GUÍA DE SOLUCIÓN DE PROBLEMAS EN …phx.phenomenex.com/lib/gu92930212_I_Sp.pdf · n Drogas en fluidos biológicos n Fase estacionaria de HPLC a granel n Accesorios para HPLC tales

GUÍA DE SOLUCIÓN DE PROBLEMAS EN CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA

COMUNÍQUESE CON PHENOMENEX SI NECESITA:nColumnas para HPLC (desde capilares hasta preparativas)n Columnas de exclusión por tamaño (SEC): acuosa (GFC) o no

acuosa (GPC)nAnálisis de aminoácidosnColumnas especializadas para el análisis de:

nDrogas farmacéuticas básicas, ácidas o anfotéricas

nSeparaciones de pH alto/bajo (pH 1-12)

nProteínas/Péptidos por fase reversa

nBiopolímeros-proteínas y ácidos nucléicos por métodos

de GFC/SEC

nPolímeros sintéticos

nAlimentos y bebidas

n Muestras ambientales

n Drogas en fluidos biológicosnFase estacionaria de HPLC a granelnAccesorios para HPLC tales como:

nFiltros para muestras y solventes

nProtección de columnas SecurityGuard

nFiltros para jeringa

nJeringas y viales

nCalentador de columnas/Enfriador-Calentador de columnas

nVálvulas de inyección para HPLC

nTubos y conectores

nDesgasificadores de solventes

nSelectores de columnas

nProcesadores de fluidosnColumnas para gasesn Tubos de SPE (extracción por fase sólida), Platos de 96 pocillosnSoporte para aplicaciones, desarrollo y validaciónnServicio Técnico fuera de serie

ÍNDICE

I. Introducción ..................................................................................... 1

II. Presión anormal ............................................................................... 2

III. Fugas ............................................................................................... 4

IV. Problemas con el cromatograma .................................................... 6

V. Problemas con el inyector ............................................................. 14

VI. Problemas detectados por medio del olfato, vista u oído ............. 15

VII. Areas de problemas clave y mantenimiento preventivo ................ 17

Filtros para jeringa Phenex™ .......................................................... 20

SecurityGuard Sistema de Cartuchos de Protección Universal para HPLC.......................................................................................19

© 2012 Phenomenex, Inc. Todos los derechos reservados.

Este manual no puede ser copiado ni reproducido total o parcialmente sin la autorización por escrito de Phenomenex, Inc. USA.

Aún cuando se hecho todo lo posible para asegurar la confiabilidad de la información contenida en esta guía, Phenomenex no asume responsabilidad por el uso que se dé a la misma. Es bienvenida cualquier adición o corrección para ser incorporadas en futuras ediciones.

1

I. INTRODUCCIÓN

LOCALIZANDO Y CORRIGIENDO EL PROBLEMALa correcta identificación del problema es la mejor forma de acercarse a la solución del mismo. Esta guía se divide en cinco categorías principales de síntomas para ayudarle en una forma efectiva a identificar el origen del problema que usted esta confrontando: • presión anormal • fugas • problemas con el cromatograma • problemas con el inyector • otros problemas detectados por los sentidos del olfato, vista u oídoCuando haya corregido el problema, regístrelo en un libro de incidentes que será muy valioso en el futuro para la identificación de los problemas.

PREVENCIÓNMuchos problemas en cromatografía líquida pueden evitarse con el mantenimiento preventivo rutinario, por ejemplo el reemplazo de los sellos (juntas) de la bomba a intervalos regulares, puede eliminar las fallas asociadas a esas juntas (sellos). La sección VII lista las áreas de problemas más comunes para cada módulo y las prác-ticas de mantenimiento preventivo que reducen su frecuencia. Estas sugerencias pueden ser modificadas para ajustarse al modelo de su cromatógrafo y para ser implementadas como una rutina en su laboratorio.

DONDE CONSEGUIR AYUDA ADICIONAL

• Deben consultarse los manuales del operador así como de servicio. Estos manuales contienen diagramas, y procedimientos a seguir para resolver pro-blemas en algún modelo específico, así como números de parte para ordenar repuestos.

• El conocimiento de otras personas en el laboratorio que hayan experimentado un problema similar y lo hayan resuelto, es un valioso recurso.

• El fabricante del instrumento puede ayudarle también. La mayoría de ellos ofre-cen soporte técnico sin costo a sus clientes.

• Phenomenex, tiene un equipo de consultores técnicos experimentados que pueden asistirle en casi cualquier problema de cromatografía. Llámenos, envíe-nos un fax o email.

