Técnicas histológicas

El cuerpo humanoEl cuerpo humano

Human body

Qué es la histología?Qué es la histología?

• Estudio del tejido– composición microscópica

• Requiere auxiliares ópticos

Qué estudia la histología?

• La célula (Citología)

• Los tejidos (Histología propiamente dicha)

• Estructura de los órganos (Histología especializada)

Importancia de la Histología

• Lugar central – educación médica– investigación médica

La aplicación de la Histología

• Nexo de unión entre:– La genética – La bioquímica

– La fisiología

• Explica las interrelaciones entre:– Composición molecular de

• Célula

• Tejido• Órganos

METODOS DE ESTUDIO

-Técnicas histológicas: (mediato e inmediato)

– 1- Toma de material.– 2.- Fijación– 3.- Deshidratación– 4- Aclaración– 4.- Preparación para la inclusión– 5.- Inclusión– 6.- Modelado del bloque – catalogación– 7.- Sección con el micrótomo extendido de los cortes – pegado– 8.- Coloraciones: de rutina o especiales– 9- Montaje

-Instrumentos:Procesadores de tejido, micrótomo, estufa y otros

Laboratorio histopatológico

Laboratorio histopatológico

Laboratorio histopatológico

Laboratorio histopatológico

Laboratorio histopatológico

Laboratorio histopatológico

Técnicas histológicas

• Protocolo de trabajo – Utilizado por un servicio, para la técnica de Hematoxilina - Eosina

para preparados de uso didáctico:

I. Fijación • En formol al 10% (1 parte de formol y 9 partes de agua

destilada) por lo menos durante 6 hs.II. Corte• Se le da el tamaño deseado a la pieza y se la coloca en una

bolsa de gasa, con el fin de enjuagarla en agua corriente durante, por lo menos, 15'..

Protocolo de trabajo

III. Deshidratación• 1) Alcohol 70º, 1h30'.

2) Alcohol 96º, 1h30'.3) Alcohol 100º (l), 1h30'.4) Alcohol 100º (ll), 1h30'.5) Toluol, entre 1h30' y 3hs.

IV. Inclusión• 1) Secado de la muestra con gasa.

2) Parafina 56º (l), 1h30'.3) Parafina 56º (ll), 1h30'.4) Formación de la barra.5) 30' de frezzer.6) Fractura del taco

V. Corte

Protocolo de trabajo

VI. Coloración• 1) Secado de los cortes en estufa a 58ºC, 15'.

2) Xilol o toluol (I), 15' en estufa.3) Xilol o toluol (II), 2'.4) Alcohol 100º, 30".5) Alcohol 96º, 30".6) Alcohol 70º, 30".7) Alcohol 50º, 30".8) Agua destilada, 30".9) Hematoxilina, 1´30".10) Agua corriente, 2´.11) Alcohol 50º, 15".12) Eosina, 30".13) Alcohol 96º, 10".14) Alcohol 100º, 10".15) Xilol, 1´ por lo menos.16) Montaje con Bálsamo de Canadá sintético

Qué coloraciones usamos?• Rutina:

– Hematoxilina (lila)– Eosina (rosa)

• Especiales: – PAS (carbohidrato)– Orceína (fibras elásticas)– Reticulina (fibras reticulares)– Rojo Congo (amiloide)– Sudan (tejido adiposo)– Tricómico de Masson (fibras colágenas)– Metenamina de Plata (hongos)

PAS Azul Alciano

PAS

Fontana-Masson

Ziehl- Neelsen

Grocott contrastadocon amarillo de metanilo

Grocott

Inmunohistoquímica

• Marcadores celulares:– Proteínas:

• Anticuerpos• Se asocian a:

– La membrana

– Citoplasma

– Núcleo

Que hacemos después de colorear y montar?

• Observamos al microscopio

Cuáles son los tipos de microscopios?

Qué imágenes histológicas podemos ver?

La célula. Formas

Tipos celulares

Qué podemos observar con el microscopio óptico?

La célula. Tamaño celular

La célula. Elementos visualizados

• Membrana celular o plasmalema.

• Núcleo: cromatina y membrana nuclear.

• Citoplasma: cambios de coloración– Organelas: Retículo endoplasmático, aparato de golgi,

mitocondrias, ribosomas.– Vesículas.

Con esto concluimos....

Muchas gracias…