LABORATORIO CENTRALMINISTERIO DE SALUD DE LA PROVINCIA DE CÓRDOBA

Prof. Dra. Analía Cudolá

HERRAMIENTAS DE TAMIZAJE DIAGNÓSTICO Y SEGUIMIENTO

“TAMIZAJE EN BANCOS DE SANGRE-EXPERIENCIA EN LA PROVINCIA DE

CÓRDOBA”

IMPACTO SANITARIO

TRANSMISIÓN DE INFECCIONES POR VÍA TRANSFUSIONAL

SEGURIDAD TRANSFUSIONAL

LOS PRODUCTOS DERIVADOS DE UNA SOLA

DONACIÓN PUEDEN AFECTAR A MÚLTIPLES

RECEPTORES.

CORRECTA INDICACIÓN DE LA TRANSFUSIÓN

CAPTACIÓN DE DONANTES VOLUNTARIOS Y

HABITUALES

TRATAMIENTO DE INACTIVACION DE PATÓGENOS

LA CORRECTA CALIFICACIÓN BIOLÓGICA DEL

DONANTE

ESTRATEGIAS PROPUESTAS

POR LA OMS

TAMIZAJE

LA ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD (OMS): “la aplicación

sistemática de una prueba para identificar a individuos con

un riesgo suficientemente alto de sufrir un determinado

problema de salud como para beneficiarse de una

investigación más profunda o una acción preventiva

directa, entre una población que no ha buscado atención

médica por síntomas relacionados con esa enfermedad”.

Epidemiología: Fundamentos, Métodos y Aplicaciones Capítulo 13:Tamizaje en las Poblaciones

ACCIÓN PREVENTIVA PARA RECEPTORES DE HEMOCOMPONENTES

ANALIZA LOS MARCADORES DE INFECCIONES

TRANSMISIBLES POR TRANSFUSIÓN, APLICADOS A UNA

MUESTRA DE SANGRE OBTENIDA DE CADA DONANTE, A

FIN DE PREVENIR SU TRANSMISIÓN

TAMIZAJE SEROLÓGICO EN

BANCO DE SANGRE

INTERRELACIÓN

ESCENARIO EPIDEMIOLOGICO

METODOLOGIA

REACTIVOS

NUEVOS MICROORGANIS

MOS

POLÍTICAS DE SALUD

COSTOS

EQUIPAMIENTO

CALIDAD

CAPACITACIÓN

PERÍODO VENTANA

CEPAS MUTANTES

PATOLOGÍA EMERGENTE

PATOLOGÍA RE-EMERGENTE

ERROR EN EL LABORATORIO

DONANTES ASINTOMÁTICOS

PORTADORES CRÓNICOS

OTRAS CAUSAS

SITUACIONES QUE FAVORECEN LAS TRANSMISIÓN DE INFECCIONES POR

TRANSFUSIONES

UNA PRUEBA DE TAMIZAJE

NO TIENE

CATEGORÍA DIAGNÓSTICO

CARACTERÍSTICAS DE LAS PRUEBAS DE

TAMIZAJE

• SENSIBILIDAD

• ESPECIFICIDAD

• VALOR PREDICTIVO

• REPRODUCIBILIDAD

• COSTO

• RAPIDEZ

• COMPLEJIDAD DE SU DESARROLLO

• CRITERIOS OPERATIVOS

•VALOR GLOBAL DE LA PRUEBA: POSIBILIDAD QUE UN INDIVIDUO

SEA CLASIFICADO CORRECTAMENTE POR LA PRUEBA.

PROCESO ANALÍTICO

PRUEBAS DE SELECCIÓN, SCREENING O TAMIZAJE

DESTINADAS A DETECTAR MARCADORES DE LAS ITT

DE INTERÉS (alta sensibilidad)

LOS HALLAZGOS REACTIVOS O POSITIVOS SE

CONSIDERAN SOSPECHOSOS Y SON CONFIRMADOS

SEGÚN CORRESPONDAN (alta especificidad)

NAT PARA VIH, VHB Y VHC (acortamiento del período de

ventana)

CHAGAS

SÍFILIS

BRUCELOSIS

VIH

VHB

VHC

HTLV I/II

OTROS …………..