• Phenomenex ofrece seminarios para HPLC.

• Hay un numero de fuentes de referencia que pueden guiarle en la solución del problema:

J.W. Dolan and L.R. Snyder, Troubleshooting LC Systems, Humana Press, NJ (1989).

L.R. Snyder and J.J. Kirkland, Introduction to Modern Liquid Chromatography, 2nd ed., Wiley, NY (1979).

D.J. Runser, Maintaining and Troubleshooting HPLC Systems - A User’s Guide, Wiley, NY (1981).

J.W. Dolan, “Troubleshooting”, LC/GC Magazine. Publicación mensual.

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II. PRESIÓN ANORMALUn cambio en la presión de operación es un signo de que puede haber un pro-blema. Seleccione abajo cual categoría se parece más a los síntomas que presenta su instrumento de HPLC. Entonces siga las sugerencias para corregir el problema.

1. Está apagado 1. Enciéndalo

2. Fusible quemado 2. Reemplace el fusible

3. Fallas o ajuste del controlador 3. a. Verifique que la programación es la correcta b. Repare o cambie el controlador

4. Pistón roto 4. Cambie el pistón

5. Aire atrapado en el cabezal de 5. Desgasifique los solventes, elimine el la bomba aire de la bomba principal

6. Fase móvil insuficiente 6. a. Rellene el recipiente de la fase móvil b. Limpie el frit de entrada si está tapado

7. Válvula check fallando 7. Cambie la válvula check

8. Fuga mayor 8. Apriete o cambie los conectores

A. No hay flujo ni lectura de presión

B. No hay lectura de presión y el flujo es normal

CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN


1. Medidor fallando 1. Cambie el medidor

2. Transductor de presión fallando 2. Cambie el transductor

1. El ajuste del flujo es demasiado alto 1. Ajústelo adecuadamente

2. Frit de la columna tapado 2. a. Monte la columna al revés y pase flujo b. Reemplace frit* c. Reemplace la columna

3. Fase móvil incorrecta, precipitación 3. a. Use la fase móvil correcta de la solución reguladora (búfer) b. “Lave” la columna

4. Columna incorrecta 4. Use la columna adecuada

5. Inyector tapado 5. Limpie o cambie el inyector

6. Temperatura de la columna 6. Aumente la temperatura demasiado baja

7. Mal funcionamiento del controlador 7. Repare o cambie el controlador

8. Guarda columna (pre-columna) tapada 8. Cambie el guarda columna

9. Filtro en línea bloqueado 9. Remueva o cambie el filtro en línea

C. La presión se mantiene altaCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

* Remover los conectores podria anular la garantía de la columna, verifique con el fabricante antes de hacerlo.

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1. Vea la sección C 1. Vea la sección C

II. PRESIÓN ANORMAL (continúa)

D. La presión se mantiene bajaCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. El ajuste del flujo es demasiado bajo 1. Ajuste el flujo correctamente

2. Fuga en el sistema 2. Localícela y corríjala

3. Columna incorrecta 3. Use la columna apropiada

4. Temperatura de la columna 4. Disminuya la temperatura demasiado alta

5. Mal funcionamiento del controlador 5. Repare o cambie el controlador

E. Presión en aumento

F. Presión llegando a cero

G. Presión disminuyendo pero no en cero

H. La presión sube y baja

1. Aire atrapado en la bomba 1. a. Desgasifique el solvente b. Saque el aire la bomba

2. Válvula check fallando 2. Cambie la válvula

3. Sello (junta) de la bomba fallando 3. Cambie el sello de la bomba

4. Desgasificado insuficiente 4 a. Desgasifique el solvente b. Cambie el método de desgasificar, use Degassex (desgasificador en línea)

5. Fuga en el sistema 5. Localícela y repárela

6. Uso de elución con gradiente 6. Las variaciones de presión son normales cuando se usa gradiente debido a cambios en la viscosidad





1. Vea las secciones A y B 1. Vea las secciones A y B

1. Vea la sección D 1. Vea la sección D

4

III. FUGASLas fugas se resuelven casi siempre apretando o cambiando un conector. De cualquier forma debe tomar en cuenta que apretando de más los conectores de metal pueden dañarse y causar fuga. Así mismo los conectores de plástico pueden desgastarse apretándolos demasiado. Cuando un conector sigue con fuga después de apretarlo un poco más, es mejor quitarlo y examinario para comprobar que no esta dañado debido a un ferrul deformado o a partículas de los sellos (juntas). Los conectores que presenten algún daño deben desecharse.

