BAB IPENDAHULUAN
A.Latar belakangDalam beberapa tahun terakhir kemajuan teknologi
di bidang kedokteran molekuler sangatlah berkembang pesat. Saat ini
bahkan dapat dilakukan pemeriksaan untuk mengetahui ada tidaknya
hubungan keluarga antara dua individu. Pemeriksaan tersebut
sangatlah berguna dalam situasi seseorang membutuhkan kepastian,
ataubuktiilmiahtentangketurunannya,apakahbenarmilikmerekasendiriatauberasaldarioranglain.Dalamkebanyakankasus,halinimudahditentukandengan
proses persalinan. Wanita yang melahirkan seorang anak adalah
jelasbahwa dia ibudari anak tersebut secara genetik dan hukum.Tes
paternitas dapat membantu pengadilan untuk menentukan seorang
terdakwa dalam kasus perkosaan. DNA fingerprinting pada 2 orang
yang mempunyai hubungan pertalian keluarga akan mirip. Tes
paternitas dapat dilakukan untuk beberapa alasan, antara lain untuk
menentukan siapakah ayah dari seorang bayi yang dikandung oleh
seorang wanita. Di dalamkasus perkosaan, tes paternitas ini dapat
diajukan oleh sang wanita (korban), sang lelaki (tertuduh) atau
penyidik untuk membuktikan bahwa bayi yang dikandung adalah
memangbenaranakdarisangpemerkosa,apalagi apabila terdapat dugaan
multiple sexual partners. Sebuah tes paternitas dengan DNA finger
printing juga dapatmembantu pengadilan untuk menentukan siapa ayah
dari seorang anak sehingga tahu kepada siapa bantuan pemeliharaan
anak harus diwajibkan.A. Permasalahan Permsalahan yang kami angkat
dalam refrat ini adalah:1. Apa yang dimaksud dengan paternitas?2.
Bagaimana paternitas dibutuhkan dalam kehidupan?3. Apakah aspek
medikolegal dari paternitas?4. Apa sajakah macam-macam test yang
dapat dilakukan pada paternitas?5. Bagaimanakah cara mengambil
kesimpulan tentang ada tidaknya pertalian darah?
B. Maksud dan Tujuan 1. MaksudRefrat ini disusun untuk memenuhi
tugas dan melengkap syarat dalam menempuh Program Pendidikan
Profesi Dokter di bagian Ilmu Kedokteran forensic dan Medikolegal
Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro RSUP Dr. Kariadi
Semarang.
2. TujuanTujuan penyusunan refrat ini adalah agar tenaga medis
memahami tentang paternitas. Selain itu refrat ini juga dapat
bermanfaat bagi mahasiswa kedokteran dan calon dokter untuk
mengetahui mengenai paternitas.
BAB IITINJAUAN PUSTAKA
A. Definisi PaternitasPaternitas adalah salah satu sarana untuk
menetapkan seorang laki-laki yang merupakan ayah biologis.1
Paternitas adalah suatu prosedur hukum yang sah untuk keayahan.2
Kesangsian dari keayahan mulai muncul pada segi hukum setelah
lahirnya sang anak. Untuk menentukan peternitas itu sendiri sulit
karena banyak hal yang harus dibuktikan. Dan sampai sekarang untuk
menyelesaikan masalah paternitas ini dilihat mulai dari segi
kemiripan atau dari segi yang tidak terdapat kemiripan antara anak
dan yang diduga sebagai ayah. Dari segi kemiripan contohnya
karakteristik warna pelangi mata, rambut, cara bersikap ataupun
berbicara yang khas, tinggi badan.3
Gambar 2.1. Hubungan ayah dan anakSumber: 5 Stellar Fathers Day
Adventures, www.redtri.com
B. Peran Paternitas Dalam KehidupanSemakin lama semakin disadari
bahwa setiap anak mempunyai hak untuk mendapatkan informasi
mengenai asal usul mereka. Pengetahuan mengenai siapa ayah dan ibu
kandung dari seorang anak, mempunyai banyak pengaruh dari berbagai
pihak yang terkait. Pertama, informasi mengenai siapa orang tua
biologis dari seorang anak. Kedua, dari informasi diatas dapat
ditentukan hak dari anak tersebut seperti hak atas pengasuhan, hak
untuk mendapatkan santunan biaya hidup, hak waris dari orangtuanya,
hak untuk wali nikah (agama islam). Ketiga, dari hal diatas dapat
menunjukan kewajiban dari orangtuanya, seperti kewajiban memberikan
asuhan, warisan, member nafkah serta hak untuk membawa anak
tersebut ke Negara tempat orangtuanya berasal.Kasus ragu ayah
(disputed paternity), yaitu kasus yang mencari pembuktian siapa
ayah kandung dari seorang anak. Contohnya kasus imigrasi, kasus
klaim keayahan oleh seorang wanita, kasus perselingkuhan dan kasus
incest. C. Aspek Medikolegal Paternitas5Di Indonesia sebelum
lahirnya Undang-Undang Nomor 1 Tahun 1974 tentang ketentuan hukum
yang berlakupun bervariasi, setidaknya ada tiga hukum yang berlaku,
yanitu Hukum Islam, Hukum Perdata yang memuat dalam KUH Perdata
atau BW (Burgelijk Wetbook) dan hukum adat sebagai hukum yang tidak
tertulis. Setelah lahir Undang-Undang Nomor 1 tahun 1974 tentang
perkawinan terjadi univikasi hukum dalam segala hal yang
berhubungan dengan perkawainan.Perkawinan terdapat beberapa
ketentuan hukum tentang asal usul anak, hal ini dapat dimngerti,
karena pluralitas bangsa, terutama dari segi agama dan adat
kebiasaan, maka Undang-Undang Nomor 1 tahun 1974 mengatur tentang
asal usul anak, dalam pasal 42, 43, dan 44, selengkapnya berbunyi
sebagai berikut: Pasal 42: anak sah adalah anak yang dilahirkan
dalam atau akibat perkawinan yang sah. Pasal 43: anak yang
dilahirkan diluar perkawinan hanya mempunyai hubungan perdata
dengan ibunya dan keluarga ibunya (1). Kedudukan anak tersebut
dalam ayat (1) diatas selanjutnya akan di atur dalam Peraturan
Pemerintah (2). Pasal 44: (1) Seorang suami dapat menyangkal sahnya
anak yang dilahirkan oleh isterinya bilamana ia dapat membuktikan
bahwa isterinya telah berzina dan anak itu akibat dari perzinaan
tersebut. (2) Pengadilan memberikan keputusakn tentang sah tidaknya
anak atas Permintaan pihak yang bersangkutan.
