TOKSISITAS SUBAKUT EKSTRAK BIJI PEPAYA (Carica

papaya L.) VARIETAS „California‟ DAN „Bangkok‟

PADA HATI MENCIT (Mus musculus) SWISS WEBSTER

SENA YUNIA SAPUTRI

PROGRAM STUDI BIOLOGI

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

2020 M/1441 H

TOKSISITAS SUBAKUT EKSTRAK BIJI PEPAYA (Carica

papaya L.) VARIETAS „California‟ DAN „Bangkok‟ PADA

HATI MENCIT (Mus musculus) SWISS WEBSTER

SKRIPSI

Sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains

Pada Program Studi Biologi Fakultas Sains Dan Teknologi

Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta

SENA YUNIA SAPUTRI

11150950000009

PROGRAM STUDI BIOLOGI

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

2020 M/ 1441 H

ii

iii

iv

v

ABSTRAK

Sena Yunia Saputri. Toksisitas Subakut Ekstrak Biji Pepaya (Carica papaya

L.) Varietas „California‟ dan „Bangkok‟ Pada Hati Mencit (Mus musculus)

Swiss Webster. Skripsi. Program Studi Biologi. Fakultas Sains dan

Teknologi. Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. 2020.

Dibimbing oleh Dr. Nani Radiastuti, M.Si. dan Indri Garnasih, M.Si.

Biji pepaya memiliki rasa yang pahit, pedas dan beraroma menyengat

sehingga biji pepaya kurang diminati untuk diolah. Biji pepaya yang banyak

terbuang adalah biji pepaya varietas ‘California’ dan ‘Bangkok’. Biji pepaya dari

kedua varietas tersebut belum dimanfaatkan secara optimal, tetapi biji pepaya

berpotensi sebagai bahan pengawet makanan yang ikut masuk ke dalam tubuh,

oleh karenanya perlu di uji toksisitasnya. Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui efek toksisitas subakut ekstrak biji pepaya ‘California’ dan

‘Bangkok’. Penelitian ini menggunakan 28 ekor mencit putih jantan, dibagi secara

acak menjadi 3 kelompok diberi ekstrak ‘California’, 3 kelompok diberi ekstrak

‘Bangkok’ dan 1 kelompok diberi pelarut CMC 1% secara gavage dengan

konsentrasi 4, 6, dan 8% (b/v). Perlakuan dilakukan selama 28 hari dan pada hari

ke-29 darah mencit diambil melalui vena jungularis untuk diuji SGPT, SGOT

serum, dan pembedahan untuk pengamatan organ viseral mencit secara

makroskopis. Selama penyuntikkan mencit ditimbang berat badan dan diamati

kondisi fisiknya. Hasil uji toksisitas subakut selama 28 hari dengan pemberian

ekstrak tersebut tidak berpengaruh pada berat badan, kondisi fisik, dan organ

viseral mencit. Namun pada data SGPT dan SGOT menunjukkan peningkatan

pada semua kelompok perlakuan jika dibandingkan dengan kelompok kontrol,

tetapi peningkatan tersebut masih dibawah ambang batas normal sehingga aman

untuk pengawet makanan.

Kata kunci: Biji pepaya ‘California’; biji pepaya ‘Bangkok’; Toksisitas

Subakut; SGPT; SGOT

vi

ABSTRACT

Sena Yunia Saputri. Subacute Toxicity of Papaya Seed Extract (Carica

papaya L.) „California‟ and „Bangkok‟ Varieties in Swiss Webster Mice (Mus

musculus) Hearts. Thesis. Biology Study Program. Faculty of Science and

Technology. Syarif Hidayatullah State Islamic University Jakarta. 2020.

Supervised by Dr. Nani Radiastuti, M.Sc. and Indri Garnasih, M.Sc.

Papaya seeds have a bitter, spicy and aromatic aroma, so papaya seeds are

less desirable to be processed. Papaya seeds that are wasted are ‘California’ and

‘Bangkok’ varieties of papaya seeds. Papaya seeds of the two varieties have not

been used optimally, but papaya seeds have the potential as a food preservative

that enters the body, therefore it needs to be tested for toxicity. This study aims to

determine the effect of subacute toxicity of ‘California’ and ‘Bangkok’ papaya

seed extracts. This study used 28 male white mice, randomly divided into 3

groups given ‘California’ extract, 3 groups were given ‘Bangkok’ extract, and 1

group was given gavage 1% CMC solvent with concentrations of 4, 6, and 8% (w

/ v). The treatment was carried out for 28 days and on the 29th day blood of mice

was taken through the jungularis vein to be tested for SGPT, serum SGOT, and

surgery for macroscopic observation of the visceral organs of mice. During the

injection the mice weighed and their physical condition was observed. Subacute

toxicity test results for 28 days by administering the extract had no effect on body

weight, physical condition, and visceral organs of mice. However, the SGPT and

SGOT data showed an increase in all treatment groups when compared to the

control group, but the increase was still below the normal threshold making it safe

for food preservatives.

Keywords: „California’ papaya seeds; ‘Bangkok’ papaya seeds; Subacute

toxicity; SGOT; SGPT

vii

KATA PENGANTAR

Bismillahirrahmanirrahim

Assalamu’alaikum warahmatullah wabarakatuh

Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah

memberikan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan

skripsi ini sebagai salah satu syarat memperoleh gelar sarjana sains. Salawat dan

salam selalu tercurah kepada Nabi Muhammad SAW dan para sahabatnya yang

membawa kita dari zaman jahiliyah menuju zaman yang terang benderang.

Skripsi dengan judul “Toksisitas Subakut Ekstrak Biji Pepaya (Carica

papaya L.) Varietas „California‟ dan „Bangkok‟ Pada Hati Mencit (Mus

musculus) Swiss Webster” disusun berdasarkan hasil penelitian yang telah

dilaksanakan di Rumah Hewan Fakultas Kedokteran UIN Syarif Hidayatullah

Jakarta dan Pusat Laboratorium Terpadu (PLT) UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

Penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik karena adanya

dukungan dan bimbingan dari berbagai pihak. Pada kesempatan ini dengan segala

kerendahan hati, penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Prof. Dr. Lily Surraya Eka Putri, M. Env. Stud. Selaku Dekan Fakultas Sains

dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta, serta

dosen Penguji seminar proposal dan seminar hasil yang telah memberikan

kritik dan saran yang membangun dalam proses penulisan skripsi.

2. Dr. Priyanti dan Narti Fitriana, M.Si. selaku Ketua dan sekertaris Program

Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Syarif

Hidayatullah Jakarta atas kerja sama dan bantuannya dalam adminstrasi

akademik.

3. Dr. Nani Radiastuti, selaku pembimbing I yang telah memberikan izin untuk

melaksanakan penelitian di Rumah Hewan Fakultas Kedokteran Universitas

Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta dan Pusat Laboratorium Terpadu

viii

(PLT) Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta, memberikan

bimbingan dan saran bermanfaat kepada penulis dalam proses penyelesaian

skripsi.

4. Indri Garnasih, M.Si. selaku pembimbing II yang telah memberikan ilmu,

bimbingan, saran dan motivasi dalam pelaksanaan penelitian hingga

penyusunan skripsi.

5. Etyn Yunita, M.Si. selaku penguji seminar proposal dan seminar hasil yang

telah memberikan kritik dan saran yang membangun dalam proses penulisan

skripsi.

6. Dr. Fahma Wijayanti dan Ardian Khairiah, M.Si. selaku dosen penguji sidang

Munaqosyah yang telah memberikan kritik dan saran yang membangun dalam

penulisan skripsi.

7. Kepala Laboratorium Rumah Hewan Kedokteran dan Laboran Biologi Pusat

Laboratorium Terpadu, Universitas Syarif Hidayatullah Jakarta atas kerja sama

dan bantuan yang telah diberikan selama kegiatan penelitian.

Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih sangat banyak

kekurangan, untuk itu penulis membuka diri terhadap kritik dan saran yang

bersifat membangun dari berbagai pihak. Penulis berharap skripsi ini dapat

bermanfaat baik bagi penulis sendiri maupun bagi pembaca sekalian.

Wassalamu’alaikum warahmatullah wabarakatuh

Jakarta, Januari 2020

Penyusun

ix

DAFTAR ISI

Halaman

LEMBAR PENGESAHAN PEMBIMBING ........................................ ii

LEMBAR PENGESAHAN PANITIA UJIAN ..................................... iii

LEMBAR PERNYATAAN ................................................................. iv

ABSTRAK .......................................................................................... v

KATA PENGANTAR ......................................................................... vii

DAFTAR ISI ....................................................................................... ix

DAFTAR TABEL ............................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR ........................................................................... xii

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................ xiii

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar belakang .................................................................... 1

1.2 Rumusan masalah ............................................................... 3

1.3 Tujuan penelitian ................................................................ 3

1.4 Manfaat penelitian .............................................................. 3

1.5 Kerangka berpikir ............................................................... 4

BABII TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Morfologi pepaya ‘California’ ............................................ 5

2.2 Morfologi pepaya ‘Bangkok’ .............................................. 5

2.3 CMC (Carboxyl Methyl Cellulose). ..................................... 6

2.4 Toksisitas ........................................................................... 6

2.5 Morfologi dan klasifikasi mencit......................................... 9

2.6 Hati mencit ......................................................................... 9

2.7 Enzim ................................................................................. 11

BABIII METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat ............................................................. 13

3.2 Bahan dan Alat ................................................................... 13

3.3 Rancangan percobaan ......................................................... 13

3.4 Desain Penelitian ................................................................ 14

x

3.5 Cara Kerja .......................................................................... 15

3.6 Analisis Data ...................................................................... 18

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Uji toksisitas subakut............................................................ 19

4.2 Berat badan mencit................................................................ 20

4.3 Kondisi fisik mencit ............................................................ 22

4.4 Kadar GOT dan GPT serum ................................................ 23

4.5 Berat organ viseral mencit .................................................. 28

BABV KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan ........................................................................ 32

5.2 Saran .................................................................................. 32

DAFTAR PUSTAKA………………………………………………....... 33

LAMPIRAN………………………………………………………......... 38

xi

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Kondisi fisik mencit setelah didedahkan ekstrak biji

pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ dengan konsentrasi

0, 4, 6, 8% (b/v) ...................................................................... 22

Tabel 2. Berat organ viseral mencit setelah dipaparkan ekstrak Biji

pepaya ‘California’ selama 28 hari ......................................... 29

Tabel 3. Berat organ viseral mencit setelah dipaparkan ekstrak Biji

pepaya ‘Bangkok’ selama 28 hari ........................................... 29

Tabel 4. Morfologi organ viseral mencit setelah dipaparkan ekstrak Biji

pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ selama 28 hari ................. 30

xii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Kerangka berpikir ............................................................... 4

Gambar 2. Pohon dan buah pepaya ‘California’ ................................... 5

Gambar 3. Pohon dan buah pepaya ‘Bangkok’ ..................................... 6

Gambar 4. Hewan uji mencit (Mus musculus) ...................................... 9

Gambar 5. Desain penelitian ................................................................ 14

Gambar 6. Berat badan mencit selama 28 hari setelah didedahkan

ekstrak biji pepaya ‘California’ .......................................... 20

Gambar 7. Berat badan mencit selama 28 hari setelah didedahkan

ekstrak biji pepaya ‘Bangkok’ ............................................ 20

Gambar 8. Rata-rata kadar GOT (U/I) serum mencit setelah dipaparkan

ekstrak biji pepaya ‘California’ selama 28 hari secara gavage.. 24

Gambar 9. Rata-rata kadar GOT (U/I) serum mencit setelah dipaparkan

ekstrak biji pepaya ‘Bangkok’ selama 28 hari secara gavage.. 24

Gambar10. Rata-rata kadar GPT (U/I) serum mencit setelah dipaparkan

ekstrak biji pepaya ‘California’ selama 28 hari secara gavage.. 25

Gambar 11. Rata-rata kadar GPT (U/I) serum mencit setelah dipaparkan

ekstrak biji pepaya ‘Bangkok’ selama 28 hari secara gavage.. 25

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Uji parameter SGOT serum mencit setelah didedahkan

ekstrak biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ ................ 38

Lampiran 2. Uji lanjut Tukey SGOT serum mencit setelah didedahkan ekstrak

biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’……. ................... 39

Lampiran 3. Uji parameter SGPT serum mencit setelah didedahkan

ekstrak biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ ................ 40

Lampiran 4. Uji lanjut Tukey SGPT serum mencit setelah didedahkan

ekstrak biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ ................ 41

Lampiran 5. Hasil GCMS ekstrak biji pepaya ‘California’ ................... 42

Lampiran 6. Hasil GCMS ekstrak biji pepaya ‘Bangkok’ ..................... 43

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Pepaya (Carica papaya L.) merupakan tanaman yang banyak tersebar di

berbagai negara tropis termasuk di negara Indonesia. Buah dari tanaman ini

tergolong buah yang populer dan sangat digemari oleh masyarakat Indonesia.

(Kalie, 2008). Biji pepaya memiliki rasa yang pahit, pedas dan beraroma

menyengat menjadikan biji pepaya kurang diminati sebagai bahan konsumsi dan

masih di anggap limbah oleh masyarakat dunia dan belum dimanfaatkan secara

optimal (Ummah, 2012).

Menurut Warisno (2003) Biji pepaya memiliki senyawa metabolit

sekunder, seperti golongan fenol, terpenoid, alkaloid, dan saponin. Zat aktif yang

bersifat toksik pada penelitian ini yaitu senyawa alkaloid. Selain itu, pada hasil

GC-MS biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ yang telah dilakukan oleh

Awaliah, Fitri & Radiastuti (2019) bahwa didapatkan senyawa Dodecanoic acid

(HO2C (CH2) 10Me), Phenol, 2,4-bis, Methyl ester of Benzylcarbamic acid,

3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1, senyawa dari kedua varietas tersebut dapat

berpotensi toksik (Wishart, Feunang, Marcu, Guo & Liang, 2013).

Kandungan dalam senyawa tersebut diduga dapat merusak hati. Pemilihan

hati sebagai organ sasaran yang mungkin dirusak oleh adanya efek toksik dari biji

pepaya, dikarenakan hati merupakan organ tubuh yang rentan terhadap pengaruh

bahan toksik. Maka dari itu dalam penelitian ini dilakukan uji Serum Glutamat

Piruvat Transaminase (SGPT) dan Serum Glutamat Oksaloasetat Transminase

(SGOT) pada serum mencit, pembedahan dan pengamatan organ viseral mencit

seperti hati, jantung, ginjal, paru-paru, lambung, usus, pankreas dan limpa.

Pada penelitian ini selain penggunaan es sebagai bahan pengawet udang,

formalin juga sering digunakan untuk mempertahankan lama simpan makanan.

Namun kesadaran dalam penggunaan pengawet dari bahan alami pada bahan

pangan mulai meningkat agar bahan pangan aman dikonsumsi (Roller, 1995). Biji

pepaya yang sering dianggap limbah ini akan dijadikan sebagai bahan pengawet

daging ayam dan udang. Minimnya penerapan sanitasi dan higiene pada

2

penangkapan udang menyebabkan udang lebih cepat busuk, maka perlu dilakukan

cara untuk memperlambat pembusukan diantaranya adalah dengan mendinginkan

dan menyimpannya dalam es (Opara, Al-Jufaili & Rahman, 2007).

Uji toksisitas perlu dilakukan, adapun beberapa uji toksisitas adalah uji

toksisitas akut, subakut, dan kronik. Uji toksisitas akut adalah uji yang pertama

kali dilakukan terhadap suatu agensia. Uji toksisitas subakut adalah pendedahan

dosis secara berulang yang dilakukan hingga 30 hari. Uji toksisitas kronik adalah

pendedahan dosis secara berulang lebih dari tiga bulan (BPOM, 2014). Namun

pada penelitian ini uji toksisitas akut tidak dilakukan, dikarenakan menurut

penelitian Umana (2013) & Kanadi (2019) yang telah dilakukan bahwa uji

toksisitas akut selama 96 jam dengan dosis tertinggi yaitu 5000 mg/kg b.b tidak

didapatkan adanya kematian dan perubahan perilaku pada hewan uji mencit.

Namun pada penelitian ini hanya dilakukan uji toksisitas subakut selama 28 hari

dengan menggunakan dua varietas biji pepaya yang berbeda ‘California dan

‘Bangkok’ yang akan dipaparkan pada hewan mencit.

Pada uji toksisitas subakut ini dilakukan pengamatan berat badan dan

kondisi fisik mencit, seperti kulit dan rambut, mata dan mukosa, pernapasan,

aktivitas dan motorik, tremor, salivasi, diare dan letargi (terseret-seret) setelah

didedahkan ekstrak biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ dengan konsentrasi 4,

6, dan 8% (b/v) selama 28 hari selain itu, uji toksisitas subakut dilakukan dengan

pemeriksaan serum darah mencit untuk mengetahui derajat kerusakan yang

mungkin ditimbulkan akibat pemberian ekstrak biji pepaya dalam jangka waktu

tertentu dan peningkatan aktivitas enzim SGPT dan SGOT.

Pada penelitian toksisitas subakut ekstrak biji pepaya terhadap aktivitas

enzim Serum Glutamic Oxaloasetic Transminase (SGOT) dan Serum Glutamic

Pyruvic Transminase (SGPT) yang telah dilakukan oleh Safwan, Abdul, Ali & Ni,

2017 menggunakan biji pepaya yang belum diketahui varietasnya. Hasil dari

penelitian tersebut menunjukkan bahwa pemberian ekstrak biji pepaya dengan

dosis 50 mg/kg b.b, 500 mg/kg b.b, dan 5000 mg/kg b.b selama 28 hari tidak

menunjukkan peningkatan aktivitas SGPT dan SGOT. Namun dalam penelitian

ini sudah diketahui varietasnya yaitu ‘California’ dan ‘Bangkok’ dan berbeda

dalam pemberian konsentrasinya yaitu 4, 6, dan 8% (b/v).

3

Menurut penelitian Gusniar (2019), bahwa hasil ekstrak biji pepaya

‘California’ dan ‘Bangkok’ telah diaplikasikan sebagai bahan pengawet makanan

terutama untuk menjaga kesegaran daging ayam dan udang dengan konsentrasi 4,

6, dan 8% mampu memperpanjang umur simpan daging ayam dan udang selama

penyimpanan suhu dingin, dan pada hasil TPC bahwa serbuk biji pepaya

‘California’ maupun ‘Bangkok’ dapat berpotensi menghambat pertumbuhan

bakteri pada daging ayam dan udang dengan pemberian konsentrasi tertinggi yaitu

8%, maka pada penelitian ini biji pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ mampu

dijadikan sebagai bahan pengawet alami pada daging ayam dan udang.

Pengujian toksisitas subakut ini bertujuan untuk mengetahui tingkat dosis

keamanan dan efek samping yang ditimbulkan dari biji pepaya ‘California’ dan

biji pepaya ‘Bangkok’. Sehingga serbuk biji pepaya dapat digunakan sebagai

produk bahan pengawet makanan terutama menjaga kesegaran pada ikan dan

sejenisnya. Selain itu, dapat dimanfaatkan oleh masyarakat luas dan biji pepaya

dari kedua varietas tersebut tidak lagi menjadi limbah yang terbuang.

1.2 Rumusan Masalah

Apakah pemberian ekstrak biji pepaya (Carica papaya L.) dari dua

varietas berbeda ‘California’ maupun ‘Bangkok’ dapat menimbulkan efek

toksisitas subakut dengan konsentrasi 4, 6, dan 8% berdasarkan parameter

aktivitas enzim SGPT dan SGOT pada serum mencit?

1.3 Tujuan

Mendapatkan informasi tentang efek toksisitas subakut pemberian

ekstrak biji pepaya (Carica papaya L.) dari dua varietas berbeda ‘California’

maupun ‘Bangkok’ dengan konsentrasi 4, 6, dan 8% berdasarkan parameter

aktivitas kadar enzim SGPT dan SGOT pada serum mencit.

1.4 Manfaat

Memberikan informasi tingkat toksisitas subakut biji pepaya ‘California’

maupun biji pepaya ‘Bangkok’ sehingga mengetahui tingkat keamanan terhadap

konsumsi biji pepaya yang digunakan sebagai pengawet.

4

1.5 Kerangka Berpikir

Gambar 1. Kerangka berfikir toksisitas subakut ekstrak biji pepaya ‘California’

dan ‘Bangkok’ pada SGPT dan SGOT mencit swiss webster

5

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Morfologi pepaya „California‟

Tanaman pepaya varietas ‘California’ menjadi salah satu jenis pepaya

yang diminati dan ditanam para petani karena keuntungannya yang menjanjikan.

pepaya ‘California’ memiliki sifat dan ciri khasnya sendiri, yaitu: berukuran tidak

terlalu besar sekitar 1,5 kg/buah, memiliki kulit tebal dan permukaannya rata,

buah berbentuk lonjong, daging buah berwarna kuning, serta mempunyai rasa

yang manis. Varietas pepaya ‘California’ termasuk ke dalam jenis unggul dan

berumur genjah. Pohonnya kerdil lebih pendek dibandingkan dengan jenis pepaya

lain, tingginya sekitar 1,5-2 meter (Gambar 2). Buah pepaya ‘California’ sudah

bisa dipanen setelah berumur 8-9 bulan. Pohonnya dapat berbuah hingga

mencapai umur empat tahun (Nuswamarhaeni, Phihartini & Pohan, 1999).

Gambar 2. Morfologi pohon, buah dan serbuk pepaya ‘California’

(Dokumen pribadi)

2.2 Morfologi pepaya „Bangkok‟

Tanaman pepaya ‘Bangkok’ merupakan jenis pepaya yang berasal dari

Thailand. Buah pepaya jenis ini memiliki ukuran yang sangat besar dibandingkan

dengan jenis pepaya lainnya dan memiliki bentuk yang lebih bulat. Pepaya

‘Bangkok’ memiliki ciri khas utama yaitu memiliki ukuran yang besar

dibandingkan dengan pepaya jenis lainnya dengan berat per buah mencapai 3,5

kg. Buah pepaya ‘Bangkok’ juga memiliki kulit buah yang kasar dan tidak rata

6

(berbenjol-benjol), daging buahnya berwarna jingga kemerahan, sedikit keras,

serta memiliki rasa yang manis dan segar (Gambar 3), (Nuswamarhaeni et al.,

1999).

Gambar 3. Morfologi pohon, buah dan serbuk pepaya ‘Bangkok’

(Dokumen pribadi)

2.3 CMC (Carboxyl Methyl Cellulose)

CMC (Carboxyl Methyl Cellulose) mudah larut dalam air dingin maupun

air panas. Berdasarkan sifat dan fungsinya, CMC dapat digunakan sebagai bahan

aditif pada produk minuman dan aman dikonsumsi. CMC mampu menyerap air

yang terkandung dalam udara. Banyaknya air yang terserap dan laju

penyerapannya bergantung pada jumlah kadar air yang terkandung dalam CMC

dan kelembaban serta temperatur udara disekitarnya (BPOM, 2014). Menurut

Fery (2006), bahwa jumlah CMC yang diijinkan untuk bercampur dengan bahan

lain adalah berkisar dari 0.5 % sampai 3 %, untuk mendapatkan hasil optimum.

