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 1 L. B a l l esteros et a l , D i señ o d e R ea ctor es 2 0 1 3 - 2 . A va n ce 3 P roces od eel abor aci ón del yogur t enC O O LE C H E R A Lei d y B a l lester o s, J en i er C a stro, L i ceth H erná n d ez, F eli p e O rti z, S a n ti a go S ar m i en to. Progr ama d e I ng en iería Q m i ca. U n iversi d a d d el A tlántico. K m 7 V íaPuert o C ol ombi a . RESUMEN E n elsi gui ent e docu ment o se mos t r ar á det al ladament e el pr oce so de pr odu cci ón dely ogurten C OO LE CH E RA, queconstade3et ap asdemezclad oyp r eparac i ón delal ec h eap r ocesar, el proc esode p ast eu ri zación yp ost er i ormen t eel procesode fer mentaci ón , qu esel l evaa caboen u n madurad or , u n  b i o r r e ac t o r t i p o B at ch ,en el cualin t erv i en en los microor gan i smos,comoel La ct ob a cillus B ul ga r i ccus , h ast a o b t en er el p r od uct o d esead o con l as p r op i eda d es organ ol épt i cas q ue caract eri zan el yogu rt. Tamb i én se most r ará cómo se d et erm i n ó l a cinéti ca d e reacci ón , y l u ego d e u n a exh austiva revi si ón bi b l i ográ ca se en con t r ó qu e la reacciónes de o r den , y qu e ésta d epen de de con centraciones de l os mi cr oorg an ismos. C on cep t os cl a ve: B i orrea ct or , con cen t r a ci ón , m i croo r ga n i smos , ci n ét i ca d e r ea cci ón , yo gu rt , p r oces o qu í m i co. 1.INTROD UCCI ÓN E ly ogurtes u n pr oducto l ácteo fer mentado, l eve men t e ácido,de cu l ti vo sem i sóli do qu e es produc i do po r l a ho mo g ene i z a c i ó n y pa st eu r i zación de l a l ech e [ 1 ] . La le c he s e com poneensu mayorpar t ed eagua, yel resto d eotros comp on en t es sóli d os,prot n as,en t r e otros, donde se est i man l os sigui e ntes p orce n t aj es, ensu comp osici ón :  A g u a : 87,5% La ctosa: 4 , 7 % G r asa : 3 , 7 % P roteín a s: 3, 3 % S al es mi n eral es: 0 , 7 % [2] E n consecuencia,s e di cequ e la l ec he esun a solución acu osa de l act osa o i on es de calcio; t ambi én sedi cequ eesu n a su spen sióncoloidal  y aq u e co n t i enep r ot e í n asdis u e l t as,d i spe r s as; as íco mo tambi é n s e pu ededeci rque e s un a e mul s i ón yaqueesu na mez c la homogéneade gr asae n agua[3] . E n l al ech e, las p art í cu l as d e gr asaseen cuen t r an enfor mad epequeñasgot as que f or man u na em u lsióncon el agua; ses abe queun aem ul s i ónesuna me zc l amásomenos h omogéneade dos su st anciasi n mi scibles [4 ] . E n u na emu l si ón se pu eden dist i n gu i r2 f ases:l a f as e di s per sa , que se e ncuent r a en menor cant i dad y se di spe rsa en la f ase de may or can t i d ad, ofasec on t i n u a. E nel cas odel al eche, l a f ase d i spersaeslagrasa d elal ech eyl a f ase con t i n ua esel agu a.Los gl ób u los gr asos, qu e comp on en lagrasa d elal ech e, estánrecu b iertos po r una me mbr ana e l ect r os t át i c a, que d et erm i n an laestabil i d ad d e l a emulsi ón : Si l os gl ób u l os gr asos se dispersan po rt od a la f ase con t i n ua,la emu l si ón esest ab l e, en cambio, si se acu mu l an y son arr ast r ad os a l a su p er ci e, se di ce qu e la em u l si ón es i nest ab l e,y esto se p r esent acu an do lal echeseen cu en traenest ad o dere po so [ 3 ] :

Proceso de producción del yogurt

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Proceso de elaboracin del yogurt en COOLECHERALeidy Ballesteros, Jeniffer Castro, Liceth Hernndez, Felipe Ortiz, Santiago Sarmiento.Programa de Ingeniera Qumica. Universidad del Atlntico. Km 7 Va Puerto Colombia.