Dengan berlakunya Undang-Undang Nomor 7 tahun 1989 tentang
Peradilan Agama yang telah diubah dan ditambah dengan Undang-Undang
Nomor 3 tahun 2006, maka hukum yang berlaku untuk menyelesaikan
sengketa/ perkara asal-usul anak ini adalah Hukum Perdata Islam dan
kekuasaan untuk mengadili (absolute kompetensi) perkara gugatan
asal-usul anak bagi masyarakat yang beragama Islam asalah wewenang
Pengadilan Agama. Putusan pengadilan Agama akan menjadi dasar bagi
Kantor Catatan Sipil untuk menerbitkan Akta Kelahiran alat bukti
(bewijsmiddel) bermacam-macam bentuk dan jenisnya, yang mampu
memberikan keterangan dan penjelasan tentang masalah yang
diperkarakan di pengadilan. Alat bukti mana diajukan para pihak
untuk membenarkan dalil gugat atau dalil bantahan. Mengenai alat
bukti yang diakui dalam Hukum Acara Perdata diatur dalam Pasal 1866
KUH Perdata dan Pasal 164. Yang terdiri dari:1. Bukti tulisan /
surat2. Bukti saksi3. Persangkaan4. Pengakuan dan5. SumpahSurat
ditempatkan dalam urutan pertama. Hal ini sesuai dengan kenyataan
bahwa surat atau akta dalam perkara perdata memegang peranan yang
sangat penting. Semua kegiatan yang menyangkut bidang perdata
sengaja dicatat atau dituliskan dalam surat atau akta. Setiap
perjanjian jual beli, hutang, sewa menyewa, hibah, asuransi,
perkawinan, kelahiran kematian dan lain-lain, sengaja dibuat dalam
bentuk tertulis dengan maskud sebagai alat bukti atas peristiwa
hukum yang terjadi. Apabila suatu ketika terjadi sengketa atas
peristiwa itu dapat dibuktikan dengan surat atau akta tersebut alat
bukti saksi ditempatkan dalam urutan kedua karena apabila bukti
surat tidak atau tidak cukup kuat maka dibutuhkan keterangan
saksi-saksi yang melihat, mendengar dan mengalami langsung
peristiwa itu.
D. Macam-macam Tes pada Paternitas6Dasar PemeriksaanPemeriksaan
guna menetukan ada tidaknya pertalian darah didasarkna pada hukum
genetika dari Mendel, bahwa msing-masing dari orang tua hanya akan
menyumbang satu saja dari pasangan gen yang dimilikinya kepada
anaknya. Tidak mungkin seorang anak mewarisi sepasang gen yang
dimiliki salah satu dari orang tuanya dan juga tidak mungkin
seorang anak tidak mendapatkan gen dari slah satu orang
tuanya.Mendel membuat suatu kesimpulan yang disebut Hukum I Mendek
dan Hukum II Mendel. Kedua hukum Mendel tersebut merupakan prinsip
dasar dari genetika. Berikut ini adalah penjelasan dari hukum
Mendel tersebut: Hukum I Mendel (Hukum segregasi atau hukum
pemisahan alel-alel dari sautu gen yang berpasangan). Pada
pembentukan sel kelamin (gamet), pasangan-pasangan alel memisah
secara bebas. Hukum ini berlaku untuk persilangan satu sifat beda
(monohybrid)
Gambar 2.2. Hukum Mendel 1Sumber: www.zonabiokita.comHukum II
mendel ( hukum pengelompokan gen secara bebas atau asortasi). Pada
pembentukan sel kelamin (gamet), alel mengadakan kombinasi secara
bebas sehingga sifat yang muncul dalam keturunannya beraneka ragam.
Hukum ini berlaku untuk persilangan dengan dua sifat beda (
dihibrid) atau lebih polihibrid).
Gambar 2.3 Penggambaran Hukum MendelSumber:
https://dittakris.files.wordpress.com/2011/06/image_thumb17.pngBerdasarkan
hukum Mendel tersebut maka pemeriksaan guna menentukan ada tidaknya
pertalian darah antara seseorang dengan orang lain melalui
pemeriksaan genetic marker dari antigen eritrosit menggunakan
prinsip-prinsip sebagai berikut :1. seorang anak tidak mungkin
mempunyai genetik marker yang tidak dipunyai oleh kedua orang
tuanya2. seorang anak pasti mewarisi salah satu pasangan dari
genetik marker dari masing-masing orang tuanya.3. Seorang anak
tidak mungkin mempunyai sepasang genetik marker yang identik (
misalnya aa), kecuali masing-masing dari kedua orang tuanya
memiliki genetic marker yang sama ( misalnya a)4. Seorang anak
pasti akan memiliki genetic marker a atau b apabila salah satu dari
orang tuanya memiliki genetik marker yang identik (aa) atau
(bb)
Ada banyak tes yang dapat digunakan untuk menentukan paternitas,
antara lain :1. Tes dengan Marker Genetik dari Antigen
EritrositTabel 2.1 Contoh tes marker Genetik dari Antigen
Eritrosit
Sumber: Medical Genetics Center, University of Texas Health
Sciences Center at Houston, HoustonPada kumpulan tes ini sampel
yang digunakan adalah darah :a. Sistem ABOGolongan darah adalah
ciri khusus darah dari suatu individu karena adanya perbedaam jenis
karbohidrat dan protein pada permukaan membrane sel darah merah.
Golongan darah ABO ditemukan oleh Karl Landstein pada tahun 1900.
Locus system ABO terletak pada Chromosom 9, yang berisi 7 axon yang
merentang lebih dari 18 kb genom DNA. Dua jenin penggolongan darah
yang paling penting adalah penggolongan ABO dan Rhesus ( factor
Rh). Di dunia ini sebenarnya dikenal sekitar 46 jenis antigen
selain antigen ABO dan Rh, hanya saja lebih jarang dijumpai.
Transfusi darah dari golongan yang tidak kompatibel dapat
menyebabkan reaksi transfusi imunologis yang berakibat anemia
hemolysis, gagal ginjal, syok, dan kematian.Golongan darah ABO
ditentukan berdasarkan jenis antigen (aglutinogen) dan antibody
(aglutinin) yang terkandung dalam darahnya, sebagai berikut :
Individu dengan golongan darah A memiliki sel darah merah dengan
antigen A di permukaan membran selnya dan menghasilkan antibody
terhadap antigen B dalam serum darahnya. Individu dengan golongan
darah B memiliki antigen B pada pernukaan sel darah merahnya dan
menghasilkan antibody terhadap antigen A dalam serum darahnya.
Individu dengan golongan darah AB memiliki sel darah merah dengan
antigen A dan B serta tidak menghasilkan antibody terhadap antigen
A maupun B. Individu dengan golongan darah O memiliki sel darah
tanpa antigen, tapi memproduksi antibody terhadap antigen A dan
Bjadi golongan darah O, meskipun tidak mengandung aglutinogen,
tetapi mengandung agglutinin anti-A dan anti-B; golongan darah A
mengandung aglutinogen tipe A dan agglutinin anti-B; dan golongan
darah B mengandung aglutinogen tipe B dan agglutinin anti-A,
golongan darah AB mengandung kedua aglutinogen A dan B tetapi tidak
mengandung aglutinin sama sekali.
Golongan darah dengan genotipnya dan unsur pokok aglutinogen
serta aglutininnya.
Tabel 2.2. Golongan darah dengan Genotipnya dan Unsur
PokokGenotipGolongan darahAglutinogenAglutinin
OOO-Anti-A dan Anti-B
OA atau AAAAAnti-B
OB atau BBBAnti-A
ABABA dan B-
Sumber: Annisugiyarti, 2012 penentuan golongan darah, Jakarta
erlangga 2012Tes paternitas dengan metode golongan darah ABOBahan
yang digunakan : sampel darah ibu sampel darah anak / yang diduga
anak sampel darah ayah/ lelaki yang diduga sebagai ayah reagen anti
A dan reagen anti BCara / Metode :A. cek golongan darah ibu, anak,
dan ayahdengan cara meneteskan reagen anti A dan anti B dimana
hasilnya bila :A: ditetesi anti A mengalami aglutinasi, ditetesi
anti B tidak mengalami aglutinasiB: ditetesi anti A tidak mengalami
aglutinasi, ditetesi anti B mengalami aglutinasi AB : ditetesi anti
A tidak mengalami aglutinasi, ditetesi anti B tidak mengalami
aglutinasiO: ditetesi anti A mengalami aglutinasi, ditetesi anti B
mengalami aglutinasiB setelah diketahui golongan darah
masing-masing maka dari interprestasi yang didapatkan kemudian
dicocokan apakah mereka bisa dimungkinkan mempunyai pertlian darah
atau tidak.
