Informe 9 Lab Microbio Shigella

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

CURSO: Laboratorio de Microbiología

GRUPO: B*

PROFESOR: J. Juscamaita

INTEGRANTES:

- Núñez Burga, Alisson

- Pinto Pareja, Andrea

- Rodríguez Mendoza, Kevin

- Yachachin Tunque, Renzo

2011

INTRODUCCIÓN

Un método fundamental para estudiar las bacterias es cultivarlas en un medio líquido o en la

superficie de un medio sólido de agar. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes que van,

desde azúcares simples hasta sustancias complejas como la sangre o el extracto de caldo de

carne. Para aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por muchos

tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo sólido donde las células que se multiplican no

cambian de localización; tras muchos ciclos reproductivos, cada bacteria individual genera por

escisión binaria una colonia macroscópica compuesta por decenas de millones de células similares

a la original. Si esta colonia individual se siembra a su vez en un nuevo medio crecerá como cultivo

puro de un solo tipo de bacteria (Pascual, 1999).

Muchas especies bacterianas son tan parecidas morfológicamente que es imposible diferenciarlas

sólo con el uso del microscopio; en este caso, para identificar cada tipo de bacteria, se estudian

sus características bioquímicas sembrándolas en medios de cultivo especiales. Así, algunos

medios contienen un producto que inhibe el crecimiento de la mayoría de las especies bacterianas,

pero no la de un tipo que deseamos averiguar si está presente. Otras veces el medio de cultivo

contiene determinados azúcares especiales que sólo pueden utilizar algunas bacterias (Granados,

1997).

En algunos medios se añaden indicadores de pH que cambian de color cuando uno de los

nutrientes del medio es fermentado y se generan catabolitos ácidos. Si las bacterias son capaces

de producir fermentación, generan gases que pueden ser apreciados cuando el cultivo se realiza

en un tubo cerrado. Con otros medios de cultivo se identifica si las bacterias producen

determinadas enzimas que digieren los nutrientes: así, algunas bacterias con enzimas hemolíticas

(capaces de romper los glóbulos rojos) producen hemólisis y cambios apreciables

macroscópicamente en las placas de agar-sangre. Los diferentes medios y técnicas de cultivo son

esenciales en el laboratorio de microbiología de un hospital, pues sirven para identificar las

bacterias causantes de las enfermedades infecciosas y los antibióticos a los que son sensibles

esas bacterias (Granados, 1997).

Teniendo en cuenta lo mencionado anteriormente, basamos nuestro informe en los siguientes

objetivos:

- Observar las diferentes reacciones de la cepa dada en clase, en cada medio para su

posterior determinación.

- Determinar que compuestos esta metabolizando la bacteria de acuerdo a las variaciones

que ocasione en cada medio.

REVISION LITERARIA

AGAR KLIGLER

Definición

Este medio de cultivo es empleado para la diferenciación de enterobacterias (Gram negativos),

en base a la fermentación de la dextrosa y la lactosa así como a su capacidad de producir

sulfuro de hidrógeno.

Fundamento

En el medio de cultivo, la peptona de carne y la tripteína, aportan los nutrientes adecuados para

el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El

tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el citrato de

hierro y amonio, es la fuente de iones Fe 3+, los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y

producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de

sodio mantiene el balance osmótico. El agar es el agente solidificante (Granados, 1997).

Cuadro 1: Composición de agar Kliger

Fórmula (en gramos por litro)

Peptona de carne 13.0

Cloruro de sodio 5.0

Lactosa 10.0

Tripteina 10.0

Glucosa 1.0

Citrato de hierro y amonio 0.5

Tiosulfato de sodio 0.3

Rojo de fenol 0.025

Agar 15.0

Fuente: Granados, 1997

AGAR CITRATO DE SIMMONS

Definición

El Agar Citrato de Simmons es un medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias en base

a su capacidad de utilizar el citrato. Este medio es recomendado para el estudio de enterobacterias

a partir de muestras clínicas, de agua y alimentos.

Fundamento

En el medio de cultivo, el fosfato monoamónico es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio

es la única fuente de carbono. Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteriano.

Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzimático. El cloruro de

sodio mantiene el balance osmótico, y el azul de bromotimol es el indicador de pH, que vira al color

azul en medio alcalino. El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos

capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono, usan sales de amonio como única fuente

de nitrógeno, con la consiguiente producción de alcalinidad.

El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a

través del ciclo del ácido tricarboxílico. El desdoblamiento del citrato da progresivamente,

oxalacetato y piruvato. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen a ácidos

orgánicos que, al ser utilizados como fuente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos

alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permeasa

(Granados, 1997).

Cuadro 2: Composición de agar Citrato de Simmons


Citrato de sodio 2.0


Fosfato dipotásico 1.0

Fosfato monoamónico 1.0

Sulfato de magnesio 0.2

Azul de bromotimol 0.08

Agar 15.0


AGAR LISINA

Definición

El Agar de Hierro y Lisina es un medio utilizado para la diferenciación de microorganismos

entéricos en base a su capacidad para desaminar o descarboxilar la lisina y de producir sulfuro

de hidrógeno. Este medio también es conocido como LIA.

Fundamento

En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para el

desarrollo bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina es el sustrato

utilizado para detectar la presencia de las enzimas descarboxilasa y desaminasa. El citrato de

hierro y amonio, y el tiosulfato de sodio, son los indicadores de la producción de ácido

sulfhídrico. El púrpura de bromocresol, es el indicador de pH, el cual es de color amarillo a pH

igual o menor a 5.2, y de color violeta a pH igual o mayor a 6.8.

Por descarboxilación de la lisina, se produce la amina cadaverina, que alcaliniza el medio y esto

produce el viraje del indicador al color violeta. La descarboxilación de la lisina, tiene lugar en

medio ácido, por lo que es necesaria que la glucosa sea previamente fermentada.

Los microorganismos que no producen lisina descarboxilasa, pero que son fermentadores de la

glucosa, producen un viraje de la totalidad del medio de cultivo al amarillo, pero a las 24 hs de

incubación se observa el pico de color violeta debido al consumo de las peptonas, y el fondo

amarillo. La producción de sulfuro de hidrógeno, se visualiza por el ennegrecimiento del medio

debido a la formación de sulfuro de hierro (Granados, 1997).

Cuadro 3: Composición de agar Lisina


Peptona de gelatina 5.0

Extracto de levadura 3.0

Glucosa 1.0

Lisina 10.0


Tiosulfato de sodio 0.04

Púrpura de bromocresol 0.02

Agar 15.0


CALDO INDOL

Definición

El indol es un compuesto que contiene nitrógeno que puede ser formado de la degradación del

aminoácido por ciertas bacterias que utilizan la triptofanasa.

Fundamento

En el medio de cultivo, el extracto de levadura, la peptona de carne y la tripteína aportan los

nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano. Además la tripteína y el L-triptófano

aportan el sustrato para la enzima triptofanasa y triptófano deaminasa.

El almidón es la fuente de glucosa, hidrato de carbono fermentable, el piruvato de sodio presente

permite reparar células injuriadas y el citrato de hierro y amonio, permite la detección de la enzima

triptófano deaminasa (Granados, 1997).

Cuadro 4: Composición de Caldo Indol


Almidón 1.0

Extracto de levadura 6.0

Peptona de carne 6.0

Tripteína 14.0

L-triptofano 1.0

Piruvato de sodio 1.0


Mezcla cromogénica 0.2

Agar 15.0

Fuente: Granados, 1997 CALDO ÚREADefiniciónEl caldo Úrea pone de manifiesto

la actividad de la enzima ureasa, para degradar la urea en dos moléculas de amoniaco

manifestándose con una coloración grosella intenso.FundamentoEn el medio de cultivo, la

tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El

cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.

Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa liberando amoníaco y

dióxido de carbono. Estos productos alcalinizan el medio haciendo virar a un grosella

intenso. En este caso existe alcalinización del medio por aumento del pH por el carbonato

de amonio (Granados, 1997).Cuadro 5: Composición de Caldo de Úrea


Tripteína 1.0

Glucosa 1.0


Fosfato monopotásico 2.0

Rojo de fenol 0.012

Agar 15.0

Fuente: Granados, 1997CALDO NITRATODefiniciónVa a poner de manifiesto la capacidad del

microorganismo de transformar los Nitratos en Nitritos, de esta manera se puede conocer si la

bacteria puede obtener oxígeno de los Nitratos para luego obtener Nitritos (Granados,

1997).MATERIALES Y METODOSMaterialesMedios de cultivos: Agar Kligler, agar citrato de

Simmon´s, agar Lisina, caldo nitrato, caldo Indol, caldo de Urea.

Figura 1: Agar Kligler, Agar Citrato, Agar Lisina, Caldo Nitrato, Caldo Indol

Fuente: Elaboración propia

- Asa y Aguja de Kölle

- Mechero

- Cultivo microbiano de 18-24 horas (Cepa 30)

Figura 2: Cultivo microbiano

Fuente: www.egogenesis.com

Métodos

Degradación de Carbohidratos

a) Fermentación de glucosa y lactosa: Para éste análisis se utiliza el agar Kligler, el cual

está inclinado o en forma de pico de flauta. Su color es rojo-naranja intenso.

Procedimiento

1. Se flameó la aguja de kölle con el mechero y luego se cogió la cepa de E. coli. Se siguió

el protocolo y se extrajo la muestra.

Figura 3: Extracción de la Cepa


2. Por el método de picadura profunda se sembró la cepa hasta la mitad del agar. Luego

se flameó de nuevo la aguja y con el alicate se le dio forma de asa. Con el asa se

extrajo muestra de la cepa según el protocolo y se realizó una siembra por estría en la

parte superior del agar.

Figura 4: Agar Kligler


3. Finalmente se dejó incubar a 37º por 18 – 24 horas.

b) Asimilación del citrato: Para éste análisis se utiliza el agar Citrato de Simmon’s, el cual

está inclinado o en forma de pico de flauta. Su color es verde. Este agar es usado como

única fuente de carbono para ciertos bacilos Gram (-). Si la cepa se desarrolla en este

medio entones es citrato +, esto aumenta el pH y vira el indicador azul de bromotinol de

verde a azul.

Procedimiento

1. Se flameó la aguja de kölle con el mechero y se extrajo la muestra según el protocolo.



2. Se sembró en la superficie del agar.

Figura 6: Agar Citrato de Simmon’s


3. Se dejó incubar a 37 ºC por 24 horas.

Degradación de Aminoácidos

a) Descarboxilación de la Lisina: Para éste análisis se utiliza el agar Lisina, el cual esta

inclinado o en forma de pico de flauta. Su color es morado.

Procedimiento

1. Se flameó el asa de kölle con el mechero y luego se cogió la cepa de E. coli. Se siguió

el protocolo y se extrajo la muestra.



2. Se sembró en la superficie del agar.

Figura 8: Agar Lisina



Interpretación

Durante las primeras horas el medio se torna amarillo por fermentación de la glucosa

contenida en el medio y produciendo ácido. Posteriormente, al ocurrir la descarboxilación

del aminoácido, el medio se torna alcalino y el indicador vira al rojo púrpura.

b) Degradación del triptófano: Para éste análisis se utiliza el caldo Indol. Su color es

amarillo tenue y es transparente. La degradación del triptófano da como resultado un

compuesto nitrogenado llamado Indol que solo ciertas bacterias pueden producir. La

enzima que lo degrada se llama triptofanasa y da como productos indol, ácido pirúvico y

amoniaco.

Procedimiento

1. Se flameó el asa de kölle con el mechero y luego se cogió la cepa . Se siguió el

protocolo y se extrajo la muestra.



2. Se inoculó la muestra en el caldo.

Figura 10: Caldo Indol



4. Luego de la incubación se agregó el reactivo de Kovacs al tubo de ensayo.

Degradación de la Úrea

Procedimiento

1. Se flameó el asa de kölle con el mechero y luego se cogió la cepa . Se siguió el

protocolo y se extrajo la muestra.



