SMEE UNUTRA, SMEE VAN!UZORKOVANJE

Gurni mi stari tu bocu da uzmem uzorak.

Najvanija pravila uzorkovanja su:-strogo potivanje pisanih uputa o uzorkovanju,-ukljuivanje u posao samo dobro educiranog i licenciranog osoblja,-uporaba iskljuivo postupkom predvienih alata i posuda za spremanje uzoraka,-paljiv izbor mjesta uzorkovanja temeljem pisane upute,-voenje oevidnika o svim postupcima tijekom uzorkovanja,-biljeenje svih odstupanja od pisane upute,-obvezno obiljeavanje uzoraka i/ili posuda u koje su stavljeni,-pridravanje svih uputa o transportu i pohrani uzoraka,-ako je potrebno, nadzor nad cijelim postupkom uzorkovanja od strane nezavisne ovlatene komisije.

DOBAR UZORAK JE VRIJEDAN POTOVANJA

Opa uputa mora ukljuiti vrlo jasne preporuke za:-vrstu posude, ukljuujui kemijski sastav njezinih stjenki, tip alata za uzorkovanje i nain njihovog koritenja prije, za vrijeme i nakon uzorkovanja,-nain izbora mjesta uzorkovanja,-druge uvjete kojih se mora obvezno pridravati tijekom posla (npr. vrsta odjee za zatitu djelatnika i uzorka, vrste drugih alatki koje se koriste pri poslu kao npr. vrsta amca kod uzorkovanja na povrinskim vodama, itd.),-precizna uputa za svaku vrstu materijala,-nain evidentiranja i upisivanja svih potrebnih podataka,-nain obiljeavanja uzoraka,-postupke koje se mora obaviti u sluaju odstupanja od pisane upute o uzorkovanju.-tono vrijeme i mjesto uzorkovanja,-dodatne podatke koji se moraju evidentirati tijekom uzorkovanja (npr. hidrometeoroloki i hidrogeoloki uvjeti),-druge posebnosti.

Evidencija mora sadravati minimalno slijedee podatke:-oznaku koja je postavljena na uzorak,-tono vrijeme uzorkovanja (poetak i kraj),-vrstu alata za uzorkovanje i spremnika u koji je stavljen uzorak te eventualne podatke o pomonim alatkama koje su uporabljene tijekom uzorkovanja,- opis mjesta uzorkovanja (npr. dubina vode iz koje je uzet uzorak, obino uz skicu),-hidrometeoroloki uvjeti na mjestu uzorkovanja kroz vrijeme uzorkovanja,-koliina uzorka,-drugi posebni zahtjevi (npr. razina povrinske vode, temperatura uzorka, pH, nazonost mulja u vodi, itd.),-zapaanja o izgledu uzorka (npr. neugodan miris, boja, druga organoleptika opaanja, itd.),-sva odstupanja od pisanih uputa o uzorkovanju,-ime osobe koja je obavila uzorkovanje.

Temeljna pravila uzorkovanja uz povjerenstvo jesu:-nazonost nezavisnih svjedoka uzorkovanja,-osiguravanje uzorka od zlouporabe bilo koje vrste, na cijelom putu, od uzorkovanja do predaje meunarodno priznatoj instituciji,-pohrana i transport pod uvjetima koji osiguravaju stabilnost analita,-priprava pouzdane dokumentacije za sve postupke s uzorkom, od uzorkovanja do predaje nezavisnoj strunoj instituciji.

Povjerenstvo se mora sastojati od najmanje 3 osobe koje trebaju imati slijedee:-dokument odgovorne osobe o imenovanju komisije,-pisane upute o uzorkovanju,-oevidnik o uzorkovanju, za svaki uzorak, potpisan od svih lanova komisije,-ig za peatni vosak ili za plombiranje uvan od strane nezavisne institucije.

VRSTE UZORAKA-BIOLOKI MATERIJALI-ZRAK-VODA-TLO-HRANA-DRUGI MATERIJALI

Volite li ovaj uzorak?

