Blastomicosis

Mal pronsticoNo son contagiosasEndmicasDistribucin geogrfica limitadaLimitan distribucin: Clima, suelo, pluvimetra, temperatura,etc.Micosis Sistmicas

Hongos productores de micosis sistmicasDimorfismo trmico o nutricional Histoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasiliensis, Blastomyces dermatitides dimorfismo trmicoCoccidioides immitis en tioglicolato con CO2 al 30%: Esfrulas.Viven como saprobios en suelo - forma saproftica 22- 28C Estado filamentoso o miceliarEn tejidos: forma parasitaria (patgena),37 - Estado levaduriforme o esfrula.Algunos animales silvestres: reservorio

Inhalacin

Va de infeccin

DiagnsticoMUESTRASEscarificacin de lesiones cutneas y mucosasEsputoLBAHemocultivosMOBiopsias y muestras quirrgicasLCRORINALquidos. peritoneal, asctico, articular, pleural, pericrdicoPuncin aspiracin de ganglios y ndulos subcutnos

TODAS LAS MUESTRAS

Examen directo

FRESCOCOLORACIONESGiemsaGroccotPassZ-N (TBC)Kinyoun (Nocardia)Gram Weigert (P. jirovecii)Azul de toluidina (P. jirovecii)

CultivoAgar sabouraudAgar infusin cerebro coraznCicloheximidaInhibeCriptococcusAspergillusPenicillium

Siempre con antibiticosMedios diferenciales:Nocardia: Tayer Martin,Sabouraud sin ATBAgar glicerinado s\ATBLowestein jensen (micobacterias)

micosis sistmicasDeteccin de infeccin: Intradermoreaccin (P. cutnea)Estudios de reas de endemia (Valor epidemiolgico)

Deteccin de enfermedad: Deteccin de AC SerologaDiagnstico y seguimiento de la enfermedad

PARACOCCIDIOIDOMICOSIS

Paracoccidioidomicosis es una enfermedad granulomatosa crnica que caractersticamente produce una infeccin pulmonar primaria, a menudo no aparente, y luego difunde para formar ulcerosa granulomatosa de la mucosa bucal, nasal y, ocasionalmente, la gastrointestinal. La enfermedad en su creacin y desarrollo es similar a la blastomicosis y coccidioidomicosis. El nico agente etiolgico, Paracoccidioides brasiliensis est geogrficamente restringida a reas de Amrica del Sur y Central.Paracoccidioidomicoses

10Text slide. ParacoccidioidomicosisLa Paracoccidioidomicosis es una enfermedad granulomatosa cronica caracterizada por producir una infeccion pulmonar primaria, inaparente, y luego se disemina formando granuloma ulcerada de la mucosa, bucal, nasal y ocasionalmente grastrointestinal. La enfermedad es similar a y infeccion y desarrollo de blastomicosis y coccidioidomicosis. El unico agente etiologico es Paracoccidioides brasiliensis esta geograficamente restringido a la s areas de sur y cetroamerica

PARACOCCIDIOIDOMICOSIS

SINONIMIABlastomicosis sudamericana, granuloma paracoccidioidal, enfermedad de Lutz-Splendore-Almeida.

DEFINICINEnfermedad sistmica granulomatosa y supurativa crnica de la piel, mucosas, ganglios linfticos y otros rganos, causada por el hongo dimorfo Paracoccidioides brasiliensis.

ECOLOGA Y DISTRIBUCIN GEOGRFICA

Paracoccidioides brasiliensis fue aislado a partir del suelo, ms frecuentemente de Brasil. Su hbitat natural no es completamente conocido. En pocas oportunidades se aisl de suelo de reas rurales con pH cido, rico en materia orgnica, dedicado al cultivo de caf, algodn o caa de azcar, prximo a grandes ros de zonas subtropicales y hmedas con temperatura media de 18-23 C, precipitacin pluvial anual de 800-2000 mm y una altitud menor a 1800 metros sobre el nivel del mar.

No se detectaron infecciones espontneas en animales silvestres ni domsticos. Esta enfermedad es endmica en reas rurales y subtropicales de Amrica del Sur, donde se notificaron casos en todos los pases exceptuando Chile y las Guayanas, y predominando en Brasil.En Ecuador el rea endmica comprende las provincias de Los Rios, Esmeraldas.