Maka dalam penelitian ini menggunakan CMC 1%.

2.4 Toksisitas

Toksisitas dapat diartikan sebagai kemampuan racun (molekul) untuk

menimbulkan kerusakan apabila masuk ke dalam tubuh dan lokasi organ yang

rentan terhadapnya. Toksisitas dipengaruhi oleh beberapa faktor, antara lain

komposisi dan jenis toksikan, konsentrasi toksikan, durasi dan frekuensi

pemaparan, sifat lingkungan, dan spesies biota penerima. Toksikan merupakan zat

berdiri sendiri atau dalam campuran zat, limbah, dan sebagainya yang dapat

menghasilkan efek negatif bagi semua atau sebagian dari tingkat organisasi

7

biologi populasi, individu, organ, jaringan, sel, biomolekul dalam bentuk merusak

struktur maupun fungsi biologis (Soemirat, 2003).

Metode kuantitatif berupa penentuan lethal dose50 (LD50) merupakan

metode tersering yang digunakan dalam penilaian uji toksisitas akut (Paramveer,

2010). Hasil LD50 dapat menentukan kriteria penggolongan derajat toksisitas

substansi fitofarmaka yang diklasifikasikan menjadi luar biasa toksik, sangat

toksik, toksik sedang, toksik ringan, praktis tidak toksik, dan relatif tidak

membahayakan. Uji toksisitas akut adalah uji yang pertama kali dilakukan

terhadap suatu agensia. Uji toksisitas subakut adalah pendedahan dosis secara

berulang yang dilakukan hingga 30 hari. Uji toksisitas kronik adalah pendedahan

dosis secara berulang lebih dari tiga bulan (BPOM, 2014).

2.4.1 Metabolit Sekunder

Kandungan biji dalam buah pepaya kira-kira 14,3 % dari keseluruhan buah

pepaya. Apabila dikaitkan dengan senyawa aktif dari tanaman ini ternyata banyak

diantaranya mengandung alkaloid, steroid, tanin, dan minyak atsiri. Dalam biji

pepaya mengandung senyawa-senyawa steroid (Satriasa dan Pangkahila, 2010)

dan asam lemak tak jenuh yang tinggi, yaitu asam oleat dan palmitat (Yuniwati

dan Purwanti, 2008). Selain mengandung asam-asam lemak, biji pepaya diketahui

mengandung senyawa kimia lain seperti golongan fenol, alkaloid, terpenoid, dan

saponin (Warisno, 2003), glucoside cacirin dan karpain (Setiawan, 2008).

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, hasil skrining biji pepaya

menunjukkan adanya golongan senyawa alkaloid, steroid-triterpenoid, flavonoid,

tanin, saponin dan glikosida (Ramadhani, 2014).

Aktivitas insektisida dari metabolit sekunder pada daun dan biji pepaya

yang bersifat toksik seperti saponin, flavonoid, dan triterpenoid (Wahyuni, 2014).

Alkaloid karpain mekanisme kerjanya menghambat proses metabolisme tubuh

pada ulat, merintangi hormon pertumbuhan, dan mencerna protein dalam tubuh

ulat lalu merubahnya menjadi derivat pepton yang menyebabkan ulat kekurangan

makanan dan akhirnya mati (Utomo, 2010). Saponin adalah racun yang bersifat

polar, larut dalam air, dan ketika masuk ke dalam tubuh ulat akan menyebabkan

hemolisis di pembuluh darah, juga menghambat metamorfosis, pembentukan kulit

8

ulat, yang akan menyebabkan ulat mati (Suirta, 2007). Flavonoid bekerja sebagai

racun perut yang menurunkan nafsu makan ulat yang menyebabkan ulat tidak

dapat merasakan rangsangan makanan sehingga ulat akan mati kelaparan

(Cahyadi, 2009). Triterpen adalah senyawa yang bersifat toksik akut ketika

diaplikasikan secara topikal atau ketika bercampur dengan air. Triterpenoid

menyebabkan penurunan makan dan peningkatan kematian pada ulat (Wahyuni,

2014).

2.4.2 Toksisitas Subakut

Uji toksisitas ini dilakukan dengan memberikan bahan uji berulang-ulang,

biasanya setiap hari atau lima kali seminggu, selama jangka waktu kurang lebih

10% dari masa hidup hewan, yaitu tiga bulan untuk tikus dan satu atau dua tahun

untuk anjing. Meskipun demikian, beberapa peneliti menggunakan jangka waktu

yang lebih pendek, misalnya pemberian zat selama 14 dan 28 hari (Lu, 1995).

Pengamatan yang perlu dilakukan pada toksisitas subakut meliputi:

a. Berat badan dan konsumsi makan

Kedua hal tersebut harus diukur setiap minggu. Berkurangnya

pertambahan berat badan merupakan indeks efek toksik yang sederhana namun

sensitif. Konsumsi makanan merupakan indikator yang berguna sebab bila

konsumsi makanan berkurang dapat menimbulkan efek yang mirip atau

memperberat manifestasi toksik zat kimia.

b. Pengamatan umum

Hal yang diamati adalah penampilan, perilaku, dan semua abnormalitas.

Hewan yang mati atau sakit dipisah dari kandang untuk diperiksa secara umum

dan kalau mungkin secara mikroskopik.

c. Uji laboratorium

Pemeriksaan hematologik mencakup hematokrit, hemoglobin,

penghitungan leukosit total dan penghitungan jenis leukosit. Uji laboratorium

klinik mencakup glukosa darah puasa, SGOT, SGPT, alkali fosfatase, protein

total, albumin, globumin, dan unsur-unsur seperti natrium, kalium, kalsium, dan

klorit. Sedangkan urinalis mencakup warna, berat jenis, protein, glukosa, keton,

unsur berbentuk kristal dan benda amorf (Lu, 1995).

9

2.5 Morfologi dan Klasifikasi Mencit

Hewan uji mencit (Mus musculus) merupakan hewan mamalia, yang

paling sering digunakan dalam penelitian uji toksisitas, sehingga budidaya

mencit (Mus musculus) sangat berkembang, mencit pun peka terhadap perubahan

lingkungan. Kriteria hewan uji tersebut tersedia luas, baik di budidaya di

laboratorium maupun alam, dapat dipelihara dengan baik, memiliki riwayat

genetik. Maka dari itu hewan tersebut cocok dijadikan sebagai hewan uji dalam

penelitian.

Gambar 4. Morfologi hewan uji Mencit (Mus musculus)

Mencit (Mus musculus) secara umum memiliki ciri-ciri tekstur rambut

lembut dan halus, bentuk hidung kerucut terpotong, bentuk badan silindris agak

membesar kebelakang warna rambut putih, mata merah, ekor merah muda dan

berat badan dewasa 25-40 g (betina), 20-40 g (jantan). Mus musculus banyak

digunakan sebagai hewan uji dalam percobaan di dalam laboratorium dengan

beberapa alasan, diantaranya adalah struktur anatomi mencit hampir sama dengan

struktur anatomi manusia selain itu juga perkembangbiakan mencit yang sangat

cepat, disertai siklus hidup yang relatif pendek sehingga memudahkan peneliti

dalam mendapatkannya (Moriwaki, Shiroishi & Yonekawa 1994). Mus musculus

dapat diklasifikasikan sebagai berikut: Class; Mamalia, Ordo; Rodentia, Famili;

Muridae, Genus; Mus, Species; Musculus (Arrington, 1972).

2.6 Hati Mencit

2.6.1 Anatomi dan Fisiologi Hati pada mencit

Hati merupakan kelenjar terbesar dalam tubuh, rata-rata sekitar 1.500 g.

Hati merupakan organ plastis lunak yang tercetak oleh struktur sekitarnya.

Permukaan superior adalah cembung, terletak di bawah kubah kanan diafragma

10

dan sebagian kubah kiri. Bagian bawah hati adalah cekung dan merupakan atap

ginjal kanan, lambung, pankreas, dan usus. Hati mempunyai dua lobus utama,

kanan dan kiri pada mencit. Lobus kanan dibagi segmen anterior dan posterior

oleh fisura segmentalis kanan yang tidak terlihat dari luar. Lobus kiri dibagi

menjadi segmen medial dan lateral oleh ligamentum falsiforme berjalan dari hati

ke diafragma dan dinding depan abdomen (Price & Wilson, 1995).

Dasar unit fungsional hati adalah lobulus hati yang merupakan struktural

silindris dengan panjang beberapa milimeter dan garis tengah 0.8-2 mm. Hati

mencit mengandung 50.000-100.000 lobulus. Dalam septa juga terdapat venula

porta kecil yang menerima darah terutama dari vena saluran pencernaan melalui

vena porta, dari venula ini darah mengalir ke sinusoid hati gepeng dan bercabang

yang terletak diantara lempeng-lempeng hati dan kemudian masuk vena sentralis.

Dengan demikian, sel hati terus menerus terpapar dengan darah vena porta. Selain

vena porta, juga ditemukan arteriol hati di dalam septum interlobularis. Arterol ini

menyuplai darah arteri ke jaringan septum diantara lobulus yang berdekatan dan

banyak arteriol kecil juga mengalir langsung ke sinusoid hati, paling sering pada

sepertiga jarak ke septum interlobularis (Guyton & Hall, 2007).

Sinusoid vena dibatasi oleh dua jenis sel yaitu sel endotel dan sel kupffer

besar yang merupakan makrofag jaringan (sel retikoloendotel), yang mampu

menjaga fagositosis bakteri dan benda asing lain dalam darah sinus hepatikus.

Lapisan endotel sinusoid vena mempunyai pori yang sangat besar, beberapa

dianataranya berdiameter hampir satu mikrometer. Di bawah lapisan ini terletak

diantara sel endotel dan sel hepar, terdapat ruang jaringan yang sangat sempit

yang disebut ruang disse. Jutaan ruang disse kemudian menghubungkan pembuluh

limfe di dalam septum interlobularis. Oleh karena itu, kelebihan cairan di dalam

ruang ini dikeluarkan melalui cairan limfatik (Guyton & Hall, 2007).

2.6.2 Fungsi Hati

Hati merupakan organ parenkim terbesar dan menduduki urutan pertama

dalam hal jumlah, kerumitan, dan ragam fungsi. Hati sangat penting untuk

mempertahankan hidup dan berperan dalam hampir setiap fungsi metabolik tubuh

dan bertanggung jawab atas lebih dari 500 aktivitas yang berbeda. Penelitian pada

11

hewan coba, bahwa pengambilan 80-90% parenkim hati, hewan masih dapat

menunjukkan fungsi hati yang normal. Sehingga untuk menghabiskan daya

cadangan ini, diperlukan penyakit yang mengenai seluruh parenkim hati (Robbin

& Kumar, 1995). Hati merupakan kelenjar tubuh terbesar dan memiliki

multifungsi komplek, diantaranya adalah: 1. Fungsi vaskular untuk menyimpan

darah, 2. Fungsi metabolisme, 3. Fungsi ekskresi, 4. Fungsi proteksi, 5. Fungsi

detoksifikasi.

2.6.3 Tes Gangguan Hati

Mengetahui gangguan fungsi organ tubuh dapat ditentukan melalui tes

laboratorium atau diagnosa dengan pemeriksaan jaringan. Tes laboratorium untuk

evaluasi penyakit hati pada umumnya dapat dikelompokkan menjadi:

1. Diagnosis terhadap hasil ekskresi dan sekresi dari hati

2. Diagnosis terhadap fungsi biokimia yang spesifik

2.6.4 Parameter Kerusakan Hati

Apabila jaringan hati normal diamati secara mikroskopik, maka akan

terlihat penampang jaringan organ yang kompak. Penggunaan pewarnaan

Hematoxylin Eosin metode Harris, maka akan tampak sel-sel tersusun teratur

radial, inti sel berwarna biru dan sitoplasma berwarna merah.