A. Conectores con fugasCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Conector flojo 1. Apriételo

2. Conector trasroscado 2. Cámbielo

3. Conectores demasiado apretados* 3. a. Aflójelo y vuelva a apretarlo b. Cámbielo

4. Conector sucio 4. a. Desmonte y límpie el conector b. Cámbielo

5. Partes que no ajustan 5. Use partes de una misma marca

B. Fugas en la bombaCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Válvula check mal apretada 1. a. Apriete la válvula check (no se exceda) b. Cámbiela

2. Conectores flojos 2. Apriete los conectores, sin excederse

3. Falla en los sellos del mezclador 3. a. Cambie las sellos b. Cambie el mezclador

4. Fallas en los sellos de la bomba 4. Repare o cambie los sellos

5. Falla en la presión del transductor 5. Repárelo o cámbielo

6. Falla en el apagador del regulador 6. Cámbielo

7. Falla en la válvula proporcionadora 7. a. Observe los diafragmas, cámbielos si fugan b. Verifique si hay daño en los conectores, cámbielos

8. Válvula de purga 8. a. Apriete la válvula b. Cambie la válvula

* Use conectores de apretar con los dedos (“fingertight”) para evitar problemas de sellado y/o el uso de herramientas

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III. FUGAS (continúa)

C. Fugas en el inyectorCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Falla en el sello del rotor 1. Reconstruya o cambie el inyector

2. Serpentín (loop) bloqueado 2. Cambie el serpertín (loop)

3. Sello del puerto de inyección flojo 3. Ajústelo

4. Diámetro de la aguja de la 4. Use la jeringa correcta jeringa incorrecto

5. Línea de drenaje succionando 5. Mantenga la línea de drenaje arriba de la superficie de drenaje

6. Línea de drenaje bloqueada 6. Cambie la línea de drenaje

D. Fuga en la columnaCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Conector flojo 1. Apriete el conector

2. Material de empaque de la columna 2. Desmonte, enjuague el ferrul y en el ferrul móntelo de nuevo

3. Frit con espesor incorrecto 3. Use el frit apropiado (vea la tabla de abajo)

E. Fugas en el detectorCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Falla en el sello de la celda 1. a. Evite una presión excesiva b. Cambie el sello

2. Ventanas de la celda rotas 2. Cambie las ventanas

3. Conectores goteando 3. Apriételos o cámbielos

4. Línea de drenaje bloqueada 4. Cambie la línea de drenaje

5. Flujo de la celda bloqueado 5. Reconstruya o cámbiela

GUÍA PARA LA SELECCIÓN DE LOS FRITS

El tamaño de poro del frit debe ser:Cuando el tamaño de partícula es:

2 - 4 µm

5 - 20 µm

0.5 µm

2 µm

A. Pico con coleo (Tailing)CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Frit tapado 1. a. Montar al revés la columna (de ser posible) y lavar para limpiar el frit* b. Reemplace la columna

2. Columna con vacío 2. llene el vacío*

3. Pico interfiriendo 3. a. Use una columna más larga b. Cambie la fase móvil y/o la selectividad de la columna

4. pH de la fase móvil, incorrecto 4. Ajuste el pH. Para compuestos básicos, pH más bajo da picos más simétricos.

5. Muestras reaccionando con los 5. a. Agregue un reactivo de pareo sitios activos iónico o un modificador básico volátil b. Cambie la columna

B. Pico con fronteo (fronting)CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Temperatura baja 1. Aumente la temperatura de la columna

2. Solvente de la muestra incorrecto 2. Use fase móvil como solvente de inyección

3. Muestra saturada 3. Disminuya la concentración de la muestra

4. Columna dañada 4. Vea A.1 y A.2

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IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMAMuchos de los problemas en el sistema de LC producen cambios en el cromato-grama. Algunos de esos problemas pueden solucionarse haciendo ajustes en el equipo, mientras otros pueden requerir modificación en los procedimientos de ensayo. La selección correcta del tipo de columna y de fase móvil son la clave para una “buena cromatografía.”

*Vea la garantía de la columna con el fabricante. Remover los conectores puede anular la garantía de la columna, verifique con el fabricante antes de hacerlo.

PICO CON COLEO

Normal Problema

C. Picos divididosCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Contaminación del guarda 1. Remueva el guarda columna y columna o de la columna analítica haga una corrida, cámbielo de ser necesario. Si la columna analítica se obstruye, móntela al revés y púrguela. Si el problema persiste la columna podría tener contaminantes fuertemente retenidos. Use el procedimiento correcto de restauración. Si el problema persiste podría ser que la entrada esté tapada. Cambie la columna.