Interpretasi :Antigen A dan B diwariskan sebagai alelomorf
Mendel, A dan B adalah dominan. Misalnya, seseorang yang
bergolongan darah B mendapatkan turunan satu antigen B dari setiap
ayah dan ibu atau satu antigen dari salah satu orang tua dan satu O
dari orang tua lain; jadi, seorang individu yang berfenotip B dapat
mempunyai genotip BB ( homozigot) atau BO (heterozigot). Kalau
golongan darah orang tua diketahui, kemungkinan genotip pada
anak-anak mereka dapat ditetapkan. Kalau kedua orangtuanya
bergolongan B maka mereka dapat mempunyai anak bergenotip BB (
antigen B dari kedua orang tua), Bo ( antigen B dari salah tua
orangtua, O dari orang tua lain yang heterozigot).Tabel 2.3 Antigen
Ayah, Ibu dan Anak motherchildMan as father
Impossiblepossible
OOOOABOABO,BO,AAB-A,ABB,ABO,A,BMother excluded
AAAAABOAB--A,OABO,AA,B,AB,OB,ABA,B,OB,AB
BBBBABOABO,B--ABB,OA,ABA,B,AB,OA,B,OA,AB
ABABABABABOAB--------A,B,ABA,B,AB,OMother excludedA,B,AB
Sumber: Panczak Ales MENDELIAN GENETICS editan terakhir maret
2007Kalau golongan darah seorang ibu dan anaknya diketahui,
penggolongan darah dapat untuk membuktikan bahwa seorang laki-laki
adalah ayahnya, namun tidak dapat membuktikan bahwa ia adalah
ayahnya.Manfaat predikitif semakin besar kalau penggolongan darah
kelompok orang yang bersangkutan ini meliputi pula identifikasi
antigen lain selain aglutinogen ABO. Dengan menggunakan sidik DNA,
angka penyingkiran paternal meningkat hamper mendekati 100% O + O
tak mungkin anaknya A,B atau AB O + A tak mungkin anaknya B atau AB
O + B tak mungkin anaknya A atau AB A + A tak mungkin anaknya B
atau AB A + B semua kemungkinan dapat terjadi B + B tak mungkin
anaknya A atau AB O + AB tak mungkin anaknya O atau AB A + AB tak
mungkin anaknya O B + AB tak mungkin anaknya O AB + AB tak mungkin
anaknya O
Untuk kepentingan pemeriksaan diperlukan darah secukupnya. Tidak
boleh dilakukan pemeriksaan pada orang yang baru saja menerima
transfusi darah. Sebaiknya pada bayi pemeriksaan ditunda sampai
umur 1 tahun, sebab sebelum umur tersebut belum terbentuk
agglutinin ( Anti A dan anti B) yang cukup. pada bayi tersebut
darah diambil dari tumit.
b. Sistem MNSystem MN ditemukan oleh Landsteiner dan Levine pada
tahun 1927. Pengelompokan imi didasar pada dua molekul glikoprotein
spsifik yang terletak pada permukaan sel darah merah.
Group system MN terdapat pada locus autosomal yang terdapat pada
chromosome 4 dan 23 dengan dua alel yang diberinama LM dan LN.
orang orang dengan golongan darah M mempunyai satu dari kedua tipe
molekul ini dan orang dengan golongan darah N mempunyai tipe yang
lainnya. Golongan MN dikarakterisasi oleh adanya kedua molekul pada
sel darah merah. Sebuah lokus gen tunggal, dimana dua variasi alel
bisa berada, menetukan golongan golongan darah ini. Individu M
adalah homozigot untuk satu alel; individu N adalah homozigot untuk
alel yang lainnya. Kondisi heterozigot terdapat pada golongan MN.
Perlu diperhatikan bahwa fenotip MN bukanlah intermediet antara
fenotip M dan N, tetapi kedua fenotip tersebut secara sendiri-
sendiri terekspresikan oleh adanya kedua tipe molekul ini pada sel
darah merah.Tabel 2.4. Genotip dan
AglutinogenGenotypeAgglutinogenBlood group/ phenotype
MMMM
NNNN
MNM + NMN
Sumber: www.wikipedi.com MN Gene. Mark E. BrecherBahan : Sampel
darah ibu sampel darah anak / yang diduga anak sampel darah ayah /
lelaki yang diduga sebagai ayahCara :- ambil sel jaringan yang
terlarut pada cairan amnion ( amniosintesis ) dengan cara mengambil
sedikit cairan amnion dari bayi menggunakan jarum yang dimasukan
kedalam perut ibu Lakukan analisis PCR (polymerase chain reaction)
untuk mendeterminasi antigen yang terdapat pada permukaan eritrosit
bayi Lakukan analisa serupa pada sampel darah ibu dan ayah untuk
mengetahui golongan darah mereka menurut system MN
Interpretasi: (interpretasi Grup ABO dan MN)Tabel 2.5.
Interpretasi Grup ABO dan MNIbuAnakLelaki yang mungkin adalah
ayahnyaLelaki yang tidak mungkin ayahnya
O,MO,MNA,B,O,N,MNAB,M
O,MNB,MNB,AB,M,N,MNA,O
A,NO,MNA,B,O,M,MNAB,N
A,MNA,NA,B,O,AB,N,MNM
A,NAB,MNB,AB,M,MNA,O,N
B,MNO,NA,B,O,N,MNAB,M
B,MO,MA,B,O,M,MNAB,N
AB,NA,NA,B,O,AB,N,MNM
AB,MNAB,MA,B,AB,M,MNO,N
Sumber: Panczak Ales. MENDELIAN GENETICS halaman 20
MM + MM tak mungkin anaknya MN atau NN MM + MN tak mungkin
anaknya NN MM + NN tak mungkin anaknya MM atau NN NN + NN tak
mungkin anaknya MN atau MM MN + MN semua kemungkinan dapat
terjadi
c. Sistem Rhesus14Bahan yang digunakanMelakukan uji pada wanita
hamil yang mempunyai Rhesus negative. Paling tidak pada kehamilan
kedua atau pada kehamilan berikutnya. Untuk mengambil apakah
wanita-wanita tadi terbentuk antibody rhesus.Maka pengobatan awak
dengan metode yang baik adalah transfuse pengambilan darah yang
basanya berhasil. Penelitian efisiensi yang baik telah dilakukan
yaitu engenai cara untuk mencegah sensitisasi wanita yang mempunyai
rhesus negative secara praktis pada seluruh kasus. Penyuntikan
sel-sel rhesus positif ke tubuh orang dengan rhesus negative akan
merangsang pembentukan antibody dlam proporsi yang
tinggi.Cara/Metode15Sistem rhesus didapat untuk memperoleh
heteroaglutinin. Heteroaglutinin yang diperoleh kemudian dicoba
pada eritrosit darah manusia. Eritrosit tersebut tentu saja
diaglutinasikan oleh heteroaglutinin tadi. Eritrosit tersebut
mengandung factor M dan N maka akan membentuk agglutinin terhadap
factor M dan N dengan cara absorbs dapat dihilangkan untuk
mendapatkan serum yang murni pada hasil percobaan tersebut 86%
memberikan aglutinasi positif dan 14% memberikan aglutinasi
negative. Selanjutnya penyuntikan sel-sel wanita yang belum pernah
hamil pada keadaan apapun perlu dihindari karena akibatnya telah
diketahui bahwa akan mengalami kematian anak dan
selanjutnya.InterpretasiSistem rhesus terdiri dari sejumlah antigen
yang berbeda-beda tetapi untuk keperluan praktis maka salah satu
disebut rhesus D jauh lebih penting dibandingkan secara
bersama-sama. Hal ini karena rhesus D paling kuat dalam merangsang
pembentukan antibody. Dengan demikian dalam penggolongan darah
donor atau dalam uji rutin wanita hamil merupakan praktek yang umum
untuk menggunakan anti D saja. Untuk mengklasifikasikan individu
sebagai rhesus positif atau rhesus negative wanita bergolongan
darah OO rhesus (-) yang menikah dengan seorang pria bergolongan
darah AO rhesus (+) akan mengalami sensititasi oleh anak pertamanya
yang kebetulan bergolongan darah OO. Penelitian ini dimulai pada
tahun 1961 dengan mengadakan tiran golongan darah ABO dengan
menyuntikkan darah kompatibel ABO rhesus (-) pada para sukarelawan
pria rhesus (-) dan kemudian mencegah terjadiya imunisasi dengan
memberikan infuse plasma yang mengandung antibody anti D bertiter
tinggi. Penyuntikan globulin yang mengandung anti D yang poten
dalam 48 jam kelahiran sangat bersifat protektif.Keakuratannya Pada
hasil percobaan tersebut didapatkan 86% memberikan aglutinasi (+)
dan 14% memberikan agllutinasi (-). Golongan (=) disebut rhesus (+)
(Rh+) sedangkan yang (-) disebut Rhesus (-) (Rh-).
