AZ ERŐKIFEJTÉS KULCSA: A MIOZIN AKTIVÁCIÓS HUROK

 

Boglárka Várkuti

Eötvös Loránd TudományegyetemBiológiai Intézet, Biokémiai TanszékMolekuláris Biológiai és Bioinformatikai KutatócsoportVezető: Dr. Málnási-Csizmadia András

téma: enzimek szerkezetvizsgálata

  

 

A novel actin binding site of myosin required for effective muscle contraction.Várkuti BH, Yang Z, Kintses B, Erdélyi P, Bárdos-Nagy I, Kovács AL, Hári P, Kellermayer M, Vellai T, Málnási-Csizmadia ANat Struct Mol Biol. 2012 Feb 12;19(3):299-306. doi: 10.1038/nsmb.2216.

BEVEZETÉS I: A MIOZIN 

összes sejtünkben jelen van   állatok, növények, gombák 

sokféle funkció 

izomösszehúzódás, sejtosztódás, sejtrészecskék szállítása …

azonos mechanizmus aktin (vele/nélküle) 

BEVEZETÉS II: AZ AKTIN ÉS A MIOZIN

miozin

aktin

aktin aktiváció több nagyságrenddel gyorsabb működés hatékonyabb motor

aktivációs hurok

EREDMÉNYEK I: IN VITRO 

kísérletes eredmények: miozin aktivációs hurka köti az aktint 

aktivációs hurok mutációja enzim ugyanúgy működőképes nincs aktin aktiváció!! specifikus 

fluoriméter„stopped-flow” / megállított áramlású tranziens kinetikai műszer

A MUTÁCIÓK LÉTREHOZÁSA 

mutációk

aktivációs hurok mutációk aktin aktiváció hiány nem hatékony enzimműködés

EREDMÉNYEK II: IN VIVO - GYORSASÁG

génpuska 

vad típus

transzgénikusvad

transzgénikustestfalmiozin mutáns

testfalmiozin hiányos

gyors ~ 180-200 µm/s

elég gyors ~ 150-180 µm/s

lassú~ 50-80 µm/s

nagyon lassú~ 20-40 µm/s

aktivációs hurok mutációk lassú kukacok

EREDMÉNYEK II: IN VIVO - ERŐ 

vad típus

transzgénikusvad

transzgénikustestfalmiozin mutáns

testfalmiozin hiányos

erős ~ 20 µN

erős ~ 20 µm

gyenge ~ 1-2 µN

gyenge ~ 1-2 µN

atomerőmikroszkóp

aktivációs hurok mutációk gyenge kukacok

transzgénikusvad

transzgénikustestfalmiozin mutáns

EREDMÉNYEK II: IN VIVO - ERŐ

mizozin aktivációs hurok specifikusan felelős aktin aktivációért motor hatékonyságáért defektes aktivációs hurok lassúság, gyengeség

sejt hatékony működéséhez elengedhetetlen miozin defektusokhoz komoly betegségek köthetőek (?)

KONKLÚZIÓ

KÖSZÖNETNYÍLVÁNÍTÁS  

falco.elte.hu

www.sote.hu

The Hollfelder Group

www.anatomia.elte.hu

Málnási-Csizmadia András Zhenhui Yang

Kintses Bálint

Vellai Tibor Erdélyi Péter

Bárdos-Nagy IrénKellermayer Miklós

Hári Péter

Kovács L. Attila

EGYÉB ERŐFORRÁSOK: