UTICAJ DODAVANJA SELENA I CINKA U HRANI NA … · kojima su u hrani bili dodavani ovi mikroelementi postoji značajno manje učešće onih krava čija je prosečna vrednost broja

151

ORIGINALNI RAD / ORIGINAL PAPER

* Rad primljen za štampu 01. 07. 2013. godine**Drsci.vet.med.IvanaDavidov,docent,drsci.vet.med.MarkoR.Cincović,asistent,drsci.vet.med.MiodragRadinović,docent,MScMihajloErdeljan,asistent,drsci.med.BranislavaBelić,vanr.prof.,drsci.vet.med.BojanToholj,docent,drsci.vet.med.MilenkoStevančević,red.prof.,Departmanzaveterinarskumedicinu,Poljoprivrednifakultet,UniverzitetuNovomSadu.

DOI:10.2298/VETGL1404151D UDK:661.691+636.087:616.151+613.287.5:618.19+616-092.11

UTICAJ DODAVANJA SELENA I CINKA U HRANI NA KONCENTRACIJU OVIH ELEMENATA U KRVI I MLEKU, BROJ SOMATSKIH ĆELIJA I

HISTOLOŠKE KARAKTERISTIKE VIMENA KRAVA* THE INFLUENCE OF SELENIUM AND ZINC ADDITION IN FOOD ON CONCENTRATION

OF THESE ELEMENTS IN BLOOD AND MILK, ON SOMATIC CELLS NUMBER AND HISTOLOGICAL CHARACTERISTICS OF COWS UDDERS

Davidov Ivana, Cincović M. R., Radinović M., Erdeljan M., Belić Branislava, Toholj B., Stevančević M.**

U eksperiment je uključeno 30 krava holštajn-frizijske rase. 15 krava je primalo selen i cink u optimalnoj dozi u periodu pre telje-nja, dok je drugih 15 krava odabrano iz grupe krava koje nikada to-kom života nisu bile suplementirane ovim mikroelementima. Analizira-na je koncentracija selena i cinka u krvnom i mlečnom serumu, kao i prosečan broj somatskih ćelija u pripadajućoj laktaciji. Posle isključe-nja krava iz proizvodnje ispitana su histološka svojstva vimena krava. Rezultati ispitivanja pokazuju da dodavanje selena i cinka kod krava u periodu pred teljenje pozitivno utiče na vrednost ovih mikroelemenata u krvi i mleku tokom rane laktacije, tako da je koncentracija ovih ele-menata značajno viša u mleku i krvi kod krava koje su dobijale suple-mente selena i cinka. Kod krava kojima su u hranu dodavani ovi mikro-elementi postoji značajno manji prosečan broj somatskih ćelija tokom laktacije koja sledi. Nađena je manje izražena infiltracija pa renhima vimena leukocitima, značajno deblji keratinski sloj ductus papillaris-a i manje izraženi reparacioni procesi koji ukazuju na hroničnu inflamaci-ju vimena u preparatima dobijenim posle isključenja krava iz proizvod-nje. Postoji značajna pozitivna korelacija između selena u krvi i mleku, dok takva korelacija nije pokazana za vrednosti cinka. Postoji značaj-na negativna korelacija između koncentracije selena u krvi i mleku sa prosečnim brojem somatskih ćelija i stepenom leukocitne infiltracije, dok uticaj na keratinski sloj ductus papillaris-a nije pokazan. Cink iz kr-

152

Vet.glasnik68(3-4)151-164(2014)DavidovIvanaisar.:Uticajdodavanjaselenaicinkauhraninakoncentracijuovihelemenataukrviimleku,brojsomatskihćelijai...

vi i vimena negativno korelira sa brojem somatskih ćelija, dok pozitiv-no korelira sa debljinom keratinskog sloja ductus papillaris-a, a nema uticaja na stepen infiltracije parenhima vimena lukocitima. Cink poka-zuje pozitivan uticaj na formiranje keratinskog sloja ductus papillaris-a i štiti vime od prodora uzročnika, dok selen utiče na imunološki odgo-vor vimena. Njihovo pozitivno dejstvo moglo bi se okarakterisati kao aditivno, jer iako deluju na morfološki dva odvojena dela vimena, do-davanje i jednog i drugog elementa značajno smanjuje broj somatskih ćelija u mleku krava.

Ključne reči: selen, cink, mlečne krave, mastitis, histologija vi-mena

Adekvatna ishranabogatamineralimaobezbeđujeoptimalno funkicionisa-njeimunološkogodgovoraisamimtimimapozitivnodejstvonaočuvanjezdrav-lja iotpornostmlečnežlezdenapojavumastitisa(Weiss iWyatt,2002).Mikro-elementikaoštosuselen icink imajuesencijalanznačajuočuvanjuzdravlja iproduktivnostivimenakrava(Andrieu,2008).Ovimikroelementisuprvenstvenoćelijskiantioksidansi,čijaseaktivnostodvijaućelijskojcitoplazmigdesprečavajuoštećenjećelijedejstvomperoksidaza.Takođe,oviantioksidansiimajuiesenci-jalanznačajufunkcionisanjuimunološkogodgovora(Millerisar.,1993).Slablje-njeimunološkogsistemamuznihkravajeuvremepartusaitadasepovećavarizikodnastajanjainfekcija(Mallardisar.,1998).Tomožedanastanezbogpadakon-centracijecinkaukrviutomperiodu(GoffiStabel,1990;Megliaisar.,2001),aMillerisar.(1995),suusvojimistraživanjimauočilidauvremepartusadolazidopadakoncentracijeselenaukrvi.Nekontrolisanostvaranjeperoksidajevrloštet-nozazdravećelijeizdravotkivomlečnežlezde(Kommisrudisar.,2005).Selenjeneophodankaopomoćleukocitimadaredukujuperoksidekojisustvorenidaihpreveduubezbednematerijeizatimdautičunauništenjeinvadiranihpatoge-na(Larsen,1993;FinchiTurner,1996;Smithisar.1997;McKenzieisar.,1998).Ulogacinka je iurastućelija i tkiva,ućelijskogreplikaciji,u formiranjukostiju,uočuvanju integritetakože,uprocesimakeratinizacije,ucelularnom imunitetuiuopšteuodbraniorganizma.Mlečnojžlezdikaoorganukojipredstavljaderivatkože,neophodanjecink(Tomlisonisar.,2004,2008),zbogformiranjakeratins-kog sloja u ductus papillaris-u.