ECOLOGA Y DISTRIBUCIN GEOGRFICA

La infeccin pulmonar primariaEs generalmente subclnica y puede simular una neumonitis inespecfica a partir de la cual frecuentemente se produce una diseminacin hematgena o linftica precoz, en especial hacia las membranas mucosas y mucocutneas, con poca evidencia de compromiso pulmonar.

Luego de 3 a 4 semanas del contacto infectante la inmunidad mediada por clulas sensibilizadas (inmunidad especfica) hace que se produzcan reacciones granulomatosas, necrosis y destruccin del microorganismo lo que en general lleva a la involucin de la infeccin; en otras oportunidades la infeccin no puede ser frenada y contina activa, o se reactiva despus de meses o aos de latencia en el pulmn u otro rgano. El perodo de incubacin puede variar desde 2 semanas a 35 aos

forma tipo infantojuvenilLa diseminacin de la enfermedad puede originar dos tipos clnicos: la forma tipo infantojuvenil, poco frecuente, se presenta en nios, adolescentes o adultos con mal estado inmunolgico, con tratamientos antituberculosos o con yoduros. Se caracteriza por fiebre, astenia, adinamia, prdida de peso, anemia, hepatoesplenomegalia y adenopatas mltiples. Luego de algunas semanas aparecen abscesos subcutneos fros, lesiones seas en las metfisis de los huesos largos o costillas, las adenopatas se reblandecen, se adhieren a la piel, se fistulizan y supuran.

Slo los adultos presentan compromiso pulmonar con tos, expectoracin purulenta o hemoptica y disnea.En la piel aparecen lesiones mltiples, erupciones papulosas o ppulopustulosas, pero las mucosas pocas veces se ven afectadas

forma tipo adulto puede ser uni o multifocalEsta ltima es la ms frecuente, se presenta en adultos y se caracteriza por lesiones mucocutneas, ganglionares o pulmonares. Con menos frecuencia disemina a bazo, intestino e hgado y raramente a otros rganos. La mucosa bucal es generalmente afectada y muestra ulceraciones de fondo granulomatoso, con puntillado hemorrgico que asienta sobre una base rojo-violcea. Los labios presentan una inflamacin difusa, fra, de consistencia dura y dolorosa a la presin que se conoce como induracin.

Se puede observar adems paradentosis, lceras en amgdalas, necrosis de epiglotis y granulomas o lceras de laringe lo que provoca disfona, disfagia y disnea de tipo obstructivo. Con menos frecuencia estos hallazgos se repiten en las mucosas traqueobronquiales y pueden conducir a estenosis de las vas areas. Tambin pueden observarse lceras cutneas, generalmente periorificiales, sndrome de Addison y granulomascerebrales. Las lesiones pulmonares presentan escasos sntomas y signos clnicos.

forma pulmonar crnicaAlgunos pacientes desarrollan procesos pulmonares de evolucin prolongada cuyos sntomas iniciales son tos, expectoracin mucopurulenta, hemoptoica, disnea de esfuerzo, astenia, anorexia, prdida de peso y puede o no presentar febrcula; no se observan cavidades pulmonares, los signos clnicos son escasos, detectndose enfisema, roncus o estertores subcrepitantes de localizacin variable. Produce fibrosis pulmonar de intensidad creciente que lleva a una insuficiencia respiratoria crnica con aumento de la disnea, aparicin de cianosis subungueal y dedos hipocrticos. En esta forma pulmonar crnica no se detectan lesiones extrapulmonares.

FRECUENCIA SEGN EDAD, SEXO, RAZA Y OCUPACIN

Afecta todas las edades, especialmente a individuos entre 30 y 50 aos. Los varones son ms afectados que las mujeres, en proporciones que oscilan entre 12:1 segn la regin estudiada. No se detecta una notoria predisposicin racial. Es ms frecuente en trabajadores manuales especialmente de reas rurales.

FACTORES PREDISPONENTES

El etilismo crnico, la mala nutricin, y enfermedades subyacentes juegan un rol importante,como as tambinla exposicin al agente etiolgico.Esta micosis sistmica endmica no aparece con frecuencia asociada a pacientes inmunocomprometidos

EVOLUCIN

Habitualmente es crnica, progresiva y suele conducir a la caquexia en varios aos si no se instaura el tratamiento adecuado.Puede causar una infeccion subclinica o ser de evolucion aguda, subaguda o cronica e incluso causar la muerte

Diagnstico Diferencial

Paracoccidioidomicosis PulmonarTuberculosis, histoplasmosis, neoplasias,coccidioidomicosis

Paracoccidioidomicosis MucocutneaEsporotricosis, tuberculosis,coccidioidomicosis, blastomicosis, lupus vulgar, sfilis tarda, actinomicosis cervicofacial.

