Upload
avarielle-smith
View
86
Download
0
Embed Size (px)
DESCRIPTION
REAKCI Ó KINETIKA É L Ő SEJTEKBEN. Asz ó di Andr á s. MAKROSZK Ó PIKUS K É MIA. T Ö MEGHAT Á S-KINETIKA. …a reakci ó elegy homog é n …a molekul á k gyakran ü tk ö znek …a h őm é rs é klet á lland ó …a molekul á k “ bels ő ” szabads á gi fokai termodinamikai egyens ú lyban vannak. - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
REAKCIÓKINETIKA ÉLŐ SEJTEKBEN
Aszódi András
MAKROSZKÓPIKUS KÉMIA
TÖMEGHATÁS-KINETIKA
€
A + B k ⏐ → ⏐ C
€
d[C]dt
= k[A][B]
1. …a reakcióelegy homogén2. …a molekulák gyakran ütköznek3. …a hőmérséklet állandó4. …a molekulák “belső”
szabadsági fokai termodinamikai egyensúlyban vannak
Érvényes közelítés, ha…
MIKROSZKÓPIKUS KÉMIA1. Inhomogén elegyek2. Kevés molekula
http://www.photon.t.u-tokyo.ac.jp/~maruyama/hetero/picture/e2.avi
SZTOCHASZTIKUS KINETIKA
€
A + B k ⏐ → ⏐ C
€
Pr(a−1,b−1,c +1 | t + Δt) = Pr(a,b,c | t) ⋅kμ ⋅a ⋅b ⋅Δt
€
Pr(a,b,c | t + Δt) = Pr(a,b,c | t) ⋅(1− kμ ⋅a ⋅b ⋅Δt)
Annak a valószínűsége, hogy a t+t időintervallumban egy elemi reakció történik:-
Annak a valószínűsége, hogy semmi se történik:-
k a mikroszkópos sebességi állandó!
MAKROSZKÓPOS ÉS MIKROSZKÓPOS SEBESSÉGI ÁLLANDÓK
€
d[C]dt
= k[A][B]
€
Dim(k) = 1[conc][time]
= [volume][mole][time]
€
Pr(a −1,b −1,c +1 | t + Δt) = Pr(a,b,c | t) ⋅kμ ⋅a ⋅b ⋅Δt
€
Dim(kμ ) = 1[time]
€
k = kμ ⋅NA ⋅V
Mi az összefüggés elsőrendű reakciók esetén?
SZTOCHASZTIKUS SZIMULÁCIÓ
€
A + E k1 ⏐ → ⏐ EA
B + E k2 ⏐ → ⏐ EB
A + EB k3 ⏐ → ⏐ ES
B + EA k4 ⏐ → ⏐ ES
ES k5 ⏐ → ⏐ E +C
1. Melyik reakció történik meg legközelebb?2. Mikor fog megtörténni?
A rendszer állapota:-{nA,nB,nE,nEA,nEB,nES,nC}
Egységnyi idő alatti átalakulási valószínűségek:-1=k1·nA ·nE
2=k2·nB ·nE
3=k3·nA ·nEB
4=k4·nB ·nEA
5=k5·nES
A GILLESPIE-ALGORITMUSMelyik reakció következik be?
€
Pr(reaction i) = μ i
μ jj
∑= μ i
M
Mikor következik be?
€
Pr(state | t + Δt) = Pr(state | t) ⋅(1− Δt ⋅M)
Annak a valószínűsége, hogy mostantól fogva t idő alatt semmi sem történik:-
t exponenciális eloszlású, M paraméterrel
1. Rulett-algoritmussal kiválasztjuk i-t
2. Hajtsuk végre az i -edik reakciót3. Lépjünk t-nyi időt, ismételjük 1-től
Gillespie, D.T. J. Phys.Chem. 81: 2340-2361 (1977)
„ZSÚFOLT“ RENDSZEREK KINETIKÁJAZSÚFOLT RENDSZEREK KINETIKÁJA
EGY EUKARIÓTA SEJT ALKOTÓRÉSZEIEGY EUKARIÓTA SEJT ALKOTÓRÉSZEI
Dictyostelium discoideum sejt belseje (krioelektron-tomográfiás rekonstrukció)Medalia et al. (2002), Science 298, 1209–1213.
AZ ÉLŐ SEJTEK „ZSÚFOLTAK“
Aktinfilament Riboszómák
Membrán
A ZSÚFOLTSÁG MÉRTÉKE
In vitro: 1..10 mg/ml In vivo: 50..400 mg/ml
•30 vol%-os fehérjeoldatban az össztérfogat 1%-a áll csak egy újabb molekula rendelkezésére•E.coli sejtben egy átlagos fehérje diffúziós együtthatója az in vitro értéknek csak mintegy tizede
NÉHÁNY KÍSÉRLETI EREDMÉNY Számos fehérje, amely híg oldatban spontán
fölveszi natív szerkezetét, zsúfolt környezetben chaperone-okat igényel J. Martin (2002), Biochemistry 41: 5050–5055.
Peptidbontó enzimek zsúfolt környezetben peptidszintézist katalizálnak B. Somalinga, R. Roy (2002), J. Biol. Chem. 277:
43253– 43261. Tömény dextránoldat hozzáadására megnő a
lizozim enzim denaturációs hőmérséklete K. Sasahara, P. McPhie, A.P. Minton (2003), J. Mol.