Sordillo isar.(1997)smatrajudapostojedvanačinakojimamikroelemen-ti utiču na očuvanjumlečne žlezde. Prvi je da pojačavaju aktivnost prve linijeodbranemlečnežlezdeodprodoramikroorganizamakaoidapojačavajuodbram-benusposobnostepitelnihćelijazaborbuprotivmikroorganizamakojipenetrirajukamlečnojžlezdi.Druginačinjeupojačavanjufagocitnogmehanizmanamestuprodoramikroorganizmaumlečnužlezdu.

Uvod / Introduction

153


Ciljovogradajedaseispitauticajdodavanjaselenaicinkauhraninakon-centracijuselenaicinkakrviimleku,brojsomatskihćelijauranojlaktacijikaoihistološkekarakteristikevimenakravaznačajnezaprocenuzdravljavimenapoisključenjukravaizproizvodnje.

Životinje / AnimalsUeksperimentjeuključeno30visoko-mlečnihkravaHolštaj-frizijskeraseko-

jesupraćenetokomcelogciklusalaktacije,ikojesudržaneuštalskimuslovima.Svekravesubilepribližnetelesnegrađeimase,starostiod3-4laktacijeidavalesupribližnoistukoličinumleka(oko7000l/laktaciji).Postojalesudvegrupepo15krava.Prvugrupusučinilekravekojimanikadatokomprethodnihlaktacijanisudavanidodaciselenaicinka,adrugajeoglednakojajedobijalaorganskicinkiselenuhraniuperiodu14-21danpreteljenja(komplekseBioplexZinc240mg/kghraneiSel-Plex0,30mg/kghrane;Alltech). Ishranakravauperioduzasušenostizasnivasenasledećem(kg):kukuruznasilaža(15),senolucerke(2),suncokreto-vasačma(0,5),zrnokukuruza(2),suvirepinrezanac(1),premiks(0,1).Suvama-terijajenanivouoko57%(oko12kg).Premakalkulacijidnevniunosselenaizno-si0,2mg/kgsuvematerije(apreporukapremaNRC-u0,3),adnevniunoscinkaiznosioko30mg/kgsuvematerije(apreporukapremaNRC-uje40-50).Dakleuobrokusupostojalesuboptimalnevrednostiselenaicinka.

Analiza krvi / Blood analysis Krvjeuzetauprvommeseculaktacije(oko30dana)izv.coccygeakakobi

seodredilakoncentracijaselenaicinkaukrvi.Kadasuprikupljenisviuzorcikrvi,krvniserumisudaljeanaliziraniatomskomapsorpcionomspektrometrijom(AAS)naaparatuPerkinElmerElan6100ICPMS,Massachusetts,USA.KoncentracijaselenaicinkaodređenajepremapostupkukojisuopisaliTamasiisar.(2008)iMaasisar.(1992).

Analiza mleka / Analysis of milkMlekojezapotrebeeksperimentauzetoumomentukadajeuzorkovanai

krv.PomoćuMilkoscanaparataodređen jebrojsomatskihćelija.Kadasuprik-upljenisviuzorcimleka,mlečniserumisuizdvojeniidaljeanaliziraniatomskomapsorpcionomspektrometrijom(AAS)naaparatuPerkinElmerElan6100ICPMS,Massachusetts,USA.Metodoligijajeistakaoizakrvniserum.

Histološka analiza vimena / Histological analysis of udderVimena30kravaHolštajn-frizijskeraseuzimanasuzahistološkaispitivanja,

poisključenjuovihkravaizproizvodnje.Zaispitivanjesukorišćene120četvrtivi-menakrava,kojimajemerenadužinapapilaidužinaductus papillaris-a,iodkojihsuuzetiuzorcitkivazahistološkipregled.Analizahistološkihpreparatajerađena

Materijal i metode / Material and methods

154

na Leicamikroskopu.Čaklijevakvanitativnametoda,kojuopisujuMayeriKlein(1961)jekorišćenaradiprocenastepenaoštećenjaalveolarnogepitela,alveola-noglumenaiintraalveolarnestrome.Leukocitarnainfiltracija,uglavnomlimfocitaipolimorfonuklearnihneutrofilnihgranulocita(PMN)jekategorizovanaudvapo-dručjavimenakrava:1.cisternai2.parenhim.Promenesuutvrđenenauveliča-njusvetlosnogmikroskopaod10xi40x.Stepenleukocitarnoginfiltratasmoutvr-dilinaosnovuprisutnostiodređnihćelijazapaljenskogodgovarauvidnompolju,gdenekolikoneutrofilnihgranulocitailimfocitapredstavljaleukocitarniinfiltratod0%do25%;značajanbrojneutrofilnihgranulocitailimfocitasaretkimmakrofaga-majeleukocitarniinfiltratod25,1%do50%;masivnainfiltracijalimfocita,znača-janbrojmakrofagairetkieozinofilnigranulocitisuleukocitarniinfiltratod50,1%do75%;imasivnainfiltracijalimfocitaimakrofagasanekolikoplazmocitaieozino-filnihgranulocitapredstavljaleukocitarniinfiltratod75,1%do100%.Reparacioniprocesipodrazumevalisunalazgranulomaihipertrofiju/hiperplazijuvezivnogtki-važlezdanogdelavimena.

