis berturut-turut 0,75; 1,5; 3,0 g/kgBB

secara p.o selama 6 hari berturut-turut dan hari ke-7 diinduksi karbon tetraklorida (2,0

mL/kg secara i.p.). Pengambilan darah pada jam ke 24 untuk mengukur aktivitas SGPT

dan SGOT. Penelitian ini telah mendapat persetujuan dari The Medical and HeSGPTh

Research Ethics Committee (MHREC) Fac. of Medicine Gadjah Mada University.

Pemeriksaan SGPT dan SGOT

Pengambilan darah tikus dilakukan melalui sinus orbitalis, lalu diukur aktivitas SGPT

dan SGOT di Laboratorium Hi-lab, Yogyakarta menggunakan Architectcsystem. Data

aktivitas SGPT dan SGOT dianalisis secara statistik menggunakan uji normalitas dengan

Shapiro-Wilk, jika data terdistribusi normal maka dilanjutkan dengan analisis One Way

ANOVA lalu dilanjutkan dengan uji Post Hoc taraf kepercayaan 95%.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian infusa daun Tithonia

diversifolia (Hemsley) A. Gray terhadap efek hepatoprotektif pada tikus jantan galur

Sprague Dawley terinduksi karbon tetraklorida. Infusa daun Tithonia diversifolia

(Hemsley) A. Gray diberikan selama 6 hari bertujuan untuk memproteksi hati tikus. Efek

hepatoprotektif disimpulkan berdasarkan adanya aktivitas SGPT dan SGOT yang berbeda

bermakna antara kelompok perlakuan dosis dengan kelompok karbon tetraklorida.

Determinasi Tanaman

Determinasi tanaman dilakukan di Laboratorium Biologi-Farmasi Universitas Gadjah

Mada bertujuan untuk memastikan bahan uji yang digunakan adalah Tithonia diversifolia

(Hemsley) A. Gray. Hasil determinasi membuktikan bahwa tanaman tersebut adalah

Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray.

Penyiapan Sediaan

Daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray dicuci dan dijemur dengan ditutupi kain

hitam untuk meningkatkan penyerapan panas. Kemudian daun kering diserbuk dan diayak


5

dengan mesh nomor 40 yang bertujuan untuk memperkecil ukuran serbuk sehingga luas

permukaan semakin besar dan kontak serbuk dengan pelarut meningkat. Hal ini akan

mempermudah flavonoid untuk terlarut. Pengukuran kadar air dilakukan untuk memastikan

serbuk memiliki kadar air kurang dari 10% (BPOM, 2010). Berdasarkan pengukuran

menggunakan moisture balance, kadar air serbuk daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A.

Gray adalah 8,13 %. Kadar air berkaitan dengan kualitas dan penyimpanan serbuk, jika

kadar air lebih dari 10% dikhawatirkan adanya pertumbuhan mikroba.

Pembuatan infusa diawali dengan menimbang serbuk dan membasahi dengan aquadest

sebanyak dua kali bobot serbuk. Hal ini bertujuan menjenuhkan serbuk sehingga flavonoid

lebih mudah larut. Flavonoid bersifat polar karena adanya gugus hidroksil sehingga dapat

larut aquadest (Amanatie, 2015). Selanjutnya, penambahan aquadest 100 mL dan

pemanasan selama 15 menit terhitung ketika suhu 90oC. Larutan disaring menggunakan

kain flannel untuk memisahkan antara ampas dengan larutan (BPOM, 2010). Kehilangan

aquadest akibat penguapan, diganti dengan penambahan aquadest panas melalui ampas

agar kandungan flavonoid yang masih tersisa dapat terlarut. Kelebihan infusa yaitu

sederhana dalam pembuatannya sehingga masyarakat mudah untuk mengaplikasikan,

infusa tidak dapat digunakan lebih dari 24 jam karena kandungan air yang tinggi

dikhawatirkan adanya pertumbuhan mikroorganisme.

Uji Pendahuluan

a. Penentuan Dosis Hepatotoksik

Penentuan dosis hepatotoksik bertujuan untuk mengetahui dosis karbon tetraklorida

yang dapat menyebabkan kerusakan hati tanpa kematian. Dosis yang digunakan yaitu 2,0

mL/kgBB dengan rute i.p (Janakat dan Al-Merie,2002).

Tabel I. Purata Aktivitas SGPT±SE dan SGOT±SE Jam ke- 0, 24, dan 48

Karbon tetraklorida menyebabkan kerusakan hati yang ditandai dengan kenaikan

SGPT sebesar 3 kali normal dan SGOT sebesar 4 kali normal (Zimmerman, 1999). Hasil

penelitian membuktikan karbon tetraklorida dosis 2,0 mL/kgBB menyebabkan kerusakan

hati tanpa kematian.

Selang waktu (jam) Purata aktivitas SGPT±SE (U/L) Purata aktivitas SGOT±SE (U/L)

0 62,60 ± 5,48 125,40 ±3.32

24 203,00 ± 15,69 649,20 ± 30,86

48 75,20 ± 3,44 190,80 ± 13,31


6

Tabel II. Hasil Uji Post Hoc Aktivitas SGPT Jam ke 0, 24, dan 48

Keterangan: BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05) BB = Berbeda bermakna (p<0,05)

Gambar 1. Diagram Batang Aktivitas SGPT Pemberian CCl4 2,0 mL/kgBB

Tabel III. Hasil Uji Post Hoc Aktivitas SGOT Jam ke 0, 24, dan 48

Keterangan : BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05) BB = Berbeda bermakna (p<0,05)