Tanda-tanda kerusakan hati yang dapat diamati secara mikroskopis adalah

degenerasi. Degenerasi merupakan perubahan morfologi sel akibat dari luka yang

tidak mematikan (non letal injury) yang bersifat reversibel. Reversibel karena

apabila rangsangan yang menimbulkan cidera dapat dihentikan, maka sel akan

kembali seperti semula. Tetapi apabila berjalan terus menerus dan dosis

berlebihan, maka akan mengakibatkan nekrosis atau kematian sel yang tidak dapat

pulih kembali (Robbins & Kumar, 1995)

2.7 Enzim

2.7.1 Sifat Umum Enzim

Enzim berfungsi sebagai katalisator dalam sel dan mempunyai sifat yang

sangat khas. Sebagian besar reaksi kimia dalam sel hidup akan terjadi sangat

12

lambat jika tidak dikatalisa oleh enzim (Wilson, 1982). Dalam jumlah yang sangat

kecil, enzim dapat mengatur reaksi tertentu sehingga dalam keadaan normal tidak

terjadi penyimpanan-penyimpanan hasil akhir reaksinya. Enzim akan kehilangan

aktivitasnya akibat panas, asam atau basa kuat dan pelarut organik yang bisa

menyebabkan denaturasi protein (Girinda, 1986). Pada keadaan patologis tertentu

kadar enzim dalam serum dapat digunakan sebagai parameter diagnostik yang

penting (Wilson, 1982).

2.7.2 Enzim SGOT dan SGPT

Transminase adalah sekelompok enzim dan bekerja sebagai katalisator

dalam proses pemindahan gugusan amino antara suatu asam alfa amino dengan

asam alfa keto (Page, 1997). Enzim Serum Glutamat Oxaloasetat Transminase

(SGOT) terdapat dalam sel-sel organ tubuh, yang terbanyak pada otot jantung, sel-

sel hati, otot ginjal dan pankreas. Bila jaringan tersebut mengalami kerusakan

yang akut, kadarnya dalam serum meningkat. Kadar yang meningkat terdapat

pada hepatoseluler nekrosis atau infark miokard (Hadi, 2002).

Prinsip reaksi penentuan kadar enzim SGOT adalah Glutamat

Oksaloasetat Transminase mengkatalisis reaksi antara asam α-ketoglutarat dengan

asam L-aspartat menghasilkan suatu asam oksaloasetat dan asam L-glutamat.

Asam oksaloasetat yang terbentuk, dengan adanya MDH, akan direduksi menjadi

asam malat, bersamaan dengan itu NADH menjadi NAD+. NADH diabsorbsi

pada panjang gelombang 340 nm. Kecepatan penurunan absorbsi pada panjang

gelombang tersebut sebanding dengan aktivitas Serum Glutamat Oxaloasetat

Transminase (SGOT) (Amadea, 1987).

Enzim Serum Glutamat Piruvat Transaminase (SGPT) banyak terdapat

dalam sel-sel jaringan tubuh dan sumber utama adalah sel-sel hati, sedang dalam

jantung dan otot-otot skelet agak kurang jika dibandingkan dengan GOT. Kadar

dalam serum meningkat terutama pada kerusakan dalam hati jika dibandingkan

dengan GOT (Hadi, 2002). Prinsip reaksi penentuan kadar enzim SGPT adalah

Glutamat Piruvat Transaminase mengkatalisis reaksi antara α-ketoglutarat dengan

L-alanin menghasilkan suatu asam piruvat dan asam L-glutamat. NADH

diabsorbsi pada panjang gelombang 340 nm (Amadea, 1987).

13

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei-Oktober 2019 di Rumah

Hewan Fakultas Kedokteran UIN Syarif Hidayatullah dan Pusat Laboratorium

Terpadu (PLT) UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

3.2 Bahan dan Alat

Bahan yang digunakan yaitu ekstrak biji pepaya dua varietas pepaya

yaitu ‘Bangkok’ yang didapatkan dari pertanian rakyat Sukabumi dan

‘California’ dari pertanian rakyat Bogor, akuabidestillata steril, alkohol 70%, es

batu, CMC (Carboxyl Methyl Cellulose) 1%, 28 ekor mencit jantan dewasa

berumur 12 minggu yang didapatkan dari perternakan mencit Pamulang,

makanan dan air minuman mencit, sekam mencit, reagent SGOT dan SGPT

merk reiged.

Alat yang digunakan meliputi timbangan analitik, timbangan manual,

glinder, inkubator, alat sentrifugasi, spektrofotometri uv-vis, homogenizer,

erlenmeyer, hot plate, gelas ukur, micropipet 100 microlite dan 1000 microlite,

vortex, batang pengaduk, kandang mencit ukuran 120 x 40 cm, botol minum

mencit, jarum gavage, mikrotube 1,5 mL, tip yellow dan blue, syiringje 1 mL,

coolbox, pipa kapiler, 1 set alat bedah, beaker glass, botol kaca.

3.3 Rancangan Percobaan

Rancangan penelitian yang digunakan dalam penelitian toksisitas

subakut untuk hewan uji mencit adalah RAK. Penelitian terhadap 28 mencit

jantan dewasa, usia 12 minggu, berat badan 29-40 g yang dibagi secara acak

menjadi 1 kelompok kontrol, 3 kelompok perlakuan ekstrak biji pepaya

‘California’ dan 3 kelompok perlakuan ekstrak biji pepaya ‘Bangkok’ dan

masing-masing kelompok terdiri 4 ekor mencit. Pada masing-masing kelompok

perlakuan mencit dipaparkan ekstrak tersebut dengan konsentrasi 4, 6, dan 8 %

(b/v) yang dilarutkan menggunakan CMC 1%.

14

3.4 Desain Penelitian

Gambar 5. Desain penelitian toksisitas subakut ekstrak biji pepaya varietas

‘California’ dan ‘Bangkok’ pada SGPT dan SGOT mencit swiss

webster

15

3.4 Cara Kerja

3.4.1 Ekstraksi Biji Pepaya „California‟ dan „Bangkok‟

Biji pepaya yang telah dikumpulkan sebanyak 20 kg dibersihkan dari

kulit arinya, selanjutnya dicuci dibawah air mengalir sampai bersih, ditiriskan,

lalu dikeringkan. Sampel yang telah kering dibuat dalam bentuk serbuk dengan

menggunakan glinder. Kemudian serbuk dicampurkan dengan pelarut CMC

(Carboxyl Methyl Cellulose) 1% (Gunawan & Mulyani, 2004).

3.4.2 Persiapan Hewan Uji

Hewan percobaan yang digunakan pada penelitian ini adalah mencit

jantan (Mus musculus) Swiss Webster yang didapatkan dari perternakan mencit

pamulang, yang berumur 12 minggu, berat badan 29-40 g. Mencit dipelihara di

ruang pemeliharaan rumah hewan, Fakultas Kedokteran UIN Syarif

Hidayatullah Jakarta, yang diberi penerangan dari pukul 16.00-05.00 WIB

sedangkan dari pukul 05.00-16.00 diterangi sinar matahari dan ditempatkan

pada suhu ruang pada setiap harinya. Mencit diletakkan pada kandang yang

terbuat dari plastik dan pada bagian alas kandang diberi sekam. Pada bagian

atas tutup kandang terbuat dari kawat. Pada tutup terdapat lubang yang

berfungsi untuk memasukkan ujung botol minum. Seluruh kandang

ditempatkan pada satu rak diruang pemeliharaan hewan.

Kandang dibersihkan setiap tiga hari sekali dengan mencuci dan

mengganti sekam, sedangkan botol minum dibersihkan setiap 2 minggu sekali.

Mencit diberi pakan 5 g perhari sedangkan air minum diberikan secara ad

libitum. Pakan yang diberikan adalah pakan anak babi 551.

3.4.3 Penentuan Konsentrasi yang digunakan untuk Mencit (Mus

musculus)

Pada penelitian ini konsentrasi ekstrak biji pepaya ‘California’ dan

‘Bangkok’ diperoleh dari penelitian sebelumnya yang telah dilakukan oleh

Awaliah, Fitri & Radiastuti (2019) didapat sebesar konsentrasi 4, 6, dan 8%

(b/v) dalam larutan CMC 1 %.

16

3.4.4 Uji Toksisitas Subakut pada Mencit (Mus musculus)

Mencit dibagi secara acak yaitu tiga kelompok perlakuan yang

diberikan ekstrak biji pepaya ‘California’ tiga kelompok perlakuan diberikan

biji pepaya ‘Bangkok’ dan 1 kelompok perlakuan diberikan CMC 1% saja

sebagai kontrol. Mencit yang telah didistribusikan diletakkan pada masing-

masing kandang. Kemudian pada ekor mencit masing-masing kelompok

diberikan tanda dengan menggunakan spidol pada ekornya, misalnya strip 1

(1coretan) untuk individu ke 1 dan seterusnya. Kemudian setelah itu untuk

masing-masing kandang diberikan tanda sesuai dengan konsentrasi yang akan

didedahkan.

Mencit dilakukan penimbangan berat badan setiap harinya, kemudian

mencit didedahkan ekstrak biji pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ dengan

konsentrasi 4, 6, dan 8 % (b/v) yang telah dicampurkan pelarut CMC 1%

dengan cara gavage dengan cara diarahkan kebagian rongga mulut

menggunakan jarum gavage tegak lurus sampai masuk ke dalam lambung.

Tepatnya daerah pendedahan ditandai dengan lancarnya jarum gavage saat

masuk ke lambung. Pendedahan dilakukan setiap hari selama 28 hari, setelah

mencit didedahkan larutan ekstrak biji pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’

kemudian dilakukan pengamatan kondisi fisik mencit (Mus musculus) seperti

kulit dan rambut, mata dan mukosa, pernafasan, aktivitas motorik, tremor,

salivasi, diare, letargi (terseret-seret).

3.4.5 Pengamatan Fisik Mencit (Mus musculus)

Pada pengamatan kondisi fisik mencit hal pertama yang dilakukan

adalah mengamati setiap kelompok mencit setelah didedahkan ekstrak biji

pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ dengan konsentrasi 4, 6, dan 8% (b/v).

Semua kelompok perlakuan diamati setiap hari selama 28 hari. Fisik yang

diamati, seperti kulit dan rambut, mata dan mukosa, pernapasan, aktivitas

motorik, tremor, salivasi, diare, dan letargi (terseret-seret).

17

3.4.6 Uji Aktivitas Enzim SGOT dan SGPT

Uji Serum Glutamat Oxaloasetat Transminase (SGOT) dan Serum

Glutamat Piruvat Transaminase (SGPT) dilakukan dengan cara mengambil

darah mencit melalui vena jungularis yang terdapat pada sekitar areal mata

menggunakan pipa kapiler dan ditampung pada tabung mikro yang telah

disterilisasi. Darah yang diperoleh disentrifus pada kecepatan 4000 rpm selama

10 menit (Safwan et al., 2017). Lapisan serum diambil sebanyak 100 mikrolit

untuk pengukuran aktivitas Serum Glutamat Oxaloasetat Transminase (SGOT)

dan Serum Glutamat Piruvat Transaminase (SGPT). Serum yang didapatkan

dimasukkan ke dalam mikrotube baru yang telah disterilisasi dan dibawa ke

suhu kamar (15-300C). Diatur spektrofotometer ke 0 (nol) menggunakan air

suling dengan panjang gelombang 340 nm. Sampel serum diambil sebanyak 50

mikrolit, reagent 1 sebanyak 400 mikrolit dan reagent 2 sebanyak 100 mikrolit

kemudian dicampur dan inkubasi 370C. Setelah 60 detik, dibaca dan dicatat

absorbansinya. Pembacaan absorbansi diulangi tepat setelah 1, 2 dan 3 menit.