Statistička analiza podataka / Statistical data analysisRazlike u koncentraciji selena i cinka u krvi odnosno mleku kod krava koje

sudobijaliovemikroelementeikojenisudobijaleodređenjepomoćut-testa.Ve-zaizmeđudodavanjaselenaicinkakaoizastupljenostikravasadeficitomselenaicinkauranojlaktacijiodređenajeHi-kvadrattestom.Značajnostrazlikeubro-jusomatskihćelijaizmeđuodgledneikontrolnegrupeodređenajet-testom,dokjeveza izmeđudodavanjaselena i cinka ipojavebrojasomatskihćelijapreko400.000/mlodređenaHi-kvadrattestom.Uticajdodavanjaselenaicinkanade-bljinuductus papillaris-a,stepenćelijskeinfiltracijeinalazreparacionihprocesaispitanjepomoćuCochran-Armitagetestazatrend(određenojezasvakuispitiva-nučetvrtvimenaposebno).Ispitanajeikorelacijaitestiranaznačajnostkorelacijeizmeđukoncentracijeselenaicinkaukrviimleku,brojasomatskihćelija,stepenacelularneinfiltracijeidebljinekeratinskogsloja.

Rezultati ispitivanja pokazuju da dodavanje selena i cinka kod krava u peri-odupredteljenjepozitivnoutičenavrednostovihmikroelemenataukrvnomseru-muimlekutokomranelaktacije,takodajekoncentracijaovihelemenataznača-jnovišaumlekuikrvikodkravakojesudobijalesuplementeselenaicinka.Kodkrava suplementiranih ovimmikroelementima postoji značajnomanji prosečanbrojsomatskihćelijatokomlaktacijekojasledi.Nađenajemanjeizraženainfil-tracijaparenhimavimenaleukocitima,značajnodebljikeratinskislojductus papi-llaris-aimanjeizraženireparacioniprocesikojiukazujunahroničnuinflamaciju

Rezultati / Results


155

vimenaupreparatimadobijenimposleisključenjakravaizproizvodnje.Navedenirezultatipredstavljenisuutabeli1.

Dodavanjeselena icinkakrozhranu jeuvezisastatusomselena icinkakod ispitivanih krava, jerugrupi kravakojenisudobijaleoveelementepostojiznačajnovećeučešćekravakojeimajudeficitovihelemenataukrvi.Kodkravakojimasuuhranibilidodavaniovimikroelementipostojiznačajnomanjeučešćeonihkravačijajeprosečnavrednostbrojasomatskihćelijabilapreko400.000/ml.Histološkekarakteristikevimenakravatakođesuuznačajnojvezisadodavan-jemselenaicinka,takodakodonihkojesudobijaleovesuplementepostojitrendpovećanjabrojakravasaniskomcelularnominfiltracijomparenhima,kaoitrendpovećanjabrojakravačijajedebljinaductus papillaris-apreko200μm.Repara-cioniprocesiusmislunalazagranulomaihiperplazije/hipertrofijevezivnogtkivaizraženijisuugrupikravakojenisudobijaleselenicinkuhrani.Svirezultatisuprikazaniutabeli2.Mikrofotografijekarakterističnihnalazauvezisahistologijomvimena(keratinskimslojemductus papillaris-a,infiltracijeleukocitauperialveolar-nomprostoruuzdilatacijualveola,deskvamacijuepitela,sakupljanjeimunološkihćelijaualveolarnomprostoruireparacioniprocesi)prikazanisunaslikama1-4.

Tabela1.Razlike u vrednostima ispitivanih parametara kod krava koje su dobijale i koje nisu dobijale selen i cink u hrani pre teljenja /

Table 1. Differences in values of the examined parameters in cows which did and did not receive selenium and zinc in food before calving

Krave / Cowspsuplementirane /

supplementednesuplementirane /

non supplementedSelenukrvi(µmol/l)/ Selenium in the blood 0,69±0,12 0,51±0,16 <0.01

Selenumleku(µmol/l)/ Selenium in milk 0,63±0,2 0,09±0,025 <0.01

Cinkukrvi(µmol/l)/ Zinc in the blood 13,59±4,5 10,93±3,49 <0.05

Cinkumleku(µmol/l)/ Zinc in milk 33,1±7,3 24,78±8,21 <0.05

Brojsomatskihćelija(000/ml)/ Number of somatic cells 380±150 479±110 <0.05

Keratinskislojd.papillaris-a(μm)/ Keratin layer of d.papillaris 303,5±15,20 241,7±20,24 <0.01

Infiltracijaleukocitauparenhimvimena(%)/ Infiltration of leukocytes in parenchyma of the udder 38,5±15,7 65,5±19,1 <0.01

Reparacioni procesi(brojgranulomaupreparatu)/ Repairing processes (number of granuloma in the preparation)

3,5±1,5 7±2,2 <0.01


156

Tabela2.Ispitivanje veze između dodavanja selena i cinka u hrani sa nalazom deficitarnih stanja, subkliničkog mastitisa, nivoa ćelijske infiltracije, debljine keratinskog sloja i prisustva reparacionih procesa u vimenu krava

Table 2. Analysis of the relation between selenium and zinc adding in food and findings of deficiency conditions, subclinical mastitis, level of cells infiltration, thickness of keratin layer and reparation processes in cows udders

Krave / Cows

psuplementirane / supplemented

nesuplementirane / non supplemented

RelacijasadeficitarnimSe/Relation with deficient SeBroji%deficitarnih/Number and % of the deficient 3(20%) 8(53,33%) <0.01

RelacijasadeficitarnimZn/Relation with deficient ZnBroji%deficitarnih/Number and % of the deficient 4(26,67%) 9(60%) <0.01

Relacijasaznacimamastitisapreko400.000/ Relation with mastitis indicators over 400 000 4(26,67%) 10(66,67%) <0.05