L. Ballesteros et al, Diseo de Reactores 2013-2. Avance 3

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RESUMEN

En el siguiente documento se mostrar detalladamente el proceso de produccin del yogurt en COOLECHERA, que consta de 3 etapas de mezclado y preparacin de la leche a procesar, el proceso de pasteurizacin y posteriormente el proceso de fermentacin, que se lleva a cabo en un madurador, un biorreactor tipo Batch, en el cual intervienen los microorganismos, como el Lactobacillus Bulgariccus, hasta obtener el producto deseado con las propiedades organolpticas que caracterizan el yogurt. Tambin se mostrar cmo se determin la cintica de reaccin, y luego de una exhaustiva revisin bibliogrfica se encontr que la reaccin es de orden, y que sta depende de concentraciones de los microorganismos.

Conceptos clave: Biorreactor, concentracin, microorganismos, cintica de reaccin, yogurt, proceso qumico.

1. INTRODUCCINEl yogurt es un producto lcteo fermentado, levemente cido, de cultivo semislido que es producido por la homogeneizacin y pasteurizacin de la leche[1]. La leche se compone en su mayor parte de agua, y el resto de otros componentes slidos, protenas, entre otros, donde se estiman los siguientes porcentajes, en su composicin: Agua: 87,5% Lactosa: 4,7% Grasa: 3,7% Protenas: 3,3% Sales minerales: 0,7%[2]En consecuencia, se dice que la leche es una solucin acuosa de lactosa o iones de calcio; tambin se dice que es una suspensin coloidal ya que contiene protenas disueltas, dispersas; as como tambin se puede decir que es una emulsin ya que es una mezcla homognea de grasa en agua [3]. En la leche, las partculas de grasa se encuentran en forma de pequeas gotas que forman una emulsin con el agua; se sabe que una emulsin es una mezcla ms o menos homognea de dos sustancias inmiscibles[4]. En una emulsin se pueden distinguir 2 fases: la fase dispersa, que se encuentra en menor cantidad y se dispersa en la fase de mayor cantidad, o fase continua. En el caso de la leche, la fase dispersa es la grasa de la leche y la fase continua es el agua. Los glbulos grasos, que componen la grasa de la leche, estn recubiertos por una membrana electrosttica, que determinan la estabilidad de la emulsin: Si los glbulos grasos se dispersan por toda la fase continua, la emulsin es estable, en cambio, si se acumulan y son arrastrados a la superficie, se dice que la emulsin es inestable, y esto se presenta cuando la leche se encuentra en estado de reposo [3]:

Figura 1. Estabilidad de la leche con los glbulos grasos1.1. HomogeneizacinEn la industria lctea, se forza el paso de la leche a gran velocidad a travs de una ranura muy estrecha. La leche llega al homogeneizador por un conducto con una velocidad moderada (entre 4 y 6 m/s). En el homogeneizador se provoca unaumento de la velocidad (entre 100 y 400 m/s) yde la presin (entre 10 y 20 MPa) que provocan la ruptura de los glbulos de grasa en dos etapas, de manera que a la salida del homogeneizador la leche contiene glbulos de grasa de menor tamao.La homogeneizacin se consigue por tres fenmenos: Fuerzas de rozamiento: La fuerza de rozamiento entre la vlvula y la leche hace que los lbulos de grasa se deformen y se rompan Implosin: La leche se ve obligada a pasar por un espacio muy estrecho, lo queprovoca un aumento de la velocidad y un descenso de la presin. Eso hace que algunos componentes de la leche se vaporicen formando pequeas burbujas. Una vez atravesado el espacio ms estrecho las burbujas implotan, lo que provoca la divisin de los glbulos de grasa. Fuerzas de impacto: El golpeo de la leche contra la vlvula provoca la ruptura de los glbulos de grasa[3].El tamao de los glbulos grasos se reduce aproximadamente a 1/5 del inicial (unos 5 m). Tambin se destruyen parcialmente las micelas de casena y los pedazos se adhieren a la superficie de los glbulos grasos[5].

