Внедрение инновационных технологий в диагностику социально значимых заболеваний в Республике Казахстан

д.м.н., профессор Толемисова Арай

Магауияновна

“Cоздавая будущее для диагностики ТВ”

1

Внедрение новейших методов скрининга и углубленной диагностики социально значимых заболеваний – онкологических и туберкулеза - является одной из существенных задач, решение которых позволило бы снизить высокий уровень заболеваемости и смертности по этим нозологиям в Республике Казахстан. Передовые позиции в разрешении этих вопросов занимает Оздоровительный центр Масимова.

Одним из первых Центр в 2010 году начал работу в новом направлении - внедрении инновационной технологии ранней диагностики рака шейки матки совместно с партнерами из Южной Кореи.

2

В скрининге рака шейки матки впервые в РК была использована технология жидкостной цитологии с помощью системы Сэлл Скан южнокорейского производства. Метод жидкостной цитологии был впервые разработан и одобрен для клинического использова- ния еще в 1996 году в США, а затем получил широкое признание за рубежом, как эффективный метод скрининга рака шейки матки и рака некоторых других локализаций, а также предраковых заболеваний. С помощью системы Сэлл Скан проводится обработка эксфолиативных клеток, полученных из органов и тканей и помещенных в презервационный раствор в виалах.

3

Система СellScan Tb

Для сбора образца в системе Сэлл Скан применяется комбинация методов фильтрации и преципитации.Используются два отличительных метода фильтрации: один из них установлен на виале, а другой на мембранной системе. В мембранном фильтре применяется умеренное вакуумное давление, что позволяет пропускать презервационный раствор и другие вещества, кроме тех, которые необходимы для диагностики. После устранения презервационного раствора и других веществ на мембране остаются только клетки определенного размера, которые наносятся в автоматическом режиме в один слой на микроскопическое стекло, окрашиваются и микроскопируются.

5

Этапы работы Сэлл Скан

По данным различных авторов, жидкостная технология производства цервикальных мазков позволяет получить стандартныецитологические препараты высокого качества, в 6-8 раз снизить количество неудовлетворительных для оценки мазков и значительно повысить каче ство скрининга, уменьшая число ложноотрицательных заключений, которое при традиционном методе достигает 16%. Важным преимуществом жидкостной цитологии является возможность при необходимости провести на полученном материале допол нительные молекулярные исследования (Hybrid Capture II на вирус папилло мы человека высокого риска, иммуноцитохимические, молекулярно-генетические и др.).

7

Технология жидкостной цитологии была апробирована и в ранней диагностике колоректального рака в республике. Апробация технологии в практических учреждениях здравоохранения выявила ее большую диагностическую ценность в сравнении с использовавшимися ранее методами цитологического исследования, что позволило Оздоровительному центру Масимова при поддержке государства внедрить технологию жидкостной цитологии в государственную программу скрининговых исследований по выявлению рака шейки матки ранней стадии его развития и колоректального рака.

8

В 2011 году четырем областным онкологическим диспансерам 5-ти городов Центром поставлены по государственному закупу аппараты жидкостной цитологии CytoFastS.A, а также безвозмездно на сумму 8 000 тыс.тенге были переданы расходные материалы к аппарату, а областному онкологическому диспансеру Южно-Казахстанской области – и само оборудование.

В 2013 году комплекты диагностического оборудования Сэлл Скан 100 и Сэлл Скан 200 безвозмездно переданы 16-ти областным онкологическим диспансерам, при этом экономия бюджетных средств составила 360 000 тыс.тенге. Параллельно специалисты по проведению скрининга и по сервисному обслуживанию оборудования за счет средств Центра прошли обучение в Южной Корее.

9

Одним из весьма важных направлений в деятельности Центра является внедрение инновационных технологий в диагностику туберкулеза в РК. Несмотря на достаточно сложную эпидемиологическую ситуацию, у Казахстана есть возможность добиться прогресса в решении этой задачи путем повсеместного внедрения в стране Международных стандартов по диагностике и лечению случаев туберкулеза. Одним из важнейших аспектов снижения уровня заболеваемости туберкулезом является его профилактика, достигаемая скрининговыми обследованиями населения, в частности, наряду с другими, бактериоскопией нативного мазка мокроты. Традиционная бактериоскопия не всегда позволяет обнаружить МБТ. Значительно повышает ее эффективность концентрирование микобактерий на стекле, используемое в методе жидкостной цитологии с помощью прибора Сэлл Скан, выпускаемого южнокорейской фирмой Cell & Tech Bio Co.

10

Теория обнаружения туберкулеза методом ЖЦ

Огромное количество слизи Удаление слизи

Нативный мазок Жидкостная цитология

Преимущества Сэлл Скан-тb-технологии анализа мокроты в сравнении с обычной бактериоскопией

Дегенерация пробы

Высокая вероятность заражения

Высокая вероятность

повторного теста

Стандартизация пробы

Нет риска заражения

Вероятность дополнительного

теста

Самый распространенный цитологический метод

диагностики

Тонкослойный метод для ясного фона

Результаты окрашивания

(x1000) Прямой мазок Посредственный мазок

14

Лабораторные испытания, проведенные специалистами фирмы Cell & Tech Bio Co у 325 больных с подтвержденным культурально диагнозом туберкулеза показали, что жидкостная цитология обладает значительными преимуществами перед обычной микроскопией мазка мокроты. Так, отрицательный результат при использовании СellScan Tb –метода наблюдался всего лишь в 2 % случаев, тогда как при обычной бактериоскопии – в 37% случаев.