2. Solvente de la muestra 2. Cambie el solvente. Cada vez incompatible con la fase móvil que sea posible inyecte las muestras con fase móvil.

D. Distorsión más grande de los picosCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Saturación con la muestra 1. Disminuya el tamaño de la muestra

E. Distorsión de los primeros picosCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Inyección con solvente equivocado 1. a. Reduzca el volumen de inyección b. Use un solvente más débil para la inyección

F. Más coleo (tailing) en los primeros picos que en los últimosCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Efecto extra columna 1. a. Cambie el tubo del sistema por uno más corto y de menor diámetro interno b. Use una celda del detector de menor volumen

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IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMA (continúa)

PICOS DIVIDIDOS

Normal Problema

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G. Aumento de coleo (tailing) al aumentar k’CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Efectos secundarios de 1. a. Agregue trietilamina retención en fase reversa (muestras básicas) b. Agregue acetato (muestras ácidas) c. Agregue sal o búfer (muestras iónicas) d. Pruebe con una columna diferente

2. Efectos secundarios de 2. a. Agregue trietilamina retención en fase normal (compuestos ácidos) b. Agregue ácido acético (compuestos ácidos) c. Agregue agua (polifuncionales). Solamente en métodos de fase normal que usan solventes miscibles con agua. d. Pruebe un método de HPLC distinto3. Efectos de retención 3. Agregue trietilamina secundaria, par iónico (muestras básicas)

H. Picos ácidos o básicos con coleo (tailing)CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Solución reguladora 1. a. Use búfer con concentración (búfer) incorrecta 50-100 mM b. Use búfer con pKa igual a la fase móvil

I. Picos extraCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Otros componentes en la muestra 1. Normal

2. Pico de una inyección previa 2. a. Aumente el tiempo de análisis eluyendo tardíamente o la curva del gradiente b. Aumente el flujo3. Picos fantasma o vacantes 3. a. Verifique la pureza de la fase móvil b. Use fase móvil como solvente de inyección c. Reduzca el tamaño de la inyección

4. Contaminación 4. Filtre la muestra


L. Elevación de la línea baseCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Fluctuación en la temperatura. 1. Controle la temperatura de la fase (Aún los cambios mínimos causan móvil y de la columna, use que la línea base se mueva arriba intercambiador de calor antes o hacia abajo. Afecta más a detectores del detector de índice de refracción, de conductividad y de UV, a alta sensibilidad o en modo fotométrico directo.)

2. Fase móvil no homogénea. (Se eleva 2. Use solventes grado HPLC, sales y generalmente a absorbancias altas, aditivos de alta pureza. Desgasifique más que con fluctuaciones la fase móvil antes de usarla, haga cíclicas de temperatura.) burbujear helio durante su uso.

3. Contaminación o burbuja de 3. Lave la celda con metanol, u otro aire en la celda del detector solvente fuerte. De ser necesario limpie la celda con HNO3 1N (jamás use HCl).

4. Salida de línea tapada después del 4. Desconecte o cambie la línea. Vea el detector. (La alta presión fractura manual del detector para la ventana de la celda produciendo cambiar la ventana. una línea base con ruido.)

5. Problema en el mezclado de la fase 5. Corregir la composición y/o el flujo. móvil o cambio en la velocidad flujo Para evitar esto, observe rutinariamente la composición y el flujo.

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J. Movimiento en los tiempos de retenciónCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Pobre control de la temperatura 1. Use termostato con la columna

2. Fase móvil cambiante 2. Evite el cambio (evaporación, reacción, etc.)

3. Acondicionamiento de 3. De más tiempo de acondicionamiento la columna insuficiente a la columna entre un análisis y otro

K. Cambio abrupto en los tiempos de retenciónCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Cambio en el flujo 1. Restablezca el flujo

2. Aire atrapado en la bomba 2. Purgue la bomba para eliminar el aire

3. Fase móvil incorrecta 3. a. Cambie la fase móvil por la correcta b. Ajuste la mezcla apropiada de fase móvil en el controlador

ELEVACIÓN DE LA LÍNEA BASE

Normal Problema

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M. Ruido en la línea base (regular)CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Aire en la fase móvil, celda del 1. Desgasifique la fase móvil. Purgue detector o en la bomba el sistema para eliminar el aire del detector, la celda o la bomba.