2. Se inoculó la muestra en el caldo.

Figura 12: Caldo úrea


3. Se deja incubar a 37 ºC por 24 horas.

Interpretación

La presencia de color púrpura indica la degradación de la úrea por la ureasa.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

Degradación de carbohidratos

Cuadro 6: Fermentación de glucosa y lactosa

Agar: Kligler

Indicador: Rojo de fenol

Color: Rojo, Amarillo

Ruptura del medio: Positivo

Ennegrecimiento del medio: Negativo

Observaciones:

Figura

13:

Se observa fermentación de lactosa,

ya que ha virado el color del indicador

a amarillo en la parte superior y

superficial del agar donde se hizo la

siembra.

Sí hay presencia de fermentación de

glucosa, además se observa

producción de gas ya que hay

rompimiento del agar.

Muestra en Agar Kligler


Cuadro 7: Asimilación de citrato

Agar: Citrato de Simmon´s

Indicador: Azul de bromo timol

Color: Verde

Observaciones:

Figura 14: Muestra en Citrato de Simmon´s

La prueba da negativo debido que no hay viraje de color del indicador, lo que indica que el microorganismo no ha utilizado el citrato como fuente de carbono y no ha ocasionado un incremento del pH del agar (pH=7.6) por ello mantuvo su color inicial de verde.


Degradación de aminoácidos

Justificación

Por Descarboxilación de la lisina se ha producido la amina cadaverina, que ha alcalinizado el

medio y esto ha producido el viraje del indicador al color rojo purpura. La descarboxilación de la

lisina tiene lugar en medio ácido, por lo que ha sido necesaria que la glucosa sea previamente

fermentada, tornándose durante las primeras horas amarillo.

Cuadro 8: Descarboxilación de la lisina

Caldo: Lisina

Indicador: Púrpura de bromocresol

Color: Púrpura

Observaciones:

Figura 15: Muestra en lisina

Cuando se pierde el grupo carboxilo de un aminoácido y permanece el grupo amino (básico), se alcaliniza el medio y aumenta el pH a 6.9, haciendo que el indicador se torne rojo púrpura. Esto ocurrió en la prueba y se demostró que el microorganismo es capaz de descarboxilar la lisina.



Cuadro 9: Degradación del triptófano

Caldo: Indol

Reactivo: Kovacs

Formación de anillo rojo: Negativo

Observaciones:

Figura 16: Muestra en Caldo Triptófano

No se formó ningún anillo rojo por lo cual decimos que el indicador no ha reconocido la presencia de indol. Entonces, se concluye que el microorganismo no posee triptofanasa y no degrada el triptófano, a partir del cual debería producirse el indol. Lo que contradice a la bibliografía que dice que debería salir (+)

Degradación de la urea

Cuadro 10: Degradación de la úrea

Caldo: Úrea

Color: No varía

Ureasa: Negativo

Observaciones:

Figura 17: Muestra en úrea

No se ha evidenciado el viraje de color del indicador rojo fenol a rojo grosella intenso, lo que nos indica que el microorganismo no produjo ureasa para degradar a la urea.


Cuadro 11: Resumen de resultados

*Según la teoría, debería salir (+).


Microorganismo

E. Coli

AgarKligler

Glucosa (+)

Lactosa (+)

H2S (-)

Gas (+)

Asimilación del citrato (-)

Descarboxilación de la lisina

(+)

Degradación del triptófano (-)*

Degradación de la úrea (-)

DISCUSIONES

- Según Romero (2007) la Escherichia Coli es un bacilo gramnegativo, con una sola cadena

espiral de ADN, móvil, aerobio y aerobio facultativo, con flagelos perítricos. Va a tener

ciertos efectos y características al reaccionar con los siguientes medios de cultivo:

Cuadro 12: Efectos y características del Escherichia Coli al reaccionar con diferentes medios de cultivo

Fuente: Romero, 2007.

- Según Granados y Villaverde (1997), la fermentación de la glucosa (+) y lactosa (+): zona

profunda amarillo (reacción ácida), zona superficial de la reacción (reacción alcalina).

Entonces podría pertenecer a Escherichia Coli.

- El resultado citrato (-), según Granados y Villaverde (1997), indica con medio Simmons que

no aparece cambio de color ni crecimiento; esto no ocurrió en la práctica y según Beeton et

al. (1959) se trata de la bacteria Escherichia Coli sp.