Gambar 2. Diagram Batang Aktivitas SGOT Pemberian CCl4 2,0 mL/kgBB

b. Penentuan Waktu Pencuplikan Darah

Penentuan waktu pencuplikan darah bertujuan mengetahui waktu karbon tetraklorida

memberikan efek hepatotoksik maksimal dan menentukan waktu pencuplikan darah tikus

pada perlakuan. Karbon tetraklorida dosis 2,0 mL/kgBB diinduksikan pada tikus,

kemudian pencuplikan darah pada jam ke-0, 24, dan 48. Pencuplikan darah pada jam ke-0

bertujuan untuk melihat aktivitas SGPT dan SGOT pada keadaan normal dan dibandingkan

dengan jam ke-24 dan 48. Tabel I menunjukkan bahwa pada jam ke-24 terjadi peningkatan

SGPT dan SGOT (203,00 ± 15,69 dan 649,20 ± 30,86 U/L) paling tinggi jika dibandingkan

Selang waktu (jam) 0 24 48

0 - BB BTB

24 BB - BB

48 BTB BB -

Selang waktu (jam) 0 24 48

0 - BB BTB

24 BB - BB

48 BTB BB -


7

jam ke-0 (62,60 ± 5,48 dan 125,40 ±3, 32 U/L) dan ke-48 ( 75,20 ± 3,44 dan 190,80 ±

13,31 U/L). Aktivitas SGPT meningkat hingga 3 kali normal dan SGOT meningkat hingga

6 kali normal. Hasil statistik menunjukkan aktivitas SGPT dan SGOT yang berbeda

bermakna (p<0,05) antara jam ke-24 terhadap jam ke-0 dan ke-48, serta hasil yang berbeda

tidak bermakna antara jam ke-0 dan ke-48 (tabel II dan tabel III). Hasil ini menunjukkan

bahwa pada jam ke-24 hati mengalami kerusakan maksimal. Pada jam ke-48, metabolit

karbon tetraklorida sudah terekskresi sehingga kerusakan hati terhenti dan hati telah

mengalami regenerasi sel-sel sehingga kondisi hati kembali normal.

Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Infusa

Penelitian ini memiliki 6 kelompok perlakuan yaitu kontrol hepatotoksik, kontrol

negatif, kontrol infusa (infusa dosis 3,0g/kgBB), dosis I (0,75 g/kgBB), dosis II (1,5

g/kgBB), dan dosis III (3,0 g/kgBB). Parameter untuk melihat efek hepatoprotektif yaitu

penurunan aktivitas enzim aminotransferase (Serum Glutamic Pyruvic Transaminase dan

Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase). SGPT dan SGOT merupakan indikator yang

sensitif terhadap cedera sel hati dan membantu mengenali penyakit hepatoseluler. Jika

terjadi cedera hati, maka aktivitas serum aminotransferase akan meningkat. SGPT

merupakan enzim yang terdapat di hati dalam konsentrasi yang tinggi. Sedangkan SGOT

terdapati di hati, otot, ginjal dan konsentrasi paling tinggi ada di jantung (Kang, 2013). Uji

Normalitas menunjukkan data SGPT dan SGOT terdistribusi normal maka dilanjutkan uji

Post Hoc untuk melihat kebermaknaan dari aktivitas SGPT dan SGOT antarkelompok.

Tabel IV. Purata Aktivitas SGPT±SE dan SGOT±SE Kelompok Perlakuan

Kelompok SGPT(U/L) (rerata± SE*) SGOT(U/L)(rerata±SE*) % Hepatoprotektif

SGPT SGOT

I 187,60 ± 5,53 665,40 ± 51,39 - -

II 64,20 ± 3,15 91,60 ± 6,03 - -

III 61,20 ± 0,58 115,20 ± 1,71 - -

IV 92,80 ± 1,59 371,20 ± 17,18 76,82 % 43,67 %

V 69,00 ± 1,58 263,60 ± 6,72 96,11 % 73,27 %

VI 123,60 ± 2,87 477,40 ± 22,71 51,86 % 40,36 %

Keterangan :

I : Kontrol hepatotoksik (CCl4 2,0 mL/kgBB)

II: Kontrol negatif (olive oil 2,0 mL/kgBB)

III: Kontrol Infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray (3,0 g/kgBB)

IV: Perlakuan Dosis I (Infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray (0,75 g/kgBB) + CCl42,0 mL/kg)

V: Perlakuan Dosis II (Infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray (1,5 g/kgBB) + CCl42,0 mL/kg)

VI : Perlakuan Dosis III (Infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray (3,0 g/kgBB) + CCl4 2,0 mL/kg)


8

Tabel V. Hasil Uji Post Hoc Aktivitas SGPT pada Kelompok Perlakuan


Gambar 3. Diagram Batang Purata Aktivitas SGPT Kelompok Perlakuan

Tabel VI. Hasil Uji Post Hoc Aktivitas SGOT Kelompok Perlakuan


Kelompok I II III IV V VI

I - BB BB BB BB BB

II BB - BTB BB BTB BB

III BB BTB - BB BTB BB

IV BB BB BB - BB BB

V BB BTB BTB BB - BB

VI BB BB BB BB BB -

Kelompok I II III IV V VI

I - BB BB BB BB BTB

II BB - BTB BB BB BB

III BB BTB - BB BB BB

IV BB BB BB - BB BTB

V BB BB BB BB - BB

VI BTB BB BB BTB BB -


9

Gambar 4. Diagram Batang Purata Aktivitas SGOT Kelompok Perlakuan

a. Kontrol Negatif

Kontrol negatif bertujuan untuk mengetahui pengaruh olive oil sebagai pelarut

karbon tetraklorida terhadap aktivitas SGPT dan SGOT. Aktivitas SGPT dan SGOT

kontrol negatif jam ke 24 yaitu 67,20 ± 2,22 dan 98,20 ± 3,51 U/L. Berdasarkan uji

Paired Sample Test, aktivitas SGPT dan SGOT antara jam ke-0 dan 24 menunjukan

hasil yang berbeda tidak bermakna (p>0,05). Hasil tersebut membuktikan olive oil

tidak mempengaruhi aktivitas SGPT dan SGOT. Nilai SGPT dan SGOT jam ke-24

kelompok ini akan digunakan sebagai acuan nilai normal aktivitas SGPT dan SGOT.