2. Fugas 2. Vea la sección III. Verifique que el sistema no tenga conectores flojos. Vea que la bomba no tenga fugas, incrustaciones de sales o haga ruidos poco comunes. De ser necesario cambie los sellos de la bomba.

3. Mezclado incompleto de la fase móvil 3. Mezcle la fase móvil manualmente o use un solvente menos viscoso

4. Efecto de temperatura (columna a 4. Reduzca la diferencia de alta temperatura, detector sin calentar) temperaturas o use un intercambiador de calor

5. Otro equipo electrónico en 5. Ponga aparte del cromatógrafo de la misma línea líquidos, para determinar si el problema es externo. Corríjalo de ser necesario.

6. Pulsaciones en la bomba 6. Incorpore un regulador de pulsaciones en el sistema


Normal

Problema

RUIDO DE LA LÍNEA BASE

L. Elevación de la línea base (continúa)CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

6. Acondicionamiento lento de la 6. Purgue con un solvente columna especialmente cuando se medianamente fuerte, corra con 10 a cambia la fase móvil 20 volúmenes de columna con fase móvil nueva, antes de iniciar el análisis

7. Fase móvil contaminada, deteriorada, 7. Verifique como se prepara la fase o preparada con materiales de móvil. Use solventes de la más alta baja calidad pureza grado HPLC.

8. Materiales fuertemente retenidos en 8. Use guarda-columna. De ser la muestra (k’ alta) pueden eluir dando necesario purgue la columna con un picos muy gruesos y aparecer una solvente fuerte entre inyecciones o línea base elevada. (Los análisis con periódicamente entre análisis. gradiente pueden agravar este problema.)

9. Fase móvil reciclada, aunque 9. Ajuste la línea base. Use fase móvil el detector no ha sido ajustado nueva cuando los límites dinámicos del detector son excedidos.

10. Detector (UV) no ajustado al máximo 10. Cambie la longitud de onda de UV de absorbancia sino a la al máximo de absorbancia pendiente de la curva

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N. Ruido en la línea base (irregular)CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Fugas 1. Vea la sección III. Verifique si hay conectores flojos. Vea si la bomba gotea, tiene incrustaciones de sales, cambie los sellos de ser necesario. Vea si la celda del detector no tiene fugas.

2. Fase móvil contaminada, deteriorada 2. Verifique como se prepara o preparada con materiales la fase móvil de baja calidad

3. Fase móvil con solventes 3. Seleccione y use solo no miscibles solventes miscibles

4. Detector y registrador electrónicos 4. Aísle electrónicamente ambos. Vea las instrucciones para corregir el problema.

5. Aire atrapado en el sistema 5. Purgue el sistema con un solvente fuerte

6. Burbujas de aire en el detector 6. Purgue el detector. Instale un componente para presión después del detector.

7. Celda del detector contaminada 7. Limpie la celda con HNO3 1N (Aún las más pequeñas cantidades (nunca use HCl) de contaminantes producen ruido.)

8. Lámpara del detector muy débil 8. Cambie la lámpara

9. Columna fugando sílica o 9. Cambie la columna material de empaque

10. Mezclador de fase móvil dañado 10. Repare o cambie el mezclador o funcionando mal o mezcle fuera de línea si es isocrático

O. Picos muy anchosCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Cambio en la composición 1. Prepare fase móvil nueva de la fase móvil

2. Flujo de la fase móvil demasiado bajo 2. Ajuste el flujo

3. Fugas (especialmente entre 3. Vea la sección III. Verifique que no la columna y el detector) hayan conectores flojos. Vea que la bomba no tenga fugas, incrustaciones de sales, o ruido.

Normal

Problema

RUIDO DE LA LÍNEA BASE

O. Picos muy anchos (continúe)CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

4. Ajuste incorrecto del detector 4. Ajúste bien

5. Efectos extra columna 5. a. Inyecte un volumen menor a. Columna saturada (10 μl vs. 100 µl) o diluya la muestra a 1:10 y 1:100

b. Tiempo de respuesta del detector b. Reduzca el tiempo de respuesta largo o volumen de la celda o use una celda más pequeña demasiado grande c. La tubería entre la columna y el c. Use una pieza más corta de detector es demasiado larga tubo con un diámetro interno de entre 0.005” y 0.007” d. El tiempo de respuesta del d. Reduzca el tiempo de respuesta registrador es demasiado largo

6. Concentración de la solución 6. Aumente la concentración reguladora demasiado baja

7. Guarda columna contaminada 7. Cambie el guarda columna o desgastada

8. Columna contaminada/desgastada. 8. Cambie la columna por una Conteo de platos muy bajo. nueva del mismo tipo

9. Vacío a la entrada de la columna 9. Cambie la columna por otra nueva

10. Un pico representando dos o más 10. Cambie el tipo de columna para compuestos pobremente resuelto mejorar la separación

11. Temperatura de la columna muy baja 11. Aumente la temperatura. No exceda los 60 ˚C a menos que el fabricante de la columna indique lo contrario.