Figura 2. Proceso de homogeneizacin de la leche.

1.3. PasteurizacinEste proceso consiste en el tratamiento trmico en el cual se somete la sustancia, en este caso la leche, a un calentamiento para eliminar esporas y microorganismos patgenos presentes en ella y posterior e instantneamente se somete a un enfriamiento, para eliminar por completo estos agentes patgenos. Este proceso se denomina as en honor de Louis Pasteur, quien realiz los primeros experimentos de dicho proceso [6].

Figura 3. Pasteurizacin de la leche.

1.3. FermentacinEste proceso consiste en y se debe a la actividad de microorganismos presentes en la sustancia a procesar, en el caso de la leche se tiene como ejemplo a los Lactobacillus Bulgariccus y Streptococcus Thermophilus.

Figura 4A. Lactobacillus Bulgariccus

Figura 4B. StreptococcusThermophilus El proceso de fermentacin es un proceso por tandas, en el cual los microorganismos comienzan a adaptarse a las condiciones de sustrato, se ajustan a su nuevo entorno, sintetizando enzimas y se preparan para comenzar a reproducirse [7]. Este tipo de reacciones suelen tardar un perodo considerable de tiempo.

Figura 5. Proceso de fermentacin2. DESCRIPCIN DEL PROCESOEl proceso se basa en la fermentacin lctica de la leche por medio de cultivos bacterianos para la produccin de yogurt. En la planta de COOLECHERA se utilizan tres maduradores que se pueden definir como reactores tipo Batch, para realizar dicho proceso.En la planta de produccin de yogurt en COOLECHERA se emplean 3 biorreactores o maduradores, dos de ellos con volmenes de 5000L cada uno, y uno ms pequeo, de 4000L. Para iniciar, una solucin de leche (del da) mezclada con azcar, la cual es agregada a razn de 12 bultos de 50Kg cada uno por cada 1000L de leche; despus, pasa por un pasteurizador que calienta la mezcla hasta una temperatura de 90C durante 45 minutos para pasar luego a los maduradores. El proceso de fermentacin de la leche en los maduradores toma un tiempo aproximado de 6 horas. Antes de introducir el cultivo de microorganismos, se enfra la mezcla de leche y azcarutilizando como medio de enfriamiento una chaqueta donde circula agua a temperatura ambiente, reduciendo la temperatura de la solucin a una temperatura de 40C, paso seguido, se agrega un sobre de cultivos bacterianos liofilizados, por cada 1000L de leche, luego se somete a agitacin por un perodo de 10 a 15 minutos. Se reactivan los microorganismos y comienzan a fermentar. Luego, se esperan 4 horas para que el cultivo bacteriano se active y las siguientes 2 horas, los mismos se encargan de disminuir el pH. Se toman muestras de acidez estimadas entre 4 y 4,5 para poder cortar el proceso, es decir, enfriar la leche por medio de las chaquetas y los agitadores que tienen integrado un sistema de enfriamiento. Al finalizar el proceso, se lava el reactor durante 20 minutos y luego el reactor comienza a trabajar de nuevo con una nueva mezcla y un nuevo cultivo de bacterias liofilizado.