INFECCIONES QUE SE INVESTIGAN:

DESCUBRIMIENTO DE NUEVOS MICROORGANISMOS

INCREMENTO DE LA SENSIBILIDAD DE LOS REACTIVOS

NUEVOS ESCENARIOS EPIDEMIOLÓGICOS

DESARROLLO DE NUEVAS METODOLOGÍA

DISEÑO DE EQUIPAMIENTO DE ALTA TECNOLOGÍA QUE GARANTIZA LA

TRAZABILIDAD DEL PROCESO

……….

ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD:

ES EL CONJUNTO DE ACCIONES NECESARIAS PARA GARANTIZAR QUE LOS PRODUCTOS Y SERVICIOS CUMPLIRÁN LOS REQUERIMIENTOS PREVIAMENTE ESTABLECIDOSORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE LA SALUD FIJA LOS ESTÁNDARES DE

TRABAJO PARA SERVICIOS DE SANGRE.. (TERCERA EDICIÓN) WASHINGTON, D.C.: OPS, 2012.

ESCENARIO DINÁMICO

1965 DESCUBRIMIENTO DEL HBsAg

1969 HBsAg CIE, PHA, EIA

1982 ALT (SGPT) Colorimétrico

1987 HBcAb EIA

1990 anti HCV 1a gen EIA

1992 anti HCV 2a gen EIA

1996 anti HCV 3a gen EIA

1999 HCV RNA PCR (NAT) 2000/1 HIV RNA PCR (NAT)

HAN PASADO 50 AÑOS….

EVOLUCIÓN EN LAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS PARA HEPATITIS VIRAL EN LOS BANCOS DE SANGRE

• DÉCADA DEL 90´: SE CONSIDERA LA UTILIZACIÓN DE NAT EN BANCOS DE SANGRE,

LUEGO QUE LA FOOD AND DRUG ADMINISTRATION (FDA) REPORTARA CASOS DE INFECCIÓN POR VHC DEBIDO AL USO DE INMUNOGLUBULINA INTRAVENOSA MANUFACTURADA SIN INACTIVACIÓN VIRAL.

UNIÓN EUROPEA: TODO PLASMA INTRODUCIDO EN EUROPA CON FINES COMERCIALES DEBÍA ESTAR ANALIZADO PARA ARN DEL VHC.

EE.UU. Y CANADÁ: DETECCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS (NAT) PARA VHC Y VIH-1 EN BANCOS DE SANGRE

• DÉCADA DEL 2000´: DIFERENTES PAÍSES INCORPORAN PAULATINAMENTE NAT PARA

HCV Y HIV EN EL TAMIZAJE DE DONACIONES.

• 2009: OMS (RECOMMENDATIONS: SCREENING DONATED BLOOD FORTRANSFUSION-TRANSMISIBLES INFECTION) SUGIERE BÚSQUEDA DE ÁCIDOS NUCLÉICOS DE VHC, VIH Y VHB (ADEMÁS DE SEROLOGÍA).

EVOLUCIÓN EN LA IMPLEMENTACIÓN DE LAS TÉCNICAS DE NAT EN LOS BANCOS DE SANGRE

http://www.cdc.gov/hepatitis/resources/mtgsconf/hcvsymposium2011-pdfs/10_busch.pdf

EVOLUCIÓN GENERAL DEL RIESGO EN LA

PROVISIÓN DE SANGRE

(Nat Med. 2000;6:1082-1086).

Bacterial Contamination of Blood Components: Risks, Strategies, and Regulation Hillyer et al.

Joint ASH and AABB Educational Session in Transfusion Medicine. Hematology 2003

Año

1/1000

1/10,000

1/100,000

1/1000,000

Rie

sgo d

e in

feccio

n p

or u

nid

ad tra

nsfu

ndid

a

1985 1990 1996 1999 2001

HCV

HBV

HIV1/180,000

1/1.600,000

1/1.900,000

1/100

Ac Anti-HIV Ac Anti-HCV NATp24

EVOLUCIÓN PARTICULAR DEL RIESGO EN LA PROVISIÓN

DE SANGRE SEGÚN EL AGENTE VIRAL

TiempoInfección

Reacción inmune

Positivo Serológico

INTRODUCCIÓN DE ENSAYOS PARA LA

DETECCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS

Período ventana: Es la etapa de la evolución de una enfermedad en la cual el individuo, recientemente infectado, no presenta en sangre los marcadores

serológicos ni virales buscados por las pruebas del tamizaje.

Organización Panamericana de la Salud Estándares de trabajo para servicios de sangre (tercera edición) Washington, D.C.: OPS, 2012.

