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図1
50
75
100
GM CM (L1)
Rel
ativ
e C
ol1a
exp
ress
ion
(% o
f G
M) *
A
0
25
50
75
100
GM CM (L1) CM (Co) R
elat
ive
Col
1a e
xpre
ssio
n (%
of G
M)
*
*
§
B
図1 繊維芽細胞のコラーゲン発現に対する脂肪細胞の影響 A) 繊維芽細胞のCol1a mRNA発現に及ぼす脂肪細胞の影響。 B) 過度な肥満状態がCol1a mRNA発現に及ぼす影響。 GM; Growth Medium (used as vehicle control)、CM (L1); Conditioned Medium with L1、 CM (Co); Conditioned Medium with Coculture *p < 0.05 with GM, §p < 0.05 with CM (L1)
図2
0
50
100
150
F1 F2 F3 F4 F5
GM CM
Rel
ativ
e C
ol1a
Exp
ress
ion
(% o
f GM
)
*
*
§
*
* *
図2 脂肪細胞由来液性因子の解析実験。 本試験で用いたフィルターは以下の5種類。 F1; ゲル濾過フィルター、F2; シリカゲルフィルター、F3; 糖鎖吸着フィルター、 F4; 陽イオン交換フィルター、F5; 陰イオン交換フィルター *p < 0.05 with GM, §p < 0.05 with CM (Co)
図3
0 25 50 75
100 125 150
GM CM (Co) CM (Co) +EGC
CM (Co) +EGCg
Rel
ativ
e C
ol1a
ex
pres
sion
(% o
f GM
)
*
§
§ B
A
Catechin Gallocatechin Epicatechin Epigallocatechin
Catechin gallate
Gallocatechin gallate
Epicatechin gallate
Epigallocatechin gallate
図3 脂肪細胞によるコラーゲン発現抑制に対する茶カテキン類の効果 A) 本試験で用いたカテキン(8種類)の構造式。 B) 脂肪細胞によるコラーゲン発現抑制に対するエピガロカテキン(EGC)およびエピガロカテキンガレート(EGCg)の効果。 *p < 0.05 with GM, §p < 0.05 with CM (Co)
0 50
100
1000 1200
Vehicle 0.5 1 5
Rel
ativ
e hB
D3
expr
essi
on
(vs.
veh
icle
con
trol
) A
*
*
C1P (µM)
*
図4
0
100
200
300
400 *
- Pyr
- NS398 -
C1P
+ - -
- - Aspirin
- + - -
- - + -
- - - +
+ - - +
- + - +
- - + +
B
** ** **
Rel
ativ
e hB
D3
expr
essi
on
(vs.
veh
icle
con
trol
) 図4 抗菌ペプチドhBD3発現に与えるC1Pの作用とそのメカニズム A) C1PがhBD3発現に与える影響。 B) C1PによるhBD3発現メカニズム解析1;cPLA2aおよびCOXの関与。 pyr; cPLA2a inhibitor, NS398; COX2 inhibitor, Aspirin; COX inhibitor *p < 0.05 vs vehicle control, **p < 0.05 vs C1P
図4(つづき)
E
**
400
300
100
0
200
*
**
- α δ - α δ PPAR Antagonist
- - - + + + C1P
Rel
ativ
e hB
D3
expr
essi
on
(vs.
veh
icle
con
trol
)
200
150
50
0
100
*
*
D
Veh α
PPAR agonist
δ γ
Rel
ativ
e hB
D3
expr
essi
on
(vs.
veh
icle
con
trol
)
50
40
10
0
20
*
30
Vehicle PGJ2 PGE2
C
Rel
ativ
e hB
D3
expr
essi
on
(vs.
veh
icle
con
trol
)
図4 抗菌ペプチドhBD3発現に与えるC1Pの作用とそのメカニズム C) C1PによるhBD3発現メカニズム解析2;プロスタグランジンの関与。 DおよびE) C1PによるhBD3発現メカニズム解析3;PPARの関与。 *p < 0.05 vs vehicle control, **p < 0.05 vs C1P
A
** - + - + - - + +
Rel
ativ
e hB
D3
expr
essi
on
(vs.
veh
icle
con
trol
)
STA C1P
100
75
25
0
50
*
P-STAT3 (Tyr705)
Vehicle GW GSK C1P C1P C1P +GW +GSK
B
Vehicle
GW
GSK
C1P
C1P +GW
C1P +GSK
P-STAT3 DAPI Merge C 図5
図5 C1P-hBD3発現における作用メカニズム解析 A) C1PによるhBD3発現メカニズム解析4;STAT3の関与。 BおよびC) STAT3活性化に対するC1Pの影響。 P-STAT3; phosphorylated STAT3, STA; STAT3 inhibitor, GW; PPARa antagonist, GSK; PPARd antagonist, DAPI staining indicates nuclear. *p < 0.05 vs vehicle control, **p < 0.05 vs C1P
A
- + - + - - + +
150
50
0
100
Bac
teria
l kill
ing
activ
ity
(% o
f ve
hicl
e co
ntro
l)
STA
C1P
*
B
- + - + - - + +
750
250
0
500
hBD
3 se
cret
ion
(p
g/m
g pr
otei
n)
STA
C1P
図6
図6 C1Pが抗菌活性に与える評価 A) Staphylococcus aureus に対する抗菌活性試験。 B) C1PがhBD3分泌に与える影響。 *p < 0.05 vs vehicle control