¹3 (49) 2010 · 2015-11-23 · В. Жарков ПРОЦЕССНЫЙ ПОДХОД В УПРАВЛЕНИИ АПТЕЧНОЙ ОРГАНИЗАЦИЕЙ ЗАО «Максфарма-Балтия»,

2010¹3 (49)

ÌÈÍÈÑÒÅÐÑÒÂÎ ÇÄÐÀÂÎÎÕÐÀÍÅÍÈß ÐÅÑÏÓÁËÈÊÈ ÁÅËÀÐÓÑÜ

ÂÈÒÅÁÑÊÈÉ ÃÎÑÓÄÀÐÑÒÂÅÍÍÛÉ ÌÅÄÈÖÈÍÑÊÈÉ ÓÍÈÂÅÐÑÈÒÅÒ

Íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêèé åæåêâàðòàëüíûé ðåöåíçèðóåìûé æóðíàë

ÂÅÑÒÍÈÊ ÔÀÐÌÀÖÈÈ

îñíîâàí â 1997 ãîäó

Ó÷ðåäèòåëü – Ó÷ðåæäåíèå îáðàçîâàíèÿ "Âèòåáñêèé ãîñóäàðñòâåííûé îðäåíà Äðóæáû íàðîäîâ ìåäèöèíñêèé óíèâåðñèòåò"

Ðåäàêöèîííàÿ êîëëåãèÿ Áóçóê Ã.Í. (ãëàâíûé ðåäàêòîð), Ãåíåðàëîâ È.È., Ãèäðàíîâè÷ Ë.Ã., Ãîäîâàëüíèêîâ Ã.Â. (Ìèíñê), Ãóðèíà Í.Ñ., Äåéêàëî Â.Ï., Äîðîôååâà Ò.À., Æåðíîñåê À.Ê., Æåáåíòÿåâ À.È., Èãíàòüåâà Å.Â., Êåâðà Ì.Ê. (Ìèíñê), Êîçëîâñêèé Â.È., Êîíîðåâ Ì.Ð., Êðàïèâêî È.È., Êðèøòîïîâ Ë.Å., Êóãà÷ Â.Â. (çàì. ãëàâíîãî ðåäàêòîðà), Êóíöåâè÷ Ç.Ñ., Êóðêèí Â.À. (Ñàìàðà), Ïèìàíîâ Ñ.È., Ðåóòñêàÿ Ë.À. (Ìèíñê), Ðîäèîíîâà Ð.À., Ñà÷åê Ì.Ì., Ñóøêîâ Ñ.À. (çàì. ãëàâíîãî ðåäàêòîðà), Ôèäåëüìàí Ô.È., Õåéäîðîâ Â.Ï., Õèøîâà Î.Ì., ×óåøîâ Â.È. (Õàðüêîâ), Öàðåíêîâ Â.Ì. (Ìèíñê), Ýëüÿøåâè÷ Å.Ã. (Ìèíñê).

Ðåäàêöèîííûé ñîâåò

Àäàìåíêî Ã.Ï., Áîêîâèêîâà Ò.Í. (Ìîñêâà), Áóðàê È.È., Âîéòåõîâè÷ Þ.Á., Ãàïàíîâè÷ Â.Í. (Ìèíñê), Ãëåìáîöêàÿ Ã.Ò. (Ìîñêâà), Ãåîðãèåâñêèé Â.Ï. (Õàðüêîâ), Ãëóøàíêî Â.Ñ., Ãëóøíåâ À.Í. (Ãîìåëü), Ãíèòèé Â.À. (Áðåñò), Ãðèöåâè÷ Í.Í. (Ãðîäíî), Äóáîâèê Á.Â. (Ìèíñê), Åâòóøåíêî Í.Ñ. (Ìîñêâà), Æàðêîâ Ë.Â. (Ìèíñê), Çàëåññêèé Â.Å. (Ìèíñê), Êèñåëåâà Ñ.Í. (Ìîãèëåâ), Êîâàëü÷óê È.Å. (Ìèíñê), Êîíåâàëîâà Í.Þ., Êîñèíåö À.Í., Êóïðèÿíîâ Â.Â. (Ìèíñê), Ëàìàí Í.À. (Ìèíñê), Íàðêåâè÷ È.À. (Ñàíêò-Ïåòåðáóðã), Ïèëüêî Å.Ê. (Ìèíñê), Ðàõìàíüêî Å.Ì. (Ìèíñê), Ôóðñà Í.Ñ. (ßðîñëàâëü), Øàëàåâà Ì.Ã. (Ìèíñê), Øåðÿêîâ À.À. (Ìèíñê).

Æóðíàë çàðåãèñòðèðîâàí â Ìèíèñòåðñòâå èíôîðìàöèè Ðåñïóáëèêè Áåëàðóñü, ñâèäåòåëüñòâî ¹112 îò 12.03.2009ã.

ISSN 2074-9457

�� 3 (49) 2010

3

��

��.

��

�� ! � "��

#

.$

. %&'()* +�,-.��/01 +,23,2

$

4+�5$#./66 5+�.7/,1

,�85/695-6.1

……........ 5 $

.$

. :;<&=, ../

. �&' &>)*&, ..

$. 6<?&@AB*& 35�5:�.�6��6:5

-.#.$,1 5426�,�66

+,��.C6�.#.1 #.:5��$.//03 ��.2��$

, �.5#694.D03

C.9 �.-.+�5

$�575

………………………………….…. 10 ��

�� ! � "��

��

�EF�G �

#

.$

. %&'()* ,�,C.//,��6 �.5#695-66

#.:5��$.//03

��.2��$ 95

�4C.%,D ........ 19

��! ��

� F ��!�

5

.5

. +)<)H(&I ,

8./

. C;J; (, ,.

$. �)JK?)* D,�L,D.��6M

CHELIDONIUM MAJUS L.: $956D,�$M9N

�59D.�,$

, L,�D0

#6��5 6

�,2.�%5/6M

5#:5#,62,$ 6

L./,#N/03

�,.26/./61

………… 26 O

.O

. PQRQSTUV, W.X

. YZ[ZT 69D./76$,��N 5#:5#,62/,8,

�,��5$5 #6��N.$

D5:#.16

�.�2-.$62-/,1

(MACLEAYA CORDATA) $

+�,-.��.

4�:,�.//,8, ��5�./6M

………..… 40 .

.8

. \]AI^B*K=, 8./

. C;J; ( ,/,D5��6:5

$ L5�D5:,8/,966 …………………………………………………..…. 49

�� !��

_��

6.C

. 8'K?HB*K=, �.\.

�`B; >>(Ka :,#67.��$.//,. ,+�.2.#./6.

/5��6M

5#./2�,/5�5

$

�5C#.�:53 …. 59

b.8

. 7B'?BH(&I ,

b.8

. CB]()*>(&I ,

�.$

. �';c&=B*&, 5.

6. %BdB?@IB*, +.

�. +B@')* �59�5C,�:5

6 $5#625-6M

D.�,26:6

,+�.2.#./6M D6�5D6��6/5

$

862�,8.#.$03 +,#6D.�/03

D5��6-53

�

6�+,#N9,$5/6.D

$0�,:,-\LL.:�6$/,1 %62:,��/,1

3�,D5�,8�5L66 …………………………………. 67

��

3 (49) 2010

4

.�

. �� , �.�

. �� !��"�# �"��$%�!� �

��$�&!�'$�� $!(�'�)*��

!�� %$!� *�# � ………………………………………………………………………….. 78

+,-./0/123

4/056,.23

0,789:+;

$

.

. <�=>�, $

.

. ?�@�� %��#'�* �$'"*' !�"��

�� $AB '�

*?'$�$(�)*��* �%$C� %� !�%B

��)� �� D*�$C

…………………………………………………………..…….. 85 �

.�

. !E�F GG>�H $"*'��

��)*� %� �D�* $�

'� !�# ��*'I!$'� � �$ *� & «

!�� %$!*-'�*» …………………………………………………………………………………………..… 91

J89K87/0/123

, 702.26,:783

J89K87/0/123

�.

!. (F��>��,

I.I

. �@F� ��,

.(

. �G=��L��,

�.$

. �M=F N��, D .�.

��NM��, �.%

. ��G��>�� %��#'�*

�' *!$�$!D*' � �&-

� '� �$��A� *��

��I'$($ $D *'� �!B�

�!� �' $��"��

#�*�B � * �� ……………………….….. 97

;

4/K/OP

98Q/+.275

4,9;/1/

:+/08

�.

%. ?�R�LS> D�$�$(�)*��#

I$� &�'$� T ��

�$� �%�#UV�# ��'�)*��$C

�W

-W*� �%'$� � �*��!� %*''$($

�!*I� %�: %

W$�&�*

D*'W$ �� ' ....103

%��=��S �� ……………………………………………………………………………. 109

Вестник фармации №3 (49) 2010 Научные публикации

5

ОРГАНИЗАЦИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ДЕЛА Л.В. Жарков ПРОЦЕССНЫЙ ПОДХОД В УПРАВЛЕНИИ АПТЕЧНОЙ ОРГАНИЗАЦИЕЙ ЗАО «Максфарма-Балтия», г. Минск

В статье приводится описание различных подходов к управлению орга-низацией. Особое внимание уделяется процессному подходу. Обосновываются преимущества его использования. Рас-сматриваются системный подход к вы-делению процессов предприятия и базо-вая методика управления процессом.

Ключевые слова: процесс, про-цессный подход, системный подход, управление процессом.

ВВЕДЕНИЕ

Руководство компанией требует по-стоянного принятия решений по чрезвы-чайно широкому кругу вопросов: цели фирмы, пути их реализации, управленче-ские технологии, компетенции персонала, уровень затрат, ценовая политика. Эффек-тивность управленческих решений во мно-гом зависит от самого подхода к управле-нию организацией. Из всего многообразия управленческих подходов наиболее распро-страненными являются системный, ситуа-ционный, директивный, процессный [1].

Если компания рассматривается как социотехническая организационная систе-ма из двух составляющих: внешней среды и внутренней структуры, представляющей собой совокупность подсистем: цехи, от-делы и прочие структурные подразделе-ния, призванные перерабатывать «вход» в «выход» для достижения поставленной це-ли, то это говорит о применении системно-го подхода в управлении [1].

Функционирование организаций, в том числе аптечных, зависит от целого ря-да факторов: социокультурных, техноло-гических, экономических, экологических, политических. Их состояние и соотноше-ние в определенные временные интервалы

различно. Существующая комбинация факторов может способствовать развитию предприятия, а может быть для него угро-жающей [2]. Ситуационный подход в управлении организацией состоит в уме-нии руководителя грамотно и адекватно оценивать возникшую ситуацию и опреде-лять ключевые параметры ее решения [1].

Принятие решений на основе жест-кой регламентации функций, прав, обязан-ностей, нормативов, планов и заданий, а также оперативное руководство с приме-нением методов принуждения свидетель-ствуют об использовании директивного подхода в управлении [1].

Дифференциация всей деятельности на отдельные взаимосогласованные про-цессы и постоянный контроль за ними для достижения максимальной эффективности деятельности организации предусматрива-ет применение процессного подхода в управлении [1,3].

В настоящее время преимуществен-ным способом управления аптечным пред-приятием является функциональный под-ход, т.е. распределение полномочий, обя-занностей и ответственности по функцио-нальным подразделениям (отделам) пред-приятия. Однако международные стандар-ты серии ISO 9000 рекомендуют в качестве способа управления предприятием про-цессный подход, который «ломает» функ-циональные перегородки, существующие на предприятии, и позволяет сконцентри-ровать усилия всех подразделений на главных целях организации [4].

Для успешного функционирования организация должна определить и осуще-ствлять менеджмент многочисленных взаимосвязанных видов деятельности. Деятельность, в результате которой ис-пользуются ресурсы и выполняются пре-образования входов в выходы, может рас-сматриваться как процесс. Часто выход одного процесса образует вход следующе-го. Применение в организации системы процессов наряду с их идентификацией и взаимодействием, а также менеджмент процессов могут считаться «процессным подходом». Преимущество процессного


6

подхода состоит в непрерывности управ-ления, которое он обеспечивает на стыке отдельных процессов в рамках их системы, а также при их комбинации и взаимодей-ствии [5].

Целью настоящего исследования было определить базовую методику управ-ления процессом в аптечной организации.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Объектами исследования в настоя-

щей работе являлись международные стандарты и научные публикации, посвя-щенные использованию процессного под-хода в управлении организацией.

В работе использованы логико-теоретические методы исследования.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Системный подход к выделению

процессов предприятия Любая организация в ходе дости-

жения собственных целей включена в сот-ни различных процессов. Для всех ком-мерческих организаций существует опре-деленная совокупность стандартных про-цессов: процесс управления, процесс заку-пок (сырья, материалов, услуг других ор-ганизаций), процесс производства товаров и услуг, процесс сбыта. Таким образом реализуется основная цель предприятия – получение прибыли [1].

Система процессов предприятия может быть определена как совокупность взаимосвязанных и взаимодействующих видов деятельности, осуществляемых на предприятии. При использовании данного определения не важно, сколько процессов выделено на предприятии. Значимо то, что вся деятельность, без исключения, рас-сматривается в виде процессов [6].

Применение для управления дея-тельностью и ресурсами организации сис-темы взаимосвязанных процессов может называться «процессным подходом». Та-кое определение процессного подхода в ISO 9001:2000, очевидно, несколько огра-ничено, поскольку не содержит в себе соб-ственно технологии управления процес-сом. Для определения технологии управ-

ления процессом необходимо описать ша-ги, выполнение которых обеспечивает вне-дрение системы процессного управления.

Организация должна: • выявить процессы, необходимые для

системы менеджмента и их применения внутри организации;

• определить последовательность этих процессов и их взаимосвязь;

• определить критерии и методы, необ-ходимые для обеспечения уверенности в том, что как сами эти процессы, так и управление ими результативны;

• обеспечить уверенность в наличии ресурсов и информации, необходимых для поддержки хода реализации этих процес-сов и их мониторинга;

• наблюдать, измерять и осуществлять анализ этих процессов;

• реализовывать мероприятия, необхо-димые для достижения запланированных результатов и постоянного улучшения этих процессов [7].

В соответствии с методологией функционального моделирования (концеп-ция IDEFO) иерархия процессов выглядит следующим образом:

• стратегические процессы; • ключевые процессы; • процедуры; • задания [1].

Процессы, являющиеся в деятель-ности предприятия основными (когда ис-ключение любого из них влечет за собой недостижение общего результата), а также процессы, более или менее общие для всех коммерческих организаций, называются стратегическими. Каждый стратегический процесс, в свою очередь, подразделяется на ключевые процессы. Например, управ-ление организацией может делиться на управление ресурсами, управление персо-налом, учет (бухгалтерский, налоговый, управленческий), финансовый менедж-мент, юридическую экспертизу и сопро-вождение. Каждый ключевой процесс представляется в виде процедуры, описы-вающей выдвигаемые для него задания [1].

Процесс представляется в виде функциональных блоков, которые преоб-разуют входы в выходы при наличии не-обходимых ресурсов [3]. Это достигается


7

путем привязки системы процессов к функциональным подразделениям пред-приятия [6] (рисунок 1).

Привязка процессов к функцио-нальным подразделениям позволяет одно-значно определить границы процессов по входам и выходам, выполняемым функци-ям подразделений, взаимодействие про-цессов в рамках существующей системы предприятия, а также владельцев процес-сов, отвечающих за результативность и эффективность каждого из них [6].

Базовая методика управления

процессом Рассмотрим базовую методику

управления процессом. На рисунке 2 пока-зана концептуальная схема управления процессом, основанная на сформулиро-ванном выше определении этого понятия. Бизнес-процесс имеет входы и выходы. Управление процессом осуществляет его владелец, имеющий в своем распоряжении все необходимые ресурсы: персонал, ин-фраструктуру, программное и аппаратное обеспечение, информацию о бизнес-процессе. Владелец управляет ходом биз-нес-процесса и несет ответственность за его результаты и эффективность. Таким образом, в рассматриваемом понимании процессного подхода к управлению нали-чие владельца процесса, обладающего ре-сурсами, является необходимым условием.

На рисунке 3 представлена схема системы управления предприятием, по-строенная на основе рассматриваемой ме-тодики управления процессами [6]. Схема управления предприятием предполагает наличие следующих средств: 1 - получение оперативной управленче-ской информации о ходе процесса (записи в журналах; автоматизированные системы учета); 2 - анализ оперативной информации по процессу его владельцем (регламентирую-щие документы, содержащие регулировоч-ные критерии процесса; средства автомати-зации, например, сигнализация об отклоне-ниях процесса от нормального хода); 3 - разработка оперативных управленче-ских решений владельцем процесса, руко-водителем и генеральным директором

(регламенты принятия типовых решений; документы, определяющие ответствен-ность и полномочия владельца процесса, руководителя и генерального директора по принятию решений); 4 - ежемесячный (ежеквартальный) ана-лиз процесса его владельцем и руководи-телем (регламентирующие документы, оп-ределяющие перечень показателей процес-са, продукта и данных удовлетворенности клиентов; статистические методы анализа; программное обеспечение для анализа; формы отчетности); 5 - разработка мероприятий по улучше-нию процесса его владельцем и руководи-телем (регламентирующие документы, оп-ределяющие полномочия владельца про-цесса по разработке и выполнению меро-приятий для его улучшения; типовые фор-мы обоснования мероприятий; программ-ные средства расчета экономической эф-фективности мероприятий, регламенты принятия решений); 6 - анализ оперативной информации об отклонениях в ходе процесса руководите-лем и генеральным директором (регламен-тирующие документы); 7 - анализ информации по выполнению бизнес-процессов предприятия генераль-ным директором (регламенты выполнения анализа процессов ГД); 8 - разработка мероприятий по улучше-нию бизнес-процессов и приведения их в соответствие стратегическим целям пред-приятия (регламенты стратегического ана-лиза и планирования); 9 - анализ внешней среды [6].

Для аудиторов (внутренних или внешних) процесс, организация или дея-тельность, представленные в виде схем, позволяют очень быстро идентифициро-вать возможные отклонения в системе. Ес-ли четко обозначить взаимосвязь проце-дур, это позволит всем заинтересованным участникам процесса увидеть и определить точки соприкосновения, найти способы эффективного функционирования. Таким образом, становится легче понимать друг друга и определять, избегая двусмыслен-ностей, процессы или порядок действий, применяемый в рамках организационной процедуры или рабочей инструкции [4,8].


8

В настоящее время процессный подход используется для управления ин-формационной работой аптеки в организа-ции здравоохранения [3], при разработке фармакотерапевтических рекомендаций по применению лекарственных средств с це-лью повышения эффективности их исполь-зования [9], при разработке системы ме-

неджмента качества в аптечной организа-ции [10].

Применение процессного подхода в управлении аптечной организацией позво-ляет снизить издержки обращения, повы-сить рентабельность и управляемость, уменьшить влияние человеческого фактора [3].

Рисунок 1 – Система процессов предприятия

Рисунок 2 – Концептуальная схема управления процессом

Выходы процесса

Входы процесса

Отчетность по процессу

Ресурсы

Владелец процесса

Управляющее воздействие

Информация о процессе

Цели процесса

Информация от клиентов процесса

Бизнес-процесс

Организация в целом

Выходы Входы

Границы структурных подразделений


9

ГД - генеральный директор, Р – руководитель, ВП - владелец процесса, А - средства выполне-

ния бизнес-процесса: документация, регламентирующая ход процесса, Б - средства управления ре-сурсами процесса: документация, регламентирующая управление ресурсами.

Рисунок 3 – Схема системы управления предприятием, основанная на процессном подходе к

управлению

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Современная теория менеджмента предполагает переход от управления, ори-ентированного только на финансовые по-казатели, к системному (интегрированно-му) управлению организациями. В стан-дартах серии ISO 9000 сделан акцент на процессный подход к организации и управлению работами, главная цель кото-

рого - избавиться от разобщенности, не-эффективности и внутренних конфликтов, присущих многим функциональным ие-рархическим организациям. Перенос цен-тра тяжести с функции на процесс интег-рирует все действия (операции), предпри-нимаемые организацией для удовлетворе-ния данного конкретного потребителя или данного сегмента рынка.

ГД

14 13 12 11 10

Ресурсы БП (Б)

ВП

Р

Бизнес-процесс (А)

5 3 24

9 8 7 6

1

Входы БП

Выходы БП

… …

Ресурсы БП (Б)

ВП

Р

Бизнес-процесс (А)

5 3 2 4

9 8 7 6

1

Входы БП

Выходы БП


10

SUMMARY

L. V. Zharkov THE PROCESS APPROACH IN

MANAGEMENT OF THE CHEMIST'S ORGANIZATION

In the article description of different approaches to organization management is given. The special attention is paid to the process approach, advantages of its use are proved. The system approach to allocation of processes of the enterprise and a base tech-nique of management by process are consid-ered.

Key words: process, the process ap-proach, the system approach, management of process.

ЛИТЕРАТУРА

1. Алпатова, Н. Процессный подход как основа ISO 9001:2000 / Н. Алпатова // Журнал «Управление компанией» № 5, 2006 [Электронный ресурс]. – 2006. – Ре-жим доступа: http://www.cfin.ru/about/contacts.shtml. – Дата доступа: 13.09.2010. 2. Дремова, Н.Б. Ситуационный анализ как метод инновационного менеджмента / Н.Б. Дремова, О.А. Умнова, Л.М. Кудякова // Новая аптека. – 2010, №7. – С. 32-37. 3. Устинова, Л.В. Построение модели про-цесса аптечного предприятия / Л.В. Усти-нова, Л.Н. Логунова // Новая аптека. – 2008, №3. – С. 12-18. 4. Неволина, Е.В. Процессный подход к управлению аптекой / Е.В. Неволина, В.Ф. Ломадуров // Российские аптеки. – 2008. – №3. 5. Системы менеджмента качества. Требо-вания: СТБ ИСО 9001-2001. Введ. 26.09.2001. – Мн.: Комитет по стандартиза-ции, метрологии и сертификации при Сове-те Министров Республики Беларусь, 2001. – 26 с. 6. Репин, В.В. Два понимания процессного подхода к управлению предприятием / В.В. Репин // [Электронный ресурс]. – 2008. – Режим доступа: http://quality.eup.ru/DOCUM5/ebp.htm. - Дата доступа: 13.09.2010.

7. Системы менеджмента качества. Основ-ные положения и словарь: СТБ ИСО 9000-2006. Введ. 15.11.2006. – Мн.: Государст-венный Комитет по стандартизации Рес-публики Беларусь, 2006. – 29 с. 8. Брескина, Т.Н. Обеспечение качества медицинских услуг и конкурентоспособ-ности медицинской организации на основе внедрения принципов концепции ТQM (Всеобщего управления на основе качест-ва) // Система менеджмента качества на службе здравоохранения: Материалы Все-российской научно-практической конфе-ренции с международным участием. – Курган. – 2007. – С. 14-15. 9. Стандартизация потребления лекарст-венных средств как способ воздействия на качество и эффективность медицинской помощи / И.А. Наркевич [и др.] // Вестник ВГМУ. – 2003. – Т.2, №1. – С. 5-9. 10. Неволина, Е.В. Система менеджмента качества (СМК) в аптечной организации / Е.В. Неволина // Новая аптека. – 2008, №11. – С. 72-76. Адрес для корреспонденции: 220123, Республики Беларусь, г. Минск, ул. В. Хоружей, 32 А, ЗАО «Максфарма-Балтия». Жарков Л.В.

Поступила 30.08.2010 г. ************************************* В.В. Кугач, Е.Н. Тарасова, Е.В. Игнатьева ХАРАКТЕРИСТИКА ЦЕЛЕВОЙ АУДИТОРИИ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, РЕАЛИЗУЕМЫХ БЕЗ РЕЦЕПТА ВРАЧА Витебский государственный медицинский университет

Проведен анализ факторов,

влияющих на приверженность населе-ния Республики Беларусь к самолечению. Применен метод социологического ис-следования с участием 416 респонден-тов. Показано, что на принятие реше-ния о самостоятельном применении ле-


11

карственных средств значимо влияют пол, социальное положение, затруднение попасть на прием к врачу, частота по-сещений врача и не влияют – возраст, частота посещений аптек, удовлетво-ренность информацией, предоставляе-мой фармацевтическим работником. Раскрыто влияние изучаемых факторов на прием лекарственных средств без на-значения врача в зависимости от воз-раста. В результате проведенного ис-следования установлена целевая аудито-рия потребителей лекарственных средств, применяемых без рецепта вра-ча.

Ключевые слова: самолечение, ле-карственные средства безрецептурного отпуска.

ВВЕДЕНИЕ

Согласно Закону Республики Бела-

русь «О лекарственных средствах» [1], од-ним из необходимых условий обеспечения населения своевременной медицинской помощью является доступность лекарст-венных средств (ЛС). Реализации данного принципа способствует наличие перечня ЛС, реализуемых без рецепта врача, и уча-стие фармацевтических работников в са-молечении пациента.

В последнее время повышается ос-ведомленность населения о способах лече-ния заболеваний, растет ответственность за свое здоровье. В среднем около четвер-ти всех заболеваний лечится с помощью безрецептурных лекарственных средств [2]. Современный фармацевтический ры-нок характеризуется возрастанием роли ЛС, подлежащих отпуску без рецепта вра-ча [3]. Это также способствует развитию самолечения.

Согласно данным, опубликованным в информационном бюллетене ВОЗ (№ 338, май 2010 г.), более 50% всех ЛС в разных странах мира назначают или реали-зуют ненадлежащим образом. Каждый второй пациент принимает их неправиль-но. Только 30–40% пациентов получают лечение в соответствии с клиническими протоколами. Менее 50% стран на госу-дарственном уровне стимулируют рацио-

нальное применение лекарственных средств. Рациональное использование тре-бует, чтобы больные получали лекарст-венные средства, соответствующие их клиническим нуждам, в дозах, отвечаю-щих их индивидуальным потребностям, на протяжении адекватного промежутка вре-мени и по наименьшей стоимости для них и для общества [4,5]. Наиболее распро-страненные проблемы при применении ле-карственных средств – полипрагмазия, бесконтрольный прием или неправильное назначение антибиотиков, несоблюдение схем лечения, указанных в клинических протоколах.

В связи с этим одним из ключевых мероприятий, способствующих рацио-нальному использованию лекарственных средств, является предоставление населе-нию необходимой информации о лекарст-венных средствах и обучение грамотному их использованию [4,5].

Во всем мире более десяти лет ус-пешно работают лекарственные информа-ционные центры. Приведем ряд примеров. В США они выполняют, в основном, обра-зовательную функцию и существуют на базе университетов. В Великобритании и некоторых других странах Европы лекар-ственные информационные центры распо-лагаются, преимущественно, на базе круп-ных клиник и оказывают помощь боль-ничным формулярным комитетам, врачам. В Израиле такие центры занимаются раз-витием фармацевтической опеки пожилых пациентов. В России (Смоленск) главное направление деятельности лекарственного информационного центра - правильное применение антибиотиков, профилактика развития антибиотикорезистентности. В Астане, на базе Института развития здра-воохранения Министерства здравоохране-ния Республики Казахстан, в 2009 г. начал функционировать лекарственный инфор-мационный центр, главной задачей кото-рого является донесение до населения и медицинской общественности объектив-ной информации о рациональном приме-нении лекарственных средств, основанной на международных стандартах лечения [6]. В Республике Беларусь роль информаци-онного центра по лекарственным средст-


12

вам выполняет РУП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении». Он пре-доставляет сведения о порядке государст-венной регистрации лекарственных средств в нашей стране, требованиях к ре-гистрационному досье, зарегистрирован-ных и снятых с регистрации лекарствен-ных средствах в Республике Беларусь [7].

Цель нашего исследования – вы-явить целевую аудиторию потребителей лекарственных средств, применяемых без назначения врача, в Республике Беларусь.


Для сбора информации о факторах,

влияющих на самолечение населения, на-ми был использован социологический ме-тод исследования (анкетирование). Мини-

мальное число респондентов для получе-ния достоверных данных составляло 384 человека [8]. Исследованием было охваче-но 416 респондентов (67% женщин и 33% мужчин) - население г. Витебска, г. Ново-полоцка, г. Городка.

Проводили анализ влияния на при-верженность населения самолечению сле-дующих переменных: пол, возраст, соци-альное положение, затруднения попасть на прием к врачу, частота посещений врача, частота посещений аптеки, удовлетворен-ность информацией, предоставляемой ра-ботником аптеки при отпуске лекарствен-ных средств без рецепта врача.

Для выявления зависимостей между переменными строили таблицы сопряжен-ности 2х2 (таблица 1).

Таблица 1 – Общая форма таблицы сопряженности размерности 2х2

Переменная X Переменная Y 2 1 Всего

1 a b a+b 2 c d c+d

Всего a+c b+d N Примечание: Переменная X – независимая, Y – зависимая. В качестве зависимой переменной

Y выступала приверженность самолечению. Независимыми переменными X являлись остальные изу-чаемые факторы. «1» и «2» - значения, принимаемые каждой из переменных; a – c – абсолютные час-тоты (число случаев для каждого из возможных сочетаний значений признаков, то есть для сочетаний «1 – 2», «1 – 1», «2 – 2», «2 – 1»); N – общее количество респондентов [9].

Так как изучаемые переменные ис-

ходно были разбиты на большее, чем два, количество категорий, их перегруппиро-вывали, разбивая диапазоны значений на два класса. К одному классу относили рес-пондентов, которые никогда не лечатся самостоятельно, в другом классе объеди-няли анкетируемых, которые лечатся ред-ко, часто, постоянно.

Для определения степени взаимо-связи между переменными использовали критерий χ2 Пирсона и точный критерий Фишера. Критерии применяли с целью проверки гипотезы о независимости фак-торов, по которым построена таблица со-пряженности.

При расчете критерия χ2 Пирсона руководствовались тем, что в двувходовой таблице ожидаемые частоты при гипотезе «между переменными нет зависимости» можно вычислить непосредственно. Две

исследуемые переменные признавали не-зависимыми, когда расслоение наблюде-ний по одному признаку оставалось про-порциональным для разных подгрупп, вы-деленных по другому признаку. Критерий χ2 Пирсона использовали, когда ожидае-мые частоты в ячейках таблицы 2х2 были велики и относительно малы (больше 5). По данному критерию сравнивали наблю-даемые частоты в реальной таблице с ожи-даемыми, рассчитанными при условии не-зависимости табулированных переменных.

Точный критерий Фишера исполь-зовали при рассмотрении всех возможных предельных случаев расположения данных и вычислении вероятности для каждого из них. Точная вероятность для наблюдаемо-го расположения данных или еще менее вероятного задавалась суммой всех таких вероятностей. Если эта сумма имела тен-денцию быть очень малой, то отвергалась


13

гипотеза о независимости переменных. Точный критерий Фишера применяли как при больших, так и при совсем малых час-тотах (5 или меньше) [9,10].

Во всех случаях статистически зна-чимой считали связь при уровне значимо-сти (p), не превышавшем 0,05 (p<0,05). Ре-зультаты анкетирования обрабатывали с помощью программы Statistica 6.0.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ В результате проведенного анализа

установлено, что женщины чаще занима-

ются самолечением (редко, часто или по-стоянно) (90,7%), чем мужчины (83,9%) (рисунок 1). Анализ таблиц сопряженности показал наличие связи между полом и са-молечением населения (по критерию χ2

Пирсона p=0,049, точному критерию Фи-шера p=0,038).

Определено, что возраст значимо не влияет на приверженность самолечению (рисунок 2, по критерию χ2 Пирсона p=0,47, точному критерию Фишера p=0,31).

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

никогда не занимаются занимаются

самолечение респондентов

% респо

ндентов в группе

м

ж

Рисунок 1 – Влияние пола на самолечение респондентов

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100



% респондентов в группе < 20

21 - 30

31 - 40

41 - 50

51 - 60

> 60

Рисунок 2 – Влияние возраста на самолечение респондентов


14

Анализ таблиц сопряженности по-казал влияние социального положения на самолечение (по критерию χ2 Пирсона p=0,027, точному критерию Фишера p=0,026): выявлено, что учащиеся и рабо-тающие (89,6%) по сравнению с пенсионе-

рами и неработающими (80,5%) чаще ле-чатся самостоятельно (рисунок 3). Это, ве-роятно, связано с наличием у двух послед-них категорий населения большего коли-чества свободного времени для посещения врача.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100



% респондентов в группе

учащиеся

работающие

пенсионеры

неработающие

Рисунок 3 – Влияние социального положения на самолечение респондентов Доказано, что затруднение попасть

на прием к врачу также значимо влияет на приверженность самолечению: среди лиц, которые имеют возможность без затрудне-ний посетить врача, к самолечению прибе-

гает 81,7%, а среди тех, кто испытывает такие затруднения, - 90,9% (по критерию χ2 Пирсона p=0,010, точному критерию Фишера p=0,010) (рисунок 4).

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100




да

иногда

нет

Рисунок 4 – Влияние наличия затруднений попасть на прием к врачу на самолечение респондентов


15

Показано, что чем чаще население посещает врача, тем реже прибегает к са-молечению. Среди респондентов, посе-щающих врача 1 раз в месяц, используют самолечение 73,8%, среди посещающих врача 1 раз в полгода и реже – 90,4% (ри-сунок 5, по критерию χ2 Пирсона p=0,0003, точному критерию Фишера p=0,0008).

Не выявлено взаимосвязи между приверженностью самолечению и частотой посещения аптеки: практически в равной степени используют самолечение опро-шенные, посещающие аптеку не реже 1 раза в 10 дней (88,8%) и 1 раз в месяц (86,9%) (рисунок 6, по критерию χ2 Пирсо-на p=0,63, точному критерию Фишера p=0,39).

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100



% рес

понд

ентов в груп

пе

1 раз в месяц

1 раз в полгода

1 раз в год

реже 1 раза в год

Рисунок 5 – Влияние частоты посещения врача на самолечение респондентов

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100



% респо

ндентов в группе


1 раз в 10 дней

1 раз в неделю

ежедневно

другое

Рисунок 6 – Влияние частоты посещения аптеки на самолечение респондентов

Выявлено, что только 2,4% опро-шенных не устраивает информация, пре-доставляемая работником аптеки при от-пуске лекарственных средств без рецепта врача. При этом не установлена связь ме-жду частотой самолечения и удовлетво-

ренностью предоставляемой информацей (по критерию χ2 Пирсона р=0,415, точному критерию Фишера p=0,334). 80% респон-дентов, которых не устраивает информа-ция фармацевтического работника аптеки, занимаются самостоятельным лечением.


16

Таким образом, было выявлено, что на приверженность самолечению значимое влияние оказывают пол, социальное поло-жение, наличие затруднений попасть на прием к врачу и частота его посещений респондентами.

Целью следующего этапа нашего исследования было изучить взаимосвязи между возрастом населения и другими факторами, влияющими на самостоятель-ный прием ЛС.

Определено, что в каждой возрас-тной группе преобладали женщины (рису-нок 7). При этом количество женщин в разных возрастных группах значимо не отличалось (по критерию χ2 Пирсона и точному критерию Фишера p>0,05).

Чаще других не испытывали за-труднений попасть на прием к врачу оп-рошенные старше 60 лет (рисунок 8, по критерию χ2 Пирсона p=0,009, точному критерию Фишера p=0,009).

0

10

20

30

40

50

60

70

80

< 20 21 - 30 31 - 40 41 - 50 51 - 60 > 60

возраст респондентов


м

ж

Рисунок 7 – Распределение мужчин и женщин в возрастных категориях респондентов

0,0

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

60,0

70,0

< 20 21 - 30 31 - 40 41 - 50 51 - 60 > 60



даиногданет

Рисунок 8 – Распределение наличия затруднений попасть на прием к врачу в возрастных категориях


17

Данная категория респондентов по-сещала врача чаще других возрастных групп – один раз в месяц (по критерию χ2

Пирсона p=0,0000, точному критерию Фишера p=0,0000). Лица моложе 60 лет посещали врача, как правило, 1 раз в пол-года и реже (рисунок 9). Реже других воз-

растных групп посещали врача анкетируе-мые в возрасте 41 - 50 лет (по критерию χ2

Пирсона p=0,01, точному критерию Фише-ра p=0,006).

Респонденты всех возрастных групп в основном посещают аптеку 1 раз в месяц (рисунок 10).

0

10

20

30

40

50

60

< 20 21 - 30 31 - 40 41 - 50 51 - 60 > 60


% респо

нден

тов в группе


1 раз в полгода1 раз в год

реже 1 раза в год

Рисунок 9 – Распределение частоты посещения врача в возрастных категориях

Рисунок 10 – Распределение частоты посещения аптеки в возрастных категориях

ЗАКЛЮЧЕНИЕ В результате проведенного иссле-

дования установлена целевая аудитория

потребителей лекарственных средств без назначения врача: учащиеся или работаю-щие женщины в возрасте до 60 лет, испы-

0

10

20

30

40

50

60

70

<20 21-30 31-40 41-50 51-60 >60возраст


ежедневно2 раза в неделю1 раз в неделю1 раз в 10 дней1 раз в месяцдругое


18

тывающие затруднения попасть на прием к врачу и посещающие его 1 раз в полгода и реже. Это та аудитория, которой необхо-димо уделять особое внимание при обуче-нии населения рациональному примене-нию лекарственных средств, подлежащих реализации без рецепта врача.

SUMMARY

V.V. Kugach, E.N. Tarasova,

E.V. Ihnatsyeva THE CHARACTERISTIC OF A TARGET

AUDIENCE OF CONSUMERS OF DRUGS SOLD WITHOUT THE RECIPE

OF THE DOCTOR The analysis of the factors influencing

adherence to self-medication of population in Republic of Belarus is resulted. The method of sociological research with participation of 416 respondents is applied. It is shown, that decision-making on self-medication signifi-cantly influence sex, social status, difficulty to get on reception to the doctor, frequency of visiting of the doctor, and does not influence age, frequency of visiting of drugstores, satis-faction of the information given by the phar-maceutical worker. Influence of factors on reception of drugs without prescription of the doctor depending on age is opened. As a re-sult of the carried out research the target audi-ence of consumers of drugs without prescrip-tion of the doctor is established.

Key words: self-medication, OTC-drugs.


1. О лекарственных средствах: Закон Рес-публики Беларусь от 20 июля 2006 г., № 161-З (с изменениями и дополнениями от 15.06.2009) // Национальный реестр право-вых актов Республики Беларусь, 2009 г., № 148, 2/1579. 2. Мнушко, З. Н. Практические аспекты потребительского выбора лекарственных средств / З. Н. Мнушко, И. А. Грекова // Провизор [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.provisor.com.ua/archive/2000/index.php. - Дата доступа: 20.08.2010.

3. Тарасова, Е.Н. Безрецептурные лекарст-венные средства на фармацевтическом рынке Республики Беларусь / Е.Н. Тарасо-ва, В.В. Кугач // Вестник фармации. – 2010. - № 2 (48). – С. 29 – 38. 4. ВОЗ: рациональное применение лекар-ственных средств [Электронный ресурс]. – 2010. – Режим доступа: http://rpt.health-ua.com/. – Дата доступа: 20.08.2010. 5. Рациональное использование лекарст-венных средств: ключевые моменты // Ра-циональная фармакотерапия [Электронный ресурс]. – 2007. - № 1. – Режим доступа: http://www.who.int. – Дата доступа: 20.08.2010. 6. Институт развития здравоохранения [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.dsdi.kz/. – Дата доступа: 23.08.2010. 7. Резолюция VIII съезда фармацевтиче-ских работников Республики Беларусь // Вестник фармации. – 2010. - № 2 (48). - С. 8 – 11. 8. Кокрен, У. Определение объема выбор-ки / У. Кокрен // Методы выборочного ис-следования / У. Кокрен; под ред. А.Г. Вол-кова. – М: Статистика, 1976. – Гл. 3, 4. - С. 64 – 99. 9. Аптон, Г. Анализ таблиц сопряженности / Г. Аптон. – М.: Финансы и статистика, 1982. – 143 с. 10. Девятко, И.Ф. Анализ данных / И.Ф. Девятко // Методы социологического ис-следования / И.Ф. Девятко. – Екатерин-бург, 1998. – 208 с. Адрес для корреспонденции: 210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра организации и экономики фармации с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8 (0212) 24-94-38. Кугач В.В.