Hasil data diperoleh dan diolah dengan menghitung perbedaan absorbansi rata-

rata per menit (Abs/Min). Hasil abs/menit yang didapat dikalikan dengan faktor

1746 (faktor untuk SGOT) sedangkan SGPT dengan faktor 1768 yang akan

menghasilkan hasil dalam U/L (Bergmeyer, Horder & Rej, 1986).

3.4.7 Pembedahan dan Pengamatan Organ Viseral Mencit (Mus

musculus)

Sebelum pembedahan mencit harus dimatikan terlebih dahulu dengan

cara dislokasi pada bagian leher mencit menggunakan alat tumpul untuk

menekan bagian leher, sedangkan bagian ekor mencit ditarik sampai mencit

tidak bergerak atau mati. Setelah mencit mati dilakukan pembedahan dengan

menggunakan gunting bedah dimulai dari bagian anus. Organ viseral yang

diamati adalah jantung, paru-paru, lambung, usus, hati pankreas, ginjal, limpa.

Organ tersebut diberi alas alumunium foil kemudian ditimbang. Setelah

ditimbang organ viseral tersebut diamati secara makroskopis. Organ viseral

dibandingkan dengan kontrol dengan melihat dari warna organ.

18

3.5 Analisis Data

Data Serum Glutamat Oxaloasetat Transminase (SGOT) dan Serum

Glutamat Piruvat Transaminase (SGPT) yang telah diperoleh kemudian diolah

dengan program SPSS (Statistical Product and Service Solution) 25.0 for

windows dengan menggunakan uji Parametrik Anova. Uji ini untuk mengetahui

adanya perbedaan antar perlakuan konsentrasi.

19

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Uji Toksisitas Subakut

Uji toksisitas subakut dilakukan dengan pemberian ekstrak biji pepaya

varietas ‘California’ dan ‘Bangkok’ dengan variasi konsentrasi (0, 4, 6 dan 8

(%/b/v) pada mencit dewasa dengan berat 29-40 g. Menurut penelitian yang telah

dilakukan oleh Awaliah, Fitri & Radiastuti (2019) pada uji antibakteri ekstrak biji

pepaya bahwa konsentrasi dari 4, 6 dan 8% efektif untuk menghambat mikroba.

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan oleh Umana (2013) & Kanadi

(2019) bahwa uji toksisitas akut selama 96 jam dengan dosis tertinggi yaitu 5000

mg/kg b.b tidak didapatkan adanya kematian mencit dan perubahan perilaku pada

hewan uji mencit. Namun dalam uji toksisitas subakut dengan pemberian ekstrak

biji pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ dengan konsentrasi 4, 6, dan 8 % (b/v)

selama 28 hari tidak ditemukan adanya kematian serta perubahan kondisi fisik

pada mencit, dapat dilihat pada (Tabel 1), sehingga di nilai LD50 dikatakan 0

karena tidak ada dosis letal.

Maka penelitian ini dilakukan uji lanjut dengan pengujian Serum Glutamat

Oxaloasetat Transminase (SGOT) dan Serum Glutamat Piruvat Transaminase

(SGPT) pada mencit melalui pengambilan darah lewat vena jungalaris untuk

mengetahui derajat kerusakan yang mungkin ditimbulkan akibat pemberian

ekstrak biji pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ dalam jangka waktu tertentu

dan peningkatan aktivitas enzim SGPT dan SGOT pada serum darah mencit.

4.2 Berat Badan Mencit

Berdasarkan hasil pengukuran berat badan pada Gambar 6 (ekstrak biji

pepaya ‘California’ dan Gambar 7 (ekstrak biji pepaya ‘Bangkok’) bahwa

dihasilkan berat badan yang bervariasi pada setiap perlakuan. Pada semua

kelompok perlakuan dengan konsentrasi 4, 6 dan 8 % (b/v) menunjukkan hasil

semua berat badan mengalami peningkatan. Menurut BPOM (2014), mengatakan

bahwa parameter berat badan tersebut perlu dilakukan, dikarenakan berat badan

merupakan indikasi teringan untuk uji toksisitas.

20

Pada penelitian ini hewan uji yang digunakan adalah mencit jantan, seperti

yang telah dikatakan oleh Kahn dan Wein (1994) bahwa mencit jantan lebih

rentan terhadap zat-zat toksik dibandingkan mencit betina. Pemberian senyawa

pada hewan coba memiliki dosis maksimum (yaitu 5000 mg/kg bb).

Gambar 6. Berat badan mencit selama 28 hari yang telah didedahkan ekstrak biji

pepaya ‘California’

Gambar 7. Berat badan mencit selama 28 hari yang telah didedahkan ekstrak biji

pepaya ‘Bangkok’

Berdasarkan parameter berat badan yang telah didedahkan ekstrak biji

pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ dengan konsentrasi 4, 6 dan 8% menunjukkan

bahwa pada hari ke-1 hingga hari ke-28 pada semua kelompok perlakuan

mengalami penambahan berat badan, maka penelitian ini menandakan bahwa

hewan uji tersebut tidak adanya sakit atau derita setelah pemberian ekstrak biji

pepaya dari kedua varietas tersebut. Walaupun berat badan mencit mengalami

33

34

35

36

37

38

39

40

0 4 6 8

Ber

at

Ba

da

n (

g)

Konsentrasi ekstrak biji pepaya 'California' (%)

Hari ke-

1 2 3 4

5 6 7 8

9 10 11 12

13 14 15 16

17 18 19 20

21 22 23 24

25 26 27 28

34

34,5

35

35,5

36

36,5

37

37,5

38

0 4 6 8

Ber

at

Bad

an

(g)

Konsentrasi ekstrak biji pepaya 'Bangkok' (%)

Hari ke-

1 2 3 4

5 6 7 8

9 10 11 12

13 14 15 16

17 18 19 20

21 22 23 24

25 26 27 28

21

peningkatan pada semua kelompok tetapi masih dalam kisaran range 20%,

sehingga berat badan tersebut masih dapat digunakan dalam parameter uji

toksisitas.

Pada pengamatan berat badan setelah didedahkan ekstrak biji pepaya

‘California’ maupun ‘Bangkok’ didapatkan hasil yang selalu meningkat dengan

semakin tingginya konsentrasi yang digunakan. Hal ini diduga dalam hasil uji

GC-MS menurut Awaliah, Fitri dan Radiastuti (2019) bahwa ekstrak biji pepaya

dari dua varietas yang berbeda tersebut terdapat kandungan senyawa aktif yang

bersifat toksik seperti alkaloid dan senyawa lainnya, yaitu endosper biji pepaya

sebagai cadangan glukosa yang dapat memacu terjadinya peningkatan berat badan

mencit, adapun faktor lain yang menyebabkan terjadinya peningkatan adalah

pemberian pakan atau nutrien yang terdapat dalam pakan mencit.

Menurut Smith dan Mangkoewidjojo (1988) mengatakan bahwa kondisi

yang mengindikasikan hewan mengalami sakit atau derita umumnya saat berat

badan yang telah menurun lebih dari 20% dibandingkan dengan hewan kontrol,

atau berat badan yang telah menurun lebih dari 20% selama periode 7 hari atau

lebih biasanya disertai dengan konsumsi makan yang menurun. Pertumbuhan

mencit ada dua fase yaitu fase tumbuh cepat saat laju pertambahan bobot badan

mencit meningkat tajam, dan fase yang kedua yaitu fase tumbuh lambat saat laju

pertambahan bobot badan mulai menurun sampai menjadi nol yaitu hewan telah

mencapai dewasa tubuh. Smith dan Mangkoewidjojo (1988) menyatakan bahwa

rata-rata pertambahan bobot badan seekor mencit adalah 1 g/ekor/hari.

Menurut penelitian (Siburian, Marlina & Johari, 2008) menyatakan

pemberian ekstrak biji pepaya dengan dosis 50 mg kg/BB, 75 mg kg/BB dan 10

mg kg/BB pada mencit betina selama 10 hari pada tahap pracopulasi tidak

berpengaruh nyata terhadap berat badan. Kurva pertumbuhan mencit berbentuk

sigmoid dan cenderung mengalami peningkatan yang cepat (akselerasi) pada umur

21-42 hari karena pada saat itu mencit mulai memasuki masa dewasa kelamin dan

mengalami penurunan sesaat kemudian meningkat kembali hingga memasuki

umur 54 hari. Pada umur 54-57 hari mencit memasuki umur dewasa tubuh,

dimana pertumbuhannya sudah mulai konstan dan sedikit mengalami peningkatan

(Pribadi, 2008). Penambahan berat badan dapat digunakan sebagai kriteria untuk

22

mengukur pertumbuhan yaitu suatu proses yang sangat kompleks yang meliputi

pertambahan berat badan dan perkembangan semua bagian tubuh secara serentak

dan merata. Nilai pertambahan berat badan diperoleh melalui pengukuran berat

badan yang dilakukan secara berkala pada waktu tertentu.

4.3 Kondisi Fisik Mencit

Pengamatan makroskopis dengan paparan ekstrak biji pepaya ‘California’

dan ‘Bangkok’ yang didedahkan terhadap mencit tidak berpengaruh terhadap

parameter fisik seperti kulit dan rambut, mata dan mukosa, pernapasan, aktivitas

motorik, tremor, salivasi, diare, dan letargi.

Tabel 1. Kondisi fisik mencit setelah didedahkan ekstrak biji pepaya ‘California’

dan ‘Bangkok’ dosis 0, 4, 6 dan 8% (b/v)

Hari

ke-

Kulit

dan

rambu

t

Mata

dan

mukos

a

Pernapasa

n

Aktivita

s dan

motorik

Tremo

r

Salivas

i

Diare Letarg

i

1 0 0 0 0 0 0 0 0

2 0 0 0 0 0 0 0 0

3 0 0 0 0 0 0 0 0

4 0 0 0 0 0 0 0 0

5 0 0 0 0 0 0 0 0

6 0 0 0 0 0 0 0 0

7 0 0 0 0 0 0 0 0

8 0 0 0 0 0 0 0 0

9 0 0 0 0 0 0 0 0

10 0 0 0 0 0 0 0 0

11 0 0 0 0 0 0 0 0

12 0 0 0 0 0 0 0 0

13 0 0 0 0 0 0 0 0

14 0 0 0 0 0 0 0 0

23

15 0 0 0 0 0 0 0 0

16 0 0 0 0 0 0 0 0

17 0 0 0 0 0 0 0 0

18 0 0 0 0 0 0 0 0

19 0 0 0 0 0 0 0 0

20 0 0 0 0 0 0 0 0

21 0 0 0 0 0 0 0 0

22 0 0 0 0 0 0 0 0

23 0 0 0 0 0 0 0 0

24 0 0 0 0 0 0 0 0

25 0 0 0 0 0 0 0 0

26 0 0 0 0 0 0 0 0

27 0 0 0 0 0 0 0 0

28 0 0 0 0 0 0 0 0

Keterangan : 0: tidak ada gangguan/ kondisi fisik normal

1: Jumlah adanya gangguan kondisi fisik mencit

Berdasarkan hasil penelitian ini setelah pemberian ekstrak biji pepaya

‘California’ dan ‘Bangkok’ dengan konsentrasi 4, 6, dan 8% (b/v) selama 28 hari

didapatkan hasil yang menunjukkan normal, dan terlihat masih aktif pada semua

kelompok perlakuan pada pengamatan kondisi fisik. Hewan uji mencit tersebut

tidak ditemukan penyakit atau perubahan pada tubuh mencit jika dibandingkan

dengan kelompok kontrol yang telah didedahkan CMC (Carboxyl Methyl

Celullose) 1%. Hal ini dikarenakan bahwa zat aktif yang terdapat pada ekstrak biji

pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ yang telah didedahkan setiap harinya

tidak menimbulkan kondisi fisik dengan dosis tersebut. Parameter fisik yang

ditunjukkan merupakan respon tubuh mencit terhadap adanya racun di dalam

tubuh.