Keratinskislojmikrometar/ Keratin layer Micrometers

do 100 8 24

<0.01101-200 20 28

>200 32 8

Leukocitnainfiltracija%/ Leukocytes infiltration %

0-25 20 8

<0.0126-50 20 16

51-75 12 2076-100 8 12

Reparacioni procesi prisutni / Repairing processes present 20 44 <0.01

Tabela3.KoeficijentikorelacijeinjihovstatističkiznačajizmeđuispitivanihparametaraTable 3. Correlation coefficient and its statistical significabce between the investigated parameters

Selen u krvi /

Selenium in the blood

Cink u krvi / Zinc in

the blood

Selen u mleku / Selenium

in milk

Cink u mleku /

Zinc in milk

Broj somat. ćelija /

Number of somatic cells

Keratinski sloj /

Keratin layer

Infiltracija leukocita / Leukocytes infiltration

Selenukrvi/ Selenium in the blood – NS 0,51

<0.05 NS -0,59<0.05 NS -0,68

<0.01

Cink u krvi / Zinc in the blood – NS NS -0,58

<0.050,81

<0.01 NS

Selenumleku/ Selenium in milk – NS -0,55

<0.05 NS -0,73<0.01

Cink u mleku / Zinc in milk – -0,53

<0.050,67

<0.01 NS

Brojsomat.ćelija/ Number of somatic cells – -0,59

<0.050,82

<0.01Keratinskisloj/ Keratin layer – -0,55

<0.05Infiltracijaleukocita/ Leukocytes infiltration –


157

Slika3.Deskvamacija epitela i makrofage – somatske ćelije u lumenu alveoleFigure 3. Desquamation of epithelium and macrophage-somatic cells in lumen of the alveoli

Slika1.Keratinski sloj ductus papillaris-aFigure 1. Keratin layer of ductus papillaris

Slika2.Intersticijalna infiltracija preko 75% u perialveolarnom prostoruFigure 2. Interstitial infiltration over 75% in perialveolar space


158

Korelacijeizmeđuispitanihparametaratakođesutestirane.Postojiznačajnapozitivnakorelacijaizmeđukoncentracijeselenaukrvnomserumuimleku,doktakvakorelacijanijepokazanazavrednosticinka.Postojiznačajnanegativnako-relacijaizmeđukoncentracijeselenaukrviimlekusaprosečnimbrojemsomat-skihćelijaistepenomleukocitneinfiltracijeparenhimavimena,dokuticajnakera-tinski sloj ductus papi llaris-anijepokazan.Cinkizkrviivimenanegativnokorelirasabrojemsomatskihćelija,dokpozitivnokorelirasadebljinomkeratinskogslo-ja ductus papillaris-a,doknemauticajanastepeninfiltracijeparenhimavimenaleukocitima.Debljinastratum corneum-anegativnokorelirasabrojemsomatskihćelijaistepenominfikltracijeleukocita.Nađenajepozitivnakorelacijaizmeđubro-jasomatskihćelijaistepenaleukocitneinfiltracije.Svirezultatiprikazanisuuta-beli3.

Fiziološkevrednostikoncentracijeselenaukrvnomserumukojesunađenekodkravabilesuurasponuod0,6do0,9µmol/l(Erdeljanisar.,2011;Gunterisar., 2003; Juniper i sar., 2006).Aplikacija selenadovodi do značajnogporas-ta njegove koncentracije u krvi i mleku, ali to zavisi od doze, vremena aplikacije ivrsteizvoraselena(Ranisar.,2010).Koncentracijaselenaumlekukodsuple-mentiranihkravaiznosiod0,117do0,2µmol/l(Ceballosisar.,2009),sačimeseslažunaširezultati.Koncentracijacinkaukrvnomserumukojajenađenaiznosioko12μmol/l(Davidovisar.,2013;Ismailisar.,2011;Pavlataisar.,2005).Niževrednostiselenaicinkanađenesuuperioduzasušenjainapočetkulaktacijedabinjihovavrednostkasnijerasla(Megliaisar.,2004;VanRyn,2009).Naširezul-tati su u skladu sa navedenim ranijim rezultatima.

Koncentracijaselenaicinkaukrviimlekunegativnokorelirasabrojemso-matskihćelijaumlekukrava,dokjeaplikacijaselenaicinkauznačajnojvezisaprocentomkrava koje imaju vrednost broja somatskih ćelija preko400.000/ml.

Slika4.Reparacioni procesi – granulom sa hipertrofijom vezivnih septiFigure 4. Repairing process – granuloma with hypertrophy of the connective septa

Diskusija / Discussion


159

Aplikacijaselenadovodidoredukcijesubkliničkogmastitisaismanjenjabrojaso-matskihćelijakodmlečnihkrava(Barbanoisar.,2006;Copeisar.,2009;Rabieeisar.,2010;Weisisar.,2002;Davidovisar,2012).UistraživanjukojijeizveoVanSaun(2009)nadvanaestkravau laktaciji,kojesuuhranidobijaledodatakor-ganskogcinka,uočenojedajeu33%kravadošlodoredukcijebrojasomatskihćelijaumlekukrava.Kravesavišomkoncentracijomselenaicinkapokazujunižibrojsomatskihćelijaumleku,kakoupočetkutakoinasredinilaktacije(Davidovisar.,2012).

