Hemocultura - trabalho da II unidade (quase pronto).pptx

8/11/2019 Hemocultura - trabalho da II unidade (quase pronto).pptx

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HEMOCULTURA

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FAINORFACULDADE INDEPENDENTE DO NORDESTE

FARMCIA

7 SEMESTRE

MATUTINO

MICROBIOLOGIACLNICA

COMPONENTES: Abino Ailton Ariele Cosme Maciel Emerson Batista Fernando

Francisco Jair Jamille Magalhes Jssica Juliana

Jussara Luan Magalhes Maik Chapadeiro Patrick Novais Roberto Santos Tssia Fernandes


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HEMOCULTURA

Hemocultura um exame laboratorial que pesquisa

microrganismos patognicos no sangue por meio da

utilizao de meios de cultura especficos.

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HEMOCULTURA

Hemoculturas so usadas para a deteco de micro-organismos,como, bactrias ou fungos, presentes no sangue, de maneira emque se possa identificar os micro-organismos presentes e orientaro tratamento aos pacientes, ou seja, qual medicao ir usar.

- possvel observar se h ou no a presena de bactrias. Casohaja, coloca-se o material em outros meios de cultura paraidentificar a espcie e, por conseguinte, realiza-se tambm

um antibiograma.- Dentre as bactrias mais comumente encontradas na

corrente sangunea esto o Staphylococcus sp., Streptococcussp. e bacilos gram-negativos.

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HEMOCULTURA

As bactrias responsveis pela infeco podem ser identificadaspela realizao da hemocultura e so teis no diagnsticoetiolgico e na escolha da terapia.

O exame deve ser solicitado em certos quadros infecciosos, como:

Suspeita de endocardite; Sepse;

Infeces hospitalares;

Febre de origem no definida;

Infeces em pacientes imunodeprimidos; Meningites;

Pneumonias graves;

Bacteremia;5


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BACTEREMIA

Bacteriemia o termo que designa a indicao da presenade microrganismos viveis na corrente sangunea.

A maioria dos episdios spticos tem

origem hospitalar e com certafrequncia envolvem microrganismosque apresentam grande resistncia aosantimicrobianos.

Neste contexto o laboratrio clnicotem um papel importante no manejode pacientes com bacteremia, uma vezque a hemocultura positiva paramicrorganismo patognicos.

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A bacteremia tem duas origens :

Bacteremia Primria: que tem origem no prprio sistema

circulatrio, ou pela entrada direta de microrganismo na corrente

sangunea atravs de agulhas, infuses contaminadas, cateter, etc.Bacteremia Secundria: O corre atravs de drenagem depequenos vasos sanguneos ou linfticos, seguindo para correntecirculatria atravs de disseminao hematognica.

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BACTEREMIA


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BACTEREMIA

Conceitualmente, as bacteriemias se classificam emtransitria, intermitente, contnua ou de escape.

TRANSITRIA

rpida; a mais comum, e ocorre aps a

manipulao de algum tecidoinfectado;

Em cirurgias que envolvem reascontaminadas;

Tambm ocorre em algumasinfeces agudas, localizadas ou

sistmicas; 8


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INTERMITENTE

Geralmente este tipo ocorre em processos infecciososrelacionados a abscessos intra-abdominais, plvicos,

perinefrticos, hepticos, prostticos e outros,

caracterstica da endocardite infecciosa aguda esubaguda e de outras infeces endovasculares.

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BACTEREMIA


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CONTNUA OU DE ESCAPE

Ocorre mesmo enquanto o pacienteesteja recebendo antibioticoterapiasistmica apropriada.

Na maioria das vezes, as bacteriemiasso causadas por um nicomicrorganismo.

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BACTEREMIA


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SEPTICEMIA

A septicemia uma infeco generalizada consideradagrave, que comea numa regio do corpo e se espalha pormeio da corrente sangunea.

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O QUE CAUSA ?

- Quando o organismo invadido por microrganismospatognicos (vrus, bactrias, fungos) e esses invasores

conseguem se desenvolver e reproduzir h o incio de umainfeco. Geralmente, as infeces se mantm locais, ou seja,acometendo apenas uma regio especfica. No entanto, essainfeco pode ser tornar sistmica quando o patgeno

consegue se disseminar e atingir as demais localidades docorpo, dando origem, assim, uma septicemia.

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SEPTICEMIA


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SINTOMAS

A febre alta; Fraqueza;

Calafrios; Queda da presso arterial;

Enjo; Vmitos; Diarria;

Acelerao cardaca; tremores;

Aparecimento de nguas e erupes na pele.