Biol. 326: 1227– 1237.
EGYENSÚLYI REAKCIÓK FENOMENOLOGIKUS TERMODINAMIKAI LEÍRÁSA
nnmm PpPpPpRrRrRr +++⇔+++ KK 22112211
€
K id =Pi[ ]
p i
i=1
n
∏
Ri[ ]ri
i=1
m
∏
€
Kapp =γPi Pi[ ]( )
p i
i=1
n
∏
γ R iRi[ ]( )
ri
i=1
m
∏=K id ⋅
γPip i
i=1
n
∏
γR i
ri
i=1
m
∏=K id ⋅Γ(T, p,{c})
Ideális egyensúlyi állandó
Korrekciós faktor
AZ AKTIVITÁSI EGYÜTTHATÓ ÉRTELMEZÉSE
})0{}{,,(}){,,(
}){,,(ln→
⎟⎟⎠⎞
⎜⎜⎝⎛∂∂
−⎟⎟⎠⎞
⎜⎜⎝⎛∂∂
=cpTicpTi
i cG
cGcpTRT γ
Az i-edik oldott anyag kölcsönhatása az
oldószerrel
Az i-edik oldott anyag kölcsönhatása a többi
oldott anyaggal
AZ AKTIVITÁSI EGYÜTTHATÓ KÖZELÍTŐ SZÁMÍTÁSA
∑ ∑∑ ++=j j k
kjijkjiji ccBcB Kγln
K++= 232ln cBcBγ
drrkTrUNB A
2
02
)(exp14 ∫∞
⎥⎦⎤
⎢⎣⎡ ⎟⎠
⎞⎜⎝⎛−−= p
i
j
k
Több oldott species esetén:-
Egy oldott species esetén:-
Például B2 értéke centroszimmetrikus U(r) potenciál esetén
W.G. McMillan Jr., J.E. Mayer (1945), J. Chem. Phys. 13 276–305.
A KIZÁRT TÉRFOGAT HATÁSA
MT
MC
MC
MC
MC
Vtotal
total
C
VV∑=φ
C
C
T
T
VM
VM
==ρ
“Scaled Particle Theory”: A T makromolekula aktivitási együtthatója több nagyságrenddel is megnôhet a C (“crowder”) makromolekula hatására!
A ZSÚFOLTSÁG KÖVETKEZMÉNYEI
1. Termodinamikai következmények Aktivitási együtthatók
megnövekednek Kémiai egyensúlyok eltolódnak a
kompaktabb termékek irányába (pl. oligomerizációs folyamatok)
2. Kinetikai következmények Elsőrendű reakciók sebessége
megnő Másodrendű (diffúziólimitált)
reakciók sebessége csökken
NEMIDEÁLIS MM-KINETIKA
S E ES E P+ ⇔ → +−k
k k
1
1 2
]S[]S[]P[ max
+=
Kv
dtd
mKkkk
=+−
1
21
mSE
ESm
m
ESES
KK
Kv
dtd
ESSEEESS
γγγ
γγγ
=
+=
===
~]S[~]S[]P[
][]~[],[]~[],[]~[
ax
Fenomenologikus leírás, nem megyünk vele sokra...
“LATTICE GAS AUTOMATON”
P
C
P
C
ES
S
S
E
C
C
ESE+Svagy
ESE+P
E+SES
Inert oldott anyag(“crowder”)
Megszámoljuk, hányszor megy
végbe ez a reakció
S
Diffúzió
S E ES E P+ ⇔ → +−k
k k
1
1 2
)()()()()()(
)()()()(
22
11
11
testktvtestktvtstetktv
⋅=⋅=
⋅⋅=
−−
∫∫ ′′⋅′⋅′=′′=tt
tdtstetktdtvt0
10
1 )()()()(:)(γ
ELEMI REAKCIÓK SEBESSÉGE
)(
)()()(
)()()(
)()(
2
211
211
11
tvdtdp
tvtvtvdtdes
tvtvtvdtde
tvtvdtds
=
−−+=
++−=
+−=
−
−
−
dtdp
testk
dtds
dtd
testk
dtd
tstetk
)(1)(
)(1)(
)()(1)(
2
1
1
=
⎟⎠⎞⎜⎝
⎛ +=
⋅=
−γ
γ“Reakciókoordináta”
A sebességi “állandók”változhatnak!
A SZIMULÁCIÓ EREDMÉNYE (1)
Schnell, S. & Turner, T.E. (2004): Progr. Biophys. Mol. Biol. 85: 235-260
Az elsőrendű sebességi állandók tényleg állandóak
A másodrendű sebességi “állandó”
idő- és zsúfoltságfüggő!
A SZIMULÁCIÓ EREDMÉNYE (2)
Berry, H. (2002): Biophys. J. 83: 1891-1901
Az ES komplex szimulált koncentrációváltozása jelentősen eltér a klasszikus eredménytől, ha tekintetbe vesszük a zsúfoltságot és a térbeli inhomogenitást.
Klasszikus MM
Sztoch. szimul.
Nagyon zsúfolt Kevésbé zsúfolt
TANULSÁGOK
1. A klasszikus tömeghatás-kinetika nem érvényes:- Inhomogén rendszerekben Kicsiny rendszerekben
2. In vivo kémiai reakciók leírásához szükséges:- Sztochasztikus kinetika Térbeli eloszlás figyelembevétele Diffúzió modellezése