Uticajselenanabrojsomatskihćelijaumlekuihistološkekarakteristikevi-menamožeseobjasnitinasledećinačin.Prodorbakterijainjihovrastumlečnojžlezdiglavnisuuzroknastajanjamastitisakodkrava(Mukherjee,2008).Nakonprodorabakterijadolazidonizakaskadnihreakcija.Prvo,neutrofilnigranulocitiizkrvidolazedomestainfekcijeuznarušavanjekrvno-mlečnebarijere(ZhaoiLac-asse,2008).Neutrofilnigranulocitisuprvalinijaodbraneorganizmaodprodorabakterija.Funkcijaneutrofilnihgranulocitajeufagocitovanjuiuništavanjubakteri-ja.Nakonfagocitovanjabakterija,nastajenizhemijskihreakcijauništavanjabak-terije,pričemuseoslobađajucitotoksičnislobodniradikaliiproinflamatornicito-kini (Knaapen isar.,1999). Inflamatornematerijenastaleoslobađanjemvisokoreaktivnihmolekulaublažujuseantioksidansimakojipredstavljaju intracelularnimehanizamodbraneodoksidacije.Superoksiddismutaza,glutationperoksidazaikatalazaumlečnojćeliji,uklanjajusuperoksideiproksideprenegoštoonistupeu reakcijusametalnimkatalizatorimaćelije istvore razorna toksična jedinjenjazaćeliju.Ovaj intracelularnimehanizamodbranedovodidasmanjenjaošteće-njamlečnećelijetokomakutnefazeinflamacije(Ndiveniisar.,1991;FuchsiMil-bradt,1994).Sordillo isar. (1997)suuočilidapojedinivitamini imikroelemen-ti imajuznačajaupoboljšavanju imunološkogsistemamlečnežlezde,poštosuAtroshiisar.(1986)iHoganisar.(1993)usvojimistraživanjimazaključilidadopojavemastitisadolazikodkravačijijenivoglutationperoksidazeivitaminaEuplazmivrlonizak.DodavanjemuhranivitaminaEiselena,dolazidopojačavanjaaktivnostiglutationperoksidazeiredukcijepojavemastitisa(Hemmingway,1999;Weissisar.,1997).Ustanovljenojedanizaknivoglutationperoksidazesmanju-jeantioksidativnusposobnostodbrambenogsistemamlečnežlezdeidovodidopojavemastitisa ipovećanjabrojasomatskihćelijaumleku(Mukherjee,2008).Koncentracijaselenaiaktivnostglutationperoksidazemeđusobnopozitivnoko-reliraju(Pilarczykisar.,2012).Selenjesastavnideoovogenzima,pabisetimemogloobjasnitizbogčegakravekojenisudobijaleselenimajuvećuinfiltracijuin-flamatornihćelijasaizraženimupalnimprocesima.Nedostatakselenaprovocirainflamatorneprocesezbogsmanjeneantioksidativneaktivnostitkiva,kadadolazidonagomilavanjaimunihćelijakaoodgovornaprolongiranuinflamaciju,pazbogtogakoncentracijaselenanegativnokorelirasastepenomcelularneinfiltracijeuparenhimuvimenakrava.

Kinalisar.(2005)iCortinhasisar.(2010)sudaliodgovorzaštodolazidosmanjenjabrojasomatskihćelijaumlekukojesukaosuplemetntuhranidobijale


160

organskicink.Odgovorje,dajedošlodobržegformiranjakeratinskogslojaduc-tus papillaris-aisamimtimbržegnjegovogzatvaranjakodkravahranjenimsuple-mentom organskog cinka. Glavnuodbrambenuuloguuductus papillaris-učinike-ratin,kojigaoblaže.Keratinoznedeskvamiraneepitelnećelijeductus papillaris-astvarajumaterijusličnuvosku,kojalepipatogenemikroorganizmezakeratinita-koonemogućavanjihovprodorucisternuiparenhimvimenakrava.Paulrudisar.(2004)smatrajudakeratinskislojductus papillaris-apredstavljanjegovufizičkubarijeruisamimtimsprečavaprodorpotencijalnihpatogenihmikroorganizamaumlečnužlezdu.Sniženakoncentracijacinkaispod9,64µmol/l dovodidostanje-nja keratinskog sloja ductus papillaris-azapolovinučimeseznačajnosmanjujeotpornostvimena(Davidovisar.,2013).Ovakvirezultatipotkrepljujunašenalazeukojimakoncentracijacinkaumlekuikrvipozitivnokorelirasadebljinomkeratin-skog sloja ductus papillaris-a,kaoirezultatekojipokazujuzaštosaopadanjemdebljinekeratinskogslojaductus papillaris-arastebrojsomatskihćelijaistepenćelijskeinfiltracijeparenhimavimena.

Patohistološke karakteristike vimena koje su ispitivane u našem ogledupredstavljajukarakterističneznakeupalnihprocesaiodlikujusenalazimakaoštojeedem,oštećenjeepitelasekretornihćelijaparenhimaileukocitarnainfiltracijarazličitogstepenauzpojavu reparacionihprocesa (granulomi i fibrozavezivnihsepti)(Jovanovićisar.,2012).Benitesisar.(2002)suhistološkipregledali184parenhimavimanakrava,kojesuposlatenaekonomskoiskorišćavanje.Takođesuradiliiizolacijuuzročnikakojisudovelidoodređenihpromenauparenhimimakrava.Odsvihuzorakagdesuizolovaniuzročnici,samoseu3,1%uzorakanisuuočilipatohistološkepromene.Uostalih96,9%uzorakasubileuočljivekompo-nente zapaljenja koje su pokazane i u našem radu.

Aplikacijaselenaicinkaputemhraneuperiodupretelenjadovodidoporas-takoncentracijeovihmikroelemenataukrvnomserumuimlekukodkravauranojlaktaciji.Kravekojedobijajupomenutemikroelementeuhraniimajuprosečnonižibrojsomatskihćelijaumleku,manjistepenleukocitneinfiltracijeparenhimavime-na,debljikeratinskislojductus papillaris-aimanjeizraženereparacioneprocese,pokazatelje hronične inflamacije. Sve navedeno pokazuje da postoji pozitivanefekataplikacijeselenaicinkanazdravljevimena.Selenznačajnonegativnoko-relirasastepenomleukocitneinfiltracijeuparenhimuvimena,dokcinkznačajnopozitivnokorelirasadebljinomkeratinskogslojaductus papillaris-a.Njihovopozi-tivnodejstvobisemoglookarakterisatikaoaditivno,jeriakodelujunamorfološkidvaodvojenadelavimena,dodavanjejednogidrugogelementaznačajnosma-njujebrojsomatskihćelijaumlekukrava.NAPOMENA/ACKNOWLEDGEMENT:OvajradjedeoprojektaTR31062finansiranogodstraneMinistarstvaprosveteinaukeR.Srbije./ This work is a part of the project TR1062 funded by the Ministry of Education, Science and Technological Development of the Republic of Serbia

Zaključak / Conclusion


161

1. AndrieuS.Istherolefororganictraceelementsupplementsintransitioncowhealth?VetJ2008;176:77-83.

2. AtroshiF,ParantainenJ,SankariS,OstermanT.Prostaglandinandglutathioneperoxidaseinbo-vinemastitis.ResVetSci1986;40:361-6.

