Upload
andrey-kulakovskiy
View
102
Download
6
Embed Size (px)
Citation preview
Артефакты
Причины и устранение
Гистологический процесс
2
Микротомия
Взятие материала
ЗаливкаФиксация
Вырезка
Проводка
Транспортировка
Окраска Заключение
1. Ошибки на стадии взятия или вырезки.
● Выглядят как сдавление, разрыв ткани, деформация или фрагментация.
● Всегда необратимы, иногда ставят под вопрос диагностическую ценность материала!
3
Разновидности. Механическое травмирование.
Сдавление пинцетом, использование тупого режущего инструмента, воздействие лазером и прочее. Самый распространенный вид.
4
Разновидности. Хранение, шовный материал.
● Хранение в таре, не соответствующей по размеру и вызванное этим сдавление, а также дефекты фиксации.
● Фрагменты шовного материала.
5
2. Ошибки при фиксации
● Влияют на все последующие стадии (плохо зафиксированный материал не может быть хорошо проведен и хорошо окрашен).
● При грубых ошибках фиксации материал становится непригодным к исследованию!
6
Разновидности. Аутолиз.
Аутолиз тканей, происходящий при нарушении правил взятия материала и фиксации. Причиной аутолиза помимо недостаточной фиксации может быть фиксация формалином высокой концентрации, приводящая к переуплотнению материала по краям и плохой фиксации в глубине. Аутолиз является наименее благоприятным, но достаточно распространённым дефектом.
7
Разновидности. Формалиновый пигмент.
Артефакты, являющиеся следствием химической реакции формальдегида и фиксируемой ткани. Это, например, появление чёрного пигмента при образовании солей с гемоглобином, что впоследствии потребует дифференциальной диагностики с меланином и гемосидерином, или артефактоы рыжего цвета при выпадении солей муравьиной кислоты.
8
Разновидности. Неравномерная фиксация
Неравномерное окрашивание из-за неравномерной фиксации.
9
3. Ошибки при проводке
● Встречаются чаще всего, но в большом проценте случаев связаны изначально с плохой фиксацией.
● Частично обратимы.
10
Разновидности. “Пересушенный материал”
● Избыточная длительность пребывания в спирте.
● Излишнее использование нагрева (слишком высокая температура),
● Неправильный подбор сред и прочее.
Помимо трещин, видных невооруженным глазом, и больших затруднений при получении среза, микроскопически видно уменьшение и деформация тканевых структур.
11
Разновидности. Недостаточная проводка.
Чаще встречается при работе с плотной тканью (опухоли, связки) либо тканью, содержащей значительное количество жира.● Любая ткань, вызывающая
затруднения в проводке, требует выработки отдельного протокола.
12
13
Плохо проведенный образец.
4.Ошибки при заливке
● Неправильная ориентация образца● Термические повреждения● Механические повреждения
14
5. Ошибки при микротомии.Наибольшие сложности возникают в следующих случаях:1) Избыточно твердый материал
(недостаточная декальцинация, переуплотнение при фиксации, плотная ткань)
2) Избыточно мягкий, плохо проведенный материал.
● Правильно подбирать тип лезвия!
● Не допускать наличия в одном блоке разных по плотности тканей!
15
16
Разновидности. Мех.повреждения.
17
Разновидности. Контаминация.
6. Ошибки при окраске● На предварительных этапах:
плохое подсушивание или пересушивание, неправильное закрепление на стекле
● Редко: сильное перекрашивание или недокрашивание
● Часто: участки с артефактами вследствие неправильно подобранного протокола
● Часто: артефакты при использовании старых или некачественных красителей
18
Разновидности. Плохая депарафинация.
Неравномерность окраски из-за недостаточной депарафинации.Как избежать?● Чистота реагентов● Правильный
протокол и внешние условия (t)
19
Разновидности. Использование белка.
● Появление фоновой окраски при использовании адгезионных сред
● Пустая трата времени и сил
● Низкая технологичность
20
7. Ошибки при заключении● Инородные частицы (чаще
всего - чешуйки кожи с пальцев, пыль)
● Воздушные пузыри● Кристаллизация среды для
заключения● “Паутина” (Sakura Film)● Недостаточная
дегитратация и\или просветление.
21
Не получается? - зовите на помощь
На рынке появилась услуга консультаций для гистологических лабораторий. БиоВитрум - первые (и пока единственные), кто может это предложить.
22
Сообщество лаборантов-гистологов
23
Не получается? - зовите на помощь!
На сегодняшний день никто не может предложить решение Ваших проблем у Вас в лаборатории:●Решение поставленной задачи. Только практика.●Повышение скорости и качества работы.●Эргономика.●Передовые Lean-технологии, 3D-моделирование.●Введение точек контроля для закрепления результата.
24
География
25
Спасибо за внимание!
Вопросы?Предложения?
26
Контакты
Гистоклаб:
histoclub.ru
8 (800) 700-92-46 (бесплатный)БиоВитрум:
biovitrum.ru 8 (495) 787-40-46
27