Figura 6. Diagrama de flujo del proceso

Diagrama 1. Descripcin del proceso

3. CARACTERSTICAS DEL REACTOR

Los tres maduradores estn elaborados en acero inoxidable con mirillas para observar el estado del proceso, poseen forma cilndrica y, la parte superior en forma de domo, que tiene unas tapas que permiten agregar, inocular los cultivos bacterianos manualmente y tomar muestras del producto. Se trabaja con la presin atmosfrica ya que no estn presurizados. Uno de los maduradores tiene 3,5m de alto para un volumen de 4000L y los otros dos de 4m de alto para un volumen de 5000L cada uno. Cada madurador tiene una chaqueta de enfriamiento y un agitador de paletas que adems de homogeneizar el producto, posee un sistema de enfriamiento que ayuda al proceso.Se cuenta con un sistema de tuberas, de las cuales se usan dos tuberas para alimentar los maduradores y pasan por la parte superior del reactor; otra tubera que tambin pasa por la parte de arriba que se encarga de circular el agua de enfriamiento a las chaquetas, y una tubera que pasa por la parte inferior, que sirve para retirar el producto por gravedad y se comunica a una envasadora.

Figura 7. Madurador 4. JUSTIFICACIN DEL DISEO DEL REACTORSe atribuye el uso de un reactor tipo Batch en ste proceso, al tiempo que toma llevar a cabo los cambios de temperatura, la agitacin y el proceso de fermentacin es s mismo, ya que el tiempo de activacin de los cultivos bacterianos es largo, 4 horas aproximadamente, adems de la disminucin del pH que toma 2 horas ms.Otro aspecto importante es que los cultivos bacterianos y algunos aditivos que pudieran ser agregados, se dosifican en sobres que se adicionan manualmente al reactor, ya que estos son slidos y se dificultara su transporte por tubera, a menos que se transportaran en una suspensin lquida, pero esto podra afectar seriamente el proceso. El hecho de agregar los aditivos por medio de unas tapas ubicadas en la parte de arriba de los reactores, sugiere que el proceso est en contacto con la presinatmosfrica, lo que se justica tambin como parte importante del diseo ya que, la reaccin de fermentacin podra liberar gases como CO2que generaran presin adicional en el reactor y debido al largo tiempo del proceso, podran afectar la calidad del producto, llegando incluso daarlo.

Figura 8. Biorreactor tipo Batch. Diseo del madurador.5. CARACTERSTICAS Y CONDICIONES DE REACCIN La fermentacin lctica es una ruta metablica anaerbica que ocurre en el citosol de las clulas, en la cual se oxida parcialmente la glucosa para obtener energa y donde el producto de desecho es el cido lctico.En condiciones de ausencia de oxgeno (anaerobias), la fermentacin responde a la necesidad de la clula de generar la molcula de NAD+ (Nicotinamide adenine dinucleotide (C21H27N7O14P2)), que ha sido consumida en el proceso energtico de la gluclisis. En la gluclisis la clula transforma y oxida la glucosa en un compuesto de tres tomos de carbono, el cido pirvico, obteniendo dos molculas de ATP; sin embargo, en este proceso se emplean dos molculas de NAD+ que actan como receptores de electrones y se reducen a NADH. Para que puedan tener lugar las reacciones de la gluclisis productoras de energa es necesario re-oxidar el NADH; esto se consigue mediante la cesin de dos electrones del NADH al cido pirvico, que se reduce a cido lctico [1].Tenindose como sustrato a la lactosa (C12H22O11)y la enzima lactasa, involucrada en la hidrlisis de la lactosa, aportada por bacterias del tipo Lactobacillus, las cuales son las encargadas de ejecutar la degradacin de carbohidratos. Las reacciones relacionadas a la produccin de cido lctico son: Hidrlisis:

Gluclisis:

Fermentacin lctica:

En una ecuacin general, el cido lctico se forma al reducir cido pirvico [4].