BIOLOKI MATERIJALI

-KRV I KRVNI DERIVATI-MOKRAA-ELUANI SADRAJ-TKIVO-DRUGO (npr. kosa, slina, suze, kosti)

IZRADA PLANA UZORKOVANJA BIOLOKOG MATERIJALARAZLOG OBAVLJANJA ANALIZE (otkrivanje otrova, utvrivanje koncentracije, toksikokinetski razlozi)TOKSIKOKINETIKA OTROVA (mjesta gdje se nakuplja, putovi kojima se eliminira, itd.)ANALITIKA METODA NA RASPOLAGANJU (uzmi to ima)DRUGI RAZLOZI (npr. Etika)

VANI PODACI KOD UZORKOVANJA BIOLOKOG MATERIJALAVRIJEME UZORKOVANJA U ODNOSU NA INGESTIJU ILI IZLOENOST OTROVU.NAIN UZIMANJA MATERIJALA ANALIZE (npr. Nain pripreme za ubod, vrsta igala s kojim se uzorkuje, itd.)TVARI DODANE U UZORAK (npr. konzervansi ili antikoagulansi)PREDOBRADA PRIJE SLANJA U LABORATORIJ (npr. vrsta centrifugiranja i odvajanja stanica krvi)POHRANA I TRANSPORT UZORKA

KRV I KRVNI DERIVATI KAO UZORCI-Prikladni jer govore o koncentraciji otrova u organizmu - siguran dokaz otrovanja-Izbor derivata ovisi o toksikokinetici otrova-Vano ispravno odvojiti stanice od seruma ili plazme-U pravilu koncentracije nie nego u drugim toksikolokim uzorcima

KAD SE KORISTI KRV KAO UZORAKPRI OCJENI TEINE OTROVANJAKOD PRAENJA TIJEKA LIJEENJAKAO SIGURAN DOKAZ ULASKA OTROVA U ORGANIZAMU TOKSIKOKINETICI

MOKRAA KAO UZORAK ANALIZE-Prikladna kad se otrov ili njegovi metaboliti izluuju mokraom-Obino se rauna na visoke koncentracije otrova-Korelacija s koncentracijama u krvi obino nije dobra-Vrlo rijetko se koristi u toksikokinetskim pokusima (nesigurni volumeni),-Vani i etiki razlozi izbora mokrae

PROBLEMI S MOKRAOMOVISNOST KONCENTRACIJE O DIUREZIZNATAN BROJ METABOLITAOVISNOST ELIMINACIJE O FUNKCIJI BUBREGASLABA KORELACIJA S KONCENTRACIJOM U KRVIDRUGO (npr. problemi sakupljanja)FEMINISTIKA ZABRANA

ELUANI SADRAJ-Prikladan zbog visokih koncentracija otrova brzo nakon ingestije,-Pozitivan nalaz nije dokaz da je dolo do apsorpcije otrova

MOEMO LI KORISTITI KOSU?SAMO U SLUAJEVIMA KAD SE OTROV NAKUPLJA U KOSI, A TO NIJE TAKO RIJETKO (Zna li netko primjere?)

DOJKA JE IZVOR IVOTA ZA DIJETE, A RADOSTI ZA OCA!MLIJEKO JE PRIKLADNO ZA OTROVE KOJI SE U MLIJEKU NAKUPLJAJU (preteno lipofilne tvari)

MOGUI SU I DRUGI MATERIJALI POPUT SLINE, SUZA, KOE, TKIVA, KOSTI, ZRAK IZ PLUA, ITD. (Kako doi do sline?)

OPI INITELJI IZBORA MJESTA UZORKOVANJA ZRAKA

-razlog uzorkovanja-pristupanost mjesta uzorkovanja-atmosferske mijene

VRSTE UZORAKA

PLINOVIVRSTE ESTICE

ALATKAISPIRALICEFILTRICIKLONPOTHLAENI TRAPKOLONE SA SORBENSOMDRUGO (npr. elektroprecipitacija

TAKO SE TO RADI

UZORKOVANJE PLINOVA

-Adsorpcija na sorbens-Otapanje u prikladnom otapalu-Kondenzacija kod sniene temperature

UZORKOVANJE VRSTIH ESTICA-Filtracija-Sedimentacija,-Otapanje,-Ciklonima,-Drugo (npr. elektrostatski filtri)

NA EGA SE MORA MISLITI KOD UZORKOVANJA ZRAKAPROCES (emisija, imisija, transmisija)UZORKOVANJE JE U PRAVILU EKSTRAKCIJAVANO JE MJESTO UZORKOVANJA (hidrometeorologija, vrijeme uzorkovanja, mogunost interferencije)VANA JE ISPRAVNA TEHNIKA

DANAS SE OBAVLJAJU I IZRAVNA KONTINUIRANA MJERENJARuni ureaj.Mobilni ureaj.Stalna vienamjenska postaja.

MALO O VODIZNATE LI GDJE JE OVO SNIMLJENO?

STRATEGIJA UZORKOVANJA VODE OVISI O:

-tipu "tijela vode",-svojstvu otrova koji valja analizirati,-red veliine koncentracije otrova u uzorku,-razlog uzorkovanja,-posebnosti analitikog laboratorija kojemu se alju uzorci itd.