Поступила 06.09.2010 г.

*************************************

Вестник фармации №3 (49) 2010

19

ОРГАНИЗАЦИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ДЕЛА ЗА РУБЕЖОМ

Л.В. Жарков ОСОБЕННОСТИ РЕАЛИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ЗА РУБЕЖОМ ЗАО «Максфарма-Балтия», г. Минск

В статье обсуждаются некото-

рые особенности реализации лекарст-венных средств за рубежом. Представ-лены преимущества использования электронных рецептов, позволяющие эффективно обмениваться информаци-ей о лекарственном обеспечении паци-ента между врачом и фармацевтиче-ским работником. Показана возмож-ность выписки рецепта работниками аптек. Также приведены источники фи-нансирования лекарственной помощи населению за рубежом.

Ключевые слова: лекарственное средство, реализация, электронный ре-цепт, страхование.

ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время в здравоохране-нии многих развитых стран активно вне-дряются новые информационные техноло-гии. В США, Канаде, Великобритании, Франции, Австрии и других государствах большое внимание уделяется системам ве-дения электронной медицинской докумен-тации. Например, в Англии существует служба электронных медицинских карт пациентов Национальной системы здраво-охранения, которая дает возможность свя-зать между собой медицинские карты, хранящиеся в разных местах. Каждый ох-ваченный программой гражданин получает памятку с описанием программы по ин-формационным технологиям и ее принци-пов работы. Пациент может на домашнем компьютере просмотреть информацию и внести в нее дополнения, выразить свои пожелания. Кроме того, пациенты дома могут сами измерять артериальное давле-ние и уровень сахара в крови и направлять

результаты по электронной почте своему врачу. При следующем визите к нему па-циент может ознакомиться с обобщенными данными и внести в них изменения [1]. Важное значение имеет электронная служ-ба назначения лекарственных средств вра-чами и передача рецептов фармацевтиче-ским работникам по Интернету.

В некоторых странах существует практика независимого и дополнительного прописывания лекарственных средств фармацевтическими работниками, которая получила наибольшее развитие в Велико-британии [2].

Можно выделить различные источ-ники финансирования лекарственной по-мощи населению за рубежом: государст-венные и местные бюджеты; система со-циального страхования; личные средства граждан. Однако ни в одной из развитых стран указанные системы не представлены в чистом виде [2].

Целью настоящей работы было вы-явление особенностей розничной реализа-ции лекарственных средств за рубежом и характеристика существующих систем компенсации стоимости лекарственных средств.


Объектами исследования являлись публикации, связанные с особенностями реализации лекарственных средств в неко-торых зарубежных странах. Методы – ло-гический анализ и синтез.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Во многих странах уделяется серьез-

ное внимание автоматизации процедуры выписывания и передачи рецептов. Элек-тронный рецепт используют для эффектив-ного обмена информацией по отпуску ле-карственных средств (ЛС) каждому жителю и формирования базы данных об их распре-делении, для последующего анализа и при-нятия административных решений [3].

Электронные рецепты можно запи-сывать в память смарт-карты и распечаты-


20

вать в виде двумерного штрихового кода на бланке рецепта. В аптечной организа-ции происходит автоматическое считыва-ние информации с карты либо штрих-кода и ввод данных в информационную систему аптеки. После оформления отпуска ЛС ав-томатически формируется электронный документ, подтверждающий этот факт, и отсылается в центр обработки данных [3].

Одной из функций электронного рецепта является сбор информации о ле-карственном обеспечении каждого паци-ента. Из организаций здравоохранения со-бирается информация о каждом выписан-ном рецепте, из аптек – о каждом выдан-ном ЛС. Это позволяет сопоставлять дан-ные при дальнейшем анализе и дает воз-можность планировать расходы бюджет-ных средств на лекарственное обеспечение на основе реальных потребностей населе-ния определенного региона. Осуществля-ется контроль обоснованности назначения, отпуска и оплаты ЛС и изделий медицин-ского назначения льготным категориям граждан. При этом уменьшается «бумаж-ная» работа и временные затраты на рабо-ту с рецептами [3].

Это также помогает отслеживать приверженность пациентов терапии. Про-блема невыполнения пациентами врачеб-ных рекомендаций остается в центре вни-мания как исследователей, так и работни-ков практического здравоохранения. За последнее десятилетие достигнут значи-тельный прогресс в понимании механиз-мов развития, принципов диагностики, профилактики и лечения многих заболева-ний. Но эти достижения не в полной мере реализуются в клинической практике. Проблема недостаточной приверженности пациентов лечению особенно актуальна при хронических заболеваниях [4].

В Испании существует система вы-писки рецептов, в основе которой лежит код PDF 417, а также магнитная полоса и линейный штрих-код. Врачи при визите на дом или при приеме в клинике используют портативную систему, состоящую из тер-минала и принтера. При составлении ре-цепта врач считывает информацию с иден-тификационной карточки пациента, на магнитной полосе которой также содер-

жится информация о положенных скидках и бесплатных ЛС. Портативный терминал объединяет эту информацию с предписа-ниями врача и генерирует код PDF 417, содержащий информацию о пациенте и назначениях врача. Затем этот штрих-код прикрепляется к рецепту [5].

В аптеке при покупке ЛС линейный код с его упаковки также прикрепляется к рецепту. Этот рецепт отправляется в мест-ное агентство оплаты льготных рецептов, где сканируются линейный штрих-код и код PDF 417, соединяя всю необходимую информацию о пациенте, враче, аптеке и ЛС, предоставляя пациенту необходимую компенсацию на лечение.

Главным достоинством системы яв-ляется сокращение количества ошибок за счет устранения ручного ввода данных. Кроме того, есть возможность получать всестороннюю информацию о количестве выписываемых ЛС и другую информацию, которая помогает улучшить работу систе-мы в целом. В будущем предполагается сканирование штрих-кодов самими апте-ками, а также рассматривается возмож-ность электронного обмена данными с агентствами оплаты [5].

При взаимодействии врача и фар-мацевтического работника все чаще ис-пользуют Интернет. Например, врач выпи-сывает электронный рецепт и по электрон-ной почте передает его в аптеку. К момен-ту визита пациента рецепт уже обработан и отложен в базу данных, в этой же базе хранятся визуальные данные о пациенте, а также информация о ЛС рецептурного и безрецептурного отпуска, которые тот ра-нее принимал. Система способна прове-рить правильность дозировки и возмож-ность замены назначенного ЛС аналогич-ными ЛС. Подобное взаимодействие спо-собно существенно снизить долю ошибок при выписке рецептов [2].

В США в 2007 г. около 6% врачей, ведущих прием пациентов, выписывали рецепты по электронной почте; в 2008 г. их было 12%, в 2009 г. – 17%. За 2 года число врачей, перешедших на электрон-ную систему выписки рецептов, увеличи-лось с 19 до 103 тысяч. План стимулирова-ния экономики США, принятый конгрес-


21

сом в феврале 2009 г., предусматривает выделение 19 млрд. долл. на развитие ин-формационных технологий в здравоохра-нении, в том числе и выписку электронных рецептов. В значительной степени разви-тию электронной системы выписки рецеп-тов способствует и стартовавшая в 2009 г. под эгидой Medicare (федеральной про-граммы медицинского страхования людей в возрасте 65 лет и старше и инвалидов) программа по поощрению врачей, выпи-сывающих ЛС по электронной почте. По новым правилам программы Medicare вра-чи, которые к 2012 г. не освоят электрон-ную выписку назначений, могут быть ош-трафованы. Согласно данным отчета, опубликованного Американской ассоциа-цией лекарственного обеспечения (PCMA), в течение ближайших 5 лет на электрон-ную выписку рецептов перейдут 75% вра-чей [6]. Самым последним штатом, пере-шедшим на выписку лекарственных средств в электронном виде, стала Аляска, что связано с ее размерами и периферий-ным положением [7].

В декабре 2009 года Министерство социальных дел Эстонии объявило об обя-зательном переходе с 1 января 2010 года на единую систему электронных (диги-тальных) рецептов и отказе от бумажных рецептов. Врач составляет рецепт и от-правляет его в электронном виде по интер-нету в базу данных, к которой аптеки имеют доступ. Информация о приобретен-ных лекарственных средствах затем пере-дается в историю болезни. Фармацевтиче-ский работник при этом не может про-сматривать истории болезней и диагнозы. Планировалось, что с 1 января 2010 г. ре-цепты в бумажном виде выдаваться не бу-дут. Однако в связи со сбоем в системе был продлен период действия бумажных рецептов до 1 марта [8-10], затем до 1 мая 2010 г. [11].

Идея выписывания электронных рецептов очень активно разрабатывается в такой небольшой стране, как Дания, где всего 280 аптек и где до сих пор открытие каждой новой аптеки оформляется указом королевы [2].

Минздравсоцразвития России гото-вит общую концепцию по информатизации

сферы здравоохранения до 2020 года [13]. В 2011 году в России пациентам начнут выписывать электронные рецепты. Лекар-ственные средства можно будет приобре-сти по универсальной электронной карте. Эту систему уже внедрили в Астрахани [13, 14].

В Республике Татарстан Министер-ством здравоохранения совместно с Цен-тром информационных технологий разра-ботан и с 2009 г. также внедрен в практику программный продукт по обмену инфор-мацией о товарных остатках и выписанных льготных рецептах в режиме online между аптечными и медицинскими учреждения-ми. Этот продукт позволил эффективно управлять товарными запасами в аптеках, равномерно распределять ЛС между горо-дами и районами республики. Пациенты могут незамедлительно получать ЛС сразу после выписки льготного рецепта. При выписке льготного рецепта можно прово-дить замену ЛС на синоним с учетом ас-сортимента, имеющегося в аптеках. Суще-ствует возможность оставлять ЛС в аптеке для конкретного пациента [12].

Самым революционным в развитии аптечной службы эксперты считают выпи-сывание лекарственных средств фармацев-тическими работниками. Их знания долж-ны быть использованы на благо пациента в полной степени, а не только при отпуске ЛС. Так считают во многих странах мира. В этом плане больше всего сделано в Ве-ликобритании, где с 2000 г. узаконена практика прописывания ЛС фармацевтами. С 2005 г. было введено независимое про-писывание ЛС благодаря государственной программе «Выбирай здоровье в аптеке – программа для фармацевтического сектора здравоохранения на 2005-2015 гг.». Ново-введение сопровождалось внедрением стандартов и очень серьезной программой обучения кадров с соответствующим уси-лением ответственности, которую наряду с фармацевтами несет профессиональная ассоциация – Королевское фармацевтиче-ское общество.

В Великобритании на сегодняшний день есть независимое прописывание ЛС (его осуществляет врач) и дополнительное прописывание его осуществляют (его осу-


22

ществляют фармацевт, медсестра, акушер-ка). Выписывание ЛС идет в соответствии с планом клинического менеджмента, ко-торый составляет лечащий врач, согласо-вывает с фармацевтом и обязательно с па-циентом. Обычно это применяется при за-болеваниях, требующих долгосрочного лечения: артериальная гипертензия, астма, диабет, некоторые невралгические состоя-ния [2].

Право дополнительного прописы-вания ЛС обязует фармацевта соответство-вать ряду требований: опыт работы (ми-нимум два года практики); соответствую-щее дополнительное обучение; знания в соответствующей области назначения; за-прет на прописывание ЛС самому себе, друзьям и членам семьи; прописывание и отпуск ЛС одним человеком допускается в исключительных случаях.

Определены шесть моделей незави-симого прописывания ЛС фармацевтиче-скими работниками: по определенным со-стояниям по ограниченному формуляру; по всем состояниям по ограниченному формуляру; по специфическим состояниям по полному формуляру; по всем состояни-ям по полному формуляру; различный подход по различным клиническим усло-виям; смешанный подход [2].

Существенное распространение за рубежом получает такая форма обслужи-вания, как отпуск лекарственного средства фармацевтическим работником хрониче-ским больным с долгосрочным рецептом. Однако это практикуется только в тех странах, где серьезно налажено взаимо-действие врача и фармацевта. Исходят из того, что если пациент хронически болен, он регулярно принимает одни и те же ЛС, ему сложно постоянно посещать поликли-нику, затрачивая время и свое, и врача. На основе имеющейся в аптеке информации и долгосрочного рецепта, который есть у па-циента, фармацевт получает право отпус-тить ему ЛС [2].

За рубежом существуют различные источники финансирования лекарственной помощи населению.

В Канаде, Норвегии, Италии, Гре-ции, Португалии и Испании большая часть средств на здравоохранение выделяется из

государственного бюджета и формируется за счет обязательных налогов с доходов населения и предпринимателей. В этих странах здравоохранением управляют пра-вительственные органы, оно контролиру-ется государством. Централизованное фи-нансирование позволяет сдерживать рост стоимости лечения. Такая система обеспе-чивает равные права на получение меди-цинских услуг для всех граждан страны [15].

Преимущественно страховая мо-дель лекарственного обеспечения функ-ционирует в Нидерландах, Австрии, Бель-гии, Швейцарии, Люксембурге, Германии, Франции. Правительство определяет пере-чень основных социальных услуг, которые должны оказываться застрахованным гра-жданам; устанавливает группы населения, которые должны быть застрахованы; опре-деляет порядок оказания медицинской и лекарственной помощи; регулирует вели-чину страхового взноса. При этом взносы указанных категорий плательщиков колеб-лются в различных странах от 4 до 20% общего объема финансовых средств, выде-ляемых на здравоохранение.

В некоторых странах функциони-руют системы социального страхования, но определенную часть медицинских това-ров оплачивают сами застрахованные гра-ждане (в том числе приобретение ЛС, средств реабилитации и др.). Кроме того, действуют различные государственные программы по профилактике заболеваний, таких как атеросклероз, сахарный диабет и др. [15].

Как правило, приоритет при пре-доставлении льгот на лекарственные сред-ства имеют граждане, страдающие тяже-лыми хроническими заболеваниями, тре-бующие постоянной поддерживающей или курсовой лекарственной терапии. Мало-имущих граждан в европейских государст-вах также стремятся освободить от долево-го участия в оплате ЛС. Лица с низкими доходами и пациенты с хроническими за-болеваниями несут ограниченные обяза-тельства по соучастию в расходах на ме-дицинские услуги, в том числе на лекарст-венное обеспечение, или не несут их вовсе.


23

В Бельгии не взимается плата за ме-дицинские услуги и ЛС с граждан, полу-чающих социальные пособия (вдовы, си-роты, пенсионеры и др.). От участия в со-оплате освобождены лица пожилого воз-раста в Великобритании и Австрии, а во Франции долевое участие пациента ис-ключается или сокращается при использо-вании ЛС, выписанных для лечения тяже-лых заболеваний, входящих в определен-ный перечень. В Ирландии выписанные ЛС для лечения инфекционных и некото-рых хронических заболеваний предостав-ляются бесплатно [15].

В Японии и Венгрии выделены со-циальные группы, имеющие право на бес-платное лекарственное обеспечение. В ос-тальных экономически развитых странах (кроме США) существуют только перечни заболеваний, при которых требуется бес-платное лекарственное обеспечение. Во-прос о критериях освобождения пациента от доплаты за ЛС рассматривается очень тщательно. В случае хронических заболе-ваний, опасных для жизни, расходы паци-ентов должны быть полностью компенси-рованы, однако такие пациенты не полу-чают бесплатно другие ЛС, назначаемые для лечения состояний, не относящихся к данному заболеванию [15,16].

В Финляндии, Норвегии и Швеции разработаны сравнительно небольшие спи-ски бесплатных для населения ЛС. Однако затраты на приобретение большинства ЛС лишь частично возмещаются за счет обще-ственных фондов. В Италии ЛС, имеющие статус жизненно важных, предоставляются бесплатно. Выделяют также категорию ЛС, предусматривающую доплату в разме-ре от 30 до 40% стоимости ЛС и группу ЛС, которые полностью оплачиваются па-циентом. Бесплатное обеспечение ЛС ус-тановлено только для лиц, имеющих низ-кие доходы, для многодетных семей, пен-сионеров старше 65 лет и инвалидов. При-быль аптек уменьшается с ростом цены реализуемого ЛС. Это создает стимул для отпуска наиболее дешевых ЛС. [15,17,18].

В Норвегии право на бесплатное или льготное лекарственное обеспечение предоставляется при 36 хронических забо-леваниях. Назначение особо дорогих ЛС

контролируется специальным комитетом. Бесплатно обеспечиваются лица старше 66 лет, при этом годовой лимит на пациента ограничен [15].

В Дании размеры доплаты пациен-тов за амбулаторно назначенные ЛС зави-сят от общей суммы расходов пациента на ЛС за определенный период и составляют 50, 25 или 15%. Хронические больные мо-гут быть полностью освобождены от опла-ты, если их затраты на ЛС достигли опре-деленного уровня в год. Малоимущие мо-гут быть также освобождены от доплаты за ЛС. [18].

В Германии, Нидерландах, Бельгии утверждены «ограничительные списки». В эти списки в первую очередь включены дорогостоящие ЛС, имеющие более деше-вые аналоги, а также ЛС, используемые для самолечения. Затраты на приобретение ЛС, включенных в эти списки, не возме-щаются общественными фондами. В Гер-мании рецептурные ЛС для лечения опре-деленных заболеваний полностью оплачи-ваются для лиц до 18 лет. Безрецептурные ЛС больничные кассы оплачивают для де-тей до 12 лет. [15,18].

В Австралии действует единая сис-тема лекарственного обеспечения. Госу-дарство субсидирует приобретение 75% рецептурных ЛС. Соплатежи населения при этом составляют в среднем 16%. Пе-речень ЛС, отпуск которых застрахован-ному населению компенсируется государ-ством, существует более 30 лет и пере-сматривается один раз в год [15].

В Великобритании от сооплаты ос-вобождены 85% выписываемых нацио-нальной службой здравоохранения наиме-нований ЛС. Во многих случаях плата не взимается за ЛС для детей в возрасте до 16 лет, пожилых людей, лиц с низким уров-нем доходов, лиц с определенными хрони-ческими заболеваниями и за определенные ЛС, например, контрацептивы [15,18].

Во Франции льготы предоставляют-ся по 31 группе заболеваний. ЛС оплачи-ваются за счет страховых компаний и сис-темы социального обеспечения, а карточка медицинского страхования включает ре-цептурные ЛС, которые требуют неболь-шой доплаты. Для снижения расходов на


24

ЛС все чаще наблюдается замена ориги-нальных ЛС генериками, а регулировать стоимость ЛС призвано «базовое ценооб-разование», которое введено в действие в 2005 г. [15,18].

В Канаде предусмотрена частичная оплата лекарственной помощи для нетру-доспособных жителей (6% населения) и для жителей старше 65 лет (12% населе-ния), которые в среднем оплачивают 20% от максимальной стоимости фармацевти-ческих услуг.

Национальный уровень здравоохра-нения Японии – один из самых высоких в мире. В рейтинге ВОЗ Япония признана лидером в борьбе с болезнями и смертно-стью. Медицинская помощь в стране в ос-новном платная, но оплачивается она большей частью через систему медицин-ского страхования. Застрахованные паци-енты оплачивают 10% стоимости лечения, но эта сумма не должна превышать уста-новленного максимума сооплаты. Здесь введена система референтных цен для ЛС, включенных в «положительные» списки ЛС, стоимость которых подлежит возме-щению. Как правило, это ЛС, отпускаемые по рецепту врача. Кроме того, лицам старше 70 лет лекарственная помощь ока-зывается бесплатно.

Таким образом, можно выделить три механизма сооплаты: взимание фикси-рованной суммы, которая составляет лишь часть стоимости ЛС (Германия, Нидерлан-ды, Израиль); оплата определенного про-цента стоимости ЛС (Франция, Дания, Бельгия, Италия и др.); оплата пациентом фиксированной суммы и (дополнительно) определенного процента от стоимости ЛС (Финляндия).

Как следует из вышеизложенного, третий механизм включает в себя два пре-дыдущих.

В этих странах действует принцип государственного регулирования потреб-ления ЛС, приобретаемых бесплатно или со скидкой. При этом ограничивают декре-тированные группы населения; ограничи-вают перечень ЛС, отпускаемых бесплатно или со скидкой; регулируют долевое уча-стие потребителя в оплате ЛС; контроли-руют необходимость бесплатного назначе-

ния ЛС (оптимальный подбор длительно-сти курса лечения, дозирования и кратно-сти назначения ЛС и др.) [15].


Существующая система ведения медицинской и фармацевтической доку-ментации на бумажной основе является слишком громоздкой. Переход к электрон-ным носителям медицинской информации обеспечивает более безопасную и высоко-качественную медицинскую помощь. Вра-чи смогут экономить время и тратить его на общение с пациентом. Иногда фарма-цевтический работник аптеки испытывает затруднения при прочтении содержания рецепта врача, выписанного от руки. Элек-тронный рецепт обеспечивает точность передаваемой в рецепте информации, ее защиту, экономит время врачей и пациен-тов. Однако информационные технологии не исключают специфической опасности – повреждения данных.

В большинстве европейских стран государство берет на себя ответственность за организацию и финансирование лекар-ственной помощи, создавая систему соци-ального страхования. Данная система при-способлена к социальной, экономической и политической ситуации в государстве. Такой подход обеспечивает доступность лекарственной помощи для каждого граж-данина, независимо от его социального статуса и уровня дохода. Добровольное медицинское страхование может успешно развиваться не как альтернатива, а как до-полнение к государственному финансиро-ванию здравоохранения и обязательному медицинскому страхованию.

SUMMARY

L.V. Zharkov FEATURES OF REALIZATION OF

DRUGS ABROAD In the article some features of realiza-

tion of drugs abroad are discussed. Advan-tages of use of the electronic recipes, allowing effectively to communicate about medicinal maintenance of the patient between the doctor and the pharmaceutical worker are presented. Possibility of prescription of drugs by phar-macists is shown. Also sources of financing


25

of the medicinal help to the population abroad are resulted.

Key words: drug, realization, elec-tronic recipe, insurance.

ЛИТЕРАТУРА 1. Лазаренко, А. Бумага уходит в прошлое / А. Лазаренко // Медицинская газета [Электронный ресурс]. – 2009. - №40. – Режим доступа: http://www.mgzt.ru/archive/. – Дата доступа: 18.08.2010. 2. Шевченко, Р. Здоровье по рецепту / Р. Шевченко // Фармацевтическое обозрение [Электронный ресурс]. – 2008. - №12. – Режим доступа: http://rudoctor.net/. – Дата доступа: 18.08.2010. 3. Электронный рецепт [Электронный ре-сурс]. – Режим доступа: http://www.smart-card.hostco.ru/unif/ – Дата доступа: 18.08.2010. 4. Власюк, Т. Приверженность терапии: в поисках улучшения / Т. Власюк // Аптека [Электронный ресурс]. – 2008. - №30 (651). – Режим доступа: http://www.apteka.ua/article/magazine/651. – Дата доступа: 20.08.2010. 5. Процесс выписки рецептов // Между-народный фонд автоматической иденти-фикации [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.fond-ai.ru/art1/art223.html. – Дата доступа: 17.08.2010. 6. Электронные рецепты набирают попу-лярность // Медицинский вестник [Элек-тронный ресурс]. – 2009. - №15 (484). – Режим доступа: http://medvestnik.ru/archive/2009/15/2211.html. – Дата доступа: 18.08.2010. 7. Электронные рецепты достали эскимо-сов [Электронный ресурс]. – Режим досту-па: http://telnews.ru/Fedor_Smirnov/c36649/. – Дата доступа: 17.08.2010. 8. Зеленская, Е. С нового года больница выписывает дигитальные рецепты / Е. Зе-ленская [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.inforing.net/publications/infopress/. – Дата доступа: 18.08.2010. 9. Действие бумажных рецептов в Эсто-нии продлено [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://medolaga.ru/. – Дата доступа: 16.09.2010.

10. Электронные больницы, виртуальные врачи [Электронный ресурс]. – Режим дос-тупа: http://m.habrahabr.ru/post/80501/. – Дата доступа: 18.08.2010. 11. Действие бумажных рецептов в Эсто-нии продлено [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.regnum.ru/news/1255880.html. – Дата доступа: 18.08.2010. 12. Татарстан: лекарство сразу после вы-писки рецепта // Новая аптека [Электрон-ный ресурс]. – 2010. - №2. – Режим досту-па: http://www.mcfr.ru/journals/30/257/18401/. – Дата доступа: 16.08.2010. 13. Россиян переведут на электронное медобслуживание и будут лечить «по шаб-лону» [Электронный ресурс]. – 2010. – Ре-жим доступа: http://newsru.com/russia/16mar2010/inetremedy.html. – Дата доступа: 16.08.2010. 14. Россиян будут лечить через Интернет // Аргументы и факты [Электронный ре-сурс]. – 2010. – Режим доступа: http://www.aif.ru/. – Дата доступа: 16.08.2010. 15. Юргель, Н.В. Региональный аспект ле-карственного обеспечения населения / Н.В. Юргель // Здравоохранение [Элек-тронный ресурс]. – 2008. - №2. – Режим доступа: http://www.zdrav.ru/library/publications/detail.php?ID=8365. – Дата доступа: 17.08.2010. 16. Кугач, В.В. Японская фармация: тра-диции и современность / В.В. Кугач, Е.Н. Тарасова // Рецепт. – 2007. - №3. – С. 15 – 22. 17. Кугач, В.В. Здравоохранение и фарма-ция Швеции / В.В. Кугач, В.В. Пахомов // Рецепт. – 2008. – № 5. – С. 18. Лазаренко, А. В интересах пациентов / А. Лазаренко // Медицинская газета [Элек-тронный ресурс]. – 2009. - №58. – Режим доступа: http://www.mgzt.ru/article/1476/. – Дата доступа: 17.08.2010. Адрес для корреспонденции: 220123, Республики Беларусь, г. Минск, ул. В. Хоружей, 32 А, ЗАО «Максфарма-Балтия» Жарков Л.В.

Поступила 30.08.2010 г. *************************************


26

ФАРМАКОГНОЗИЯ И БОТАНИКА

А.А. Погоцкая, Г.Н. Бузук, О.В. Созинов

МОРФОМЕТРИЯ CHELIDONIUM MAJUS L.: ВЗАИМОСВЯЗЬ РАЗМЕРОВ, ФОРМЫ ЛИСТА И СОДЕРЖАНИЯ АЛКАЛОИДОВ И ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ Витебский государственный медицинский университет

Впервые изучена взаимосвязь ме-

жду размерами, дескрипторами формы листьев чистотела большого и накопле-нием в них биологически активных ве-ществ алкалоидов и фенольных соедине-ний. Установлена возможность прогно-зирования морфологических параметров стеблевых листьев чистотела на осно-вании измерений параметров терми-нального фрагмента листовой пластин-ки. Выявлено влияние факторов внешней среды (экологических условий) на морфо-логические параметры стеблевых ли-стьев чистотела с помощью фитоинди-кационного метода. Установлена связь между содержанием отдельных алка-лоидов листьев чистотела большого и экологическими условиями местообита-ний, которые оценивались с использова-нием экологических шкал Д.Н. Цыганова. Данной зависимости не выявлено для фенольных соединений чистотела. В то же время, индикатором содержания фе-нольных соединений могут служить морфологические параметры листьев, взаимосвязь с которыми установлена также и для сангвинарина, который, в отличие от основного алкалоида копти-зина, является минорным среди алка-лоидов чистотела.

Ключевые слова: чистотел боль-шой, листья, морфометрия, алкалоиды, фенольные соединения, экологические шкалы.

ВВЕДЕНИЕ

Изучению влияния различных эко-логических факторов на морфологию и

анатомию листьев посвящено большое ко-личество работ [1-7]. Известно, что коли-чественные признаки листьев могут слу-жить для оценки сходства и различий эко-лого-ценотических режимов местообита-ний [8,9], индикатором изменения условий произрастания [10] и являться критерием эффективности действия того или иного фактора на продуктивность растений [11]. Экологические условия влияют на содер-жание в различных органах и структурах растений, в том числе и в листьях, различ-ных биологически активных веществ (фе-нольных соединений, алкалоидов, терпе-ноидов и других) [12-16].

Однако взаимосвязи между морфо-логическими параметрами листьев (длина, ширина, площадь, периметр, форма) и на-коплением в них различных групп вторич-ных соединений практически не изучены. Этому вопросу посвящены единичные ис-следования [17,18]. Изучение данной зави-симости представляет большой интерес для фармацевтической практики: на основе видимых и определяемых в полевых усло-виях морфологических признаков можно прогнозировать содержание биологически активных веществ в лекарственных расте-ниях. Данный подход предполагает воз-можность внедрения в практику дистанци-онных методов оценки качества лекарст-венного растительного сырья, а также по-зволяет проводить масштабное изучение качества лекарственного сырья (хемотак-сация) с целью выявления популяций с наиболее высоким содержанием дейст-вующих веществ без проведения длитель-ных, трудоемких и дорогостоящих анали-зов.

Важным этапом данных исследова-ний является разработка методических подходов: методики взятия репрезентатив-ных образцов, в наибольшей степени от-ражающих влияние экологических усло-вий на форму и размеры листьев отдель-ных особей и ценопопуляции в целом изу-чаемого вида. Разработанная методика должна быть нетрудоемкой и легко вы-полнимой в полевых условиях.


27

Проведенные ранее исследования [19-22] позволили нам впервые установить взаимосвязь между размерами, дескрипто-рами формы листьев брусники (Vaccinium vitis-idaea), черники (Vaccinium myrtillus), сабельника болотного (Comarum palustre) и накоплением в них различных групп фе-нольных соединений. Обнаружено, что за-висимости содержания различных групп фенольных соединений от исследованных параметров листьев имеют в основном не-линейный характер с общей тенденцией максимального накопления указанных со-единений в субоптимальных условиях произрастания, способствующих форми-рованию относительно небольших по раз-меру листьев.

Чистотел большой Chelidonium ma-jus является ценным лекарственным расте-нием, сырье которого широко использует-ся в официнальной и народной медицине. Основными действующими веществами чистотела являются алкалоиды, которые представлены соединениями с различной химической структурой и фармакологиче-ской активностью. В то же время, в науч-ной литературе встречаются данные, со-гласно которым высокая ранозаживляю-щая активность в сочетании с противовос-палительным действием определяется на-личием в чистотеле большом фенольных соединений, в частности, флавоноидов [23].

Целью данной работы является ус-тановление значимых взаимосвязей между морфологическими параметрами листьев чистотела большого Chelidonium majus (Papaveraceae) и накоплением в них алка-лоидов и фенольных соединений на эколо-го-ценотических градиентах.


В отличие от исследованных нами ранее брусники и черники, для которых характерны цельные листья, у чистотела большого листья непарно перистораздель-ные, с непостоянным числом сегментов. Сегменты листьев округлые или яйцевид-ные, в основании с добавочной лопастью в виде ушка, низбегающие на ось листа, крупно- и неравно-округло-зубчатые, цельные или иногда с нижней стороны

надрезанные. Конечный фрагмент листа крупнее и шире боковых, более или менее глубоко надрезанный на три доли [24]. От-дельные фрагменты листа зачастую накла-дываются друг на друга, что затрудняет и усложняет проведение измерений. Поэто-му возникла необходимость в модифика-ции методики фиксации образцов.

В качестве индикаторного нами вы-браны терминальные (конечные) фрагмен-ты наиболее развитого стеблевого листа чистотела большого (рисунок 2), собран-ного в фазу начала цветения (май-июнь), а также розеточного листа (рисунок 3), взя-того в период вторичного отрастания (сен-тябрь). Подобный подход с использовани-ем вместо целого листа его частей приме-нялся ранее при разработке недеструктив-ных методик оценки площади листьев раз-личных видов и сортов клевера [25-30].

На пробных площадях, заложенных в различных биотопах окрестностей г. Ви-тебска, случайным образом срезали 30-40 наиболее развитых стеблевых или розе-точных листьев чистотела, закладывали во временный гербарий, в тот же день дос-тавляли в лабораторию и сканировали (сканер EPSON Perfection 1270, RGB, 24 bit, 150 dpi). Далее полученные изображе-ния обрабатывали с помощью программы ImageJ ver. 1.42G (http://rsbweb.nih.gov/ij).

Определяли площадь, периметр и длину листа целиком, а также морфомет-рические параметры терминального фраг-мента, в основе определения которых ле-жит оценка параметров его контура [31-32], в том числе: Area – площадь контура, мм2; Perimeter – периметр контура, мм; MinR – радиус вписанной в контур окруж-ности, мм; MaxR – радиус окружности, описанной во-круг контура, мм; Feret – наибольшая длина контура = AC (ри-сунок 1), мм; Breadth – наибольшая ширина контура = BD (рисунок 1), мм; CHull – периметр выпуклого многоугольни-ка, описанного вокруг контура, мм; CArea – площадь выпуклого многоугольни-ка, описанного вокруг контура, мм2;


28

MDCRadius – минимальный радиус окруж-ности, описанной вокруг контура, мм; AspRatio: AspRatio = Feret/ Breadth; Circ: Circularity = 4*Pi*Area/Perimeter; Pi=π; Roundness: Roundness = 4*Area/(Pi*Feret^2); AreaEquivD: Area Equivalent Diameter = sqrt ((4/Pi)*Area); PerimEquivD: Perimeter Equivalent Diameter = Area/Pi; EquivEllipseAr: Equivalent Ellipse Area = (Pi*Feret*Breadth)/4; Compactness: Compactness = sqrt((4/Pi)*Area)/Feret; Solidity: Solidity = Area/ConvexArea;

Concavity: Concavity = ConvexArea-Area; Convexity: Convexity = ConvexHull/Perimeter; Shape: Shape = Perimeter^2/Area; RFactor: RFactor = ConvexHull/(Feret*Pi); ModRatio: Modification Ratio = (2*MinR)/Feret; Sphericity: Sphericity = MinR/MaxR; ArBBox: ArBBox = Feret* Breadth; Rectang: Rectangularity = Area/ArBBox; Topangl – угол BCD (рисунок 1); Rightangl – угол CDA (рисунок 1); Botonangl – угол BAD (рисунок 1); Leftangl – угол ABC (рисунок 1).

AC – наибольшая длина контура; BD – наибольшая ширина контура. Рисунок 1 – Схема измерения некоторых параметров терминального фрагмента листа

чистотела большого

Одновременно с взятием образцов для морфометрии отбирали образцы, со-стоящие из 30-40 листьев, для фитохими-ческого анализа, которые подвергали есте-ственной сушке в тени. Образцы до анали-за хранили в бумажных пакетах. За день-два до проведения анализа листья измель-чали на кофемолке до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями 0,5 мм. Определение содержания различных групп фенольных соединений и алкалои-

дов проводили спектрофотометрически или с помощью ВЭЖХ [19-22,33].

В каждом биотопе проводили геобо-танические описания с учетом обилия всех видов высших растений. Для характери-стики экологических условий местообита-ний чистотела большого использовали ав-торский фитоиндикационный метод на ос-нове регрессионного анализа с использо-ванием диапазонных экологических шкал Д.Н. Цыганова [34-36]. Определяли сле-дующие экологические факторы:

Термоклиматический TM Континентальности климата KN Аридности/гумидности климата OM Криоклиматический CR Увлажнения почв HD Трофности почв TR Богатства почв азотом NT Кислотности почв RC Освещенности/затенения LC Переменности увлажнения почв FH


29

Для установления роли факторов внешней среды в изменчивости морфоло-гических параметров терминального фраг-мента стеблевых листьев чистотела боль-шого нами был применен дисперсионный анализ. Силу влияния экологических фак-торов (µ) на параметры листьев чистотела определяли по формуле:

µ = 1-(Dz/Dy) ((N-1)/(N-a))

Dz = дисперсия, вызванная случайными факторами (остаточная);

Dy = дисперсия общая; N = общее количество исследованных

листьев - 279;

a = общее количество исследованных це-нопопуляций - 10.

Статистическую обработку данных проводили методами корреляционного и регрессионного анализа с использованием пакетов программ Matlab 7 и Excel 2007 и приложения XLStats [37].


На первом этапе определяли связь

параметров терминального фрагмента лис-товой пластинки с параметрами целого листа (рисунки 2-3). Полученные данные представлены в таблицах 1-2.

Рисунок 2 – Стеблевой лист чистотела большого, его контур и терминальный фрагмент Таблица 1 – Корреляционная матрица морфологических параметров терминального фраг-

мента и целого стеблевого листа чистотела большого

Параметры Площадь Периметр Длина Площадь фрагмента

Периметр фраг-мента

Площадь Периметр 0,97 Длина 0,92 0,93 Площадь фрагмента 0,95 0,90 0,84

Периметр фрагмента 0,90 0,88 0,77 0,96

Длина фраг-мента 0,94 0,90 0,83 0,97 0,97

Примечание: полужирным шрифтом здесь и далее выделены значения коэффициентов линей-ной корреляции, достоверные на 0,05 и более высоких уровнях.


30

Рисунок 3 – Розеточный лист чистотела большого, его контур и терминальный фрагмент

Таблица 2 – Корреляционная матрица морфологических параметров терминального фраг-

мента и целого розеточного листа чистотела большого

Параметры Площадь Периметр Длина Площадь фрагмента

Периметр фрагмента

Площадь Периметр 0,95 Длина 0,95 0,99 Площадь фрагмента 1,00 0,95 0,95

Периметр фрагмента 0,95 1,00 0,99 0,95

Длина фраг-мента 0,95 0,99 1,00 0,95 0,99

Отмечены достоверные линейные

связи параметров терминального фрагмен-та листовой пластинки с такими же пара-метрами цельного листа как стеблевого

(r=0,77-0,97), так и розеточного (r=0,95-1), при более высокой степени связи части и целого у розеточных листьев (таблицы 1-2, рисунок 4).

0

5000

10000

15000

20000

25000

30000

0 2000 4000 6000 8000

Площадь фрагмента листа, мм2

Площадь целого

листа

, мм

2

0

50

100

150

200

250

300

0 50 100 150

Длина фрагмента листа, мм

Длина

целого листа,

мм

Рисунок 4 – Взаимосвязь параметров целого стеблевого листа и его терминального

фрагмента


31

Отсюда следует возможность про-гнозирования параметров целого листа пу-тем оценки параметров его терминального фрагмента (fr).

Это позволяет предложить регрес-сионные уравнения для расчета таких не-

линейных параметров листьев, как пло-щадь и периметр на основании вариантов измерений их длины и ширины (рисунок 2) с достаточно высокой точностью (коэффи-циент детерминации - R2 = 0,95-0,98).

Уравнение регрессии R2

Area = -860,115 + 3,791 Area fr 0,98 Area = -2388,617 + 30,538 Perim fr 0,95 Area = -8069,179 + 234,895 L fr 0,96 Perim = 315,505 + 0,465 Area fr 0,98 Perim = 79,298 + 3,883 Perim fr 0,97 Perim = -578,788 + 28,952 L fr 0,97 L = 50,68 + 0,032 Area fr 0,98 L = 40,526 + 0,25 Perim fr 0,96 L = -11,563 + 2,004 L fr 0,97 Обозначения: L – длина целого листа, L fr – длина фрагмента листа, Perim – периметр.