Gambar 2.4. Hubungan Rhesus terhadap antigen janin
Sumber:http://biologigonz.blogspot.com/2010/04/golongan-darah.html
Gambar 2.5. Hubungan Rhesus terhadap antibodi tubuhSumber:
http://biologigonz.blogspot.com/2010/04/golongan-darah.htmld.
Sistem Kell16Bahan yang digunakan: Antigen system rhesus pada
janinCaranyaDiammbil 32 plasma pada ibu yang diambil pada bulan ke
2 dan ke 3 kehamilan dan kemudian dengan metode matriks laser
desorption/ionisasi GF Flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS)
berbasis saber dan hasil yang dikonfirmasi oleh serological test
darah/polymerase chain reaction (PCR) pada amaniocyte yang berasal
dari DNA janin.Interpretasi Golongan darah kell merupakan system
antigenic dalam eritrosit manusia. Kell antigen berada pada 93 Kda
pada selaput glikoprotein yang berada pada sitoskeleton berdasarkan
urutan asam amino dari salah satu peptide dan dengan menggunakan
system PCR oligonucleid pada sumsum tulang manusia pada cDNA. Pada
A klones yang berisi 1 c DNA yang berbingkai terbuka dan berbentuk
83 KDA protein. Semua Kell asam amino sekuensial yang ada dalam
urutan berada ke 30 pada asam amino peptide. Reaksi pada imunoblot
asli dengan Kell protein. Kell di urutan cDNA memuat 732 asam amino
protein.Pada analisis air juga menunjukan satu selaput yang
menyatakan bahwa Kell protein adalah berorientasi dengan 47 dari N
terminal amino acid dalam sel cytoplasma, 665 asam amino segmen
yang berisi N glycosylation situs yang terletak ekstraseluler. Kell
structural dan homolog seng metaglycoproteins dengan netral endo
peptidase.Golongan darah KEll yang penting dalam system transfuse
obat ini adalah system kompleks yang mengandung 24 antigen berada
pada 9300 kDa glycoprotein dan melekat pada sitoskeleton. Kell
glycol mengandung 12% karbohidrat yang semuanya adalah N linked
glikosida tidak semmua Kell antigen dapt disempurnakan hanya yang
bernama kx. Kx ada pada semua eritrosit kecuali yang berjenis Mc
leod eritrosit telah berkurang pada kell antigen dan akantolitik
morfologi. Antigen kx terdapat 37 kDa protein. Kell dan Mc leod
juga merupakan kode berbagai gen 93 Kell kDa protein yang berasal
dari gen autosomal yang belum dapat digambarkan dan Mc Kod gen cDNA
clone Kell dan urutan asam aminonya yang memiliki struktur dan
urutan homolog yang dapat mengikat golongan endopeptidase netral
fiktif karena golongan darah Kell mempengaruhi masalah rhesus dan
kemudian menyebabkan penyakit hemolitik pada janin baru lahir.
Untuk mendiagnosanya dilakukan secara rutin untuk melihat apakah
ada janin yang beresiko.
KeakuratannyaDapat mendeteksi fetal Kell, allele sebannyak 11
dan 13 sampel Kell, positif tidak terdapat positif palsu dengan
ayah yang Kell, allele dapat ditemukan sebannyak 94%.
Gambar 2.6. Sistem Kell dalam tubuh manusiaSumber: Practical
Preimplantation Genetic Diagnosis hlm. 141e. Sistem Duffy17Sistem
Duffy adalah suatu protein yang berada di permukaan dari sel darah
merah dan penamaan ini diberikan setelah pasien dengan yang
terdapat protein ini. Pada manusia, protein ini tidak mendapatkan
kode dari gen DARC.Antigen Duffy dinyatakan dalam eritrosit juga
ditemukan pada beberapa sel yakni: sel epitel, sel purkinje yang
terdapat dalam serebelum, sel endotel yang ada di kapiler-kapiler
tyroid, post-kapiler vena di beberapa organ dan beberapa vena besar
di paru-paru.Protein yang tidak mendapatkan kode ini adalah
membrane protein glycosylated an suatu reseptor non-spesific dari
beberapa chemokines. Protein ini juga sebagai reseptor malaria bagi
manusia yakni parasit Plasmodium vivax dan Plasmodium knowlesi.
Polymorphism adalah salah satu gen yang berbasis dari sistem
golongan darah Duffy.
Genetik dan GenomAntigen Gen Duffy (gp-Fy; CD234) dalah
berlokasi pada kromosom 1 yang belengan panjang (1.q22-1.q23) dan
ini ditemukan pada tahun 1993.1Ini adalah stau kopian dari gen
tersebut dan tidak dikode sebagai 336 aam amino glycoprotein
acidic. Ini adalah gen karier dengan antigen determina dari system
golongan darah duffy yang terdiri dari empat alleles FY*A dan FY*B-
masing-masing kode untuk Fya dan Fyb antigen ini adalah FY*X dan
FY*Fy, lima phenotype (Fy-a, Fy-b, Fy-o, Fy-x dan Fy-y) dan lima
antigen. Fya dan Fyb ini berbeda dari single asam amino pada posisi
43: asam aspartad pada Fya dan glisin di Fyb. Basis genetic untuk
Fy (a-b-) penotipe adalah satu point mutasi pada eritrosit yang
spesifik.
Gambar 2.7. Keluarga ras negroidSumber: www.
mojaafryka.weebly.comOrgan PenyebaranSementara Duffy berada di
eritrosit, antigen Duffy ditemukan di sel epithelial seperti
pembuluh darah ginjal, sel purkinje pada cerebellum, endothelial
sel di kelenjar tyroid dan di alveoli paru-paru.
PopulasiPerbedaan distribusi rasial Duffy antigens ditemukan
pada tahun 1954 ketika mayoritas dari kulit hitam atau yang lebih
dikenal orang Afrika Amerika, mempunyai erythrocyte phenotype Fy
(A-B-) sebesar 68 %. Dan orang Afrika atau kulit hitam Afrika Barat
itu sendiri lebih dari 90 %. Phenotype ini sangat jarang pada orang
kulit putih. Sebab Duffy antigen merupakan phenotype luar biasa
pada orang Afrika hitam.