Tabel VII. Purata Aktivitas SGPT±SE dan SGOT±SE Jam ke-0 dan 24 Setelah

Pemberian Olive Oil 2,0 mL/kgBB

Tabel VIII. Hasil Uji Paired Sampel Test SGPT Jam ke 0 dan 24 setelah

Pemberian Olive Oil 2,0 mL/kgBB


Selang waktu(jam) Purata aktivitas SGPT±SE (U/L) Purata aktivitas SGOT±SE(U/L)

0 63,80 ± 1,46 91,40 ± 5,10

24 67,20 ± 2,22 98,20 ± 3,51

Selang waktu (jam) 0 24

0 - BTB

24 BTB -


10

Gambar 5. Diagram Batang Aktivitas SGPT Pemberian Olive Oil 2,0 mL/kgBB

Tabel IX. Hasil Uji Paired Sampel Test SGOT Jam ke 0 dan 24 Setelah Pemberian

Olive oil 2,0 mL/kgBB


Gambar 6. Diagram Batang Aktivitas SGOT Pemberian Olive Oil 2,0 mL/kgBB

b. Kontrol Hepatotoksik

Kontrol hepatotoksik bertujuan mengetahui pengaruh karbon tetraklorida terhadap

kerusakan hati pada tikus dilihat dari kenaikan aktivitas SGPT dan SGOT. Uji Post

Hoc menunjukkan aktivitas SGPT dan SGOT antara kontrol hepatotoksik dengan

kontrol negatif berbeda bermakna (p<0,05). Aktivitas SGPT kontrol hepatotoksik

(187,6±5,5 U/L) mencapai 3 kali nilai normal (67,20 ± 2,22 U/L). Aktivitas SGOT

(665,4 ±51,3 U/L) 7 kali nilai normal (98,20 ± 3,51 U/L). Hal ini menunjukkan karbon

tetraklorida menyebabkan kerusakan hati, khususnya perlemakan hati (ATSDR, 2005).

Karbon tetraklorida dimetabolisme oleh sitokrom P450 2E1 (CYP2E1) yang

konsentrasi tertinggi berada di hati. Hal inilah yang menyebabkan hati menjadi target.

Karbon tetraklorida dimetabolisme menjadi radikal bebas triklorometil (CCl3).

Selang waktu (jam) 0 24

0 - BTB

24 BTB -


11

Triklorometil dengan oksigen akan membentuk radikal triklorometilperoxi yang dapat

menyerang lipid membran retikulum endoplasmik (peroksidasi lipid) dengan kecepatan

yang melebihi radikal bebas triklorometil sehingga mengganggu homeostasis Ca2+

dan

akhirnya menyebabkan kematian sel (Timbrell, 2008). Radikal bebas merupakan

molekul yang memiliki elektron terluar yang tidak berpasangan dan dapat menarik

elektron dari molekul lain dalam tubuh, sehingga menyebabkan kerusakan sel tubuh.

Kondisi yang tidak seimbang antara radikal bebas mekanisme pertahanan tubuh

menyebabkan kerusakan oksidatif yang tersebar dalam semua sel target (lipid, protein,

dan DNA). Molekul yang pertama diserang yaitu lipid yang berada pada membrane sel,

sehingga menghasilkan radikal lipd (L*) yang jika bertemu oksigen akan menjadi

radikal lipid peroksida (LOO*) (Amic, 2003).

c. Kontrol Infusa

Kontrol infusa bertujuan untuk mengetahui pengaruh infusa terhadap aktivitas

SGPT dan SGOT. Kontrol infusa menggunakan dosis 3,0 g/kgBB dianggap mewakili

dosis 1,50 dan 0,75 g/kgBB. Aktivitas SGPT dan SGOT kontrol infusa yaitu 61,20 ±

0,58 dan 115,20 ± 1,71 U/L. Berdasarkan uji Post Hoc, kontrol infusa memiliki

perbedaan tidak bermakna (p>0,05) terhadap kontrol negatif. Hasil ini membuktikan

bahwa pemberian infusa dosis tinggi selama 6 hari berturut-turut tidak mempengaruhi

aktivitas SGPT dan SGOT.

d. Kelompok Perlakuan Dosis

Efek hepatoprotektif daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray dipengaruhi

oleh adanya flavonoid. Daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray mengandung

flavonoid (Hanifa, Yani, dan Livia, 2015) jenis flavonol (Zirconia, dkk, 2015).

Menurut Kandimalla (2016), flavonoid memiliki kemampuan sebagai hepatoprotektif

yang dapat menurunkan aktivitas serum enzim (SGPT, SGOT, ALP, dan LDH) pada

tikus terinduksi karbon tetraklorida. Flavonoid memiliki kelektronegatifan tinggi

sehingga dapat menetralkan radikal bebas dengan menyumbangkan atom hidrogen ke

elektron bebas CCl3–

dan CCl3OO– maka dapat menghambat radikal bebas berikatan

dengan asam lemak di hati sehingga kerusakan hati dapat teratasi.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas SGPT perlakuan infusa daun

Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray dosis I, II, dan III secara berturut-turut yaitu

92,80 ± 1,59; 69,00 ± 1,58; 123,60 ± 2,87 U/L. Berdasarkan Uji Post Hoc (Tabel V),

purata aktivitas SGPT seluruh kelompok perlakuan dosis infusa daun Tithonia


12

diversifolia (Hemsley) A. Gray berbeda bermakna terhadap kontrol hepatotoksik

(p<0,05). Berdasarkan Uji Post Hoc, aktivitas SGPT kelompok perlakuan dosis II

menunjukkan hasil berbeda tidak bermakna terhadap kontrol negatif (p>0,05),

sedangkan dosis I dan III berbeda bermakna (p<0,05) terhadap kontrol negatif. Hasil

ini menunjukkan bahwa dosis I, II, dan III dapat menurunkan SGPT jika dibandingkan

dengan kontrol hepatotoksik (187,60 ± 5,53 U/L) dan dosis II dapat menurunkan SGPT

hingga normal jika dibandingkan dengan kontrol negatif (64,20 ± 3,15 U/L).