6. EXPRESIN CINTICA DE LA REACCIN

Para las reacciones donde intervienen microorganismos, como la que ocurre en la fermentacin de la leche para la obtencin del yogurt, la expresin cintica de reaccin est expresada bsicamente de la siguiente manera:(1)Esta ecuacin es conocida con la ecuacin de Monod, donde es la velocidad de crecimiento de la clula, expresada en g/dm3s, es la velocidad de crecimiento especfico, medida en (s-1), y es la concentracin de las clulas en el sustrato (g/dm3)[7].La velocidad de crecimiento especfico de la clula (o microorganismo) se puede expresar como:(2)Donde es la velocidad mxima de reaccin especifica de crecimiento, Ks es la constante de Monod (g/dm3) y Cs es la concentracin del sustrato, expresado en g/dm3. Reemplazando (2) en (1)(3)

Para esta reaccin, la constante de Monod es mucho menor que entonces la ecuacin se reduce a:

Dado a que el proceso de fermentacin no es en estado estacionario en todo momento, se tiene que:

Donde representa la velocidad de muerte celular, que es debida a las fuerzas de corte en el mezclado, a los entornos difciles, agotamiento local de nutrimentos y presencia de sustancias txicas [7], y se define matemticamente como:

Velocidad de consumo del sustrato:

En la literatura se pudo encontrar, para el Lactobacillus Bulgariccusun valor estimado para la concentracin celular, as como otros datos cinticos generales para reacciones de fermentacin, como las constantes de muerte natural y de muerte por sustancia txica y de mantenimiento celular (m):

De la ecuacin (7) se tiene el trmino de rendimiento, que se calcula por medio de la siguiente relacin:

Calculando :

Se puede calcular por medio del mtodo de vida media o tiempo de duplicacin:

Aplicando variable separable:

Integrando con los lmites de concentracin celular (), y los lmites de tiempo de (tiempo de duplicacin), se tiene:

Teniendo valores de duplicacin para el Lactobacillus tomado de la literatura, se puede estimar un tiempo de duplicacin de 45 minutos:Desarrollando la integral se tiene:

Reemplazando el valor estimado de :

Como , entonces:

Calculando , con los valores estimados, reemplazando en la ecuacin (6):

Donde es la concentracin de la sustancia txica para los microorganismos, o sea, de cido lctico, producto de la sntesis de la lactosa por medio de los microorganismos. En la literatura se pudo encontrar que una concentracin tolerada y aceptada de cido lctico en el yogurt es de 1,1%, sin embargo, cuando la concentracin de cido lctico alcanza un porcentaje de 1,4% cesa toda actividad metablica [7], es decir, la concentracin de clulas es cero (0).Entonces, la concentracin de la sustancia txica para el microorganismo se puede estimar como 1,4% de cido lctico en el yogurt, es decir (1,4g/100L) o 0,014g/L, reemplazando en la ecuacin (6):

Reemplazando y en la ecuacin cintica, ecuacin (5)

Hay que tener en cuenta que la leche posee mltiples nutrimentos, sin embargo la concentracin de sustrato que se tiene en cuenta es la del nutrimento limitante, en este caso, la lactosa.

El crecimiento microbiano se puede resumir en 4 etapas:1. Retraso (I): el cultivo de microorganismos entra a un proceso de adaptacin en el sustrato en que es inoculado y para adaptarse empiezan a sintetizar enzimas y a prepararse para su reproduccin. Hay poco aumento en la concentracin de microorganismos.2. Crecimiento exponencial (II): Aqu se comienza a notar un aumento considerable, de carcter exponencial de microorganismos y este crecimiento es proporcional a la concentracin celular, dividindose al mximo.3. Fase estacionaria (III): en esta etapa los microorganismos alcanzan un nivel de crecimiento tan grande, que su espacio biolgico se ve muy reducido, por lo que la concentracin de estos microorganismos se mantiene constante.4. Muerte (IV): En esta ltima etapa se nota la carencia de nutrimentos y metabolitos esenciales en el entorno de los microorganismos, ya que han sintetizado todo lo que haba en el sustrato. Con un nivel bajo de los requerimientos de nutrientes esenciales para la vida de los microorganismos, estos comienzan a reducir su poblacin, disminuyendo as su concentracin [7].