PenyakitDi eritrosit, antigen Duffy bertindak sebagai reseptor
masuknya parasite alaria manusia, Plasmodium vivax dan plasmodium
knowlesi. Seorang individu Duffy negative, eritrositnya tidak
menjadi reseptor masuknya malaria parasite hewan pengerat,
Plasmodium yoelii. Penyaki-penyakit yang lain yaitu asma dan
HIV.
Gambar 2.8. Plasmodium dalam tubuh manusiaSumber:
http://www.cdc.gov/dpdx/malaria/f. Sistem KiddSistem antigen kidd
(dikenal juga sebagai Jk antigen), adalah selaput membrane dari sel
darah merah dan ginjal yang dapat menentukan jenis golongan darah
seseorang. Jk antigen ini ditemukan pada suatu protein yang
bertanggung jawab atas transport urea pada sel darah merah dan
ginjal. Gen yang memberi kode pada protein ini ditemukan pada
chromosome 18. Dua Jk umum allels adalah Jk (A) dan Jk
(B).Penyebaran OrganSel darah merah dan sel darah putihOrang-orang
dengan dua antigen Jk (A), sebagai contoh boleh membentuk zat darah
penyerang kuman melawan terhadap darah yang didonorkan yang berisi
dua Jk (B) antigens. Ini dapat mendorong kea rah anemia hemolytic,
dimana badan menghancurkan darah yang ditransfusikan, mendorong kea
rah sel darah merah rendah. Penyakit dihubungkan yang lain dengan
Jk antigen adalah penyakit hemolytic bayi yang baru lahir (HDN),
dimana ibu hamil menciptakan zat darah penyerang kuman melawan
darah janinnya.
Gambar 2.9. Sickled Red CellSumber:
http://scahillsborough.org/sickle-cell/2. Tes dengan marker genetic
dari serum proteinPlasma darah berisi substansi protein yang juga
dikontrol secara genetic dengan prinsip-pinsip pewarisan yang sama
dengan erotrosit. Penggolongan serum protein didasarkan pada
pengukuran pergerakan dari berbagai protein dibawah pengaruh
listrik pada elektroforesis, kecuali pada sistem Gm. Dikenal
beberapa sistem anatara lain sistem Gc, sistem Hp dan sistem Gm.a.
Sistem Gc (Group-Spesific Component)Gc adalah vitamin D-binding
(terikat) glikoprotein pada -2 globulin fraksi dari serum protein.
Fungsi biological secara spesifik tidak begitu jelas. Ada tiga
fenotip pada pola pita yang biasanya teridentifikasi dengan
elektroforesis (Gc 1-1, Gc 2-2. Gc 2-1). Penggunaan
imunoelektroforesis (IEF) memungkinakan untuk membedakan 9 Gc
subtype.
Kedua metoda tersebut memerlukan imunofikasi (imobilisasi pita
protein dengan gel spesifik antibody) untuk menemukan perbedaan
pita protein. Fenotip pertama dipisahkan oleh migrasi melalui gel
dan menghasilkan pola pita yang terlihat dengan mengaplikasikan
anti-Gc buatan. Biasanya imunopresipitat bisa terlihat lebih jelas
dengan menandai memakai rantai protein seperti Coosmassie brilliant
blue.
b. Sistem Hp (haptoglobin)Haptoglobin adalah glikoprotein dari
kelas -2 globulin yang merupakan kompleks stabil dengan hemoglobin
yang mengontrol pengeluaran hemoglobin yang mengontrol pengeluaran
hemoglobin dari tubuh. Kompleks ini stabil, kuat terikat dan
ireversibel . Elektroforesis biasanya keluar pada vertical
policrylamid gel apparatus. Pemisahan tipe Hp secara elektroforesis
merupakan cara utama yang dilakukan, hemoglobin ditambahkan pada
sample untuk membuat kompleks Hp-Hb, dimana nanti terpisah sebagai
unit.Hp merupakan protein yang relative stabil pada darah yang
kering yang dapat digunakan untuk marker serologis.Untuk mencari
sistem-sistem tersebut di atas dilakukan pemeriksaan yang dapat
membedakan makromolekul (seperti protein dan asam nukleat).
Terdapat pemeriksaan elektroforeisis.Elektroforesis merupakan
proses bergeraknya molekul bermuatan pada suatu medan listrik. Laju
perpindahan tersebut bergantung pada ukuran molekul
bersangkutan.
Gambar 2.10. Alat elektroforesisSumber:
http://blog.ub.ac.id/pusphikasari/2014/04/16/tugas-dasar-bioteknologi/
Caranya:Prinsip yang dipakai dalam tes ini, bila berada dalam
suatu medan listrik molekul biologi yang bermuatan positif akan
bermigrasi ke elktroda yang negative dan sebaliknya.
Gambar 2.11. Metoda elektroforesis gelSumber:
http://wanenoor.blogspot.com/2011/06/pengertian-elektroforesis-dan-jenis.html
Pita-pita (band) pada lajur-lajur (lane) yang berbeda pada gel
akan tampak setelah proses pewarnaan; satu lajur merupakan arah
pergerakan sampel dari sumur gel. Pita-pita yang berjarak sama dari
sumur gel pada akhir elektroforesis mengandung molekul-molekul yang
bergerak di dalam gel selama elektroforesis dengan kecepatan yang
sama, yang biasanya berarti bahwa molekul-molekul tersebut
berukuran sama. Marka atau penanda (marker) yang merupakan campuran
molekul dengan ukuran berbda-beda dapat digunakan untuk menentukan
ukuran molekul dalam pita sampel dengan mengelektroforesis marka
tersebut dapat dibandingkan dengan pita sampel untuk menentukan
ukurannya. Jarak pita dari sumur gel berbanding terbalik terhadap
logaritma ukuran molekul.3. Tes dengan marker genetic dan enzim
eritrositSebagaimana diketahui bahwa fungsi dari eritrosit adalah
menyera, mengangkut dan mendistribusikan oksigen. Fungsi tersebut
terjadi dengan bantuan enzim, yang pada dasarnya juga merupakan
protein yang dikontrol secara genetic. Dikenal beberapa sistem PGM,
6GPD, AK, ADA, Acid Phospatase dan GPT.Phosphoglucomutase (PGM)PGM
adalah sebuah enzim phosphotransferase enzim yang mengkatalisis
konversi yang berubah dari glukosa 1-fosfatase menjadi
glukosa-6-fosfatase, yang sangat penting pada metabolisme
karbohidrat. PGM dapat ditemukan pada banyak jaringan dari
tumbuhan, binatang dan mikroorganisme. Pada manusia enzim ini
terdapat dalam konsentrasi yang artinya penting sekali pada darah,
semen dan banyak pada sekresi vagina dan mucus serviks. Telah
diketahui enzim ini dapat dihambat oleh logam logam-logam berta dan
flour. Saat disimpan dengan kondisi dingin dan kering enzim ini
dapat bertahan dengan baik. Hal ini harus selalu menjadi perhatian
khusus dari para peneliti forensic untuk menghindari pemaparan
bilogik untuk memperpanjang pemanasan dan kelembaban.
Tiga lokus genetik mengontrol polimorfi dari PGM. Lokus 1 pada
kromosom 1, lokus 3 pada kromosom 6 dan lokus 2 terdapat pada
kromosom 4. Hanya polimorfi yang berada pada lokus 1 yang dianggap
penting pada forensic.Pada dasarnya pemeriksaan ini juga mencari
protein yang dikontrol secara genetic. Seperti pemeriksaan protein
makan pemeriksaan ini pun menggunakan elektroforesis.