Более высок процент обнаружения и при небольшом количестве МК в полях зрения. Аналогичные результаты были получены и в Национальной туберкулезной больнице Мокпхо-Сити (Ю.Корея).

Сравнительные данные по выявлению МБК методом СellScan Tb и обычной бактериоскопией мазка мокроты

РезультатыСellScan Традиционная

бактериоскопияАбс. % Абс. %

Отрицательный 7 2 121 37Положительный

4+ ( более 10 в 1 п/зр)

3+ (1-9 в 1 п/зр)

2+(1-9 в 10 п/зр)

1+(1-9 в 100 п/зр)

32

98 %

9,8 12

63%

3,69

32 9,8 19 5,8

117 36 66 20,3

137 42,1 107 32,9

Всего: 325 325

СellScan Tb – метод позволяет в автоматизированном режиме осуществить концентрацию микобактерий туберкулеза, нанести концентрат на микроскопическое стекло и провести сканирование мазка с выдачей результата. Аппарат прост в применении, может обслуживаться одним человеком (врачом или лаборантом), безопасен в плане возможного заражения персонала биосубстратами, так как мокрота, кровь и другой материал забираются в специализированные контейнеры и обрабатываются в закрытом режиме аппаратом. Еще одним преимуществом является возможность забора материала в контейнеры на выезде в отдаленных районах с последующей обработкой в лабораториях.

16

Преимущества СellScan Tb-метода

Высокая чувствительность – до 95% (обычная бактериоскопия – 66%) Высокая специфичность - до 100% Автоматизированный режим работы Простота обслуживания аппарата Безопасность Возможность онлайн-просмотра Возможность забора материала на выезде и последующей

обработкой в лабораториях Возможность анализа не только мокроты, но и другого

биоматериала Повышение качества и количества выполняемой

специалистами работы

Расходный материал Сэлл-Скан рассчитан на обработку 120 проб и окрашивание 240 стекол в час, т.е., за 1 год можно обследовать 172800 человек, а за 3 года – почти все население РК.

СellScan Tb - технология прошла апробацию и в Научно-исследовательском Центре проблем туберкулеза, где получила одобрение.

18

ОЦМ аппараты жидкостной цитологии для определения микобактерий туберкулеза поставлены на безвозмездной основе во все 16 регионов РК, что позволяет широко использовать этот более чувствительный цитологический метод и охватить обследованием значительные слои населения.

19

Таким образом, внедрение инновационного метода жидкостной цитологии с помощью системы Сэлл Скан является одним из необходимых условий эффективного скрининга и диагностики

туберкулеза и онкопатологии(рака шейки матки, колоректального рака).

20

Благодарю за внимание!

Функция антисептика и стерилизации

Тест на культивирование после хранения в презервационном растворе

Хранение 30 мин Хранение 2часа Хранение 24 часа

Эпидемиологическая ситуация по туберкулезу в РК по данным за 2013 год

Год

Показатели Заболеваемости, на 100000 населения

Показатели смертности, на

100000 населения

Всего Взрос-лые

Дети Под-рост-

ки

Находя-щиеся в КУИС

Всего

Находя-щиеся в КУИС

2012 81,7 105,5 13,7 90,9 941,1 7,4 115,2

2013 73,4 96,0 11,3 76,3 965,8 5,6 88,6

24

Рентгенограмма

Обнаружение TB

Культура, ПЦРАнализ мокроты

Диагностика TB

Преимущества и ограничения в использовании молекулярно-генетических и культуральных методов диагностики туберкулеза

Метод Преимущества Ограничения в использовании

Xpert MTB/RIF, молекулярно- генетический метод рекомендован ВОЗ

Используется для выявления МБТ, чувствительности к рифампицину.

Время – 2-3 часа Автоматизировано Безопасно для

персонала

Высокая стоимость Требуется соответ-

ствующее техничес-кое обслуживание

Необходима подго-товка персонала

Определение чувст-вительности только к рифампицину

Преимущества и ограничения в использовании молекулярно-генетических и культуральных методов диагностики туберкулеза продолжение

Hein-testмолекулярно-генетический

Используется для выявле-ния микобак-терий тубер-кулеза (МБТ), чувствитель-ности к рифампицину и изониазиду.

 

Высокая стоимость Требуется соответст-

вующее техническое обслуживание

Необходима подготов-ка персонала

Длительность Определение чувстви-

тельности только к 2 антибиотикам

Преимущества и ограничения в использовании молекулярно-генетических и культуральных методов диагностики туберкулеза

продолжение

БАСТЕС МGIT-960 Культуральные методы

Ускоренное культиви-рование на жидких питательных средах с автоматической регис-трацией роста культуры

Прямое выявление возбудителя

Длительность 7-14 дней

Длительность Стоимость

3 Приемы для максимального сохранения клеток

Как получить хорошие результаты

Муколитическое средство

Фильтр

Приводит к химической и физической реакции свободных микроорганизмов, попавших в мокротуМикрофильтр отделяет клетки и микроорганизмы от инородных веществ

Предотвращает воздушно-капельный перенос бактерий

Препятствует растворению

Продукт_Cистема ЖЦ Сell Scan_3

○ Метод преципитации и фильтрации (Cell Scan, Cell&Tech Bio)

Фильтрующий аппарат

АвтоматРучной

Емкость для преципитации

- Преципитация производится силой центрифуги и гравитацией.- Два фильтра помогают получить нужное количество клеток.- Перенос клеток путем штамповки предотвращает потерю клеток.- При штамповке клетки равномерно распределяются по кругу.

Мембрана

Проба

Аспирация

Штамповка

Механизм