12. Constante del tiempo del detector 12. Use una constante más pequeña demasiado larga

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PICOS MUY ANCHOS

ProblemaNormal

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Q. Todos los picos demasiado pequeñosCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. La atenuación del detector 1. Reduzca la atenuación es demasiado alta

2. La constante de tiempo del 2. Use una constante menor detector es demasiado grande

3. La inyección es demasiado pequeña 3. a. Aumente la concentración de la muestra b. Aumente el volumen de inyección

4. Conexión del registrador incorrecta 4. Corrija la conexión

R. Todos los picos demasiado grandesCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. La atenuación del detector 1. Aumente la atenuación es muy baja

2. Inyección demasiado grande 2. a. Reduzca la concentración de la muestra b. Disminuya el volumen de inyección. Use un serpentín más corto o use un serpentín parcialmente rellenado.

3. Mala conexión del registrador 3. Corrija la conexión

P. Pérdida de resoluciónCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Fase móvil contaminada /deteriorada, 1. Prepare fase móvil fresca causando cambios en los tiempos de retención

2. Guarda columna o 2. Quite el guarda columna y haga un columna tapadas análisis. Cambie el guarda de ser necesario. Si la columna analítica esta tapada, póngala al revés y púrguela. Si el problema persiste la columna pudiera estar fallando debido a que tiene retenidos contaminantes muy fuertes. Use el procedimiento de regeneración apropiado. Si el problema persiste, probablemente este tapada la entrada. Limpie el frit o cambie la columna.

Problema

Normal

PÉRDIDA DE RESOLUCIÓN

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V. PROBLEMAS CON EL INYECTOREstos problemas se detectan generalmente cuando se usan válvulas de inyec-ción. Las fugas en las válvulas de inyección se discuten en la Sección III (Fugas).

A. Inyector manual difícil de operarCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Sello del rotor, dañado 1. Reconstruya o cambie la válvula

2. Rotor demasiado apretado 2. Ajuste la tensión del rotor

B. Inyector manual difícil de cargarCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Válvula mal alineada 1. Ajuste la alineación

2. Serpentín (loop) bloqueado 2. Cambie el serpentín (loop)

3. Jeringa sucia 3. Limpie o cámbiela

4. Líneas bloqueadas (tapadas) 4. Límpielas o cámbielas

C. El autoinyector no funcionaCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. No hay presión de aire (o corriente) 1. Ajuste la presión al punto correcto

2. El rotor esta muy apretado 2. Ajuste

3. Válvula mal alineada 3. Ajuste la alineación

D. Otros problemas con el autoinyectorCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Obstrucción 1. Destápelo o cambie la porción obstruida

2. Mecanismo atorado 2. Vea el manual de servicio

3. Controlador fallando 3. Cambie o repare el controlador

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VI. PROBLEMAS DETECTADOS POR MEDIO DEL OLFATO, EL OÍDO O LA VISTAPara identificar los problemas de LC se necesita hacer uso de todos los senti-dos. Seria una buena idea dedicar unos minutos cada día para usar todos los sentidos (a excepción del gusto), para determinar las condiciones del equipo de LC y asegurarse que esta funcionado correctamente. Esta práctica le puede ayudar muchas veces a localizar rápidamente algún problema ya que en mu-chas ocasiones se puede percibir el olor de una fuga antes de encontrar donde se encuentra. La mayoría de los problemas se identifican con la vista, y muchos de ellos se incluyen en la sección anterior.