- Según Granados y Villaverde (1997), el resultado Indol (+) se manifiesta con la aparición

de un anillo color rojo en la superficie del medio luego de añadir el reactivo de Kovacs.

Esto no ocurrió en la práctica realizada, lo que conlleva a un error del experimento. O

también, a una mala adición del Reactivo de Kovaks (no fue lo suficiente).

- La descarboxilación de la lisina, suele realizarse según Granados y Villaverde (1997) en

caldo Lisina, el resultado da (+) si el medio cambia a rojo púrpura, evidenciando que se

trata de Escherichia Coli sp.

- La prueba de degradación de la urea detecta la presencia de la enzima ureasa en los

microorganismos. En la práctica el resultado dio (-), corroborando con la bibliografía que da

(-) (Guerrant, 2002).

CONCLUSIONES

- Agar lisina en este medio se permite evidenciar la descarboxilación del aminoácido lisina

en la diamina cadaverina, como también la desaminación de la lisina en un alfa cetoácido.

Estas 2 reacciones se ponen de manifiesto por el viraje del indicador púrpura de

bromocresol. La formación de H2S se pone de manifiesto por la presencia del tiosulfato

sódico, que dará formación al sulfato férrico. También puede verificarse la formación de

gas a partir de la degradación de la glucosa (Alania, 2010).

- Agar Simmons este medio nos permite comprobar la capacidad de la bacteria de utilizar el

citrato como fuente exclusiva de carbono. La degradación del citrato conlleva a la

alcalinización del medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a azul prusia.

- Agar kligler este medio se emplea para la identificación de bacilos gram (–) basada en la

fermentación de la lactosa y la glucosa y en la producción de H2S. Si el tubo no muestra

ningún cambio es porque la bacteria no consume ni lactosa ni glucosa (Alania, 2010).

- Caldo urea en este medio se observa la capacidad de la bacteria de degradar la úrea por

medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el

medio por lo cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza (Alania, 2010).

Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia

Bacterias úrea + retardada: Klebsiella, Citrobacter y Enterobacter.

Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella

- Caldo triptófano en este medio la motilidad se pone de manifiesto por la turbidez difusa del

medio de cultivo alrededor del canal de la picadura. La no motilidad se caracteriza por el

crecimiento producido exclusivamente a lo largo de la línea de inoculación. La producción

de H2S se reconoce por el ennegrecimiento de la zona de crecimiento o del medio debido a

la presencia del tiosulfato sódico. Para la demostración del indol se usa el reactivo de

Kovacs, que manifiesta la degradación del triptófano por la enzima triptofanasa en indol,

que se combina con el aldehído presente en el reactivo de Kovacs, para producir un color

rojo (Alania, 2010).

RECOMENDACIONES

- El cultivo se debe observar a las 24 horas.

- Se debe tener cuidado con los factores de crecimiento de microorganismos.

- Todos los materiales que se usan en el cultivo deben estar esterilizados.

- En la inoculación se debe hacer cerca al mechero para evitar la presencia de otro

microorganismo que altere el experimento.

CUESTIONARIO

1. Nombre algunos ácidos producidos por bacterias. Mencione el género principal que

producen cada uno de estos ácidos.

- Los ácidos orgánicos se usan por lo general como acidulantes y son uno de los

ingredientes más versátiles en los alimentos y bebidas, debido a sus solubilidad,

higroscopicidad, propiedades tampón (buffer) y de quelación (Moresi y Parente, 1999). Los

ácidos láctico, cítrico, glucónico y propiónico están presentes en forma natural y son

producidos por fermentación. El ácido cítrico tiene el más amplio rango de aplicación y

junto con el ácido acético, da razón del 75% de uso como acidulante. El ácido cítrico es

producido por varios hongos, levaduras y bacterias por fermentación de la glucosa a través

de la glicólisis (Food Technology, 2000).

Aunque se conoce una amplia variedad de bacterias que producen ácido cítrico a partir de varios

substratos, se ha enfocado muy poca atención hacia su uso industrial. Tales bacterias incluyen

Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis, Brevibacterium sp. Y Cornyebacterium sp.

