артефакты и борьба с ними

Артефакты

Причины и устранение

Гистологический процесс

2

Микротомия

Взятие материала

ЗаливкаФиксация

Вырезка

Проводка

Транспортировка

Окраска Заключение

1. Ошибки на стадии взятия или вырезки.

● Выглядят как сдавление, разрыв ткани, деформация или фрагментация.

● Всегда необратимы, иногда ставят под вопрос диагностическую ценность материала!

3

Разновидности. Механическое травмирование.

Сдавление пинцетом, использование тупого режущего инструмента, воздействие лазером и прочее. Самый распространенный вид.

4

Разновидности. Хранение, шовный материал.

● Хранение в таре, не соответствующей по размеру и вызванное этим сдавление, а также дефекты фиксации.

● Фрагменты шовного материала.

5

2. Ошибки при фиксации

● Влияют на все последующие стадии (плохо зафиксированный материал не может быть хорошо проведен и хорошо окрашен).

● При грубых ошибках фиксации материал становится непригодным к исследованию!

6

Разновидности. Аутолиз.

Аутолиз тканей, происходящий при нарушении правил взятия материала и фиксации. Причиной аутолиза помимо недостаточной фиксации может быть фиксация формалином высокой концентрации, приводящая к переуплотнению материала по краям и плохой фиксации в глубине. Аутолиз является наименее благоприятным, но достаточно распространённым дефектом.

7

Разновидности. Формалиновый пигмент.

Артефакты, являющиеся следствием химической реакции формальдегида и фиксируемой ткани. Это, например, появление чёрного пигмента при образовании солей с гемоглобином, что впоследствии потребует дифференциальной диагностики с меланином и гемосидерином, или артефактоы рыжего цвета при выпадении солей муравьиной кислоты.

8

Разновидности. Неравномерная фиксация

Неравномерное окрашивание из-за неравномерной фиксации.

9

3. Ошибки при проводке

● Встречаются чаще всего, но в большом проценте случаев связаны изначально с плохой фиксацией.

● Частично обратимы.

10

Разновидности. “Пересушенный материал”

● Избыточная длительность пребывания в спирте.

● Излишнее использование нагрева (слишком высокая температура),

● Неправильный подбор сред и прочее.

Помимо трещин, видных невооруженным глазом, и больших затруднений при получении среза, микроскопически видно уменьшение и деформация тканевых структур.

11

Разновидности. Недостаточная проводка.

Чаще встречается при работе с плотной тканью (опухоли, связки) либо тканью, содержащей значительное количество жира.● Любая ткань, вызывающая

затруднения в проводке, требует выработки отдельного протокола.

12

13

Плохо проведенный образец.

4.Ошибки при заливке

● Неправильная ориентация образца● Термические повреждения● Механические повреждения

14

5. Ошибки при микротомии.Наибольшие сложности возникают в следующих случаях:1) Избыточно твердый материал

(недостаточная декальцинация, переуплотнение при фиксации, плотная ткань)

2) Избыточно мягкий, плохо проведенный материал.

● Правильно подбирать тип лезвия!

● Не допускать наличия в одном блоке разных по плотности тканей!

15

16

Разновидности. Мех.повреждения.

17

Разновидности. Контаминация.

6. Ошибки при окраске● На предварительных этапах:

плохое подсушивание или пересушивание, неправильное закрепление на стекле

● Редко: сильное перекрашивание или недокрашивание

● Часто: участки с артефактами вследствие неправильно подобранного протокола

● Часто: артефакты при использовании старых или некачественных красителей

18

Разновидности. Плохая депарафинация.

Неравномерность окраски из-за недостаточной депарафинации.Как избежать?● Чистота реагентов● Правильный

протокол и внешние условия (t)

19

Разновидности. Использование белка.

● Появление фоновой окраски при использовании адгезионных сред

● Пустая трата времени и сил

● Низкая технологичность

20

7. Ошибки при заключении● Инородные частицы (чаще

всего - чешуйки кожи с пальцев, пыль)

● Воздушные пузыри● Кристаллизация среды для

заключения● “Паутина” (Sakura Film)● Недостаточная

дегитратация и\или просветление.

21

Не получается? - зовите на помощь

На рынке появилась услуга консультаций для гистологических лабораторий. БиоВитрум - первые (и пока единственные), кто может это предложить.

22

Сообщество лаборантов-гистологов

23

Не получается? - зовите на помощь!

На сегодняшний день никто не может предложить решение Ваших проблем у Вас в лаборатории:●Решение поставленной задачи. Только практика.●Повышение скорости и качества работы.●Эргономика.●Передовые Lean-технологии, 3D-моделирование.●Введение точек контроля для закрепления результата.

24

География

25

Спасибо за внимание!

Вопросы?Предложения?

26

Контакты

Гистоклаб:

histoclub.ru

8 (800) 700-92-46 (бесплатный)БиоВитрум:

biovitrum.ru 8 (495) 787-40-46

27