Aktivitas SGOT perlakuan infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray

dosis I, II, dan III secara berturut-turut yaitu 371,20 ± 17,18; 263,60 ± 6,72; dan 477,40

± 22,71 U/L. Berdasarkan Uji Post Hoc (Tabel VI), purata aktivitas SGOT kelompok

perlakuan dosis I dan II berbeda bermakna terhadap kontrol hepatotoksik (p<0,05),

sedangkan dosis III berbeda tidak bermakna terhadap kontrol hepatotoksik (p>0,05).

Hasil ini menunjukkan bahwa dosis I dan II dapat menurunkan aktivitas SGOT tetapi

dosis III belum mampu menurunkan aktivitas SGOT jika dibandingkan dengan kontrol

hepatotoksik (665,40 ± 51,39 U/L). Aktivitas SGOT kelompok perlakuan dosis I, II,

dan III memiliki perbedaan bermakna terhadap kontrol negatif (p<0,05). Hasil ini

menunjukkan bahwa dosis I, II, dan III belum menurunkan aktivitas SGOT hingga

normal jika dibandingkan dengan kontrol negatif (187,60 ± 5,53 U/L). Aktivitas SGOT

yang masih tinggi karena adanya kerusakan organ lain seperti jantung, otot dan ginjal

karena SGOT tidak spesifik di hati (Thapa dan Anuj, 2007). Hati merupakan organ

yang paling sensitif terhadap paparan karbon tetraklorida, namun hal ini tidak menutup

kemungkinan bahwa karbon tetraklorida yang diinduksikan sistemik secara ip juga

menyebabkan kerusakan pada jantung, ginjal, otot, otak dan paru-paru (ATSDR, 2005).

Pada tabel IV, terlihat bahwa kenaikan dosis infusa daun Tithonia diversifolia

(Hemsley) A. Gray tidak diikuti dengan kenaikan persen hepatoprotektif. Perlakuan

dosis I memberikan penurunan aktivitas SGPT-SGOT belum mencapai normal dan

persen hepatoprotektif lebih kecil dibanding dosis II, karena dosis I masih rendah

sehingga kurang optimal dalam memproteksi hati. Perlakuan dosis II memberikan

penurunan aktivitas SGPT hingga normal dan memberikan persen hepatoprotektif

paling tinggi, walaupun penurunan aktivitas SGOT belum mencapai normal karena

adanya kerusakan pada organ lain (Kang, 2013). Sedangkan untuk dosis III, penurunan

aktivitas SGPT dan persen hepatoprotektif paling kecil bahkan aktivitas SGOT masih

berbeda tidak bermakna dengan karbon tetraklorida. Hal ini disebabkan karena adanya


13

pro-oxidant pada dosis III, yaitu suatu efek samping yang dipengaruhi oleh konsentrasi

antioksidan yang sudah jenuh (Prochazkova, D., Bousova, dan Wilhelmova, 2011).

Antioksidan akan menjadi reaktif dan tidak stabil setelah kehilangan elektron karena

adanya radikal bebas. Pada konsentrasi yang sesuai, kereaktifan antioksidan akan

dinetralkan dengan bantuan antioksidan lain (baik antioksidan endogen maupun

eksogen), namun jika konsentrasi sudah melampaui batas maka kereaktifan akan

semakin meningkat dan terjadilah pro-oxidant yang menyebabkan antioksidan yang

telah bereaksi dengan radikal bebas justru menjadi reaktif dan tidak stabil sehingga

menyebabkan kerusakan jaringan yang ada disekitar (Villanueva dan Kross, 2012).

Berdasarkan penelitian, dosis I (0,75 g/kgBB) dan II (1,50 g/kgBB) memiliki efek

hepatoprotektif karena mampu menurunkan aktivitas SGPT dan SGOT tikus terinduksi

karbon tetraklorida hingga berbeda bermakna terhadap karbon tetraklorida. Namun,

perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terkait efek hepatoprotektif dengan dosis di

bawah 0,75 g/kgBB. Hipotesis penelitian ini yaitu infusa daun Tithonia diversifolia

(Hemsley) A. Gray memberikan efek hepatoprotektif dapat terpenuhi.

KESIMPULAN

Infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray memiliki efek hepatoprotektif

pada tikus jantan galur Spague Dawley terinduksi 2,0 mL/kgBB karbon tetraklorida.

SARAN

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terkait efek heptoprotektif dosis di bawah 0,75

g/kgBB dan uji toksisitas daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A Gray.


14

DAFTAR PUSTAKA

Amanatie, E. S., 2015. Structure Elucidation of the Leaf of Tithonia diversifolia (Hemsl)

Gray. Jurnal Sains dan Matematika., 23 (4), 101-106.

Amic, D., Davidovic- Amic, D., Beslo, Trinajstc, 2003. Structure-Radical Scavenging Activity

Relationship of Flavonoids, Croatia Chemica Acta, 76 (1), 55-61.

Departemen Kesehatan RI, 2007. Pharmaceutical Care untuk Penyakit Hati.

Department Of Health And Human Services, 2005. Public Health Statement Carbon Tetrachloride.

Agency for Toxic Substance and Disease Registry, 1-7.

Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995. Farmakope Indonesia.

Guyton and Hall, 2006. Text Book of Medical Physiology.

Hanifa, R., Yani, L., dan Livia, S., 2015. Uji Antioksidan serta Penetapan Kadar Flavonoid

Total dari Ekstrak dan Fraksi Daun Paitan (Tithonia diversifolia (Hemsley) A.

Gray). Prosiding Penelitian SPeSIA Unisiba., 2460-6472.