Таким образом, существует возмож-

ность прогнозировать с высокой долей дос-товерности морфологические параметры стеблевых листьев чистотела большого на основании измерений параметров терми-нального фрагмента листовой пластинки.

Для установления диапазона есте-ственной изменчивости параметров тер-минального фрагмента стеблевых листьев чистотела большого проведены измерения морфологических параметров 279 листьев

из 10 ценопопуляций данного вида расте-ния, произрастающих в открытых парцел-лах лесных биотопов (поляны, прогалины и опушки в березняках, сероольшанниках, сосняках в окресностях г. Витебска). Дан-ные биотопы характеризовались влажно-лесолуговым/болотно-лесолуговым слабо-переменным увлажнением на слабокис-лых/нейтральных богатых азотом почвах при открытом/опушечном освещении (таб-лица 3).

Таблица 3 – Градации экологических факторов по Д.Н. Цыганову в исследованных

биотопах Экологические факторы, баллы Биотоп, №

TM KN OM CR HD TR NT RC LC FH 1 5,42 6,92 7,95 8,86 13,17 4,00 7,98 6,25 2,40 5,52 2 7,71 6,81 9,27 8,12 12,20 2,80 9,47 7,50 1,00 5,00 3 6,43 5,96 8,65 8,40 17,17 5,19 10,39 9,41 1,14 5,40 4 7,69 6,51 8,16 8,87 13,95 6,32 10,67 7,71 1,72 5,39 5 6,67 5,92 8,35 9,24 14,07 4,24 9,68 7,65 1,55 4,35 6 8,75 6,52 8,37 10,26 12,13 4,25 8,68 7,12 2,45 4,55 7 7,67 7,78 8,97 9,43 14,23 4,12 7,65 7,79 1,94 5,45 8 6,77 5,17 9,81 9,56 13,71 3,09 7,10 6,17 2,08 5,12 9 8,33 5,43 9,42 9,47 12,71 3,81 8,94 7,67 2,69 4,32 10 7,63 5,99 8,73 9,27 13,66 3,09 8,04 7,68 1,25 4,60 Анализ листьев чистотела показал

дифференциацию степени изменчивости морфологических параметров: небольшая

для некоторых аллометрических: RFactor, Solidity, Compactness, нормальная для всех метрических и большей части аллометри-


32

ческих: Rectang, Leftangl, Roundness, AspRatio, Rightangl, Convexity, Botonangl, Topangl, AreaEquivD, CHul, FeretL, MBCRadius, MaxR, FeretW, Circularity,

ModRatio, Sphericity, Perim, Shape, MinR, PerimEquivD, Area, CArea, ArBBox, Equiv-EllipseAr) и значительная для Concavity = ConvexArea-Area (таблица 4).

Таблица 4 – Изменчивость морфологических параметров листьев (n = 279) исследованных

ценопопуляций чистотела (a = 10) Area Perim MinR MaxR FeretL FeretW CHul

Max 7700,05 782,39 22,34 63,70 121,62 115,74 359,44 Min 1159,28 186,08 0,47 23,03 44,93 38,18 132,49 Mean 3096,10 401,97 14,46 40,04 76,68 65,60 220,26 Std 1077,76 98,45 3,98 7,42 13,91 12,96 39,69 CV 34,81 24,49 27,50 18,53 18,15 19,76 18,02

CArea MBCRadius AspRatio Circularity Roundness AreaEquivD PerimEquivD


EquivEllipseAr Compactness Solidity Concavity Convexity Shape RFactor


ModRatio Sphericity ArBBox Rectang Topangl Rightangl Botonangl Leftangl

Max 0,59 0,59 13954,37 0,70 107,00 126,00 119,00 129,00 Min 0,01 0,01 1744,88 0,50 50,00 77,00 67,00 74,00 Mean 0,38 0,36 5189,38 0,60 74,60 97,76 91,21 96,44 Std 0,09 0,09 1955,61 0,04 11,74 9,08 10,20 8,25 CV 24,21 24,45 37,68 6,12 15,74 9,29 11,19 8,56 Обозначения: Max – максимум, Min – минимум, Mean – средняя арифметическая, Std – стандартное отклонение, CV - коэффициент вариации (%).

Полученные результаты математико-статистического анализа показывают, что все исследованные параметры контроли-руются факторами внешней среды. Сила влияния изменяется от 3 до 54%. При этом в наибольшей степени подвержены влия-нию экологических факторов морфологи-ческие параметры листьев, характеризую-щие их размеры и, в меньшей степени, ха-рактеризующие форму. В целом, наиболь-

шая сила влияния условий произрастания растений выявлена на метрические пара-метры листьев (более 50%). Для большин-ства аллометрических составляющих мор-фоструктуры листа отмечена значительно меньшая связь с экологическими режима-ми при минимальной зависимости для уг-лов листа, для которых, вероятно, характе-рен высокий уровень генетического кон-троля (таблица 5).


33

Таблица 5 – Влияние факторов внешней среды на морфологические параметры терминально-го фрагмента стеблевого листа чистотела большого (p < 0,05)

Параметр µ F Параметр µ F Area 0,51 32,54 Compactness 0,26 11,91 Perim 0,41 22,10 Solidity 0,24 10,64 MinR 0,39 20,62 Concavity 0,34 17,15 MaxR 0,53 36,38 Convexity 0,33 16,43 FeretL 0,54 37,58 Shape 0,26 11,97 FeretW 0,45 26,37 RFactor 0,27 12,17 CHul 0,52 34,28 ModRatio 0,17 7,46 CArea 0,48 30,05 Sphericity 0,16 7,09 MBCRadius 0,54 37,09 ArBBox 0,48 29,14 AspRatio 0,30 14,16 Rectang 0,19 8,11 Circularity 0,37 18,89 Topangl 0,19 8,19 Roundness 0,26 11,98 Rightangl 0,10 4,42 AreaEquivD 0,53 35,16 Botonangl 0,05 2,65 PerimEquivD 0,51 32,54 Leftangl 0,03 1,94 EquivEllipseAr 0,48 29,14 Обозначения: µ – сила влияния фактора, F – критерий Фишера.

Для оценки связи морфологических

параметров терминального фрагмента стеблевого листа чистотела большого с ко-личественным содержанием алкалоидов нами применен регрессионный анализ при аппроксимации зависимостей полиномом 1-2 степени (таблицы 6-8). С параметрами терминального фрагмента стеблевого лис-

та чистотела, характеризующими как его размеры, так и форму, достоверно связано содержание сангвинарина и, в некоторой степени, хелидонина (таблица 6). Для ос-тальных алкалоидов чистотела большого (коптизина, берберина, хелеритрина) таких зависимостей не выявлено.

Таблица 6 – Связь морфологических параметров терминального фрагмента стеблевого листа

чистотела большого с содержанием в них сангвинарина Параметр a2 a1 a0 R2 pval pvala2 pvala1 pvala0

Area -0,68155 104,9533 -537,927 0,55 0,06 0,02 0,02 0,69Perim -0,06645 10,49456 34,26256 0,77 0,01 0,00 0,00 0,68MinR -0,00135 0,215078 6,582844 0,23 0,41 0,22 0,20 0,27MaxR -0,00518 0,809932 11,57494 0,64 0,03 0,01 0,01 0,21FeretL -0,00977 1,536306 22,30301 0,64 0,03 0,01 0,01 0,19FeretW -0,00795 1,206987 24,96758 0,56 0,06 0,02 0,02 0,13CHul -0,02744 4,270639 71,25624 0,63 0,03 0,01 0,01 0,15CArea -0,86111 132,9441 -890,752 0,59 0,04 0,02 0,02 0,57MBCRadius -0,00493 0,773973 11,36736 0,64 0,03 0,01 0,01 0,19AspRatio -1,1E-05 0,002663 1,039085 0,34 0,24 0,62 0,44 0,00Circularity 3,26E-05 -0,00552 0,455263 0,88 0,00 0,00 0,00 0,00Roundness 2,11E-05 -0,00375 0,804954 0,65 0,03 0,04 0,02 0,00AreaEquivD -0,00707 1,095924 23,68382 0,58 0,05 0,02 0,02 0,10PerimEquivD -0,21694 33,40766 -171,227 0,55 0,06 0,02 0,02 0,69EquivEllipseAr -0,97049 149,0413 -1032 0,57 0,05 0,02 0,02 0,57Compactness 1,28E-05 -0,00228 0,899852 0,63 0,03 0,05 0,03 0,00


34

Solidity 1,4E-05 -0,00233 0,923441 0,68 0,02 0,01 0,01 0,00Concavity -25,0614 3906,694 -49244,1 0,74 0,01 0,00 0,00 0,16Convexity 2,86E-05 -0,00484 0,739089 0,84 0,00 0,00 0,00 0,00Shape -0,00622 1,028503 16,80128 0,85 0,00 0,00 0,00 0,03RFactor 3,53E-06 -0,00076 0,951957 0,32 0,26 0,52 0,38 0,00ModRatio 1,62E-05 -0,00252 0,465164 0,15 0,57 0,32 0,31 0,00Sphericity 1,63E-05 -0,00248 0,445976 0,16 0,53 0,28 0,28 0,00ArBBox -1,23567 189,7652 -1313,98 0,57 0,05 0,02 0,02 0,57Rectang 1,35E-05 -0,00205 0,668361 0,65 0,03 0,01 0,01 0,00Topangl 0,000421 -0,18946 87,23422 0,58 0,05 0,80 0,47 0,00Rightangl -0,00137 0,237523 88,73812 0,25 0,36 0,29 0,24 0,00Botonangl 0,000125 0,04735 86,45321 0,40 0,16 0,92 0,80 0,00Leftangl 0,000821 -0,09723 97,72145 0,29 0,30 0,32 0,44 0,00Обозначения (здесь и далее): a2, a1, a0 – коэффициенты уравнения полинома (Y = a2 X2 + a1X +a0), R2 - коэффициент детерминации, Pval – уровень достоверности коэффициента детерминации, Pvala0, Pvala1 и Pvala2 - уровень достоверности коэффициентов полинома a0, a1 и a2, соответственно. Полу-жирным шрифтом отмечены достоверные связи параметра с содержанием БАВ.

Выявлена достоверная связь морфо-

логических параметров терминального фрагмента стеблевого листа чистотела большого с содержанием в них хелидонина:

Topangl = 0,013444*X2– 0,97228*X + 87,55955, R2 = 0,64;

Botonangl = – 0,00753*X2 + 0,562932*X + 83,63141, R2 = 0,59.

Полученные данные по чистотелу в значительной степени отличаются от по-лученных ранее данных по бруснике, чер-нике и сабельнике болотном при оценке связей морфологических параметров и различных групп фенольных соединений [19-22]. В связи с этим, было не исключе-но, что индикаторное значение морфоло-гических параметров терминального фраг-мента стеблевого листа чистотела имеет место лишь в отношении количественного содержания фенольных соединений. Для проверки предположения такого рода ли-стья чистотела были дополнительно про-анализированы на содержание суммы фе-нольных соединений и флавоноидов, а по-лученные результаты подвергнуты регрес-сионному анализу. Отмечено, что значи-тельное число морфологических парамет-ров терминального фрагмента стеблевых листьев чистотела связано с содержанием суммы фенольных соединений и флаво-ноидов (таблицы 7,8).

Таким образом, морфологические параметры листьев чистотела могут слу-

жить индикатором содержания фенольных соединений и, в меньшей степени, сангви-нарина, который, в отличие от основного алкалоида листьев данного растения - коп-тизина, является минорным среди соеди-нений данного класса [32].

Следующий этап работы нами предпринят для выявления возможных связей экологических условий с содержа-нием в листьях чистотела большого раз-личных по химическому строению алка-лоидов. С этой целью регрессионному анализу нами подвергнуты данные по со-держанию алкалоидов и экологических ус-ловий местообитаний чистотела большого, полученные с помощью экологических шкал Д.Н. Цыганова.

В результате математического ана-лиза данных выявлено, что существуют сильные и высоко достоверные связи меж-ду содержанием в листьях чистотела большого хелеритрина, влажностью и ки-слотностью почвы (рисунки 5, 6), содер-жанием коптизина и трофностью почвы (рисунок 7). Что касается остальных алка-лоидов чистотела большого, а также сум-мы фенольных соединений, то связей меж-ду их содержанием в листьях чистотела и экологическими условиями местообитаний не выявлено, что обосновывает проведение дальнейших исследований в более контра-стных экологических условиях и на уровне отдельных фенольных соединений.


35

Таблица 7 – Связь морфологических параметров терминального фрагмента стеблевого листа чистотела большого с содержанием в них суммы фенольных соединений

Параметр a1 a0 R2 pval pvala1 pvala0 Area -92,9784 4568,158 0,41 0,04 0,04 0,00Perim -7,97139 536,6259 0,42 0,04 0,04 0,00MinR -0,27143 18,68628 0,34 0,08 0,08 0,00MaxR -0,72602 51,71174 0,49 0,02 0,02 0,00FeretL -1,35216 98,48119 0,48 0,03 0,03 0,00FeretW -0,9959 81,65558 0,36 0,06 0,06 0,00CHul -3,62834 278,7879 0,44 0,04 0,04 0,00CArea -116,501 5573,685 0,44 0,04 0,04 0,00MBCRadius -0,6779 49,61124 0,47 0,03 0,03 0,00AspRatio -0,00356 1,2357 0,11 0,35 0,35 0,00Circularity 0,003199 0,188632 0,22 0,17 0,17 0,00Roundness 0,00365 0,592495 0,38 0,06 0,06 0,00AreaEquivD -0,93569 76,76666 0,40 0,05 0,05 0,00PerimEquivD -29,596 1454,09 0,41 0,04 0,04 0,00EquivEllipseAr -132,623 6207,96 0,44 0,04 0,04 0,00Compactness 0,00224 0,770205 0,37 0,06 0,06 0,00Solidity 0,001472 0,811326 0,23 0,16 0,16 0,00Concavity -3283,11 140342 0,50 0,02 0,02 0,00Convexity 0,002559 0,509665 0,18 0,22 0,22 0,00Shape -0,55756 64,71205 0,21 0,18 0,18 0,00RFactor 0,001179 0,896016 0,20 0,19 0,19 0,00ModRatio -4,7E-05 0,378452 0,00 0,98 0,98 0,00Sphericity 0,000123 0,360314 0,00 0,96 0,96 0,00ArBBox -168,861 7904,22 0,44 0,04 0,04 0,00Rectang 0,001573 0,573877 0,36 0,06 0,06 0,00Topangl 0,456459 67,01954 0,20 0,19 0,19 0,00Rightangl -0,23622 102,0841 0,17 0,24 0,24 0,00Botonangl -0,2242 95,08837 0,12 0,32 0,32 0,00Leftangl -0,0022 95,90253 0,00 0,99 0,99 0,00Обозначения: полужирным шрифтом отмечены достоверные связи параметра с содержанием БАВ.

Таблица 8 – Связь морфологических параметров терминального фрагмента стеблевого листа

чистотела большого с содержанием в них суммы флавоноидов Параметр a1 a0 R2 pval pvala1 pvala0

Area -357,498 3942,38 0,39 0,06 0,06 0,00Perim -30,1417 481,7232 0,38 0,06 0,06 0,00MinR -1,06492 16,91196 0,33 0,08 0,08 0,00MaxR -2,77851 46,79325 0,45 0,03 0,03 0,00FeretL -5,26299 89,53848 0,45 0,03 0,03 0,00FeretW -3,72923 74,70627 0,32 0,09 0,09 0,00CHul -13,938 254,3364 0,41 0,05 0,05 0,00CArea -447,805 4789,253 0,40 0,05 0,05 0,00MBCRadius -2,62294 45,08935 0,44 0,04 0,04 0,00AspRatio -0,01747 1,221115 0,17 0,24 0,24 0,00


36

Circularity 0,011895 0,211154 0,19 0,20 0,20 0,00Roundness 0,015361 0,613793 0,42 0,04 0,04 0,00AreaEquivD -3,595 70,46256 0,37 0,06 0,06 0,00PerimEquivD -113,795 1254,899 0,39 0,06 0,06 0,00EquivEllipseAr -507,656 5309,753 0,40 0,05 0,05 0,00Compactness 0,00946 0,783192 0,42 0,04 0,04 0,00 Solidity 0,005719 0,821096 0,22 0,18 0,18 0,00Concavity -12604,3 118198,5 0,46 0,03 0,03 0,00 Convexity 0,009349 0,5281 0,15 0,27 0,27 0,00 Shape -2,0498 60,72763 0,18 0,22 0,22 0,00RFactor 0,005464 0,901658 0,27 0,12 0,12 0,00ModRatio -0,00084 0,379762 0,00 0,93 0,93 0,00Sphericity -0,00049 0,363522 0,00 0,96 0,96 0,00 ArBBox -646,368 6760,588 0,40 0,05 0,05 0,00 Rectang 0,005528 0,585741 0,28 0,11 0,11 0,00Topangl 2,151499 69,11406 0,28 0,11 0,11 0,00Rightangl -0,87092 100,4022 0,14 0,28 0,28 0,00Botonangl -1,05172 94,04717 0,17 0,23 0,23 0,00Leftangl -0,24129 96,4619 0,03 0,66 0,66 0,00Обозначения: полужирным шрифтом отмечены достоверные связи параметра с содержанием БАВ.

y = 0,0663x2 - 0,4094x - 4,8604R2 = 0,8049

02468

10

12 13 14 15 16 17 18

HD

Che, мг/г

Рисунок 5 – Взаимосвязь между содержанием в листьях хелеритрина и увлажнением почвы

y = 0,6454x2 - 7,7812x + 23,68R2 = 0,7198

0

2

4

6

8

6 7 8 9 10RC

Che, мг/г

Рисунок 6 – Взаимосвязь между содержанием в листьях хелеритрина и кислотностью почвы


37

y = -0,0177x2 - 0,9974x + 14,554R2 = 0,791

6

8

10

12

14

2 3 4 5 6 7

TR

Cop, мг/г

Рисунок 7 – Взаимосвязь между содержанием в листьях коптизина и трофностью почвы


Таким образом, в результате прове-

денных исследований химического соста-ва, морфологических параметров чистоте-ла большого и экологических режимов его местообитаний в окрестностях г. Витебска установлена связь содержания отдельных алкалоидов листьев чистотела большого с экологическими факторами, оценка кото-рых произведена через регрессионный анализ с использованием экологических шкал Д.Н. Цыганова.

Подтверждена обнаруженная ранее на других видах растений связь морфоло-гических параметров (размеров и формы) листьев чистотела большого с накоплени-ем в них различных групп фенольных со-единений.

Наибольшее индикаторное значение для прогнозирования содержания суммы фенольных соединений имеют морфологи-ческие параметры листьев чистотела большого, в то время как для прогнозиро-вания содержания отдельных алкалоидов – экологические условия местообитаний.

SUMMARY

A.A. Pohotskaya, G.N. Buzuk, O.V. Sozinov

THE MORPHOMETRY OF CHELI-DONIUM MAJUS L.: THE INTERRELA-TION OF THE SIZES, FORMS OF THE

LEAVES AND MAINTENANCE OF THE ALKALOIDS AND PHENOLIC COM-

POUNDS

There has been studied for the first time the interconnection between the sizes, leaves form descriptors of the celandine (Chelidonium majus) and accumulation in them of biological active substances of alka-loids and phenolic compounds. The possibil-ity of forecasting of morphological parame-ters of stem leaves of Chelidonium majus on the basis of measurements of parametres of a terminal fragment of a sheet plate is estab-lished. The influence of factors of an envi-ronment (ecological conditions) on morpho-logical parameters of stem leaves of the Chelidonium majus by means of a phytoindi-cator method is revealed. The connection be-tween the maintenance of the separate alka-loids of the leaves of Chelidonium majus and ecological conditions of habitats which were estimated with use of ecological scales of D. N.. Tsyganov is established. It is not revealed the given dependence for the phenolic com-pounds of the Chelidonium majus. At the same time the morphological parameters of leaves of Chelidonium majus can serve as the indicator of the maintenance of the phenolic compounds. This interrelation is also estab-lished for the sangvinarin which unlike the main alkaloid coptisin is the minor among the alkaloids of the Chelidonium majus.

Key words: Chelidonium majus, leaves, morphometry, alkaloids, phenolic compounds, ecological scales.


1. Menadue, Y. Leaf polymorphism in Ranunculus nanus Hook (Ranunculaceae) /


38

Y. Menadue, R.K. Crowden // New Phytol. – 1990. – Vol. 114, N 2. – P. 265-274. 2. Neuffer, B. Leaf morphology in Capsella (Cruciferae): dependency on environments and biological parameters / B. Neuffer // Beitr. Biol. Pflanz. – 1989. – Bd. 64, N 1. – S. 39-54. 3. Jensen, R.J. Detecting shape variation on oak leaf morphology: a comparison of rota-tional-fit methods / R.J. Jensen // Amer. J. Bot. – 1990. – Vol. 77, N 10. – P. 1279-1293. 4. Bentson, G.M. Size structure of populations within populations: leaf number and size in crowned and uncrowned Impatiens pallida in-dividuals / G.M. Bentson, J. Weiner // Oecolo-gia. – 1991. – Vol. 85, N 3. – P. 327-331. 5. Kuiper, P.J.C. Analysis of phenotypic re-sponses of plant to changes in the environ-ment in terms of stress and adaptation / P.J.C. Kuiper // Acad. Bot. neerl. – 1990. – Vol. 39, N 3. – P. 217-227. 6. Lotz, L.A.P Within-population variability in morphology and life history of Plantago major L. ssp. pleiosperma Pilger in relation to environmental heterogeneity / L.A.P. Lotz, H. Olff, P.H. Tienderen // Oecologia. – 1990. – Vol. 84, N 3. – P. 404-410. 7. Гамалей, Ю.В. Сравнительная анато-мия растений в качестве метода оценки изменений среды обитания / Ю.В. Гама-лей, Ц. Шифэвдамба // Методологические вопросы оценки состояния природной сре-ды МНР. – Пущино, 1990. – С. 56-57. 8. Житков, В.С. Значение динамики раз-меров особей Anemone fasciculate для идентификации местообитаний / В.С. Житков // Организация форм охраны объ-ектов природно-заповедного фонда. – М., 1989. – С. 162-167. 9. Пельтек, Л.А. Анализ продукционного процесса брусники в естественных услови-ях произрастания / Л.А. Пельтек, О.П. Черненков // Многоцелевое лесопользова-ние. – М., 1992. – С. 99-104. 10. Валетов, В.В. Биометрические показа-тели листьев ольхи черной, произрастаю-щей в различных по увлажнению место-обитаниях / В.В. Валетов // Ботаника. – Минск: Наука и техника, 1984. – С. 63-64. 11. Липская, Г.А. Морфологические изме-нения растений при оптимизации плодоро-дия дерново-подзолистой почвы путем тор-

фования и землевания / Г.А. Липская, Н.П. Иванов, Н.К. Чертко; под ред. Г.А. Липской // Ботаника. – Минск: Наука и техника, 1984. – Вып. 26. – С. 67-68. 12. Крылова, И.Л. Влияние экологических факторов на содержание действующих ве-ществ в листьях брусники / И.Л. Крылова, Я.С. Трембля // Хим. фарм. журн. – 1976. – № 6. – С. 73-76. 13. Гозин, А. А. Динамика накопления ду-бильных веществ в вегетативных органах брусники в зависимости от почвенно-грунтовых условий / А. А. Гозин // Ботани-ка. – Минск: Наука и техника, 1971. – Вып. 13. – С. 205-208. 14. Бузук, Г.Н. О влиянии микроэлементов на биосинтез алкалоидов / Г.Н. Бузук // Растительные ресурсы. – 1986. – Т. 22, № 2. – С. 272-279. 15. Bennet, B.C. Geographic variation in al-kaloids content of Sanquinaria canadensis (Papaveraceae) / B.C. Bennet, C.R. Bell, R.T. Baulware // Phodora. – 1990. – Vol. 92, N 870. – P. 57-69. 16. Гозин, А.А. Влияние экологических факторов на накопление биологически ак-тивных веществ в бруснике / А.А. Гозин // Экология. – 1972. – № 1. – С. 45 – 47. 17. Крылова, И.Л. Влияние географическо-го и экологических факторов на анатомо-морфологические признаки листьев ба-гульника болотного и связь этих признаков с химическим составом листьев / И.Л. Крылова, Л.И. Прокошева // Растительные ресурсы. – 1980. – Т. 14, Вып. 4. – С. 502. 18. Кузьмичева, Н.А. Корреляционные свя-зи между морфологическими показателями и содержанием флавоноидов в листьях ивы остролистной и ивы трехтычинковой / Н.А. Кузьмичева // 40 лет фармацевтиче-скому факультету: сб. науч. труд., Витебск, 1999 / ВГМУ; редкол.: А.Н. Косинец [и др.]. – Витебск, 1999. – С. 115-126. 19. Бузук, Г.Н. Морфометрия лекарствен-ных растений. 1. Vaccinium vitis-idaea L. Изменчивость формы и размеров листьев / Г.Н. Бузук // Вестник фармации. – 2006. – № 2. – С. 21-33. 20. Морфометрия лекарственных растений. 2. Vaccinium myrtillus L. Взаимосвязь мор-фологических признаков и химического со-


39

става / Г.Н. Бузук [и др.] // Вестник фарма-ции. – 2007. – № 1. – С. 26-37. 21. Морфометрия лекарственных растений. 3. Vaccinium myrtillus L. Взаимосвязь раз-меров, формы и химического состава ли-стьев / Г.Н. Бузук, О.А. Ёршик, Н.А. Кузь-мичева // Вестник фармации. – 2007. – № 1. – С. 26-37. 22. Ершик, О.А. Морфометрия сабельника болотного: взаимосвязь размеров, формы и химического состава листьев / О.А. Ершик, Г.Н. Бузук, О.В. Созинов // Вестник фар-мации. – 2009. - № 1. – С. 13-27. 23. Фомичева, Е.А. Количественное опреде-ление флавоноидов в гомеопатической на-стойке чистотела методом спектрофотомет-рии. Сообщение 2 / Е.А. Фомичева, М.Н. Лякина, З.П. Костенникова // Фармация. – 2001. - № 5. – С. 13-15. 24. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР. Под ред. Чикова П. С. - Мо-сква: ГУГК, 1976 - С. 327. 25. Gamper, H. Nondestructive estimates of leaf area in white clover using predictive for-mulae. The contribution of genotype identity to trifoliate leaf area / H. Gamper // Crop. Sci. – 2005. – Vol. 45. – P. 2552-2556. 26. Black, J.N. Competition between plants of different initial seed sizes in swards of subter-ranean clover (Trifolium subterraneum L.) with particular reference to leaf area and the light microclimate / J.N. Black // J. Agric. Res. – 1958. – Vol. 9. – P. 299-318. 27. Wiersma, J.V. Estimation of leaflet, trifo-liate, and total leaf areas of soybeans / J.V. Wiersma, T.B. Bailey // J. Agron. – 1975. – Vol. 67. – P. 26-30. 28. Variation within white clover (Trifolium repens L.) for phenotypic plasticity of mor-phological and yield related characters, in-duced by phosphorus supply / J.R. Caradus [еt al.] // New. Phytol. – 1993. – Vol. 123. – P. 175-184. 29. Hamilton, N.R.S. The dynamics of Tri-folium repens in a permanent pasture. 1. The population dynamics of leaves and nodes per shoot axis / N.R.S. Hamilton, J.L. Harper // Biol. Sci. – 1989. – Vol. 237. – P. 133-173. 30. Marshall, J.K. Methods for leaf area measurement of large and small leaf samples / J.K. Marshall // Photosynthetica. – 1968. – Vol. 2. – P. 41-47.

31. The School of Dentistry College of Medical and Dental Sciences University of Birmingham [Электронный ресурс] Soft-ware // Birmingham, United Kingdom / Last updated on 10/Jul/2010 – Режим доступа: http://www.dentistry.bham.ac.uk/landinig/software. – Дата доступа: 01.07.2010. 32. Russ, John C. The image processing handbook / by John C. Russ.- 5th ed. – 2007.- CRC Press: Taylor & Francis Group, LLC; Boca Raton London New York. – 817 p. 33. Погоцкая, А.А. Влияние возрастающих концентраций уксусной кислоты на извле-чение алкалоидов из травы чистотела боль-шого – Chelidonium majus / А.А. Погоцкая, Г.Н. Бузук, Н.А. Алексеев // Вестник фарма-ции. – 2009. – № 3. – С. 21-27. 34. Бузук, Г.Н. Фитоиндикация: примене-ние регрессионного анализа / Г.Н. Бузук, О.В. Созинов // Вестник фармации. – 2007. – № 3. – С. 44-54. 35. Бузук, Г.Н. Регрессионный анализ в фитоиндикации (на примере экологиче-ских шкал Д.Н. Цыганова) / Г.Н. Бузук, О.В. Созинов // Ботаника. – Вып. 37. – Минск: Право и экономика, 2009. – С. 356-362. 36. Цыганов, Д.Н. Фитоиндикация эколо-гических режимов в подзоне хвойно-широколиственных лесов / Д.Н. Цыганов – М.: Наука, 1983. – 196 с. 37. Зверев, А.А. Программно-информационное обеспечение исследований растительного покрова: дис. … к. б.н: 03.00.05 / А.А. Зверев. – Томск, 2007. – 268 с. Адрес для корреспонденции: 210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр-т Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра фармакогнозии и ботаники с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8 (0212) 37-09-29. Погоцкая А.А.


*************************************


40

А.А. Погоцкая, Г.Н. Бузук ИЗМЕНЧИВОСТЬ АЛКАЛОИДНОГО СОСТАВА ЛИСТЬЕВ МАКЛЕЙИ СЕРДЦЕВИДНОЙ (MACLEAYA CORDATA) В ПРОЦЕССЕ УСКОРЕННОГО СТАРЕНИЯ Витебский государственный медицинский университет

Использован метод «ускоренного

старения» применительно к расти-тельному сырью с различной первоначальной влажностью для оценки стабильности лекарственного сырья при его хранении. Установлено, что на качественный состав сырья маклейи в процессе ускоренных испытаний влияют содержание влаги в сырье и способ уку-порки образцов. С помощью хромато-графического метода обнаружен не-идентифицированный алкалоид, уста-новлена зависимость его содержания от вышеуказанных факторов. Вместе с тем, содержание основных алкалоидов мак-лейи сердцевидной - сангвинарина и хе-леритрина - существенным образом не изменяется.

Выявлено, что в герметично уку-поренных образцах происходит измене-ние цвета, причем с повышением содер-жания влаги в исходном сырье явления изменения окраски носят более выра-женный характер.

Ключевые слова: маклейя, алка-лоиды, метод ускоренного старения.

ВВЕДЕНИЕ

Лекарственное растительное сырье должно соответствовать всем показателям, предусмотренным в фармакопейной статье в течение определенного для каждого вида сырья срока годности. Между тем, с вре-менем в сырье может происходить ряд из-менений, влияющих на его внешний вид и содержание биологически активных ве-ществ. При хранении на лекарственное растительное сырье влияют различные факторы: внешние – гигиенические (влаж-ность, температура, свет) и природно-климатические (время года, зональность);

внутренние – физико-химические и биоло-гические процессы, протекающие в лекар-ственном растительном сырье.

В настоящее время вопросам изуче-ния устойчивости и повышения стабиль-ности лекарственного растительного сырья (ЛРС) уделяется большое внимание. Как правило, для установления срока годности, условий возможного хранения и примене-ния ЛРС требуется его изучение по всем показателям в течение длительного про-межутка времени (как правило, срок год-ности ЛРС – 2-5 лет). Метод «ускоренного старения» заключается в выдерживании испытуемых образцов при температуре, превышающей его температуру хранения. При этом, подвергая исследуемые объекты воздействию высоких температур в тече-ние некоторого промежутка времени, можно получить достоверную информа-цию об естественных изменениях, которые могут происходить в них на протяжении нескольких лет хранения в стандартных условиях, так как температурный фактор, являющийся активатором процесса старе-ния, наиболее полно освещается в литера-туре. Однако имеющиеся данные посвя-щены в основном изучению стабильности лекарственных средств и продуктов пита-ния [1-5] и практически не освещают дан-ную проблему относительно растительно-го сырья.

Целью настоящей работы является исследование изменчивости алкалоидного состава и цветовых характеристик сырья маклейи сердцевидной при ускоренном старении.


Изучение изменений алкалоидного

состава было проведено при хранении из-мельченного (500) лекарственного сырья маклейи сердцевидной при повышенной температуре (60ºС) в сравнении с исход-ным растительным материалом, хранив-шимся при комнатной температуре. Из-вестно, что показатели стабильности ле-карственных средств определяются их со-ставом, технологией изготовления, а также спецификой упаковочно-укупорочного ма-териала [6].


41

В термостат (температура 60ºC) по-мещали серии порошка листьев маклейи, отличающиеся содержанием влаги (6%, 12%, 20%), которую задавали, прибавляя рассчи-танное количество воды к исходному сырью, высушенному до влажности 4-5%. Первую серию образцов выдерживали в термостате в открытых пенициллиновых флаконах, вто-рая серия была укупорена герметично (рези-новые пробки под обкатку алюминиевыми колпачками). Отобранные пробы после тер-мостатирования исследовали по разработан-ной ранее методике [7].

Качественный состав и количест-венное содержание алкалоидов устанавли-вали методом тонкослойной хроматогра-фии (ТСХ), используя внешний стандарт - раствор сангвиритрина известной концен-трации [9].

Для определения цветовых характе-ристик сырья порошок листьев маклейи помещали в пластиковые чашки Петри диаметром 3 см, разравнивали и слегка уп-лотняли постукиванием по дну чашки, а затем сканировали на планшетном сканере EPSON Perfection 1270 (RGB, 24 bit, 400 dpi) при открытой крышке. Полученные изображения обрабатывали с помощью компьютерной программы Imagej 1.43 (http://rsbweb.nih.gov/ij), используя в каче-стве основной подпрограмму RGB Measure (http://rsbweb.nih.gov/ij/plugins/rgb-measure.html).

Данная подпрограмма выделяет R, G и B в RGB координатах и рассчитывает средние значения интенсивности пикселов в изображении по каждому каналу. Града-ции интенсивности при этом варьируют от 1 до 256 по одному каналу (R, G или B).

Далее полученные цифровые данные по средней интенсивности пикселов в изо-бражении раздельно по R, G и B каналам для различных образцов сырья, подвергну-тых различным видам воздействия, объе-диняли в одну общую матрицу. Затем, ис-пользуя в качестве переменных средние значения для R, G и B каналов в изображе-нии, с одной стороны, и содержание раз-личных алкалоидов в образцах ЛРС, с дру-гой, рассчитывали уравнения регрессии для всех комбинаций значений каналов и содержания алкалоидов, используя для ап-

проксимации зависимостей полином 2-ой степени, позволяющий аппроксимировать как линейные, так и нелинейные зависимо-сти, соответственно. Об адекватности по-лученных уравнений регрессии судили по величине и достоверности коэффициента детерминации (p < 0,05).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Первоначально исследованию под-

верглись пробы, хранившиеся в течение 14 дней с пошаговым интервалом в 3 дня. Од-нако исследования показали, что значитель-ные изменения в сырье происходят при вы-держивании в термостате в течение первых 6 дней, поэтому дальнейшее исследование было направлено на изучение происходящих явлений в исследуемых образцах в течение одной недели с пошаговым интервалом в 1 день.

Полученные данные представлены в таблицах 1-2 (в виде денситограмм) и в таблицах 3-5. Использование внешнего стандарта сангвиритрина позволяет иден-тифицировать сангвинарин и хелеритрин, которые являются основными алкалоида-ми маклейи сердцевидной. Алкалоид 1 об-наруживается на старте во всех пробах. Во всех пробах открытой и закрытой серий также обнаруживается неидентифициро-ванный алкалоид, обозначенный на соот-ветствующих денситограммах как алкало-ид 2. Однако в закрытой серии содержание алкалоида 2, оцененное по высоте и пло-щади его пика на денситограммах, почти в 2 раза ниже, чем в контроле, и его содер-жание остается практически неизменным на протяжении 7 суток. Данное вещество имеет окраску, по которой обнаруживается на хроматограмме в видимом свете, а так-же характерную флуоресценцию в УФ – свете. При обработке хроматограмм моди-фицированным реактивом Драгендорфа данные пятна приобретают характерную окраску, что подтверждает алкалоидную природу неидентифицированного вещест-ва. В контрольных образцах, хранившихся при комнатной температуре в течение 7 суток в обеих сериях (открытой и плотно укупоренной), обнаруживаются 4 основ-ных алкалоида – на линии старта (алкало-ид 1), неидентифицированный алкалоид 2, хелеритрин и сангвинарин (таблица 1).


42

Таблица 1 - Денситограммы извлечений листьев маклейи сердцевидной, выдержанных в термостате (открытая и закрытая серии) при исходном содержании влаги в сырье 6 %

УСЛОВИЯ СТАРЕНИЯ (влага 6 %) Время выдер-живания Открытая серия Закрытая серия

Контроль

4 суток

5 суток

6 суток

7 суток

Примечание: здесь и далее 1 – неидентифицированный алкалоид на старте; 2 – неидентифициро-ванный алкалоид 2; Chel – хелеритрин; Sg – сангвинарин


43

При содержании влаги 12 % алка-лоид 2 практически не обнаруживается в образцах закрытой серии.

При увеличении содержания исход-ной влаги в листьях маклейи сердцевидной до 20% наблюдается аналогичный резуль-тат. На хроматограмме в закрытых пробах практически отсутствует алкалоид 2, в то

время как в открытых пробах данное со-единение обнаруживается даже в видимом свете по его окраске. В контрольных об-разцах, хранившихся при комнатной тем-пературе, как в открытой, так и в закрытой сериях, присутствует данное вещество и обнаруживается соответствующий пик (таблица 2).

Таблица 2 - Денситограммы извлечений листьев маклейи сердцевидной, выдержанных в термостате (открытая и закрытая серии) при исходном содержании влаги в сырье 20 %

УСЛОВИЯ СТАРЕНИЯ Время выдер-живания Открытая серия Закрытая серия

Контроль

4 суток

5 суток

6 суток

7 суток


44

Таким образом, в ходе исследова-ния по ускоренному старению маклейи сердцевидной установлено, что на качест-венный и количественный состав сырья влияет способ укупорки (герметизация), а также содержание исходной влаги. При этом указанные факторы практически не

оказывают влияния на содержание основ-ных алкалоидов маклейи - сангвинарина и хелеритрина, обусловливающих ее анти-микробный эффект [10-12], однако суще-ственным образом изменяют содержание второстепенных (неосновных) алкалоидов (таблицы 3 - 5).

