Click here to load reader

Técnicas Histológicas

  • View
    89

  • Download
    2

Embed Size (px)

Text of Técnicas Histológicas

1. Mayela Estivalis Vega Rivera TCNICAS HISTOLGICAS 2. TCNICA HISTOLGICA Serie de mtodos y tcnicas utilizados para poder estudiar las caractersticas morfolgicas y moleculares de los tejidos. 1.- Obtencin de muestra 2.- Fijacin 3.- Deshidratacin 4.- Aclaramiento 5.- Inclusin 6.- Corte 7.- Bao de flotacin 8.- Tincin 3. 1.- OBTENCIN DE MUESTRA Biopsia Necropsia Frotis de clulas superficiales Frotis de clulas sanguneas Aplastados celulares 4. 2.- FIJACIN Con un fijador simple (Formaldehido) o mezcla de fijadores (liquido de Bouin o Helly). Conservar la morfologa y la composicin de los tejidos. Se puede clasificar en 3 mtodos: o Por inmersin o Por perfusin o Por vapores 5. 3.- DESHIDRATACIN Con Alcohol etlico Eliminar el agua de los tejidos. Evita la deformacin de la a morfologa del tejido, debido a la rpida salida del agua. 6. 4.- ACLARAMIENTO Se sumerge el tejido en un liquido que sea miscible tanto en el medio de inclusin como en el medio de deshidratacin. Xilol Benzol Tolueno 7. Confeccin del taco: Es la inclusin definitiva del trozo de tejido. Se utiliza un molde metlico especial denominado barras de Leuckart, donde se vierte parafina liquida (60C). Los tejidos deben ser sumergidos en una sustancia de consistencia firme, la cual puede ser hidrfila o hidrfoba. Parafina Paraplast 5.- INCLUSIN 8. 6.- CORTE Se debe cortar el taco obtenido en secciones muy delgadas que permitan el paso de luz, utilizando el micrtomo. Con un grosor de 6 a 8 m. Tipo Minot 9. 7.- BAO DE FLOTACIN Se coloca la muestra sobre el agua tibia y se retira con un portaobjetos. 10. 8.- TINCIN Colorantes bsicos: Basfilos. Hematoxilina Azul de toluidina Azul de metileno Colorantes cidos: Acidfilos. Eosina Naranja G Fucsina cida 11. Hematoxilina Eosina Hematoxilina Azul: Ncleo, regiones cidas del citoplasma Eosina Rosa: Regiones bsicas del citoplasma, fibras de colgena Tricrmetrico de Masson Negro: Ncleos Rojo: Msculo, queratina, citoplasma Azul o verde: Colgena cido peridico de Schiff (PAS) Magenta: Glucgeno y molculas ricas en carbohidratos 12. MICROSCOPIO PTICO Pie: Sirve como base al microscopio y en l se encuentra la fuente de iluminacin. Platina: superficie sobre la que se colocan las preparaciones. Tubo: Cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio. Brazo: Une al tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el microscopio para mover de lugar. Macromtrico: Sirve para tener un primer enfoque de la muestra al utilizarse el objetivo de menor aumento. Micromtrico: Sirve para dar un enfoque preciso de la muestra. Ocular: sistema de lentes ms cercanos al ojo observador, situados en la parte superior (10x). Revolver: estructura giratoria que contiene los objetivos. Objetivos: Sistema de lentes convergentes que se acoplan en la parte inferior del tubo. Condensador: Sistema de lentes convergentes que captan los rayos de luz y los concentra sobre la preparacin. Fuente de luz: Lmpara halgena de bajo voltaje (12V).