4-5.-PRODUKSI-BENIH-KULJAR

8/17/2019 4-5.-PRODUKSI-BENIH-KULJAR

1/50

PEMBIBITANDENGAN KULTUR

JARINGAN


2/50

Pokok bahasan:

- Macam teknik kultur jaringan untukpembibitan

- Kelebihan dan kelemahan pembibitandari

kultur jaringan

- Tehnik perbanyakan pada tanamandikotil dan

monokotil- Menghasilkan bibit bebas virus

- Tahapan pembibitan secara in vitro

- Contoh pembibitan pada beberapatanaman


3/50

MACAM TEK!K K"#T"$ %A$!&A

"T"K PEM'!'!TA

() Kultur meristem

*) Kultur pucuk

+) Kultur embrio

,) Kultur embrio somatik .E /

somatic embryo0


4/50

KE#E'!1A 2A KE#EMA1A

K"#T"$ %A$!&A

Kelebihan :

() %umlah bibit yang diproduksi bisa banyak*) .ehat3 bebas dari virus dan penyakit lain

+) $elati4 cepat rate ,-5 perbulan0

,) .eragam

5) Memudahkan dalam transportasi


5/50

KE#E'!1A 2A KE#EMA1A

K"#T"$ %A$!&A

Kekurangan :

() 'iaya lebih mahal

*) 'utuh skill6keahlian khusus

+) Mutasi 6of type akibat sub kultur

berlebih variasi somaklonal


6/50

() Kultur meristem

Kultur biakan0 yang menggunakan bahantanam berupa pucuk tanaman yang terdiridari titik tumbuh dan primordia daun)

'agian tersebut terdiri dari sel-selmeristem yg berciri :

a) .itoplasma penuh

b) !nti sel besarc) 'elum ada vacuola dan amylum

d) Akti4 membelah


7/50

() Kultur meristem

Tujuan : untuk menghasilkan tanamanbebas

virus

Penggunaan : apabila tanaman yang akandiperbanyak dalam kondisi terserangpenyakit) Misalkan jeruk terkena C7P23

anyelir terserang virus mosaic3 kentangterserang penyakit penting)

Teknik : () Tanpa heat treatment

*) 2engan heat treatment


8/50

() Kultur meristem

Teknik

• Tunas pucuk dari tanaman sakitditumbuhkan perbanyakan eksplan0

• Tunas pucuk dipotong sepanjang 5 cmdan diisolasi dengan cara membuangdaun terluar dan disterilkanmenggunakan teknik standar)

• Media yang digunakan sesuai reerence masing - masing tanaman3 padat ataucair)


9/50

() Kultur meristem

Teknik

• 8aktu inokulasi digunakan mikroskop agarnampak bagian meristem3 yaitu titik

tumbuh dan primordia daun (-* pasang0)• Menggunakan pinset ujung bengkok dan jarum atau scalpel ujung lengkung3meristem diisolasi secara hati hati

• Meristem diletakkan pada media agaryang lunak atau media cair dengan kertas9lter)


10/50

() Kultur meristem


11/50

() Kultur meristem

Teknik

• .esudah meristem tumbuh normal danagak besar3 eksplan disubkultur ke

media kultur pucuk yaitu media agakkeras3 diberi PT untuk penggandaan)

• Pengujian virus menggunakan ELISA

dilakukan ketika tanaman sudahdiaklimatisasi dan sudah berdaunsempurna)


12/50

() Kultur meristem

Teknik heat treatment

• "ntuk tanaman semusim atau yangtumbuh dalam pot3 maka sebelum

diisolasi meristemnya3 tanamandiperlakukan suhu tinggi yaitu +5oCsampai ,;oC)

• Tanaman dalam pot diletakkan di dalamgrowth chamber bersuhu tinggi tersebutselama (-* minggu dengan kriteria sudahmuncul daun baru)


13/50

*) Kultur pucuk

• Kultur biakan0 tanaman sehatdengan bahan tanam eksplan0berupa pucuk tanaman yang sudah

mempunyai daun3 ataumenggunakan tunas samping3 ataubuku yang belum bertunas)

• Tujuan : untuk pembibitan dalam jumlah banyak3 massal3 sehat3seragam3 cepat)


14/50

*) Kultur pucuk

'ahan tanam :

• Eksplan diambil dari tanaman yang sehatdan subur di screen house atau dari lahan)

• Persyaratan true to type harus dipatuhikarena diperlukan untuk serti9kasi)

• Pada tanaman dikotil diambil dari pucuktanaman terminal atau tunas samping

sepanjang ;35 < (3; cm• Pada tanaman monokotil diambil dari

umbi3 rhi=ome3 corm3 suckers dll)


15/50

$hi=ome

Corm


16/50

.ucker


17/50

*) Kultur pucuk

Media :

