ESPECTROFOTOMETRÍACONCEPTOS

*TRANSMITANCIA

T = I/I0

%T = (I/ I0)x100

*ABSORBANCIA

A = log I/I0 = ε cl

I : intensidad de la radiación transmitida

I0 : intensidad de la radiación incidente

c : concentración molar de la sustancia absorbente

ε : coeficiente de extinción molar (M-1cm-1)

l : espesor de la sustancia atravesada

LEY DE LAMBERT-BEERA = ε c l

A : Absorbancia

ε : coeficiente de extinción molar (M-1cm-1)

l : espesor de la sustancia atravesada

c : concentración molar de la sustancia absorbente

La fracción de luz incidente absorbida por una sustancia absorbente es proporcional al número de moléculas que interaccionan con la radiación en su recorrido.

MEDICIÓN DE LA ABSORBANCIA

* Importancia del blanco.

Adisolución=Asoluto + Adisolvente

Asoluto=Adisolución - Adisolvente

* En las mezclas:

Atotal=A1 + A2 + …….+ An

* Limitaciones de la Ley de Beer.

NATURALEZA EXPONENCIAL DE LA LEY

DE LAMBERT-BEER

La Transmitancia decrece exponencialmente y la Absorbancia

aumenta linealmente a medida que se incrementa la concentración o el camino óptico atravesado por la

radiación.

SPECTRONIC 20

1 Encendido y ajustede la transmitancia

4 Ajuste del blanco

5 Escala de absorbanciay transmitancia

2 Selector de lalongitud de onda

3 Compartimentopara la muestra

Monocromador

Fuente deradiación

Cubeta con muestra

Detector

Sistema delectura

ESPECTRO VISIBLE

Longitud de onda (nm)

IR UV

ESPECTROFOTÓMETROS HITACHI U-2000 Y U-2001

Menú principal. Opciones:

1.- PHOTOMETRY

2.- WL SCAN

3.- TIME SCAN

4.- MULTIPLE WL

5.- MULTIPLE COMPONENT

6.- TEST MENU

7.- OPTIONAL FUNCTIONS

8.- CALIBRATION

9.- REMOTE CONTROL

“FOSFORIMAGER”(BAS-1500, FUJIFILM)

Equipo analizador de imágenes.

Consta de 3 componentes:

1.- pantallas (“Imaging Plate”, IP)

2.- lector

3.- borrador

PANTALLAS, IP

Tienen en su composición una capa de cristales de fósforo radiosensibles y fotoestimulablesunidos a una capa de poliester.

2 tipos: *para isótopos de uso general

*especiales para 3H

Las pantallas de uso general son reutilizables.

OBTENCIÓN DE UNA IMAGEN

3 PROCESOS:

- EXPOSICIÓN

- LECTURA: LÁSER DE He/Ne

- BORRADO