Таблица 3 – Содержание алкалоидов (мг/г) в листьях маклейи сердцевидной, выдержанных в

термостате (открытая и закрытая серии) при исходном содержании влаги в сырье 6 % Открытая серия Закрытая серия Время,

сутки Алк 1 Алк 2 Chel Sg Алк 1 Алк 2 Chel Sg

0 2,94±0,02 1,15±0,04 5,74±0,02 6,32±0,03 3,04±0,13 1,40±0,04 5,97±0,03 6,40±0,02

4 3,07±0,08 1,32±0,01 5,77±0,01 6,48±0,02 3,18±0,09 0,34±0,02 5,98±0,10 6,52±0,05

5 3,09±0,05 1,09±0,06 5,53±0,02 6,16±0,02 2,98±0,15 0,56±0,02 5,53±0,02 6,32±0,06

6 2,57±0,11 1,16±0,02 5,46±0,02 6,15±0,17 2,96±0,07 0,29±0,03 5,21±0,05 6,29±0,05

7 3,75±0,32 0,98±0,06 5,27±0,28 5,96±0,03 2,57±0,04 0,23±0,02 4,79±0,04 6,01±0,01 Таблица 4 – Содержание алкалоидов (мг/г) в листьях маклейи сердцевидной, выдержанных в

термостате (открытая и закрытая серии) при исходном содержании влаги в сырье 12 % Открытая серия Закрытая серия Время,

сутки Алк 1 Алк 2 Chel Sg Алк 1 Алк 2 Chel Sg 0 4,26±0,02 0,94±0,02 5,99±0,02 6,11±0,03 3,64±0,02 - 5,88±0,01 5,94±0,003 4 3,83±0,04 0,96±0,02 5,97±0,01 5,76±0,01 4,54±0,03 - 5,54±0,01 5,76±0,002 5 4,71±0,02 0,98±0,03 6,19±0,02 5,83±0,004 5,29±0,03 - 5,83±0,02 5,60±0,01 6 4,63±0,04 1,19±0,04 6,04±0,02 5,71±0,03 6,09±0,03 - 5,83±0,02 5,51±0,001 7 5,99±0,07 0,70±0,03 5,42±0,05 5,25±0,02 6,37±0,03 - 5,40±0,02 5,34±0,01

Таблица 5 – Содержание алкалоидов (мг/г) в листьях маклейи сердцевидной, выдержанных в

термостате (открытая и закрытая серии) при исходном содержании влаги в сырье 20% Открытая серия Закрытая серия Время,

сутки Алк 1 Алк 2 Chel Sg Алк 1 Алк 2 Chel Sg 0 3,22±0,04 1,14±0,02 6,20±0,04 6,29±0,02 3,36±0,05 0,88±0,01 5,90±0,01 6,25±0,02 4 2,68±0,06 1,12±0,04 6,21±0,04 6,35±0,05 3,40±0,03 0,46±0,06 5,91±0,03 5,96±0,05 5 3,02±0,03 1,30±0,01 6,36±0,02 6,41±0,02 3,67±0,01 0,13±0,06 5,75±0,03 6,12±0,05 6 3,00±0,002 1,34±0,08 6,22±0,01 6,40±0,01 4,04±0,07 0,26±0,02 5,76±0,03 5,99±0,01 7 3,66±0,2 1,19±0,03 6,03±0,02 5,95±0,01 5,02±0,2 0,53±0,04 5,99±0,004 5,79±0,03

При ускоренном старении наблю-

даются изменения в цвете сырья. При этом с увеличением содержания изначальной влаги в сырье с 6 % до 20 % наблюдаются значительные изменения в цвете сырья за-крытой и открытой серии проб, которые можно обнаружить визуально. Так, в за-крытых образцах происходит изменение окраски с первоначальной естественной зеленой на коричневую, причем при 6 % влаги эти изменения незначительны, а при

повышении содержания влаги до 20 % из-менения цвета носят выраженный характер и сырье приобретает контрастную корич-невую окраску. Более точно определить изменения в цвете сырья позволяет прове-дение цветометрического исследования [14]. Полученные значения интенсивности по каждому каналу для закрытой и откры-той серии листьев маклейи с различным содержанием влаги представлены на ри-сунках 1-6.


45

0

20

40

60

80

100

120

140

160

0 2 4 6 8сутки

интенсив

ность

R G B

Рисунок 1 – Зависимости изменения интенсивности цвета в порошке листьев маклейи откры-

той серии (исходное содержание влаги 6 %)

0

20

40

60

80

100

120

140

160

0 2 4 6 8

сутки

интенсивно

сть

R G B

Рисунок 2 – Зависимости изменения интенсивности цвета в порошке листьев маклейи закры-


0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

0 2 4 6 8

сутки

интенсив

ность

R G B

Рисунок 3 – Зависимости изменения интенсивности цвета в порошке листьев маклейи откры-той серии (исходное содержание влаги 12 %)


46

020406080

100120140160180

0 2 4 6 8

сутки

интенсивно

сть

R G B

Рисунок 4 – Зависимости изменения интенсивности цвета в порошке листьев маклейи закры-


0

20

40

60

80

100

120

140

160

0 2 4 6 8сутки

интенсив

ность

R G B

Рисунок 5 – Зависимости изменения интенсивности цвета в порошке листьев маклейи откры-


0

20

40

60

80

100

120

140

0 2 4 6 8

сутки

интенсив

ность

R G B

Рисунок 6 – Зависимости изменения интенсивности цвета в порошке листьев маклейи закры-той серии (исходное содержание влаги 20 %)


47

Как видно из представленных на рисунках 1-6 данных, в ходе ускоренного старения листьев маклейи на фоне различ-ных уровней исходной влажности, а также условий (открытая и закрытая серии) на-блюдаются определенные изменения в средних значениях RGB – каналов. В наи-большей степени эти изменения характер-ны для R и G каналов и менее значитель-ные - для B-канала. Какой либо законо-мерности в характере изменений интен-

сивности RGB – каналов от исходной влажности сырья не прослеживается. Для количественной оценки возможных связей изменения цветовых параметров ЛРС и содержанием в них алкалоидов был прове-ден регрессионный анализ. При этом в ка-честве независимых переменных исполь-зовались средние значения интенсивности каналов. Полученные данные представле-ны в таблице 6 раздельно по вариантам ис-ходного содержания влаги в сырье.

Таблица 6 - Параметры уравнений регрессии зависимостей содержания алкалоидов и цветовых параметров листьев маклейи в ходе ускоренного старения (открытый и закрытый

варианты) при различной исходной влажности. Влажность,% Алкалоид Канал a2 a1 a0 D pval

Открытая серия 6 Chel R -0,00616 1,68717 -109,832 0,95 0,05

20 Алк 2 G 0,002787 -0,61722 34,92414 0,95 0,05 20 Sg R -0,00086 0,207275 -6,02289 0,99 0,01 20 Sg B -0,12163 3,675038 -21,3735 0,99 0,01

Закрытая серия 6 Алк 1 R -0,0178 4,815645 -322,607 0,99 0,01 6 Алк 2 B 0,004012 0,036411 -0,86342 0,96 0,04 6 Sg R -0,01277 3,464254 -228,444 0,97 0,03

12 Алк 2 R 0,000297 -0,06593 3,509066 0,99 0,01 12 Алк 2 G 0,000141 -0,02474 1,025969 1,00 0,00 12 Алк 2 B 0,000222 -0,00879 0,075588 1,00 0,00

Примечание: коэффициенты детерминации (D) и их значимость (pval), коэффициенты уравнений регрессии (a0, a1, a2) при аппроксимации зависимостей полиномом 2-ой степени (Y = a2X2 + a1X + a0).

Достоверная связь цветовых харак-

теристик сырья и содержания алкалоидов имеет место в ограниченном числе случаев (представлены в таблице 6) и в большей степени характерна для неосновных алка-лоидов растения.

Таким образом, в процессе уско-ренного старения сырья с разным содер-жанием влаги наблюдаются различия в скорости и характере протекания процес-сов, приводящих к изменению его свойств.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ В ходе исследования по ускоренно-

му старению маклейи сердцевидной уста-новлено, что на качественный и количест-венный состав сырья влияет способ уку-порки (герметизация), а также содержание исходной влаги, причем указанные факто-ры практически не оказывают влияния на содержание основных алкалоидов маклейи

- сангвинарина и хелеритрина, обусловли-вающих ее антимикробный эффект. Необ-ходимо также отметить, что при ускорен-ном старении наблюдаются визуальные изменения в цвете сырья, что также под-тверждается цветометрическими исследо-ваниями. Данные явления необходимо учитывать при хранении сырья маклейи.

SUMMARY A.A. Pohotskaya, G.N. Buzuk

THE VARIABILITY OF ALKALOIDS STRUCTURE OF LEAVES MACLEAYA

CORDATA IN THE COURSE OF THE AC-CELERATED AGEING

Attempt to use a method of the accel-erated ageing with reference to vegetative raw materials with various initial moisture for an estimation of stability of medicinal raw mate-rials is undertaken at its storage. It is estab-lished, that qualitative structure of raw mate-


48

rials of Macleayae cordata in the course of the accelerated tests is depended from the moisture content in raw materials and from a way of closing of samples. With the help of cromatografic method it is found non-identified alkaloid and it is established that its maintenance depends on the above-stated fac-tors. At the same time, the maintenance of the main alkaloids of Macleayae cordata sangvi-narin and cheleritrin essentially does not change.

It is revealed, that in tightly corked samples there is a colour change, and with moisture content increase in initial raw mate-rials the phenomea of change of colouring have more expressed character.

Key words: Macleaya cordata, alka-loids, method of the accelerated ageing.

ЛИТЕРАТУРА 1. Выбор условий «ускоренного старе-ния» и методов оценки стабильности ин-сулина / П.А. Бабич [и др.] // Хим. - фарм. журнал. – 1976. – № 7. – С. 127 - 130. 2. Губайдуллина, А.А. Метод «ускорен-ного старения» для прогнозирования срока годности стабилизированной формы аль-фа-интерферона / А.А. Губайдуллина, Е.В. Бобкова, А.И. Мелентьев // Труды БГУ. - 2010. – Т.4,вып.2. – С. 1-6. 3. Исследование изменений качества га-лет методом «ускоренного старения» / Л.М.Аксенова [и др.] // Хранение и пере-работка с/х сырья. - 2002. - №4. -С.6-8. 4. Шарафеддинова, А.А Окислительные и гидролитические процессы, протекающие в пралиновых конфетах с заменителями какао- продуктов / А.А. Шарафеддинова // Хранение и переработка с/х сырья. – 2000. – №12. –С.25-28. 5. Школьникова, М.Н. Товароведная ха-рактеристика безалкогольных бальзамов, производимых на основе природного сы-рья Алтая: автореф. дис. …канд. техниче-ских наук: 05.18.15 / М.Н. Школьникова; - Новосибирск, 2006. – 16 с. 6. Временная инструкция по проведению работ с целью определения сроков годно-сти лекарственных средств на основе ме-тода «ускоренного старения» при повы-шенной температуре. - МЗ СССР. И-42-2-82. — М.: 1983. - 13 с.

7. Погоцкая, А.А. Влияние возрастающих концентраций уксусной кислоты на извле-чение алкалоидов из листьев маклейи / А.А. Погоцкая, Г.Н. Бузук , Н.А. Алексеев // Вестник фармации. – 2009. – Т.44, № 2. – С. 16-22. 8. Маклейи листья / Государственная фармакопея Республики Беларусь. Т. 2: Контроль качества вспомогательных ве-ществ и лекарственного растительного сы-рья / Центр экспертиз и испытаний в здра-воохр.; под общ. ред. А.А. Шерякова. - Молодечно: Типография «Победа», 2008. – С. 373-374. 9. Применение сканера и компьютерных программ цифровой обработки изображе-ний для количественного определения сорбированных веществ / Ю.Л. Шишкин [и др.] // Журнал аналитической химии. - 2004. - Т.59, № 2. – С.119 - 124. 10. Сангвиритрин – новый лекарственный растительный препарат антимикробного действия. / С.А. Вичканова [и др.] // Хим. - фарм. журнал. – 1982. – Т.16, № 12. – С. 1515 - 1520. 11. Вичканова, С.А. Клиническое исследо-вание антимикробного растительного пре-парата сангвиритрин / С.А. Вичканова // Фармация. – 2003. – № 2. – С.31 - 34. 12. Вичканова, С.А. Изыскание новых хи-миотерапевтических средств из высших растений / С.А. Вичканова // Herba pol. – 1970. – Т. 16, № 3. – С. 301 - 308. 13. Государственная фармакопея Респуб-лики Беларусь. Т. 1: Общие методы кон-троля качества лекарственных средств / Центр экспертиз и испытаний в здраво-охр.; под общ. ред. Г.В. Годовальникова. - Минск: Минск. гос. ПТК полиграфии, 2006. – 1345 с. 14. Джадд, Д. Цвет в науке и технике / Д. Джадд, Г. Вышецки. – М.: Эком., 1997. – 339 с. Адрес для корреспонденции: 210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе,27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра фармакогнозии и ботаники с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8(0212) 37-09-29. Погоцкая А.А.

Поступила 06.09.2010 г. *************************************


49

Е.Г. Эльяшевич1, Г.Н. Бузук2

ОНОМАСТИКА В ФАРМАКОГНОЗИИ 1Белорусский государственный медицинский университет 2Витебский государственный медицинский университет

Ономастика – это наука, изучающая

собственные имена. Она подразделяется на: топонимику (изучающую географиче-ские названия), зоонимику (изучающую имена животных и их клички), теонимику (изучающую имена богов) и т.д. В доступ-ной нам литературе мы не нашли опреде-ления ботаниконимики или этнонимики, которая бы занималась изучением наиме-нований лекарственных растений и их се-мейств.

Целью настоящей работы было ис-следование ономастики применительно к фармакогнозии и ботанике, т.е. установле-ние ботанических названий лекарственных растений.

Изучая литературные источники в области фармакогнозии, мы установили, что названия лекарственных растений оп-ределялись строением (формой) их частей (листьев, корней, корневищ, цветков), ме-стом произрастания, фамилией ученого, впервые их описавшего, именем античных богов и т.д.

Основатель фармакогнозии в Рос-сии, академик Нестор Максимович Амбо-дик-Максимович (1744 -1812) в труде «Врачебное веществословие или описание целительных растений» в 1783 – 1788 го-дах описал на основании названия лекар-ственных растений их фармакологическое действие и привел латинские и русские на-звания.

В 1780 – 1804 гг. ученый составил три словаря медицинских и фармакогно-стических терминов на латинском, рус-ском и французском языках (на француз-ском языке говорила знать в России).

Приводим в алфавитном (латин-ском) порядке истоки названий растений, изучаемых в фармакогнозии.

Achillea millefolium L. – Тысяче-листник обыкновенный, сем. Compositae (Asteraceae) – сложноцветные.

Родовое название - Achillea - дано растению в честь мифического героя Ахилла, который лечил раны этой травой. Видовое – millefolium – от латинского mille (тысяча) и folium (лист), так как ли-стья растения многократно перисто-мелкорассеченные на многочисленные уз-кие дольки.

Aconitum karakolicum Papcs. – Аконит (борец каракольский), сем. Ranun-culaceae – лютиковые. Родовое название – Aconitum – дано растению благодаря клубневидновздутому коническому корню, а видовое – karakolicum – говорит о местах его произрастания. Из-за ядовитости рас-тение относят к арсеналу средств, принад-лежащих покровительнице отравлений греческой богине Гекате. В Древней Гре-ции также считали, что аконит вырос из ядовитой слюны пса Цербера. Существует предание, что именно аконитом был от-равлен хан Тимур, так как соком этого рас-тения была пропитана его тюбетейка.

Acorus calamus L. – Аир болотный, сем. Araceae – ароидные. Родовое название – Acorus – происходит от греческого Acoron (душистый корень). Видовое на-звание – calamus – от индийского calama и арабского kaljam (тростник, обитающий в воде). Кроме того, acorus переводится как глаз, зрачок, так как в старину этим расте-нием лечили глазные болезни.

Adonis vernalis L. – Горицвет ве-сенний, сем. Ranunculaceae – лютиковые.

Родовое название – Adonis – дано растению в честь финикийского и асси-рийского бога Солнца - Адониса, которому приписывают необыкновенную красоту и который ежегодно умирал осенью и вновь воскресал весной. Видовое – vernalis – произошло от латинского vernalis (весен-ний).

Aloё arborescens Mill. − Алоэ дре-вовидное, сем. Liliaceae – лилейные.

Выпаренный сок растения называл-ся сабур. На аккадском языке (древнейшем из всех семитских языков) алоэ называлось «si-bu-ru». От него произошло арабское «sabr» или «saber» (терпение, выносли-


50

вость). Именно алоэ арабы символизиро-вали с выносливостью, так как растение долгое время может обходиться без влаги, и дали ему название «сабур».

Ammi visnaga L.− Амми зубная, сем. Apiaceae – седьдерейные, зонтичные.

Диоскорид назвал растение по мес-ту его произрастания. Родовое название – Аmmi – от греч. ammos (песок), то есть произрастающее в песчаных местах либо по сухим склонам. Видовое – visnaga – происходит от египетского слова «келла» либо «visnaga»: так называли плоды амми зубной в Древнем Египте.

Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng. – Толокнянка обыкновенная, сем. Erica-ceae – вересковые.

Родовое название – Arctostaphylos – происходит от греческого медведь – arktos - и staphylos (на греческом языке обознача-ет «кисть»). Видовое − uva-ursi – от латин-ского uva (кисть) и – ursus- на латинском «медведь». Uva-ursi переводится из грече-ского как «медвежья ягода», так как ею лакомится бурый медведь.

Artemisia absinthium L. − Полынь горькая, сем. Compositae (Asteraceae) – сложноцветные.

Родовое название – Artemisia – по-священо богине Артемиде. В поэме Одо из Мена «О свойствах трав» - литературном памятнике раннего Средневековья - гово-рится: «Действие этой травы, говорят, от-крыла Диана, что Артемидой зовется у греков». Есть еще версия, что растение на-звано в честь жены царя Мавзола Артеми-зии, которая (по данным Плиния Старше-го) излечилась этим растением. Видовое – absinthium – происходит от горького вкуса растения.

Artemisia cina Berg. – Полынь цитварная (цитварное семя), сем. Compo-sitae (Asteraceae) – сложноцветные.

Родовое название дано в честь бо-гини Артемиды. Видовое – cina – от фор-мы нераспустившейся корзинки цветков, напоминающей семена. Отсюда и про-изошло его название – цитварное семя. – Semenzo (на итальянском «семя»), умень-шительное – semenzina – отсюда латинское Semencinae.

Atropa belladonna L. − Красавка обыкновенная, сем. Solanaceae – паслено-вые.

Родовое название – Atropa – дано в честь древней римской богини Атропы, которая обрезала нить жизни каждого смертного, живущего на земле. Очевидно, это связано с тем, что растение ядовито. Видовое – belladonna – состоит из двух слов: bella (на итальянском языке обозна-чает – «прекрасная» и donna – «женщи-на»). Женщина, натершая соком растения щеки, становится прекрасной, так как на них появляется румянец. Сок красавки расширяет зрачок, глаза приобретают осо-бо чудный блеск, что также красит жен-щину.

Bidens tripartita L. – Череда трех-раздельная, сем. Compositae (Asteraceae) – сложноцветные.

Родовое название – Bidens – дано растению из-за наличия у плодов двух зуб-чатых остриев и состоит из двух слов: на латинском языке bis – дважды и dens – зуб. Видовое – tripartita – (на латинском «триж-дыделенный») – из-за трижды рассеченных (раздельных) его листьев.

Capsella bursa-pastoris (L.) Medic. – Пастушья сумка обыкновенная, сем. Cruciferae (Brassicaceae) – крестоцветные, капустные.

Родовое название – Capsella – про-исходит от латинского «маленькая коро-бочка». Видовое – bursa (сумка), pastor (пастух). Таким образом, название расте-нию дано из-за формы плода, по виду по-хожего на маленькую коробкообразную пастушью сумку.

Centaurea cyanus L. – Василек си-ний, сем. Compositae (Asteraceae) – слож-ноцветные.

Карл Линней назвал цветок centau-rea в честь кентавра (туловище - лошади, голова - человека). Плиний Старший на-звал мудрейшего кентавра Хироном, кото-рый знал силу лекарств и исцелял героев, в том числе с помощью василька. Как из-вестно, Хирон обучал искусству лечения сына Аполлона – Асклепия, ставшего впо-следствии богом медицины. Видовое на-звание растения происходит от cyanus, что


51

значит «синий», исходя из окраски цвет-ков.

Centaurium umbellatum Gilib – Зо-лототысячник зонтичный, или обыкно-венный, сем. Gentianaceae – горечавковые.

Родовое название – Centaurium – дано в честь кентавра, в то же время его переводят как centum (сто) и aurum (золо-то), связывая с особой ценностью расте-ния. Видовое – umbellatum – от слова «зон-тичный», так как его цветки собраны в щитковидные соцветия, напоминающие зонтик.

Cephaёlis ipecacuanha Willd. − Ипекакуана, сем. Rubiaceae –мареновые.

Название растения происходит от слов i (на индейском обозначает малень-кое), pe (придорожное), caa (растение), goene (рвотное), то есть «маленькое при-дорожное растение, обладающее рвотным действием».

Chelidonium majus L. – Чистотел большой, сем. Papaveraceae – маковые.

Родовое название растения – Cheli-donium (в переводе с греческого «ласточ-кина трава»). Название растения объясня-ется древним поверием, что растение за-цветает с прилетом ласточек, которые со-бирают его сок и несут своим слепорож-денным детям, чтобы вернуть им зрение. С отлетом ласточек растение увядает. Видо-вое название – majus (большой) – так как трава и корневище довольно массивные.

Cinchona succirubra Pav. – Цинхо-на красносоковая, сем. Rubiaceae – маре-новые.

Родовое название – Cinchona – было дано растению в честь графа Чинчона.

Графиня Анна дель Чинчон [Chin-chon], красавица - жена вице-короля Перу Дона Луиса Геронино Кабрера де Ваба-дилла графа Чинчон, заболела малярией. Служанка попросила госпожу отпустить ее в свое родовое индейское племя с тем, чтобы принести кору дерева для спасения графини Анны. Ее отпустили, служанка принесла кору, и графиня вылечилась. Счастливый граф Чинчон положил кору в золотой ларец, украшенный бриллиантами. Через несколько лет заболел малярией и сам граф Чинчон, но кора от неправильно-го хранения и времени утратила свои ле-

чебные свойства. Граф Чинчон умер, но перед смертью в 1641 г. он передал испан-ским врачам в Мадриде мешок с корой хинного дерева.

В 1678 г. французский ученый Шарль Кондамин послал гербарный обра-зец растения Карлу Линнею. К. Линней в память о погибшем вице-короле Перу дал растению название цинчона, считая, что его поступок был достоин памяти о нем. Видовое название – succirubra – дано от красноватого сока растения. В 1866 г. Ме-ждународный ботанический конгресс пе-реименовал растение в Cinchona – цинхону для более мягкого его произношения.

Claviceps purpurea Tulasne. – Спо-рынья, Fungi – грибы, сем. Clavicepiteae – булавовидные.

Родовое название – Claviceps – дано от латинского clavis (булава) и видовое – purpurea – (красная) из-за произрастающих красных булавовидных споровых телец.

Colchicum speciosum Stev. – Без-временник великолепный, сем. Liliaceae – лилейные.

Родовое название – Colchicum – безвременник – связано с тем, что расте-ние цветет осенью (сентябрь-октябрь) в безлистном состоянии, плоды закладыва-ются под землей, то есть весь цикл разви-тия идет без времени (года), в отличие от других растений. Видовое – speciosum – великолепный. Действительно, растение очень красивое, хотя и ядовитое.

Convallaria majalis L. – Ландыш майский, сем. Liliaceae – лилейные.

Родовое название растения – Con-vallaria – означает по латыни долину, то есть это цветок долины. Видовое – majalis – майский, так как растение зацветает в мае.

Coriandrum sativum L. - Кишнец посевной (кориандр), сем. Apiaceae – седьдерейные, зонтичные.

Родовое название – Coriandrum – произошло от coris (клоп), так как незре-лые плоды пахнут клопами. Видовое – sa-tivum – посевной. Уже в Древней Греции растение культивировали (сеяли).

Datura stramonium L. – Дурман обыкновенный, сем. Solanaceae – пасле-новые.


52

Родовое название – Datura – образо-вано от арабского tatora (tat – колоть), т.к. плоды дурмана имеют форму яйцевидной коробочки с многочисленными колючими шипами. Именно эта колючая коробочка и явилась основой латинскому названию растения– datura. Русское – дурман (одур-манивающий) – связано с его ядовитым действием. Видовое - stramonium – указы-вает на принадлежность растения к секции stramonium, к которой относятся однолет-ние виды, характеризующиеся прямостоя-чими коробочками и черными семенами.

Delphinium elatum L. – Живокость высокая, сем. Ranunculaceae – лютиковые.

Родовое название – Delphinium – дано растению из-за его цветочной почки, похожей на фигуру дельфина. Кроме того, Диоскорид назвал живокость «цветком дельфийского Апполона», так как г. Дель-фа расположен у подножья Парнаса, где находился оракул Апполона. Видовое – elatum – дано за высокий рост растения.

Digitalis purpurea L. – Наперстян-ка пурпуровая, сем. Scrophulariaceae – норичниковые.

Родовое название – Digitalis – дано по наперстковой форме цветка – напер-стянка (венчик цветков в виде наперстка). Digitus (от латинского палец), digitalis (к пальцу относящийся), digitabulum (напер-сток). Видовое - purpurea – дано растению за окраску цветков: снаружи – пурпуро-вый, внутри – белый с пурпуровыми пят-нами в зеве.

Dryopteris filix-mas (L.) Schott – Папоротник мужской, щитовник муж-ской, сем. Aspidiaceae – Щитовниковые.

Родовое название − Dryopteris – произошло от греческих слов drys (дуб) и pteris (папоротник) и дано растению в свя-зи с его местопроизрастанием в дубовых лесах. Видовое – filix mas – (мужской), у которого в отличие от женского сорусы (кучки спорангиев) закрыты почковидным покрывальцем и находятся на нижней по-верхности листа.

Echinops sphaerocephalus L. – Мордовник шароголовый, сем. Composi-tae (Asteraceae) – сложноцветные.

Родовое название – Echinops – (еж) дано растению по характеру соцветий: ка-

ждый цветок имеет свою обверточку, со-стоящую из наружных листочков, рассе-ченных на тонкие щетинки (ежики). Цвет-ки собраны в крупную шаровидную голов-ку. Видовое название – sphaerocephalus – состоит из двух слов греческого происхо-ждения: spaera (шар) и cephale (голова) – шароголовый.

Erysimum canescens Roth. – Жел-тушник серый, сем. Cruciferae (Brassica-ceae) – крестоцветные, капустные.

Родовое название – Erysimum – от греческого eryomai (спасать, исцелять) – в знак того, что это сердечное средство спа-сает (исцеляет) людей.

Erythroxylon coca Lam. – Эритрок-силон кока, сем. Erythroxylaceae – эрит-роксилоновые.

Родовое название – Erythroxylon – от греческих слов erythros (красный) и xy-lon (дерево) дано растению из-за характер-ной окраски древесины, имеющий красный цвет. Видовое – coca – от индейского coca (кокаиновый куст).

Eucalyptus globulus Labill. – Эвка-липт шариковый, сем. Myrtaceae – мир-товые.

Родовое название – Eucalyptus – происходит от греческих слов eu (хоро-ший) и kalyptos (закрытый), так как бутоны растения хорошо закрыты крышечкой. Ви-довое – globules – (шариковый) дано за яй-цевидную форму листьев, сердцевидных у основания.

Fragaria vesca L. – Земляника лес-ная, сем. Rosaceae.

Родовое название – Fragaria – про-исходит от латинского глагола fragare (благоухать) и связано с замечательным запахом земляники. Видовое – vesca – (ма-лый) – от маленького размера плода.

Frangula alnus Mill. – Крушина ольховидная, или ломкая, сем. Rhamna-ceae – крушиновые.

Родовое название – Frangula – про-исходит от латинского глагола frangere (ломать) – связано с легкой ломкостью древесины. Видовое – alnus – (ольха) за схожесть древесины с древесиной ольхи: ствол и ветки растения гладкие, без колю-чек.


53

Gаlanthus Woronowii A. Los. – Под-снежник Воронова, сем. Amaryllidaceae, – амариллисовые.

Растение названо в честь русского ботаника И.Н. Воронова.

Родовое название – Galanthus – со-стоит из двух слов: «молоко» и «цветок» (имеется в виду белый цветок, так как у растения белый околоцветник). Легенда гласит, что в момент изгнания Богом из рая Адама и Евы на земле было холодно, шел снег. Ева озябла, и ей в утешение не-сколько снежинок превратилось в цветы подснежника – вестника весны и тепла. Бог даже в гневе – милосерден.

Gentiana lutea L. – Горечавка жел-тая, сем. Gentianaceae – горечавковые.

Родовое название дано растению по имени древнегреческого царя Gentius (167 г. до н.э.), лечившего людей горечавкой во время чумы, о чем сообщил Плиний Стар-ший в своем труде «Естественная исто-рия». Видовое – lutea – (желтая) – по окра-ске цветков.

Glycyrrhiza glabra L. – Солодка го-лая, сем. Leguminosae (Fabaceae) – бобо-вые.

Родовое название – Glycyrrhiza – происходит от греческих слов glycys (сладкий) и rhiza (корень) и дано растению благодаря сладкому вкусу корня. Видовое – glabra – от латинского (голая) из-за плода (боб) – бурого, кожистого, плоского, пря-мого и голого.

Helianthus annuus L. – Подсолнеч-ник однолетний, сем. Compositae (As-teraceae) – сложноцветные.

Родовое название – Helianthus – происходит от греческих слов helios (солн-це) и anthos (цветок), так как цветок похож на солнце и всегда поворачивается к солн-цу. Видовое – annuus – (однолетний) – ука-зывает на то, что растение однолетнее.

Helichrysum arenarium D.C. – Бес-смертник песчаный, сем. Compositae (As-teraceae) – сложноцветные.

Родовое название – Helichrysum – дано растению за золотисто-желтую окра-ску венчика цветка и происходит от грече-ских слов helios (солнце) и chrysos – (золо-то). Видовое – arenarium – от его место-

обитания: от латинского arenarius (песок, песчаный).

Helleborus caucasicus A. Br. – Мо-розник кавказский, сем. Ranunculaceae – лютиковые.

Родовое название – Helleborus – пе-реводится как «убивать» и «пища, еда», т.е. растение ядовито. Видовое – caucasium – свидетельствует о произрастании расте-ния в основном в Закавказье и на северном склоне Главного Кавказского Хребта.

Hippophaё rhamnoides L. – Обле-пиха крушиновидная, сем. Elaeagnaceae – лоховые.

Родовое название – Hippophaё – со-стоит из греческих слов hippos (лошадь) и phaeos (блестящий) и связано с тем, что в Древней Греции облепихой лечили лоша-дей, после чего шерсть их принимала кра-сивую, блестящую окраску. Русское «об-лепиха» названо из-за того, что плоды рас-тения почти «сидят» на стебле, они густо покрывают («облепляют») концы ветвей. Видовое – rhamnoides – от rhamnus – (кру-шина), так как плоды у крушины и обле-пихи схожи и они красноватого цвета.

Hyoscyamus niger L. – Белена чер-ная, сем. Solanaceae – пасленовые.

Родовое название – Hyoscyamus – образовано от двух греческих слов: hyos (свинья) и cyamоs (боб). Древнеримский врач Диоскорид обратил внимание на то, что свиньи, поедавшие белену, заболевали, и дал растению такое название. Плод рас-тения – коробочка, похожая на боб. Видо-вое – niger – (черная) связано с темно-фиолетовыми жилками венчика цветков и с темно-фиолетовым зевом.

Hypericum perforatum L. – Зверо-бой продырявленный (обыкновенный), сем. Hypericaceae - зверобойные.

Родовое название – Hypericum – об-разовано от греческих слов hypo (под, сре-ди) и Erica (вереск), то есть «растущий среди вереска». Растение и похоже на ве-реск, растет в сухих лесах (назывался раньше вересковидный). Видовое – perfo-ratum – (от латинского «продырявленный») названо из-за черных и просвечивающихся секреторных вместилищ в листьях, кото-рые кажутся дырочками.


54

Linum usitatissimum L. – Лен обык-новенный, сем. Linaceae – льновые.

Родовое название – Linum – проис-ходит от греческого слова linon (лен).

Видовое – usitatissimum – (от латин-ского «полезнейший, наиболее широко употребляемый»). Культура льна очень древняя: его возделывали в Древнем Егип-те за 2400 лет до н.э. Семена льна найдены среди археологических остатков из свай-ных построек каменного века в Европе. Лен употребляется в медицине с глубокой древности.

Lycopodium clavatum L. – Плаун булавовидный (Ликоподий), сем. Lyco-podiaceae – плауновые.

Родовое название растения – Lyco-podium – дано К. Линнеем и состоит из двух греческих слов: lycos (волк) и podon (лапа), так как густонаселенные его ветви напоминают волосатые лапы волка. Видо-вое – clavatum – (булавовидный) – харак-теризует форму стробил.

Mаtricaria chamomilla L. – Ромаш-ка обыкновенная, сем. Compositae (As-teraceae) – сложноцветные.

Родовое название – Matricaria – произошло от маточной травы, применяе-мой в старину при женских болезнях.

Melilotus officinalis Desr. – Донник лекарственный, сем. Leguminosae (Fa-baceae) – бобовые.

Родовое название – Melilotus – про-исходит от двух греческих слов: mel (мед) и lotos (кормовая трава), то есть трава ме-довая, идущая на корм скоту. Однако, при продолжительном кормлении этой травой у скота начиналось сильное кровотечение, даже при незначительных ранениях. Видо-вое – officinalis – (лекарственный) указы-вает на его использование в медицине.

Menispermum dahuricum DC. – Лу-носемянник даурский, сем. Mеnisper-maceae – луносемянниковые.

Родовое название – Menispermum – состоит из двух греческих слов: men (луна) и sperma (семя) из-за полулунной формы семени. Видовое – dahuricum – от место-обитания (Дальний Восток, Хабаровский край и т.д.).

Menyanthes trifoliata L. – Вахта трехлистная, сем. Menyanthaceae – вахто-вые.

Родовое название – Menyanthes – встречается в работах Теофраста и означа-ет «показывать, сообщать» (о болоте, реке, водоеме и т.п.). Русское – вахта – так как растение как бы несет вахту у водоемов. Видовое – trifoliatea – трилистник, так как листья имеют тройчато-раздельную листо-вую пластинку.

Nicotiana tabacum L. – Табак на-стоящий, сем. Solanaceae – пасленовые.

Родовое название – Nicotina – дано по фамилии французского посланника в Испании Sean j Nicot, который в XVI в. вырастил табак в Европе. Видовое – ta-bacum – от tabaco (на индейском языке – табак).

Nymphaea lutea L. – Кувшинка желтая, сем. Nymphaeaceae – кувшинко-вые.

Родовое название – Nymphaea – по-священо нимфам, русалкам, так как расте-ние раскрывает свои лепестки с первыми лучами солнца, а от яркого солнца прячет-ся. Видовое – luteа – (желтая) названо по желтой окраске цветков.

Oxycoccus quadripetalus Gilib. (Oxycoccus palustris Pers.) – Клюква че-тырехлепестная, клюква болотная – сем. Vacciniaceae – брусничные.

Родовое название – Oxycoccus – произошло от греческих слов: oxus (ост-рый, кислый) и coccos (шаровидный), что характерно для формы ягод и их вкусовых качеств. Видовое – quadripetalus – четы-рехлепестная – благодаря четырехраздель-ному венчику цветков, собранных по два.

Panax ginseng C.A. Mey. – Жен-шень обыкновенный, сем. Araliaceae – аралиевые.

Родовое название – Panax – от pana-cea: pan (все) и acos (исцеляю), то есть «всёисцеляющий». Это название дал рас-тению Карл Линней в 1753 году. Видовое – ginseng – от китайского названия корня jen (человек) и chen (корень), то есть, «корень, похожий на фигуру человека». И от – gen-send – по латински chin-seng (человек-корень).


55

Papaver somniferum L. – Мак сно-творный, сем. Papaveraceae – маковые.

Родовое название – Papaver – (мак). Видовое – somniferum – (от латинского «сон несущий»), снотворный. Название «мак снотворный» было посвящено богине земледелия и хлебных злаков Деметре (Цецере), которая изображается с венком из колосьев злаков и цветков мака на голо-ве. Есть еще одна мифологическая легенда о том, что бог подземного царства Пид (Плутон) похитил дочь Деметры (Цецеры) Персефону (Прозерпину), а семена мака давали матери забвение и тем облегчали ее страдания. Сок из маковых головок произ-водили в Древнем Египте в горах Тебанс (отсюда название – алкалоид тебаин), а бог сна Морфей (отсюда название алкалоида – морфин) создал сам мак. Сок, который до-бывают из маковых головок, – opion – лат. уменьшенное – opos – (отсюда – опий).

Pinus silvestris L. – Сосна обыкно-венная, или лесная, сем. Pinaceae – со-сновые.

Родовое название – Pinus – от кельтского pin (скала), что указывает на частое обитание сосны на скалистых об-рывах. Видовое – silvestris – лесная, указы-вает на местообитание.

Plantago major L. – Подорожник большой, сем. Plantaginaceae – подорож-никовые.

Родовое название – Plantago – пере-водится как «ступня» и «двигать», так как листья по форме напоминают след ноги. Видовое – major (большой) из-за длинно-черешковых листьев.

Polygonum aviculare L. – Горец птичий (спорыш), сем. Polygonaceae – гречишные.

Родовое название – Polygonum – (горец), стебель имеет в узлах рассеченные раструбы, отсюда poly (много) и gonu (ко-лено). Спорыш от слова «спорится». Рас-тение «sporon» быстро вырастает весной и быстро размножается: каждая особь дает в год 200 семян и больше, растение стелется и захватывает огромные территории.

Polygonum bistorta L. (Bistorta ma-jor S.F. Gray) – Горец змеиный (змее-вик), сем. Polygonaceae – гречишные. Ро-довое название – Polygonum – (горец). Ви-

довое – bistorta – состоит из двух латин-ских слов: bis (дважды) и torta (скручен-ная), то есть «дважды скрученная», так как корневище растения дважды изогнуто и похоже на черную, дважды изогнутую змею.

Polygonum hydropiper L. – Горец перечный, сем. Polygonaceae – гречиш-ные.

Видовое название – hydropiper – от греческого слова gydos (вода) и латинского слова piper (перец), что говорит о его ме-стопроизрастании.

Polygonum persicaria L. (Polygonum maculata (Ra.) S.F. Gray) – Горец поче-чуйный, сем. Polygonaceae – гречишные.

Видовое название – persicaria – про-исходит от латинского persicorum (перси-ковый), так как напоминает листья перси-кового дерева.

Potentilla tormentilla Schrank. (Po-tentilla erecta (L.) Raeusch.) – Лапчатка прямостоячая, узик, сем. Rosaceae – ро-зоцветные.

Родовое название – Potentillа – уменьшительное от potenсia (сила) – «ма-ленькое, но сильнодействующее расте-ние». Видовое – tormentilla – от латинского tormina (дизентерия). Торминой в Средние века называли дизентерию.

Quercus robur L. – Дуб черешча-тый (или обыкновенный), сем. Fagaceae – буковые.

Родовое название – Quercus – озна-чает «красное (красивое) дерево». В Древ-ней Греции дуб был посвящен богу солн-ца, науки и искусства – Апполону, в Древ-нем Риме – Юпитеру. Дубовая ветвь (на голове) в венке означала могущество.

Rauwolfia serpentinа Benth. – Рау-вольфия змеиная, сем. Apocynaceae – кутровые.

Название растению – Rauwolfia – дано по фамилии врача L. Rauwolf, впер-вые в XVI в. описавшего его.

Rheum palmatum L. – Ревень тан-гутский, сем. Polygonaceae – гречишные.

В 1750г. придворный врач Давид Гротер получил от бухарских купцов се-мена тангутского ревеня и переслал их в Швецию ботанику Карлу Линнею, кото-рый считал, что ревень –Rheum – происхо-


56

дит от греческого rheon - (течь) из-за сла-бительного действия корней. Видовое – palmatum - (от латинского «лапчатый») из-за лапчатой формы листа. Русское назва-ние «тангутский» – от местообитания (Ки-тай, Тибет и др.).

Rhodiola rosea L. – Родиола розо-вая (золотой корень), сем. Crаssulaceae – толстянковые.

К. Линней дал растению видовое название Rosea, так как свежесрезанные корневища имеют запах розы. Русское на-звание «золотой корень» растение получи-ло в связи с тем, что крупные корневища имеют цвет старой позолоты.