• Komposisi media disesuaikan dengan jenis tanaman sesuai re4erensi0

• "mumnya digunakan media padatdengan konsentrasi agar 5-(; g6liter3p1 umumnya 53> kecuali anggrek ada

yang membutuhkan p1 53,)• Perakaran menggunaakan media

dengan tambahan PT auksin sajayaitu !'A atau AA


18/50

*) Kultur pucuk

.ub kultur :

• Apabila eksplan sudah berumur antara+ < , pekan dipindahkan ke media baru)

Alasan : media kering3 terjadirespirasi anaerob3 hara berkurang3kompetisi antar plantlet atau ?adahsudah penuh)

• Maksimum untuk sub kultur adalah @sebelum perakaran agar tidak terjadimutasi sementara atau of type)


19/50

+) Kultur embrio

• 'iakan in vitro untuk menghasilkan bibitdengan bahan tanam berupa embrio=igotik embrio hasil perka?inan antara

gamet jantan dan betina0)• Embrio yang digunakan adalah embrio

yang sudah masak siap berkecambah0)

• Alasan digunakan embrio: bijinya tidak

mpny endosperma atau kotiledon tidakada cadangan makanan bagi embriountuk tumbuh6berkecambah0)


20/50

+) Kultur embrio

• Tanaman yang diperbanyak dari embriosecara komersial adalah anggrek)

• 'uah anggrek berisi ();;; < (;);;;

embrio3 tetapi tidak punya endospermasehingga tidak bisa tumbuh pada mediapakis atau organik lainnya)


21/50

+) Kultur embrio

• Pada pembibitan anggrek3 buahdipecah dan dalam kondisi steril bijiaditabur dalam botol media agar

sebagai pengganti endosperma)• 2ari setiap buah akan tumbuh ribuan

kecambah yang selanjutnya tumbuh

sebagai bibit tanaman anggrek)• Contoh komodity lain: kepala kopyor


22/50

,) Kultur embrio somatik

• Adalah kultur tanaman dengan bahantanam berupa bagian vegetati4 tanamandan dikembangkan menjadi embrio

somatik)• Embrio somatik adalah perkembangan

dari satu sel somatik bukan sel gamet0yang membelah dan berkembang menjadi

embrio dan akhirnya menjadi tanaman)• !ndustri bibit yang menggunakan E.

secara massal adalah tanaman kakao3 jeruk3 anggrek3 kelapa sa?it)


23/50

,) Kultur embrio somatik

• Kelebihan : bisa menghasilkanberjuta-juta bibit tanaman dalam?aktu relati4 singkat)

• Kelemahan : sering manghasilkanmutan bahkan sampai 5;B)

• Kesulitan dalam melakukan seleksi

4ase dini3 sehingga apabila padatanaman perkebunan terjadi kerugianpemeliharaan selama belum berbuah)


24/50

Perkembangan embrio sigotik samadengan embrio somatik


25/50

Embrio somatik


26/50

TEK!K PE$'AAKA TAAMA2!KDT!# 2A MDDKDT!#

• Perbanyakan tanaman dikotil : denganmemotong buku single node0 sehingga dari (plantlet bisa menjadi ,-5 eksplan baru)

•

Perbanyakan tanaman monokotil : denganmemisahkan anakan dari tunas sampingsehingga dari ( eksplan bisa menjadi ,-5eksplan baru)

•

2ari sistim penggandaan tersebut makaterjadilah laju perbanyakan prolieration rate0,-50 pangkat n di mana n adalah jumlahberapa kali sub kultur)


27/50

ME&1A.!#KA '!'!T 'E'A.

7!$".

• Kultur meristem3 kultur embrio=igotik dan somatik menghasilkantanaman bebas virus

• Kultur pucuk tidak bebas virussehingga tanaman induk harussehat6tidak ada gejala penyakit


28/50

• Meristem belum mempunyaikambium sehingga belum ada

ylem 'elum ada jalur transport dari

root ke shoot

7irus terhenti di bagian yang adaylem

ang tersalurkan hanya molekulkecil spt : mono6disakarida3 asamamino basa nitro en melalui

Mengapa virus tidak terdapatdi jaringan meristem


29/50

• Heat treatment menyebabkanvirus yang terdiri dari molekulbesar terhambatperkembangannya dan tidakdapat diangkut ke atas