Pada penelitian ini menggunakan pelarut CMC yang merupakan garam

natrium dari polikarboksimetil eter selulosa, mengandung tidak kurang dari 6,5%

24

dan tidak lebih dari 9,5%, Natrium (Na) dihitung terhadap zat yang telah

dikeringkan. CMC berupa serbuk atau granul berwarna putih sampai krem dan

bersifat higroskopik. CMC mudah terdispersi dalam air membentuk larutan

koloidal (Direktorat Jendral Pengawasan Obat & Makanan RI, 1995). CMC

merupakan polimer semisintetik yang diperoleh dari substitusi parsial gugus

hidroksil dalam selulosa dengan gugus –OCH2COONa dan pelarutan dalam air,

CMC berupa cairan kental transparan (Mitsui, 1997). Menurut Fery (2006), bahwa

jumlah CMC yang diijinkan untuk bercampur dengan bahan lain adalah berkisar

dari 0.5 % sampai 3 %, untuk mendapatkan hasil optimum, maka dalam penelitian

ini menggunakan CMC 1%.

4.4 Kadar GOT dan GPT serum mencit

Pada hasil GOT dan GPT serum darah mencit setelah didedahkan ekstrak

biji pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ bahwa mengalami peningkatan pada

semua kelompok perlakuan jika dibandingkan dengan kelompok kontrol. Hasil

aktivitas enzim Serum Glutamic Oxalosetic Transaminase (SGOT) dan Serum

Glutamic Pyruvic Transminase(SGPT) pada penelitian ini ditampilkan pada

Gambar 8 (GOT biji pepaya ‘California’), Gambar 9 (GOT biji pepaya

‘Bangkok’), Gambar 10 (GPT biji pepaya ‘California’) dan Gambar 11 (GPT biji

pepaya ‘Bangkok’).

Gambar 8. Rata-rata kadar GOT (U/I) serum mencit setelah dipaparkan ekstrak

biji pepaya ‘California’ selama 28 hari secara gavage

*54.51*

*90.21*

*113.49*

*139.68*

0

20

40

60

80

100

120

140

160

1 2 3 4

Kad

ar

GO

T (

U/I

)

Konsentrasi ekstrak biji pepaya 'California' (%)

SGOT

25

Gambar 9. Rata-rata kadar GOT (U/I) serum mencit setelah dipaparkan ekstrak

biji pepaya ‘Bangkok’ selama 28 hari secara gavage

Gambar 10. Rata-rata kadar GPT (U/I) serum mencit setelah dipaparkan ekstrak

biji pepaya ‘California’ selama 28 hari secara gavage

*54.51*

*128.04* *161.5* *178.96*

0

50

100

150

200

250

0 4 6 8

Kad

ar

GO

T (

U/I

)

Konsentrasi ekstrak biji pepaya 'Bangkok' (%)

SGOT

43.65

57.46

75.14

*98.71*

0

20

40

60

80

100

120

0 4 6 8

Kad

ar

GP

T (

U/I

)

Konsentrasi ekstrak biji pepaya 'California' (%)

SGPT

26

Gambar 11. Rata-rata kadar GPT (U/I) serum mencit setelah dipaparkan ekstrak

biji pepaya ‘Bangkok’ selama 28 hari secara gavage

Berdasarkan hasil SGOT serum mencit setelah didedahkan ekstrak biji

pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ bahwa mengalami peningkatan pada

semua kelompok perlakuan jika dibandingkan dengan kelompok kontrol. Pada

hasil uji Anova parameter SGOT menunjukkan bahwa pada semua konsentrasi 0,

4, 6 dan 8% didapatkan hasil yang signifikan atau berbeda nyata, dapat dilihat

pada (Lampiran 1). Hal ini menyatakan bahwa berdasarkan hasil uji lanjut Tukey

pada perlakuan jenis pepaya dan konsentrasi berpengaruh pada semua kelompok

perlakuan dengan ditandai adanya peningkatan pada kadar SGOT serum darah

mencit dapat dilihat pada (Lampiran 2).

Berdasarkan hasil SGPT serum mencit setelah didedahkan ekstrak biji

pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ bahwa mengalami peningkatan juga pada

semua kelompok perlakuan jika dibandingkan dengan kelompok kontrol. Namun

hasil uji Anova parameter SGPT menunjukkan bahwa hanya pada konsentrasi 8%

saja yang didapatkan hasil signifikan atau berbeda nyata. Sedangkan pada

konsentrasi 0, 4, dan 6% didapatkan hasil yang tidak signifikan, dapat dilihat pada

(Lampiran 3). Hal ini menyatakan bahwa berdasarkan hasil uji lanjut Tukey pada

perlakuan jenis pepaya dan konsentrasi hanya berpengaruh pada konsentrasi

tertinggi saja yaitu 8% dengan ditandai adanya peningkatan pada kadar SGPT

serum darah mencit, dapat dilihat pada (Lampiran 4).

43.65 53.03 58.93

*85.45*

0

20

40

60

80

100

120

0 4 6 8

Kad

ar

GP

T (

U/I

Konsentrasi ekstrak biji pepaya 'Bangkok' (%)

SGPT

27

Pada hasil peningkatan kadar SGOT maupun SGPT serum darah mencit

dapat disebabkan karena adanya senyawa-senyawa zat aktif yang bersifat toksik

pada ekstrak biji pepaya ‘California’ maupun ‘Bangkok’ tersebut. Menurut

(Warisno, 2003) bahwa senyawa yang bersifat toksik atau racun adalah alkaloid.

Namun zat-zat aktif tersebut jika dikonsumsi dengan dosis yang yang tepat akan

bermanfaat bagi tubuh. Sedangkan jika dikonsumsi dengan dosis yang tidak tepat

diduga dapat menyebabkan efek toksik terhadap hati. Namun pada hasil uji GC-

MS ekstrak biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ yang telah dilakukan oleh

Awaliah, Fitri & Radiastuti (2019) bahwa golongan senyawa Dodecanoic acid

(HO2C (CH2) 10Me), Phenol, 2,4-bis, Methyl ester of Benzylcarbamic acid,

3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1 dapat berpotensi toksik terhadap hati,

dikarenakan senyawa tersebut tidak dapat larut dalam air.

Namun hasil tersebut walaupun mengalami peningkatan pada kadar SGOT

dan SGPT jika dibandingkan dengan ambang batas normal dinyatakan masih

aman untuk dikonsumsi, sehingga tidak berpotensi toksisitas pada hati. Menurut

Guyton dan hall (2007) bahwa aktivitas kadar normal enzim Serum Glutamic

Oxalosetic Transaminase (SGOT) sebesar 70-400 U/I dan Serum Glutamic

Pyruvic Transaminase (SGPT) yaitu sebesar 25-200 U/I.

Menurut penelitian yang telah dilakukan oleh (Safwan, 2017) mengenai uji

toksisitas subakut dengan parameter SGOT dan SGPT didapatkan hasil yang

menunjukkan bahwa pada hasil uji Anova tidak adanya perbedaan yang bermakna

untuk semua kelompok (p>0,05). Hasil ini menunjukkan perlakuan ekstrak biji

pepaya dengan dosis 50 mg/kg b.b, 500 mg/kg b.b dan 5000 mg/kg b.b tidak

berpengaruh pada aktivitas enzim SGOT dan SGPT pada mencit. Dari hasil

penelitian ini menunjukkan bahwa toksisitas secara subakut tidak terjadi pada

ekstrak biji pepaya dilihat dari parameter SGOT dan SGPT.

Kerusakan hati dapat dinilai dengan terjadinya peningkatan kadar aktivitas

enzim SGOT dan SGPT dalam darah. Peningkatan kadar SGOT dan SGPT dapat

mencapai 20-100 kali di atas batas normal tertinggi apabila terjadi nekrosis pada

sel hati yang disebabkan oleh obat-obatan dan bahan toksis (Sacher, Ronald &

Richard, 2002). Terjadinya kerusakan pada hati disebabkan oleh gangguan

keseimbangan dari ion-ion, cairan atau produk-produk metabolisme seperti lemak

28

bebas maupun hasil penguraian dari membran fosfolipid. Pada keadaan tersebut

dapat menyebabkan terjadinya gangguan keseimbangan cairan yang berupa

pembengkakan sel maupun degenerasi seluler (Evans & Butler, 1993).

Parameter yang digunakan pada penelitian toksisitas ini adalah aktivitas

kadar enzim SGOT dan SGPT untuk melihat adanya kerusakan hati. SGOT dan

SGPT atau aspartate aminotransferase (AST) merupakan sebuah enzim yang

biasanya terletak dalam sel-sel hati. Enzim ini akan dilepaskan menuju ke darah

ketika hati atau jantung rusak. Tingkat SGOT dan SGPT dalam darah signifikan

dengan tingginya kerusakan hati atau kerusakan jantung. Beberapa obat pun juga

dapat meningkatkan aktivitas SGOT dan SGPT. Pada jumlah kecil enzim ini

ditemukan pada otot jantung, ginjal dan otot rangka (Wibowo, 2008).

Secara farmakologik setiap zat aktif yang dimiliki oleh tumbuhan seperti

fenol, alkaloid, terpenoid, saponin yang masuk ke dalam tubuh akan mengalami

proses farmakodinamik dan farmakokinetik. Biji pepaya yang dikomsumsi akan

melalui absorbsi di usus, di distribusikan ke seluruh tubuh untuk mengalami

proses metabolisme di hepar dan selanjutnya zat-zat yang tidak berbahaya di

ekskresikan melalui ginjal (Richard, 2002).

Sel hati menjadi organ yang sangat berpotensi mengalami peradangan atau

kerusakan sel hati pada umumnya ditunjukkan dengan peningkatan enzim

transminase seperti SGOT dan SGPT. Enzim dari detoksifikasi pada hati

menyebabkan enzim tersebut dapat digunakan sebagai parameter kerusakan hati.

Kerusakan membran sel menyebabkan enzim Glutamat Oksaloasetat

Transminase (GOT) keluar dari sitoplasma sel yang rusak dan jumlahnya

meningkat di dalam darah, sehingga hal tersebut dapat dijadikan indikator

kerusakan hati (Ronald, 2004).

Fungsi hati yang tidak normal sering terindikasi terjadi kerusakan pada

hati, tetapi sebaliknya pada tes fungsi hati yang normal tidak selalu menunjukkan

hati dalam keadaan normal atau bebas dari penyakit. Karena pada kasus penyakit

hati kronis (menahun dan berjalan perlahan), dapat ditemukan kadar enzim SGOT

dan SGPT yang normal atau hanya sedikit meningkat. Kondisi ini sering

ditemukan pada kasus hepatitis B kronik atau hepatitis C kronik.

29

Enzim hati meningkat ketika sel-sel hati mengalami kerusakan yang masif,

sedangkan pada infeksi hati kronik (menahun), sel hati mengalami kerusakan

secara perlahan-lahan sehingga kenaikan SGOT dan SGPT tidak signifikan

bahkan terlihat normal. Salah satu indikasi kerusakan hati adalah pada aktivitas

SGOT dan SGPT, oleh karena itu pada penelitian ini diperlukan jenis pemeriksaan

lainnya seperti uji histologi (Kirsch, Robson & Meissner, 1991), tetapi dalam

penelitian ini uji histologi tidak dilakukan karena membutuhkan waktu yang

sangat lama.

