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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICASCAMPUS IV EXTENSIÓN
OCOZOCOAUTLA
BIOLOGIA CELULAR
CATEDRATICO
DR. ANA OLIVIA CAÑAS URBINA
INTEGRANTES
ARÉVALO PÉREZ ALEXANDRA YURIKO
GÓMEZ DEL CARPIO GUADALUPE E.
MANGA CIGARROA JOSARY YAEL
MASTER: NUÑEZ GOMEZ JESUS WILFREDO. Visto bueno
PRACTICA 3:MICROSCOPIO
OCOZOCOAUTLA DE ESPINOZA A 5 DE MAYO DEL 2017
1
ÍNDICE
RESUMEN...............................................................................................................2
MARCO TEÓRICO...................................................................................................3
MICROSCOPIO.......................................................................................................3
PARTES DE UN MICROSCOPIO............................................................................4
TIPOS DE MICROSCOPIO......................................................................................4
CABELLO.................................................................................................................8
OBJETIVO................................................................................................................9
MATERIALES...........................................................................................................9
METODOLOGÍA.......................................................................................................9
RESULTADOS.......................................................................................................10
DISCUSION DE RESULTADOS............................................................................12
CONCLUSION.......................................................................................................13
REFERENCIAS......................................................................................................13
CUESTIONARIO....................................................................................................13
2
RESUMEN
El microscopio es un instrumento de suma importancia debido a que es utilizado
por la ciencia para hacer grandes descubrimientos.
Gracias al uso del microscopio se pudo descubrir la célula, con Robert Hooke.
En la actualidad ya existen varios tipos de microscopio como es el óptico, de
fluorescencia, eléctrico de transmisión y el microscopio eléctrico de barrido.
Con el microscopio óptico se puede observar materia viva, este tipo de
microscopio cuenta con oculares, brazo, revolver, platina, diafragma, lámpara,
tornillo micrométrico y macro métrico, condensador, lámpara y los objetivos que
son cuatro, de: 4x, 10x, 40x y de 100x.
La resolución es lo que ayuda a que se pueda ver en los microscopios, esta
depende de la amplitud del cono objetivo y del condensador. Se puede medir
mediante una fórmula que es la siguiente:
Resolucion= 0.61λnsenΘ
Donde λ es la longitud de onda.
Conocer cada parte del microscopio y todo conocimiento visto acerca de este, es
importante al realizar esta práctica, para tener una mejor visión de las muestras de
cabello, ya que, al observar una muestra de cana con cada objetivo, se observó la
diferencia y el alcance y resolución que tiene cada uno de ellos, debido a que con
el objetivo 4x no se logran ver las fibras que se observaron con el objetivo 40x.
3
MARCO TEÓRICO
MICROSCOPIO
Tortora, Funke, & Case 2007 dice que el microscopio es un instrumento
óptico que amplifica la imagen de un objeto pequeño. Es un instrumento
que más se utiliza en laboratorio y que estudian a los microorganismos,
mediante un sistema de lentes y fuentes de iluminación se puede hacer
visible un objeto microscópico. Los microscopios pueden aumentar de 100 a
cientos de miles de veces el tamaño original.
“El invento del microscopio se atribuye a Zacharias Janssen, un fabricante
holandés que posiblemente con la colaboración de su hermano y de su padre,
desarrollo el microscopio en 1608” (Tortora, Funke, & Case, 2007).
PARTES DE UN MICROSCOPIO
4
Imagen 1 partes del microscopio. (Tortora, Funke, & Case, 2007)
TIPOS DE MICROSCOPIO
Los microscopios a través de los años han sido mejorados para que se
puedan observar objetos de tamaños más diminutos de una manera más
nítida. Es por ello que en la actualidad existen diferentes tipos de
microscopios, mismos que poseen diferentes formas de dar aumento a las
imágenes, pero todos coinciden en el mismo fin, que es aumentar las
imágenes de diferentes cosas que a simple vista no es posible observar.
Fundamentalmente existen dos tipos de microscopio: el simple y el
compuesto (Tortora, Funke, & Case, 2007)
“Un microscopio simple está formado por una lente, es decir
una lupa” (Tortora, Funke, & Case, 2007) (Imagen 2).
Un microscopio compuesto es evolución del anterior, este
posee múltiples lentes que se
encuentran graduadas y colocadas de
tal manera que el aumento de tamaño
al ver los objetos puede superar las dos
mil veces el tamaño real del objeto
(Tortora, Funke, & Case, 2007) (Imagen 3).
Tortora, Funke, & Case (2007) dice que el Microscopio Óptico Compuesto
(MO) es el más común utilizado en microbiología. El aumento total de un
objeto se calcula mediante la multiplicación del aumento de la lente objetivo
por el aumento de la lente ocular. El microscopio óptico compuesto es el
Imagen 2. Microscopio simple.