Janakat, S., and Al-Merie, H., 2002. Optimization of the dose and route of injection, and

characterisation of the time course of carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity in

the rat, J. Pharm. Tox.Methods, 48, 41-44.

Kandimalla, R., Kalita, S., Saikia, B.,Choudhury, B., Singh, Y., Kalita, K., Dash, S., dan

Kotoky, J., 2016. Antioxidant and Hepatoprotective Potentiality of Randia

dumetorum Lam. Leaf and Bark via Inhibition of Oxidative Stress and Inflammatory

Cytokines. Journal Frontiers in Pharmacology, 7 (205), 1-8.

Kang, K. S., 2013. Review Article: Abnormality on Liver Function Test. Pediatric

Gastroenterology, Hepatology & Nutrition, 16, 225-232.

Pearce, E., 2011. Anatomi dan Fisiologi untuk Paramedis.

Prochazkova, D., Bousova, dan Wilhelmova, 2011. Review : Antioxidant and Prooxidant

Properties of Flavonoid. Fitoterapia, 82, 513-523.

Thapa, B.R., dan Anuj, W., 2007. Liver Function Tests and their Interpretation. Indian

Journal of Pediatrics, 74, 67-75.

Timbrell, A.J., 2008. Principle of Biochemical Technology.

Villanueva, C., and Robert D. K., 2012. Review : Antioxidant-Induced Stress. International

Journal of Molecular Sciences, 13, 2091-2109.

Wakchaure, D., Jain, D., Singhai, A.K., dan Somani, R., 2013. Hepatoprotective Activity

of Symplocos racemose Bark on Tetrachloride-Induced Hepatic Damage.


15

Xiao, Fai So, Liong dan Tipoe, 2013. Recent Afvances in the Herbal Treatment of Non-

Alcoholic Fatty Liver Disease. Journal of Traditional and Complementary

Medicine., 3 (2), 88-94.

Zimmerman, H. J., 1999. Hepatotoxicity.

Zirconia, A., Nunung, K., dan Vina, A., 2015. Identifikasi Senyawa Flavonoid dari Daun

Kembang Bulan (Tithonia Diversifolia) dengan Metode Pereaksi Geser. al Kimiya,

2, 9-17.


16

LAMPIRAN


17

Lampiran 1. Foto serbuk daun

Lampiran 2. Foto pembuatan infusa daun

Lampiran 3. Foto infusa daun


18

Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi tanaman


19

Lampiran 5. Surat legalitas penggunaan aplikasi SPSS


20

Lampiran 6. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics Committee

(MHREC)


21

Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas SGPT pada uji pendahuluan dosis

hepatotoksik karbon tetraklorida 2,0 mL/kgBB

Descriptives

KELOMPOK Statistic Std. Error

SGPT

JAM KE O

Mean 67.60 5.483

95% Confidence Interval for Mean Lower Bound 52.38

Upper Bound 82.82

5% Trimmed Mean 67.72

Median 70.00

Variance 150.300

Std. Deviation 12.260

Minimum 51

Maximum 82

Range 31

Interquartile Range 23

Skewness -.364 .913

Kurtosis -1.067 2.000

JAM KE 24

Mean 203.00 15.697


Upper Bound 246.58


Median 210.00

Variance 1232.000


Minimum 152

Maximum 245

Range 93


Skewness -.546 .913

Kurtosis .247 2.000


22

JAM KE 48

Mean 75.20 3.441


Upper Bound 84.75


Median 75.00

Variance 59.200


Minimum 67

Maximum 86

Range 19


Skewness .480 .913

Kurtosis -.934 2.000

Tests of Normality

KELOMPOK Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

\

SGPT

JAM KE O .178 5 .200* .976 5 .913

JAM KE 24 .179 5 .200* .981 5 .941

JAM KE 48 .190 5 .200* .955 5 .776

*. This is a lower bound of the true significance.

a. Lilliefors Significance Correction

Test of Homogeneity of Variances

SGPT

Levene Statistic df1 df2 Sig.

4.366 2 12 .038

Multiple Comparisons

Dependent Variable: SGPT

Tamhane

(I) KELOMPOK (J) KELOMPOK Mean Difference

(I-J)

Std. Error Sig. 95% Confidence Interval

Lower Bound Upper Bound

JAM KE O JAM KE 24 -135.400* 16.627 .001 -194.10 -76.70

ANOVA

SGPT

Sum of Squares Df Mean Square F Sig.

Between Groups 57872.933 2 28936.467 60.222 .000

Within Groups 5766.000 12 480.500

Total 63638.933 14


23

JAM KE 48 -7.600 6.473 .627 -28.01 12.81

JAM KE 24 JAM KE O 135.400* 16.627 .001 76.70 194.10

JAM KE 48 127.800* 16.070 .003 67.59 188.01

JAM KE 48 JAM KE O 7.600 6.473 .627 -12.81 28.01

JAM KE 24 -127.800* 16.070 .003 -188.01 -67.59

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas SGOT pada uji pendahuluan dosis

hepatotoksik karbon tetraklorida 2,0 mL/kgBB

Case Processing Summary

KELOMPOK Cases

Valid Missing Total

N Percent N Percent N Percent

SGOT

JAM 0 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

JAM 24 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

JAM 48 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

Descriptive


SGOT JAM 0

Mean 125.40 3.326

95% Confidence Interval for

Mean

Lower Bound 116.17

Upper Bound 134.63


Median 127.00


24

Variance 55.300


Minimum 113

Maximum 132

Range 19


Skewness -1.538 .913

Kurtosis 2.625 2.000

JAM 24

Mean 649.20 30.863


Mean

Lower Bound 563.51

Upper Bound 734.89


Median 634.00

Variance 4762.700


Minimum 567

Maximum 756

Range 189


Skewness .825 .913


JAM 48

Mean 190.80 13.317


Mean

Lower Bound 153.83

Upper Bound 227.77


Median 210.00

Variance 886.700


Minimum 150

Maximum 215

Range 65


Skewness -.793 .913

Kurtosis -2.139 2.000


25

ANOVA

SGOT

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 814623.600 2 407311.800 214.198 .000