Pruebas de Ácidos Nucleicos

(Nucleic Acid Testing, NAT)

Ventajas de NAT

ALTAMENTE SENSIBLES Y ESPECÍFICAS

(Detección directa del virus mediante el hallazgo de ácido nucleico viral).

REDUCEN EL INTERVALO DESDE LA INFECCIÓN HASTA LA DETECCIÓN.

PROPORCIONAN SEGURIDAD AL SUMINISTRO DE SANGRE.

PERIODO DE VENTANA EN LA INFECCION POR HIVEVOLUCIÓN DE LOS TESTS ELISA

Período Ventana

Variantes Virales

Seroconversión Atípica

Errores de Laboratorio

VHC 72.1- 87.9%<1.1-

<0,9%0 - 21,9% 0 - 21,9%

VHB 41.2- 98% 0% 0,6 - 1,5% 0,6 - 4,5%

RIESGO ESTIMADO DE INFECCIÓN VIRAL EN 107 DONACIONESESTUDIADAS

SEGURIDAD TRANSFUSIONAL

AHHI – Comité de ITT – DOC. DE CONSENSO 002-2012

EXPERIENCIA EN LA PCIA DE CORDOBA

LABORATORIO SEROLOGIA

PRETRANSFISIONAL

LABORATORIO DE DIAGNÓSTICO

RESULTADO DEFINIDO

SI BIEN LA LEY NO OBLIGA A DEFINIR UN RESULTADO, ESTO

PERMITE CALIFICAR CORRECTAMENTE AL DONANTE.

ETAPAS:

•CENTRALIZACIÓN

•AUTOMATIZACIÓN

• INFORMATIZACIÓN

•IMPLEMENTACIÓN DE NAT

PROVINCIA DE CÓRDOBA

ÁreaInterior

Deán Funes

Cruz del Eje

Domingo Funes

Alta Gracia

Villa Dolores

Sta. Rosa Cal.

Río Cuarto

Jesús María

San Francisco

Sta. Rosa R. 1º

Villa María

Río Tercero

Bell Ville

Marcos Juárez

Co. de Bustos

Laboulaye

V. del Rosario

La Carlota

Oprima Espacio

AUTOMATIZACIÓN

Inmunoensayo Magnético Quimioluminiscente (CMIA) EQUIPAMIENTO ARCHITECT DE EMPRESA ABBOTT

Trazabilidad Descendente

Trazabilidad Ascendente

CODIGO DE BARRAS E INFORMATIZACIÓN DE

LOS RESULTADOS

Ficha deDonación

27849 02

Hemodonación

27849 02

Ficha deReceptor

27849 02

Transfusión

27849 02 27849 02

Preparación del

Producto

Sanguíneo

27849 02

Ficha deReceptor

27849 02

Transfusión

27849 02

Ficha deReceptor

27849 02

Transfusión

LABORATORIO DE NAT DEL LABORATORIO CENTRALEQUIPAMIENTO DE EMPRESA ROCHE

Hamilton Microlab STAR

COBAS AmpliPrep

COBAS TaqMan

NAT EN CORDOBASUBSECTOR PRIVADO COMIENZA EN 2006

SUBSECTOR PÚBLICO EN 2009

MARCADORES DE VHC DURANTE LA INFECCION TEMPRANA

HCV RNA

Anti-HCV EIAs

1st gen 150 d

2nd gen 80 d

3rd gen 70 d

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

viremia ~ 55 días

- HCV Ag EIA

- HCV MP-NAT

- HCV ID-NAT

ALT

Busch et al.

HEPATITIS C

Screening Test

Kit NameManufacturer Assay Format

Signal-to-cut–off ratio predictive of a true positive ≥

95% of the time

Ortho HCV Version 3.0 ELISA Test

SystemOrtho

EIA

(Enzyme Immunoassay)≥ 3.8

Abbott HCV EIA 2.0 AbbottEIA

(Enzyme Immunoassay)≥ 3.8

VITROS Anti-HCV OrthoCIA

(Chemiluminescennt Immunoassay)≥ 8.0

AxSYM Anti-HCV AbbottMEIA

(Microparticle Immunoassay)≥ 10.0

Architect Anti-HCV Abbott

CMIA

(Chemiluminescent Microparticle

Immunoassay)

≥ 5.0

Advia Centaur HCV BayerCIA

(Chemiluminescennt Immunoassay)≥ 11.0

Signal-to-Cut–Off Ratios for Commercially Available Assays

EXPERIENCIA PROPIA

TÉCNICAS + SENSIBLES PERO – ESPECÍFICAS

(detección de Ac anti- VHC)

Los resultados reactivos por CMIA (Rp 1-5) se definían

como negativos

CDC reporta un algorritmo definiendo un Rp para las

principales metodologías del mercado.