Imagen 3. Microscopio compuesto.
5
que utiliza la luz visible. Su resolución máxima o poder de resolución, es la
capacidad de medir dos puntos de un microscopio óptico compuesto es de
0,2 um; el aumento máximo es de 2000 x. Para este microscopio las
muestras se tiñen para aumentar la diferencia entre los índices de
refracción de la muestra y del medio. El aceite de inmersión se utiliza con
las lentes de inmersión en aceite para reducir la perdida de luz entre el
portaobjeto y la lente. La iluminación con campo claro se utiliza para los
extendidos teñidos. Las células no teñidas se observan mejor mediante la
microscopia de campo oscuro, contraste de fase.
Microscopio de Campo Oscuro (MCO) muestra
una silueta luminosa de un organismo contra un
fondo oscuro. Es más útil para detectar la
presencia de organismos extremadamente
pequeños. Utiliza un condensador especial con
un disco opaco que bloquea la luz que llega
directamente al objetivo; solo ingresa en el
objetivo la luz reflejada por la muestra y la muestra contra un fondo negro
(Tortora, Funke, & Case, 2007). (Imagen 4)
Microscopio de Contraste de Fase (MCF) une los
rayos directos y los rayos reflejados o
difractados de luz (en fase) para formar una
imagen de la muestra en el ocular. Permite la
observación detallada de los organismos vivos.
No requiere de tinción. El diafragma permite que
la luz directa del condensador pase, se enfoque la luz sobre la muestra y en
una placa de difracción en la lente objetivo (Tortora, Funke, & Case, 2007).
(Imagen 5)
Microscopio de Contraste por Interferencia
Diferencial (MCID) proporciona una imagen
tridimensional coloreada del objeto que se va a
Imagen 4. Ilustración de una muestra a través del MCO.
Imagen 5. Ilustración de una muestra a través del MCF.
Imagen 6. Ilustración de una muestra a través del MCID.
6
observar, permite observaciones detalladas de las células vivas. Utiliza dos
fases de luz separados por prismas; la muestra aparece coloreado como
resultado del efecto prisma. No requiere tinción (Tortora, Funke, & Case,
2007). (Imagen 6)
Tortora, Funke, & Case (2007) dice que el
Microscopio de Florescencia (MF), las muestras
se tienen que teñir primero con fluorocromos y
luego se visualizan a través de un microscopio
compuesto mediante el empleo de una fuente de
luz ultravioleta. Los microorganismos aparecen
como objetos brillantes con un fondo oscuro
(teñidos de verde). La microscopia fluorescente
se utiliza sobre todo en un procedimiento diagnostico denominado técnica
con anticuerpo fluorescentes o inmunoflorescencia. (Imagen 7)
Microscopio Confocal (MC) utiliza luz por láser
para iluminar. En la microscopia la muestra se
tiñe con un colorante fluorescente y se ilumina
un plano por vez. Se utiliza unos ordenados
para procesar las imágenes; pueden obtenerse
imágenes bidimensionales y tridimensionales de
las células (Tortora, Funke, & Case, 2007). (Imagen 8)
Microscopio Acústico de Barrido (MAB) se basa
en la interpretación de ondas sonoras que
atraviesan una muestra. Se utiliza para estudias
células vivas adheridas a las superficies como
células cancerosas, placas arteriales y películas
biológicas (Tortora, Funke, & Case, 2007).
(imagen 9)
Microscopio Electrónico (ME) se utiliza un haz
de electrones en lugar de luz, los electrones
Imagen 7. Ilustración de una muestra a través del MF.
Imagen 8. Ilustración de una muestra a través del MC.
Imagen 9. Ilustración de una muestra a través del MAB
7
atraviesan la muestra. Para el control del foco, la iluminación y el aumento
se utilizan lentes electromagnéticos en lugar de lentes de vidrio. Los cortes
delgados de los organismos pueden observarse en una microfotografía
electrónica producida como un microscopio electrectonico de transmisión
(MET) que aumenta 10000-100 x el poder de resolución 2.5 um (Tortora,
Funke, & Case, 2007). (Imagen 10)
Microscopio Electrónico de Barrido (MEB) utiliza
un haz de electrones en lugar de luz; los
electrones se reflejan desde la muestra; dada la
longitud de onda más pequeña de los
electrones, pueden resolverse estructuras
menos de 0,2 um. La imagen producida es
tridimensional (Tortora, Funke, & Case, 2007). (Imagen 11)
Microscopio de Sonda de Barrido por Efecto
Túnel (MBT) utiliza una sonda delgada de
metal que recorre una muestra y produce una
imagen que revela las protuberancias y las
depresiones de los átomos sobre la superficie
de la muestra. El poder de resolución es mucho
mayor que el de un microscopio electrónico. No
se aprecia una preparación especial. Producen
imágenes tridimensionales de la superficie de una molécula (Tortora,
Funke, & Case, 2007) (Imagen 12).