4. Tes dengan marke genetic HLASistem HLA meliputi hampir
seperseribu dari genom. Letaknya pada tangan pendek dari kromosom 6
dan terdiri atas satu seri yang letaknya berdekatan. Pada kromosom
6 terdiri dari 6 locus yaitu HLA-A, HLA-B, HLA-C, HLA-DR, HLA-DQ
dan HLA-DP. Untuk tes paternitas secara rutin dilakukan pemeriksaan
terhadap HLA-A dan HLA-B. Dibandingkan tes-tes lain, tes dengan
menggunakan sistem HLA ini memiliki presentase penyingkiran yang
amat tinggi 96%. Tes tersebut dilakukan dengan menggunakan metode
serologi dengan menggunakan marker genetic dari HLA yang sangat
polimorfis.
5. Penerapan metoda DNAPolimorfisme adalah istilah yang
digunakan untuk menunjukkan adanya suatu bentuk yang berbeda dari
suatu struktur dasar yang sama. Jika terdapat variasi/modifikasi
pada suatu lokus yang spesifik (pada DNA) dalam suatu populasi,
maka lokus tersebut dikatakan bersifat polimorfik ini disamping
menunjukkan variasi individu, juga memberikan keuntungan karena
dapat digunakan untuk membedakan satu orang dari yang lain.Dikenal
polimorfisme protein dna polimorfisme DNA. Polimorfisme protein
antara lain ialah sistem golongan darah , golongan protein serum
dan sistem golongan enzim dan HLA. Namun di sini kami hanya akan
membahas fungsi tes DNA terhadap kasus paternitas.Polimorfisme DNA
merupakan suatu polimorfisme pada tingkat yang lebih awal
dibandingkan polimorfisme protein, yaitu pada tingkat kode genetik
atau DNA. Pemeriksaan polimorfisme DNA meliputi pemeriksaan sidik
DNA (DNA fingerprint), VNTR (Variable Number of Tandem Repeat) dan
RFLP (Resriction Fragment Length Polymorphisms), secara Southern
blot maupun dengan PCR (Polymerase Chain Reaction).Dibandingkan
dengan pemeriksaan pomlimorfisme protein, pemeriksaan polimorfisme
DNA menunjukan beberapa kelebihan, yaitu: Polimorfisme DNA
menunjukan tingkat polimorfis yang jauh lebih tinggi, sehingga
tidak diperlukan pemeriksaan terhap lebih banyak sistem DNA jauh
lebih stabil dibandingkan protein, membuat pemeriksaan DNA masih
memungkinkan pada bahan yang sudah membusuk, mengalami mumifikasi
atau bahkan pada jenazah yang tinggal kerangka saja Distribusi DNA
sangat luas meliputi seluruh sel tubuh, sehingga berbagai bahan
mungkin untuk digunakan sebagai bahan pemeriksaan Dengan
ditemukannya metode PCR, bahan DNA yang kurang segar dan sedikit
jumlahnya masih mungkin untuk dianalisis
Gambar 2.12 Struktur DNASumber:
https://wikispaces.psu.edu/display/BIOL110F2013/DNA+Replication
PEMERIKSAAN DNA FINGERPRINT26
Pemeriksaan sidik DNA pertama kali diperkenalkan oleh Jeffreys
pada taun 1985. Pemeriksaan ini didasarkan atas adanya bagian DNA
manusia yang termasuk daerah non-coding atau intron (tidak mengkode
protein) yang ternyata merupakan urutan basa tertentu yang berulang
sebanyak n kali.Bagian DNA ini tersebar dalam seluruh genom manusia
sehingga dinamakan multilokus. Bagian DNA ini dimiliki oleh semua
orang tetapi masing-masing individu memili jumlah pengulangan yang
berbeda-beda satu sama lain, sedemikian rupa sehingga kemungkinan
dua individu mempunyai fragmen DNA yang sama adalah sangat kecil
sekali. Bagian DNA ini dikenal dengan nama Variabel Number of
Tandem Repeats (VNTR) dan umumnya tersebar pada bagian ujung dari
kromosom. Seperti juga DNA pada umumnya, VNTR ini diturunkan dari
kedua orang tua menurut hukum Mendel, sehingga keberadaannya dapat
dilacak secara tidak langsung dari orang tua, anak, maupun saudara
kandungnya.Jeffreys dkk menemukan bahwa suatu fragmen DNA yang
isolasi dari DNA yang terletak dekat dengan gen globin manusia
ternyata dapat melacak VNTR ini secara simultan. Pelacak DNA
(probe) multilokus temuannya ini dinamakan pelacak Jeffreys yang
terdiri dari beberapa probe, antaranya 16.6 dan 16.15 yang paling
sering digunakan.Pemeriksaan sidik DNA diawali dengan melakukan
ekstraksi DNA dari sel berinti, lalu memotongnya dengan enzim
restriksi Hinfl sehingga DNA menjadi potongan-potongan. Potongan
DNA tersebut dipisahkan satu sama lain berdasarkan berat molekulnya
(panjang potongan) dengan melakukan elektroforesis pada gel
agarose. Dengan menempatkan DNA pada sisi bermuatan negatif, makan
DNA yang juga bermuatan negatif akan ditolak ke sisi lainnya dengan
kecepatan yang berbanding terbalik dengan panjang fragmen DNA.
Fragmen DNA yang telah terpisah satu sama lain di dalam agar lalu
diserapkan pada suatu membran nitroselulosa dengan suatu metode
yang dinamakan metode Southern blot.
Gambar 2.13 Metode Southern blotSumber:
http://www.mun.ca/biology/scarr/Gr12-18.html
Membran yang kini telah mengandung potongan DNA ini lalu
diproses untuk membuat DNA-nya menjadi DNA untai tunggal (proses
denaturasi), kemudian campurkan dengan pelacak DNA yang telah
diberi label dengan bahan radioaktif dalam proses yang dinamakan
hibridisasi. Pada proses ini pelacak DNA akan bergabung dengan
fragmen DNA yang merupakan basa komplemennya.Untuk menampilkan DNA
yang telah berhibridisasi dengan pelacak berlabel ini,
dipaparkanlah suatu film di atas membran sehingga film akan
terpapar oleh adanya radioaktif tersebut (proses autoradiografi).
Hasil pembakaran film oleh sinar radioaktif ini akan tampak pada
film berupa pita-pita DNA yang membentuk gambaran berupa
barcode.
Gambar 2.14 Contoh hasil DNA fingerprintSumber:
http://geneed.nlm.nih.gov/topic_subtopic.php?tid=37&sid=38
Dengan metode Jeffreys dan menggunakan dua macam pelacak DNA
umumnya dapat dihasilkan sampai 20-40 buah pita DNA
per-sampelnya.Pada kasus identifikasi mayat tak dikenal, dilakukan
pembandingan pita korban dengan pita orang tua atau anak-anak
tersangka korban. Jika korban benar adalah tersangka, maka akan
didapatkan bahwa separuh pita anak akan cocok dengan ibunya dan
separuhnya lagi cocok dengan pita ayahnya. Hal yang sama juga dapat
dilakukan pada kasus ragu ayah (disputed paternity).Pada kasus
perkosaan, dilakukan pembandingan pita DNA dari apus vagina dengan
pita DNA tersangka pelaku. Jika tersangka benar adalah pelaku, maka
akan dijumpai pita DNA yang persis pola susunannya.