TIPOVI TIJELA VODE-povrinske vode (npr. rijeke, jezera, more, izvori, itd.)-podzemne vode,-oborinske vode,-voda za pie (vodovod, vodotornjevi, vodospreme, autocisterne, itd.),-industrijski i kanalizacijski izljevi,-vode oneiene kemijskim katastrofama.

STRATEGIJA UZORKOVANJA POVRINSKE VODE OVISI O:

-hidrogeolokim uvjetima (npr. tip tla na obali i dnu te podzemnih voda koje eventualno prihranjuju tijelo vode),-zemljopisnom poloaju u odnosu na efluente s moguim utjecajem na tijelo vode,-dnevnim i godinjim varijacijama u protoku vode, njezinoj temperaturi, sastavu biosfere u tijelu vode, koncentraciji polutanata u efluentima iz industrije a s utjecajem na tijelo vode, itd.-prirodi toka vode na mjestu uzorkovanja (npr. bez toka, lagani tok, brzi tok),

MJESTA UZORKOVANJA

-obalne vode,-podruje bez toka,-matica,-sediment,-biosfera,-itd.

JEDNOSTAVNE ALATKE

A MOE I DRUGAIJE

ZA PODZEMNE VODE PIEZOMETRIPIEZOMETAR ZA DVA SLOJA.JEDNOSTAVNO UKLJUISISALJKU!

ZEMLJA JE NAJVANIJI MEDIJ OKOLIAOneienja se dreniraju u povrinske vodeProcjeuju se u podzemne vodeIz zemlje rastu biljke koje su hrana ivotinjama, pa i preko biljaka i ivotinja ovjek dobiva oneienjePlodnost zemlje ovisi o njezinoj istoiPogledajte kakoje lijepa!

PROCESI KOJI SE ODIGRAVAJU S OTROVOM U TLU

-prelazak otrova iz tla u zrak,-adsorpcija na tlo i desorpcija s njega,-solvatacija i depozicija,-kemijska degradacija i kemijske reakcije s konstituentima tla,-bakterijski metabolizam i bioakumulacija u jednostavnim organizmima,-ulazak u biljke i ivotinje,-ispiranje drenaom.

Na brzinu procesa prelaska iz tla u zrak e utjecati slijedei imbenici:

-fizikalno kemijska svojstva otrova (prvenstveno hlapljivost, hidrofilnost odnosno lipofilnost, reaktivnost)-lokalni klimatski uvjeti (temperatura tla i zraka, vjetrovitost, vlanost tla, itd.),-dubina penetracije u tlo,-tip tla i intenzivnost njegove obrade (npr. oranje u odnosu na zaputeno tlo),-intenzivnost vegetacije.

Penetracija kroz tlo je najvaniji proces ovisan je o brojnim imbenicima kao:

-fizikalno kemijska svojstva otrova,-sastav tla,-koliina organske tvari u strukturi tla,-uinkovitosti drenae,-vlanost i drugi hidroloki uvjeti,-lokalni geoloki uvjeti,-drugi imbenici (npr. pH, temperatura)

SVI MEHANIZMI VODE PREMA LOEM ISHODU

ALATKE ZA UZORKOVANJE TLA

UZORAK ANALIZE U TOKSIKOLOGIJI MOE BITI BILO TO-IME RUE (knjiga)-PAUINA IZ 1991. U REPUBLICI HRVATSKOJ-BAXTEROVI DIJALIZACIJSKI FILTRI-KOZMETIKA ZA MUKARCE-LONAC OBINI-TISUE DRUGIH SLUAJEVA

UMBERTO ECO, IME RUES ime su bili impregnirani listovi Aristotelove knjige o humoru?

PAUINA 1991.-SJEA LI SE ITKO TOGA -U istraivanja ukljueni svi instituti, zavodi i fakulteti,-Nikada nije dokazana na pauini opasna kemikalija ili mikroorganizam-Dokazano da po sastavu i drugim osobinama odgovara prirodnoj pauini-Nema dokaza o podrijetlu i razlozima pojave-Nismo sigurni to je to zapravo bilo

SLUAJ JUENKO Zato samo po licu? Je li to bila hrana ili kozmetiki preparat?

LONACMoe li se u ovakvom loncu zadrati fungicid koriten za tretiranje vinograda?

Zanima li vas pria?