Paracoccidioidomicosis GanglionarTuberculosis colicuativa, linfomas.

Paracoccidioidomicosis VisceralHistoplasmosis, Kalazar, blastomicosis, Enf. Addison

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ESTUDIO MICOLOGICOEl diagnstico se realiza : por clnica fundamentalmente, OMD: con KOH al 10% se realiza en esputo, exudado, triturado de material de biopsia lo que permite la visualizacin del hongo. Especificidad de hasta 100% ; El cultivo es agar Sabouraud, ASHP, BHI, macromorfologia crece como una colonia de color blanco a crema; el reverso muestra un color marrn claro y micromorfologia se observan hifas, artroconidias y clamidosporas intercalares y terminales.

CARACTERSTICAS MICROSCPICAS AL EXAMEN DIRECTOLas formas caractersticas de este agente se observan, tanto en el examen directo con KOH como en las coloraciones de Giemsa, PAS y MNP, como clulas esfricas de brotacin mltiple y anisomtrica de 10 a 60 m de dimetro cuyos brotes pueden tener de 1 a 10 m de dimetro, de paredes gruesas y refringentes que asemejan una doble pared. Estas estructuras pueden ser escasas en la muestra predominando clulas de gemacin simples de 1 a 10 m que pueden confundirse con B. dermatitidis (no existe en nuestro pas).Tambin pueden verse las caractersticas ruedas de timn que consisten en grandes clulas esfricas rodeadas de mltiples brotes perifricos de pequeo tamao. Otras veces aparece como cortas cadenas de 3 a 4 clulas.

Preparacin en solucin salina normal tomada Paracoccidioides brasiliensisa) Levaduras en rueda de timn de barcob) Levaduras en orejas de Mickey mouse

Levaduras en rueda de timn de barco

Diagnstico HistopatolgicoUtiliza adems de la coloracin de Hematoxilina-Eosina, coloraciones especiales para hongos como PAS y Grocot-Gomori, con las cuales es posible observar al Paracoccidioides brasiliensis en los preparados histopatolgicos.

Fase saproftica (Crecimiento a 25-28 C)

Aspecto macroscpico: Desarrollo lento (2 a 3 semanas), colonia rugosa o membranosa, cubierta por un micelio areo blanco (pardo con la edad) y de vellosidades cortas. El reverso puede ser de tostado a marrn.Algunos primocultivos dan colonias rugosas y cerebriformes. Crece en presencia de cicloheximida.

Fase saproftica(Crecimiento a 25-28 C)Aspecto microscpico:Hifas hialinas tabicadas y ramificadas con clamidosporas intercalares o terminales y raramente conidios ssiles, redondos u ovales de 3-4 m, ubicados a los lados de las hifas.

Es otro medio diagnstico que consiste en la inyeccin intradrmica de Paracoccidioidina, un antgeno celular proveniente de filtrados de cultivos del Paracoccidioides brasiliensis diluido.Esta prueba se lee a las 48 horas y se consideran reacciones positivas el observar induraciones de 5 mm y ms, en la zona donde se realizo la inyeccin.Esta prueba slo indica INFECCIN y sern necesarios otros estudios para el diagnstico de la ENFERMEDAD. Durante el manejo de una infeccin sospechosa de Paracoccidioidomicosis los test diagnsticos no son superiores al aislamiento del agente causal del espcimen clnico o a su inequvoca identificacin fsica, o a las caractersticas histopatolgicas de la invasin tisular. Sin embargo constituyen herramientas diagnosticas importantes de conocer y manejar.Test cutneo

Sin embargo no en todos lo casos este aislamiento es posible por lo que se hace necesario el uso de test serolgicos como la inmunodifusion, mas confirmatorio que un test cutneo positivo. El examen serolgico por Inmunodifusin es la tcnica ms simple y efectiva en el diagnstico de esta micosis, detecta anticuerpos IgG en casi el 99% de los casos activos, pero no se ha precisado la sensibilidad de esta tcnica en la captacin de casos incipientes.Otras tcnicas empleadas en el diagnstico inmunolgico son la inmunoelectroforesis y la ELISA.