A. Olor a solventeCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Fugas 1. Vea la sección III

2. Derrame 2. a. Verifique que el recipiente de drenado no esté rebosando b. Localice el derrame y límpielo

B. Olor a sobrecalentamientoCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Sobrecalentamiento del módulo 1. a. Verifique que hay ventilación adecuada, ajústela b. Vea que la temperatura sea la correcta, ajuste de ser necesario c. Apague el módulo y vea el manual de servicio

C. Lecturas del medidor fuera de lo normalCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Anomalía en la presión 1. Vea la sección II

2. Problema con el horno 2. a. Vea los ajustes y corrija de la columna b. Consulte el manual de servicio

3. Lámpara del detector fallando 3. Cambie la lámpara

D. Luz de aviso de anomalíaCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Límite de presión excedido 1. a. Vea si hay algún bloqueo b. Verifique los limites de operación, ajústelos

2. Otras lámparas de aviso 2. Consulte el manual de servicio

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E. Timbre de aviso de anomalíaCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Fuga o derrame de solvente 1. Localice y corrija

2. Otros timbres de aviso sonando 2. Consulte el manual de servicio

F. Chillidos y chirridosCAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Falla en los cojinetes (baleros) 1. Consulte el manual de servicio

2. Mala lubricación 2. Lubrique tanto como sea necesario

3. Desgaste mecánico 3. Consulte el manual de servicio

VI. PROBLEMAS DETECTADOS POR MEDIO DEL OLFATO, EL OÍDO O LA VISTA (continúa)

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VII. PROBLEMAS CLAVE Y MANTENIMIENTO PREVENTIVOLa tabla de abajo presenta los problemas más comunes que ocurren en cualquier equipo de HPLC. En la columna de la derecha están las prácticas de manteni-miento preventivo que pueden evitar a la incidencia de fallas. Entre paréntesis se presenta la frecuencia sugerida para el mantenimiento. Los manuales de servicio y del operador de su equipo pueden tener sugerencias adicionales para el mejor mantenimiento preventivo de su modelo de LC.

Deposito (tanque)PROBLEMA MANTENIMIENTO PREVENTIVO

1. Frit de entrada tapado 1. a. Lave la columna montándola al revés b. Filtre la fase móvil con filtro de 0.5 μm

2. Burbujas de gas 2. Desgasifique la fase móvil

BombaPROBLEMA MANTENIMIENTO PREVENTIVO

1. Burbujas de aire 1. Desgasifique la fase móvil

2. Falla en el sello de la bomba 2. Cámbielo cada 3 meses

3. Falla en la válvula check 3. Filtre la fase móvil, use un frit en la entrada de la línea. Tenga una válvula de repuesto.

InyectorPROBLEMA MANTENIMIENTO PREVENTIVO

1. Sello del rotor desgastado 1. a. No apriete de más b. Filtre las muestras

ColumnaPROBLEMA MANTENIMIENTO PREVENTIVO

1. Frit tapado 1. a. Filtre la fase móvil b. Filtre las muestras c. Use un filtro en línea y/o guarda columnas

2. Vacío en la cabeza de la columna 2. a. Evite fase móvil con pH > 8 (para la mayoría de columnas a base de sílica) b. Use guarda columna c. Use pre-columna (columna de saturación)

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DetectorPROBLEMA MANTENIMIENTO PREVENTIVO

1. Fallas en la lámpara, respuesta del 1. Cambie cada 6 meses. dectector disminuida, aumento Tenga uno de repuesto. en el ruido del detector

2. Burbujas en la celda 2. a. Mantenga limpia la celda b. Use restrictor después de la celda c. Desgasifique la fase móvil

GeneralPROBLEMA MANTENIMIENTO PREVENTIVO

1. Daño corrosivo/abrasivo 1. Elimine los residuos de sales en el sistema y límpielo cuando no lo use

VII. PROBLEMAS CLAVE Y MANTENIMIENTO PREVENTIVO (continúa)

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AVISO: LOS CONTAMINANTES PUEDEN CAUSAR • ALTA PRESIÓN • PICOS DIVIDIDOS • PICOS DEMASIADO ANCHOS • RUIDO EN LA LÍNEA BASE • ELEVACIÓN DE LA LÍNEA BASE • PERDIDA DE RESOLUCIÓN • DAÑO IRREVERSIBLE EN LA COLUMNA • DAÑO AL SISTEMA

PROTEJA SU COLUMNA DE HPLC Y SUS RESULTADOS

Un sistema universal de guarda cartuchos para HPLC diseñado para proteger en forma efectiva tanto a sus valiosas columnas analíticas como sus resultados del daño que producen los contaminantes. Atrapa los contaminantes sin afectar la cromatografía.

ASÍ ES COMO TRABAJA SECURITYGUARD*:

AJUSTE UNIVERSAL*:

Con su diseño patentado SecurityGuard™ se ajusta a todos los conectores sean macho o hembra, prácticamente de cualquier fabricante.

Si usted no queda totalmente satisfecho con el comportamiento de SecurityGuard simplemente contacte a Phenomenex dentro los 45 días de su compra para un ¡REEMBOLSO TOTAL DE SU DINERO!