Grfico 1. Concentracin celular vs tiempo. Grfica de crecimiento exponencial

Si se conociera con exactitud los datos experimentales de tiempo vs concentracin celular, se podra calcular sin problemas la velocidad de reaccin, ya que esta depende fundamentalmente de la accin de los microorganismos en el sustrato. Sin embargo, la empresa no brind suficiente informacin para calcular la cintica y velocidad de reaccin.Sin embargo, en la literatura se pudo encontrar un dato estimado de concentracin celular en este tipo de procesos, con un valor de:

7. USOS E IMPORTANCIAComo se mencion anteriormente, la importancia de introducir cultivos de microorganismos en un reactor es para favorecer la reaccin, ya que en estos se presentan reacciones qumicas dentro de sus cuerpos, se puede decir que cada uno de los microorganismos es un mini-reactor, donde cada uno comienza su proceso de adaptacin en el sustrato, luego de la adaptacin del microorganismo al sustrato viene su proceso de crecimiento y reproduccin, hasta que ya finaliza su ciclo. En la industria de alimentos es frecuente el uso de estos microorganismos y tiene sus beneficios, en el caso del yogurt, las bacterias cido-lcticas, mencionadas anteriormente, proveen al producto de un sabor agradable, de gusto suave y delicado, promueve la cuajada, mejora la digestin y absorcin y contribuye a promover la salud humana, entre los cuales se pueden destacar los siguientes beneficios: Mantenimiento de la flora intestinal y tratamiento de problemas digestivos Modulacin del sistema inmunolgico Reduccin de cncer de colon Usos en intolerancia a la lactosa Disminucin del colesterol srico Usos en hipertensin [10]

8. CONCLUSIONES

La velocidad de crecimiento celular es de La velocidad de muerte celular es de AYDAME CON OTRAS!!!

9. AGRADECIMIENTOS

Al Ingeniero Jos Domingo Martnez Julio por hacer posible la visita industrial. Al Ingeniero Clemente Jimnez Moreno por guiarnos en el recorrido de la empresa y brindarnos la informacin necesaria. A la profesora Leda Pernett, por hacer posible la realizacin de estos proyectos, en base a los conocimientos transmitidos en la clase de Diseo de reactores, y formndonos en nuestro trayecto como futuros ingenieros.

10. BIBLIOGRAFA

http://turnkey.taiwantrade.com.tw/showpage.asp?subid=074&fdname=FOOD+MANUFACTURING&pagename=Planta+de+produccion+de+yogurtDoc del yogurt pdfhttp://www.gominolasdepetroleo.com/2011/10/que-es-la-leche-homogeneizada.htmlhttp://www.monografias.com/trabajos82/guia-quimica-organica/guia-quimica-organica.shtmlhttp://ingalimentos.wordpress.com/2007/11/17/homogenizacion-de-la-leche/http://www.slideshare.net/omarrn/pasteurizacion-7159548#btnNextFoglerALFA LAVAL, Manual de Industrias Lcteas, 2 Edicin, Iragra S.A. Madrid, Espaa, p 169-174.Miguel Jakymec, Hctor Morn, Gisela Pez, Jos R. Ferrer, Zulay Mrmol, Eduardo Ramones. Cintica de la produccin de acido lctico por fermentacin sumergida con lactosuero como sustrato. REVISTA CIENTIFICA FCV-LUZ, Vol XI, N1, 53-59, Ao 2001.http://fuente.uan.edu.mx/publicaciones/03-07/1.pdf