UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALAFACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Docente: Bioq. Farm. Carlos García MsC.Alumno: Adrián Wellington Barros Valarezo.Curso: Quinto Año. Paralelo: “A”.Grupo: #4.

Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes 15 de Junio del 2015.Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes 22 de Junio del 2015.

PRÁCTICA N°3.

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ALCOHOL METÍLICO.

Animal de Experimentación: Rata Wistar.

Vía de Administración: Vía Intraperitonial.

Volumen Administrado: 10 ml.

Tiempos:

1. Inicio de la práctica: 07:50 AM.2. Hora de administración del toxico a la rata wistar: 07:52 AM.3. Deceso del animal: 08:05 AM. (12 minutos).4. Hora de disección: 08:07 AM.5. Hora de destilación: 08:10 AM.6. Final de la Práctica: 10:25 AM.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta la rata wistar luego de haber administrado el alcohol metílico.

2. Determinar el tiempo en que actúa el tóxico en el organismo de la rata wistar para causarle la muerte.

3. Conocer mediante varias pruebas de identificación la presencia del alcohol metílico en la rata wistar.

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 1

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SUSTANCIAS

1. Ácido tartárico.2. Permanganato de potasio

al 2%.3. Ácido oxálico.4. Cloruro de fenilhidracina

al 4%.5. Ferricicianuro de potasio

al 5-10%.6. Cloruro férrico.7. NaOH 20%.8. Agua destilada.9. Alcohol metílico.

EQUIPO:1. Balanza analítica.

MATERIALES

1. Bisturí.2. Equipo de disección.3. Cinta.4. Vasos de precipitación.5. Erlenmeyer.6. Mechero.7. Varilla de vidrio.8. Papel filtro.9. Pinzas.10.Embudo11.Gorro.12.Equipo de destilación.13.Jeringuilla de 10cc.14.Tubos de ensayo.15.Perlas de vidrio.16.Panema.17.Pipetas.18.Cronómetro.19.Guantes de látex.20.Mascarilla.21.Mandil.

PROCEDIMIENTO:

1. Desinfectar la mesa de trabajo.

2. Equiparse adecuadamente con la ropa de trabajo para la realización de la

práctica.

3. Tener listo todos los materiales que se van a utilizar en la mesa de trabajo.

4. Con la jeringuilla administramos 10cc de alcohol metílico a la rata wistar por vía

Intraperitonial.

5. Controlar el tiempo en que se administra el toxico.

6. Colocar a la rata wistar en la panema y observar las manifestaciones que se

presentan.

7. Luego colocar a la rata wistar en la tabla de disección y empezar a rasurar en la

parte donde se va a realizar la disección.

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 2

8. Después abrirlo con el bisturí y proceder a extraer los órganos depositándolos

en un vaso de precipitación.

9. Procedemos a triturar los órganos para luego ser colocados en un balón

previamente antes ya colocadas las perlas; luego adicionamos ácido tartárico.

10. Procedemos a destilar pero previo a esto se arma el equipo de destilación y se

prepara el NaOH 0.1N, luego se coloca el balón aforado al equipo de destilación,

abriendo el paso de agua.

11. Con el mechero se flamea con ligeros movimientos por 30 minutos hasta

obtener el destilado.

12. Con el destilado se procede a realizar las reacciones de reconocimiento.

Reacciones:

1. Reacción de Schiff:

A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al

1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja

reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido

oxálico. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada, con lo cual se produce

un intenso color violeta en caso de positivo.

2. Reacción de Rimini

A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas

de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución

de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.

3. Con la Fenilhidracina

En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad

de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de

solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de

potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.

4. Reacción de Marquis

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 3

Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita

luego con una solución sulfúrica de morfina; se obtiene enseguida o después de

algún tiempo un color violeta.

5. Con el Ácido Cromotrópico

Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el

formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.

6. Reacción de Hehner

Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con

ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico; en

caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.

GRÁFICOS:

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 4

Realizamos la destilación de las vísceras.

Diseccionamos a la rata.

Extraemos las vísceras y trituramos en el matraz junto

con las perlas de vidrio.

Inyectamos 10 ml de metanol.

Tenemos listo los materiales a utilizar.

Conocamos a la rata e la panema.

Realizamos las reacciones de reconocimiento.

Reconocimiento en Medios Biológicos

Reacción Positivo característico Cambio de coloración

Reacción Negativo Lijeramente Amarillo

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 5

REACCIÓN CON LA FENILHIDRACINA.

REACCIÓN DE RIMINI

REACCIÓN DE SCHIFF.

ANTES

ANTES

DESPUÉS

DESPUÉS

Reacción Positivo No característico Ligeramente Café.