Ricinus communis L. – Клещевина обыкновенная, сем. Euphorbiaceae – мо-лочайные.

Родовое название – Ricinus – пере-водится как «клещ, клещевина», так как семена растения похожи на клеща по пест-рой расцветке.

Rosa canina L. – Шиповник соба-чий, сем. Rosaceae – розоцветные.

Родовое название – Rosa – от грече-ского rhodon и кельтского rhodon – (крас-ный) из-за окраски цветков и плодов. В Древней Греции растение считали симво-лом нравственности. Греки разводили са-ды из него вокруг храма Афродиты – бо-гини любви и красоты.

Rubus idaeus L. – Малина обыкно-венная, сем. Rosaceae – розоцветные.

Родовое название – Rubus – от ruber (красный) – от цвета ягод. Видовое – idaeus – относится к горе Иде (горный мас-сив в центре острова Крит, место его на-чального произрастания).

Salvia officinalis L. – Шалфей ле-карственный, сем. Labiatae (Lamiaceae) – губоцветные.

Родовое название – Salvia – про-изошло от латинского salvare (излечивать). Видовое – officinalis – от латинского offici-nal (лекарство), то есть растение как вя-жущее и дезинфицирующее средство изле-чивает многие заболевания и является ле-карством.

Sambucus nigra L. – Бузина чер-ная, сем. Caprifoliaceae – жимолостные.

Родовое название – Sambucus – происходит от названия трехструнного ин-

струмента – самбука, широко распростра-ненного в Древнем Иране, который делали из многочисленных тонких дощечек из древесины бузины. Видовое – nigra – от черных ягодообразных плодов.

Sanguisorba officinalis L. – Крово-хлебка лекарственная, сем. Rosaceae – розоцветные.

Родовое название – Sanguisorba – происходит от двух латинских слов: san-guis (кровь) и sorbere (впитывать), то есть название растения происходит от его кро-воостанавливающего действия. Видовое – officinalis – от officinal (лекарство).

Schizandra chinensis Baill. – Ли-монник китайский, сем. Schisandraceae – лимонниковые.

Родовое название – Shizandra – про-исходит от греческих слов «разделять» и «мужчина», что связано со строением цветков этого растения: они однополые (либо женские, либо мужские). Русское название «лимонник» дано растению из-за запаха лимона, который ощущается при растирании его листьев, коры и корней. Видовое – chinensis – (китайский) дано растению, так как оно стало известно из китайской медицины.

Scopolia carniolica Jaсq. – Скопо-лия карниолийская, сем. Solanaceae – пасленовые.

Родовое название – Scopolia – про-изошло от фамилии итальянского врача – Скопии, впервые описавшего растение. Видовое – carniolica – по местности на Балканах, где этот вид растения впервые был найден.

Securinega suffruticosa (Pall.) Rehd. – Секуринега полукустарниковая, сем. Euphorbiaceae – молочайные.

Родовое название – Securinega – происходит от двух латинских слов: se-cures (топор) и negare (отрицать, не при-знавать). То есть топор не берет древесину из-за ее твердости. Видовое – suffruticosa – от латинского frutex (кустарник), так как растение является двудомным кустарни-ком.

Sphaerophysa salsula (Pall.) DC. – Сферофиза солонцовая, сем. Leguminosae (Fabacaeae) – бобовые.


57

Родовое название – Sphaerophysa – состоит из двух латинских слов: spaera (шар) и physa (пузырь) из-за формы бобов у растения: они пузырчато-вздутые, шаро-видные. Видовое – salsula – (солонцовая), так как растение растет на солонцеватых почвах.

Sphagnum spp. – Торфяные, сфаг-новые мхи, класс – Musci – мхи листосте-бельные, сем. Sphagnaceae.

Родовое название – Sphagnum – происходит от греческого sphagnos (губка) из-за способности мха всасывать воду.

Strophanthus kombe Oliv. – Стро-фант комбе, сем. Apocynaceae – кутровые.

Родовое название – Strophanthus– состоит из греческих слов strophes (скру-ченная лента) и anthos (цветок) и дано ему из-за лентовидных, спирально-закрученных кончиков лепестков цветка. Видовое – kombe – вероятно, по имени ученого, его описавшего.

Thea sinensis L. – Чай китайский, сем. Theaceae – чайные.

Родовое название – Thea – (чай) от китайского «тцай-йе» (чайные листья). Видовое – sinensis – (китайский), т.к. ро-диной чайного дерева был Китай. В ста-ринных древнекитайских рукописях уже имелись указания на использование чая как лекарственного и тонизирующего средства. В Европе он появился лишь в 1517 году.

Theobroma cacao L. – Шоколадное дерево, сем. Sterculiaceae – стеркулиевые.

Родовое название – Theobroma – происходит от слов theos (бог) и broma (пища), то есть «пища богов». Отсюда на-звание теобромин – алкалоид, открытый в 1841 году русским ученым-химиком А.А. Воскресенским. Видовое – cacao – так как в 1710 году масло какао было введено в медицину, а древние индейцы семена ка-као употребляли в пищу, а также исполь-зовали в качестве разменной монеты. Само слово cacao происходит от какауатл – мек-сиканского названия семян какао.

Thymus serpyllum L. – Чабрец (тимьян ползучий), сем. Labiatae (La-miaceae) – губоцветные.

Родовое название – Thymus – (ти-миан) происходит от греческого слова

«жертвоприношение», так как в Древней Греции чабрец был посвящен богине Аф-родите и приносился ей в жертву: растение сжигали, и к небу возносился благоухан-ный дым (фимиам). Видовое – serpyllum (ползучий) дано растению из-за стелюще-гося (ползучего) стебля.

Tilia cordata Mill. – Липа сердце-видная, сем. Tiliaceae – липовые.

Родовое название – Tilia – от грече-ского teleja (липа). Видовое – cordata – от латинского «сердцевидная», названо из-за сердцевидной формы листа дерева.

Tussilago farfara L. – Мать-и-мачеха обыкновенная, сем. Compositae (Asteraceae) – сложноцветные.

Родовое название – Tussilago – про-исходит от латинских слов tussis (кашель) и agere (выводить), то есть растение назва-но исходя из его отхаркивающего дейст-вия. Видовое – farfara – от латинских слов far (мука) и ferre (носить) благодаря муч-нисто-белой нижней поверхности листа растения. Русское название «мать-и-мачеха» дано растению из-за листьев: лист с одной стороны гладкий (сверху), голый, зеленый; а снизу – покрыт белым войло-ком волосков на длинных черешках: с од-ной стороны он – «мать», с другой – «ма-чеха».

Vaccinium myrtillus L. – Черника обыкновенная, сем. Vacciniaceae – брус-ничные.

Родовое название – Vaccinium – происходит от vacca (ягода). Русское на-звание «черника» дано растению из-за то-го, что ягода чернит пальцы рук и губы. Vaccinium – значит «ягодный куст». Видо-вое – myrtillus – дано растению из-за того, что по внешнему виду оно напоминает кустик маленькой мирты.

Vaccinium vitis-idaea L. – Брусни-ка, сем. Vacciniaceae – брусничные.

Родовое название – Vaccinium – происходит от vacca (ягода). Видовое – от слов vitis (виноградная лоза) и idaea (рас-тущий на горе Иде – горный массив на острове Крит). Название vitis-idaea впер-вые появилось у нидерландского ботаника Додонеуса.


58

Valeriana officinalis L. – Валерьяна лекарственная, сем. Valerianaceae – ва-лерьяновые.

Родовое название – Valeriana – про-исходит от латинского слова valere (быть здоровым). Именно так назвал это расте-ние К. Линней Старший, имея в виду его успокаивающее действие. Об этом дейст-вии валерьяны писал еще Плиний Стар-ший. Даже в XVII веке валерьяна была од-ним из важнейших лекарственных средств, таким она осталась и в настоящее время.

Осмысливание истоков названий («имен») растений, изучаемых в фарма-когнозии, нами будет продолжаться. Од-нако уже на данном этапе мы рискнем дать определение и назвать науку ботаникони-микой, как одну из ветвей ономастики, ко-торая изучает происхождение ботаниче-ских названий, а в нашем случае, ботани-конимикой в фармакогнозии.


1. Гамерман, А.Ф. Курс фармакогнозии / А.Ф. Гамерман – Л.: Медицина, 1967. – 701 с.

2. Гринкевич, Н.И. Легенды и быль о ле-карственных растениях / Н.И. Гринкевич, А.А. Сорокина. – М.: Наука, 1988. – 173 с. 3. Мурох, В.И. Наш зеленый исцеляющий друг / В.И. Мурох, Л.И. Стекольников. – Минск: Ураджай, 1986. – 255 с. 4. Стекольников, Л.И. Целебные кладо-вые природы / Л.И. Стекольников, В.И. Мурох. – Минск: Ураджай, 1982. – 271 с.

Адрес для корреспонденции: 210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра фармакогнозии и ботаники с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8 (0212) 37-09-29. Бузук Г.Н.


*************************************


59

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ХИМИЯ И.Б. Гринцевич1, С.Э. Ржеусский2 КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ НАТРИЯ АЛЕНДРОНАТА В ТАБЛЕТКАХ 1УЗ «Национальная антидопинговая лаборатория», Минский р-н, п. Лесной 2Витебский государственный медицинский университет

Разработана и валидирована ме-тодика количественного определения натрия алендроната в таблетках «Га-мимакс» с использованием высокоэф-фективной жидкостной хромотографии (ВЭЖХ) с предколоночной дериватиза-цией диальдегидом орто-фталевым с детектированием в УФ-области. Ли-нейность отклика детектора доказана в диапазоне применения методики (30 – 70 мг/л); уравнение калибровочной зависи-мости имеет вид y = kx+b и характери-зуется следующими параметрами: k = 10,25, ε(k) = 4,5 %, b = -0,78, ε(b) = 17,9 %, r = 0,9875; предел обнаружения – 2 мг/л (экспериментально подтвержденное значение), 1,7 мг/л (рассчитанное значе-ние); величина смещения результата (B, %) по результатам анализа в разные дни (n = 10) – 7,3 % – -8,8 %; внутрилабора-торная точность (Sr, %, n = 10) - от 4,7 % до 13,8 %; сходимость (Sr, %, n = 6) - от 2,3 % до 9,0 %; открываемость (пра-вильность) - 93 % вблизи нижней кон-центрации диапазона применения мето-дики, 97 % в середине диапазона и 104 % вблизи верхней концентрации диапазона применения методики.

Ключевые слова: натрия алендро-нат, количественное определение, таб-летки, ВЭЖХ с предколоночной дерива-тизацией.

ВВЕДЕНИЕ

Натрия алендронат – аминобисфос-

фонатное соединение, которое использует-ся для лечения заболеваний костей, вклю-чая остеопороз, болезнь Педжета и мета-

статические заболевания [1, 2]. С аналити-ческой точки зрения натрия алендронат представляет собой сложное соединение, поскольку не содержит поглощающих хромофоров. Однако сообщается о некото-рых методиках ВЭЖХ для его определе-ния, многие из которых основываются на дериватизации алендроната, используя ли-бо предколоночную [3-6], либо постколо-ночную методики [7, 8]. Описан ВЭЖХ анализ натрия алендроната с использова-нием рефрактометрического детектора [9], ионной хроматографии с детектором по проводимости [10] или непосредственно УФ-определение [11]. Методики ионной масс-спектрометрической хроматографии также применяли для исследования натрия алендроната [12]. Натрия алендронат оп-ределяли в лекарственных средствах мето-дом ВЭЖХ после дериватизации 9-флуоренилметилхлороформиатом (ФМОК). Избыток реагента экстрагирова-ли хлористым метиленом и аликвоту вод-ной порции анализировали методом об-ратнофазовой ВЭЖХ [3]. Известно о при-менении индуктивно связанной плазмы и анодной инверсионной вольтамперомет-рии для анализа натрия алендроната в таб-летках [13, 14]. Описан также спектрофо-тометрический метод для анализа аленд-роната в таблетках, основанный на образо-вании комплекса между действующим ве-ществом и железом в хлорной кислоте [14]. Благодаря средней стабильности дан-ного комплекса, для получения надежных количественных данных требуется значи-тельный избыток натрия алендроната.

Методика анализа натрия алендро-ната в таблетированных лекарственных формах, изложенная в действующих Бри-танской и Европейской фармакопеях, ис-пользует анионообменную хроматографию для разделения компонентов и рефракто-метрическое детектирование. Согласно действующей Американской фармакопее (фармакопейная статья (ФС) на субстан-цию), натрия алендронат анализируют с использованием классической обратно-фазной хроматографии в виде производно-го ФМОК с предварительной стадией уда-


60

ления избытка реагента с помощью мети-ленхлорида и детектированием при помо-щи УФ-детектора переменной длины вол-ны при 266 нм. Таким образом, методика количественного определения натрия алендроната, изложенная в Британской и Европейской фармакопеях, невыполнима в наших условиях ввиду отсутствия рефрак-тометрического детектора. Методика оп-ределения Американской фармакопеи тре-бует использования редкой и дорогостоя-щей хроматографической колонки на ос-нове сополимера стирола и дивинилбензо-ла и при этом достаточно трудоемка.

Целью настоящего исследования были разработка и валидация методики количественного определения натрия алендроната в таблетках «Гамимакс» с возможностью ее дальнейшей автоматиза-

ции для выполнения тестов по разделам ФС «Однородность дозирования», «Коли-чественное определение».


Анализ выполняли с использовани-ем жидкостного хроматографа «Agilent 1100 Series», оснащенного вакуумным де-газатором G1322A, четырехканальным градиентным насосом G1311A, устройст-вом автоматического ввода проб G1329A ALS, двухсекционным термостатом коло-нок G1316A, диодно-матричным детекто-ром G1315D фирмы «Agilent Technologies». В работе использовали ре-активы согласно табл. 1 и расходные мате-риалы согласно табл. 2.

Таблица 1 – Реактивы, используемые для количественного определения натрия алендроната

в таблетках Наименование реактива, чистота Производитель № по каталогу

Метанол, >99,9% Promochem SO-9260-B025 Ацетонитрил, >99,9% Lab-Scan C02C11X Кислота ортофосфорная, 85% Fluka 79606 Кислота лимонная, безводная, ≥99,5% Fluka 27487 Натрия гидроксид, ≥98%. Fluka 71689 Натрия алендронат USP 1012780 Диальдегид орто-фталевый Fluka

Таблица 2 – Расходные материалы, используемые для количественного определения натрия

алендроната в таблетках Наименование Производитель № по каталогу

Шприц для фильтрации образцов, 2,5 мл Agilent Technologies 5182-9711 Фильтры тефлоновые для фильтрации образцов, диаметр 13 мм, размер пор 0,2 мкм Supelco 54131-U

Фильтры из регенерированной целлюлозы для фильтрации элюентов, диаметр 47 мм, размер пор 0,45 мкм

Agilent Technologies 3150-0576

Колонка хроматографическая Eclipse XDB-Phenyl, 2,1х150 мм, 5 мкм. Agilent Technologies 993700-912

Предколонка защитная XDB-С8, 2,1x12,5 мм, 5 мкм. Agilent Technologies 821125-926

Приготовление элюента А: раствор

1 (цитрат-фосфатный буферный раствор): растворяли 1,2 г ± 0,025 г кислоты лимон-ной в 250 мл воды очищенной; концентра-ция кислоты лимонной в полученном рас-творе равна 0,025 моль/л, pH=2,68±0,05. После перемешивания доводили рН рас-

твора до 6,5 сначала 10 М раствором на-трия гидроксида, затем 0,1 М раствором натрия гидроксида. Раствор 2:5 мл 1 М ки-слоты фосфорной растворяли в 200 мл во-ды очищенной. После перемешивания до-водили рН раствора до 6,5 сначала 10 М раствором натрия гидроксида, затем 0,1 М


61

раствором натрия гидроксида. Растворы 1 и 2 смешивали в соотношении 1:1, полу-ченный раствор (элюент А) отфильтровы-вали через фильтр из регенерированной целлюлозы с размером пор 0,45 мкм.

Приготовление элюента B: смеши-вали ацетонитрил, метанол и воду очи-щенную в соотношении 45:45:10 (v/v/v).

Приготовление рабочих растворов

10 М раствор натрия гидроксида:

в мерную колбу вместимостью 50 мл, со-держащую приблизительно 35 - 40 мл во-ды очищенной, порциями вносили 20 г на-трия гидроксида, перемешивая и охлаждая при этом мерную колбу на водяной бане. Доводили объем раствора водой очищен-ной до метки, перемешивали.

0,1 М раствор натрия гидроксида: в мерную колбу вместимостью 50 мл, со-держащую приблизительно 30 - 35 мл во-ды очищенной, вносили 0,2 г натрия гид-роксида, перемешивая и охлаждая при этом мерную колбу на водяной бане. До-водили объем раствора водой очищенной до метки, перемешивали.

0,05 М раствор натрия гидрокси-да: в мерную колбу вместимостью 2 л, со-держащую приблизительно 150 - 200 мл воды очищенной, вносили 4 г натрия гид-роксида, перемешивая и охлаждая при этом мерную колбу на водяной бане. До-водили объем раствора водой очищенной до метки, перемешивали.

1 М раствор кислоты фосфорной: в мерную колбу вместимостью 100 мл, со-держащую приблизительно 25 мл воды очищенной, порциями добавляли 68 мл кислоты фосфорной концентрированной (плотность кислоты равна 1,70 г/мл), пере-мешивали, доводили объем раствора до метки водой очищенной. Полученный рас-твор тщательно перемешать.

0,5 М боратный буферный рас-твор: отвешивали 3,09 г ± 0,06 г кислоты борной, переносили в стакан вместимо-стью 100 мл, добавляли 90 мл воды очи-щенной, доводили рН раствора до 10,2 на-трия гидроксидом. Затем переносили по-лученный раствор в мерную колбу вме-

стимостью 100 мл, доводили объем рас-твора до метки водой очищенной.

Раствор диальдегида орто-фталевого: отвешивали 3 мг ± 0,06 мг ди-альдегида орто-фталевого, растворяли в 50 мкл метанола, тщательно перемешивали. Раствор хранили в атмосфере инертного газа.

Реагент для дериватизации: в мерную колбу вместимостью 5 мл, содер-жащую 2 - 2,5 мл боратного буферного раствора, добавляли 17 мкл раствора ди-альдегида орто-фталевого и 17 мкл 2-меркаптоэтанола, тщательно перемешива-ли. Доводили объем раствора до метки бо-ратным буферным раствором. Реагент для дериватизации использовали в день прове-дения анализа.

Валидация: для валидации мето-дики количественного анализа таблеток натрия алендроната определяли следую-щие характеристики: специфичность, ли-нейность, внутрилабораторная точность, сходимость, правильность и робастность.

Для определения специфичности метода проводили исследование таблеток плацебо. (ГФ РБ 5.3.3.2).

Линейность изучали путем оценки зависимости площади хроматографическо-го пика от концентрации раствора натрия алендроната. В эксперименте использова-ли растворы 5-и концентраций: 30, 40, 50, 60 и 70 мг/л. Строили график и рассчиты-вали коэффициент корреляции (ГФ РБ 5.3.3.3).

Внутрилабораторную точность изу-чали путем последовательного выполнения 10 анализов, выполненных в разные дни с использованием разного лабораторного оборудования (ГФ РБ 5.3.3.6.2).

При определении сходимости вы-полняли 10 определений содержания на-трия алендроната в таблетке (ГФ РБ 5.3.3.6.1).

Для подтверждения правильности определяли содержание натрия алендрона-та в 3-х растворах с концентрацией 30, 50 и 70 мг/л (ГФ РБ 5.3.3.5.1.2).

Робастность доказывали по пара-метрам воспроизводимости времен удер-живания пика натрия алендроната, площа-ди пика натрия алендроната в градуиро-


62

вочных растворах при рутинном анализе большого количества (n > 200) испытуе-мых образцов на протяжении длительного времени (более 20 календарных дней, ГФ РБ 5.3.3.9).


Методика анализа, разработанная

для количественного определения фарма-цевтической субстанции натрия алендро-ната [6,15,16], была адаптирована для таб-

леток. В результате была разработана сле-дующая методика количественного опре-деления натрия алендроната в таблетках «Гамимакс» (методика №1).

Для дериватизации использовали диальдегид орто-фталевый. Спектр погло-щения раствора натрия алендроната, под-вергнутого дериватизации, представлен на рисунке 1. Ориентировочное время элюи-рования пика натрия алендроната в опи-санных условиях составляет 2,3 мин.

nm220 240 260 280 300 320 340 360 380

mAU

0

100

200

300

400

*DAD1, 2.270 (486 mAU, 82) Ref=2.117 & 2.484 of SIG000019.D

Рисунок 1 – Спектр поглощения раствора натрия алендроната, подвергнутого дериватизации орто-фталевым диальдегидом (получен при анализе стандартного образца с концентрацией

70 мг/л). Максимумы поглощения: 228 нм, 336 нм. Пробоподготовка: таблетку натрия

алендроната растирали в ступке до полу-чения однородного порошка, отбирали на-веску массой 0,130 г ± 0,007 г (содержание натрия алендроната в данной навеске при-близительно равно 10 мг), переносили во флакон из полиэтилена или полипропилена вместимостью 100 мл, добавляли 50,0 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида. Кон-центрация натрия алендроната в получен-ном растворе приблизительно равна 200 мг/л. Флакон закрывали, перемешивали на вортекс-мешалке в течение примерно 10 с, затем обрабатывали ультразвуком в ульт-развуковой бане при комнатной темпера-туре в течение 10 мин. После этого остав-ляли раствор на 10 мин. при комнатной температуре. Отбирали аликвоту раствора объемом 1,5 – 2 мл, фильтровали через тефлоновый фильтр с размером пор 0,2

мкм и разбавляли в 4 раза 0,05 М раство-ром натрия гидроксида для получения рас-твора с приблизительной концентрацией натрия алендроната 50 мг/л. Полученный раствор (проба А) в дальнейшем использо-вали для анализа.

Температура термостата колонок – 30ºС; хроматографическая колонка Eclipse XDB-Phenyl 2,1х150 мм, 5 мкм («Agilent Technologies»); защитная предколонка Eclipse XDB-C8, 2,1x12,5 мм, 5 мкм, ско-рость потока мобильной фазы – 0,4 мл/мин; состав элюента (по объему): 75 % элюента А, 25 % элюента B. Детектирова-ние проводили с использованием детекто-ра переменной длины волны (или диодной матрицы) на длине волны 336 нм. Общее время одного анализа составляло 5 мин.

Приготовление испытуемого рас-твора: во флакон вместимостью 2 мл из


63

темного стекла со вставкой для микрообъ-емов на 250 мкл добавляли 75 мкл борат-ного буферного раствора и 15 мкл реагента для дериватизации, флакон закрывали крышкой, встряхивали в течение несколь-ких секунд, затем добавляли 15 мкл пробы А или раствора рабочего стандартного об-разца (РСО). Флакон закрывали крышкой, интенсивно перемешивали в течение 30 с, вводили пробу в хроматограф; объем про-бы – 50 мкл.

Качественный и количественный анализ натрия алендроната проводили с использованием внешнего стандарта. Для построения градуировочного графика на-веску стандартного образца натрия аленд-роната массой 0,005 г, взвешенную с точ-ностью до 0,0001 г, количественно перено-сили в мерную колбу вместимостью 5 мл, содержащую 2 – 3 мл 0,05 М раствора на-трия гидроксида. Раствор тщательно пере-мешивали, помещали в ультразвуковую баню при комнатной температуре на 5 мин. до полного растворения навески, до-

водили объем раствора до метки 0,05 М раствором натрия гидроксида, тщательно перемешивали. Концентрация натрия алендроната в полученном растворе со-ставляла 1000 мг/л.

Путем последовательных разбавле-ний из раствора с концентрацией 1000 мг/л получали растворы с концентрациями 30 мг/л, 40 мг/л, 50 мг/л, 60 мг/л, 70 мг/л. Примерная схема разбавления приведена в таблице 3: для получения раствора с тре-буемой концентрацией в мерную колбу объемом 5 мл, содержащую 2 – 2,5 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида, добавляли раствор натрия алендроната с концентра-цией 1000 мг/л в объеме, указанном в таб-лице 3 в строке соответствующей концен-трации. Перемешивали, доводили объем раствора до метки 0,05 М раствором на-трия гидроксида. Пример хроматограммы испытуемого образца приведен на рисунке 2. На рисунке 3 приведены хроматограммы растворов для градуировки.

Таблица 3 - Схема разбавления для получения градуировочных растворов натрия алендрона-

та. № п/п

Концентрация натрия алендро-ната в растворе, мг/л

Объем раствора натрия алендроната с концентрацией 1000 мг/л, мкл

1 30 150 2 40 200 3 50 250 4 60 300 5 70 350

min0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5

mAU

0

10

20

30

40

50

60

70

80

DAD1 A, Sig=336,16 Ref=off (DRUG\2010\2010-05-11\SIG000060.D)

2.4

22 -

Ale

n

Рисунок 2 – Хроматограмма испытуемого раствора натрия алендроната, полученного при

анализе таблеток «Гамимакс» (Методика 1)


64

min0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5

mAU

0

20

40

60

80 Ale

n

Рисунок 3 – Хроматограммы растворов для градуировки с концентрацией натрия алендрона-та 30 мг/л, 40 мг/л, 60 мг/л, 70 мг/л (Методика 1)

Выполнение анализа: хромато-

графировали последовательно градуиро-вочные растворы в диапазоне концентра-ций 30 – 70 нг/мл, затем – испытуемые растворы, получая для каждого раствора не менее 2 хроматограмм. Строили линей-ную градуировочную зависимость вида y =

kx + b. Пример градуировочной зависимо-сти для натрия алендроната приведен на рисунке 4. С использованием градуиро-вочного графика находили концентрацию натрия алендроната в испытуемых раство-рах.

Amount[mg/L]0 20 40

Area

0

200

400

600

800

13 2

4

5

Alen, DAD1 A

Correlation: 0.98879

Rel. Res%(1): 9.679

Area = 12.7349553*Amt -0.9956683

Рисунок 4 – Градуировочный график для натрия алендроната в диапазоне концентраций 30 – 70 мг/л (Методика 1)

В процессе валидации методики 1

было обнаружено, что при анализе боль-шого количества образцов ЛС (более 100) время удерживания пика натрия алендро-ната уменьшалось (Sr >15%), что сопрово-ждалось ухудшением параметров симмет-рии пика определяемого вещества и раз-

решения с предшествующим пиком (пред-положительно, сопродукт реакции дерива-тизации натрия алендроната с избытком орто-фталевого альдегида). Восстановле-ния удовлетворительных параметров хро-матографирования не удалось добиться ни путем замены защитной предколонки на


65

новую, ни путем промывки используемой хроматографической колонки различными композициями органических растворите-лей и буферных растворов с использовани-ем как нормального направления потока подвижной фазы, так и обращенного. Опи-санные наблюдения могут свидетельство-вать о необратимом повреждении (измене-нии свойств) неподвижной фазы хромато-графической колонки, что привело к кри-тическому ухудшению параметров хрома-тографирования.

Для обеспечения должной степени робастности методики по параметрам «стабильность времени удерживания» и «симметрия пика» она была модифициро-вана в разделе «хроматографическая сис-

тема». В методику были внесены следую-щие изменения:

- хроматографическая колонка Eclipse XDB C18 (4,6х150 мм, 5 мкм) («Agilent Technologies»); защитная предколонка Eclipse XDB C18, 4,6x12,5 мм, 5 мкм;

- скорость потока мобильной фазы – 1,2 мл/мин;

- элюент А: 4,73 г динатрия гидрофос-фата, 30 мг тетрабутилгидросульфата ам-мония на 1 л воды для хроматографии Р, довести pH до 8,0 раствором 1 М ортофос-форной килоты;

- состав элюента (по объему): 70 % элюента А, 30 % элюента B.

Хроматограмма раствора стандарт-ного образца натрия алендроната в кон-центрации 50 мг/л приведена на рисунке 5.

min0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5

mAU

0

1

2

3

4

5

6

7

DAD1 A, Sig=336,16 Ref=off (DRUG\2010-09-24P2\SIG000007.D)

2.3

96 -

Ale

n

Рисунок 5 – Хроматограмма раствора для градуировки с концентрацией натрия алендроната 50 мг/л (методика 2)

Валидация разработанной методики

2 показала ее соответствие всем критериям приемлемости, изложенным в документах [17-19], для количественного определения натрия алендроната методом высокоэф-фективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием в лекарственном средстве «Гамимакс», таблетки в контур-ной ячеистой упаковке №10.

Для разработанной методики уста-новлены следующие аналитические харак-теристики: доказана специфичность (се-лективность); подтверждена линейность отклика детектора в диапазоне применения

МИ (30 – 70 мг/л); уравнение калибровоч-ной зависимости имеет вид y = kx+b и характеризуется следующими параметрами: k = 10,25, ε(k) = 4,5 %, b = -0,78, ε(b) = 17,9 %, r = 0,9875; предел обна-ружения – 2 мг/л (экспериментально под-твержденное значение), 1,7 мг/л (рассчи-танное значение); величина смещения ре-зультата (B, %) по результатам анализа в разные дни (n = 10) – 7,3 % – -8,8 %; внут-рилабораторная точность (Sr, %, n = 10) – от 4,7 % до 13,8 %; сходимость (Sr, %, n = 6) – от 2,3 % до 9,0 %; открываемость (пра-вильность) – 93 % вблизи нижней концен-


66

трации диапазона применения МИ, 97 % в середине диапазона применения МИ и 104 % вблизи верхней концентрации диапазона применения МИ. Доказана устойчивость (робастность) МИ.

Методика 2 была использована для оценки качества лабораторных и промыш-ленных образцов таблеток натрия аленд-роната, а также при исследовании их ста-бильности в естественных условиях хране-ния на протяжении двух лет (предвари-тельный срок годности таблеток).


Разработана методика количествен-

ного определения натрия алендроната в таблетках с использованием ВЭЖХ с предколоночной дериватизацией орто-фталевым диальдегидом с детектировани-ем в УФ-области. Процедурой валидации было доказано, что методика является приемлемой для определения количест-венного содержания натрия алендроната в лекарственном средстве «Гамимакс», таб-летки в контурной ячеистой упаковке №10.

SUMMARY

I.B. Grintsevich, S. Rzheuski

THE QUANTITATIVE DEFINITION OF SODIUM ALENDRONATE IN TABLETS

The technique of quantitative defini-tion of sodium alendronate in tablets Gami-max with the use of HPLC with pre-column derivatization dialdehyde о-phthalic with de-tecting in UV-area is developed and validated. Linearity of the response of the detector is proved in a range of application of a tech-nique (30 - 70 mg / Ѕ); the equation calibra-tion looks like dependence y = kx+b and is characterized by the following parameters: k = 10,25, ε (k) = 4,5 %, b =-0,78, ε (b) = 17,9 %, r = 0,9875; a limit of detection - 2 mg / Ѕ (experimentally confirmed value), 1,7 mg / Ѕ (the designed value); size of displacement of result (B, %) by results of the analysis in dif-ferent days (n = 10) - 7,3 % --8,8 %; intra-laboratory accuracy (Sr, %, n = 10) from 4,7 % up to 13,8 %; convergence (Sr, %, n = 6) from 2,3 % up to 9,0 %; correctness of 93 % near to the bottom concentration of a range of

application of a technique, 97 % in the middle of a range and 104 % near to the top concen-tration of a range of application of a tech-nique.

Key words: sodium alendronate, quan-titative definition, tablets, HPLC with pre-column derivatization.


1. Russell, RG. Bisphosphonates: from the laboratory to the clinic and back again / R.G. Russell, M.J. Rogers. – Bone. – 1999. – P.25, 97–106. 2. Hosking, D. Prevention of bone loss with alendronate in postmenopausal women under 60 years of age. Early Postmenopausal Inter-vention Cohort Study Group / D. Hosking [et al.]. – 1998, – №338. – 485 р. 3. The determination of 4-amino-1-hydroxybutane-1,1-diphosphonic acid mono-sodium salt trihydrate in pharmaceutical dos-age forms by high-performance liquid chro-matography / J.D. De Marco [et al.]. // J. Pharm.Biomed. Anal. – 1989. - №7. – 1719 р. 4. Kline, W. Determination of 4-amino-1-hydroxybutane-1,1-bisphosphonic acid in urine by automated pre-column derivatization with 2,3-naphthalene dicarboxyaldehyde and high-performance liquid chromatography with fluorescence detection / W. Kline // J. Chro-matogr. – 1990. – № 534. – 139 р. 5. Kline, W. Improved determination of the bisphosphonate alendronate in human plasma and urine by automated pre-column derivati-zation and high-performance liquid chroma-tography with fluorescence and electrochemi-cal detection / W. Kline, B. Matuszewski. // J. Chromatogr. – 1992. - № 583. – 183 р. 6. Ptacek, Р. Determination of alendronate in human urine as 9-fluorenylmethyl derivative by high-performance liquid chromatography / P. Ptacek, J. Klima, J. Macek // J. Chroma-togr. – 2002. – № 767. – 111 р. 7. Lovdahl, M.J. Anion-exchange separation and determination of bisphosphonates and related analytes by post-column indirect fluo-rescence detection / M.J. Lovdahl, D.J. Pietrzyk, J // Anion-exchange separation and determination of bisphosphonates and related analytes by post-column indirect fluorescence detection. – 1999. - № 850. – 143 р.


67

8. HPLC analysis of an amino bisphosphonate in pharmaceutical formulations using postcol-umn derivatization and fluorescence detection / E. Kwong [et al.] // J. Chromatogr.Sci. – 1990. - №28. – 563 р. 9. Yieng, R. Determination of alendronate sodium by ion chromatography with refrac-tive index detection / R. Yieng, Z. Xue // J. Chromatogr. – 1996. – №719. – 345 р. 10. Tsai, E.W. Determination of alendronate in pharmaceutical dosage formulations by ion chromatography with conductivity detection / E.W. Tsai, M.A. Brooks // J. Chromatogr. – 1992. - №596. – 217 р. 11. Tsai, E.W. Determination of bisphospho-nate drugs in pharmaceutical dosage formula-tions by ion chromatography with indirect UV detection / E.W. Tsai [et al.] // – J. Pharm. Biomed. Anal. – 1994. – № 12. – 983 р. 12. Pharmaceutical application of liquid chromatography-mass spectrometry II. Ion chromatography-ion spray mass spectrometric characterization of alendronate / X.Z. Qin [et al.] // J. Chromatogr. – 1994. - № 686. – 205 р. 13. The determination of alendronate sodium in tablets by inductively coupled plasma (ICP) / D.G. Reed [et al.] // J. Pharm.Biomed. Anal. – 1995. - № 13. – 1055 р. 14. Abdel Razak, О. The utilization of cop-per(II) phosphate for the anodic stripping voltammetric assay of alendronate sodium, desferrioxamine mesylate and lisinopril / O. Abdel Razak, S.F. Belal, M.M. Bedair, R.S. Haggag // Talanta. – 2003. – № 59. – 1061 р. 15. Yun, Min-Hyuk. High-performance liquid chromatography method for determing alen-dronate sodium in human plasma by detecting fluorescence: application to a pharmacoki-netic study in humans / Min-Hyuk Yun, Kwang –il Kwon // J. Pharm.Biomed. Anal. – 2006. - №40. – 168 р. 16. Al Deeb, Sami K. Spectroscopic and HPLC methods for the determination of alen-dronate in tablets and urine / Sami K. Al Deeb, Imad I. Hamdan, Samer M. Al N Ajjar // Talanta. – 2004. - № 64. – 695 р. 17. Guidance for Industry. Bioanalytical Method Validation. – FDA. May 2001. 18. СТБ 1436-2004 «Производство лекар-ственных средств. Валидация методик ис-пытаний».

19. Государственная Фармакопея Республи-ки Беларусь: Общие методы контроля каче-ства лекарственных средств.- Том 1.- Минск. - МГПТК полиграфии. - 2006. - 656 с. Адрес для корреспонденции: 210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра организации и экономики фармации с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8 (0212) 24-94-38. Ржеусский С.Э.


************************************* Ю.Г. Чернецкая1, Ю.Г. Белковская1, Т.В. Трухачева1, А.И. Жебентяев2, П.Т. Петров3

РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕ-ТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИРАМИ-СТИНА В ГИДРОГЕЛЕВЫХ ПОЛИ-МЕРНЫХ МАТРИЦАХ С ИСПОЛЬЗО-ВАНИЕМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 1РУП «Белмедпрепараты», г. Минск 2Витебский государственный медицинский университет 3ГУ Научно-производственный центр «Институт фармакологии и биохимии Национальной академии наук Беларуси», г. Минск

Разработана методика иденти-фикации и количественного определения мирамистина (миристамидопропилди-метилбензиламмония хлорида) в новой лекар-ственной форме на основе гидро-гелевых полимерных матриц с использо-ванием высокоэффективной жидкост-ной хроматографии со спектрофото-метрическим детектором. Установле-ны оптимальные условия хроматогра-фического анализа: колонка размером 250х4,6 мм, заполненная октилсилиль-ным силикагелем (Lichrospher 100 RP-8), в качестве подвижной фазы использова-


68

ли 0,5 М раствор аммония ацетата в смеси метанол - вода (93:7), скорость элюирования – 1,0 мл/мин. Детектиро-вание проводили при длине волны 261 нм. Объем вводимой пробы – 100 мкл. Опти-мизированы условия пробоподготовки образцов для анализа. В результате про-веденной валидации подтверждены из-бирательность, линейность, повторяе-мость, воспроизводимость и правиль-ность разработанной методики.

Ключевые слова: высокоэффек-тивная жидкостная хроматография, гидрогелевые полимерные матрицы, ми-рамистин.

ВВЕДЕНИЕ

Мирамистин находит применение в

производстве антисептических средств, обладающих широким спектром противо-микробного действия. Освоены и выпус-каются различные виды лекарственных форм на основе мирамистина: мази, рас-творы, клеи [1].

Для лечения инфицированных ран и ожогов разработан новый вид аппликаци-онных лекарственных средств с антисеп-тиком мирамистином (миристамидопро-пилдиметилбензиламмония хлоридом) [2]. Новая лекарственная форма для наружного применения «Гидрогелевые пластины» включена в Государственную фармакопею Республики Беларусь (ГФ РБ) [3]. Трех-мерная полимерная структура гидрогеле-вых пластин формируется в результате воздействия ионизирующего излучения на растворенные в воде полимеры медицин-ского назначения. Нами установлено, что благодаря введению в состав мирамистина, антисептика широкого спектра действия из группы четвертичных аммониевых соеди-нений, гидрогелевые матрицы обладают выраженным противомикробным действи-ем по отношению к наиболее часто встре-чающимся условно-патогенным микроор-ганизмам, основным возбудителям ране-вой инфекции: грамположительным (ста-филококкам, стрептококкам, бациллам) и грамотрицательным (энтеробактериям и псевдомонадам), проявляют высокую про-тивогрибковую активность в отношении

Candida albicans [4]. Гидрогелевые пласти-ны предназначены для лечения свежих травматических ран, травматических де-фектов мягких тканей в первую и вторую фазы раневого процесса, травматических дефектов мягких тканей с обнажением костей и сухожилий, фликтен, гранули-рующих ран после аутодермопластики, донорских дефектов после взятия кожных лоскутов. Новые методики лечения трав-матических дефектов мягких тканей с ис-пользованием гидрогелевых форм позво-ляют сократить сроки лечения поверхно-стных дефектов мягких тканей конечно-стей в 3,2, а глубоких - в 1,7 раза по срав-нению с контрольной группой, значитель-но улучшить качество жизни пациентов [5]. Комплексное лечение рожистого вос-паления, включающее местное применение гидрогелевых пластин, позволило сокра-тить средний койко-день при рожистом воспалении с 14,3 до 13,0, при этом уменьшить общую летальность с 0,76 % до 0,21 % [6].