PRUEBA DE INMUNODIFUSIN DOBLE (ID)La inmunodifusion tiene sensibilidad de 90% y especificidad de 100%;Una prueba positiva indica infeccin activa aun en ausencia de sntomas. Presenta de una a tres bandas de precipitacin que correlacionan con la gravedad de la enfermedad.Las bandas 1 y 2 son especificas, la 3 tienen reaccin cruzada con coccidioidomicosis;Las bandas disminuyen en nmero e intensidad con el tratamiento.

Inmunodifusin (ID)

Blastomicosis

Blastomicosis

La blastomicosis es una enfermedad granulomatosa crnica y supurativa tiene una etapa pulmonar primaria que es seguido con frecuencia por su difusin a otras partes del cuerpo, principalmente la piel y los huesos. Aunque la enfermedad hace mucho tiempo se pens limitarse al continente de Amrica del Norte, en los ltimos aos han sido diagnosticados casos autctonos en frica, Asia y Europa.Distribucin: Amrica del Norte, algunos casos de frica, Asia y Europa.Agente etiolgico: Blastomyces dermatitidis, un hongo que habita en el suelo.

Blastomicosis

86Text slide.La blastomicosis es una enfermedad granulomatosa crnica y supurativa tiene una etapa pulmonar primaria que es seguido con frecuencia por su difusin a otras partes del cuerpo, principalmente la piel y los huesos. Aunque se pens por mucho tiempo que la enfermedad limitaba al continente de Amrica del Norte, en los ltimos aos han sido diagnosticados casos autctonos en frica, Asia y Europa.Distribucin: Amrica del Norte, algunos casos de frica, Asia y Europa.Agente etiolgico: Blastomyces dermatitidis, un hongo que habita en el suelo.

90050. Granuloma ulcerado debido a la B. dermatitidis. (Cortesa del Dr. John Rippon, EE.UU.).Granuloma ulcerado debido a dermatitis Blastomices

92052. Cutaneous blastomycosis from the same patient as in 051 showing loss of skin from the arm and fingers. Note advancing edge of lesion. (Courtesy of Dr. John Rippon, USA).

Blastomicosis cutnea del mismo paciente que muestra la prdida de la piel del brazo y los dedos. Nota avanzar borde de la lesin.

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94Cutaneous blastomycosis from the same patient as in 051 showing loss of skin from the arm and fingers. Note advancing edge of lesion. (Courtesy of Dr. John Rippon, USA).

Blastomicosis cutnea del mismo paciente que muestra la prdida de la piel del brazo y los dedos. Nota avanzar borde de la lesin.

EXAMEN microscopico DIRECTO

Los hongos pueden detectarse en preparaciones de KOH al 10% o en solucin de lugol. El material recolectado (expectoracin, lavado bronquial, pus, escamas o fragmento de piel, segn la variedad clnica de la enfermedad) se coloca entre un porta y cubreobjetos con KOH. Al microscopio se observan clulas levaduriformes, esfricas, refrigentes, de pared gruesa y monogemantes que miden de 8 15 m de dimetroLa caracterstica de esta estructura radica en que la clula hija es prcticamente del mismo tamao que la madre, y las divide un tabique de base gruesa y ancha.

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054

105054. Tissue sections showing large, broad-base, unipolar budding yeast-like cells, 8-15 um in diameter. Note: tissue sections need to be stained by Grocott's methenamine silver method to clearly see the yeast-like cells, which are often difficult to observe in Haematoxylin and eosin (H&E) stained preparations.

Muestras de tejido que muestran, clulas levaduriformes grandes, gemacion unipolares , de base amplia, 8-15 um de dimetro. Nota: las secciones de tejido necesario teirlos por el mtodo de la plata metenamina de Grocott para ver claramente las clulas similares a las levaduras, que son a menudo difciles de observar en las preparaciones teidas hematoxilina y eosina (H & E).

MacromorfologiaColonias de desarrollo lento (10 a 15 das), vellosas y blanquecinas y con pliegues radialesAlgunas cepas presentan un pigmento pardo difusible.Algunas cepas presentan un crecimiento levaduriforme al principio, tornndose vellosas en toda su superficie.