Tambm pode ocorrer, ao invs de um estado febril, uma quedaconsidervel de temperatura (que ter a mesma funo dafebre).

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SEPTICEMIA


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DIAGNSTICO

dado atravs da cultura do sangue, mais conhecida comoHEMOCULTURA.

A amostra de sangue submetida a um meio de cultura em queo microrganismo ter condies adequadas para crescer e semultiplicar.

O desenvolvimento do microrganismo causador da infeco

possibilita sua identificao, o que fundamental ao tratamento

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SEPTICEMIA


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Idealmente, a coleta deve ser feita ANTES do incio daANTIBIOTICOTERAPIA de pacientes que configurem quadroclnico sugestivo de infeco e suficiente para serem submetidos internao e que apresentem:

Febre(> 38C)

Ou hipotermia (< 36C),

Leucocitose (> 10.000/mm3, especialmente com desvio esquerda)

Ou granulocitopenia absoluta (< 1000 leuccitos/mm3).

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QUANDO A HEMOCULTURA INDICADA?


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QUANDO A HEMOCULTURA INDICADA?

As principais indicaes para a realizao da hemocultura so:

Mudana repentina no pulso Prostrao e hipotenso arterial;

Temperatura corporal apresentando ou no calafrios,

Pacientes com histria de febre baixa, interrompida por

perodos, porm persistente e interligando-se com a presenade sopro cardaco, e demais casos suspeitos conforme aavaliao clinica.

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NORMALMENTE INDICADA AHEMOCULTURA NO APARECIMENTOS DAS

SEGUINTES DOENAS

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NMEROS DE AMOSTRAS

Dever ser considerado de acordo com a condio clnica dopaciente;

Um total de trs culturas em 24 horas costuma ser suficientepara descartar bacteremias, endocardite ou fungemias;

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Adultos e adolescentes

Endocardite Bacteriana Aguda: Coletar trs amostras de punes venosasdiferentes (brao direito e esquerdo), com intervalo de 15 a 30 minutos, 1-2 horas antes da antibioticoterapia;

Endocardite Bacteriana Subaguda: Coletar trs amostras, nas primeiras 24horas, com intervalo mnimo de 15 minutos, com punes venosasdiferentes;

Infeces Sistmicas e Localizadas: Sepsis aguda, Meningite, Osteomielite,Artrite ou Pneumonia Bacteriana Aguda: Coletar duas amostras de punesvenosas diferentes, antes da antibioticoterapia, com intervalos de cinco

minutos entre as punes. Se possvel, 10 a 20 mL por amostra. Bacteremia de Origem Indeterminada: Coletar de duas a trs amostras com

15 a 20 minutos de intervalo entre as colheitas. Paciente com picos febris regulares: Coletar no mais que trs amostras

antes do incio da febre (1 hora) e evitar o pico febril;

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NMEROS DE AMOSTRAS


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Crianas

Coletar amostras com 1 a 3 mL.

Duas culturas so

recomendadas paradiagnstico de bacteremias emrecm-nascidos.

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NMEROS DE AMOSTRAS


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ORIENTAO PARA OBTERHEMOCULTURA

Idealmente uma equipe bem treinada de flebotomia devecoletar todas as hemoculturas de acordo com os protocolosestabelecidos.

As hemoculturas so indicadas quando est presente umadoena febril grave que precisar de terapia antimicrobiana,ou quando uma infeco em um sistema orgnico possa ser

elucidada isolando um patgeno do sangue

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ETAPAS DA HEMOCULTURA

Preparar o material e colocar etiquetacorretamente;

Limpar a tampa de borracha com lcool 70;

Fazer a antissepsia com clorexidine alcolico 0,5;

Colocar novamente o garrote e puncionar a veiacom agulha e seringa ou dispositivo para coletaa vcuo.

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Coletar de 5 a 10ml de sangue (adultos)ou de 1 a 4ml de sangue (crianas) paracada frasco;

Ao retirar a agulha, fazer compressolocal com algodo seco;

Transferir a amostra para os frascos dehemocultura;

Dispensar o material de puno em localapropriado (caixa de perfurocortante).

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ETAPAS DA HEMOCULTURA


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HORAS, INTERVALOS E LOCAL DACOLETA

A coleta deve ser indicada precocemente ao incio dossintomas de infeco e antes do incio do tratamento comantibiticos.