Zakljuak o uzorkovanju

Toksikolog se mora pridravati opih mjera koje su vane pri uzorkovanju tj.:-zatita osobe koja obavlja uzorkovanje od djelovanja potencijalnog otrova iz uzorka,-zatita uzorka od kontaminacije,-uzimanje reprezentativnog uzorka-uzimanje dovoljne koliine uzorka-komisijsko uzorkovanje kod i najmanje mogunosti da bi to bilo potrebno-uzimanje minimalno dva uzorka u sluaju kada se uzorkovanje obavlja komisijski-pohrana u iste spremnike-sainjavanje zapisnika sa svim detaljima o uzorku, mjestu uzorkovanja (veoma je korisna skica) i nainu sakupljanja uzorka-transport u hermetiki zatvorenim spremnicima na temperaturi koja e sprijeiti eventualni raspad otrova.

EKSTRAKCIJA OTROVA IZ MATERIJALA ANALIZE-destilacija-ekstrakcija na temelju razlika u topljivosti-adsorpcija-molekulska filtracija-dijaliza-ultracentrifugiranje-druge tehnike

EKSTRAKCIJA PLINOVITIH KISELINA I BAZA IZ TEKUEG ILI VRSTOG MATERIJALAPRIPRAVA UZORKAPREVOENJE U HLAPLJIVI OBLIK PROMJENOM pHDESTILACIJA U MEDIJ GDJE SE PODEAVANJEM pH PREVODE U IONIZIRANI OBLIK

EKSTRAKCIJA ORGANSKIM OTAPALOM

Promjena pH vodenog medijaIsoljavanjeTvorba ionskog paraTvorba kelataVezanje lipofilne faze na vrsti nosa

OVO JE TEK STARA SLIKAEKSTRAKCIJA SE MOE OBAVLJATI U LIJEVKU ZA ODJELJIVANJE, EPRUVETI ILI NEKOJ DRUGOJ POSUDI. NEMA VEZE!

ZAKISELJENI MATERIJAL (biolokimaterijal ili bilo koja druga otopina)EKSTRAKCIJA ORGANSKIMOTAPALOMVODENI DIO (baze, zwiter ioni, anionii kationi)ORGANSKI DIO (lipofilne i kisele organskemolekulezaluivanje i ekstrakcijaorganskim otapalomekstrakcija kiselinomORGANSKI DIO(baze)VODENI DIO(ostalo)ORGANSKI DIO(lipofilne tvari)VODENI DIO(kiseline)ionska izmjena zaekstrakciju kationa i anionazakiseljavanje i ekstrakcijaorganskim otapalomEKSTRAKT (anorganski kationi i anioni)OSTATAK (zwiter ioni, proteini i drugo)EKSTRAKT (organske kiseline)OSTATAK (nije od interesa)KLASINA TOKSIKOLOKA EKSTRAKCIJA

PROBLEMI S KLASINOM TOKSIKOLOKOM EKSTRAKCIJOM I ANALIZOM

-PREDUGO TRAJE-EKSTRAKCIJA MOE IMATI MALO ISKORITENJE-DIO MOLEKULA SE MOE TIJEKOM POSTUPKA PROMIJENITI (npr. proteini)-SKUP JE TO POSTUPAK

EKSTRAKCIJA NA OBRNUTIM FAZAMABrzoJednostavnoSpecifinoNesigurno iskoritenje

DETEKCIJA OTROVA

Otkrivanje otrovnostiOtkrivanje i dokazivanje otrova

OTRKRIVANJE OTROVNOSTI-MODELI

-Bakterijski,-Kulture prikladnih stanica,-ivotinje,Klinika iskustvaEpidemioloka istraivanja

BAKTERIJSKI MODELBRZONESIGURNODOBRO U EKOTOKSIKOLOGIJI

MODEL VODENIH IVOTINJAPRIKLADNO ZA OTKRIVANJE OTROVNOSTI ZA VODENE ORGANIZMETREBA OBAVITI POKUS NA BAREM DVA MODELA

TVARI OPASNE ZA IVOTINJE TLANAJEI MODEL BAKTERIJA I GLISTA

NAJSIGURNIJI PODACI NA SISAVCIMASVE JE VEI OTPOR

Detekcija u biolokom materijalu-odreivanje biokemijskih pokazatelja stanja bolesnika,-utvrivanje posebnih uinaka otrova,-analize prosijavanja,-testovi dokazivanja otrova

BIOKEMIJSKI POKAZATELJI

-acidobazni status,-elektroliti,-druge specifine biokemijske pretrage, prema prosudbi kliniara.

Utvrivanje posebnih uinaka otrova

-mjerenje aktivnosti acetil kolinesteraze,-koagulacijske pretrage,-mjerenje postotka met- i karboksi-hemoglobina,-druge pretrage.

OD NERONA DO DANAS NITA SE NIJE PROMIJENILOI JA SAM JEDNOM BIO KUA. ZANIMA LI VAS PRIA?