Para información adicional consultewww.phenomenex.com/info/securityguard

*Aplica solamentea los sistemas de guarda de tamaño analítico, no aplica a los guarda cartuchos SemiPrep o PREP

Del inyector

Columna de HPLC

Los cartuchos pueden ser inspeccionados fácilmente para ver los contaminantes Conexión Universal de apretar con

los dedospara columnas de HPLC -no se necesitan herramientas

contaminantescompuestos de interés

Guarda Cartucho (Holder)

garantía

Diseño Patentado

Tip: Pruebe una muestraLa major forma de determiner si una membrana Phenex específica es la más recomendable para su aplicación. Solicite su muestra por teléfono o visite www.phenomenex.com/sample

Los filtros para jeringa anteriores no son estériles. La cubierta está hecha de polipropileno (PP) grado médico.

Si Phenex no fuciona igual o mejor que los filtros para jeringa que está usando actualmente con membrana, diámetro y tamaño de poro similares, regrese el producto con datos comparativos dentro los 45 días de su compra para un ¡REEMBOLSO TOTAL DE SU DINERO!

Favor de contactar a su consultor técnico o distribuidor local para disponibilidad y asistencia. La compra de grandes cantidades podría ahorrarle aún más.

Marcas comercialesSecurityGuard y Phenex son marcas comerciales de Phenomenex. PTFE y Teflon son marcas comerciales registradas de E.I. du Pont de Nemours and Co.

© 2012 Phenomenec Inc. Todos los derechos reservados.

Tipos de membrana

RCRegenerated Cellulose

NY(Nylon)

PTFE® Teflon®

(Polytetrafluoroethylene) CA(Cellulose Acetate)

PES(Polyethersulfone)

GF(Glass Fiber)

garantía

Baja absorción de proteínas »

Máxima compatibilidad »química

Mínimo de extraíbles »

Excelente flujo »

Alto rendimiento total »

Bajo volumen »

Calidad certificada »

Integridad probada al 100% »

Uso bidireccional »

Filtros para jeringa Phenex™

Para filtración de muestras y solventes antes de la cromatografíaMenos tiempo de paro•

Resultados más consistentes y reproducibles•

Mayor tiempo de vida de la columna•

Rápida filtración de muestras para HPLC y GC antes •del análisis

Particulado, PVC, y filtros libres de extraíbles•

Menos paros en el sistema•

Phenex ofrece:

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www.phenomenex.comLos productos Phenomenex están disponibles en el mundo entero. Para el distribuidor en su país, contacte al Departamento Internacional de Phenomenex: [email protected]

Esta publicación se distribuye libre de costo. Para copias adicionales comuniquese con nosotros a:

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Alemania 06021-58830-0 06021-58830-11 [email protected]

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Australia02-9428-6444 02-9428-6445 [email protected]

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Austria 01-319-1301 01-319-1300 [email protected]

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Bélgica+31 (0)30-2418700 +31 (0)30-2383749 [email protected]

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Canada(800) 543-3681 (310) 328-7768 [email protected]

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Dinamarca4824 8048 +45 4810 6265 [email protected]

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Estados Unidos(310) 212-0555 (310) 328-7768 [email protected]

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Finlandia09 4789 0063 +45 4810 6265 [email protected]

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Francia01 30 09 21 10 01 30 09 21 11 [email protected]

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India 040-3012 2400 040-3012 2411 [email protected]

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Irlanda 01 247 5405 +44 1625-501796 [email protected]

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Italia 051 6327511 051 6327555 [email protected]

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Luxemburgo+31 (0)30-2418700 +31 (0)30-2383749 [email protected]

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México001-800-844-5226 001-310-328-7768 [email protected]

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Noruega 810 02 005 +45 4810 6265 [email protected]

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Nueva Zelanda09-4780951 09-4780952 [email protected]

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Países Bajos030-2418700 030-2383749 [email protected]

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Puerto Rico (800) 541-HPLC (310) 328-7768 [email protected]

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Reino Unido 01625-501367 01625-501796 [email protected]

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Suecia 08 611 6950 +45 4810 6265 [email protected]

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Todos los demas países: Oficinas Corporativas en USA (310) 212-0555 (310) 328-7768 [email protected]

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GUÍA DE SOLUCIÓN DE PROBLEMAS EN …phx.phenomenex.com/lib/gu92930212_I_Sp.pdf · n Drogas en fluidos biológicos n Fase estacionaria de HPLC a granel n Accesorios para HPLC tales