4.5 Berat organ viseral mencit

Pada penelitian uji toksisitas subakut dengan pemaparan ekstrak biji

pepaya selama 28 hari kemudian pada hari ke-29 dilakukan uji SGOT dan SGPT

menggunakan spektrofotometer kemudian dilakukan uji lanjut dengan

pembedahan untuk melihat morfologi dan berat organ viseral pada mencit yang

telah didedahkan ekstrak biji pepaya dengan variasi konsentrasi 4, 6 dan 8 % (b/v)

serta pemberian CMC 0% (b/v) (kontrol). Hasil dari berat organ viseral tersebut

dapat dilihat pada (tabel 2 dan tabel 3 berat organ viseral atau berat badan),

sedangkan tabel pengamatan secara makroskopis morfologi dapat dilihat pada

tabel 4.

Tabel 2. Berat organ viseral mencit setelah dipaparkan ekstrak biji pepaya

‘California’ selama 28 hari Konsentra

si ekstrak

biji pepaya

„California

‟ (%)(b/v)

Organ viseral (g)

Hat

i

Ginjal Limpa Usu

s

Lambun

g

Pankrea

s

Jantung Paru

-

paru

0 1.18 0.49 0.12 2.45 0.25 0.16 0.13 0.15

4 1.52 0.41 0.07 3.45 0.47 0.29 0.12 0.11

6 1.41 0.38 0.05 2.58 0.33 0.26 0.12 0.13

8 1.52 0.41 0.07 3.47 0.47 0.29 0.12 0.13

30

Tabel 3. Berat organ viseral mencit setelah dipaparkan ekstrak biji pepaya

‘Bangkok’ selama 28 hari Konsentra

si ekstrak

biji pepaya

„Bangkok‟

(%)(b/v)

Organ viseral (g)

Hati Ginjal Limpa Usus Lambun

g

Pankrea

s

Jantun

g

Paru

-paru

0 1.18 0.49 0.12 2.45 0.25 0.16 0.13 0.15

4 2.00 0.68 0.16 2.12 0.49 0.20 0.18 0.23

6 1.77 0.45 0.11 2.47 0.40 0.34 0.22 0.21

8 2.00 0.57 0.13 3.50 0.58 0.20 0.22 0.19

Berdasarkan hasil tabel 2 dan tabel 3 bahwa berat organ viseral setelah

dipaparkan ekstrak biji pepaya ‘California’ maupun Bangkok selama 28 hari

menunjukkan bahwa adanya perbedaan dari masing-masing kelompok perlakuan.

Namun pada pengamatan ini jika dikaitkan dengan organ hati mencit bahwa

menunjukkan hasil rata-rata berat hati hewan uji pada semua kelompok perlakuan

tersebut masih dalam kisaran yang normal. Menurut Rogers dan Renee (2012),

bahwa berat hati mencit berkisar antara 1,5-2 g, maka hasil tersebut menandakan

bahwa tidak adanya pengaruh dari pemberian ekstrak biji pepaya ‘California’

maupun ‘Bangkok’ terhadap kerusakan organ-organ viseral mencit.

Namun jika dilihat pada hasil berat organ viseral ginjal didapatkan hasil

yang masih dalam batasan normal. Menurut Price et al. (2006) mengatakan bahwa

berat ginjal normal mencit berkisar antara 1-1,5 g. Ginjal merupakan organ yang

berperan penting di dalam tubuh, selain hati yang menjadi organ sasaran dalam uji

toksisitas namun ginjal juga merupakan organ sasaran toksik karena ginjal

merupakan organ ekskresi yang dilewati oleh sebagian darah tubuh. Ginjal terdiri

dari glomerulus yang berperan dalam memfiltrasi darah yang masuk. Selanjutnya

terjadi proses absorbsi dan reabsorpsi di dalam tubulus proksimal dan distal yang

berakhir pada tubulus pengumpul sehingga menjadi zat-zat yang berbahaya bagi

tubuh akan di ekskresikan oleh ginjal.

Berdasarkan hasil berat organ viseral limpa mencit didapatkan hasil yang

masih dibawah normal setelah didedahkan ekstrak biji pepaya ‘California’ dan

31

‘Bangkok’ jika dibandingkan dengan kelompok kontrol dan ambang batas normal.

Menurut Bratawidjaja (2012) mengatakan bahwa berat normal limpa mencit

berkisar 0,5-1 g. Limpa merupakan tempat respon imun utama yang merupakan

saringan terhadap antigen asal darah. Namun pada hasil berat organ viseral

lainnya seperti jantung, paru-paru, lambung, usus, dan pankreas belum dapat

dibandingkan dengan hasil penelitian sebelumnya dikarenakan belum ada yang

melakukan penelitian terhadap organ viseral tersebut. Perubahan bobot, fisiologis,

dan morfologis hepar berkaitan dengan pakan yang dikonsumsi, kesehatan, dan

asupan zat toksik dalam tubuh hewan (Rust, 2002). Hasil ini menunjukkan bahwa

pemberian pakan dan bahan uji dengan konsentrasi yang diberikan tersebut diduga

tidak berpengaruh terhadap berat badan dan berat hati.

Tabel 4. Morfologi organ viseral mencit setelah dipaparkan ekstrak biji pepaya

‘California’ dan ‘Bangkok’ selama 28 hari Organ Konsentrasi % (b/v)

0 4 6 8

Paru-

paru

Merah Segar Merah

Segar

Merah Segar Merah

Segar

Jantung Merah Hati Merah Hati Merah Hati Merah Hati

Lambung Putih

sedikit

kuning

Putih

sedikit

kuning

Putih sedikit

kuning

Putih

sedikit

kuning

Usus Putih Putih Putih Putih

Pankreas Putih sedikit

merah

Putih

sedikit

merah

Putih sedikit

merah

Putih

sedikit

merah

Ginjal Merah hati

segar

Merah hati

segar

Merah hati

segar

Merah hati

segar

Limpa Merah tua Merah tua Merah tua Merah tua

Hati Merah hati Merah hati Merah hati Merah hati

32

Berdasarkan hasil pengamatan secara makroskopis pada tabel 4 bahwa

terlihat tidak adanya perbedaan warna pada seluruh organ viseral mencit

khususnya pada warna hati setelah didedahkan ekstrak biji pepaya ‘California’

dan ‘Bangkok’ dengan konsentrasi 4, 6, dan 8% jika dibandingkan dengan

kelompok kontrol. Pada hati mencit berwarna merah hati, hal ini menunjukkan

bahwa warna hati tersebut normal tidak ada kerusakan atau kelainan pada hati

mencit. Pada pengamatan ini hati merupakan organ utama yang menjadi target

akumulasi ekstrak biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’. Akumulasi dapat

terjadi karena ekstrak biji pepaya membentuk senyawa kompleks dengan zat-zat

organik dalam tubuh (Ratnaningsih, 2004).

Hati merupakan organ ekskresi yang berfungsi untuk mendetoksifikasi zat-

zat toksik sehingga adanya sehingga adanya kerusakan hati merupakan petunjuk

apakah suatu zat itu bersifat toksik atau tidak. Jika hati terus menerus terpapar

obat dan zat kimia dalam jangka panjang maka sel-sel pada hati dapat mengalami

perubahan terutama pada sel hepatosit seperti degenerasi nekrosis hati yang dapat

menurunkan kemampuan regenerasi sel sehingga menyebabkan kerusakan

permanen sampai kematian sel (Anggraini, 2008). Namun dalam penelitian ini

hasil menunjukkan tidak ada berbeda antara kelompok kontrol dengan perlakuan,

hal ini berarti pemberian ekstrak biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’ tidak

mengganggu metabolisme lemak di hati sehingga tidak ditemukannya sel hati

yang mengalami degenerasi hidropis diduga pemberian ekstrak biji pepaya

tersebut tidak menyebabkan akumulasi cairan di dalam sel karena degenerasi

hidropis disebabkan oleh adanya akumulasi cairan akibat kegagalan sel dalam

mempertahankan homeostasis (Underwood, 1992).

Degenerasi hidropis merupakan kerusakan sel yang terjadi karena adanya

sel-sel yang sifatnya reversible tetapi apabila sel-sel yang mengalami degenerasi

hidropis tidak dapat memperbaiki dirinya maka dapat berakibat pada nekrosis

(Suyanti, 2008). Menurut Rianah (2014), sel-sel hati dapat memperbaiki dirinya

secara fisiologis dan menggantikannya dengan sel baru.

33

BAB V

KESIMPULAN

5.1 Kesimpulan

1. Pemberian ekstrak biji pepaya California dan Bangkok selama 28 hari

dengan konsentrasi 4, 6, dan 8% (b/v) tidak berpengaruh pada berat badan

mencit, kondisi fisik mencit, dan organ viseral mencit.

2. Pemberian ekstrak biji pepaya California dan Bangkok dapat

meningkatkan kadar SGPT dan SGOT dengan konsentrasi 4, 6, dan 8%

(b/v) jika dibandingkan dengan kelompok kontrol, peningkatan ini

dikarenakan adanya kandungan senyawa Dodecanoic acid (HO2C (CH2)

10Me), Methyl ester of Benzylcarbamic acid, 3,7,11,15-Tetramethyl-2-

hexadecen-1 yang bersifat toksik. Namun peningkatan tersebut masih

dibawah ambang batas normal sehingga aman untuk dikonsumsi sebagai

bahan pengawet pangan.

5.2 Saran

1. Perlu dilakukan penelitian uji toksisitas kronik dan dilanjutkan dengan uji

histologi untuk mengetahui toksisitas bahan secara keseluruhan.

2. Perlu adanya penelitian lebih lanjut dengan perbedaan usia biji pepaya,

sehingga dapat diketahui biji pepaya yang lebih efektif untuk di

aplikasikan sebagai bahan pengawet pangan.

3. Perlu mengetahui konsentrasi yang tepat terlebih dahulu jika ingin

menggunakan biji pepaya sebagai bahan pengawet pangan, supaya tidak

memunculkan kenaikan GPT dan GOT di atas ambang batas normal.

4. Penelitian ini dapat dilanjutkan untuk menjadi produk suplemen minuman

dengan konsentrasi yang tepat.

34

DAFTAR PUSTAKA

Anggraini, D. R. (2008). Gambaran Makroskopis dan Mikroskopis Hati dan

Ginjal Mencit Akibat Pemberian Plumbum Asetat. Fakultas Kedokteran

Universitas Sumatra Utara (Thesis).

Amadea, J., Pesce, L., Kaplas, A. (1987). Methods in Clinical Chemistry. The

C.V. Mosby Company St. Louis, Washington DC. Toronto. P. 1062-1093.

Arrington, L. R. (1972). Introductory Laboratory Animal. The Breeding, Care

And Management of Experimental Animal Science. New York: The

Interstate Printers and Publishing, Inc.

Awaliah, Fitri & Radiastuti (2019). Efektivitas Biji Pepaya dalam Menghambat

Bakteri. Islamic State University in Press: Jakarta.

Attouchi, M., & Sadok. (2010). The effect of powder ed thyme sprinkling on

quality changes of wild and farmed gilthead sea bream fi llets stored in ice.

Food Chem. 119, 1527-1534.

Bratawidjaja, K. G. (2012). Imunologi Dasar. Edisi ke 7. Gaya Baru: Jakarta.

Bergmeyer, H. U., Horder, M., & Rej, R. Approvedrecommendation. (1986).

On IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of

enzymes. Part 2. IFCC method for aspartate amintransferase, J. Clin.

Chem. Biochem.

BPOM. (2014). Pedoman uji toksisitas nonklinik secara in vivo. Peraturan

Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia No.7

Tahun 2014.