Количественное определение мира-мистина проводят титрованием 0,1 М рас-твором кислоты хлорной в кислоте уксус-ной (НД РБ 0050С-2009 «Миритин»), в 0,01 % растворе - меркуриметрическим титрованием (ФС РБ 0386-05 «Септоми-рин, раствор для наружного применения»). Известны способы определения количест-венного содержания мирамистина в лекар-ственных формах методами потенциомет-рического титрования и прямой потенцио-мет-рии с использованием трехточечного градуировочного графика [7]. При опреде-лении мирамистина в мази и суппозитори-ях «Пантестин», содержащих D-пантенол и мирамистин в количествах 5 % и 0,5 %, соответственно, был использован метод гетерофазного титрования [8]. Однако данные методики характеризуются высо-кой трудоемкостью, неспецифичностью и низкой чувствительностью.

Поэтому является актуальной задача разработки высокочувствительной, селек-тивной методики идентификации и коли-чественного определения мирамистина в новой лекарственной форме - гидрогеле-вых пластинах. Для разработки такой ме-тодики нужно оптимизировать процесс


69

пробоподготовки, снизить временные и трудовые затраты, что актуально при по-следующем использовании разработанной методики в контрольно-аналитических ла-бораториях.


Реактивы. Для проведения анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) применяли сле-дующие реактивы: вода деионизированная, полученная с помощью системы Millipore Milli-Q (Millipore, Milford, MA, USA), ме-танол (Merck, кат. № 1.06018.2500), аммо-ния дигидрофосфат (Merck, кат. № 1.01126.0502), ацетонитрил (Криохром®, РФ), аммония ацетат (Baker Analyzed HPLC® Reagent, кат. № 0390), изопропанол (Sigma-Aldrich, кат. № 31,416-1), спирт этиловый (СТБ 1334-2003).

Подготовка образцов гидрогелевых пластин. Для исследования использовали образцы лекарственного средства «Гидро-гелевые пластины мирамистина 0,05 %» размером 6х9 см производства РУП «Бел-медпрепараты».

При производстве гидрогелевых матриц использовали следующие компо-ненты: повидон (Ph. Eur.) производства AppliChem (Германия); агар (Ph. Eur.) про-изводства Merck (Германия); полиэтиле-ноксид низкомолекулярный 400 (ТУ 2483-167-05757587-2000) производства ОАО «Сибур-Нефтехим» (РФ). В качестве ак-тивного антимикробного компонента была использована субстанция миритина (мира-мистина) (рег. удостоверение № 582/03/09) с содержанием основного вещества - не менее 99,0 %, примесей – не более 1,0 %. Радиационную обработку гидрогелей про-водили на ускорителе электронов УЭЛВ-10-10 ГНУ «ОИЭиЯИ-Сосны» НАН РБ. Параметры облучения описаны ранее [3].

В качестве образцов сравнения ис-пользовали опытные образцы гидрогеле-вых полимерных матриц, не содержащие мирамистин.

Приготовление стандартных рас-творов. Раствор рабочего стандартного образца (РСО) мирамистина готовили, рас-творяя 0,025 г (точная навеска) субстанции мирамистина в 20 мл воды в мерной колбе

вместимостью 25,0 мл, доводили объем водой до метки и перемешивали. Затем 5,0 мл полученного раствора помещали в мер-ную колбу вместимостью 50,0 мл и дово-дили объем 96 % спиртом этиловым до метки и перемешивали.

Экстракция. Для приготовления ис-пытуемых растворов около 5,00 г измель-ченных гидрогелевых пластин помещали в колбу вместимостью 50,0 мл, добавляли соответствующий растворитель до 25,00 г и проводили экстракцию с использованием встряхивания на шейкере IKA® 130 basic (Германия) приготовленных проб в тече-ние определенного промежутка времени. Полученные извлечения из матриц фильт-ровали через бумажный фильтр «синяя лента», а затем через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм (Millipore, Bed-ford, MA, USA).

Спектрофотометрический анализ. Спектральные свойства раствора мириста-мидо-пропилдиметилбензиламмония хло-рида (0,5 мг/мл в 96 % спирте этиловом) были изучены с использованием спектро-фотометра Lambda 25 UV/VIS Spectrometer (Perkin Elmer, Гер-мания) в диапазоне длин волн от 220 до 300 нм.

Хроматографический анализ. Раз-работка методики анализа гидрогелевых пластин мирамистина проводилась с ис-пользованием жидкостного хроматографа «Agilent 1200 Series» со спектрофотомет-рическим детектором модели Agilent G1314B. Диапазон длин волн - от 190 до 700 нм. Диапазон шкалы детектора - от 0,0001 до 2,0 о.ед. Цена деления – 0,0001 о.ед. В системе используется четырехка-нальный насос модели Agilent G1311А. Скорость подвижной фазы устанавливает-ся от 0,001 до 10 мл/мин при давлении 0-410 атмосфер. Точность установки потока - ± 0,5 % при 1 мл/мин (изопропиловый спирт). Воспроизводимость установки по-тока (RSD) - ± 0,3 % при 1 мл/мин (смесь вода/метанол). Система оснащена авто-самплером модели Agilent G1367B. Диапа-зон объема ввода образца - от 0,1 до 100 мкл с погрешностью 0,2 %. Расчет количественного содержания ми-рамистина в гидрогелевых пластинах про-водили по формуле:


70

где S1 – среднее значение площади пика мирамистина, вычисленное из хромато-грамм испытуемого раствора;

S0 - среднее значение площади пика мирамистина, вычисленное из хромато-грамм раствора РСО мирамистина;

m0 – масса навески РСО мирамисти-на, в граммах;

m1 – масса навески гидрогелевой пла-стины, в граммах;

m2 – масса навески гидрогелевой пла-стины со спиртом этиловым, в граммах;

ρ – плотность спирта этилового. Полученные данные обрабатывались

с помощью программы Chem Station Agilent для хроматографии.

Валидация. Валидация разработан-ной методики количественного определе-ния мирамистина в гидрогелевых поли-мерных матрицах проведена по следую-щим аналитическим характеристикам: из-бирательность, линейность, повторяе-мость, внутрилабораторная воспроизводи-мость и правильность [9,10]. Статистиче-скую обработку полученных данных про-водили с использованием программы Mi-crosoft Excel.

Избирательность. Для доказательст-ва избирательности методики проводили сравнительный анализ извлечений из гид-рогелевых пластин, не содержащих дейст-вующего вещества (раствор «плацебо»), из гидрогелевых пластин с мирамистином и раствора РСО мирамистина. Экстракцию компонентов «плацебо» и мирамистина из гидрогелевых матриц проводили 96 % спиртом этиловым в течение 3-х часов, как описано в разделе «Экстракция». Кри-терием приемлемости служило отсутствие на хроматограммах раствора «плацебо» пиков со временем удерживания, совпа-дающим со временем удерживания пика мирамистина на хроматограммах раствора РСО.

Линейность. Определение линейно-сти разработанной методики проводилось на 5 уровнях концентрации: 70 %, 90 %, 100 %, 110 % и 130 % от количества мира-

мистина, принятого за 100 % (0,1 мг/мл в пробе). Готовили исходный раствор суб-станции мирамистина с концентрацией 1 мг/мл в 96 % спирте этиловом и выполня-ли соответствующие разведения.

Для оценки линейности методики была представлена графически зависи-мость площади пика мирамистина как функции содержания анализируемого ве-щества. Выполнена статистическая обра-ботка результатов анализа и вычислена регрессивная линия методом наименьших квадратов. Критерием приемлемости ли-нейности является коэффициент корреля-ции, величина которого должна быть не ниже 0,99, и пересечение с осью Y – не бо-лее 2,0 % отклика номинальной концен-трации.

Повторяемость. Повторяемость оценивалась по результатам 6 параллель-ных анализов одной серии лекарственного средства «Гидрогелевые пластины мира-мистина 0,05 %», проведенных исследова-телем в один день. Критерий приемлемо-сти выражается величиной относительного стандартного отклонения, которая не должна превышать 5 %.

Внутрилабораторная воспроизво-димость. Внутрилабораторная воспроиз-водимость оценивалась по результатам 6 параллельных анализов одной серии ле-карственного средства, выполненных дву-мя исследователями в разные дни, при ис-пользовании различных хроматографиче-ских колонок и химической посуды. Вели-чина относительного стандартного откло-нения не должна превышать 5 %.

Правильность. Выполнен анализ модельных смесей на трех уровнях кон-центраций, эквивалентных 70 %, 100 % и 130 % от номинального содержания мира-мистина (0,1 мг/мл в пробе). Модельные растворы готовили, добавляя к раствору «плацебо» определенное количество рабо-чего стандартного образца мирамистина и проводили дальнейшую пробоподготовку и анализ согласно методике. Рассчитывали величину процента восстановления как от-ношение полученного при анализе количе-ства к известному добавленному количест-ву мирамистина. Критерием приемлемости является процент восстановления, при ис-

010

02011 1005025

)100(5X АpmS

WmmS⋅

×××××−××××

=


71

пользовании растворов заданных концен-траций, скорректированный на 100 %, ко-торый должен составлять 95 – 105 %.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Спектрофотометрическое опреде-

ление мирамистина. Мирамистин пред-ставляет собой соль четвертичного аммо-ниевого соединения – миристамидопро-пилдиметилбензиламмония хлорид моно-гидрат. Как видно из химической структу-

ры (рисунок 1), мирамистин является по-лярным соединением.

Благодаря наличию бензольного кольца миристамидопропилдиметилбензи-ламмония хлорид поглощает в ультрафио-летовой области спектра. УФ-спектр рас-твора мирамистина (0,5 мг/мл) в 96 % спирте этиловом (рисунок 2) имеет макси-мумы при длинах волн (257±2) нм, (262±2) нм и (270±2) нм.

C H 2 N + C H 3

C H 3

( CH2 )3 NH C

O

C H 3 (CH2)12 C l H2O- .

Рисунок 1 – Структурная формула миристамидопропилдиметилбензиламмония хлорида мо-ногидрата (мирамистина)

Рисунок 2 – УФ-спектр мирамистина (0,5 мг/мл в 96 % спирте этиловом)

С учетом определения максимумов

поглощения мирамистина в качестве ана-литической длины волны для детектирова-ния при проведении анализа методом жид-костной хроматографии выбрали 261 нм.

Методика определения мирами-стина с применением ВЭЖХ. При разра-ботке методики проводился выбор опти-мальных условий хроматогра-фирования: тип и геометрия используемого сорбента, природа и соотношение растворителей в подвижной фазе.

При выборе хроматографических систем использовали колонки с различны-ми сорбентами с размером частиц 5 мкм (Discovery® Amide C16 размером 250х4,6 мм, заполненная пальмитамидопропилси-лильным силикагелем; катионообменная BioBasic SCX размером 250х4,6 мм, запол-ненная силикагелем с привитыми группа-ми бензил-3-сульфоновой кислоты, Hyper-sil Gold CN размером 250х4,6 мм, запол-ненная силикагелем нитрильным, обраще-но-фазовые колонки С18).


72

Оптимальные условия разделения пиков вспомогательных компонентов гид-рогелевых матриц и мирамистина были получены при использовании колонки, за-полненной октилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм (Lichrospher 100 RP-8 размером 250х4,6 мм).

При разработке методики идентифи-кации и количественного определения ми-рамистина для приготовления подвижной фазы применялись различные системы растворителей. При использовании в каче-стве подвижной фазы смесей: метанол - 0,15 М аммония дигидрофосфат (30:70), ацетонитрил - 0,15 М аммония дигидро-фосфат (20:80 и 30:70) пик мирамистина был асимметричным и размытым.

Приемлемые результаты были полу-чены при использовании в качестве под-вижной фазы 0,5 М раствора аммония аце-тата в смеси метанол – вода в различных соотношениях (80:20; 85:15; 90:10; 93:7; 95:5). При дальнейшей оптимизации усло-вий элюирования установлено соотноше-ние компонентов подвижной фазы (0,5 М раствор аммония ацетата:смесь метанол – вода в соотношении 93:7; рН=6,7), при ко-тором форма пика мирамистина соответст-вует критериям пригодности хроматогра-фической системы (коэффициент асиммет-рии пика (Т) – не более 2, количество тео-ретических тарелок (N) – не менее 2000). Изменение значения рН подвижной фазы (± 0,5) не оказывало существенного влия-ния на время удерживания мирамистина.

Извлечение мирамистина из гидроге-левых матриц проводили, используя в каче-стве экстрагентов: подвижную фазу, воду для инъекций, метанол, изопропанол и спирт этиловый различной концентрации. Макси-мальное извлечение мирамистина (100 %) из матриц наблюдалось при использовании 96 % спирта этилового (табл. 1).

Кроме того, одним из важных фак-торов для обеспечения наиболее полного экстрагирования действующих веществ является соотношение количества образца и экстрагента, а также степень измельче-ния образца. Благодаря наличию в трех-мерной полимерной структуре пор гидро-гелевые пластины способны впитывать большое количество растворителя. Экспе-риментально были подобраны соотноше-ния навески гидрогеля и количества экст-рагента. В результате проведенных иссле-дований с учетом степени набухания гид-рогелевых матриц установлено оптималь-ное соотношение навески гидрогелевых пластин и экстрагента - 1:4, при котором концентрация мирамистина в экстракте соответствует диапазону применения ме-тодики. При соотношении 1:1 гидрогеле-вые пластины полностью впитывают экст-рагент, т.к. их максимальная степень набу-хания составляет около 3,0; при использо-вании большего количества растворителя (например, при соотношении 1:5; 1:6 и т.д.) концентрация мирамистина в испы-туемом растворе находится ниже диапазо-на применения методики.

Таблица 1 – Влияние экстрагента и степени измельчения гидрогелевых матриц на степень извлечения мирамистина

Экстрагент Размер фрагментов гидрогеле-вых матриц при измельчении,

мм

Степень извлечения мира-мистина из гидрогелевой

матрицы, % 0,5 М раствор аммония ацетата в смеси метанол - вода (93:7)

5х5 Не детектируется

Вода 5х5 Не детектируется Метанол 5х5 Не детектируется Изопропанол 5х5 Не детектируется 70 % спирт этиловый 5х5 60 %

5х5 95 % 2х2 100 %

96 % спирт этиловый

10х10 70 %


73

Полное извлечение мирамистина 96 % спиртом этиловым происходит при из-мельчении гидрогелевых пластин до фраг-ментов размером около 2х2 мм (таблица 1). С уменьшением размеров фрагментов при измельчении увеличивается набухае-мость гидрогелевых пластин, что усложня-ет процесс дальнейшей пробоподготовки (необходимо применение центрифуги-рования, дополнительной фильтрации, большие потери экстракта).

Была изучена зависимость количест-ва извлеченного действующего вещества из полимерных матриц от времени экс-тракции. Процесс экстракции мирамистина из гидрогелевых матриц проводили при соотношении навески гидрогелевой пла-

стины и 96 % спирта этилового - 1:4. Кон-центрация антисептика в пробе составляла 0,1 мг/мл. Для определения оптимального времени экстракции мирамистина из гид-рогелевых пластин проводили анализ в течение 5 часов через равные промежутки времени: 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5 и 5,0 часов.

Результаты исследования зависимо-сти степени извлечения действующего ве-щества от времени экстракции представ-лены на рисунке 3. Максимальный выход мирамистина из матрицы и установление концентрационного равновесия наблюда-ется при экстракции в течение 3 часов.

0

20

40

60

80

100

0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5

время экстракции, ч

степ

ень извл

ечен

ия, %

Рисунок 3 – Зависимость степени извлечения мирамистина из гидрогелевых матриц от времени экстракции

Установлено, что при использовании

в качестве экстрагента 96 % спирта этило-вого в соотношении к навеске измельчен-ной (размеры около 2х2 мм) гидрогелевой пластины 4:1 при экстракции в течение 3 часов степень извлечения мирамистина достигает 100 %.

В результате проведенных исследо-ваний разработана методика идентифика-ции и количественного определения мира-мистина в гидрогелевых полимерных мат-рицах с применением ВЭЖХ: - колонка Lichrospher 100 RP-8 размером 250х4,6 мм, заполненная октилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм; - подвижная фаза: 0,5 М раствор аммония ацетата в смеси метанол - вода (93:7); - скорость подвижной фазы – 1,0 мл/мин; - детектирование при длине волны - 261 нм;

- температура колонки – 20 ºС; - объем вводимой пробы – 100 мкл; - количество повторных инжекций – 3.

Доказана пригодность хроматогра-фической системы: коэффициент асиммет-рии пика составил 1,6; эффективность хроматографической колонки, рассчитан-ная по пику мира-мистина на хромато-граммах раствора РСО мирамистина – 3500 теоретических тарелок; относитель-ное стандартное отклонение, рассчитанное для площадей пиков мирамистина на хро-матограммах раствора РСО мирамистина - не более 2,0 %. На рис. 6 представлена ти-пичная хроматограмма экстракта из гидро-гелевых пластин с мирамистином, полу-ченная с использованием разработанной методики. Время удерживания пика мира-мистина совпадает со временем удержива-


74

ния на хроматограмме раствора РСО (ри-сунок 4).

Разработанная методика ВЭЖХ так-же рекомендована для определения под-линности мирамистина в гидрогелевых пластинах. Идентификацию действующего вещества проводят по определению време-

ни удерживания основного пика на хрома-тограмме мирамистина, экстрагированного из матрицы, которое должно соответство-вать времени удерживания мирамистина при хроматографировании раствора РСО (рисунки 4, 6).

Рисунок 4 – Типичная хроматограмма раствора РСО мирамистина (время удерживания ми-рамистина – 4,84 мин)

Рисунок 5 – Типичная хроматограмма экстракта из гидрогелевых пластин, не содержащих действующих веществ (раствор «плацебо»)


75

Рисунок 6 – Типичная хроматограмма экстракта из лекарственного средства «Гидрогелевые пластины мирамистина 0,05 %» (время удерживания мирамистина - 4,88 мин)

Таблица 2 – Определение линейности разработанной методики

Площадь пика мирамистина в испытуемом растворе, Si

Концентрация ми-рамистина в раст-воре, % от норми-руемого значения

Концентрация мирамистина в растворе, мг/мл S1 S2 S3 Sсредн.

70 0,06775 295,1 294,1 295,7 295,0 90 0,08710 383,3 371,5 384,3 379,7

100 0,09678 426,7 427,2 425,1 426,3 110 0,10646 468,3 471.3 470,6 470,1 130 0,12581 543,9 551,3 543,9 546,4

Коэффициент аппроксимации(не менее 0,99) 0,9987

Пересечение с осью Y (не более 2,0 % отклика номинальной концентрации) 0,3

Рисунок 7 – Зависимость площадей хроматографических пиков от концентрации мира-мистина в ана-

лизируемых растворах


76

Методика исследована в условиях повторяемости и внутрилабораторной вос-производимости. Величина относительно-го стандартного отклонения при оценке повторяемости составила 3,55, при оценке

внутрилабораторной воспроизводимости – 3,58, что свидетельствует о прецизионно-сти методики. Статистическая обработка полученных результатов анализа пред-ставлена в таблице 3.

Таблица 3 – Статистическая обработка результатов анализа (p=0,95; n=12) Хi Xср S2 S RSD,%

0,52; 0,52; 0,53 0,52; 0,49; 0,49 0,52; 0,52; 0,54 0,53; 0,49; 0,50

0,51 0,000299 0,01730 3,47

Правильность разработанной мето-дики подтверждена соответствующими испыта-ниями. Было выполнено 3 опреде-ления для 3-х различных концентраций мирамистина (70 %, 100 % и 130 %). Сред-

ний процент восстановления находился в пределах от 102,5 до 104,5 % (таблица 4), что соответствует критерию приемлемо-сти.

Таблица 4 – Определение правильности методики 70 % 100 % 130 % Раствор РСО

Масса навески РСО мирамистина m (m), мг 7,32 10,18 13,33 24,77 Средняя площадь пика мирамистина на хрома-тограммах испытуемого раствора (раствора РСО) Si(S0)

260,8

359,0

466,0

419,9

Процент восстановления (95,0 – 105,0) 104,5 103,4 102,5 В результате проведенных исследо-

ваний разработана методика идентифика-ции и количественного определения мира-мистина в гидрогелевых полимерных мат-рицах, которая включена в фармакопей-ную статью «Гидрогелевые пластины ми-рамистина 0,05 %» и используется для контроля качества лекарственного средст-ва. Разработанная методика позволяет оп-ределять мирамистин в низких концентра-циях по биологически активной части мо-лекулы в присутствии остаточных коли-честв вспомогательных компонентов гид-рогелей.

В отличие от обычно применяемых для количественного определения солей четвертичных аммониевых оснований ме-тодов ацидиметрии, аргентометрии или меркуриметрии методика ВЭЖХ исключа-ет использование дорогостоящих и ток-сичных реагентов, требующих последую-щего сбора и утилизации остатков титран-та.


1.Разработана методика количественного определения мирамистина в гидрогелевых полимерных матрицах с использованием высокоэффективной жидкостной хромато-графии.

2.Экспериментально подобраны условия пробоподготовки для определения мира-мистина в гидрогелевых пластинах: опре-делен экстрагент (96 % спирт этиловый), соотношение навеска гидрогелевой пла-стины:экстрагент (1:4), время экстракции (3 часа).

3.Проведена валидация разработанной методики. В результате валидации показа-на пригодность хроматографической сис-темы, установлены избирательность, ли-нейность, повторяемость, воспроизводи-мость и правильность методики.

4.Разработанная методика определения мирамистина включена в фармакопейную статью на лекарственное средство «Гидро-


77

гелевые пластины мирамистина 0,05 %» (разделы «Подлинность» и «Количествен-ное определение» ВФС РБ 1028-06).

SUMMARY

Y.G. Charnetskaya, Y.G. Belkovskaya, T.V. Trukhachova, A.I. Zhebentyaev,

P.T. Petrov HPLC METHOD DEVELOPMENT AND VALIDATION FOR MYRAMISTIN DE-

TERMINATION IN HYDROGEL POLYMER MATRIXES

A method for identification and quan-tification of myramistin (myristamidopro-pyldimethylammonium chloride) in novel dosage forms based on hydrogel polymer ma-trixes by high-performance liquid chroma-tographic assay with UV-detection was de-veloped.

The most suitable chromatographic conditions have been found. These conditions comprised the use of a 0,25 mm long and 4,6 mm id chromatographic column packed with octylsilyl silicagel for chromatography with particle diameter of 5 µm (LiChrospher 100 RP-8), 0,5 M ammonia acetate dissolved in a mixture methanol: water (93 : 7) as a mobile phase with a flow rate of 1,0 ml/min, a 100 µl loop injector and a spectrophotometer detec-tor set at 261 nm. The procedure for sample preparation was developed and optimized.

Results of validation of the above-mentioned method were in compliance with acceptance criteria for specificity (placebo effect), linearity, repeatability, intermediate precision and accuracy.

Key words: high-performance liquid chromatographic, hydrogel polymer matrixes, myramistin.


1. Мирамистин: сб. материалов под ред. Ю.С. Кривошеина. - М.: Инфамед, 2001. – 87 с. 2. Противомикробное и ранозаживляющее средство на основе гидрогелевой полимер-ной матрицы: пат. 11060 Республика Бела-русь: МПК (2006) А 61L 15/16/ Петров П.T. [и др.]; заявитель и патентообладатель РУП «Белмедпрепараты» (BY); заявл. 21.10.2005; опубл. 30.06.2007 // Афiцыйны

бюл. / Нац. цэнтр iнтэлектуал. уласнасцi. – 2008. – № 4 (63). – С. 62. 3. Государственная фармакопея Республи-ки Беларусь: офиц. изд-ние / РУП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохране-нии»; ред. Г.В. Годовальников. – Минск: МГПТК полиграфии, 2006. – Т. 1. – 656 с. 4. Противомикробная активность новых лекарственных средств на основе гидроге-левых полимерных матриц / Ю.Г. Чернец-кая [и др.] // Вестник фармации – 2009. – № 3. – С. 63 – 75. 5. Бенько, А.Н. Новые технологии лечения травматических дефектов мягких тканей конечностей с использованием лекарст-венных форм на основе гидрогеля: авто-реф. дис. …канд. мед. наук:14.00.22/ А.Н. Бенько; ГУ «Республиканский научно-практический центр травматологии и ор-топедии». - Минск, 2008. – 27 с. 6. Карман, А.Д. Обоснование комплексно-го метода лечения рожистого воспаления: автореф. дис. …канд. мед. наук:14.00.27/ А.Д. Карман; УО «Белорусский государст-венный медицинский университет». - Минск, 2008. – 20 с. 7. Кобзарь, Г.Л. Применение ионометрии для анализа декаметоксина, мирамистина, этония и их лекарственных форм: авто-реф.дис ….канд.мед.наук:15.00.02/ Г.Л. Кобзарь; Националь-ный фармацевтиче-ский университет. - Харьков, 2005. – 20 с. 8. Георгиевский В.П. Технология и стан-дартизация лекарств. Т.2 [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.himi.oglib.ru/bgl/8268.html. - Да-та доступа: 14.05.2010. 9. СТБ 1436-2004 Производство лекарст-венных средств. Валидация методик испы-таний. – Мн.: Госстандарт. 10. СТБ ИСО 5725-(1-б)-2002. Часть 1-б «Точность (правильность и прецизион-ность) методов и результатов измерений». Адрес для корреспонденции: РУП «Белмедпрепараты», Республика Беларусь, 220007, г. Минск, ул. Фабрициуса, 30, тел./факс 8(017)220 31 42 e-mail: [email protected] Чернецкая Ю.Г.

Поступила 02.08.2010 г. *************************************


78

М.Л. Пивовар, А.И. Жебентяев ЭКСТРАКЦИЯ АЦИКЛОВИРА И АЛЛОПУРИНОЛА ОРГАНИЧЕСКИМИ РАСТВОРИТЕЛЯМИ Витебский государственный медицинский университет

Определены оптимальные условия

экстракции ацикловира и аллопуринола индивидуальными органическими рас-творителями и их смесями. Исследована зависимость распределения ацикловира и аллопуринола от содержания поляр-ных органических растворителей в экс-тракционной смеси. Рассчитаны коэф-фициенты распределения ацикловира и аллопуринола при экстракции 9 индиви-дуальными органическими растворите-лями и 2 смесями типа алкилгалогенид- спирт. Основу смесей составляли хло-роформ и дихлорметан. В качестве до-бавок использовались полярные органи-ческие растворители (изопропанол, н-бутанол или изобутанол). Установлено, что смеси хлороформа и дихлорметана с н-бутанолом или изобутанолом неэф-фективны для экстракции ацикловира и аллопуринола. Лучшими экстрагентами для ацикловира являются смеси дихлор-метан: изопропанол (50 % об.) и хлоро-форм: изопропанол (50 % об.). Аллопури-нол лучше экстрагируется н-бутанолом, изобутанолом и смесями дихлорме-тан: изопропанол (50 % об.), хлоро-форм: изопропанол (50 % об.).

Ключевые слова: ацикловир, алло-пуринол, экстракция, смеси органиче-ских растворителей.

ВВЕДЕНИЕ

Ацикловир и аллопуринол относят-

ся к лекарственным веществам группы производных пурина. Ацикловир является противовирусным лекарственным средст-вом. Аллопуринол ингибирует фермент ксантиноксидазу, применяется как проти-воподагрическое средство [1]. Использо-вание данных лекарственных средств в ме-

дицинской практике обусловливает необ-ходимость определять их содержание в биожидкостях или пробах тканей при про-ведении фармакокинетических исследова-ний или в случае отравления.

Одним из простых и доступных ме-тодов разделения и концентрирования яв-ляется жидкость-жидкостная экстракция. В статьях [2-4] описаны методики определе-ния ацикловира в плазме крови методом ВЭЖХ. Выделение ацикловира проводи-лось смесью дихлорметан: изопропанол. Примеров применения других экстраген-тов для извлечения ацикловира в литера-туре не найдено. Извлечение аллопуринола из биологических жидкостей проводят этилацетатом [5].

Следует отметить, что в литератур-ных источниках отсутствует обоснование выбора экстрагента для пробоподготовки. Кроме того, нами не обнаружены данные по коэффициентам распределения ацикло-вира и аллопуринола при экстракции ин-дивидуальными органическими раствори-телями и их смесями, которые позволяли бы сделать вывод об их эффективности.

Данная работа имеет целью опреде-лить оптимальные условия экстракции ацикловира и аллопуринола индивидуаль-ными органическими растворителями и смесями типа алкилгалогенид- спирт из водной фазы для проведения пробоподго-товки при химико-токсикологическом ис-следовании биоматериала.


В работе использовали образцы

ацикловира и аллопуринола фармакопей-ной чистоты.

В качестве экстрагентов были ис-пользованы хлороформ (х.ч.), дихлорметан (х.ч.), дихлорэтан (х.ч.), этилацетат (ч.д.а.), бутилацетат (х.ч.), амилацетат (х.ч.), н-бутанол (ч.д.а.), изобутанол (ч.д.а.), изо-пропанол (х.ч.), гексан (х.ч.), гептан (х.ч.), толуол (х.ч.), диэтиловый эфир (х.ч.). Так-же использовали смеси хлороформа или дихлорметана с различной мольной долей или объемной долей н-бутанола, изобута-нола или изопропанола. Расчет изомоляр-ной серии для смесей растворителей вы-


79

числяли по уравнениям [6]. Перед прове-дением эксперимента и приготовлением экстракционных смесей хлороформ пред-варительно очищали от этилового спирта.

Остальные растворители дополнительной очистке не подвергали.

N

N

N

N

OH

NH2

O

OH

N

N

NH

N

OH ацикловир аллопуринол

Для приготовления буферных рас-

творов использовали соли квалификации ч.д.а.

Ввиду частичной растворимости изобутанола, бутанола, этилацетата, бу-тилацетата и амилацетата в воде, водная фаза предварительно насыщалась одним из них. В данном случае расчет коэффициен-тов распределения можно осуществить по классической формуле (1):

â

î

CCD = (1),

где: Cо – концентрация вещества в ор-ганической фазе; Cв – концентрация веще-ства в водной фазе.

Вследствие того, что определяемые коэффициенты распределения малы, для уменьшения влияния погрешностей, свя-занных с приготовлением растворов, и для уменьшения количества промежуточных расчетов формула (1) была преобразована в формулу (2):

в

внач

AAA

D−

= (2),

где: Aнач – оптическая плотность вод-ной фазы до экстракции; Aв – оптическая плотность водной фазы после экстракции.

Изопропанол неограниченно сме-шивается с водой и при экстракции в со-ставе смеси органических растворителей частично переходит в водный раствор, распределяясь между водной и органиче-ской фазами. Данное явление приводит к значительному изменению соотношения объемов фаз после экстракции. Для его компенсации предварительно были уста-новлены объемы водной и органической фаз после экстракции смесями органиче-ских растворителей с различным содержа-

нием изопропанола. При расчетах коэффи-циентов распределения в формулу (2) вво-дили коэффициент r, и она приобретала вид (3):

rA

AAD

в

внач ⋅−

= (3),

где: о

в

VVr = ; Vв – объем водной фазы;

Vо – объем органической фазы. Равновесную экстракцию при рав-

ных объемах водной и органической фаз (по 4 мл) изучали в экстракционных фла-конах объемом 10 мл. Температура при изучении экстракционных характеристик составляла 20±1 °C. В каждый флакон по-мещали рассчитанные объемы растворов ацикловира или аллопуринола и буферных растворов. Экстракцию проводили 4 мл смеси органических растворителей на шейкере в течение 5 мин. По окончании экстракции флаконы центрифугировали при 3000 об/мин 5 мин для ускорения раз-деления фаз и предотвращения образова-ния микроэмульсии в водной фазе. Анализ водной фазы осуществляли УФ-спектрофотометрическим методом на ре-гистрирующем спектрофотометре Specord 250.


Ацикловир и аллопуринол являются

амфолитами. В водных растворах эти ве-щества могут находится в ионизированном и неионизированном состояниях, что будет влиять на коэффициенты распределения при экстракции. На рисунке 1 представле-на зависимость влияния pH на коэффици-енты распределения ацикловира.


80

0

0,1

0,2

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 pH

Dэтилацетатн-бутанолизобутанолдихлорметан

Рисунок 1 – Зависимость коэффициентов распределения ацикловира от pH при экстракции

различными органическими растворителями Как видно из приведенной графиче-

ской зависимости, максимальное извлече-ние ацикловира из водных растворов на-блюдается при pH=4-8. Согласно литера-турным данным [7], значения pKBH+ и pKa ацикловира соответственно равны 2,3 и 9,2. Поэтому такое поведение ацикловира при экстракции можно объяснить тем, что в данном диапазоне значений pH ацикло-вир находится в виде молекул. При pH ме-нее 4 и более 8 увеличивается доля ионов ацикловира в растворе и коэффициенты распределения уменьшаются.

На рисунке 2 представлена зависи-мость влияния pH на коэффициенты рас-пределения аллопуринола. В отличие от ацикловира, аллопуринол может ионизи-роваться только при pH больше 7 (pKa=9,4 [7]). На приведенной графической зависи-мости видно, что коэффициенты распреде-ления максимальны и не изменяются до pH=7. При дальнейшем увеличении pH на-блюдается уменьшение коэффициентов распределения, очевидно, вызванное иони-зацией молекул аллопуринола.

0

0,5

1

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 pH

D хлороформэтилацетатн-бутанолизобутанол

Рисунок 2 – Зависимость коэффициентов распределения аллопуринола от pH при экстракции

различными органическими растворителями


81

Следует отметить, что для осталь-ных изученных органических растворите-лей прослеживаются аналогичные зависи-мости влияния pH на экстракцию ацикло-вира и аллопуринола. Таким образом, можно сделать вывод, что оптимальным

для извлечения ацикловира является pH=4-8, а для аллопуринола - pH=2-7.

Коэффициенты распределения при экстракции различными органическими растворителями изучаемых веществ опре-делены при pH=5,0 и приведены в табл. 1.

Таблица 1 – Коэффициенты распределения ацикловира и аллопуринола при экстрак-

ции различными органическими растворителями (n=5; α=0,05) Вещество:

Экстрагент: Ацикловир Аллопуринол

хлороформ 0,03 0,01 дихлорметан 0,02 0,02 дихлорэтан - 0,02 этилацетат 0,05 0,17±0,02 бутилацетат 0,01 0,06 амилацетат - 0,02 н-бутанол 0,18±0,02 1,24±0,01 изобутанол 0,14±0,01 1,04±0,01 диэтиловый эфир 0,08 0,09

Примечание: для коэффициентов распределения менее 0,1 доверительный интервал не приво-дится, т.к. рассчитанные значения коэффициентов распределения имеют оценочный характер.

Как видно из приведенных данных,

ацикловир незначительно экстрагируется н-бутанолом и изобутанолом. Аллопури-нол удовлетворительно экстрагируются н-бутанолом и изобутанолом, незначительно – этилацетатом. Кроме приведенных в таб-лице растворителей, в эксперименте ис-пользовали гексан, гептан и толуол, но бы-ло установлено, что эти растворители практически не экстрагируют изучаемые вещества из водных растворов.

На практике, если вещество плохо экстрагируется, подбирают смесь органи-ческих растворителей. Обычно использу-ются смеси алкилгалогенидов (хлорофор-ма, дихлорметана) со спиртами. При экс-тракции такими органическими смесями обычно наблюдаются более высокие ко-эффициенты распределения, чем при экс-тракции индивидуальными органическими растворителями. Это можно объяснить тем, что спирты принимают участие в про-цессе сольватации молекул извлекаемых веществ, а образующиеся сольваты легче переходят в органическую фазу.

Нами были проведены исследова-ния влияния состава смеси растворителей типа алкилгалогенид-спирт на коэффици-енты распределения ацикловира и аллопу-

ринола. В качестве экстрагентов применя-лись часто используемые смеси хлорофор-ма и дихлорметана с изопропанолом, а также смеси хлороформа и дихлорметана с н- и изобутанолом, показавшие хорошие результаты при извлечении метилксанти-нов в наших предыдущих исследованиях [8].

На рисунке 3 приведена зависи-мость влияния мольной доли изобутанола в экстракционных смесях на коэффициен-ты распределения аллопуринола.

Как видно из приведенной графиче-ской зависимости, при экстракции смесями с изобутанолом наблюдается незначитель-ный синергетный эффект, который прояв-ляется при высоком содержании спирта в смеси. При использовании смесей с ди-хлорметаном он выражен в большей сте-пени, чем при использовании смесей с хлороформом. Аналогичные зависимости наблюдаются при использовании смесей с н-бутанолом и при экстракции ацикловира. Из приведенных данных также можно сде-лать вывод о нецелесообразности исполь-зования данных смесей для экстракции ацикловира и аллопуринола.

Иная зависимость наблюдается при использовании в качестве экстрагента сме-


82

сей хлороформа и дихлорметана с изопро-панолом. Для примера на рисунке 4 изо-бражена зависимость коэффициентов рас-

пределения ацикловира от содержания изопропанола в экстракционной смеси.

Рисунок 3 – Зависимость коэффициентов распределения аллопуринола от мольной доли (χ) изобутанола в экстракционной смеси

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0 10 20 30 40 50φ(изопропанола), %

D

хлороформ: изопропанолдихлорметан: изопропанол

Рисунок 4 – Зависимость коэффициентов распределения ацикловира от содержания изопро-

панола в экстракционной смеси При увеличении содержания изо-

пропанола в экстракционной смеси до 20-25 % (об.) коэффициенты распределения

возрастают по параболе, а при дальнейшем увеличении содержания изопропанола на-блюдается практически линейный рост ко-

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1

D

хлороформ: изобутанол

дихлорметан: изобутанол

Линия аддитивностихлороформ: изобутанолЛиния аддитивностидихлорметан: изобутанол

χ


83

эффициентов распределения, которые дос-тигают максимума при содержании изо-пропанола 50 % (об.). Аналогичная зави-симость наблюдается при экстракции ал-лопуринола.

Коэффициенты распределения ацикловира и аллопуринола при экстрак-ции смесями хлорформ: изопропанол (50 % об.) и дихлорметан: изопропанол (50 % об.) приведены в таблице 2.

Таблица 2 – Коэффициенты распределения ацикловира и аллопуринола при экстрак-

ции смесями органических растворителей (n=5; α=0,05) Вещество:

Экстрагент: Ацикловир Аллопуринол

хлороформ: изопропанол (50 % об.) 0,46±0,01 0,85±0,01 дихлорметан: изопропанол (50 % об.) 0,50±0,01 1,01±0,02

Как видно из полученных данных,

смеси, содержащие дихлорметан, лучше экстрагируют изучаемые вещества. Следу-ет отметить, что коэффициенты распреде-ления ацикловира при экстракции данны-ми смесями в 2,5-3,5 раза выше, чем при экстракции н- или изобутанолом. У алло-пуринола, напротив, коэффициенты рас-пределения при экстракции как смесями, так и н-бутанолом или изобутанолом по-лучаются соизмеримыми.

ВЫВОДЫ

1. Определены оптимальные условия

экстракции ацикловира и аллопуринола индивидуальными органическими раство-рителями и их смесями.

2. Рассчитаны коэффициенты распре-деления ацикловира и аллопуринола при экстракции индивидуальными органиче-скими растворителями и их смесями.