3. BarbanoDM,MaY,SantosMV.Influenceofrawmilkqualityonfluidmilkshelflife.JDairySci2006;89:15-9.

4. BenitesNR,GuerraJL,MelvillePA,daCostaEO.Aetiologyandhistopathologyofbovinemastitisofaspontaneousoccurrence.JVetMed2002;B49:366-70.

5. CeballosA,SánchezJ,StryhnH,MontgomeryJB,BarkemaHW,WichtelJJ.Metaanalysisoftheeffectoforalseleniumsupplementationonmilkseleniumconcentrationincattle.JDairySci2009;92:324-42.

6. CopeCM,MackenzieAM,WildeD,SinclairLA.Effectsoflevelandformofdietaryzincondairycowperformanceandhealth.JDairySci2009;92:2128-35.

7. CortinhasCS,BotaroBG,SucupiraMCA,RennoFP,SantosMV.Antioxidantenzymesandsomat-iccellcountindairycowsfedwithorganicsourceofzinc,copperandselenium.LivestockSci2010;127:84-7.

8. DavidovI,RadinovićM,ErdeljanM,BelićB,CincovićMR,BobošS.Bloodseleniumconcentration,somaticcellcountandtheircorrelationatfirstandsixthmonthoflactationindairycows.Contemporaryagriculture2012;61(1-2):95-103.

9. DavidovI,RadinovićM,ErdeljanM,CincovićMR,StančićI,BelićB.RelationsbetweenbloodZinconcentrationsandudderhealthindairycows.RevMedVet2013; 164(4):183-90.

10. ErdeljanM,DavidovI,BobošS,RadinovićM,StančićI.Nalaznivoaselenaukrvnomserumukodkravaulaktaciji.LetopisnaučnihradovaPoljoprivrednogfakultetauNovomSadu2011;35(1):104-9.

11. FinchJM,TurnerRJ.EffectsofseleniumandvitaminEontheimmunerespnseofdomasticani-mals.ResVetSci1996;60:97-106.

12. FuchsJ,MilbradtR.Antioxidantinhibitionofskininflammationinducedbyreactiveoxidants:eval-uationoftheradoxcoupledihydrolipoate/lipoate.SkinPharma1994;7:278-84.

13. GoffJP,StabelJR.Decreasedplasmaretinol,α-tocopherolandZnconcentrationduringtheperi-parturientperiod:effectofmilkfever.JDairySci1990;73:3195-99.

14.GunterSA,BeckPA,PhillipsJM.Effectsofsupplementaryseleniumsourceontheperformanceandbloodmeasurementsinbeefcowsandtheircalves.J.AnimSci2003;81:856-64.

15. HemmingwayRG.TheinfluencesofdietaryseleniumandvitaminEintakesonmilkdefensere-sponsestomastitis.JDairySci1999;76:2795-803.

16.HoganJS,WeissWP,SmithKL.RoleofvitaminEandseleniuminhostdefenseagainstmastitis.JDairySci1993;76:2795-803.

17. IsmailS,BenRomdhaneS,IbnHadjSlamaJ,RomdaneMN.CarencesencuivreetenzincchezlesbovinsdelarégiondeBéja:relationssol-plante-animal.RevMédVét2011;162(10):468-74.

18. JovanovićM,Aleksić-KovačevićS,KneževićM.Specijalnaveterinarskapatologija.Fakultetveteri-narskemedicineBeograd,2012:245-8.

19. JuniperDT,PhippsRH,JonesAK,BetrinG.Seleniumsupplementationoflactingdairycows:ef-fectonseleniumconcentration inblood,milk,urineand feces.JDairySci 2006;89:3544-51.

20. KinalS,KorniewiezA,JamrozD,ZieminskiR,SlupezynskaM.Dietaryeffectsofzinc,copperandmanganesechelatesandsulphatesondairycows.JFoodAgricEnviron2005;3:168-72.

21. KnaapenAM,NehlsP,BormAJ.NeutrophilscauseoxidativeDNAdamageinalveolarepithelialcells.FreeRadBioMed1999;27:234-40.

Literatura / References


162

22. KommisrudE,OsterasO,VatnT.BloodseleniumassociatedwithhealthandfertilityinNorwegiandairyherds.ActaVetScand2005;46:229-40.

23. LarsenHJS.Relationbetweenseleniumandimmunity.NorJAgricSci1993;11:105-19.24.MaasJ,GaleyFD,PeauroiJR,CaseJT,LittlefieldES,GayCC,KollerLD,CrismanRO,Weber

DW,WarnerDW,TracyML.Thecorrelationbetweenserumseleniumandbloodseleniumincattle.JVetDiagnInvest1992;4:48-52.

25. MalardBA,DekkersJC,IrelandJM,LeslieKE,SharifS,LaceyVC,WacterL,WilkieBN.Alterationinimmuneresponsivenessduringtheperipatrumperiodanditsramificationondairycowandcalfhealth.JDairySci1998;81:585-95.