Gambar 2.15 Langkah-langkah pembuatan DNA fingerprintSumber:
http://www.erewise.com/current-affairs/dna-fingerprinting_art531084d75ab32.html
ANALISIS VNTR LAIN27Setelah penemuan Jeffreys ini, banyak
penemuan VNTR lain yang mengikuti. Metode pemeriksaan pun menjadi
beraneka ragam dengan menggunakan enzim restriksi sistem labeling
pelacak dan pelacak yang berbeda meskipun semua masih menggunakan
metode Southern blot seperti metode Jeffreys.Setelah kemudian
ditemukan sesuatu pelacak yang dinamakan pelacak lokus tunggal
(single locus), maka mulailah orang mengalihkan perhatiannya pada
metode baru ini. Pada sistem pelacakan dengan pelacak tunggal, yang
dilacak pada suatu pemeriksaan hanyalah satu lokus tertentu saja,
sehingga pada analisis selanjutnya hanya akan didapatkan dua pita
DNA saja. Karena pola penurunan DNA ini juga sama, maka satu pita
berasal dari ibu dan pita satunya berasal dari ayah.Adanya jumlah
pita yang sedikit ini menguntungkan karena interpretasinya menjadi
lebih mudah dan sederhana. Keuntungan lain adalah ia dapat
mendeteksi jumlah pelaku perkosaan. Jika pada usap vagina korban
ditemukan ada 6 pita DNA misalnya, maka pelaku perkosaan adalah 3
orang (satu orang memiliki pita). Kelemahannya adalah jumlah pita
yang sedikit membuat kekuatan diskriminasi individunya lebih kecil,
sehingga untuk identifikasi personal selain kasus perkosaan
perludilakukan pemeriksaan dengan pelacakan beberapa lokus
sekaligus. Secara umum, metode Jeffreys dan pelacak multilokus
dianjurkan untuk kasus identifikasi personal, sedangkan untuk kasus
perkosaan menggunakan metode dengan pelacak lokus tunggal.
Gambar 2.16 Analisis VNTRSumber:
http://classroom.sdmesa.edu/eschmid/Lab9-Biol210.htm
PEMERIKSAAN RFLP28Polimorfisme yang dinamakan Restriction
Fragment Length Polymorphisms (RFLP) adalah suatu polimorfisme DNA
setelah dipotong dengan enzim restriksi tertentu. Suatu enzim
restriksi mempunyai kemampuan untuk memotong DNA pada suatu urutan
basa tertentu sehingga akan menghasilkan potongan-potongan DNA
tertentu.Adanya mutasi tertentu pada lokasi pemotongan dapat
membuat DNA yang biasanya dapat dipotong menjadi tidak dapat
dipotong sehingga terbentuk fragmen DNA yang lebih panjang. Variasi
inilah yang menjadi dasar metode analisis RFLP.VNTR yang disebutkan
diatas sesungguhnya adalah salah satu jenis RFLP, karena variasi
fragmennya didapatkan setelah pemotongan dengan enzim restriksi.
Metode pemeriksaan RFLP dapat lakukan dengan metode Southern blot
tetapi dapat juga dengan metode PCR.
Gambar 2.17 Langkah-langkah RFLPSumber:
http://www.blog.gurukpo.com/rflp-restriction-fragment-length-pomorphisms
METODE PCR29Metode PCR (Polymerase Chain Reaction) adalah suatu
metode untuk memperbanyak fragmen DNA tertentu secara in vitro
dengan menggunakan enzim polymerase DNA.Kelompok Cetus pada tahun
1985 menemukan bahwa DNA yang dicampur dengan deoksiribonukleotida
trifosfat atau dNTP (yang terdiri dari ATP, CTP, TTP, dan GTP),
enzim polymerase DNA dan sepanjang primer jika dipanaskan,
didinginkan lalu dipanaskan lagi akan memperbanyak diri dua kali
lipat. Jika siklus ini diulang sebanyak n kali, maka DNA akan
memperbanyak diri 2n kali lipat.Yang dimaksud dengan primer adlah
fragmen DNA untai tunggal yang sengaja dibuat dan merupakan
komplement dari bagian dari bagian ujung DNA yang akan diperbanyak,
sehingga dapat diibaratkan debagai patok pembatas bagian DNA yang
akan diperbanyak.Siklus proses PCR diawali dengan pemanasan pada
suhu tinggi, yang berkisar antara 90-95 derajat C (fase
denaturasi). Pada suhu ini DNA untai ganda (double stranded)
terlepas menjadi 2 potong DNA untai tunggal (single stranded)
proses ini dilanjutkan dengan pendinginan pada suhu tertentu (fase
penempelan primer atau primer annealing ) yang dihitung dengan
rumus Thein dan Wallace : Suhu = 4 (G+C) +2 (A+T)G,C,A dan T adalah
jumlah basa guanin, sitosin, Adenin, dan Timin pada primer yang
digunakan. Pada fase ini primer akan menempel pada basa
komplemennya pada DNA untai tunggal tadi. Selanjutnya, siklus
diakhiri dengan pemanasan kembali antara 70-75 derajat C ( fase
ekstensi atau elongasi), yang akan membuat primer memperpanjang
diri membentuk komplemen dari inti tunggal yang menggunakan bahan
dNTP.Pemeriksaan dengan medote PCR hanya dimungkinkan jika bagian
DNA yang ingin diperbanyak telah diketahui urutan basanya. Tahapan
selanjutnya adalah menentukan dan menyiapkan primer yang merupakan
komplemen dari basa pada ujung-ujung bagian yang akan diperbanyak.
Pemeriksaan PCR sendiri merupakan suatu proses pencampuran antara
DNAcetakan (template) yang akan diperbanyak, dNTP, primer, enzim
polymerase DNA dan larutan buffer dalam reaksi 50 ul atau 100 ul.
Campuran ini dipaparkan pada 3 suhu secara berulang sebanyak n
sebuah siklus (biasanya dibawah 35 siklus).Adanya mesin otomatis
untuk proses ini membuat prosedurnya menjadi amat sederhana. DNA
hasil perbanyakan dapat langsung dianalisis dengan melakukan
elektroforesis pada gel agarose atau gel poliakrilamide.Lokus DNA
yang dapat dianalisi dengan metode PCR , meliputi banyak sekali
lokus VNTR maupun RFLP lainnya, diantaranya lokus D1S58 dan D2S44.