MicromorfologiaConidias ovales, piriformes o esfricas, de 2-10 m, de pared lisa, que nacen de conidiforos laterales o en ramificaciones terminales. Los cultivos envejecidos presentan abundantes clamidoconidias de 18 m de dimetro.

Cultivo a 37 grados Colonias cerebriformes, glabras, cerosas, de color amarillento a tostadoLevaduras grandes, redondas, de paredes gruesas, unigemantes semejantes a las observadas en el examen directo. Se pueden ver cortos segmentos de micelio.

Coccidioidomicosis

Inicialmente, una infeccin respiratoria, que resulta de la inhalacin de conidios, que tpicamente se resuelve rpidamente dejando al paciente con una fuerte inmunidad especfica a la re-infeccin. Sin embargo, en algunos individuos, la enfermedad puede progresar hasta una enfermedad pulmonar crnica o como una enfermedad sistmica que afecta las meninges, huesos, articulaciones y subcutneo y tejidos cutneos.Distribucin: Endmica en el suroeste de EE.UU., el norte de Mxico y varios centros en Amrica del Sur.Agente etiolgico: Coccidioides immitis oC. posadasii, un hongo que habita en el suelo.

Coccidioidomicosis

114Text slide.

Factores de virulenciaLos artroconidios deCoccidioidesspp. estn bien equipados contra las barreras de defensa del hospedero.La parte exterior de la pared del conidio, es una envoltura, adaptada para la dispersin area, y tambin sirve como proteccin pasiva contra la destruccin de las enzimas y productos oxidativos liberados por las clulas de defensa del hospedero.Otros factores ligados a la virulencia son: la gran cantidad de endosporas que son liberadas por cada esfrula y que cada una de ellas es una esfrula potencial, y la substancia mucilaginosa que envuelve a las endosporas cuando estas emergen de la esfrula, la cual acta como proteccin contra los fagocitos del hospedero.Otros procesos bioqumicos probablemente implicados en la virulencia incluyen: la participacin de grupos sulfidhrilo y disulfato, receptores hormonales y proteinasas tanto intra como extracelulares (Ejemplos: elastasas, colagenasas y ureasas).La formacin de granulomas tambin es considerada como un factor de virulencia

SinonimiaFiebre del valle, Fiebre de San Joaqun, Enfermedad de Posadas-Wernicke, Reumatismo del desierto, Granuloma coccidial.

Enfermedad infecciosa producida por Coccidioides spp.Actualmente, se reconocen dos especies: Coccidioides immitis, agente de la enfermedad en el Valle Central de California, EEUU y Coccidioides posadasii en el resto de Amrica.La infeccin es adquirida por va inhalatoria pudiendo adoptar las siguientes formas: 1)Coccidioidomicosis primaria : enfermedad respiratoria aguda benigna que cura espontneamente. 2)Coccidioidomicosis progresiva : padecimiento crnico maligno y diseminado que afecta los tejidos cutneo, subcutneo, visceral y seo.

ECOLOGA Y DISTRIBUCIN GEOGRFICACoccidioides sp. es un hongo dimorfo cuya fase saprfita o filamentosa vive en el suelo de zonas ridas y semiridas de suelo seco y alcalino, con temperaturas ambientales de 26 a 32 C durante el verano y de 4 a 12 C en el invierno, con precipitacin anual que no sobrepase 500 a 600 mm. Este tipo de suelo es pobre en materia orgnica y rico en sales minerales. El hongo crece bien despus de un invierno con algunas lluvias seguido de un verano seco y caluroso. No sobrevive en lugares hmedos donde compite con otra flora fngica. Se comprobaron infecciones espontneas en bovinos, burros, equinos, llamas, porcinos, ovinos, perros, ardillas, conejos, ratas, ratones, chinchillas, monos, gorilas y coyotes que habitan en el rea endmica. Se encuentra distribuido en las zonas secas y ridas de Amrica. En Ecuador no hay zonas aridas.

SINTOMATOLOGA CARACTERSTICAS CLNICASCoccidioidomicosis primaria : en el 60 % de los casos aparece como una infeccin respiratoria leve o completamente asintomtica, tan ligera y fugaz que no obliga a la consulta mdica y slo se descubre por la intradermorreaccin positiva a la coccidioidina. El microorganismo es inhalado en el polvo de zonas endmicas, y los sntomas, si aparecen, lo hacen despus de un perodo de incubacin de 10 a 15 das. Los sntomas corresponden con una infeccin leve de vas respiratorias altas, estos son fiebre moderada (37,5 a 38 C), escalofros, dolores pleurales y tos no productiva; en el 28% de los casos la tos se acompaa de pequeas hemptisis. En el 8% de los casos aparecen dolores poliarticulares y a veces reacciones alrgicas de piel, conocidas como eritema nudoso. Los dolores poliarticulares, el eritema nudoso y la conjuntivitis flictenular, forman la trada propia de la primoinfeccin.