26.MayerG,KleinM.Histologyandcytologyofthemammarygland,UKonSK,CowieAT,editors.Milk:themammaryglandanditssecretion(Vol.1).NewYork:AcademicPress,1961.

27. McKenzieRC,RaffertyTS,BeckettGJ.Selenium:anessentialelementforimmunefunction.Im-munolToday1998;19:342-5.

28. MegliaGE,HolteniusK,PeterssonL,OhagenP,PerssonWallerK.PredictionofvitaminA,vita-minE,seleniumandzincstatusofperiparturientdairycowsusingbloodsamplingdurigthemiddryperiod.ActaVetScand2004;45:119-28.

29. MegliaGE,JohannissonA,PeterssonL,PerssonWallkerK.Changesinsomebloodmicronutri-ents,leukocytesandneutrophilexpressionofadhesionmoleculesinperiparturientdairycows.ActaVetScand2001;42:109-20.

30. MillerGY,BartlettPC,ErskineRJ,SmithKL.FactorsaffectingserumseleniumandvitaminEcon-centrationindairycows.JAVMA1995;206:1369-73.

31. MillerJK,Brzezinska-SlebodzinskaE,MadsenFC.Oxidativestress,antioxidantsandanimalfunc-tion.JDairySci1993;76:2812-23.

32. MukherjeeR.SeleniumandvitaminEincreasespolymorphonuclearcellphagocytosisandantioxi-dantlevelsduringacutemastitisinriverinebuffaloes.VetResCommun2008;32:305-13.

33. NdiveniN,FieldTR,WilliamsMR,BoothJM.StudiesontheincidenceofclinicalmastitisandbloodlevelsofvitaminEandseleniumindairyherdsinEngland.VetRec1991;129:86-8.

34.NRC(NATIONALRESEARCHCOUNCIL):Nutrient requirementsofDairyCattle,NationalAca-demicPress,Washington,DC,2001.

35. PaulrudCO,ThamsborgSM,EnevoldsenC,RasmussenMD.Effectofthreedifferent linersonheiferteatcanalkeratin.JDairyRes2004;72:255-7.

36.PavlataL,PodhorskyA,PechovaA,ChomatP.Differencesintheoccurrenceofselenium,cop-perandzincdeficienciesindairycows,calves,heifersandbulls.VetMedCzech2005;50(9):390–400.

37. Pilarczyk B, Jankowiak D, Tomza-MarciniakA, Pilarczyk R, Sablik P, Drozd R, TylkowskaA,SkólmowskaM.Seleniumconcentrationandglutathioneperoxidase(GSH-Px)activityinserumofcowsatdifferentstagesoflactation.BiolTraceElemRes2012;147(1-3):91-6.

38. RabieeAR,LeanIJ,StevensonMA,SochaMT.Effectsoffeedingorganictracemineralsonmilkproductionandreproductiveperformanceinlactatingdairycows:Ameta-analysis.JDairySci2010;93:4239-51.

39. RanL,WuX,ShenX,ZhangK,RenF,HuangK.Effectsofseleniumformonbloodandmilksele-niumconcentrations,milkcomponentandmilkfattyacidcompositionindairycows.JSciFoodAgric2010;90(13):2214-19.

40.SmithKL,HoganJS,WeissWP.DietaryvitaminEandseleniumaffectmastitisandmilkquality.JAnimSci1997;75:1659-65.

41.SordilloLM,Shafer-WeaverK,DeRosaD. Immunobiologyof themammarygland.JDairySci1997;80:1851-65.

42.TamasiG,BelliniM,LorenziniS,ChindamoD,MarcolongoR,BaroniF,RiccobonoF,NettiR,CiniR.CaseStudyforSelectedHeavyElementsinBloodandPlasmafromSixFemalePa-tientswithSystemicSclerosis(Scleroderma,SSc).TheConcentrationsofMercury,Lead,Antimony,Cobalt,CopperandZinc.TheOpenAnalyticalChemistryJournal2008;2:55-61.

43.TomlinsonDJ,MullingCH,FaklerTM. Invited review: formationofkeratins in thebovineclaw:rolesofhomones,mineralsandvitaminsinfuctionalclawintegrity.JDairySci2004;87:797-809.


163

44.TomlinsonDJ,SochaMT,DeFrainJM.Roleoftracemineralsintheimmunesystem.Proc.Penn.StateDairyCattleNutritionWorkshop2008:39-52.

45.VanRynM.Relationshipofcopper,zinc,andseleniumstatuswithudderhealthandmastitisinci-denceinthepolyholsteinherd.CollegeofAgriculture,FoodandEnvironmrntalScience,CaliforniaPolytechnicStateUniversity,SanLuisObispo,USA,2009

46.VanSaunRJ.Rationapproachtoseleniumsupplemnetationessential.Feedstuffs1990;15:15-21.47.WeissWP,WyattDJ.Effectsoffeedingdietsbasedonsilagefromcornhybridsthatdifferedin

concentrationandinvitrodigestibilityofnaturaldetergentfibertodairycows.JDairySci2002;85:3462-69.

48.WeissWP,HoganJS,TodhunterDA,SmithKL.EffectofvitaminEsupplementationindietswithalowconcentrationofseleniumonmammaryglandhealthofdairycows.JDairySci1997;80:1728-37.

49.WeissWP.Relationshipofmineral andvitamin supplementationwithmastitis andmilkquality.In:Proc.AnnualMeeting,NationalMastitisConcil,Orlando,Florida,USA,2002:37-44.

50. ZhaoX,LacasseP.Mammarytissuedamageduringbovinemastitis:Causesandcontrol. JAnimSci2008;86:57-65.

THE INFLUENCE OF SELENIUM AND ZINC ADDITION IN FOOD ON CONCENTRATION OF THESE ELEMENTS IN BLOOD AND MILK, ON SOMATIC

CELLS NUMBER AND HISTOLOGICAL CHARACTERISTICS OF COWS UDDERS

Davidov Ivana, Cincović M. R., Radinović M., Erdeljan M., Belić Branislava, Toholj B., Stevančević M.

