7
図1 50 75 100 GM CM (L1) Relative Col1a expression (% of GM) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Relative Col1a expression (% of GM) * * § B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a mRNA発現に及ぼす脂肪細胞の影響。 B) 過度な肥満状態がCol1a mRNA発現に及ぼす影響。 GM; Growth Medium (used as vehicle control)CM (L1); Conditioned Medium with L1CM (Co); Conditioned Medium with Coculture *p < 0.05 with GM, § p < 0.05 with CM (L1)

100 expression...expression M) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Col1a expression M) * * B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a

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Page 1: 100 expression...expression M) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Col1a expression M) * * B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a

図1

50

75

100

GM CM (L1)

Rel

ativ

e C

ol1a

exp

ress

ion

(% o

f G

M) *

A

0

25

50

75

100

GM CM (L1) CM (Co) R

elat

ive

Col

1a e

xpre

ssio

n (%

of G

M)

*

*

§

B

図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a mRNA発現に及ぼす脂肪細胞の影響。 B) 過度な肥満状態がCol1a mRNA発現に及ぼす影響。  GM; Growth Medium (used as vehicle control)、CM (L1); Conditioned Medium with L1、  CM (Co); Conditioned Medium with Coculture  *p < 0.05 with GM, §p < 0.05 with CM (L1)

Page 2: 100 expression...expression M) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Col1a expression M) * * B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a

図2

0

50

100

150

F1 F2 F3 F4 F5

GM CM

Rel

ativ

e C

ol1a

Exp

ress

ion

(% o

f GM

)

*

*

§

*

* *

図2 脂肪細胞由来液性因子の解析実験。 本試験で用いたフィルターは以下の5種類。 F1; ゲル濾過フィルター、F2; シリカゲルフィルター、F3; 糖鎖吸着フィルター、 F4; 陽イオン交換フィルター、F5; 陰イオン交換フィルター  *p < 0.05 with GM, §p < 0.05 with CM (Co)

Page 3: 100 expression...expression M) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Col1a expression M) * * B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a

図3

0 25 50 75

100 125 150

GM CM (Co) CM (Co) +EGC

CM (Co) +EGCg

Rel

ativ

e C

ol1a

ex

pres

sion

(% o

f GM

)

*

§

§ B

A

Catechin Gallocatechin Epicatechin Epigallocatechin

Catechin gallate

Gallocatechin gallate

Epicatechin gallate

Epigallocatechin gallate

図3 脂肪細胞によるコラーゲン発現抑制に対する茶カテキン類の効果 A) 本試験で用いたカテキン(8種類)の構造式。 B) 脂肪細胞によるコラーゲン発現抑制に対するエピガロカテキン(EGC)およびエピガロカテキンガレート(EGCg)の効果。 *p < 0.05 with GM, §p < 0.05 with CM (Co)

Page 4: 100 expression...expression M) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Col1a expression M) * * B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a

0 50

100

1000 1200

Vehicle 0.5 1 5

Rel

ativ

e hB

D3

expr

essi

on

(vs.

veh

icle

con

trol

) A

*

*

C1P (µM)

*

図4

0

100

200

300

400 *

- Pyr

- NS398 -

C1P

+ - -

- - Aspirin

- + - -

- - + -

- - - +

+ - - +

- + - +

- - + +

B

** ** **

Rel

ativ

e hB

D3

expr

essi

on

(vs.

veh

icle

con

trol

) 図4 抗菌ペプチドhBD3発現に与えるC1Pの作用とそのメカニズム A) C1PがhBD3発現に与える影響。 B) C1PによるhBD3発現メカニズム解析1;cPLA2aおよびCOXの関与。 pyr; cPLA2a inhibitor, NS398; COX2 inhibitor, Aspirin; COX inhibitor *p < 0.05 vs vehicle control, **p < 0.05 vs C1P

Page 5: 100 expression...expression M) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Col1a expression M) * * B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a

図4(つづき)

E

**

400

300

100

0

200

*

**

- α δ - α δ PPAR Antagonist

- - - + + + C1P

Rel

ativ

e hB

D3

expr

essi

on

(vs.

veh

icle

con

trol

)

200

150

50

0

100

*

*

D

Veh α

PPAR agonist

δ γ

Rel

ativ

e hB

D3

expr

essi

on

(vs.

veh

icle

con

trol

)

50

40

10

0

20

*

30

Vehicle PGJ2 PGE2

C

Rel

ativ

e hB

D3

expr

essi

on

(vs.

veh

icle

con

trol

)

図4 抗菌ペプチドhBD3発現に与えるC1Pの作用とそのメカニズム C) C1PによるhBD3発現メカニズム解析2;プロスタグランジンの関与。 DおよびE) C1PによるhBD3発現メカニズム解析3;PPARの関与。 *p < 0.05 vs vehicle control, **p < 0.05 vs C1P

Page 6: 100 expression...expression M) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Col1a expression M) * * B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a

A

** - + - + - - + +

Rel

ativ

e hB

D3

expr

essi

on

(vs.

veh

icle

con

trol

)

STA C1P

100

75

25

0

50

*

P-STAT3 (Tyr705)

Vehicle GW GSK C1P C1P C1P +GW +GSK

B

Vehicle

GW

GSK

C1P

C1P +GW

C1P +GSK

P-STAT3 DAPI Merge C 図5

図5 C1P-hBD3発現における作用メカニズム解析 A) C1PによるhBD3発現メカニズム解析4;STAT3の関与。 BおよびC) STAT3活性化に対するC1Pの影響。 P-STAT3; phosphorylated STAT3, STA; STAT3 inhibitor, GW; PPARa antagonist, GSK; PPARd antagonist, DAPI staining indicates nuclear. *p < 0.05 vs vehicle control, **p < 0.05 vs C1P

Page 7: 100 expression...expression M) * A 0 25 50 75 100 GM CM (L1) CM (Co) Col1a expression M) * * B 図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a

A

- + - + - - + +

150

50

0

100

Bac

teria

l kill

ing

activ

ity

(% o

f ve

hicl

e co

ntro

l)

STA

C1P

*

B

- + - + - - + +

750

250

0

500

hBD

3 se

cret

ion

(p

g/m

g pr

otei

n)

STA

C1P

図6

図6 C1Pが抗菌活性に与える評価 A) Staphylococcus aureus に対する抗菌活性試験。 B) C1PがhBD3分泌に与える影響。 *p < 0.05 vs vehicle control