Quimioluminiscencia: Rp > 5 para considerarlo positivo

MUESTRAS ESTUDIADAS

REACTIVAS(RP entre 1 y 5)X Architect

DEFINIDAS NO REACTIVAS

DEFINIDAS REACTIVAS

43.583 198 (0.45%) 183 (92.42%) 15 (7.58%)

ALGORITMO PROPUESTO PARA EL TAMIZAJE SEROLÓGICO DEL VIRUS

DE LA HEPATITIS C EN EL ÁREA DE SEROLOGÍA PRETRANSFUSIONAL

DEL LABORATORIO CENTRAL DE LA PROVINCIA DE CÓRDOBA

Almada M S (1), Sicilia Don P(1), Canna F(1), Moreno C(1), Reynoso M(1), Bracamonte A (1), Cudolá A(1), De León JF (2)(1)Laboratorio Central de la Provincia de Córdoba – Ministerio de Salud

CONCLUSIÓN

la combinación de técnicas de tamizaje (Architect anti-HCV Abbott y Murex HCV 4.0) sumado a la detección de VHC por NAT, se comprueba que, el 0,42% de los resultados reactivos RP<5 obtenidos por Architect, corresponden a falsos reactivos. Se demuestra el beneficio de incluir, en nuestro algoritmo la metodología de Murex en placa, como técnica complementaria. Esto permite definir el verdadero estado serológico del donante y evitar el rechazo del mismo en el futuro.

La totalidad de las muestras fueron negativas por NAT.

IMPORTANCIA DE CONOCER LOS GENOTIPOS DE VHC EN LA PCIA DE CORDOBA

Febrero 2010 a agosto 2015:

1342 pacientes

Biología Molecular POSITIVO HCV:

849 pacientes (64%)

PRINCIPAL GENOTIPO 1

DETECTABLE NO DETECTABLE 1 1a 1b 2 2a o 2c 2b 3 3a 4 4a/4c/4d NoConc.

CORDOBA (Dx) 318 305 11 88 82 24 49 2 3 50 0 4 5

CORDOBA (Dx) % 3,459119497 27,67295597 25,78616352 7,547169811 15,40880503 0,628930818 0,943396226 15,72327044 0 1,257861635 1,572327044

CORDOBA (Donantes) 50 0 0 9 10 6 21 0 0 2 0 1 1

CORDOBA (Donantes) % 0 18 20 12 42 0 0 4 0 2 2

ProcedenciaCV GENOTIPO

PRINCIPAL GENOTIPO 1 GENOTIPO PRINCIPAL: 2

57% 55,7%

Actualización de las Recomendaciones para el Tratamiento de la Hepatitis Crónica por VIRUS C AAEEH-guias_trat_hepatitis_cronica_VIRUS_C_2015

Actualización de las Recomendaciones para el Tratamiento de la Hepatitis Crónica por VIRUS C AAEEH-guias_trat_hepatitis_cronica_VIRUS_C_2015

VIRUS HEPATITIS B

VIRUS HEPATITIS B

Patrón Serológico de la Infección Aguda

Síntomas

HBeAg anti-HBe

IgM anti-HBc anti-HBsHBsAg

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100

Títu

lo

Semanas Post-exposición

anti-HBc Total

VIRUS HEPATITIS BPatrón Serológico de la Progresión a la Infección Crónica

HBeAg anti-HBe

anti-HBc Total

IgM anti-HBc

HBsAg

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 Años

Tít

ulo

Semanas Post-exposición

Aguda(6 meses)

Crónica(años)

Período ventana para HBV

31

56

78

82

51

26

4

NAT-HBV

HBsAg

ALT

Anti-HBc

0 20 40 60 80 100

Ventana (días) Acortamiento

Período de ventana :Utilización de NAT y pruebas de Antígeno HBsAg de alta sensibilidad