Tortora, Funke, & Case (2007) dice que el
Microscopio de Fuerza Atómica (MFA) utiliza
una sonda de metal y diamante que se aplica
con una fuerza suave a lo largo de la superficie
Imagen 11. Ilustración de una muestra a través del MEB
Imagen 12. Ilustración de una muestra a través del MBT
Imagen 13. Ilustración de una muestra a través del MBT
8
de una muestra. Produce una imagen tridimensional. No se precisa una
preparación especial (Imagen 13).
CABELLO
El cabello o pelo, es una continuación de la piel cornificada, formada por
una fibra de queratina y constituida por una raíz y un tallo. Se forma en un
folículo de la dermis, y constituye el rasgo característico de la piel delgada o
fina. La diferencia entre la queratina de la capa córnea y la queratina del
pelo es que en el pelo las células quedan unidas siempre unas con otras,
dando lugar a una queratina más dura (Wikipedia, 2017). Cada uno de los
pelos consiste en una raíz ubicada en un folículo piloso y en un tallo que se
proyecta hacia arriba por encima de la superficie de la epidermis. La raíz se
agranda en su base.
“La zona papilar o papila dérmica está compuesta de tejido conjuntivo y vasos
sanguíneos, que proporcionan al pelo las sustancias necesarias para su
crecimiento” (Wikipedia, 2017).
OBJETIVO
El alumno aprenderá el manejo del microscopio, conocerá como está constituido y
su importancia.
MATERIALES
Microscopio
Portaobjeto
Cubre objeto.
9
METODOLOGÍA
Para la realización de la práctica de microscopio, se utilizara de muestra el
cabello de cada integrante del equipo.
Cada cabello se colocara en el porta objeto.
Se colocara las muestras en la platina del microscopio y con ayuda de los
tornillos macro y micrométricos, se subirá y enfocara cada muestra.
Las muestras se observaran con los objetivos 4x, 10x y 40x.
Anotar las observaciones.
Por último apagar el microscopio utilizado y proceder a limpiar el área de
trabajo.
RESULTADOSComo resultados de la práctica del microscopio, se pudo conocer las partes que lo
constituyen y observar la raíz capilar del cabello con los objetivos de 4x, 10x y 40x,
al mirar en el ocular se obtuvo los grados de cada integrante y en la platina se
encontró las coordenadas en donde se localizó la muestra deseada.
Partes del microscopio (imagen 14):
Ocular: es la lente que se ubica en la parte
superior, con los oculares se pudo
observar muestras de manera en que los
grados obtenidos nos diera una sola
imagen.
Revólver: este permite cambiar de un
objetivo a otro.
Platina: es el lugar donde se coloca la
preparación que se va observar.
10
Objetivo: son las lentes principales que amplía la imagen de la muestra,
determinando la cantidad de aumento con la deseamos observar.
Tornillo macrométrico y micro: que sirve para acercar la platina a los objetivos y
que aproxima al enfoque y con el micro se logró realizar el enfoque hacia la
muestra.
Durante la práctica se obtuvo diferentes coordenadas y grados (tabla 1) que se
pasó a observar en los oculares y con las muestra puesta en la platina se obtuvo
coordenadas, lo cual dio los siguientes resultados:
Los resultados de la visualización de los objetivos de 4X, 10X, 40X (tabla 2).
Imagen 15. Raíz del cabello
Con el objetivo de 4x se distinguió la
raíz del cabello de un tamaño muy
pequeño, se observa como una bolita
negra. (imagen 15)
Con el objetivo de 10x se distinguió la
raíz del cabello de un tamaño un poco
Imagen 14. Microscopio Óptico Primo Star, foto tomada con el celular Huawei
de 13 megapíxeles por Josary Yael Manga Cigarroa.
Tabla 1. Coordenadas y grados obtenidos por cada alumna.
Alumnos (a) coordenadas grado
1 (28,15) 600, 600
2 (12,24) 660,660
3 (37,16) 660,660
11
Imagen 16. Raíz del cabello
grande donde se ve la bolita negra con
mas forma. (imagen 16)
Imagen 17. Raíz del cabello.
Con el objetivo de 40x se distinguió la
raíz del cabello de un tamaño grande
donde el puntito negro es algo
asombroso tiene la forma de una pepa.
(imagen 17)
Imagen 18. Raíz del cabello (cana)
Se visualizó con el objetivo 40x la raíz
del cabello de una cana, lo cual se
parece a una gota blanca. (imagen 18)
Tabla 2. Imágenes tomadas con el celular Huawei de 13 megapíxeles por Josary Yael Manga Cigarroa.