Preferencialmente so coletadas por puno venosa, to logo

se inicie o aumento de temperatura do paciente.

O estado clnico do paciente que vai determinar o momento e ointervalo entre as coletas.

Nas infeces agudas, recomenda-se a coleta de duas a trsamostras (dois frascos por puno/amostra) em curto espaode tempo, ou seja, sequenciais ou dentro de 1 hora.

Preferencialmente no devem ser coletadas a partir de cateter;24


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RECOMENDAES PARA COLETA DE

HEMOCULTURAS EM DIFERENTES CONDIES

OU SNDROMES INFECCIOSAS

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CONDIO OU SNDROME INFECCIOSA RECOMENDAES

Suspeita de bacteremia ou fungemia primriaou secundria, (endocardite, meningite,

osteomielite, artrite e pneumonia.

Obter 2-3 amostras, uma aps a outra, dediferentes stios anatmicos, logo aps o

incio dos sintomas.

Febre de origem indeterminada (ex.abscessos ocultos, febre tifide, brucelose ououtra sndrome infecciosa no diagnosticada)

Obter 2-3 amostras, uma aps a outra, dediferentes stios anatmicos, inicialmente. Senegativas nas primeiras 24-48h de incubao,

obter mais duas amostras, uma aps aoutra, de diferentes stios anatmicos

Suspeita de bacteremia ou fungemia comhemoculturas persistentemente negativas

Considerar mtodos alternativos dehemoculturas, especficos para aumentar arecuperao de micobactrias, fungos oumicrorganismos fastidiosos


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RECOMENDAES PARA COLETA DEHEMOCULTURAS EM DIFERENTES CONDIES

OU SNDROMES INFECCIOSASCONDIO OU SNDROMEINFECCIOSA

RECOMENDAES

Endocardite aguda 3 amostras, com intervalo de 15minutos entre cada uma das

amostras;

Endocardite Subaguda 3 amostras, dentro de 24 horas

Infeces Sistmicas elocalizadas

2 amostras simultneas em stios

diferentes ou em intervalo de

15/20 minutos entre as amostras,

de locais diferentes;


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VOLUME DE SANGUE

O volume do sangue uma das variveis mais crticas para apositividade do exame, pois quanto maior o volume,maior ser a chance de positividade. Entretanto ,devemos respeitar:

A idade do paciente (adulto ou criana).

O volume recomendado pelo fabricante para os tiposde frascos utilizados, mantendo a proporo de

sangue/ caldo de cultura de 1:5 a 1:10 (2).

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Para adultos, coleta-se 5 a 10ml de sangue por frasco em cadapuno, totalizando 20ml, distribudos pelo nmero de frascosindicados, ou seja, um par de frascos por puno .

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VOLUME DE SANGUE


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Na suspeita de fungos dimrficos ou filamentosos (ex.:Histoplasma) ou micobactrias, o indicado coletar 5 a 10mlpor frasco (conforme instrues do fabricante), de duas a trsamostras, coletadas com o intervalo de ao menos um dia

entre elas.

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VOLUME DE SANGUE


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Para crianas, o volume timo de sangue ainda no est bemdefinido, mas os dados da literatura demonstram que h umarelao direta entre o volume de sangue obtido e a detecode ICS.

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VOLUME DE SANGUE


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MTODOS PARA A COLETA EAMOSTRA DE HEMOCULTURA

Lavar as mos;

Usar luvas estril para o procedimento;

Selecionar o frasco de hemocultura que ser utilizado;

Remover a tampa externa do frasco e limpar vigorosamente a

tampa de borracha com lcool 70% , e deix-la protegida com

outro algodo embebido com lcool 70%, at o momento da

inoculao do sangue;

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Definir a veia que ser puncionada, escolher o melhor acessovenoso para coleta;

Fazer a antissepsia com clorexidine alcolico 0,5%,friccionando a pele em crculos semi-abertos a partir do ponto

a ser puncionado. Secar por 30 segundos. Em seguida, aplicarnovamente clorexidine alcolico 0,5% utilizando novo algodoou gaze. Esperar cerca de 30 segundos para secar, repetir oprocedimento por mais uma vez e aguardar secar.

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Fazer a puno, aspirar coletando a quantidadede sangue e o nmero de amostrasrecomendados

Remover o algodo protetor da tampa do

frasco e deixar secar. Fazer a inoculao do sangue diretamente no

frasco sem fazer a troca da agulha. Deixando-oescoar livremente, pois os frascos para

hemocultura so fechados a vcuo.