Infecciones silentes :Hepatitis B crónica asintomática

Infecciones por mutantes o variantes:Kits con diseños específicos para la detección de mutantes y

pruebas adicionales como la determinación de HBc

Errores técnicos:Introducción de automatización y QC

RIESGO DE TRANSMISION DE VHB POR TRANSFUSION

8.133 estudiadas para Anti- HBc: Reactivas 98 muestras

(1.16%)

Todas Ag HBs negativas y NAT negativas

A las 98 muestras se les realizó Anti-HBs : 44 negativas

(44.89%)

EXPERIENCIA PROPIAMARCADORES SUBROGANTES UTILIZADOS COMO

INDICADOR DE OTRA INFECCIÓN, QUE LUEGO DE DEFINEN COMO NO INFECTADOS

PREVALENCIAS DE VHC Y VHB

SUBSECTOR PÚBLICO Y PRIVADODe la Provincia de Córdoba

PREVALENCIAS

FUNDACIÓN BANCO CENTRAL DE SANGRE

DE NOVIEMBRE 2006 A JUNIO DE 2016

Nº DE DONANTES

Nº DE MARCADORES POSITIVOS

PREVALENCIA

HIV 182.128 146 0,08%

HCV 182.128 143 0,08%

HVB 139.268 67 0,04%

3 (TRES) PERÍODOS VENTANA DE VHB

LABORATORIO VILLABEL DE CÓRDOBADE DICIEMBRE DE 2009 A JULIO 2015

DETECCIÓN DE

Nº de donantes Nº de marcadores positivos

prevalencia

HIV 104.697 39 0,03%

HCV 104.697 39 0,03%

HVB 104.697 78 0,07%

PROCESADAS 104.697

DISCRIMINADAS POR MARCADOR 38.248 DONANTES

NINGÚN PERIODO VENTANA

LABORATORIO CENTRAL DE CÓRDOBADE MAYO 2009 A JUNIO 2016.

Nº DE DONANTES

Nº DE MARCADORES POSITIVOS

PREVALENCIA

HIV 138.079 172 0,12%

HCV 138.079 122 0,08%

HVB 138.079 94 0,06%

CONFIRMA DOS CASOS DE VHB CON SEROLOGÍA EN VALORES

LÍMITES.

2 (DOS) PERÍODOS DE VENTANA

1 DE VIH Y 1 DE VHC

SEROPREVALENCIA DE MARCADORES DE INFECCIONES DE TRANSMISIÓN SEXUAL TRANSMISIBLES POR TRANSFUSIÓN, EN DONANTES DE SANGRE DE LA PROVINCIA DE CÓRDOBA

Muestra: 74.865 donantes.( 1de enero de 2010 hasta el 31 de diciembre de

2013). Se analizaron AgHBs, anti-VHC y Ag/Ac VIH y sífilis mediante detección de anticuerpos no treponémicos (técnica de VDRL)

Resultados: el 1.46% presentó al menos una prueba de tamizaje reactiva de las analizadasPrevalencias:SIFILIS (1,1%)Ag/Ac VIH (0,16%)Anti-VHC (0,11%) AgHBs (0,08%).

Conclusión:la Provincia de Córdoba tiene menor frecuencia de donantes reactivos para los marcadores de Ag/Ac VIH, AgHBs y Anti-VHC que los publicados por otros autores en Argentina. Caso contrario para Sífilis, donde el estudio arrojó una prevalencia superior a las del país.

20 abr. 2015 -

Subsector Público

Subsector Privado

Total donantes

procesados 138.079 286.825

Período ventana

HIV1 0

Período ventana

VHC1 0

Período ventana

VHB0 3

RESULTADOS TOTALES DE LA PROVINCIA DE CÓRDOBA

CONFIRMA DOS CASOS DE VHB CON SEROLOGÍA EN VALORES LÍMITES.

RESULTADOS FINALES

MUESTRAS PROCESADAS:424.904

PERÍODOS DE VENTANA DETECTADOS 5:

1 VIH

3 VHB

1 VHC

CONFIRMA DOS CASOS DE VHB CON SEROLOGÍA

EN VALORES LÍMITES.

“IMPACTO SANITARIO DEL CORRECTO TAMIZAJE EN BANCO DE SANGRE “

REFLEXION:

MUCHAS GRACIAS

DECLARO NO TENER CONFLICTO DE INTERESES

Prof. Dra. Analía Cudolá

LABORATORIO CENTRALMINISTERIO DE SALUD DE LA PROVINCIA DE CÓRDOBA