Within Groups 22818.800 12 1901.567

Total 837442.400 14


Dependent Variable: SGOT

Scheffe

(I) KELOMPOK (J) KELOMPOK Mean Difference

(I-J)


Lower Bound Upper Bound

JAM 0 JAM 24 -523.800* 27.579 .000 -600.68 -446.92

JAM 48 -65.400 27.579 .100 -142.28 11.48

JAM 24 JAM 0 523.800* 27.579 .000 446.92 600.68

JAM 48 458.400* 27.579 .000 381.52 535.28

JAM 48 JAM 0 65.400 27.579 .100 -11.48 142.28

JAM 24 -458.400* 27.579 .000 -535.28 -381.52



26

Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas SGPT pada kelompok kontrol olive oil 2,0

mL/kgBB

Descriptives


SGPT

JAM 0

Mean 65.80 1.158


Upper Bound 69.01


Median 66.00

Variance 6.700


Minimum 62

Maximum 69

Range 7


Skewness -.502 .913

Kurtosis .795 2.000

JAM 24

Mean 67.20 2.223


Upper Bound 73.37



27

Median 68.00

Variance 24.700


Minimum 61

Maximum 74

Range 13


Skewness .169 .913


Tests of Normality



SGPT JAM 0 .179 5 .200* .984 5 .955

JAM 24 .164 5 .200* .981 5 .942




28

Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas SGOT kontrol olive oil 2,0 mL/kgBB


29

Oneway


SGOT


.763 1 8 .408

ANOVA

SGOT


Between Groups 115.600 1 115.600 1.204 .304

Within Groups 768.000 8 96.000

Total 883.600 9


30

Lampiran 11. Analisis statistik aktivitas SGPT pada kelompok perlakuan Infusa setelah

induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB


KELOMPOK Cases

Valid Missing Total


SGPT

KONTROL CCL4 DOSIS 2 mL/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

KONTROL OLIVE OIL DOSIS 2 mL/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

KONTROL INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 3 g/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

PERLAKUAN INFUSADAUN INSULIN DOSIS 0,75 g/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 1,5 g/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 3 g/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%


31

Descriptives


SGPT

KONTROL CCL4 DOSIS 2

mL/kgBB

Mean 187.60 .537

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound

72.23

Upper

Bound

202.97


Median 187.00

Variance 153.300


Minimum 173

Maximum 200

Range 27


Skewness -.040 .913

Kurtosis -2.616 2.000

KONTROL OLIVE OIL

DOSIS 2 mL/kgBB

Mean 64.20 3.153


Lower

Bound

55.45

Upper

Bound

72.95


Median 63.00

Variance 49.700


Minimum 56

Maximum 75

Range 19


Skewness .808 .913


KONTROL INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS 3 g/kgBB

Mean 61.20 .583

95% Confidence Interval for Mean Lower

Bound

59.58


32

Upper

Bound

62.82


Median 61.00

Variance 1.700


Minimum 60

Maximum 63

Range 3


Skewness .541 .913

Kurtosis -1.488 2.000

PERLAKUAN INFUSA

DAUN INSULIN DOSIS

0,75 g/kgBB

Mean 92.80 1.594


Lower

Bound

88.38

Upper

Bound

97.22


Median 92.00

Variance 12.700


Minimum 89

Maximum 97

Range 8


Skewness .272 .913

Kurtosis -2.680 2.000

PERLAKUAN INFUSA

DAUN INSULIN DOSIS 1,5

g/kgBB

Mean 69.00 1.581


Lower

Bound

64.61

Upper

Bound

73.39


Median 70.00

Variance 12.500


33


Minimum 64

Maximum 73

Range 9


Skewness -.566 .913


PERLAKUAN INFUSA

DAUN INSULIN DOSIS 3

g/kgBB

Mean 123.60 2.874


Lower

Bound

115.62

Upper

Bound

131.58


Median 120.00

Variance 41.300


Minimum 117

Maximum 131

Range 14


Skewness .450 .913

Kurtosis -2.936 2.000

Tests of Normality

KELOMPOK Kolmogorov-

Smirnova

Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic Df Sig.

SGPT

KONTROL CCL4 DOSIS 2 mL/kgBB .242 5 .200* .882 5 .318

KONTROL OLIVE OIL DOSIS 2

mL/kgBB

.199 5 .200* .963 5 .827

KONTROL INFUSA DAUN INSULIN

DOSIS 3 g/kgBB

.221 5 .200* .902 5 .421

PERLAKUAN INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS 0,75 g/kgBB

.215 5 .200* .901 5 .415



.211 5 .200* .965 5 .844


34



.312 5 .125 .831 5 .142



Oneway


SGPT


5.113 5 24 .002

ANOVA

SGPT


Between Groups 60151.067 5 12030.213 266.155 .000

Within Groups 1084.800 24 45.200

Total 61235.867 29


35


Dependent Variable: SGPT

Tamhane

(I) KELOMPOK (J) KELOMPOK Mean

Difference

(I-J)

Std.

Error

Sig. 95% Confidence

Interval

Lower

Bound

Upper

Bound

KONTROL

CCL4 DOSIS 2

mL/kgBB


mL/kgBB

123.400* 6

.372

.

000

94.47 152.33


DOSIS 3 g/kgBB

126.400* 5

.568

.

000

92.47 160.33

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN

DOSIS 0,75 g/kgBB

94.800* 5

.762

.

000

63.19 126.41


DOSIS 1,5 g/kgBB

118.600* 5

.758

.

000

86.95 150.25


DOSIS 3 g/kgBB

64.000* 6

.239

.

001

34.86 93.14

KONTROL

OLIVEOIL

DOSIS2

mL/kgBB

KONTROL CCL4 DOSIS 2 mL/kgBB -123.400

* 6

.372

.