3. Лучшими экстрагентами для экс-тракции ацикловира являются смеси ди-хлорметан: изопропанол (50 % об.) и хло-роформ: изопропанол (50 % об.). Лучшими экстрагентами для экстракции аллопури-нола являются н-бутанол, изобутанол и смеси дихлорметан: изопропанол (50 % об.), хлороформ: изопропанол (50 % об.).

4. В связи с относительно низкими ко-эффициентами распределения ацикловира и аллопуринола при пробоподготовке биоматериала для увеличения степени из-влечения целесообразно использовать 3-5 кратный избыток экстрагента.

SUMMARY

M.L. Pivavar, A.I. Zhebentyaev EXTRACTION OF ACICLOVIR

AND ALLOPURINOL BY ORGANIC SOL-VENTS

The optimum conditions of extraction of aciclovir and allopurinol by individual or-ganic solvents and their mixtures have been studied. Coefficients of distribution of acy-clovir and allopurinol have been calculated in the extraction with 9 individual organic sol-vents and 2 mixtures as alkyl halogenides – alcohol. The basis of the mixture was pre-sented by chloroform and dichloromethane. As additives we used polar organic solvents (isopropanol, n-butanol or isobutanol). It was found that mixtures of chloroform and di-chloromethane with n-butanol or isobutanol are inefficient for the extraction of aciclovir and allopurinol. The best extractants for the extraction of aciclovir are mixtures of di-chloromethane: isopropanol (50% vol.) and chloroform: isopropanol (50% vol.). The best extractants for the extraction of allopurinol are n-butanol, isobutanol and mixtures of di-chloromethane: isopropanol (50% vol.), chlo-roform: isopropanol (50% vol.).

Key words: aciclovir, allopurinol, ex-traction, mixtures of organic solvents.


1.Справочник Видаль. Лекарственные пре-параты в Беларуси: Справочник. – М.:АстраФармСервис, 2009. – 944с. 2.Bahrami, G. Determination of acyclovir in human serum by high-performance liquid chromatography using liquid-liquid extraction


84

and its application in pharmacokinetic stud-ies / G. Bahrami, Sh. Mirzaeei, A. Kiani // J. Chromatogr. B Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. – 2005. – Vol. 816, № 1-2. – P. 327-331. 3.Pharmacokinetics of acyclovir after intrave-nous infusion of acyclovir and after oral ad-ministration of acyclovir and its prodrug vala-cyclovir in healthy adult horses / B. Garré [et al] // Antimicrobial Agents and Chemother-apy. – 2007. - Vol. 51, № 12. - P. 4308-4314. 4.Determination of acyclovir in horse plasma and body fluids by high-performance liquid chromatography combined with fluorescence detection and heated electrospray ionization tandem mass spectrometry / A. Maes [et al] // Biomed. Chromatogr. – 2009. – Vol. 23, № 2. – P. 132-140. 5.De-Vries, J.X. Simple determination of hy-drochlorothiazide in human plasma and urine by high-performance liquid chromatography / J.X. De-Vries, A. Voss // Biomed. Chroma-togr. – 1993. – Vol. 7, № 1. – P. 12-14. 6.Мокшина, Н.Я. Явление синергизма при сорбции и экстракции биологически ак-тивных веществ / Н.Я. Мокшина, В.Ф. Селеменев, Г.Ю. Орос // Сорбцион. и хроматогр. проц. – 2002. - Т. 2, вып. 2. – С. 166-175.

7.Moffat, A.C. Clarke’s isolation and identifi-cation of drugs in pharmaceuticals / A.C. Moffat. – Second Edition. – London: Тhe pharmaceutical press, 1986. – 1684 p. 8.Пивовар, М.Л. Изучение экстракции ме-тилпроизводных ксантина бинарными сме-сями органических растворителей / М.Л. Пивовар, А.И. Жебентяев // Вестник фар-мации. – 2010. № 1. – С. 25-33. Адрес для корреспонденции: 210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра токсикологической и аналитической химии, тел. раб.: 8 (0212) 37-00-06, Пивовар М.Л.

Поступила 02.09.2010 г. *************************************


85

ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВ О.М. Шимко, О.М. Хишова ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ЛАКТОЗЫ НА ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ТРАВЫ ЛАПЧАТКИ БЕЛОЙ Витебский государственный медицинский университет

Изучено влияние концентрации вспомогательного вещества – лактозы на основные технологические свойства (сыпучесть и прессуемость) таблети-руемой и капсулируемой смеси на основе травы лапчатки белой.

Для оценки сыпучести изучаемой модельной смеси определены следующие параметры – угол естественного отко-са, угол падения и угол разности.

Для характеристики насыпной массы при свободном истечении и уп-лотнении изучаемой модельной смеси рассчитаны коэффициент сжимаемо-сти и отношение Хауснера. Установле-но, что по значениям насыпной массы при свободном истечении и при уплот-нении модельная смесь на основе порош-ка травы лапчатки белой относится к классу легких и средних порошков, соот-ветственно.

Показано, что с увеличением кон-центрации лактозы сыпучесть модель-ных смесей возрастает. Добавление 20 и 25 % лактозы позволяет характеризо-вать сыпучесть модельной смеси как хо-рошую и достаточную для производства капсул и таблеток на основе травы лап-чатки белой.

В то же время увеличение кон-центрации лактозы значимо не влияет на прессуемость модельной смеси и по-зволяет получать таблетки необходи-мой прочности на сжатие.

Ключевые слова: лапчатка белая, прессуемость, угол естественного отко-са, угол падения, угол разности, коэффи-циент сжимаемости, отношение Хаус-нера.

ВВЕДЕНИЕ

В начале прошлого века бурный прогресс в области создания лекарствен-ных средств (ЛС) синтетического проис-хождения стал теснить лекарственные рас-тения (ЛР) как в лечебной, так и в профи-лактической практике. Однако в последние десятилетия интерес к ЛС природного происхождения возродился и развивается с нарастающим темпом. Основным факто-ром повышения интереса к лечебным свойствам ЛР явилось то, что значитель-ной части синтетических ЛС присущи раз-личные нежелательные, даже опасные по-бочные эффекты. Особенно чувствительны к нежелательным эффектам синтетических ЛС люди пожилого возраста, больные хро-ническими заболеваниями, дети.

В целом, анализируя тенденции со-временного фармацевтического рынка в Республике Беларусь, эксперты выделяют следующие причины повышения потреби-тельского спроса на ЛС растительного происхождения: • относительная безопасность действия. Химическая природа ЛР позволяет ЛС на их основе легко включаться в биохимиче-ские процессы организма человека, оказы-вая многостороннее, мягкое действие; • незначительное количество побочных эффектов; • возможность рационального сочетания ЛР между собой и синтетическими ЛС; • ценовая доступность; • благосклонное отношение потребите-лей к ЛС на основе лекарственного расти-тельного сырья (ЛРС), которое сформиро-валось благодаря многовековым традици-ям и огромному опыту народной медици-ны.

С целью расширения номенклатуры ЛС на основе ЛРС нами разрабатываются капсулы и таблетки на основе травы лап-чатки белой.


86

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Ранее [1] нами были изучены тех-

нологические свойства травы лапчатки бе-лой и были сделаны выводы, что для полу-чения таблеток на основе тонко измель-ченной травы лапчатки белой необходимо использовать добавление вспомогательных веществ. Поэтому следующим этапом мы изучили технологические свойства тонко измельченной травы лапчатки белой с до-бавлением различного количества вспомо-гательных веществ.

В качестве вспомогательного веще-ства использовали лактозу, которая обла-дает необходимыми технологическими свойствами и широко применяется в тех-нологии изготовления капсул и таблеток на фармацевтических предприятиях Рес-публики Беларусь.

Готовили модельные смеси порош-ка травы лапчатки белой (измельчен-ность100 мг) и лактозы следующих соста-вов: 1) Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы; 2) Порошок травы лапчатки белой + 10% лактозы; 3) Порошок травы лапчатки белой + 15% лактозы; 4) Порошок травы лапчатки белой +20% лактозы; 5) Порошок травы лапчатки белой + 25% лактозы.

Основными технологическими ха-рактеристиками капсулируемых и табле-тируемых материалов являются сыпучесть и прессуемость. Сыпучесть порошков яв-ляется комплексной характеристикой, оп-ределяемой рядом физических констант: дисперсностью, формой и размером час-тиц, влажностью массы и гранулометриче-ским составом. Эта технологическая ха-рактеристика порошка может служить критерием для выбора технологии табле-тирования.

Способность порошкообразной сис-темы высыпаться из емкости или «течь» под силой собственной тяжести и обеспе-чивать равномерное заполнение матрично-го канала называется сыпучестью таблети-руемой массы. Порошок, имеющий

плохую сыпучесть в воронке, прилипает к ее стенкам, что нарушает ритм его поступ-ления в матрицу.

Для определения сыпучести в сухую воронку, выходное отверстие кото-рой закрыто заслонкой, помещали без уп-лотнения навеску испытуемого порошка массой 50 г, взвешенную с точностью до 0,01 г. Включали виброустройство и через 20 с открывали заслонку. Определяли вре-мя, необходимое для полного истечения испытуемого вещества из воронки. Прово-дили три параллельных измерения [2].

Сыпучесть рассчитывали по фор-муле:

V = 20−t

m (1),

где V – сыпучесть, г/с;

m – масса навески испытуемого ве-щества, г;

t – время истечения испытуемого вещества, с;

Для определения насыпной массы в сухой цилиндр помещали навеску испы-туемого вещества с заданным насыпным объемом 100 мл и эту массу указывали в результате. Закрепляли цилиндр в держа-теле. Фиксировали насыпной объем до уплотнения Vo в миллилитрах. Выполняли 10, 500 и 1250 ударов и фиксировали соот-ветствующие объемы V = 10, V = 500 и V = 1250. Частное от деления массы порошка на его объем будет насыпной массой. Ча-стное от деления массы порошка на его объем при уплотнении будет насыпной массой при уплотнении, рассчитанной по формуле 2 [2,3]:

Мн = Vm (2).

Для оценки сыпучести использова-

ли такие параметры, как угол естественно-го откоса, угол падения, угол разности [3,4].

Угол естественного откоса – это ха-рактеристика, учитывающая трение частиц между собой, а также при их движении. Результат определения угла естественного


87

откоса во многом зависит от выбранного метода. Трудности при испытании возни-кают из-за сегрегации (расслаивания) ма-териала и уплотнения или разрыхления порошка при формировании конуса. Не-смотря на это, метод продолжает исполь-зоваться в фармацевтической промышлен-ности, а в литературе описано множество примеров, демонстрирующих его значение при решении производственных проблем.

Угол естественного откоса - это величина трехмерного угла (относительно горизонтальной поверхности), образующегося при насыпании материала горкой в виде конуса [5].

Угол естественного откоса определяют простейшими средствами.

На рисунке 1 показан прибор для измерения угла естественного откоса. На сборнике 1 смонтирована пластина 2, на которой укреплена шкала 3. Свободно насыпанный исследуемый материал 4 образует конус, угол естественного откоса α, величина которого измеряется при помощи визирной линейки 5 и шкалы 3. На приборе также предусмотрена стойка 7 круглого сечения высотой 177 мм, по которой может скользить втулка 6 массой 111 г, назначение которой – определение угла падения [2].

Рисунок 1 – Прибор для определения угла естственного откоса После определения угла

естественного откоса, пластину, на которой получен конус из сыпучего материала, встряхивали путем пятикратного сбрасывания груза с высоты стойки. В момент встряхивания угол естественного откоса обрушивается, стабилизируясь после пятого встряхивания до угла падения, который определяли по шкале визирной линейкой. Чем меньше класс сыпучести, тем меньше угол падения.

В последние годы определение коэффициента сжимаемости и близко

связанного с ним отношения Хауснера считается простым, быстрым и популярным методом получения характеристик текучести порошков. Коэффициент сжимаемости представляет собой косвенный показатель насыпной массы, размера и формы, площади поверхности, когезионной способности и содержания влаги в материале. Коэффициент сжимаемости и отношение Хауснера определяются путем измерения объемов порошка при свободной засыпке и при уплотнении порошка [5].


88

Хотя существует несколько методик определения коэффициента сжимаемости и отношения Хауснера, основное испытание заключается в измерении объема порошка до усадки (Vо) и конечного объема порошка после усадки или уплотнения (Vк). Коэффициент сжимаемости и отношение Хауснера рассчитывают по следующим формулам (3 и 4):

Коэффициент сжимаемости = 100*Vo

VkVo− (3)

Отношение Хауснера=VkVo (4)

Угол разности определяют вычитанием величины угла падения из значения угла естественного откоса.

Прессуемость оценивали по спо-собности таблетируемого порошка под влиянием давления принимать и сохранять определенную форму и размеры таблетки.

Косвенной технологической пробой на прессуемость является прочность модель-ной таблетки после снятия давления. На-веску порошка массой 0,3 г прессовали в таблетку диаметром 9 мм на гидравличе-ском прессе под давлением 120 МПа. Оп-ределяли прочность таблеток на сжатие с помощью пружинного динамометра. Среднее значение находили из 5 определе-ний [2,3].


Результаты проведенных исследо-

ваний представлены в таблицах 1 – 8. Насыпная масса – масса единицы

объема свободно насыпанного порошко-образного материала. Насыпная масса за-висит от формы, размера, плотности час-тиц порошков (гранул), их влажности. По значению насыпной массы можно прогно-зировать объем матричного канала [2].

Таблица 1 – Зависимость насыпной массы травы лапчатки белой и лактозы от концентрации

лактозы Состав смеси Насыпная масса, кг/м3

Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы 619,336±0,164 Порошок травы лапчатки белой + 10 % лактозы 607,095±0,175 Порошок травы лапчатки белой +15 % лактозы 601,287±0,078 Порошок травы лапчатки белой + 20 % лактозы 595,929±0,024 Порошок травы лапчатки белой + 25 % лактозы 594,758±0,175

Насыпная масса является объемным

показателем порошков. Насыпная масса при свободном истечении изученных смесей травы лапчатки белой с лактозой незначи-тельно уменьшается с увеличением концен-

трации лактозы. По значениям насыпной массы смесь травы лапчатки белой с лакто-зой в количестве до 15% можно отнести к классу легких, а в количестве 20 и 25% – к классу средних порошков (таблица 1).

Таблица 2 – Зависимость насыпной массы при уплотнении смеси травы лапчатки белой и

лактозы от концентрации лактозы Состав смеси Насыпная масса при уплотнении,

кг/м3 Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы 806,774±0,003 Порошок травы лапчатки белой + 10 % лактозы 809,710±0,147 Порошок травы лапчатки белой +15 % лактозы 833,764±0,004 Порошок травы лапчатки белой + 20 % лактозы 899,747±0,224 Порошок травы лапчатки белой + 25 % лактозы 890,547±0,024

Насыпная масса при уплотнении

смеси травы лапчатки белой с лактозой возрастает с увеличением концентрации лактозы (таблица 2).


89

Угол естественного откоса изменяется в широких пределах от 250-350 для хорошо сыпучих материалов до 600-700 для связных материалов. Отсюда, чем меньше угол естественного откоса, тем выше сыпучесть. Таким образом, угол естественного откоса является показателем, определяющим потенциальную сыпучесть материала и характеризующим также

форму, размер, удельную поверхность частиц и когезионные свойства [2].

Угол естественного откоса иссле-дуемых смесей травы лапчатки белой с лактозой уменьшается с увеличением кон-центрации лактозы, следовательно, проис-ходит увеличение сыпучести исследуемых смесей (таблица 3).

Таблица 3 – Зависимость угла естественного откоса смеси травы лапчатки белой и лактозы от концентрации лактозы

Состав смеси Угол естественного откоса, 0 Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы 46,20±0,01 Порошок травы лапчатки белой + 10 % лактозы 44,80±0,02 Порошок травы лапчатки белой +15 % лактозы 42,80±0,01 Порошок травы лапчатки белой + 20 % лактозы 36,6±0,02 Порошок травы лапчатки белой + 25 % лактозы 36,7±0,02

Увеличение концентрации лактозы

практически не влияет на величину угла падения, следовательно, не происходит

резкого ухудшения сыпучести изучаемых смесей (таблица 4).

Таблица 4 – Зависимость угла падения смеси травы лапчатки белой от концентрации лактозы Состав смеси Угол падения, 0

Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы 34,20±0,02 Порошок травы лапчатки белой + 10 % лактозы 34,4±0,03 Порошок травы лапчатки белой +15 % лактозы 34,2±0,01 Порошок травы лапчатки белой + 20 % лактозы 29,4±0,02 Порошок травы лапчатки белой + 25 % лактозы 30,4±0,02

Угол разности косвенно

характеризует сыпучесть, удельную поверхность и когезию. Чем больше угол разности, тем больше склонность сыпучего

материала к аэрированию и псевдоожижению.

При увеличении концентрации лак-тозы угол разности уменьшается (табл. 5).

Таблица 5 – Зависимость угла разности смеси травы лапчатки белой и лактозы от концентра-ции лактозы

Состав смеси Угол разности, 0 Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы 10,60±0,01 Порошок травы лапчатки белой + 10 % лактозы 9,80±0,02 Порошок травы лапчатки белой +15 % лактозы 8,20±0,01 Порошок травы лапчатки белой + 20 % лактозы 7,20±0,02 Порошок травы лапчатки белой + 25 % лактозы 6,4±0,02

Сыпучесть смеси с добавлением 5,

10, 15 % лактозы можно считать удовле-творительной, с добавлением 20 и 25% лактозы – хорошей (таблица 6).


90

Таблица 6 – Зависимость сыпучести травы лапчатки белой и лактозы от концентрации лактозы Состав смеси Сыпучесть, г/с

Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы 4,47 ±0,001 Порошок травы лапчатки белой + 10 % лактозы 5,88 ±0,002 Порошок травы лапчатки белой +15 % лактозы 6,16 ±0,004 Порошок травы лапчатки белой + 20 % лактозы 7,59 ±0,005 Порошок травы лапчатки белой + 25 % лактозы 7,81 ±0,005

Высокая прессуемость у смеси, со-

держащей 5% лактозы. С увеличением концентрации лактозы прессуемость изу-

чаемой смеси снижается незначительно и является достаточной для получения таб-леток требуемой прочности (таблица 7).

Таблица 7 – Зависимость прессуемости травы лапчатки белой и лактозы от концентрации

лактозы Состав смеси Прессуемость (разрушающая

нагрузка), Н Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы 126,42±0,01 Порошок травы лапчатки белой + 10 % лактозы 97,51±0,02 Порошок травы лапчатки белой +15 % лактозы 98,00±0,01 Порошок травы лапчатки белой + 20 % лактозы 93,59±0,01 Порошок травы лапчатки белой + 25 % лактозы 93,59±0,01

С увеличением концентрации лак-

тозы в смеси коэффициент Хауснера и ко-эффициент сжимаемости уменьшаются,

что свидетельствует об улучшении текуче-сти (таблица 8).

Таблица 8 – Зависимость коэффициента сжимаемости и отношения Хауснера травы лапчатки

белой и лактозы от концентрации лактозы Состав смеси Коэффициент

Хауснера Коэффициент сжимаемости

Порошок травы лапчатки белой + 5% лактозы 1,50±0,01 40,1±0,2 Порошок травы лапчатки белой + 10 % лактозы 1,42±0,03 35,4±0,1 Порошок травы лапчатки белой +15 % лактозы 1,25±0,01 34,3±0,2 Порошок травы лапчатки белой + 20 % лактозы 1,17±0,02 31,1±0,1 Порошок травы лапчатки белой + 25 % лактозы 1,13±0,01 30,3±0,1

ВЫВОДЫ

Изучено влияние концентрации

вспомогательного вещества – лактозы на основные технологические свойства (сы-пучесть и прессуемость) таблетируемой и капсулируемой смеси на основе травы лапчатки белой.

Для оценки сыпучести изучаемой модельной смеси определены следующие параметры – угол естественного откоса, угол падения и угол разности.

Для характеристики насыпной мас-сы при свободном истечении и уплотнении изучаемой модельной смеси рассчитаны

коэффициент сжимаемости и отношение Хауснера. Установлено, что по значениям насыпной массы при свободном истечении и при уплотнении модельная смесь на ос-нове порошка травы лапчатки белой отно-сится к классу легких и средних порошков, соответственно.

Показано, что с увеличением кон-центрации лактозы сыпучесть модельных смесей возрастает.

Добавление 20 и 25 % лактозы по-зволяет характеризовать сыпучесть мо-дельной смеси как хорошую и достаточ-ную для производства капсул и таблеток на основе травы лапчатки белой.


91

В то же время увеличение концен-трации лактозы значимо не влияет на прессуемость модельной смеси и позволя-ет получать таблетки необходимой проч-ности на сжатие.

SUMMARY

О.М Shimko, O.M. Khishova THE INFLUENCE OF CONCEN-

TRATION OF LACTOSE ON THE TECH-NOLOGICAL PROPERTIES OF A GRASS

POTENTILLA ALBA The influence of concentration of aux-

iliary substance - lactose on the basic techno-logical properties of tabletized and capsulated mix is investigated on the basis of a grass Po-tentilla alba.

For an estimation of an investigated model mix the following parameters - corner of a natural slope, corner of fall and corner of a difference are determined.

For the characteristic of bulk weight with the free expiration and condensation of an investigated model mix, coefficient of compression and relation of Hausner are de-signed. It is established, that on meanings of bulk weight with the free expiration and with condensation model mix on the basis of a powder of a grass Potentilla alba concerns to a class of easy and average powders accord-ingly.

It is shown, that with increase of con-centration of lactose strewing of model mixes grows. The addition 20 and 25 % lactose al-lows to characterize strewing of a model mix as sufficient for manufacture capsules and tablets on the basis of a grass Potentilla alba.

At the same time increase of concen-tration of lactose does not influence on ta-bletiering of a model mix and allows to re-ceive tablets of necessary durability on com-pression.

Key words: Potentilla alba, pressing, corner of a natural slope, corner of fall, corner of a difference, factor of compression, relation Hausner.

ЛИТЕРАТУРА 1. Шимко, О.М. Изучение технологиче-ских свойств смеси тонкоизмельченной травы лапчатки белой и лактозы/ О.М.

Шимко, О.М. Хишова. //Достижения фун-даментальной, клинической медицины и фармации: материалы 63-й научной сессии сотрудников университета. – Ви-тебск:ВГМУ, 2008.С. 78-79. 2. Хишова, О.М. Таблетирование лекарст-венного растительного сырья / О.М. Хи-шова. – Витебск, 2005. – 164 с. 3. Белоусов, В.А., Вальтер М.Б. Основы дозирования и таблетирования лекарст-венных порошков / В.А. Белоусов, М.Б. Вальтер. – Минск, 1980. – 210 с. 4. Государственная фармакопея Республи-ки Беларусь. Т.1. Общие методы контроля качества лекарственных средств / Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении; под общ. ред. Г.В. Годовальникова. – Минск: Минский государственный ПТК полиграфии, 2006. – С. 233. 5. Государственная фармакопея Республи-ки Беларусь. Т.2.Контроль качества вспо-могательных веществ и лекарственного растительного сырья / Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении; под общ. ред. А.А. Шерякова. – Молодечно: «Типо-графия «Победа», 2008. – С.33. Адрес для корреспонденции: 210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра фармацевтической технологии с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8(0212) 37-00-13. Шимко О.М.

Поступила 06.09. 2010 г. ************************************* С.Э. Ржеусский ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ТАБЛЕТОК НАТРИЯ АЛЕНДРОНАТА ПО ТЕСТУ «РАСТВОРЕНИЕ» Витебский государственный медицинский университет

В статье приведены результаты

изучения влияния условий растворения таблеток натрия алендроната на ки-нетику растворения. Исследованы раз-


92

личные серии экспериментальных таб-леток натрия алендроната по этому тесту. Проведены исследования сравни-тельной кинетики растворения экспе-риментальных таблеток и эталонных таблеток Алемакс (Румыния). В работе использовали тест «растворение» со-гласно Государственной Фармакопее Республики Беларусь. Количественный анализ проводили с помощью высокоэф-фективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Определено, что процесс раство-рения натрия алендроната в приборе «лопастная мешалка» описывается уравнением кинетики первого порядка, при скорости вращения мешалки 150 об/мин в среде кислоты хлористоводо-родной pH=1,2 и скорости вращения 50 об/мин в среде растворения «вода очи-щенная». Установлено, что разные экс-периментальные серии таблеток на-трия алендроната имели близкую кине-тику растворения (при рН от 1,0 до 7,8 коэффициенты сходимости составляют от 77,7 до 98,7). Показано, что степень всасывания натрия алендроната из экс-периментальных таблеток в первые 15 мин. достоверно выше (р<0,05) по срав-нению с таблетками Алемакс.

Ключевые слова: таблетки, на-трия алендронат, кинетика растворе-ния, лопастная мешалка.

ВВЕДЕНИЕ

На рубеже 60-70-х гг. ХХ века было установлено, что лекарственные средства, содержащие одно и то же действующее вещество и даже одинаковый состав вспо-могательных веществ, могут иметь разную активность и оказывать разные побочные эффекты. Именно тогда появился термин «биоэквивалентность» для характеристики степени всасывания лекарственных средств из места введения в системный кровоток и скорости этого процесса [1,2].

Степень всасывания действующего вещества, особенно из твердых лекарст-венных форм, существенным образом за-висит от скорости его высвобождения из лекарственной формы [1]. Поэтому в фар-макопеи разных стран включен тест «рас-

творение», позволяющий по опытам in vi-tro предвидеть поведение лекарственного средства в условиях живого организма [2,3].

В рамках ГНТП “Аминокислоты” было разработано лекарственное средство - таблетки натрия алендроната [4,5]. Уста-новлена его активность в отношении экс-периментального остеопороза [6], изучены токсикологические характеристики [7].

Цель настоящего исследования - оценить качество таблеток натрия аленд-роната по тесту «растворение».

Для осуществления поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить влияние среды и времени рас-творения, скорости вращения лопасти ме-шалки на кинетику растворения натрия алендроната из таблеток;

- исследовать качество различных серий экспериментальных таблеток натрия ален-дроната по тесту «растворение»;

- оценить сравнительную кинетику рас-творения in vitro таблеток натрия алендро-ната и эталонного лекарственного средства Алемакс.


В качестве объектов исследования использовали таблетки натрия алендрона-та, изготовленные в условиях РУП “Грод-ненской завод медицинских препаратов”, г. Гродно, и таблетки Алемакс производст-ва Slavia Pharm S.R.L.(Румыния).

Исследование проводили с помо-щью тестера растворения DT-820 произ-водства ERWEKA с лопастной мешалкой (2.9.3). Эксперимент выполняли в трех средах: кислота хлористоводородная с рН=1,2, цитратный буферный раствор с pH=4,6 и фосфатный буферный раствор с рН=6,8.

Количественное определение на-трия алендроната проводили методом вы-сокоэффективной жидкостной хромато-графии с предколоночной дерификацией на приборе Agilent 1100 Series с флуорес-центным детектором (2.9.6, тест А).

Подобие кривых растворения уста-навливали с помощью вычисления фактора сходимости (коэффициент подобия,


93

5.8.14). Статистическую обработку данных осуществляли с помощью компьютерной программы Microsoft Excel [7].

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ На первом этапе исследования не-

обходимо было определить условия прове-дения теста «растворение» для таблеток натрия алендроната: выбрать среду рас-творения, ее объем и скорость вращения мешалки.

Исследование показало, что повы-шение рН среды растворения с 1,2 до 6,8 не влияло на степень растворения натрия алендроната из экспериментальных табле-ток при всех временных интервалах для одинаковых скоростей вращения мешалки (р>0,05). При этом и скорость вращения мешалки также не оказывала существенно-го влияния на скорость растворения дейст-вующего вещества из таблеток (р>0,05, таблица 1).

Таблица 1 – Влияние среды растворения и скорости вращения мешалки на растворение

таблеток натрия алендроната (n=6) Содержание натрия алендроната в растворе через определенные

промежутки времени, % от дозы Количество оборотов

в минуту, об/мин. 5 мин. 10 мин. 15 мин. 30 мин. 45 мин. 60 мин.

Среда растворения: кислота хлористоводородная, рН=1,2 50 69,73 72,92 80,37 83,44 88,94 89,94 75 70,54 77,33 82,72 86,82 89,44 89,51

100 74,32 75,12 83,68 87,50 89,34 90,41 150 77,82 79,64 81,53 84,73 88,22 89,48

Среда растворения: вода очищенная, рН=6,8 50 64,77 68,65 74,03 82,85 87,02 90,92 75 65,00 72,39 77,14 85,56 89,42 90,72

100 65,83 74,74 81,35 88,04 89,52 90,19 150 68,87 71,94 82,60 88,34 90,21 91,63

Результаты, представленные в по-

лулогарифмической системе координат, показали, что растворение натрия аленд-роната из таблеток описывается уравнени-ем кинетики первого порядка. Наилучшие

показатели R2 наблюдали при pH=1,2 и скорости вращения 150 об/мин (R2=0,9362), а также при рН=6,8 и скоро-сти вращения 50 об/мин (R2=0,9449) (ри-сунок 1,2).

Рисунок 1 – Влияние скорости вращения мешалки на кинетику растворения натрия

алендроната из таблеток при pH=1,2


94

Рисунок 2 – Влияние скорости вращения мешалки на кинетику растворения натрия

алендроната из таблеток при pH=6,8 Учитывая, что всасывание боль-

шинства лекарственных средств описыва-ется уравнением кинетики первого поряд-ка, нами выбраны условия оценки таблеток по тесту «растворение»: среда растворения – кислота хлористоводородная с рН=1,2 500 мл при скорости вращения мешалки 150 об/мин либо вода очищенная с pH=6,8 500 мл, скорость вращения мешалки 50 об/мин.

Произведена оценка 3 серий табле-ток натрия алендроната, полученных в промышленных условиях, по тесту «рас-творение». Расчет коэффициента подобия показал, что серии имеют сходную кине-

тику растворения (R2 от 77,74 до 99,70, ри-сунки 3-5).

Проведена сравнительная оценка кинетики растворения натрия алендроната из экспериментальных таблеток и таблеток Алемакс (Румыния). Установлено, что раз-работанные нами таблетки характеризуют-ся более высокой степенью растворения в течение первых 15 минут (р<0,05). К 30 минуте и далее разница между концентра-цией натрия алендроната, высвободивше-гося из таблеток Алемакс и из эксперимен-тальных таблеток, была статистически не-достоверной (p>0,05).

Рисунок 3 – Сравнительная кинетика растворения таблеток натрия алендроната при pH=1,2


95




Определено, что процесс растворе-

ния натрия алендроната в приборе «лопа-стная мешалка» описывается уравнением кинетики первого порядка, при скорости вращения мешалки 150 об/мин в среде ки-слоты хлористоводородной с рН=1,2 и скорости вращения 50 об/мин в среде рас-творения «вода очищенная». Установлено, что разные экспериментальные серии таб-леток натрия алендроната имели близкую кинетику растворения (при рН от 1,2 до 7,8 коэффициенты сходимости составляют от 77,7 до 98,7). Показано, что степень всасы-вания натрия алендроната из эксперимен-тальных таблеток в первые 15 мин. досто-верно выше (р<0,05) по сравнению с таб-летками Алемакс (Румыния).

SUMMARY

S. Rzheuski

ESTIMATION OF QUALITY OF TABLETS OF SODIUM ALENDRONATE

UNDER THE TEST “DISSOLUTION” In the article results of studying of in-

fluence of conditions of dissolution of tablets of sodium alendronate on kinetics dissolution are resulted. Various series of experimental tablets of sodium alendronate under this test are investigated. Researches of comparative kinetics dissolution of experimental tablets and the tablets of reference Alemax (Roma-nia) are lead. In work the test "dissolution" according to the State Pharmacopoeia of Re-public of Belarus is used. The quantitative analysis carried out with the help of HPLC.


96

It is determined, that the process of dissolution of sodium alendronate in the de-vice «the blade mixer » is described by the equation kinetics of the first order, at speed of rotation of a mixer 150 rev/min in the envi-ronment of an acid hydrochloric pH=1,2 and speed of rotation 50 rev/min in the environ-ment of dissolution water cleared. It is estab-lished, that different experimental series of tablets of sodium alendronate had close kinet-ics dissolution (at рН from 1,0 up to 7,8, fac-tors of convergence make from 77,7 up to 98,7). It is shown, that the degree of absorp-tion of sodium alendronate from experimental tablets in the first 15 minutes authentically is higher (р <0,05) in comparison with the tab-lets Alemax (Romania).

Key words: tablets, sodium alendro-nate, kinetics dissolution, the blade mixer.


1. Раменская, Г.В. Современные подходы к оценке генерических лекарственных средств при их регистрации (обзор) / Г.В. Раменская, И.Е. Шохин // Хим.-фарм. журнал. – Моск-ва, 2009. – Т.43. - №6.- С. 30-34. 2. FDA, Electronic Orange Book, Approved Drug Products with Therapeutic Equivalence Evaluations, 20th Edition, 2000. 3. Семинар-тренинг ВОЗ по проведению теста растворения, взаимозаменяемости лекарственных средств и системе биофар-мацевтической классификации // Элек-тронный ресурс. – Режим доступа http://www.apteka.ua/article/5191. – дата дос-тупа 10.09.2010. 4. Ржеусский, С.Э. Разработка состава и технологии таблеток натрия алендроната /

С.Э. Ржеусский, В.В. Кугач, А.И. Хоменко // Вестник фармации. – 2008. – №4. – С. 58 – 63. 5. Ржеусский, С.Э. Влияние фармацевти-ческих факторов на качество таблеток на-трия алендроната / С.Э. Ржеусский, В.В. Кугач, А.И. Хоменко // Рецепт. – 2010. – №4 (72). – С. 63-70. 6. Изучение специфической активности таблеток гамимакс при экспериментальном остеопорозе / А.И. Хоменко [и др.] // Вест-ник Витебского государственного меди-цинского университета. – 2010. - №3. – С. 190-195. 7. Фармакологические и токсикологиче-ские характеристики фармацевтической субстанции и таблеток натрия алендроната / С.Э. Ржеусский [и др.] // Вестник фарма-ции. – 2009. – №2. – С. 72 – 78. 8. Теслюк, И.Е. Статистика / И.Е. Теслюк. – Минск: «Ураджай». – 2000. – 360 с. Адрес для корреспонденции: 210023, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра организации и экономики фармации с курсом ФПК и ПК, тел. раб.: 8 (0212) 24-94-38. Ржеусский С.Э.


****************************************


97

ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ

А.Р.Гутникова1, Д.Д.Ашурова1, М.Г. Исмаилова2, К.О.Махмудов1, Б.А.Саидханов1, И.В.Косникова1

ВЛИЯНИЕ ЭНТЕРОСОРБЕНТА АУ-Л НА ПОКАЗАТЕЛИ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА КРЫС ПРИ ИНТОКСИКА-ЦИИ ТЯЖЕЛЫМИ МЕТАЛЛАМИ 1Республиканский специализированный центр хирургии им. акад. В. Вахидова, Ташкент 2Узбекский научно-исследовательский химико-фармацевтический институт им. А.С. Султанова, Ташкент

В работе представлен анализ эф-фективности энтеросорбции сорбентом АУ-Л (активированный уголь лигнино-вый) при интоксикации, индуцированной смесью металлополлютантов. Уста-новлено, что этот сорбент обеспечива-ет улучшение соматического статуса животных, оказывает позитивное влияние на показатели крови, обеспечи-вает нормализацию показателей липид-ного обмена.

Ключевые слова: тяжелые ме-таллы, интоксикация, лигниновый сор-бент, липидный обмен, энтеросорбция.

ВВЕДЕНИЕ Непрерывное увеличение промыш-

ленного производства и расширение ан-тропогенной деятельности приводит к рос-ту экологической опасности, способст-вующей увеличению доли острых и хро-нических отравлений в структуре заболе-ваемости [1,2]. Особую опасность пред-ставляют тяжелые металлы ввиду их высо-кой токсичности и способности к аккуму-ляции в организме [3,4]. Проблема усугуб-ляется тем, что обычно в экогеохимиче-ских системах присутствуют ассоциации большого числа металлополлютантов, уда-лить которые из организма достаточно сложно. Так, для Ташкентского региона характерно повышенное содержание в ок-

ружающей среде соединений меди, мар-ганца, молибдена и хрома [5,6]. Эффек-тивным способом решения этой проблемы является создание препаратов, обладаю-щих способностью связывать эти токси-канты и выводить их из организма. Прежде всего, такими свойствами обладают энте-росорбенты [7-10]. Поскольку поступление токсичных соединений металлов в орга-низм обусловливает нарушение обменных процессов, представляет интерес изучить возможность их восстановления с помо-щью энтеросорбции.

Известно, что классическим свойст-вом энтеросорбентов является их способ-ность не проникать через слизистую обо-лочку желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), т.е. не иметь системной фармако-кинетики. Исходя из этого фундаменталь-ного свойства, энтеросорбенты относят к разряду биоматериалов, а не к лекарствен-ным средствам. В то же время присутствие энтеросорбентов в пределах ЖКТ способ-но привести к заметному изменению сис-темной концентрации целого ряда важ-нейших продуктов жизнедеятельности ор-ганизма [10]. При лечении заболеваний, сопряженных с развитием интоксикацион-ного синдрома вследствие различных ви-дов отравлений, этот метод выходит на первое место. Лечение энтеросорбцией обеспечивает быструю элиминацию пер-вичного источника интоксикации – метал-ла - и максимально эффективное снижение его содержания в биосредах, т.е. устране-ние этиологического фактора. Кроме того, в патогенетическом плане этот метод обес-печивает существенное ускорение норма-лизации уровня среднемолекулярных пеп-тидов (СМ) и снижение содержания про-дуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в крови, а также повышение актив-ности ферментов системы антиоксидант-ной защиты, что положительно отражает-ся на клинической картине течения инток-сикации.

Цель исследования: определить влияние металлосодержащей токсичной


98

смеси, состоящей из вышеуказанных ме-таллополлютантов, на основные субстраты липидного профиля и изучить возмож-ность их восстановления с помощью энте-росорбента, разработанного на основе хлопкового лигнина.


Эксперименты выполнены на 120 крысах породы Вистар массой 180-200 г, разделенных на 3 группы. 1-ю группу со-ставили соматически здоровые животные, служившие биоконтролем. Во 2-ю группу вошли животные, которым вводили внут-рибрюшинно смесь металлополлютантов через день в течение 4 недель. Вводимая доза включала по веществу (мг/кг) меди сульфата CuSO4 – 60, калия перманганата KMnO4 -11,2, аммония молибдата (NH4)2MoO4 – 10, калия дихромата K2Cr2O7 – 1,19, что не превышало DL10 для каждого из компонентов. Соотношение доз метал-лов в комбинации соответствовало сред-нему их соотношению в почвах в зоне воз-действия Алмалыкского горно-металлургического комбината и составило Cu : Mn : Mo : Cr = 100 : 19 : 16 : 2. Живот-ные 3-ей группы после моделирования па-тологического процесса в течение 3 недель получали per os энтеросорбент АУ-Л (ак-тивированный уголь лигниновый) в дозе 0,5 г/100 г массы тела животного. Все жи-вотные содержались в условиях вивария на

стандартном пищевом рационе, соответст-вующем нормативам затрат кормов для лабораторных животных в учреждениях здравоохранения. Забой животных для взя-тия материала и проведения биохимиче-ских и морфологических исследований производили путем мгновенной декапита-ции без применения анестезии.