- El ácido acético es producido mediante la fermentación de varios sustratos, como solución

de almidón, soluciones de azúcar, ó productos alimenticios alcohólicos como vino o sidra,

con bacterias de Acetobacter y Gluconobacter (GENMIC, 2000).

Ejemplos de la fermentación acética:

Europa Occidental: La cidra y vinagre de manzana y el vinagre de vino, kambucha

África: vinagre de vino de palmera

Filipinas: vinagre de agua de coco

- Las bacterias ácido-lácticas constituyen un vasto conjunto de microorganismos benignos,

dotados de propiedades similares, que fabrican ácido láctico como producto final del

proceso de fermentación. Se encuentran en grandes cantidades en la naturaleza, así como

en nuestro aparato digestivo. Aunque se las conoce sobre todo por su labor de

fermentación de productos lácteos, se emplean asimismo para encurtir vegetales en el

horneado, en la panificación del vino, y para curar pescado, carne y embutidos (EUFIC,

1999).

La acción de estas bacterias desencadena un proceso microbiano por el cual la lactosa (el azúcar

de la leche) se transforma en ácido láctico. A medida que el ácido se acumula, la estructura de las

proteínas de la leche va modificándose (van cuajando), y lo mismo ocurre con la textura del

producto. Existen otras variables, como la temperatura y la composición de la leche, que influyen

en las cualidades particulares de los distintos productos resultantes (EUFIC, 1999).

El ácido láctico es también el que confiere a la leche fermentada ese sabor ligeramente acidulado.

Los elementos derivados de las bacterias ácido-lácticas producen a menudo otros sabores o

aromas característicos. El acetaldehído, por ejemplo, da al yogurt su aroma característico, mientras

que el diacetilo confiere un sabor de mantequilla a la leche fermentada. Pueden añadirse asimismo

al cultivo de microorganismos, como las levaduras, a fin de obtener sabores particulares. El alcohol

y el dióxido de carbono producidos por la levadura, por ejemplo, dan al kefir, el koumiss y el leben

(variedades de yogurt líquido) una frescura y una esponjosidad características. Entre otras técnicas

empleadas cabe mencionar las que consisten en eliminar el suero o añadir sabores, que permiten

crear una variada gama de productos (EUFIC, 1999).

En lo que concierne al yogurt, su elaboración deriva de la simbiosis entre dos bacterias, la

Streptococcus thermophilus y la Lactobacillus bulgaricus, que se caracterizan porque cada una

estimula el desarrollo de la otra. Esta interacción reduce considerablemente el tiempo de

fermentación y el producto resultante tiene peculiaridades que lo distinguen de los fermentados

mediante una sola cepa de bacteria (EUFIC, 1999).

Bacterias que produce el ácido láctico son: Leuconostoc mesenteroides, Pediococcus cerevisiae,

Estreptococo lactis y Bifidobacterium bifidus (EUFIC, 1999).

- Las bacterias propiónicas son bacterias que producen el ácido propiónico, ácido biológico

natural que es efectivo y selectivo de fa flora bífida, por eso, esta bacteria va a estimular

especialmente el incremento de las bacterias bífidas que de forma natural están en el colón

(Beerens, 1990).

El ácido propiónico es un elemento altamente beneficioso para el equilibrio intestinal, pero no

serviría de nada ingerirlo mediante el consumo de uno de los escasos vegetales que lo contienen

ya que no llegaría al colon en el estado requerido. Para que sea beneficioso para el equilibrio

intestinal, el ácido propiónico debe ser sintetizado en el mismo colon y sólo las bacterias pueden

hacerlo así (Beerens, 1990).

El ácido propiónico es el precursor biológico natural de la"flora azul" endógena de cada ser

humano. Aportar fermentos a efecto bifidógeno endógeno como las bacterias propiónicas es

ayudar a la flora a reequilibrarse saludablemente y a funcionar por si mismo (Beerens, 1990).

Propionibacterium Schermani

Las bacterias propiónicas se caracterizan por su capacidad de producir ácido propiónico, y por este

motivo son muy utilizadas en el sector quesero (Beerens, 1990).

