Mayela Estivalis Vega Rivera

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS

TÉCNICA HISTOLÓGICA• Serie de métodos y técnicas utilizados para poder estudiar las

características morfológicas y moleculares de los tejidos.

1.- Obtención de muestra

2.- Fijación

3.- Deshidratación

4.- Aclaramiento

5.- Inclusión

6.- Corte

7.- Baño de flotación

8.- Tinción

1.- OBTENCIÓN DE MUESTRA

• Biopsia• Necropsia• Frotis de células superficiales• Frotis de células sanguíneas• Aplastados celulares

2.- FIJACIÓN

• Con un fijador simple (Formaldehido) o mezcla de fijadores (liquido de Bouin o Helly).

• Conservar la morfología y la composición de los tejidos.

• Se puede clasificar en 3 métodos:o Por inmersión o Por perfusión o Por vapores

3.- DESHIDRATACIÓN• Con Alcohol etílico

• Eliminar el agua de los tejidos.

• Evita la deformación de la a morfología del tejido, debido a la rápida salida del agua.

4.- ACLARAMIENTO

• Se sumerge el tejido en un liquido que sea miscible tanto en el medio de inclusión como en el medio de deshidratación.

• Xilol

• Benzol

• Tolueno

Confección del taco:

Es la inclusión definitiva del trozo de tejido. Se utiliza un molde metálico especial denominado barras de Leuckart, donde se vierte parafina liquida (60°C).

• Los tejidos deben ser sumergidos en una sustancia de consistencia firme, la cual puede ser hidrófila o hidrófoba.

• Parafina

• Paraplast

5.- INCLUSIÓN

6.- CORTE• Se debe cortar el taco obtenido

en secciones muy delgadas que permitan el paso de luz, utilizando el micrótomo.

• Con un grosor de 6 a 8 µm.

• Tipo Minot

7.- BAÑO DE FLOTACIÓN

• Se coloca la muestra sobre el agua tibia y se retira con un portaobjetos.

8.- TINCIÓN

• Colorantes básicos: Basófilos. Hematoxilina Azul de toluidina Azul de metileno

• Colorantes ácidos: Acidófilos. Eosina Naranja G Fucsina ácida

Hematoxilina – EosinaHematoxilina

Azul: Núcleo, regiones ácidas del citoplasma

Eosina

Rosa: Regiones básicas del citoplasma, fibras de colágena

Tricrómetrico de MassonNegro: NúcleosRojo: Músculo, queratina, citoplasmaAzul o verde: Colágena

Ácido periódico de Schiff (PAS)Magenta: Glucógeno y moléculas ricas en carbohidratos

MICROSCOPIO ÓPTICO

Pie: Sirve como base al microscopio y en él se encuentra la fuente de iluminación.

Platina: superficie sobre la que se colocan las preparaciones.

Tubo: Cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio.

Brazo: Une al tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el microscopio para mover de lugar.

Macrométrico: Sirve para tener un primer enfoque de la muestra al utilizarse el objetivo de menor aumento.

Micrométrico: Sirve para dar un enfoque preciso de la muestra.

Ocular: sistema de lentes más cercanos al ojo observador, situados en la parte superior (10x).

Revolver: estructura giratoria que contiene los objetivos.Objetivos: Sistema de lentes convergentes que se acoplan en la parte inferior del tubo.

Condensador: Sistema de lentes convergentes que captan los rayos de luz y los concentra sobre la preparación.

Fuente de luz: Lámpara halógena de bajo voltaje (12V).