Mengapa virus tidak terdapatdi jaringan meristem


30/50

Em!ri" #ig"tik !e!asvirus

• Embrio =igot terbentuk daripertemuan gamet jantan danbetina yang merupakan sel

tunggal dari pembelahan miosis

• .esudah bergabung dan menjadisel =igot kemudian membelah dan

akhirnya menjadi embrio


31/50

Em!ri" #ig"tik !e!asvirus

• Proses embriogenesis tersebutterjadi di dalam ovary yang masihmuda dan meristematik sehingga

belum ada virus yang mengin4eksi

• 'ahan tanam tersebut akanmenghasilkan tanaman bebas

virus


32/50

Embrio somatik : bebasvirus

• Embrio somatik terbentuk dari selsomatik yang meristemik3 sehinggabelum ada transport virus ke dalam sel

tersebutKecuali apabila tanaman induk sudah

terserang aphids pemba?a virus dibagian meristem tersebut

'ahan tanam embrio somatik harusdari sel yang sehat atau dari bagiantanaman yang masih tertutup3

misalkan bagian dalam kuncup bunga


33/50

TA1APA PEM'!'!TAPersiapan

induk

Is"$asie%p$ant

Pr"$i&erasi'(%)

Perakaran

Ak$imatisasi

Pem!esara

n


34/50

CDTD1 PEM'!'!TAKDME$.!A#

() Kentang

*) Krisan

+) Anggrek

,) %ati

5) Pisang


35/50

A) Pembibitan kentang

Tanaman induk se+at'se$eksi)

Ku$tur meristem

Pr"$i&erasi

Ak$imatisasi

Ak$imatisasi

Penanaman di s,reen +"use

---. G/

Lapang I------------.G0

Lapang II------------G1

Lapang III

------------G2


36/50

') Pembibitan krisan

Persiapan tanamaninduk

Is"$asi

Pr"$i&erasi

Ak$imatisasi

3tek pu,uk

Bi!it


37/50

C) Pembibitan anggrek

Biji4em!ri"

Is"$asi

Perke,am!

a+an

P$an$et

3eed$ing

Remaja

De5asa

Tunas4tangkai!unga

Is"$asi

Em!ri"genesis

s"matik

Regenerasip$an$et

3eed$ing

Remaja

De5asa


38/50

2) Pembibitan jati6pisang

Persiapan tanamaninduk

Is"$asieksp$an

Ku$tur meristem4pu,uk

Pr"$i&erasi

Perakaran

Ak$imatisasi

Pem!esaran


39/50

ME2!A '!AKA

Media dibagi ke dalam + macamtergantung tahapan biakan yaitu :

() Media isolasi

*) Media proli4erasi

+) Media perakaran


40/50

() Media isolasi

• Adaptasi eksplan terhadap kondisi invitro dan seleksi eksplan tidakterkontaminasi belum memerlukan

PT• 'iasanya bagi tanaman yang

mengandung 4enol masihmengeluarkan =at tersebut dalammedia media perlu diberiantioksidan dan sering dipindah

• Komposisi media dasar sama dengan

proli4erasi)


41/50

*) Media proli4erasi

• Mulai induksi pembentukan tunas baruatau pertumbuhan memanjangmembentuk buku yang sehat dan vigor

•

Media diberi auksin untuk pembesaranbatang3 dan sitokinin untukpembentukan tunas atau pembelahansel

• "ntuk mengurangi internode yangpanjang diberi =at penghambat giberelinmisalkan Alar


42/50

+) Media perakaran

• .ebagian plantlet mudah berakartanpa harus diberi PT khusustetapi sebagian tanaman sulit

berakar• 'agi yang sulit berakar harus

dipacu dengan beberapa cara :

a) diberi auksin !'A3 AA0

b) diberi arang akti4


43/50

,) Aklimatisasi

• Media : bahan yang remah tidak padat3dapat menyimpan air

E : pasir3 arang sekam3 coco peat 3

humus3 tanah gunung andosol03 kompos• .terilisasi : dikukus selama * jam dalam

drum atau alat khusus yaitu menyalurlanuap air panas melalui pipa ke ?adah

berisi media• Tempat aklimatisasi ditutup plastik agar

kelembaban tinggi sesuai dengan kondisiin vitro)


44/50

Kiri atas $a! tissue,u$ure

Kanan atas ak$imatisasiBa5a+ per!an6akanstek

.T1ET!C6 A$T!!C!A#


45/50

.T1ET!C6 A$T!!C!A#.EE2

Encapsulated or coated somatic embryosembryoids0 that are planted and treated like seed


46/50


47/50

()Ease o4 handling ?hile in storage*)Easy to transport+)1as potential 4or long term storage

?ithout losing viability

,)Maintains the clonal nature o4 theresulting plants

5).erves as a channel 4or ne? plant lines

produced through biotechnologicaladvances to be delivered directly tothe greenhouse or 9eld

F)Allo?s economical mass propagation

o4 elite plant varieties)

Advantages


48/50

.teps

Establish somatic embryogenesis

Mature embryos

.ynchroni=e and singulate somaticembryos

Mass production o4 somatic embryos

.tandardi=ation o4 encapsulation

.tandardi=ation o4 arti9cial endosperm

Mass production o4 synthetic seed

&reenhouse and 9eld planting


49/50

Cari tahu :

umbi mikro kentang


50/50

Thankyou

Documents

4-5.-PRODUKSI-BENIH-KULJAR