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MTODOS PARA A COLETA EAMOSTRA DE HEMOCULTURA


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TIPOS DE FRASCOS

Tradicionalmente um par de hemoculturas (equivalente a umaamostra ou uma puno) compreende um frasco aerbio eum anaerbio.

Estudos anteriores, das dcadas de 80 e incio dos anos 90,

Indicavam que a recuperao de anaerbios estava em declnio,j que alguns dados deram fundamentao ao conceito deque os frascos anaerbios deveriam ser dirigidos a casosselecionados.

Sendo assim, alguns autores preconizaram o uso de rotina desomente frascos aerbios.

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Estudos que mostram que a coleta do par incluindo o frascoanaerbio leva ao aumento do isolamento de Staphylococcusspp., Enterobacteriaceae, alguns Streptococcus spp. eEnterococcus spp., anaerbios estritos e facultativos.

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TIPOS DE FRASCOS


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Os materiais devem ser colhidos e inoculados em frascosanaerbios de hemocultura, at o volume mximo permitido,que de 8 mL.

De uma maneira geral deve-se colher 20,0 mL de sangue porhemocultura

Frasco aerbio adulto: 8 a 10 mL/frasco.

Frasco anaerbio adulto: 8 a 10 mL/frasco.

Frasco peditrico: 1 a 3 mL/frasco.

Quando o material for sangue e lquidos biolgicos,pode ser armazenado por um perodo de at 24 horas, temperatura ambiente, em frascos anaerbios.

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TIPOS DE FRASCOS


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Quando a amostra obtida possuir volume total inferior aopreconizado por frasco, o maior volume de sangue deve serinoculado no frasco aerbio para que no haja perda nadeteco de bacteriemias causadas por Pseudomonas

aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia ou leveduras,que so aerbios estritos.

O menor volume restante deve ser inoculado no frascoanaerbio.

Ao ser coletada mais de uma amostra, anotar nos respectivosfrascos (aero e anaero) quais frascos so do mesmo local depuno ou stio anatmico (ex.: 1 amostra, veia perifrica,cateter etc.).

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TIPOS DE FRASCOS


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FATORES QUE INFLUENCIAM DIRETAMENTE

OS RESULTADOS DE HEMOCULTURAS:

Volume de sangue coletado por frasco:

O volume ideal corresponde a 10% do volume total do frasco decoleta. Quanto maior o volume de sangue inoculado no meio de

cultura, por amostra, melhor recuperao do microrganismo,respeitando-se a proporo sangue/meio citada, pois o sangueem desproporo com o meio pode inibir o crescimento demicrorganismos.

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Mtodo de antissepsia:

A execuo de tcnica de antissepsia para reduzir os riscos decontaminao de hemocultura.

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FATORES QUE INFLUENCIAM DIRETAMENTEOS RESULTADOS DE HEMOCULTURAS:


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IDENTIFICAO DOS FRASCOS EPEDIDO MDICO

REQUISIO MDICAToda requisio de exames microbiolgicos deve conter:

Identificao do paciente: Nome completo, nmero depronturio ou registro.

Local de internao: Clnica e leito. Data da solicitao: Identificao da amostra: stio de coleta e tipo de amostra. Uso de antimicrobianos

Suspeita Clnica Exames solicitados Identificao do mdico requisitante: carimbo.

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IDENTIFICAES DAS AMOSTRAS

Nome completo do paciente;

Identificao da amostra;

Horrio da coleta.

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TRANSPORTE

Nunca refrigerar o frasco.

Manter o frasco em temperatura ambiente e encaminhar omais rpido possvel para o laboratrio.

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Dever ser considerado de acordo com a condio clnica dopaciente.

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NMERO DE FRASCOS


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ADULTOS E ADOLESCENTES

Endocardite bacteriana aguda: coletar trs amostras depunes venosas diferentes (brao direito e esquerdo), com

intervalo de 15 a 30 minutos, 1 a 2 horas antes daantibioticoterapia.

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NMERO DE FRASCOS


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Endocardite bacteriana subaguda:coletar trs amostras, nasprimeiras 24 horas, com intervalo mnimo de 15 minutos, compunes venosas diferentes.

Infeces sistmicas e localizadas: como sepsis aguda,meningite, osteomielite, artrite ou pneumonia bacterianaaguda: coletar duas amostras de punes venosas.

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NMERO DE FRASCOS


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Bacteremia de origem indeterminada:coletar quatro a seisamostras de punes venosas diferentes em 48 horas;

Paciente com picos febris regulares:coletar no mais que

trs amostras antes do incio da febre (1 hora).