Reacción Positivo No característico Ligeramente amarillo.

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 6

CIANURO DE SODIO + ÁCIDO SULFÚRICO.

REACCIÓN DE MARQUIS.

ANTES

ANTES

DESPUÉS

DESPUÉS

Reacción Positivo No característico Color Negro.

Reacción Positivo No característico Amarillo turbio.

OBSERVACIONES:

1. En la práctica se logró observar que al administrar el alcohol metílico en la rata

wistar actuó a los doce minutos, entre los síntomas que se observo fue

nistagmus, convulsiones y finalmente murió intoxicado.

2. Cuando se disecciono a la rata wistar los órganos estaban afectados por la

presencia del alcohol metílico en su organismo.

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 7

ANTES DESPUÉS

REACCIÓN DE HEHNER.

ANTES DESPUÉS

CONCLUSIONES:

Al finalizar la práctica, la rata wistar ante la intoxicación por alcohol metílico

presento sintomatología como por ejemplo ceguera y convulsiones, debido a

que se le administró una dosis superior a la prescrita, murió a los 12

minutos (07:52 – 08:05 AM), llegando como conclusión que el metanol es

muy tóxico para el organismo ya sea humano o animal.

Mediante las reacciones de reconocimiento se evidencio que hubo presencia

de metanol en los órganos de la rata wistar.

RECOMENDACIONES

Manipular correctamente el animal.

Asegurarse que el equipo esté bien sellado, de esta forma impedimos que se

escapen los vapores.

Al aplicar calor en la destilación no se debe permitir que la muestra llegue a

elevarse y por ende a contaminar el equipo, de esta forma se echaría a perder la

práctica.

Tener la debida precaución con las perlas.

CUESTIONARIO.

1. ¿Qué es el alcohol metílico?

También conocido como alcohol de madera o alcohol, es el alcohol más sencillo. A

temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero, incoloro, inflamable y

tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible.

2. ¿Cuál es la composición de los siguientes alcoholes?

Alcohol Industrial – Metanol.

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 8

Alcohol antiséptico – Etanol.

Alcohol boricado – Etanol.

Alcohol fino – Etanol.

Alcohol Isopropilo – Propeno.

3. ¿Qué tan tóxico es el metanol?

En concentraciones elevadas el metanol puede causar dolor de cabeza, mareo, náuseas,

vómitos y muerte. Una exposición aguda puede causar ceguera o pérdida de la visión,

ya que puede dañar seriamente el nervio óptico. Una exposición crónica puede ser

causa de daños al hígado o de cirrosis.

BIBLIOGRAFÍA O WEBGRAFÍA:

https://es.wikipedia.org/wiki/Metanol

https://es.wikipedia.org/?title=Metanol#Toxicidad

http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/

Ficheros/0a100/nspn0057.pdf

AUTORIA:

Bioq. Farm. Carlos García.

Machala, 22 de Junio del 2015.

FIRMA DE RESPONSABILIDAD:

___________________________________

Adrián Barros Valarezo.

GLOSARIO.

NISTAGMO.

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 9

Es un movimiento involuntario e incontrolable de los ojos. El movimiento puede ser

horizontal, vertical, rotatorio, oblicuo o una combinación de estos. El nistagmo está

asociado a un mal funcionamiento en las áreas cerebrales que se encargan de controlar

el movimiento, pero no se comprende muy bien la naturaleza exacta de estas

anomalías.

CIRROSIS.

Es una histopatología en la que las células del parénquima de un órgano interno

cualquiera son sustituidas, al morir, por un tejido anormal de tipo cicatricial formado a

partir del tejido estromal del propio órgano.

ANTICONGELANTES.

Son compuestos que se añaden a los líquidos para reducir su punto de solidificación,

logrando de esta forma que la mezcla resultante se congele a una temperatura más

baja. Una aplicación típica es añadirlos a la gasolina y el diésel para evitar su

solidificación en invierno, así como al agua del circuito de refrigeración de los motores

para que funcionen expuestos a temperaturas extremas. Otra aplicación es inhibir la

corrosión de los sistemas de refrigeración que a menudo contienen una gama de

metales electroquímicamente incompatibles.

SOLIDIFICACIÓN.

Es un proceso físico que consiste en el cambio de estado de la materia de líquido a

sólido producido por una disminución en la temperatura o por una compresión de este

material. Es el proceso inverso a la fusión, y sucede a la misma temperatura. Ejemplo

de esto es cuando colocamos en el congelador agua, como la temperatura es muy baja

esto hace que se haga hielo, o en pocas palabras, aumenta el volumen al solidificarse,

aunque no sucede en todos los casos.

“Todo es veneno, Nada es veneno. Todo depende de la dosis”. 10