Theexperimentincluded30cowsofHolstein-Friesianbreed,outofwhich15werereceivingseleniumandzincinoptimaldosesbeforecalving,whiletheothershadneverbeensupplementedwith thesemicronutrients.Therewasanalysedtheconcentrationofseleniumandzincinbloodandmilkserumaswellastheaveragenumberofsomaticcellsincorrespondinglactation.Afterthecowsexclusionfromproduction,histologicalcharac-teristicsofcowsudderswereexamined.Theresultsoftheinvestigationhaveshownthatadditionofseleniumandzincbeforecalvinghasapositiveeffectonthevaluesofthesemicroelementsinthebloodandmilkduringtheperiodofearlylactation,thatis,thecon-centrationoftheseelementswassignificantlyhigherinthebloodandmilkofthecowsthatobtainedseleniumandzincsupplements.Also,inthesecowstherewassignificantlylowernumberofsomaticcellsduringthefollowinglacationperiod.Intheparenchymaoftheud-dertherewasfoundlesspronouncedinfiltrationofleukocytes,notablythickerkeratinlay-erofductus papillarisandlessexpressedrepairingprocessesthatindicateachronicin-flammationoftheudderinthesamplesafterexclusionofthecowsfromproduction.Therewasasignificantpositivecorrelationbetweenseleniuminbloodandmilk,whiletherewasnotobservedsuchacorrelationforzinc.Ontheotherhand,therewasasignificantnega-tivecorrelationbetweentheconcentrationofseleniuminthebloodandmilkwiththeaver-agenumberofsomaticcellsandthedegreeofinfiltrationofleukocytes,whileitsinfluenceonthekeratinlayerofductus papillaruswasnotshown.Zincfrombloodandudderhadanegativecorrelationwiththenumberofsomaticcells,hadapositivecorrelationwiththethicknessofductus papillaris keratinlayerandhadnoinfluenceonthelevelofleukocyteinfiltrationofudderparenchyma.Zincdemonstratesapositiveinfluenceontheformationofductus papillaris keratinlayerandprotectstheudderfrompathogenspenetration,whileseleniumstimulatestheimmunologicalresponseoftheudder.Theirpositiveimpactcanbe

ENGLISH


164

definedasadditive,becauseathoughtheyhaveeffectontwomorphologicallyseparateud-derparts,addingbothofthemsignificantlydecreasesthenumberofsomaticcellsinmilk.

Keywords:selenium,zinc,dairycows,mastitis,histologyoftheudder

ВЛИЯНИЕ КОРМОВЫХ ДОБАВОК С СОДЕРЖАНИЕМ ЦИНКА И СЕЛЕНА НА КОНЦЕНТРАЦИЮ ДАННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ В КРОВИ И МОЛОКЕ,

НА КОЛИЧЕСТВО СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК И ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ВЫМЕНИ У КОРОВ

Давидов Ивана, Цинцович M.Р., Радинович M., Ерделян M., Белич Бранислава, Тохоль Б., Стеванчевич M.

В эксперименте участвовало 30 коров голштино-фризской породы. 15 коровполучалиселеницинквоптимальнойдозировкевпериоддоотела,остальные15коровбылиотобраныизгруппыкоров,никогдаранеенапротяжениисвоейжизнинеполучавшихуказанныемикроэлементыввидедобавок.Былпроведенанализкон-центрацииселенаицинкавсывороткемолокаикрови,атакжесреднегоколичествасоматических клеток в соответствующей лактации. После выбытия коров былиисследованыгистологическиехарактеристикивымени.Результатыисследованийпо-казали,чтоупотреблениеселенаицинкау короввпериодпередотеломположи-тельно влияет на показатели данныхмикроэлементов в крови и молоке в периодраннейлактации,тоестьконцентрацияэтихэлементовзначительновышевмолокеикровикоров,получавшихдобавки,содержащееселеницинк.Укоров,получавшихс кормами указанныемикроэлементы, отмечено значительноменьше среднее ко-личество соматических клеток в период последующей лактации. Отмечена менеевыраженная инфильтрация паренхимы вымени лейкоцитами, значительно болеетолстый кератиновый слой ductus papillaris и менее выраженные репарационныепроцессы, указывающие на хроническое воспаление вымени в препаратах, полу-ченныхпослевыбытиякоровизпроизводства.Существуетзначительнаяпозитивнаякорреляциямеждусодержаниемселенавкровиимолоке,приэтомтакаякорреляцияне отмечена между показателями содержания цинка. Существует значительнаяотрицательнаякорреляциямеждуконцентрациейселенавкровиимолокесосреднимколичеством соматических клеток и степенью лейкоцитарной инфильтрации, приэтомвлияниенакератиновыйслойductuspapillarisнеотмечено.Цинк,содержащийсяв кровии вымени, отрицательно коррелирует с количеством соматических клеток,приэтомположительнокоррелируетстолщинойкератиновогослояductuspapillaris,авлияниенастепеньинфильтрациипаренхимывыменилейкоцитамиотсутствует.Цинкоказываетположительноевлияниенаформированиекератиновогослояduc-tuspapillariизащищаетвымяотпроникновениявозбудителей,втовремякакселенвлияетнаиммуннуюреакциювымени.Ихположительноедействиеможнобылобыохарактеризовать как аддитивное, так как, несмотря на то, что они воздействуютнадваморфологически разных участка вымени, добавление и первого, и второгоэлементазначительносокращаетколичествосоматическихклетоквмолокекоров.

Ключевыеслова:селен,цинк,молочнаякорова,мастит,гистологиявымени

РУССКИЙ


Documents

UTICAJ DODAVANJA SELENA I CINKA U HRANI NA … · kojima su u hrani bili dodavani ovi mikroelementi postoji značajno manje učešće onih krava čija je prosečna vrednost broja