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NMERO DE FRASCOS


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CRIANAS

Coletar amostras com 0,5 ml a 3 ml.

Duas culturas so recomendadas para diagnstico de

bacteremias em recm-nascidos.

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NMERO DE FRASCOS


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CONSIDERAES GERAIS

Coletar amostra, sempre que possvel, antes daantibioticoterapia;

Fazer antissepsia antes de coletar as amostras;

Aguardar 72 horas aps mudana na antibioticoterapia paracoletar novas amostras do mesmo stio de infeco;

Utilizar frascos e meios de transporte apropriados

Enviar a amostra ao laboratrio o mais breve possvel

Em situaes onde o prprio paciente ir realizar a coleta(urina, fezes), instruir de maneira clara o paciente e certificar-se de que ele entendeu suas orientaes.

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SISTEMAS MANUAIS

Utiliza um caldo enriquecido (TSB ou BHI) inocular 2 frascos

Aerobiose anaerobiose (feito vcuo e contem suplemento para produo

de CO2 , N2 , H2).

Os frascos so incubados a 35C por 7 dias, podendo ser visualizadopor: turvao do caldo; hemlise, quando as bactrias so hemolticas; produo de gs; Mais raramente pela presena de microcolnias na superfcie

da camada de sangue.

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Lmina para microscopia (Gram);

Subcultivo;

Subcultivo + bacterioscopia;

Alterao no meio de cultura, nas primeiras 24 horas (6-18h)sub-cultivo a cego;

Inspeo visual diria;

Caso s cresa em antibiose;

Repique para gar enriquecido; A maioria dos microrganismos crescem de 48 a 72 horas

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SISTEMAS MANUAIS


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SISTEMAS MANUAIS


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O sistema manual em caldo tem a vantagem de ser de baixocusto;

Bem trabalhoso;

Aumenta o risco de contaminao porque vrias

manipulaes so necessrias;

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SISTEMAS MANUAIS


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SISTEMA SEPTI-CHEK (BBL)

Sistema bifsico que utiliza :Meio de cultura slido em lmina:

Cmara plstica que acoplada ao frasco com caldo dehemocultura padro.

O sangue inoculado no caldo e a cmara para laminocultivo adicionada, formando o conjunto a ser usado.

Aps 4 a 6 horas de incubao a 35C;

A lmina banhada com o caldo, por inverso do frasco

(sendo assim inoculado como um sub-cultivo), sem anecessidade de abertura do frasco.

Inspecionados visualmente para evidncia de crescimento.

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O sistema funciona bem para recuperao de aerbios efacultativos;

O mtodo menos trabalhoso que o manual em caldo e ascolnias j so disponveis para testes de identificao e

testes de sensibilidade a antimicrobianos.

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BENEFCIOS:

Contnuo monitoramento pelo sistema (leitura em minutos).

Maior sensibilidade e rapidez para deteco de positividade

da amostra (agitao).

Possibilidade de criao de banco de dados dos

microrganismos isolados e dados demogrficos, alm do

interfaceamento com o sistema do laboratrio, o que facilita

a liberao dos resultados negativos.

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Menor risco de contaminao laboratorial, pois o repique s

realizado em amostras positivas.

No necessrio repicar amostra negativa.

Economia de tempo e material (agulha, seringa e placas com

meios de cultura para repiques) com menor risco de

manipulao.

Determinao do tempo para positividade de cada frasco,

auxiliando no diagnstico de infeces relacionadas a cateter.

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Os frascos de plstico possuem a vantagem de serem maisleves e provocarem menos risco de acidentes.

A principal desvantagem do mtodo o custo ainda elevado,

algumas vezes no compensados pelas fontes pagadoras.

Os frascos aerbios devem manter rea suficiente de volumede ar para permitir crescimento de bactrias aerbias estritas

como Pseudomonas aeruginosa e leveduras,enquanto osfrascos para anaerbios devem ter uma mistura de gases livresde oxignio, evitando-se a introduo de ar durante a coleta.

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Pacientes com infeco avanada pelo HIV, bem como outrosimunossuprimidos, tem risco elevado de infeces porMycobacterium tuberculosis e pelo complexo Mycobacterium

avium, assim como por Histoplasma capsulatum.