Полученные результаты подвергну-ты статистической обработке на персо-нальном компьютере с использованием стандартного пакета программ Microsoft Excel с вычислением M+ m [11]. Статисти-ческую достоверность различий определя-ли по критерию t Стьюдента, за статисти-чески достоверные различия приняты зна-чения, при которых Р<0,05. Единицы из-мерений всех изучаемых показателей даны в системе СИ.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Инкорпорация тяжелых металлов

приводила к выраженным изменениям со-матического и клинического статуса жи-вотных. Шерсть тускнела, обильно выпа-дала, появлялись вялость и малоподвиж-ность, животные теряли аппетит. Клиниче-ски это проявлялось отклонением от нор-мы ряда лабораторных показателей. В об-щеклиническом анализе крови отмечались лейкоцитоз со сдвигом формулы, лимфо-цитоз, уровень гемоглобина снижался в 1,5раза, в 1,33 раза уменьшилось число эритроцитов (таблица 1).

Таблица 1 - Влияние энтеросорбции сорбентом на основе лигнина на показатели гемостаза

животных с субхроническим отравлением тяжелыми металлами Показатель 1. Контроль 2. Интоксикация тяжелыми

металлами Р1-2

3. Энтеросорбция Р2-3 , Р1-3

Гемоглобин, г/л 140,5 ± 1,49

92±7 <0,01

127,3±6,0 <0,05 >0,05

Эритроциты, 1012/л 4,33 ± 0,03 3,24±0,18 <0,01

3,97±0,19 <0,05 >0,05

Цветовой показатель

0,9 ± 0,01

0,85±0,02 <0,05

0,9±0,02 <0,05 >0,05

Лейкоциты, 109/л

7,2 ± 0,12

9,25±0,8 <0,05

5,5±0,6 <0,05 <0,05

Нейтрофилы: палочкоядерные, %

5,2 ± 0,53 10,4±0,5 <0,01

2,71±0,57 <0,001 <0,05

сегментоядерные, %

48,7 ± 2,1

19,0±2,6 <0,01

14,0±1,47 >0,05 <0,001

Лимфоциты, %и

37,0 ± 1,69 70,2±6,2 <0,02

79,3±1,2 >0,05 <0,001

СОЭ, мм/с

2,0±0,2 25,5±2,5 <0,001

2,2±0,2 <0,001 >0,05


99

Возможных причин изменения со стороны показателей красной крови может быть несколько. Во-первых, это может быть обусловлено нарушением эритропо-эза. Во-вторых, это связано с внутрисосу-дистым гемолизом эритроцитов вследст-вие повреждающего действия токсичных соединений металлов на мембрану, приво-дящего к разрушению этих клеток. В-третьих, дефицитом ряда витаминов вследствие негативного влияния токсикан-та на метаболические процессы. Светооп-тическое исследование мазков крови под-

твердило наличие гемолиза, агрегации эритроцитов, появление патологических форм кровяных телец (рисунок 1). В 1,5 раза повысился уровень среднемолекуляр-ных пептидов, одного из основных марке-ров эндотоксемии.

Глубокие нарушения отмечались и в метаболизме липидов. Об интенсифика-ции липолиза мы судили по возрастанию концентрации основных липидных фрак-ций в сыворотке крови.

А Б

В

А. Мазок крови интактных крыс. Наблюдаются мономорфные эритроциты, пленки фибрина. Б. Мазок крови крыс с субхронической интоксикацией тяжелыми металлами. Характерен гемолиз. Агрегация эритроцитов, появление патологически измененных форм кровяных телец. В. Форменные элементы крови крысы после курса энтеросорбции, состоящие из относительно разной величины и формы неизмененных эритроцитов. Окраска гемат-эозином. Увеличение х 300.

Рисунок 1 - Влияние тяжелых металлов и энтеросорбции на клетки крови крыс


100

Содержание холестерина и липо-протеидов повысилось в 1,3 и в 1,8 раза, соответственно. Наблюдалось четко выра-женное изменение антиоксидантного ста-туса животных с параллельной активацией процесса липопероксидации. На это ука-

зывало возрастание содержания в сыво-ротке крови малонового диальдегида (МДА) в 1,8 раза. Антиокислительная ак-тивность сыворотки крови, напротив, сни-зилась в 2 раза (таблица 2).

Таблица 2 - Изменение основных показателей липидного обмена и ПОЛ при отравлении тя-

желыми металлами и после энтеросорбции Показатель 1. Контроль 2. Интоксикация тяжелыми

металлами Р1-2 3. Энтеросорбция

Р2-3, Р1-3 СЖК, мкмоль/л 391,4±12,4 666,7±24,7

<0,01 368,3±10,8

<0,001 >0,05 Триглицериды, ммоль/л 1,7±0,1

2,8±0,08 <0,001

1,64±0,02 <0,001 >0,05

Холестерин, ммоль/л 5,75±0,1

7,52±0,15 <0,001

3,95±0,17 <0,001 <0,001

β- Липопротеиды, г/л 2,85±0,06

5,24±0,2 <0,001

2,94±0,04 <0,001 >0,05

МДА, мкмоль/л

1,95±0,05 3,5±0,1 <0,001

1,5±0,06 <0,001 <0,05

Антиокислительная ак-тивность сыворотки крови, %

31,4±0,8 15,7±0,9 <0,001

31,2±0,66 <0,001 >0,05

СМ, усл. ед 0,08±0,005 0,12±0,008 <0,001

0,079±0,003 <0,001 >0,05

На этом фоне животным 3-ей груп-

пы проводили курс энтеросорбции. Сор-бент АУ-Л ранее нами применялся при различных патологических состояниях (при интоксикации четыреххлористым уг-леродом [12], при отравлении пестицидами [13]) и выявил возможность купирования патологического процесса при таких со-стояниях. Об эффективности декорпора-ции свинца сорбентами на основе лигнина указывается в ряде работ [14,15]. Однако возможность применения сорбента АУ-Л при интоксикации многокомпонентной смесью металлополлютантов не изучалась. В настоящем исследовании было установ-лено, что после завершения курса энтеро-сорбции данным сорбентом наблюдается улучшение соматического статуса экспе-риментальных животных. У них повыша-лись активность и подвижность, к концу второй недели лечения восстанавливалась первичная окраска шерсти и исчезала жел-тушность.

Проведенный общеклинический ана-лиз крови выявил восстановление в преде-лах нормы основных показателей крови.

Однако сохранялся лимфоцитоз, что указы-вало на неполное купирование воспалитель-ного процесса. При светооптическом иссле-довании мазков крови выявлено улучшение морфологии эритроцитов.

Значительно возросла антиокисли-тельная активность сыворотки крови, а концентрация МДА, напротив, снизилась. Полученные результаты указывали на уменьшение интенсивности процесса пе-рекисного окисления липидов, что свиде-тельствовало о хорошем детоксикацион-ном эффекте проведенного лечения. В пределах физиологической нормы восста-новились практически все исследуемые показатели липидного профиля. Это по-зволило сделать вывод о позитивном влия-нии проведенного курса терапии на ли-пидный обмен.


Суммируя изложенное, можно за-ключить, что токсическое воздействие ис-следуемой смеси металлополлютантов обусловливается, главным образом, сни-жением антитоксической функции печени


101

на фоне выраженной метаболической ин-токсикации. Проведенный курс энтеро-сорбционной терапии позволил в значи-тельной степени снизить интенсивность патологического процесса у эксперимен-тальных животных. Позитивное действие препарата проявилось в восстановлении липидного метаболизма, повышении анти-оксидантного статуса крыс и уменьшении синдрома эндогенной интоксикации.

SUMMARY

A.R. Gutnikova, D.D. Ashurova,

M.G. Ismailova, K.O. Makhmudov, B.A. Saidkhanov, I.V. Kosnikova

INFLUENCE OF AU-L ENTEROSORBENT ON INDEXES OF THE LIPID METABO-

LISM OF RATS IN HEAVY METALS INTOXICATION

The paper presents analysis of efficiency of enterosorption with the help of AU-L sor-bent at intoxication induced by a mix of metalpollutants. It is established that this sor-bent provides improvement of the somatic status of animals, makes positive influence on blood indexes, provides normalization of lipid metabolism indexes.

Key words: heavy metals, intoxica-tion, a lignin sorbent, lipid metabolism, en-terosorption.


1. Гигиеническая оценка формирования риска здоровью при воздействии металлов и их соединений / В.Н. Дунаев [и др.] // Вестник ОГУ. – 2006. – №12, Приложение. Биоэлементология. – С.89-92. 2. Луковникова, Л.В. Металлы в окру-жающей среде, проблемы мониторинга / Л.В. Луковникова, А.Д. Фролова, М.П. Че-кунова // Эфферентная терапия. – 2004. – №1. – С.74-79. 3. Бабиенко, В.В. Патогенез и экспери-ментальная терапия при интоксикации со-единениями хрома (клинико-экспериментальное исследование). – авто-реф…. к.м.н. М. – 2004. – 21 с. 4. Мартынов, А.К. Структурно-функциональная организация реализации лечебных свойств энтеросорбентов / А.К.

Мартынов // Эфферентная терапия. – 2006. – №2. – С.11-17. 5. Камильджанов, А.Х. О состоянии эколо-гической обстановки г. Алмалыка Таш-кентской области / А.Х. Камильджанов, С.С. Данияров, М.А. Мирзакаримова. Ма-териалы науч.-практич. конф. «Теоретиче-ские основы медико-экологических про-блем в Узбекистане и их практическое ре-шение». – Ташкент, 2009. – С.29-30. 6. Шукуров, Н.Э. Результаты изучения форм нахождения тяжелых металлов в за-грязненных почвах методом «последова-тельной экстракции» / Н.Э. Шукуров, Е.В. Климанов // Геология и минеральные ре-сурсы. – 2004. – №3. – С.39-41. 7. Гаев, П.А. Энтеросорбция как метод эфферентной терапии / П.А. Гаев, О.Ф. Калев, А.В. Коробкин – Челябинск: Чел-ГМА, 2001. – 56 с. 8. Коррекция некоторых показателей по-чечной функции у детей, подвергающихся экологически обусловленной экспозиции к свинцу и кадмию, в результате применения комплекса противотоксических биопрепа-ратов / Б.А. Кацнельсон [и др.] // Токсико-логический вестник.- 2007. – №6. – С.11-15. 9. Применение энтеросорбента лигносорб в комплексной терапии различных патоло-гических состояний / В.П. Леванова [и др.] // Эфферентная терапия. – 2006. – Т.12, №3. – С.12-18. 10. Николаев, В.Г. Современные энтеро-сорбенты и механизмы их действия / В.Г. Николаев, С.В. Михайловский, Н.М. Гури-на // Эфферентная терапия. – 2005. – №4. – С.3-17. 11. Лапач, С.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel / С.Н. Лапач, А.В. Чубенко, П.Н. Бабич. – К.: МОРИОН, – 2000. – 320с. 12. Пути восстановления детоксикацион-ной функции печени при токсическом ге-патите / А.Р. Гутникова [и др.] // Эффе-рентная терапия. – 2003. – Т.9, №4. – С.42-45. 13. Сравнительная оценка разных методов детоксикации при пестицидной интокси-кации организма / К.А. Махмудов [и др.] // Токсикол. вестник. – 2004. – №2. – С.9-12.


102

14. Рослый, О.Ф. Оценка энтеросорбции свинца полифепаном (экспериментальное исследование) / О.Ф. Рослый, Т.И. Гераси-менко, А.А. Федорук // Эфферентная тера-пия. – 2000.– Т.6, №4. – С.69-71. 15. Шилов, В.В. Экспериментальная оцен-ка лечебной эффективности полифепана и фитомикса при интоксикации свинцом / В.В. Шилов, Т.Е. Лим // Эфферентная те-рапия. – 2004.– №2. – С.53-56. Адрес для корреспонденции: 100115, Республика Узбекистан, г. Ташкент, ул. Фархадская, 10, Республиканский специализированный центр хирургии им. акад. В. Вахидова, отделение экспериментальной хирургии,

тел. РСЦХ- +99871 277 2602, Гутникова Алла Рувиновна. 100015, Республика Узбекистан, г. Ташкент, ул. Дурмон йули, 40, Узбекский научно-исследовательский химико-фармацевтический институт им. А.С. Султанова, лаб. «Технология природных лекарствен-ных средств и медицинских сорбентов», тел. УзНИХФИ - +99871 2625925, факс. +99871 2625957, Исмаилова Мохинур Гафуровна.


*************************************


103

В ПОМОЩЬ РАБОТНИКУ ПЕРВОГО СТОЛА

А.В. Хапалюк

БИОЛОГИЧЕСКАЯ ДОСТУПНОСТЬ КАК СОСТАВЛЯЮЩАЯ КЛИНИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА: В ФОКУСЕ БЕНФОТИАМИН

Белорусский государственный медицинский университет, Минск

Фармакокинетика – это раздел кли-

нической фармакологии, предметом кото-рого является изучение движения лекарст-венного средства (ЛС) в организме: всасы-вания, распределения, биотрансформации (метаболизма) и выведения. Для всех этих процессов необходимым условием являет-ся проникновение действующего вещества через клеточные мембраны [1].

Движение ЛС при приеме внутрь на-чинается с его абсорбции. При этом лекар-ственное средство всасывается в кровь и доставляется к месту действия, пройдя че-рез различные барьеры. Этими барьерами являются ткани, образующие стенку ки-шечника, стенки капилляров кишечника и печень (печеночные ферменты). Слизистая оболочка желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), а также его функциональное со-стояние существенно ограничивают по-ступление ЛС, принимаемых внутрь. На скорость и полноту всасывания может влиять изменение перистальтики: ее уси-ление уменьшает всасывание лекарствен-ных средств, а ослабление увеличивает. Для большинства ЛС характерно замедле-ние всасывания под действием пищи. Од-нако замедление всасывания не всегда со-провождается уменьшением общего коли-чества действующего вещества, попадаю-щего в системное кровообращение, а при-водит лишь к увеличению времени дости-жения максимальной концентрации ЛС в крови. Тем не менее, поскольку фармако-логическое действие зависит от концен-трации ЛС в крови, замедление всасывания может привести к ослаблению терапевти-ческого эффекта, особенно в случае назна-

чения ЛС с небольшим периодом полувы-ведения (например, фуросемида). Следова-тельно, если нужно быстро создать высо-кую концентрацию ЛС в крови, лучше принимать его до еды.

Проникновение действующих веществ через оболочки клеток, которые представ-ляют собой двойной слой липидных моле-кул, пронизанных «островками» протеина, регулируется процессами (пассивной) диффузии, фильтрации (через поры), ак-тивного транспорта.

Пассивная диффузия (сквозь липиды мембраны) – основной механизм проник-новения ЛС в ткани. При этом ЛС всасы-вается через мембрану клеток по градиен-ту концентрации, т.е. из области большей концентрации в область меньшей. Так как мембрана клеток имеет фосфолипидное строение, то лучше всасываются жирорас-творимые вещества в неионизированном состоянии (слабые кислоты и основания). Напротив, ионизированные молекулы имеют очень низкую растворимость в ли-пидах. ЛС - слабые кислоты лучше всасы-ваются в желудке, где среда кислая (рН = 1,5 – 2,0), ЛС-основания – в кишечнике (рН = 6,8 – 7,6). Чем интенсивнее крово-ток, чем больше поверхность всасывания, тем выше скорость пассивной диффузии. В тонком кишечнике эти показатели выше, нежели в желудке, поэтому всасывание в тонком кишечнике больше.

Активный транспорт – перенос веще-ства через мембрану клетки против гради-ента концентрации (глюкоза, аминокисло-ты и др.). Для этого процесса необходима затрата энергии АТФ и наличие белка-переносчика.

Фильтрация (диффузия через поры) – перенос водорастворимых молекул малой молекулярной массы (например, ацетилса-лициловой кислоты) по градиенту концен-трации через поры в мембране клетки.

Поскольку большинство ЛС представ-ляют собой для организма чужеродные химические вещества (ксенобиотики), по-следний реагирует на лекарственное сред-ство как на любое инородное химическое


104

вещество – подвергает его метаболизму. Под метаболизмом лекарственных средств, или биотрансформацией, понимают ком-плекс физико-химических и биологиче-ских реакций, в процессе которых ЛС превращаются в более полярные (водорас-творимые) вещества (метаболиты), легко выводящиеся из организма. Местами пер-вичного метаболизма (метаболизма ЛС до того, как оно попадет в большой круг кро-вообращения) являются стенка кишечника и особенно печень − так называемая пре-системная элиминация, или «эффект пер-вого прохождения через печень». Пресис-темная элиминация является результатом биотрансформации ЛС под действием ферментов печени при его первом прохож-дении через портальную систему. Преоб-разованию может подвергнуться значи-тельная часть поступившего в печень веще-ства. Иногда системного кровотока дости-гают лишь 5−20% от принятой внутрь дозы ЛС. Вместе с тем регулярный прием лекар-ственных средств, обладающих выражен-ным эффектом первого прохождения, дает более высокие равновесные концентрации, чем можно было бы ожидать на основании данных, полученных в исследованиях с од-нократным приемом ЛС. Это объясняется постепенным насыщением ферментов, уча-ствующих в метаболизме первого прохож-дения.

Таким образом, при внутривенном введении ЛС попадает в системный крово-ток и поэтому 100% от введенной дозы достигнет мишеней действия. Если ту же дозу ЛС принимают внутрь, не все количе-ство попадет в систему воротной вены, а затем в системный кровоток. Фракцию не-измененного лекарственного средства, достигшую большого круга кровобраще-ния после любого способа введения, опре-деляют как биодоступность. Биодоступ-ность лекарственного средства выражается в процентах. Упрощенно биодоступность можно определить как отношение концен-трации вещества в крови после назначения внутрь к его концентрации после внутри-венного введения.

При метаболизме ЛС их активность снижается. Исключением являются проле-карства, которые в момент поступления в

организм неактивны и превращаются в ак-тивные формы только после их биотранс-формации. Помимо широко известных ин-гибиторов АПФ (исключение – каптоприл и лизиноприл), жирорастворимым проле-карством является бенфотиамин.

Бенфотиамин: историческая справка. Очень интересна история откры-тия бенфотиамина – предшественника тиамина и его активных форм (тиаминди-фосфата, тиаминмонофосфата и тиамин-трифосфата).

Открытие как тиамина, так и бен-фотиамина связано с проблемой болезни бери-бери, обнаруженной в XIX столетии в отдаленных частях Юго-Восточной Азии. Чтобы выяснить причины данного заболе-вания, проявляющегося мышечной слабо-стью, нарушением ходьбы, развитием по-линевритов, демиелинизацией волокон в ЦНС, тахикардией, дилатацией сердца и сердечной недостаточностью, в конце ХIХ в. в голландскую Ост-Индию (ныне Индо-незия) прибыл нидерландский врач Хри-стиан Эйкман (Christian Eijkman). Ключ к разгадке ученому дали больничные куры: он заметил, что домашние птицы, имевшие аналогичные симптомы, что и больные бе-ри-бери, выздоравливали, когда очищен-ный рис, которым их кормили, из сообра-жений экономии заменяли на неочищен-ный. Это навело его на мысль, что в не-очищенном рисе содержится вещество, предупреждающее развитие заболевания и излечивающее его. Последующие экспе-рименты показали, что вещество, назван-ное тиамином (витамином В1), в больших количествах содержится в отрубях риса, семенах хлебных злаков, горохе и других продуктах растительного и животного происхождения. За цикл работ, посвящен-ных выделению и установлению роли ви-тамина В1, Христиан Эйкман в 1929 г. был удостоен Нобелевской премии [2].

В Японии от болезни бери-бери вплоть до 20-х годов ХХ века ежегодно умирало около 25000 человек. Причина этого высокого уровня смертности станет понятной, если внимательно проанализи-ровать диетические предпочтения японцев. С одной стороны, японцы предпочитают очищенный, бедный тиамином рис. Парал-


105

лельно с этим большой популярностью у японцев пользуется сырая рыба, богатая тиаминазой, разрушающей поступающий с пищей тиамин. Жизненно важная пробле-ма ускорила важное открытие, совершив-шееся в 1952 г. Японские ученые устано-вили, что подогретая смесь щелочного раствора экстракта свежего чеснока с тиа-мином обеспечивает при ее приеме внутрь существенно большие концентрации тиа-мина в крови, нежели прием водораство-римых солей тиамина. Этот феномен обу-словлен тем, что содержащийся в чесноке аллицин при нагревании с тиамином обра-зует соединение аллитиамин, которое яв-ляется термостабильным жирораствори-мым дериватом витамина В1. Аллитиамин оказался резистентным к тиаминазе. Ис-пользование аллитиамина позволило в те годы решить проблему заболевания бери-бери. Несколько позже, после серии даль-нейших экспериментов, были получены другие жирорастворимые дериваты тиами-на, относящиеся к группе аллитиаминов. В их число входит и бенфотиамин, отли-чающийся наилучшей всасываемостью и резистентностью к тиаминазе. Липофиль-ные свойства бенфотиамину придает бен-зольное кольцо, присоединенное к фосфо-тиамину.

Фармакокинетические различия бенфотиамина и водорастворимых со-лей тиамина. При парентеральном введе-нии водорастворимых солей тиамина (в частности, тиамина мононитрата или тиа-мина гидрохлорида) биодоступность ЛС достаточно высокая. Однако при приеме внутрь всасывание водорастворимых солей тиамина из тонкого кишечника сущест-венно лимитировано. Обусловлено это тем, что водорастворимые дериваты тиа-мина в концентрациях до 2 ммоль/л всасы-ваются путем активного транспорта при помощи специальной Na+/тиамин-АТФазы. Всасывание происходит по меха-низму насыщения; насыщение фермента происходит при дозе тиамина, равной 2 ммоль/л. Более высокие дозы поступают посредством пассивной диффузии. Тем не менее, этот процесс не является дозозави-симым, а подчиняется кинетике насыще-ния и прогрессивно уменьшается с увели-

чением концентрации витамина. В частно-сти, при приеме 1мг водорастворимого тиамина гидрохлорида всасывается около 50% принятой дозы, 5 мг - 33%, 20 мг – 25%. Таким образом, ежедневный предел всасывания водорастворимого тиамина не превышает 5 – 10 мг, а его проникновение через мембраны клеток, в том числе нерв-ных, крайне ограничено, поэтому внутри-клеточная концентрация остается очень низкой [2]. Кроме того, уже в желудочно-кишечном тракте тиамин начинает под-вергаться метаболизму под воздействием тиаминазы.

Путь поступления бенфотиамина в клетку при пероральном приеме представ-лен на рисунке. Бенфотиамин, принятый внутрь, поступает в неизмененном виде в верхние отделы тонкого кишечника, где всасывается пропорционально принятой дозе (бенфотиамин резистентен также к тиаминазе). В слизистой оболочке кишеч-ника под воздействием фосфатазы от бен-фотиамина отщепляется монофосфатная группа, что усиливает липофильность об-разовавшейся молекулы – S-бензоилтиамина. S-бензоилтиамин путем простой диффузии проходит через клеточ-ные мембраны в клетки слизистой оболоч-ки кишечника и попадает в кровь. Из кро-ви он посредством пассивной диффузии проникает в клетки-мишени (например, периферические нейроны), где происходит превращение S-бензоилтиамина в тиамин. В клетках-мишенях из S-бензоилтиамина под воздействием тиоэстеразы происходит отщепление бензольного кольца, в резуль-тате чего S-бензоил-тиамин превращается в тиамин. Далее тиамин фосфорилируется тиаминкиназой, вследствие чего образуют-ся биологически активные коэнзимные формы тиамина – тиаминдифосфат, тиа-минмонофосфат и тиаминтрифосфат, наи-большее значение из которых имеет тиа-миндифосфат.

В многочисленных клинических ис-следованиях установлено, что после прие-ма бенфотиамина концентрации тиамина и тиаминдифосфата в крови, эритроцитах, а также цереброспинальной жидкости зна-чительно превышают содержание тиамина при приеме его водорастворимых солей в


106

эквимолярных количествах. В клетках-мишенях это превышение может достигать 120 раз.

Таким образом, высочайшая био-доступность бенфотиамина в клетки-

мишени обеспечивает последующее фар-макологическое действие внутриклеточно образующихся биологически активных форм тиамина.

Рисунок 1 – Фармакокинетика бенфотиамина

Биологическое значение и фарма-кологическое действие тиамина (вита-мина В1). Содержание тиамина в организ-ме взрослого человека составляет около 30 мг. Суточная потребность в витамине В1 для взрослых мужчин колеблется от 1,3 до 1,5мг, для женщин – от 1,1 до 1,3мг. Во время беременности и во время кормления грудью необходимы дополнительные дозы витамина В1, равные 0,3 и 0,5мг, соответ-ственно. Потребность в тиамине повыша-ется при длительном физическом напря-жении, питании, богатом углеводами, при повышенном уровне глюкозы. Минималь-ная потребность в тиамине у человека со-ставляет 0,2 – 0,3 мг на 1000 ккал пищи [3].

Известно около 25 ферментативных реакций, в которых участвует тиамин, ре-гулируя углеводный, белковый и жировой обмены. Биологически активными (кофер-ментными) формами тиамина являются тиаминдифосфат, тиаминмонофосфат и тиаминтрифосфат, наибольшее значение

из которых, как уже подчеркивалось, име-ет тиаминдифосфат.

Биологическое значение тиамина в углеводном обмене обусловлено тем, что он в виде тиаминдифосфата является ко-ферментом ряда ферментов, которые уча-ствуют в ключевых процессах углеводного обмена. В частности, тиамин-зависимые ферменты катализируют декарбоксилиро-вание пировиноградной, α-кетоглютаровой и других α-кетокислот в процессе гликоли-за, а также регулируют активность транс-кетолазы, играющей ключевую роль в пен-тозофосфатном пути окисления глюкозы.

Тиамин участвует в проведении нервного импульса и «болевой» активно-сти нерва, модуляции нервно-мышечной передачи в н-холинорецепторах, регуляции переноса натрия через нейрональную мем-брану (дефосфорилированный тиамин мо-жет открывать натриевые каналы даже в отсутствие медиатора, вызывая при этом сокращение), регенерации нервной ткани, защиты мембраны клеток от токсического


107

воздействия продуктов перекисного окис-ления, блокады гликирования белков, им-муномодулирующего действия.

В больших дозах тиамин оказывает лечебный метаболический эффект. Ре-шающим обстоятельством метаболических эффектов тиамина является достижение его высоких концентраций в тканях.

За последние десятилетия отноше-ние к лекарственным средствам метаболи-ческого действия прошло путь от их по-всеместного применения в ожидании чу-додейственного исцеления до полного от-рицания самой возможности воздействия на метаболизм с целью улучшения прогно-за заболевания. Как всегда, никакая край-ность не бывает абсолютной истиной. Случилось это и с ЛС метаболического действия.

Что такое ЛС метаболического дей-ствия? – В современном представлении к ЛС метаболического действия относятся лекарственные средства, содержащие ве-щества, свойственные внутренней среде организма и обладающие первично мета-болическим действием. В отличие от абсо-лютного большинства других ЛС, метабо-лические средства оказывают системный эффект не через регулирующие механизмы (рецепторы, ионные каналы и др.), а непо-средственно, включаясь в биохимические процессы в качестве коферментов, кофак-торов, субстратов. Метаболические сред-ства обладают двумя принципиальными особенностями, пренебрежение которыми может привести к потере их клинической эффективности. Первая заключается в том, что от их концентрации в соответствую-щих тканях зависит не только выражен-ность эффекта, но и само качество дейст-вия: при значительном повышении в био-логических средах концентрации таких веществ появляются новые эффекты, не наблюдавшиеся при их физиологических концентрациях. Вторая особенность обу-словлена определенной инерционностью метаболизма и заключается в том, что для проявления метаболических эффектов ЛС требуется довольно длительное время, на-много превышающее 4 – 5 периодов его полувыведения, – время, необходимое для достижения стационарной концентрации

лекарственного средства. Как правило, это время составляет 3 – 6 нед. и более [4,5].

В большинстве случаев метаболиче-ские средства играют вспомогательную терапевтическую роль. Однако при пато-логических состояниях, при которых на-рушения метаболизма выступают в каче-стве главного патогенетического механиз-ма, они становятся основой лечения. К та-ким состояниям можно отнести диабетиче-скую полинейропатию.

Значение бенфотиамина в патоге-нетической терапии диабетической по-линейропатии. Как известно, патогенез большинства полинейропатий остается до конца не расшифрованным. Однако неза-висимо от пускового фактора, при поли-нейропатиях поражаются как миелиновая оболочка, так и аксоны нервов. Демиели-низация и аксональная дегенерация приво-дят к снижению скорости проведения воз-буждения по нерву и, соответственно, на-рушению его функции. Центральными ме-ханизмами любой формы полинейропатии являются нарушения в двух метаболиче-ских процессах: а) замедление реакций энергетического обмена и б) усиление сво-боднорадикального окисления. Естествен-но ожидать, что коррекция данных нару-шений будет приводить к терапевтическо-му эффекту [4,5].

В настоящее время считается, что клю-чевым моментом развития диабетической полинейропатии является усиление про-цессов переаминирования с образованием гексозаминов – сигнальных молекул, вы-зывающих инсулинорезистентность (по сути усиливающих ее при сахарном диабе-те), а также образование в митохондриях супероксид-радикалов. В настоящее время в литературе широко обсуждается гипоте-за, согласно которой все пути метаболиз-ма глюкозы, альтернативные гликолитиче-скому, являются следствием гиперпродук-ции радикалов супероксида в митохондри-альной цепи транспорта электронов в ре-зультате внутриклеточной гипергликемии [6] Повышение концентрации супероксид-радикалов приводит к активации фермента полимеразы, которая инактивирует глице-ральдегид-3-фосфатдегидрогеназу. Это приводит к повышению внутриклеточной


108

концентрации промежуточных продуктов распада глюкозы – фруктозо-6-фосфата и глицеральдегид-3-фосфата, что еще более усиливает альтернативные пути метабо-лизма глюкозы. В частности, происходит увеличение синтеза диацилглицерола, ко-торый активирует протеинкиназу С, иг-рающую важную роль в реализации сосу-дистых механизмов диабетической поли-нейропатии. Исследованиями установлено, что многие показатели нормальной функ-ции сосудистого русла (проницаемость со-судистой стенки, скорость кровотока, агре-гатное состояние крови и др.) находятся под контролем протеинкиназы С [7,8].

Очень важно иметь в виду, что на-ряду с гексокиназным существует прямой путь окисления глюкозы – пентозофос-фатный, для которого характерно после-довательное отщепление от молекулы глюкозы одного атома углерода с образо-ванием в течение каждого цикла по одной молекуле углекислого газа и воды [9,10]. Основным ферментом пентозофосфатного цикла является тиамин-зависимая транске-толаза. Многочисленными клиническими исследованиями продемонстрировано, что при гипергликемии вследствие активации тиамин-зависимой транскетолазы в пенто-зофосфатном цикле достигается сущест-венное снижение накопления промежуточ-ных продуктов обмена глюкозы, в частно-сти, глюкозо-6-фосфата и глицеральдегид-3-фосфата, которое происходит вследствие блокады гексокиназного пути утилизации глюкозы. В результате существенно за-медляется развитие диабетической поли-нейропатии. Однако условием достижения клинического эффекта является достиже-ние высокой внутриклеточной концентра-ции тиамина [2]. Прием водорастворимых солей тиамина может повышать актив-ность транскетолазы на 20%, 400-450мг бенфотиамина – на 400%.

Таким образом, бенфотиамин вследствие активации окислительного рас-пада глюкозы в пентозофосфатном цикле блокирует накопление нейротоксичных продуктов, тем самым предупреждая либо существенно замедляя развитие диабети-ческой полинейропатии и сосудистых ос-ложнений сахарного диабета.

Очевидно, что сравнение клиниче-ской эффективности бенфотиамина и во-дорастворимых солей тиамина в лечении диабетической полинейропатии подтвер-ждает классический тезис клинической фармакологии: без учета биологической доступности лекарственного средства не-возможно получить необходимый терапев-тический эффект [1].


1. Лоуренс, Д.Р. Клиническая фармаколо-гия / Д.Р. Лоуренс, П.Н. Беннитт. – т.I. М.,: Медицина, 2002. – 640 с. 2. Benfotiamin in der Therapie von Neuropa-thien. – Böblingen, 2005. – 90S. 3. Горбачев, В.В. Витамины, микро- и мак-роэлементы / В.В. Горбачев, В.Н. Горбаче-ва. – Справочник. – Мн.: Книжный дом, 2002. – 544 с. 4. Городецкий, В.В. Лечение диабетиче-ской полинейропатии и других дистрофи-чески-дегенеративных и воспалительных заболеваний периферической нервной сис-темы метаболическими препаратами / В.В. Городецкий. – М.: – 2004 –26с. 5. Левин, О.С. Полиневропатии. Клиниче-ское руководство / О.С. Левин. – М.: Ме-дицинское информационное агенство, 2005. – 496 с. 6. Уильямс Г., Пикап Дж.К. Руководство по диабету.-М.: МЕДпресс-информ, 2003. – 242 с. 7. Балаболкин, М.И. Генетические аспекты сахарного диабета / М.И. Балаболкин, И.И. Дедов // Сахарный диабет. – 2000. – № 1. – С. 2 – 10. 8. Мохорт, Т.В. Нейропатия при сахарном диабете: современные принципы лечения / Т.В. Мохорт // Медицинские новости. –2008. – №1. – С.40 – 46. 9. Балаболкин, М.И. Диабетология / М.И. Балаболкин. - М.: Медицина, 2000. –672 с. 10. Березов, Т.Т. Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровкин. – М.: Меди-цина, 2002. – 704 с.


*************************************

109

ВНИМАНИЮ АВТОРОВ!

Журнал «Вестник фармации» является рецензируемым изданием, включенным в утвержденный Высшей аттестационной комиссией Перечень научных изданий Республики Беларусь для опубликования результатов диссертационных исследований по фармацевтической отрасли науки. Журнал печатает полноразмерные оригинальные статьи, обзоры, краткие сообщения, рекомендации практическим работникам аптек.

Рукописи статей рецензируются независимыми экспертами. Специалисты, осуществляющие рецензирование, назначаются редакционной коллегией журнала.

Научные статьи аспирантов последнего года обучения при условии их полного соответствия требованиям, предъявляемым редакцией, публикуются вне очереди. Редакция не взимает плату за опубликование научных статей, в том числе и при внеочередной публикации статей аспирантов, докторантов, соискателей.

Объем научной статьи должен составлять не менее 0,35 авторского листа (14 000 печатных знаков, включая пробелы между словами, знаки препинания, цифры и др.).

Полноразмерная статья должна состоять из следующих разделов: - Название статьи, которое должно отражать основную идею выполненного

исследования, быть по возможности кратким, содержать ключевые слова, позволяющие индексировать данную статью.

- Аннотация на русском языке (100-150 слов), которая должна ясно излагать содержание статьи и быть пригодной для опубликования в аннотациях к журналам отдельно от статьи.

- Ключевые слова. - Введение, в котором должен быть дан краткий обзор литературы по данной проблеме,

указаны не решенные ранее вопросы, сформулирована и обоснована цель работы и, если необходимо, указана ее связь с важными научными и практическими направлениями. Во введении следует избегать специфических понятий и терминов. Содержание введения должно быть понятным также и неспециалистам в соответствующей области.

- Материалы и методы, где приводится описание методики, аппаратуры, объектов исследования и подробно освещается содержание исследований, проведенных автором.

- Результаты и обсуждение. Полученные результаты должны быть обсуждены с точки зрения их научной новизны и сопоставлены с соответствующими известными данными.

- Заключение, в котором в сжатом виде должны быть сформулированы основные полученные результаты с указанием их новизны, возможностей применения, четко сформулированы выводы.

- Аннотация на английском языке, содержащая фамилию и инициалы автора (авторов) статьи, ее название, ключевые слова.

- Литература. Обязательными являются ссылки на работы других авторов. При этом должны присутствовать ссылки на публикации последних лет, включая зарубежные публикации в данной области.

На отдельной странице следует указать: - фамилии и инициалы авторов, их место работы, занимаемые должности; - почтовый, электронный адрес и телефон того автора, с кем следует вести

редакционную переписку; - контактную информацию (почтовый, электронный адрес и номера телефонов),

которую авторы разрешают опубликовать вместе со статьей в разделе «Адрес для корреспонденции».

Статья должна быть тщательно отредактирована и выверена автором. Статьи принимаются только с визой руководителя и при наличии экспертного заключения о возможности опубликования материалов в печати и других средствах массовой информации.

В статье должна использоваться система единиц СИ. Желательно использовать общепринятые сокращения.

110

За правильность приведенных данных ответственность несут авторы. Направление в редакцию работ, ранее опубликованных в других изданиях, не допускается.

Правила оформления статьи для публикации в журнале «Вестник фармации»:

1. Материалы в редакцию представляются на бумажном носителе в 2-х экземплярах и в электронном виде. Текст должен быть набран в Microsoft Word.

2. Формат страниц А4. Поля по периметру 20 мм. Страницы не нумеруются. 3. Основная часть статьи может делиться на подразделы (с разъяснительными

заголовками). 4. Таблицы и рисунки должны быть пронумерованы в соответствии с порядком

цитирования в тексте. В названиях таблиц и рисунков не должно быть сокращений. Размер таблицы, по возможности, не должен превышать одной страницы. Рисунки и подписи на них должны быть четкими и хорошо читаемыми (шрифт Times New Roman, 10-12 пт.). На рисунках и диаграммах запрещается использовать жирный шрифт и курсив.

5. Список использованной литературы оформляется в соответствии с ГОСТом 7.1-2003. Ссылки нумеруются согласно порядку цитирования в тексте. Порядковые номера ссылок в тексте должны быть написаны внутри квадратных скобок (например, [1]).

6. Статья оформляется следующим образом: Инициалы, фамилии авторов - шрифт Times New Roman, 11 пт, жирный; название статьи – шрифт Times New Roman, 12 пт, жирный, прописными буквами; учреждение - шрифт Times New Roman, 12 пт; названия разделов статьи - шрифт Times New Roman, 12 пт, прописными буквами, курсив, по центру строки; текст статьи - шрифт Times New Roman, 12 пт; межстрочный интервал – одинарный; красная строка – 1,25 см.

Пример оформления таблицы:

Таблица 1 – Технологические свойства таблеточных смесей

Примечание: * -

Пример оформления рисунка:

Рисунок 1 – Влияние давления прессования на распадаемость таблеток

Редакция оставляет за собой право сокращать и редактировать статьи. ПРИ НАРУШЕНИИ УКАЗАННЫХ ПРАВИЛ СТАТЬИ НЕ РАССМАТРИВАЮТСЯ.

РЕДАКЦИЯ НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА СОДЕРЖАНИЕ РЕКЛАМНЫХ МАТЕРИАЛОВ.

" ", 3 (49) 2010 �� : 112 �� : �� - 001402 �� !��"��# ��$�� – 00140 %��&�'�� ()��*�� )��'�� (�*��

210602, �. %��&�', +�. ,�(-�, 27, ��.. (8-0212) 24-94-38 /��-�0

/1 2 02330/0549444 � 08.04.2009

3��4��" 5.6. 7��4"� � 8�9�":4�� 4�� ;.<. 8�4� �$ 8��4�� 6.=

34�� $�4": 25.06.2010. >��9�4 1/8. ?!9�� 4��@ �� A2. ;��4!�� Times. B��. ��$. ��4� 12,3 B$.-��. �. 8,8. C��D 300 E�� A 512 F4��$�4�� @� 6�4�G��9 ��!��4 ��9 9��9 !�� 4�4�

210602, �. 6�4�G��, ��-4 >�!��, 27. C��. (8-02120) 26-19-66 �� "�� 9�4�� D!�� «6��4��

@��9��» �G��4��"��

Documents

¹3 (49) 2010 · 2015-11-23 · В. Жарков ПРОЦЕССНЫЙ ПОДХОД В УПРАВЛЕНИИ АПТЕЧНОЙ ОРГАНИЗАЦИЕЙ ЗАО «Максфарма-Балтия»,