Coccidioidomicosis progresivaCoccidioidomicosis progresiva: algunas neumonitis progresan hacia una enfermedad parecida a la tuberculosis con consolidacin y formacin de cavidades y posterior diseminacin a otros rganos y tejidos, incluyendo piel y sistema nervioso central (SNC).La forma diseminada aguda se presenta en 0,5 a 1% de los casos clnicamente activos en hombres blancos y en personas de color aumenta a un 10%. Se presenta dentro de los nueve meses de la enfermedad (media 3-5 meses).Es semejante a la tuberculosis miliar, se caracteriza por fiebre, esplenomegalia, lesiones micronodulares en ambos campos pulmonares, adenopatas mltiples, ataque seo y del SNC con lquido cefalorraqudeo (LCR) como en la meningoencefalitis tuberculosa.

Las manifestaciones cutneas son polimorfas; comienzan como una mcula y pueden evolucionar hacia vescula, pstula y ulceracin vegetante. Se presentan generalmente en el segmento ceflico, alrededor de los orificios naturales. Otras veces la diseminacin ocurre entre los 9 meses y 10 aos con lesiones en piel, tejido subcutneo, huesos, articulaciones, SNC y otras vsceras. Las lesiones cutneas son comnmente nicas y pasan por la gama de ppula, pstula y lcera. A veces asumen el aspecto de lesiones gomosas inflamatorias que ulceran o por el contrario se reabsorben espontneamente. Las de tejido celular subcutneo son de tipo de absceso fro. La localizacin osteoarticular puede simular un micetoma, las lesiones ganglionares se caseifican y pueden fistulizar adquiriendo el aspecto de la escrfulodermatitis. La localizacin en SNC tiene la sintomatologa de una meningitis crnica o de un tumor.

Los trabajadores de laboratorio, en particular mujeres embarazadas, son extremadamente susceptibles a la enfermedad por inhalacin de los conidios del cultivo a 28 C, donde las producen en abundancia.La infeccin percutnea es rara, slo se vio en pocas oportunidades y se produjo por inoculacin del hongo por traumatismo en personal de laboratorio, dando una lesin chancroide en el sitio de inoculacin, posteriormente afecta la cadena ganglionar hasta los ganglios linfticos regionales; en estos casos la curacin fue espontnea, por lo que no se detecta con frecuencia.En pacientes con SIDA se dan las formas neumnicas localizadas con una buena sobrevida mientras que la forma pulmonar difusa con lesiones retculo nodullillares son muy graves con una sobrevida inferior a un mes. Las formas diseminadas y pulmonares crnicas se dan en menos de un 1% en zonas endmicas.

124104. Coccidioidomicosis con lesiones crnicas de la cara. Las lesiones activas se ven en la mejilla. Un atrfica, cicatriz despigmentada representa una lesin curada es en la frente. (Cortesa del Dr. J. W. Rippon, EE.UU.).

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125106. Extensin de la coccidioidomicosis pulmonar mostrando una gran placa ulcerada superficial. (Cortesa del Dr. J. W. Rippon, EE.UU.).

Diagnstico de laboratorio.PRECAUCIN.Organismo considerado deRiesgo Biolgico Nivel 3.Examen Microscopico Directo en fresco. Puede efectuarse aclarando el esputo con KOH al 10% durante 10 min u observando directamente productos como lquido de lavado bronquial, lquido cefalorraqudeo o lquido purulento producto de la fistulizacin de ndulos subcutneos. Asi mismo pueden utilizarse fragmentos de tejidos, que previamente se muelen en mortero con solucin salina. La observacin al microscopio de esfrulas con endosporas en su interior, es confirmatoria de la micosis.La mayora de las esfrulas tienen un dimetro de 20 a 80 m pero algunas pueden alcanzar un tamao de 200 m. Contienen endosporas, pequeas estructuras globulares de 2 a 5 m

Extendido. Varias formas y tamaos de esfrulas /endosporas deCoccidioides, u otras formas, pueden ser identificadas o teidas con coloracin Gram, Wright, hematoxilina-eosina o Papanicolaou; sin embargo se distinguen con mayor facilidad cuando se tien con plata metenamina (Gomori-Groccott o Gridley) o cido peridico de Shiff (PAS).La presencia de quitina en la pared celular, permite el empleo de tinciones fluorescentes en frotis de esputo u otros fludos corporales, usando Calcofluor White o Fluorescent .