Em geral, a maioria dos meios comercializados paraautomao tem desempenho semelhante para os patgenosusuais. Apesar da recomendao de coletar amostras antes do

incio da antibioticoterapia, muitos pacientes j estorecebendo antimicrobianos no momento da coleta,diminuindo potencialmente a chance de positividade.

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Em situaes rotineiras, utilizando-se o mtodo automatizadode monitorao contnua, recomenda- se que os frascos dehemocultura sejam incubados por cinco dias para bactriasaerbias, anaerbias e a grande maioria das leveduras (16), e

42 dias para frascos especiais para outros fungos emicobactrias (32), ou conforme instrues do fabricante.

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MTODO DE LISE-CENTRIFUGAO

Durante muitos anos foi considerado o padro ouro parahemoculturas.

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O sistema Isolator (laboratrios Wampole) constitui de tuboa vcuo adulto e peditrico contendo uma substncia lisantede leuccitos e hemcias, liberando microrganismosintracelulares.

Os tubos so centrifugados e, aps desprezar-se osobrenadante (contendo debris celulares, agentesantimicrobianos, plasma e complemento), o sedimento

contendo o suposto agente etiolgico semeado emqualquer tipo de meio inclusive para patgenos especiaiscomo Legionella, Micobactrias e fungos.

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Tem ainda a possibilidade de se fazer a contagem de colniaspor mL de sangue (cultura quantitativa).

Este mtodo tem como limitao o custo elevado e o fato de

ser trabalhoso, o que inviabiliza o processamento de grandenmero de amostras.

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AS FACES DO LAMINO CULTIVO SO:

Face larga: gar Chocolate e prximo tampa o Indicador deCO2 (de forma redonda) que detecta o crescimento debactrias e fungos;

Face dividida: gar Sabouraud, gar MacConkey.

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CARACTERSTICAS DOS COMPONENTES:

Fase 1: - Caldo suplementado (TSB, Piridoxina, L-Cistena,Extrato de levedura): promove o crescimento demicrorganismos, devido riqueza de nutrientes.

SPS: possui efeito anticoagulante, favorece o cultivo devido ao anticomplementar, antifagocitria e inibitria daatividade microbiana dos aminoglicosdeos e outras drogasque podem estar presentes no sangue.

Substncias orgnicas e inorgnicas que inibem osantibiticos, favorecendo o isolamento bacteriano durante ateraputica com antimicrobianos.

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Fase 2: Meios de cultura slidos que permitem o crescimentodas bactrias (gar Chocolate, gar MacConkey) e fungos(gar Sabouraud) produtores de bacteriemia.

Fase 3: Indicador: a viragem de cor para rosa forte e vermelhoocorre pela presena de CO2 produzido pelo microrganismo.

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CARACTERSTICAS DOS COMPONENTES:

HEMOCULTURA AUTOMATIZADA


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HEMOCULTURA AUTOMATIZADAO QUE ?

A hemocultura automatizada permite contnua monitorizaodo crescimento bacteriano, que permite deteco debactrias 24 horas ao dia.

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FATORES DE INTERFERNCIA NO


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FATORES DE INTERFERNCIA NORESULTADO

Contaminao com flora normal da pele;

Volume do sangue cultivado;

Tipos de meios utilizados;

Uso de antibiticos; e Presena de microrganismos fastidiosos.

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IMPORTANTE PARA A COLETA

Quando solicitado hemocultura para aerbios, anaerbios efungos, so colhidos 3 frascos (1 aerbio, 1 anaerbio e 1fungo) no mesmo acesso e momento. Se houver solicitaode 2 amostras, aguarda-se 20 minutos e colhe-se os 3 frascos

de outro acesso venoso (nova puno).

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VANTAGENS

Contnuo monitoramento pelo sistema (leitura em minutos).

Maior sensibilidade e rapidez para deteco de positividadeda amostra(agitao).

Possibilidade de criao de banco de dadosdos microrganismos isolados e dados demogrficos, alm dointerfaceamento com o sistema do laboratrio, o que facilita aliberao dos resultados negativos.

Determinao do tempo para positividade de cada frasco,auxiliando no diagnstico de infeces relacionadas a cateter.

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Menor risco de contaminao laboratorial, pois o repique s realizado em amostras positivas.

No necessrio repicar amostra negativa.

Economia de tempo e material (agulha, seringa e placas commeios de cultura para repiques) com menor risco demanipulao.

Os frascos de plstico possuem a vantagem de serem maisleves e provocarem menos risco de acidentes.

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VANTAGENS


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DESVANTAGENS

A principal desvantagem do mtodo o custo ainda elevado,algumas vezes no compensados pelas fontes pagadoras.