El Propionibacterium schermani puede producir vitamina B12 y acumular prolina en el medio donde

crece. Esta subespecie se caracteriza además por la capacidad de fermentar la lactosa. Por este

motivo se recomienda su administración a los sujetos que presentan intolerancia hacia la lactosa

(Beerens, 1990).

- A Louis Pasteur (1822-1895) están asociados importantísimos descubrimientos en el

campo de la Microbiología. Pasteur demostró la naturaleza microbiana de la fermentación

alcohólica, láctica y butírica, descubriendo un nuevo tipo de respiración (anaerobia) en

algunos microbios (alimentacionynutricion.org, 2005).

Las bacterias del ácido butírico se han utilizado, durante muchos años, para la producción de los

disolventes industriales acetona y butanol. Aunque estos pueden prepararse por síntesis química,

la producción microbiana sigue siendo competitiva con los métodos químicos de síntesis

(alimentacionynutricion.org, 2005).

Las bacterias butíricas son bacterias (diacetílicas) formadoras de ácidos y aromas, de la nata, entre

las que se encuentran Lactococcus lactis subsp. lactis, Lactococcus lactis subsp. cremoris,

Lactococcus lactis subsp. diacetylactis y Lactococcus lactis subsp. cremoris bv.

Citrovorum(alimentacionynutricion.org, 2005).

2. Algunos microorganismos usan carbohidratos sin formar niveles de ácido

detectables. En tales casos, ¿cómo podría determinar si el carbohidrato ha sido

utilizado?

Al no haber ningún tipo de ácido formado se tendría que recurrir a otros tipos de pruebas, quizás

para determinar otros tipos de productos que se pudieron formar de acuerdo a los microorganismos

que se estudian o al tipo de cultivo que se utilizan, además también se podría evaluar los cambios

que sufre o las características que muestra.

3. ¿Por qué las amilasas, gelatinasas, caseinasas y lipasas son clasificadas como

enzimas hidrolíticas?

Las enzimas hidrolíticas aceleran las reacciones en las que una sustancia se rompe en

componentes más simples por reacción con moléculas de agua (Fernández, 2002).

La amilasa es principalmente un componente del jugo y de la saliva pancreáticos, necesitado para

la interrupción de los carbohidratos de larga cadena (tales como almidón) en unidades más

pequeñas. La amilasa también se sintetiza en la fruta de muchas plantas durante la maduración,

haciéndolas llegar a ser más dulces (Fernández, 2002).

La amilasa, o más propiamente dicho, las amilasas, por que existe más de una isoforma, son

enzimas hidrolasas, que catalizan la hidrólisis de ciertos polisacáridos, concretamente

aminopectina, amilosa, glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados (Fernández, 2002).

La gelatina, una proteína del colágeno animal, se incorpora a diferentes medios de cultivo para

determinar la capacidad de un microorganismo de producir enzimas proteolíticas (proteinasas),

detectables por digestión o licuefacción de la gelatina. Las enzimas capaces de producir gelatinosis

se denominan gelatinasas. La gelatina es hidrolizada por la gelatinasa en sus aminoácidos

constitutivos, con pérdida de sus características gelificantes, asimismo la caseinasa se encarga de

la hidrólisis de la caseína (Mac Faddin, 2003).

La lipasa es una enzima secretada por el páncreas para descomponer los triglicéridos en ácidos

grasos; como en el caso de amilasa, la lipasa aparece en el torrente sanguíneo cuando hay daño

de las células acinares pancreáticas, dado que solo se produce en el páncreas (Correa, 2002).

4. Las enzimas que hidrolizan la caseína y gelatina rompen el mismo enlace químico.

¿Cuál es?

Según Pareja (2009), el enlace que se rompe durante la hidrólisis es el enlace glucosídico.

5. ¿Cuál es el nombre de la amina formada por la descarboxilación de la lisina?

La amina formada es la cadaverina, la cual se origina por descarboxilación de la lisina por la lisina

descarboxilasa (Landete, 2005).

http://www.google.com.pe/search?hl=es&tbo=p&tbm=bks&q=inauthor:%22Jean+F.+Mac+Faddin%22

BIBLIOGRAFÍA

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http://andres-laboratorioclinico.blogspot.com/ . Consultado el 3 de junio del 2011.

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