Histopatologa.Los cambios histopatolgicos, incluyen respuesta piogranulomatosa con granulocitos, neutrfilos y eosinfilos, macrfagos, clulas gigantes multinucleadas con clulas epitelioides empalizadas, caseacin-necrosis e hialinizacin o fibrosis con linfocitos en la periferia. Las esfrulas observadas miden de 30 a 60 m, tienen pared gruesa y citoplasma eosinfilo; pueden tener aspecto de cuerpo asteroide Con tincin de Gomori-Grocott se observan de color obscuro y con PAS, de color rojo.

Observacion Microscopica Directa

Se observa en el examen directo con KOH y las coloraciones de MNP, HE y PAS como cuerpos esfricos de 20 a 60 m, de paredes gruesas y sin yemas, en cuyo interior contienen gran cantidad de endosporos de 2 a 5 m. Las esfrulas ms pequeas pueden no contener endosporas (esfrulas inmaduras). No se observan con la coloracin de Gram ni con Tinta China.

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133108. Plata de Grocott metionina (GMS) seccin de tejido teido de tejido pulmonar mostrando esfrulas endosporulating tpicos de Coccidioides immitis. Esfrulas jvenes tienen un centro claro con citoplasma perifrico y una pared de espesor prominente. Endospores (esporangiosporas) ms tarde se forman dentro de la spherule por escisin citoplasmtica repetidas. La rotura de los comunicados de spherule endosporas hacia el tejido circundante, donde vuelve a iniciar el ciclo de desarrollo spherule.

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134109. cido peridico de Schiff seccin de tejido teido (PAS) de las vsceras de una infeccin inducida experimentalmente en un ratn que muestra esfrulas endosporulating tpicos de Coccidioides immitis. Esfrulas jvenes tienen un centro claro con citoplasma perifrico y una pared de espesor prominente. Endospores (esporangiosporas) ms tarde se forman dentro de la spherule por escisin citoplasmtica repetidas. La rotura de los comunicados de spherule endosporas hacia el tejido circundante, donde vuelve a iniciar el ciclo de desarrollo spherule.

Cultivo. Debe procederse en Mycosel o Mycobiotic (agar dextrosa Sabouraud con cicloheximida), incubndose a 25-30C y en siete das podrn observarse las siguientes caractersticas:El cultivo se debe realizar en tubo y destruir antes de diez das luego del inculo. Para la observacin microscpica es necesario pasarlo previamente por formol..

CultivoT : 25-28C y 35-37CForma saproftica

Macromorfologia

Desarrollo rpido (3 a 10 das) al principio membranosa, hmeda y pegada al agar, rpidamente desarrolla un micelio areo blanco algodonoso, que se torna pardo con la edad.Algunas colonias pueden presentar color lavanda, rosado o amarillo. El reverso es incoloro. No es inhibido por la cicloheximida.

MicromorfologiaHifas hialinas, ramificadas y tabicadas que forman cadenas de artrosporas rectangulares, elipsoidales o en forma de barril, de pared gruesa, de 1,5 - 2,3 x 1,5 - 15 m, separadas entre s por una clula vaca caracterstica. En los cultivos viejos casi todas las hifas forman artrosporas.

37 grados Posee la misma morfologa a las dos temperaturasSlo se obtiene en medios especiales donde se observan esfrulas similares a las descriptas en examen directo. En los medios de cultivo comn, incubado a 37 C, se observa lo mismo que a 25 C.Es resistente a la cicloheximida.

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140107. Microscopia directa de muestras de piel de una lesin cutnea montado en KOH al 10% y solucin de tinta Parker mostrando esfrulas endosporulating caractersticos (esporangios) de Coccidioides immitis. La presencia de esfrulas con endosporas es diagnstico.

Imunodifuso (ID)Ag - Paracoccidioides brasiliensisSoro positivo - 1/8Puro1/21/41/81/161/32

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