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MTODO AUTOMATIZADO

ltimos anos foram desenvolvido novos mtodos; Grandes vantagens (rapidez);

Monitorizaro constante das amostras;

Baseado na deteco de CO2, produzido pelosmicrorganismos .

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Segundo protocolos, so 5 dias de incubao; Maioria dos resultados ocorrem nas primeiras 24 horas;

O subcultivo torna-se desnecessrio quando o negativo.

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MTODO AUTOMATIZADO


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Na incubao, os equipamentos monitoram continuamente a

cada 10 minutos durante 24 horas ao dia;

Aviso imediato caso haja positividade, alarmes e por meio da

cor da tela no mdulo.

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MTODO AUTOMATIZADO


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Identificao final para bactrias ocorre entre 4horas a18horas;

J para as leveduras o resultado final ocorre na maioria doscasos at 24horas.

Em monitorao contnua recomenda-se 42 dias para frascosespeciais para outros fungos e micobactrias.

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MTODO AUTOMATIZADO


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IMPORTANTE:

O tempo de incubao diretamente proporcional aonmero de microrganismos presente no sangue;

Sendo menor quando a carga bacteriana for alta.

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MTODO AUTOMATIZADO

COLETA DE HEMOCULTURAS PARA DIAGNSTICO


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COLETA DE HEMOCULTURAS PARA DIAGNSTICODE INFECO RELACIONADA A CATETER VASCULAR

A remoo e cultura do cateter vascular foram durante muitotempo o padro-ouro para o estabelecimento do diagnsticode infeco relacionada a cateter, especialmente em cateteresvenosos centrais (CVCs) de curta permanncia.

Apenas 20% a 25% dos cateteres removidos com suspeita deinfeco realmente eram os responsveis pelo processoinfeccioso.

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Se a amostra for obtida a partir de cateter vascular, deve serrealizada a antissepsia do local a ser puncionado com lcool70% (dispositivo) ou clorexidine alcolico (pele).

no necessrio descartar o volume inicial de sangue ou lavaro acesso com salina para eliminar heparina ou outrosanticoagulantes, pois a alta concentrao protica dos meios

de cultura normalmente neutraliza o efeito antimicrobianoeventual do anticoagulante.

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Alm disso, o descarte do volume inicial de sangue do catetercom o intuito de evitar contaminao assunto controverso eesta prtica ainda realizada em muitas instituies, mesmonas peditricas, onde o volume de sangue ponto crtico.

Porm, estudo realizado por Dwivedi e col. Em 2009,demonstrou que o descarte da alquota inicial no diminui achance de contaminao da amostra, tornando esta prticadesnecessria.

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MTODO MAKI


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MTODO MAKI

O mtodo descrito por Maki o mais amplamente utilizadopara determinar a relao entre colonizao do cateter einfeco. O segmento distal do cateter rolado (deve-seevitar a esfregao) 4 a 5 vezes sobre a superfcie de umaplaca de gar-sangue, com auxlio de uma pina estril.

Aps incubao, durante 18 24 horas 35C,preferencialmente em atmosfera de CO2, realizada acontagem de colnias. recomendvel fazer uma novaobservao da placa aps 48 - 72h. Esta tcnica avaliasomente a superfcie externa do cateter. Considera-se ocrescimento de 15 UFC por placa como sugestivo decolonizao do cateter.

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MTODO MAKI


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Na ausncia de cultura semiquantitativa, a infeco

relacionada ao dispositivo vascular tambm pode ser

diagnosticada clinicamente quando h drenagem de secreo

purulenta na juno da pele com o cateter e realizando-se a

cultura deste material.

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MTODO MAKI

MTODO MAKI


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A tcnica mais sensvel a cultura quantitativa, em que osegmento do cateter imerso em caldo e sonicado(ultrassom) para a liberao dos microrganismos aderidos nas

superfcies intra e extraluminal. Em seguida so executadasdiluies e culturas quantitativas a partir do caldo, apssonicao.

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MTODO MAKI

I

INTERPRETAO DOS RESULTADOS


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Por muitos anos tem sido consenso entre

clnicos e microbiologistas que a

hemocultura um dos testes

laboratoriais mais importantes para o

diagnstico de infeces graves.

O ndice de positividade pode variar

bastante de acordo com o tipo e o grau

de complexidade da instituio.

