Espectrofotometría

Embed Size (px)

DESCRIPTION

Técnica y fundamentos de la espectrofotometría

Citation preview

Transmitancia

TransmitanciaLa transmitancia o transmitencia es una magnitud que expresa la cantidad de energa que atraviesa un cuerpo en la unidad de tiempo.La transmitancia ptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo, en una determinada longitud de onda.Ies la cantidad de luz transmitida por la muestra eI0es la cantidad total de luz incidente.

Muchas veces encontraremos la transmitancia expresada en porcentaje, segn la frmula:

1Es la cantidad de energa que atraviesa, en la unidad de tiempo, una unidad de superficie de un elemento constructivo de caras plano paralelas cuando entre dichas caras hay un gradiente trmico unidad. Es el inverso a laresistencia trmica. Su expresin matemtica es;

En donde:U = transmitancia en vatios por metro cuadrado y kelvin.W = potencia envatios.S = superficie en metros cuadrados.K = diferencia de temperaturas enkelvin.El concepto de transmitancia trmica se usa en construccin para el clculo de los aislamientos y prdidas energticas

Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslcido, una parte de esta luz es absorbida por el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A mayor cantidad de luz absorbida, mayor ser la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de luz ser transmitida por dicho cuerpo. Como se ve, la absorbancia y la transmitancia son dos aspectos del mismo fenmeno. La absorbancia, a una determinada longitud de onda lambda, se define como:

AbsorbanciaLa medida de la absorbancia de una solucin es usada con mucha frecuencia en laboratorio clnico, para determinar la concentracin de analitos tales como colesterol, glucosa, creatinina y triglicridos en sangre. Cada uno de estos analitos se hace reaccionar qumicamente con determinados compuestos, a fin de obtener una solucin coloreada. A mayor intensidad de color, mayor ser la absorbancia de la solucin en una determinada longitud de onda. La absorbancia es entonces directamente proporcional a la concentracin del analito en sangre.Para medir esta absorbancia, se hace incidir un haz de luz con determinada intensidad y longitud de onda, sobre la solucin, y se mide la luz transmitida al otro lado de la cubeta que contiene dicha solucin. Estas tcnicas estn comprendidas en el rea de la espectrofotometra.La ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia est directamente relacionada con las propiedades intrnsecas del analito, con su concentracin y con la longitud de la trayectoria del haz de radiacin al atravesar la muestra. La expresin matemtica de la ley de Lambert-Beer es:A = C ** bdonde:A = Absorbancia de la muestraC = Concentracin del cromforob= Longitud del paso ptico que contiene la muestra.=Coeficiente molar de extincin.

Curva de calibracin: es una curva de referencia construida con cantidades conocidas de una sustancia la cual es utilizada para determinar la cantidad de la sustancia presente en una muestra problema. Para que se usa: sirve para medir la concentracin de una sustancia problema a travs de la comparacin de una serie de elementos con concentracin y volumen conocidosQu se entiende por curva de calibracin?

EspectrofotometraEs la medida de la cantidad de energa radiante absorbida por las molculas de una muestra en funcin de las longitudes de onda especficas.

EspectrofotmetroEl espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia con el fin de determinar la concentracin de una sustancia en una solucin, permitiendo as la realizacin de anlisis cuantitativosTipos de espectrofotmetroAbsorcin 1. Molecular: UV-visible, IR, RMN 2. Atmica: llama(EAA), electrotrmica(GF)

Emisin 1. Molecular: Fluorescencia (FS, XRF) 2. Atmica: llama(EEA), plasma(ICP)

Otros Refractometria, polarimetra, espectroscopia mas(EM) y turbidimetria.

Componentes del espectrofotmetroLos ms importantes son los siguientes:

La fuente luminosaEl monocromador El portador de muestras o cubeta El sistema detector El sistema de lectura

Tcnica legislada para el anlisis del cromo hexavalente en agua(mtodo colorimtrico) NMX-AA-044-1981FUNDAMENTACIN:El cromo hexavalente reacciona con la difenilcarbazida en medio cido, para dar un complejo de color violeta de composicin desconocida, que se cuantifica a una longitud de onda de 540 nm

Recoleccin, preservacin y conservacin de las MuestrasSe debe tomar un mnimo de 300 mL de muestra en frascos de vidrioEs necesario filtrar la muestra con papel filtro de poro fino. Despus se debe acidificar hasta un pH < 2.Preservar las muestras a 4C y por un tiempo mximo de 24 horasProcedimiento experimentalElaboracin de la curva de calibracin Medir de 2 a 20 ml de la disolucin std. de Cr (VI) y diluir con objeto de obtener estndares de entre 10-100 mg/L en matraces aforados de 100 ml; luego transferir a matraces Erlenmeyer de 250 ml y agregar H2SO4 0.2 N hasta conseguir un intervalo de pH: 1