Metode analisis dengan PCR ini begitu banyak disukai sehingga
penemuan penemuan lokus DNA polimorfik yang potensial untuk
analisis kasus forensik terus terjadi tanpa henti setiap saat.Pada
masa sebelum berkembangnya tekhnologi bio molekuler, identifikasi
personal dilakukan hanya dengan memanfaatkan pemeriksaan
polimorfisme protein, seperti golongan darah, dnegan segala
keterbatasannya. Keterbatasan pertama, ia hanya dimungkinkan
dilakukan pada bahan yang segar karena protein cepat rusak oleh
pembusukan. Keterbatasan kedua adalah ia hanya dapat memberikan
kesimpulan ekslusi yaitu pasti bukan atau mungkinPada metode
kovensional, untuk mempertinggi ketepatan kesimpulan pada kelompok
yang tak tereksklusi, pemeriksaan harus dilakukan terhadap banyak
sistem sekaligus.Penemuan DNA finger print yang menawarkan metode
eksklusi dengan kemampuan eksklusi yang amat tinggi membuatnya
menjadi metode lengkap atau bahkan pengganti yang jauh lebih baik
karena ia mempunyai ketepatan yang nyaris seperti siddik jari
.Dengan mulai diterapkannya metode PCR, kemampuan metode ini untuk
memperbanyak DNA jutaan sampai milyaran kali metode ini untuk
memperbanyak DNA jutaan sampai milyaran kali memungkinkan
dianalisisnya sampel forensic yang jumlahnya amat minim, seperti
analisi kerokan kuku ( cakarankorban pada pelaku) , bercak mani
atau darah yang minim, punting rokok, dsb. Kelebihan lain dari
pemeriksaan dengan PCR adalah kemampuannya untuk menganalisisbahan
yang sudah didegradasi sebagian. Hal ini penting karena banyak dari
sampel forensik merupakan postmortem yang tak segar lagi.E. Cara
mengambil Kesimpulan dari Berbagai Test Paternitas Pengambilan
kesimpulan tentang ada tidaknya pertalian darah didasarkan pada 2
tahapan , yaitu : a. Penyingkiran terhadap orang orang yang jelas
tidak ada hubungan keturunan.b. Penentuan terhadap orang-orang yang
tidak disingkirkan Bagaimanapun penyelidikan keturunan melalui
deteksi genetik marker tidak dapat menentukan ( menunjuk )
seseorang sebagai ayah yang sebenarnya dari seseoranga anak. Tujuan
utamanya adalah menyingkirkan orang 0 orang yang tidak ada hubungan
keturunan.Tingkat penyingkiran masing masing test berbeda. Kecuali
test HLA, test lain yang memiliki derajat penyingkiran yang cukup
rendah. Test ABO misalnya hanya mempunyai derajar penyingkiran 17,6
% , sedangkan test MN 32,1 % . Namun , semakin banyak test yang
dikerjakan semakin besar derajat penyingkiran kumulatifnya. Jika
semua test genetik marker dari eritrosit, plasma protein dan enzim
eritrosit dikerjakan semua maka derajat penyingkirannya menjadi
89%.Tahapan selanjutnya adalah menentukan ada tidaknya hubungan
keturunan dari orang orang yang tak tersingkirkan. Race dan Sanger
menggunakan metode probabilitas guna menunjukan kecenderungan
pewarisan gen- gen. Jika misalnya seorang laki-laki dicurigai
sebagai ayah dari seorang anak yang dilahirkan oleh seorang ibu
maka langkah pertama yang dilakukan adalah menentukan marker
genetik yang harus ada pada ayah dengan melihat marker genetik pada
ibu. Jika balans probabilitas ( dnegan menggunakan rumusnya )
diatas level 100 kali maka kecenderungan pewarisan gen tersebut
dianggap signifikan.Pemeriksaan paternitas dengan menggunakan
tekhnologi DNA memiliki derajat signifikansi yang lebih tinggi.
Dengan cara membeandingkan variasi DNA sequence dari individu
individu yang diperiksa maka akan dapat diketahui ada tidaknya
hubungan darah anatara indivisu tersebut.
BAB IIILAPORAN KASUS
Mr. A adalah seorang laki-laki usia 65 tahun berkebangsaan
Australia, memiliki anak laki-laki MDA dari Istri pertamanya di
Australia. Pada tahun 2008, diketahui Mr. A telah memilki istri
kedua di Bali Nyonya S dan dari hubungan mereka lahir seorang bayi
laki-laki RJ yang pada saat pemeriksaan telah berusia satu bulan.
Karena keluarga besar Mr. A yang berada di Australia ingin
mengetahui pasti apakah bayi tersebut benar-benar anak dari Mr. A,
maka mereka meminta dilakukannya uji keayahan atau tes paternitas
dengan menggunakan tes DNA. Permasalahannya, Mr. A telah meninggal
sejak tahun 2009, sehingga sampel dari ayah tidak mungkin di
peroleh. Sehingga, sampel yang dipakai sebagai pembanding adalah
sampel dari anak pertama Mr. A (MDA). Dari tes tersebut dapat
diperoleh hasil, apakah MDA berasal dari satu garis keturunan yang
sama dengan RJ atau tidak.
BAB IVPENUTUP
KesimpulanPaternitas adalah salah satu sarana untuk menetapkan
seorang laki-laki yanag merupakan ayah biologis Peran paternitas
dalam kehidupan yaitu, Informasi mengenai siapa orang tua biologis
dari seorang anak Dapat ditentukan hak dari anak tersebut Dapat
menunjukan kewajiban dari orangtuanya Kasus ragu orang tua
(disputed parentage) Kasus ragu ayah (disputed
paternity)Medikolegal paternitas Undang undang nomor 1 tahun 1974
mengatur tentang asal usul anak, dalam pasal 42,43, dan 44
selengkapnya berbunyi sebagai berikut : Pasal 42 : anak sah adalah
anak yang dilahirkana dalam atau akibat perkawinan yang sah Pasal
43 : anak yang dilahirkan di luar perkawinan hanya mempunyai
hubungan perdata dengan ibunya dan keluarga ibunya (1) kedudukan
anak tersebut dalam ayat (1) di atas selanjutnya akan diatur dalam
Peraturan Pemerintah (2) Pasal 44 : (1) seorang suami dapat
menyangkal sahnya anak yang dilahirkan oleh isterinya bilamana,
iada dapat membuktikan bahwa isterinya telah berzina dan anak itu
akibat dari perzinaan tersebut. (2) Pengadilan memberikan keputusan
tentang sah tidaknya anak atas Permintaan pihak yang bersangkutan.
Mengenai alat bukti yang diakui dalam hukum acara Perdata diatur
dalam pasal1866 KUHP Perdata dan pasal 164 , yang etrdiri dari :1.
Bukti tulisan / surat 2. Bukti saksi3. Persangkaan 4. Pengakuan 5.
Sumpah Macam macam test pada Paternitas A. Test dengan Marker
Genetik dari Antigen Erotrosit Sitem ABO Sistem MN Sitem Rhesus
Sistem kell Sistem Duffi Sistem Kidd Test dengan marker Genetik
dari Serum Protein Sistem Gc ( group-Specific Component) Sistem Hp
( haptoglobin) Test dengan Marker Genetik dari Enzim Eritrosit
Elektroforesis Isoelectric focusing Test dengan Marker Genetik HLA
Penerapan metode DNA 6. Cara mengambil kesimpulan dari berbagai
test Paternitas Penyeingkiran terhadap orang orang yang jelas yidak
ada hubungan keturunan Penentuan terhadap orang orang yang tidak
tersingkirkanSaran 1. Pemerintah meningkatkan subsidi dalam bidang
kesehatan, agar alat-alat pemeriksaan paternitas tidak hanya berada
di kota besar.2. Peningkatan sumber daya manusia dalam bidang
pemeriksaan paternitas mengingat luasnya penggunaan tes-tes
paternitas
DAFTAR PUSTAKA
1. Atmadja, Djaja Surya, Evi Untoro. Peran Analisa DNA pada
Penanganan Kasus Forensik
2. Bagian kedokteran forensik Fakultas Kedokteran, 1997.
Universitas Indonesia. Ilmu Kedokteran Forensik. Edisi I.
3. Dahlan, Sofwan. Ilmu Kedokteran Forensik. 2008. Semarang :
Badan Penerbit ; Universitas Diponegoro.
4. Ellis , JM, dkk. 2000. Diversity is Demontrated in Class 1
HLA and HLA B Alleles in Cameroon
5. Elvita Azmi, dkk. Genetika Dasar.PDF. editan terakhir 2008
diakses tanggal 7 maret 2007
6. Gonzales, thomas A dkk. Legal Medicine Pathology and
Toxicology. Chapter 21 Pregnancy : puerperium : Illegitimacy Second
edition. New York : Appleti-Century-Croft,Inc.
7. James, Stuart H, Jon J. Nordby. Forensic Science An
Introduction ti Scientific and Investigative Technique. 2003. CRC
Press LLC : United states of America
8. Panzak Ales. MENDELIAN GENETICS. Editan Terakhir maret 2007
diakses tanggal 7 maret 2009
9. Race, RR& Sanger, Ruth. 1968. Blood Group In Man.
Oxford.
10. Subekti, Tjitrosudibio, Cetakan ke 32 edisi revisi. 2003.
Kitab Undang Undang Hukum Perdata. Jakarta.PT Pradnya Paramita.
1