DISCUSION DE RESULTADOS
Tortora, Funke, & Case 2007 dice que “el microscopio es un instrumento óptico
que amplifica la imagen de un objeto pequeño”.
El microscopio es de mucha utilidad en los laboratorios, ya que nos ayuda a ver
microorganismos más pequeños que a la vista no se logra ver ni distinguir y
gracias al microscopio podemos observar cómo están conformados y las
estructuras que estos tienen. En esta práctica se aprendió a manejar de forma
12
correcta el microscopio y cada una de sus partes. Se observó cada una de las
muestras de cabello. Colocando las muestras de cabello en un porta objeto, para
colorarlas en la platina y observarlas con los diferentes objetivos (4x, 10x y 40x).
Las muestras de cabello eran gruesos, negros y alargados, las raíces más
gruesas y gordita mientras se aumentaba de objetivo; se ven las fibras y mucho
más grande que con el ojo no se puede visualizar, se observó una muestra de
cana la cual era alargada y blanca, al ver por el objetivo 40x se vio la raíz gruesa
como una gota muy blanca, como algodón.
CONCLUSION
Es importante saber el manejo y la función de cada una de las partes que
componen al microscopio, debido a que para nosotros como Químicos fármaco
biólogos es una herramienta clave y de su suma importancia en nuestro campo de
trabajo y de investigación; se logró observar con los diferentes objetivos, y se
aprendió el manejo del microscopio, y ver la diferencia que existe al observar con
cada uno de los objetivos.
REFERENCIAS
Alberts, B., Bray, D., Hopkin, K., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., . . . Walter, P. (2004). Introduccion a las celulas. En B. Alberts, Introduccion a la biologia celular (págs. 8-10). España: Editorial medica panamericana.
Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Bases de la microbiologia. En G. J. Tortora, Introduccion a la microbiologia (págs. 56-71). España: Editorial medica panamericana.
Wikipedia. (11 de Marzo de 2017). Pelo. Obtenido de https://es.wikipedia.org/wiki/Pelo
CUESTIONARIO
1. Defina longitud de onda, espectro visible, resolución y apertura numérica
R. Longitud de onda: es la distancia que hay entre dos crestas.
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Espectro visible: es la luz que alcanza a percibir el ojo humano.
Resolución: el alcance que tiene el ojo humano o ya sea un microscopio u otro aparato que se use para observar o percibir cosas.
Apertura numérica: magnitud del ángulo en donde llega de enfoque de luz.
2. ¿Cuál es la importancia del uso del condensador?
R. Nos ayuda a tener una mejor resolución de la muestra.
3. ¿Qué diferencia hay entre el ojo humano, microscopio óptico y microscopio electrónico?
R. Alberts et al, 2004, dice que el ojo humano tiene una resolución de aproximadamente 200 µm, el microscopio óptico tiene una mínima resolución de 200 nm y el microscopio electrónico tiene un resolución mínima de 0,2 nm
4. ¿Para qué se emplea el microscopio de campo oscuro, el microscopio de contraste de fases y el microscopio de fluorescencia? ¿Qué es microscopia led?
R. El microscopio de campo oscuro, se utiliza para examinar microorganismos vivos que no se pueden observar en un microscopio común, debido a que no pueden teñirse con los métodos estándares (Tortora, Funke, & Case, 2007).
Microscopio de contraste de fase, permite observar con as detalle las estructuras internas de los microorganismos vivos.
Microscopio de fluorescencia, se utiliza cuando las células son teñidas con colorantes fluorescentes específicos, estos microscopios tienen esa capacidad de poder observar esas células, como el del DNA (Alberts, et al, 2004)
Microoscopia led, es un nuevo sistema de iluminacion para los microscopios y asi tener una mejor resolucion de las muestras.
5. Explique qué son tinciones simples y qué son tinciones diferenciales y dé 2 ejemplos de cada una de ellas.
R. Las tinciones simples son aquellas que solo tienen un solo componente, como el azul de metileno o safranina.
Las tinciones diferenciales, son las que tienen más un componente o donde se usan varias, como en al tinción de Gram y tinción de Wright.
6. ¿Por qué existen objetivos con diferentes aumentos? ¿Le sirvieron en la presente práctica? Explique sus respuestas ¿Qué dificultades se presentarían si se iniciara un enfoque de muestra con la lente de mayor aumento? ¿Por qué debe emplearse aceite de inmersión con el objetivo de 100X?
14
R. Existen varios objetivos con diferente aumento, para que tenga diferentes perspectivas de la muestra. Cada objetivo nos fue útil esta práctica, para observar con diferente resolución la muestra, en este caso fue un cabello.
No se va poder observar bien debido a que para el objetivo de 100x es necesario usar aceite de inmersión, este se usa para que los fotones no se escapen por completo y la luz sea dirigida hacia la muestra y tener una mejor resolución.