000

-152.33 -94.47


DOSIS 3 g/kgBB

3.000 3

.206

1

.000

-15.82 21.82


DOSIS 0,75 g/kgBB

-28.600* 3

.533

.

003

-45.24 -11.96


DOSIS 1,5 g/kgBB

-4.800 3

.527

.

977

-21.45 11.85


DOSIS 3 g/kgBB

-59.400* 4

.266

.

000

-76.97 -41.83

KONTROL

INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS

3 g/kgBB


* 5

.568

.

000

-160.33 -92.47


mL/kgBB

-3.000 3

.206

1

.000

-21.82 15.82


DOSIS 0,75 g/kgBB

-31.600* 1

.697

.

000

-40.40 -22.80


DOSIS 1,5 g/kgBB

-7.800 1

.685

.

079

-16.52 .92


DOSIS 3 g/kgBB

-62.400* 2

.933

.

000

-79.43 -45.37

PERLAKUAN

INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS

0,75 g/kgBB


* 5

.762

.

000

-126.41 -63.19


mL/kgBB

28.600* 3

.533

.

003

11.96 45.24


36


DOSIS 3 g/kgBB

31.600* 1

.697

.

000

22.80 40.40


DOSIS 1,5 g/kgBB

23.800* 2

.245

.

000

14.58 33.02


DOSIS 3 g/kgBB

-30.800* 3

.286

.

001

-45.84 -15.76

PERLAKUAN

INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS

1,5 g/kgBB


* 5

.758

.

000

-150.25 -86.95


mL/kgBB

4.800 3

.527

.

977

-11.85 21.45


DOSIS 3 g/kgBB

7.800 1

.685

.

079

-.92 16.52


DOSIS 0,75 g/kgBB

-23.800* 2

.245

.

000

-33.02 -14.58


DOSIS 3 g/kgBB

-54.600* 3

.280

.

000

-69.65 -39.55

PERLAKUAN

INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS

3 g/kgBB


* 6

.239

.

001

-93.14 -34.86


mL/kgBB

59.400* 4

.266

.

000

41.83 76.97


DOSIS 3 g/kgBB

62.400* 2

.933

.

000

45.37 79.43


DOSIS 0,75 g/kgBB

30.800* 3

.286

.

001

15.76 45.84


DOSIS 1,5 g/kgBB

54.600* 3

.280

.

000

39.55 69.65



37

Lampiran 12. Analisis statistik aktivitas SGOT pada kelompok perlakuan Infusa setelah

induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB


KELOMPOK Cases

Valid Missing Total


SGOT

KONTROL CCL4 DOSIS 2 mL/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

KONTROL OLIVE OIL DOSIS 2 mL/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

KONTROL INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 3 g/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 0,75 g/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN DOSIS1,5 g/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 3 g/kgBB 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%


38

Descriptives

KELOMPOK Statistic Std.

Error

SGOT

KONTROL CCL4 DOSIS 2

mL/kgBB

Mean 665.40 1

.393


Lower

Bound

522.71

Upper

Bound

808.09


Median 681.00

Variance 13206.300


Minimum 511

Maximum 814

Range 303


Skewness -.135 .913

Kurtosis -.268 .000


mL/kgBB

Mean 91.60 .030


Lower

Bound

74.86

Upper

Bound

108.34


Median 87.00

Variance 181.800


Minimum 75

Maximum 106

Range 31


Skewness .074 .913

Kurtosis -2.194 .000


39

KONTROL INFUSA DAUN


Mean 115.20 .715


Lower

Bound

110.44

Upper

Bound

119.96


Median 116.00

Variance 14.700


Minimum 110

Maximum 120

Range 10


Skewness -.254 .913

Kurtosis -.501 .000



Mean 371.20 1

7.188


Lower

Bound

323.48

Upper

Bound

418.92


Median 371.00

Variance 1477.200


Minimum 314

Maximum 421

Range 107


Skewness -.456 .913

Kurtosis 1.667 .000


INSULIN DOSIS1,5 g/kgBB

Mean 263.60 .728


Lower

Bound

244.92

Upper

Bound

282.28


40


Median 258.00

Variance 226.300


Minimum 247

Maximum 280

Range 33


Skewness .297 .913




Mean 477.40 2.721


Lower

Bound

414.32

Upper

Bound

540.48


Median 483.00

Variance 2581.300


Minimum 419

Maximum 527

Range 108


Skewness -.177 .913



41

Tests of Normality



SGOT

KONTROL CCL4 DOSIS 2 mL/kgBB .154 5 .200* .994 5 .992

KONTROL OLIVE OIL DOSIS 2 mL/kgBB .240 5 .200* .889 5 .354

KONTROL INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 3 g/kgBB .183 5 .200* .985 5 .961

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 0,75 g/kgBB .256 5 .200* .951 5 .747

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN DOSIS1,5 g/kgBB .247 5 .200* .864 5 .243

PERLAKUAN INFUSA DAUN INSULIN DOSIS 3 g/kgBB .231 5 .200* .864 5 .244



Oneway


SGOT


5.711 5 24 .001

ANOVA

SGOT


Between Groups 1216483.467 5 243296.693 82.531 .000

Within Groups 70750.400 24 2947.933

Total 1287233.867 29


42


Dependent Variable: SGOT

Tamhane

(I) KELOMPOK (J) KELOMPOK Mean

Difference

(I-J)