Cui, X., Fang, J.L., & Wang. (2007). Kinetic spectrophotometric method for

rapid determination of trace formaldehyde in foods. Anal. Chem. Acta,

590, 253-259.

Dikretorat Jendral Pengawasan Obat & Makanan RI. (1995). Farmakope

Indonesia. Jilid IV. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.

pp, 95-98.

Evans, J. G., & Butler. (1993). Histopathology in Safty Evaluation.

Experimental Toxicology. The Basic Issue. 2 Edition. D. Anderson and

D.M. Conning (eds). Hartnolls Ltd., Bodmin, hal. 119.

Fan, W., Chi., & Zhang. (2008). The use of a teapolyphenol dip to extend the

shelf life of silvercarp (Hypophthalmicthys molitrix) during storagein ice.

Food Chem. 108, 148-153.

Fery, M. (2006). Pengaruh Konsentrasi Karboksil Metil Selulosa (CMC)

Terhadap Mutu Sirup Jambu Mete. Balai Penelitian Tanaman Obat dan

Aromatik.

35

Girinda, A. (1986). Biokimia 1. Jakarta: Gramedia.

Gleasson, M. N. (1969). Clinical toxicology of commercial product. The

william and wilkins. Baltimore.

Gunawan, D., Mulyani, S. (2004). Farmakognosi. Jakarta: Swadaya.

Gusniar, A. B. (2019). Aplikasi Ekstrak Biji Pepaya (Carica papaya L.)

Varietas California dan Bangkok Sebagai Bahan Pengawet Daging Ayam

dan Udang. Islamic State University in Press: Jakarta.

Guyton, A. C & Hall. (2007). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 9.Jakarta:

EGC.

Hadi, S. (2002). Gastroenterology. Penerbit Alumni, Bandung. Hal. 402-420.

Kalie, M. B. (2008). Bertanam Pepaya. Jakarta: Penebar Swadaya.

Kanadi, A. J., Alhassan, A. I., Ngwen, A. I., Yaradua, A., Nasir & Wudil.

(2019). Acute Toxicity Studies and Phytochemical Constituents of

Different Solvents Extracts of Carica papaya Seeds. Asian Journal of

Research in Botany.

Kirsch, R. S., Robsons and Meissner. (1991). A Pratical Guide to the Diagnosis

and management of Liver Disease, in Liver. Cape Town. South Africa.

Kusumawati. (2004). Bersahabat dengan Hewan Coba. Gadjah Mada

University Press: Yogyakarta.

Larasaty & Wisya. (2013). Uji Antifertilitas Ekstrak Etil Asetat Biji Jarak Pagar

(Jatropha curcas L.) Pada Tikus Putih Jantan (Rattus Novergicus) Galur

Sprague Dawley Secara In Vivo. Skripsi. Jakarta: UIN Syarif

Hidayatullah.

Laurence & Bacharach. (1964). Evaluation of Drug Activities

Pharmacometrics. 1th ed. Academic Press. London.

Lestari. (2017). Farmakologi Dasar. UB Press: Malang.

Lu, F. C. (1995). Toksikologi Dasar Edisi Dua. Jakarta: UI-Press.

Lu, F., Din.,Ye & Liu. (2010). Cinamon andnisin in alginate-calcium coating

maintain quality of fresh northern snakehead fish fi llet. LWT-Food Sci.

Tech. 43, 1331-1335.

Marlinda, M. (2012). Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dan Uji Toksisitas

Ekstrak Etanol Biji Buah Alpukat (Persea americana mill). Jurnal MIPA

UNSRAT ONLINE. Manado.

Martiasih, M. (2012). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Biji Pepaya Terhadap

Escherichia coli dan Streptococcus pyogenesis. Yogyakarta. Fakultas

Teknologi Universitas Atma Jaya.

36

Mitsui, T. (1997). New Cosmetic Science. Elsevier, Netherlands, 134-135, 479-

487.

Moniharpon., Soekarto & Nitibaskoro. (1993). Biji buah Atung (Parinarium

glaberimum HASSK) sebagai pengawet udang windu segar. Jurnal Pasca

Panen Perikanan, 56, 1-9.

Moriwaki, K. T., Shiroishi & Yonekawa. (1994). "Genetic in Wild Mice." Its

Aplication to Biomedical Research. Karger, Tokyo: Japan Scientific

Societies Press.

Nagai, T., Inoue., Kanamori., Suzuki & Nagashima. (2006). Characterization on

honeyfrom different floral sources. Its functionalproperties and effects of

honey species on storageof meats. Food Chem, 96, 256-262.

Nuswamarhaeni, S. D., Phihartini & Pohan. (1999). Mengenal buah unggul

Indonesia. Swadaya: Jakarta.

Oduola, T., Adeniyi, FAA., Ogunyemi, EO., Bello, IS., Idowu, To., and Subair.

(2007). Toxicity studies on an unripe Carica Papaya aqueous extract:

biochemical and haematological effects in wistar albino rats. Journal of

Medicinal Plants Research, 1(1), 1-4.

Oehlenschlager, J. (2010). Introduction-importanceof analysis in seafood and

seafood products, variability and basic concepts. In: Handbookof Seafood

and Seafood Product analysis. Editedby: Leo M.L. Nollet and Fidel

Todra. CRC Press.

Opara, L.U., Al-Jufaili and Rahman. (2007). Postharvest handling and

preservation of fresh shand seafood. In: Handbook of Food Preservation,

Rahman, M. S. ed. CRC Press, Boca Raton, FL, 151-202.

Page, D. S. (1997). Prinsip-Prinsip Biokimia. Jakarta: Erlangga.

Price, A. S., & Wilson, M. L. (2002). Patofisiologi Konsep Klinis Proses-

Proses Penyakit. Edisi 4. Jakarta: EGC. 426-430.

Paramveer, D., Chancal, M., Paresh, M., Rani, A., and Nema, R. K. (2010).

Effective alternative methods of LD50 help to save number of

experimental animals. Journal of Chemical and Pharmaceutical Research,

2(6), 450-3.

Pribadi & Gutama, A. (2008). Penggunaan Mencit dan Tikus sebagai Hewan

Model Penelitian Nikotin.Skripsi. Bogor: IPB.

Price., Sylvia, A., Lorraine., & Wilson. (1995). Buku 1 Patofisiologi " Konsep

Klinis Proses-Proses Penyakit". Edisi 4. Jakarta: EGC.

Purwaningdyah. (2015). Efektivitas Ekstrak Biji Pepaya (Carica papaya L.)

sebagai Antidiare pada Mencit yang Diinduksi Salmonella typhimurium.

Jurnal Pangan dan Agroindustri.

37

Putra, W. S. (2012). 68 Buah Ajaib Penangkal Penyakit. Yogyakarta: Katahati.

Quitral, V., Donoso., Ortiz., Herrera., Araya and Aubourg. (2009). Chemical

changes during the chilled storage of Chillean jack mackerel (Trachurus

murphyi): effect of a plant-extract icingsystem. LWT-Food Sci. Tech. 42,

1450-1454.

Ratnaningsih, A. (2004). Pengaruh Cadmium Terhadap Gangguan Patologik

pada Hati Tikus Percobaan. Jurnal Matematika, Sains Dan Teknologi.

Ridwan, E. (2013). Etika Pemanfaatan Hewan Percobaan dalam Penelitian

Kesehatan. J. Indon Med Assoc. 63. Jakarta.

Robbins & Kumar. (1995). Buku Ajar Patologi 1. Edisi 4. Jakarta. EGC. 290-

293.

Rogers, A. B., Z. D., Renee. (2012). Comparative Anatomy and Histology: A

Mouse and Human Atlas. USA: Elsevier Inc, 193-196.

Rust, M. B. (2002). Nutritional Physiology. In: Halver, J. E., R.W. Hardy. Fish

nutrition. USA: Academic Press, 822.

Roller, S. (1995). The quest for natural antimicrobials asnovel means of food

preservation: Status reporton a European research project. Int. Biodete,

333-345.

Ronald, A., Sacher & Richard, A. (2002). Tinjauan Klinis. Hasil Pemeriksaan

Laboratorium. Jakarta: EGC.

Sacher., Ronald, A., & Richard, A. (2002). Tinjauan Klinis. Hasil Pemeriksaan

Laboratorium. Jakarta: EGC.

Safwan., Abdul, R. W., Ali, R. H., & Ni Nyoman, M. M. (2007). Toksisitas Sub

Akut Ekstrak Biji Pepaya Terhadap Aktivitas Enzim SGPT dan SGOT

Secara In Vivo. Farmasi. Universitas Muhammadiyah Mataram.

Satriyasa, B. K., & Pangkahila, W. (2010). Fraksi heksan dan fraksi metanol

ekstrak biji pepaya muda menghambat spermatogonia mencit (Mus

musculus). Denpasar-Bali. Farmakologi FK UNUD.

Siburian, J., Marlina & Johari. (2008). Pengaruh Ekstrak Biji Pepaya (Carica

papaya L.) pada Tahap Pra copulasi terhadap Fungsi Reproduksi Mencit

(Mus musculus. L) Swiss Webster Betina. Laporan Penelitian. PS

Pendidikan Biologi Jurusan Pendidikan MIPA FKIP Universitas Jambi.

Smith, B. J., & Mangkoewidjojo. (1988). Pemeliharaan, Pembiakan dan

Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis Indonesia. Jakarta:

University Press.

Soemirat, J. (2003). Tolksikologi Lingkungan. Gadjah Mada University Press.

Sudarmono & Untung. (2014). Uji Keamanan Ekstrak Etanol Daun Mindi

38

(Melia azedarach I) Pada Tikus Galus Wistar Berdasarkan Dosis Letal 50

Serta Gambaran Histopatologi Hepar dan Ginjal. Jurnal Kesehatan

"Caring and Enthusiasm".

Suyanti, L. (2008). Gambaran Histologi Hati dan Ginjal Tikus pada Pemberian

Fraksi Asam Amino Non-Protein Lamtoro Merah (Acacia villosa) pada

Uji Toksisitas Akut. Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor

(Skripsi).

Ummah, W. (2012). Pengaruh Ekstrak Air Biji Pepaya (Carica papaya L.) dan

Testosteron Undekanoat (TU) Terhadap Jaringan Ginjal Mencit (Mus

musculus L.). (Skripsi) S1 FMIPA Universitas Sumatera Utara. Medan.

Umana, Uduak, E., Timbuak, J. A., Musa, S. A., Samuel, A., Joseph, H., &

Anuka, J. A. (2013). Acute and Chronic Hepatotoxicity and

Nephrotoxicity Study of Orally Administered chloroform extract of Carica

papaya Seeds in Adult Wistar Rats. International Journal of Scienctific

and Research Publication, vol, 3.

Underwood, A. L. (1992). Analisa Kimia Kuantitatif. Edisi 5. Jakarta: Erlangga.

Warisno. (2003). Budidaya Pepaya. Yogyakarta: Penerbit Kanisius.

Wilson and Gosvold. (1982). Textbook of Organic Medicinal and

Pharmaceutical Chemistry in Deorge, RF. (Ed). Buku Teks Wilson dan

Gisvold: Kimia Farmasi dan Medisinal Organik. Lippincott Company,

Philadelphia-Toronta.

Yuniawati, M. & Purwanti, A. (2008). Optimasi Kondisi Proses Ekstraksi

Minyak Biji Pepaya. Journal Teknologi Tecnoscientia. Vol 1, No. 1. 75-

82.

39

LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil Uji Beda Menggunakan Metode Uji Parametik Anova Two

Way

1. Uji Parameter SGOT Serum Mencit Setelah didedahkan Ekstrak Biji Pepaya

California dan Bangkok

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable: SGOT

Source

Type III Sum

of Squares Df Mean Square F Sig.

Corr