اختبار تكوين الروز (أو الزهيرات)

اختبار تكوين الروز )أو الزهيرات(

األساس العلمي:بالـ • خاصة سطحها على مستقبالت البائية الخاليا بعد SRBCتمتلك

بها التمنيعضد • متكونة مضادة أجسام المستقبالت هذه قبل SRBCتكون

المستضد على التعرف مرحلة في أي المصل في إفرازها مرحلةو مبدية البائية الخاليا حضنت حرارة SRBCفإذا درجة في C H4معا

منظر مبدية البائية الخلية سطح على تلتصق الكريات هذه فإن. ) بالزهيرات ) وتعرف الضوئي بالمجهر زهيرة الروز

الهدف منه: البائية- 1 الخاليا تعرف لمرحلة N وظيفيا المناعي الجهاز لقدرة مقياس

المستضد .( SRBC)علىالتائية- 2 والخاليا البائية الخاليا من لكل الوظيفية للقدرة مقياس يعتبر

المساعدة.

ويتم إجراء هذا األختبار بالخطوات التالية:اختبار- 1 أول إجراء قبل البريتوني الغشاء تحت الفئران تحقن

بحوالي أيام معلق ( 0.3ml-0.2)بثالث .SRBC% 1منالخاليا- 2 منه تستخرج حيث الطحال ويستخرج افئران تشرح

. ذكرها السابق بالطريقة الليمفاويةفي 5 ×10يؤخذ- 3 وتوضع الطحال خاليا من ليمفاوية خلية

. نظيفة اختبار أنبوبةالليمفاوية- 4 الخاليا من العدد هذا إلى معلق 0.1mlيضاف من

إليه SRBC% 1 خاليا .0.05ml مضاف الفئران مصل منسرعة- 5 عند المركزي الطرد جهاز في األنابيب 1500تدار

r.p.m. حرارة درجة عند دقائق خمس . CH4لمدةبخاليا- 6 المختلطة الليمفاوية الخاليا في SRBCتحضن

حرارة درجة عند درجة 30لمدة CH37حضان عند ثم دقيقةبين CH4حرارة تتراوح .hrs 12-10لمدة تحريكها دون

أزرق- 7 صبغة N وايضا الدم عند جهاز باستعمال للروز المكونة الخاليا تعدالتربيان.

موجبة- 8 للروز المكونة الخاليا الليمفاوية (P)تحسب الخلية تلتصق حينخاليا ثالث بعدد

خاليا من ثالث SRBCفأكثر من بأقل الملتصقة الليمفاوية الخلية تعتبرخلية بأي ملتصقة غير أو سالبة SRBCخاليا ليمفاوية في (N)خلية

. ميتة خلية تعتبر التربيان بأزرق تصبغ التي الليمفاوية الخلية ان حين

= الموجبة للروز المكونة الخاليا عدد للروز المكونة الخاليا نسبةـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ ×

100 فقط الحية الليمفاوية للخاليا الكلي العدد

Rosette forming cells )RFC(% = no. of RFC ___________________ x 100

total no. of cells

اختبار التالزن الدموي

يستخدم لقياس تركيز األجسام المضادة المتكونة ضد الخاليا الدموية التي سبق حقنها في الفار, وقد

الستحثاث تكوين االجسام SRBCاستخدمت المضادة.

طريقة العمل:- تخدر الفئران باإليثر ثم يسحب الدم لكل فأر على حدة 1

في انبوبة اختبار نظيفة بدون مانع للتخثر .- يفصل المصل بالطريقة السابق ذكرها2C- يوضع المصل عند درجة حرارة 3 H56 20 لمدة min

وذلك لتثبيط عمل العامل المتمم حتى اليحدث تحلل .SRBCللخاليا

- يجرى االختبار في أطباق تالزن خاصة بها عيون على شكل 4 • (U)حرف

- يتم عمل سلسلة من إثنى عشر تخفيف متضاعف في مصل 5 • ، ومصل مجموعة من الفئران SRBC الفئران المستحثة بخاليا

.SRBCغير المستحثة بخاليا% من 1 من ml 0.5- يوضع في كل عين من عيون الطبق 6 •

PBC فيSRBCمعلق- يخصص صف لكل مصل ويوضع مقدار متساوي من كل 7•

في كل عين SRBCعلى خاليا ( 0.05ml)تخفيف من المصلعلى حدة.

N ثم يغطى الطبق ويترك لمدة SRBC- يخلط المصل بخاليا8• جيداساعتين في درجة حرارة الغرفة وتؤخذ له قراءة أولى ثم يترك

وتؤخذ له القراءة الثانية.CH 4 ساعة في 18لمدة -وتقرأ النتيجة بالعين المجردة حيث أننا نجد أن النتيجة الموجبة 9•

بيبي مضغوط أو فيلم منتشر من الخاليا المتالزنة تظهر تالزن ح�تغطي قعر العين، اما النتيجة السالبة تظهر كحلقة كثيفة من

الخاليا أو زر دقيق منفصل من الخاليا وسط العين

الدموي : • التالزن الختبار صورة

االستجابة لتعين المعملية الطرقالخلوية المناعية

من • النوع هذا في تدخل التي التفاعالت سلسلة إنالخاليا تتفاعل خاصة بصورة مرتبطة المناعة

العديد ضد التفاعالت مثل الهدف الخاليا مع المؤثرةهو كما لها N مكانا الخاليا من تتخذ التي الجراثيم من

. وغيرها السل جراثيم في الحالفي • الخلوية التفاعالت تدخل ذلك إلى إضافة

وفي واألعضاء األنسجة بنقل الخاصة المناعة. وغيرها السرطان حاالت