Lower Bound Upper

Bound

KONTROL CCL4

DOSIS 2

mL/kgBB

KONTROL OLIVE OIL DOSIS 2 mL/kgBB 573.800* 51.746 .005 259.89 887.71


DOSIS 3 g/kgBB

550.200* 51.422 .006 231.31 869.09


DOSIS 0,75 g/kgBB

294.200* 54.191 .045 6.80 581.60


DOSIS1,5 g/kgBB

401.800* 51.832 .019 89.14 714.46


DOSIS 3 g/kgBB

188.000 56.192 .234 -87.80 463.80

KONTROL

OLIVE OIL

DOSIS 2

mL/kgBB

KONTROL CCL4 DOSIS 2 mL/kgBB -573.800* 51.746 .005 -887.71 -259.89


DOSIS 3 g/kgBB

-23.600 6.269 .203 -58.08 10.88


DOSIS 0,75 g/kgBB

-279.600* 18.215 .000 -375.05 -184.15


DOSIS1,5 g/kgBB

-172.000* 9.034 .000 -209.25 -134.75


DOSIS 3 g/kgBB

-385.800* 23.508 .000 -516.84 -254.76

KONTROL

INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS

3 g/kgBB


KONTROL OLIVE OIL DOSIS 2 mL/kgBB 23.600 6.269 .203 -10.88 58.08


DOSIS 0,75 g/kgBB

-256.000* 17.274 .002 -361.47 -150.53


DOSIS1,5 g/kgBB

-148.400* 6.943 .000 -187.38 -109.42


DOSIS 3 g/kgBB

-362.200* 22.786 .001 -502.36 -222.04

PERLAKUAN

INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS

0,75 g/kgBB




DOSIS 3 g/kgBB

256.000* 17.274 .002 150.53 361.47


43


DOSIS1,5 g/kgBB

107.600* 18.458 .027 13.70 201.50


DOSIS 3 g/kgBB

-106.200 28.490 .095 -226.49 14.09

PERLAKUAN

INFUSA DAUN

INSULIN

DOSIS1,5

g/kgBB




DOSIS 3 g/kgBB

148.400* 6.943 .000 109.42 187.38


DOSIS 0,75 g/kgBB

-107.600* 18.458 .027 -201.50 -13.70


DOSIS 3 g/kgBB

-213.800* 23.696 .006 -343.04 -84.56

PERLAKUAN

INFUSA DAUN

INSULIN DOSIS

3 g/kgBB

KONTROL CCL4 DOSIS 2 mL/kgBB -188.000 56.192 .234 -463.80 87.80



DOSIS 3 g/kgBB

362.200* 22.786 .001 222.04 502.36


DOSIS 0,75 g/kgBB

106.200 28.490 .095 -14.09 226.49


DOSIS1,5 g/kgBB

213.800* 23.696 .006 84.56 343.04



44

Lampiran 13. Perhitungan Dosis

Berat Badan tikus : 250 gram = 0,25 kg

Konsentrasi Infusa : 15% =

Volume maksimal yang dapat diberikan : 5 mL

D x BB = C x V

D = ;

D = = 3g/kgBB; kemudian dibuat 3 peringkat dosis dengan dibagi 2

Maka, peringkat dosis yaitu : 0,75; 1,5; 3,0 g/kg BB

Lampiran 14. Perhitungan efek hepatoprotektif

{1- }x 100%

{1- }x 100%

(Wakchaure, Jain, Singhai, Somani, 2013)

1. Kelompok perlakuan dosis 0,75 g/kgBB

- SGPT

{1- }x 100% = 76,82 %

- SGOT

{1- }x 100% = 43,67 %


- SGPT

{1- }x 100% = 96,11%

- SGOT

{1- }x 100% =73,27 %


- SGPT

{1- }x 100% = 51,86 %

- SGOT

{1- }x 100% = 40,36 %


45

Lampiran 15. Perhitungan konversi dosis daun untuk manusia

Nilai konversi tikus 200 g ke manusia 70 kg = 56 , Dosis untuk manusia 70 kg = dosis tikus

200g x nilai konversi. Maka dosis infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A.Gray yaitu :

Infusa daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A.Gray dosis 0,75 g/kgBB

0,75 g/kgBB=0,75 g/1000gBB=0,15g/200gBB

0,15 g/200 gBB x 56,0 = 8,4 g/70kgBB manusia


1,50 g/kgBB=1,50 g/1000gBB=0,3/200gBB



3,0 g/kgBB=3,0 g/1000gBB=0,6/200gBB


Lampiran 16. Penetapan kadar air serbuk daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A.Gray

Maka, kadar air serbuk daun Tithonia diversifolia (Hemsley) A.Gray yaitu,

Rata-rata kadar air =( )% = 8,13 %


46

BIOGRAFI PENULIS

Penulis skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif

Jangka Panjang Infusa Daun Insulin (Tithonia Diversifolia

(Hemsley) A. Gray ) pada Tikus Jantan Galur Sprague

Dawley Terinduksi Karbon Tetraklorida” memiliki nama

lengkap Veronica Olivia Gita Puspa Dewi, merupakan anak

pertama dari empat bersaudara yang dilahir di Bandar Lampung

pada tanggal 24 Maret 1995. Penulis merupakan anak kedua dari

pasangan Vilius Yuli Winarno dengan Magdalena Ngadinem.

Pendidikan formal yang telah ditempuh penulis yaitu TK Tunas

Jaya, tingkat Sekolah Dasar di SD Negeri 2 Sidoharjo, tingkat Sekolah Menengah di SMP

Xaverius Metro, tingkat Sekolah Menengah Atas di SMA Stella Duce 2 Yogyakarta, dan saat

ini menyelesaikan studi Strata 1 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta

2013-2017. Penulis memiliki pengalaman kerja sebagai asisten dosen Pratikum Biokimia

2016. Penulis aktif dalam Dewan Perwakilan Mahasiswa Fakultas Farmasi tahun 2015-2016

dan organisasi lainnya. Penulis juga aktif dalam kegiatan kemahasiswaan seperti Paduan Suara

Mahasiswa Farmasi dan Herbal Garden Team.


Documents

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIrepository.usd.ac.id/8509/1/138114047_full.pdf · INSULIN (Tithonia Diversifolia (Hemsley) A. Gray ) PADA TIKUS JANTAN GALUR SPRAGUE DAWLEY