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I



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Quando uma hemocultura inesperadamente positiva (naausncia de sinais ou sintomas) ou quando somente umadentre vrias amostras positiva para um determinadomicrorganismo, este pode eventualmente ser considerado um

contaminante.

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Alguns microrganismos tm alto valor preditivo positivo

para bacteremia verdadeira (> 90%), mesmo quando

isolado em somente uma amostra.

J alguns tipos de microrganismos so mais

frequentementeassociados com contaminao (< 5% de

chancede bacteremia verdadeira).

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Microrganismos que apresentaminfeco verdadeira:

Staphylococcus aureus, Escherichia coli eoutras Enterobacteriaceae, Neisseriameningitidis, Streptococcus pneumoniae,Pseudomonas aeruginosa, Brucella spp.,Streptococcus pyogenes, Streptococcusagalactiae, Listeria monocytogenes,Neisseria meningitidis, Neisseria

gonorrhoeae, Haemophilus influenzae,membros do grupo Bacteroides fragilis,Candida spp. e Cryptococcus spp.

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Microrganismos como Streptococcus viridans representa 38%das bacteremias verdadeiras;

Enterococcus spp. 78%;

Staphylococcus coagulase

negativo 15%.

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Alguns tipos de microrganismos so mais frequentementeassociados com contaminao, como:

Corynebacterium spp.;

Micrococcus spp.;

Bacillus spp.;

Propionibacterium acnes.

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ILIMITAES DO MTODO


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Os mtodos em uso requerem de horas a dias de incubaopara detectar o crescimento de microrganismos.

No h um sistema comercial disponvel ou meio de cultivocapaz de possibilitar a deteco de todos potenciais

patgenos.

Quanto maior a quantidade de sangue inoculada no meio,maior ser a sensibilidade do teste.

A contaminao ocasional do sangue difcil de ser evitada,principalmente no ato da coleta e semeadura.

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LIMITAES DO MTODO

I

LIMITAES DO MTODO


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O momento da coleta muito importante para a eficcia do

exame, e, apesar de no haver um consenso geral,

recomenda-se que a coleta seja efetuada preferencialmente

no momento do pico febril e antes de se iniciar qualquer

procedimento teraputico com antibiticos e

quimioterpicos.

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LIMITAES DO MTODO

I

LIMITAES DO MTODO


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O nmero de amostras coletadas no consensual, porm,

admite-se que o ideal um mnimo de 3 amostras em 24

horas, em duplicata (desta forma pode-se rastrear possveis

contaminaes)

Algumas bactrias fastidiosas como brucelas e alguns

hemfilos podem no ser recuperadas pela hemocultura.

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LIMITAES DO MTODO

COMUNICAO DOS RESULTADOS


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O exame mais importante a ser realizado em qualquerhemocultura sinalizada como positiva a colorao de Gram.

altamente provvel que esta informao descritiva das

caractersticas morfotintoriais, juntamente com os dados dopaciente, ir ditar a escolha da antibioticoterapia primriacom impacto positivo na escolha teraputica e na evoluoclnica.

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Portanto, o resultado parcial de hemoculturas deve serconsiderado de alta prioridade para notificao ao mdicoassistente, inclusive por escrito. sempre til rever outrasculturas do mesmo paciente, para identificar possveis pistas

da identificao do agente.

O nmero de hemoculturas positivas sobre o total deamostras enviadas e o tempo de positividade tambm devem

ser analisados ao reportar os resultados.

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REFERNCIAS


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REFERNCIAS

Koneman, Elmer; et al. Diagnostic Microbiology. Lippincott, USA, 5 ed.1997.

Hemocultura. Disponvel em :

Acessado em: 29 de maro de 2014.

BACTEREMIA. Disponvel em : Acesso em: 02 de abril de 2014.

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INFECTOPEDIA COLETA E HEMOCULTURA. Disponvel em: Acesso em 09 deabril de 2014.

HEMOCULTURA: RECOMENDAES DE COLETA, PROCESSAMENTO EINTERPRETAO DOS RESULTADOS. Maria Rita Elmor de Araujo,Mdica Patologista Clnica Coordenadora mdica dos setores deMicrobiologia dos Laboratrios do Hospital Beneficncia Portuguesa,So Paulo (SP) e Hospital do Corao, So Paulo (SP), Brasil. Disponvel

em: Acesso em 09 de abril de 2014.

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REFERNCIAS

REFERNCIAS


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Araujo, M.R.E. Como pode ser feito o diagnstico microbiolgico das

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Documents

Hemocultura - trabalho da II unidade (quase pronto).pptx