Bahan dan MetodeDesain penelitian : studi cross-sectional
Ukuran sampel : 50 sampel cairan mulut yang berasal dari tahanan
yang ditahan peradilan di pengadilan petugas polisi dari kota
Barcelona. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Institute of
Medicine Hukum Catalonia.Pemilihan sampel : Partisipasi diminta
dari para tahanan yang kecanduan obat-obatan yang digunakan sebagai
hak untuk dirawat oleh dokter forensik sesuai dengan hukum Spanyol
normatif [5]. Semua subjek memiliki riwayat penyalahgunaan konsumsi
obat kronis. Kriteria inklusi termasuk yang dilaporkan sendiri
penggunaan merokok, terhirup atau obat intravena setidaknya selama
enam bulan sebelum penahanan. Para peserta diberikan informed
consent. Setiap kali tidak mengkonsumsi tidak bisa ditetapkan
secara akurat, tetapi berkisar antara 1-3 hari selama tinggal di
kantor polisi. Informasi tambahan dikumpulkan relatif terhadap
jenis kelamin dan usia peserta.Metode : Mendapatkan sampel: sampel
air liur diperoleh secara langsung dengan meludah dalam tabung
polypropylene. Aliran air liur tidak dirangsang. Setelah
pengumpulan cairan mulut aliquoted ke cryotubes dan dibekukan pada
-20 sampai analisis. Analisis deskriptif dari variabel kategorikal
dan media, kisaran dan standar deviasi dari variabel kuantitatif
telah dilakukan. Identifikasi analit dilakukan dengan GC-MS.
Kuantifikasi analit tidak dilakukan.
Persiapan sampel: Persiapan sampel terdiri dalam penambahan 1 ml
cairan mulut, tanpa sentrifugasi, dan pH disesuaikan dengan 1ml
buffer fosfat (pH = 6). Setelah pH disesuaikan, 20l dari d3-kokain,
d3-6-MAM, d5-amphetamine, d9-methamphetamine dan 9-THC ditambahkan
untuk konsentrasi akhir 10g / ml.
Sampel dihomogenisasi selama 10 menit. dan dipindahkan dalam
Toxitube selama 10 menit dan disentrifugasi (3500 rpm selama 10
menit). Fase organik diekstraksi, diuapkan sampai kering di bawah
nitrogen dan diderivatisasi dengan 40l dari BSFTA (N, O-bis
(trimetilsilil) trifluoroasetamida) -TMCS (trimetilklorosilan) di
suhu 80 C selama 20 menit untuk 9-THC dan 6-MAM atau PFPA untuk
amfetamin dan metamfetamin di suhu 50C selama 40 menit.
Konfirmasi massa kromatografi-spektrometri gas
Bahan kimia dan bahan: solusio metanol dengan konsentrasi dari 1
mg/mL kokain, 9-tetrahydrocannabinol (THC 9-), amfetamine,
methamphetamine, dl-3, 4-methylendioximethamphetamine (dl-3, 4-
MDMA), dl-3, 4-methylendioximethamphetamine (dl-3, 4-MDEA) dan
6-monoacetylmorphine (6-MAM) yang dibeli dari Alltech-Applied
Science (State College, PA, USA).
Untuk derivatisasi dari 9-THC dan 6-MAM, BSTFA dan TMCS
digunakan sebagai BSTFA + 1% TMCS disediakan oleh Supelco
(Bellefonte, PA, USA) dan asam 2,2,3,3,3-Pentafluoropropionic
(PFPA) oleh Merck KGaA (Darmstadt Jerman). Penyangga fosfat (0,1 M)
dibuat dari NaH2PO4 dan disesuaikan dengan pH 6,0 dengan NaOH 0,1
M.
Kondisi GC / MS-MS: sebuah varian Inc (Palo Alto, USA) 3800 gas
kromatografi digabungkan ke 4000 massa selektif detektor perangkap
ion (MSD) yang beroperasi dalam mode pengaruh elektron digunakan
untuk analisis (GC / MS-MS). Kolom gas kromatografi adalah 5%
fenil-95% metil silikon DB-5, 0,25 mm ID,ketebalan 0,25 pM, panjang
30 m (Varian faktor Empat Kolom kapiler) dan suhu injeksi adalah
250C. 2l sampel disuntikkan secara terpisah. Oven diprogram dengan
suhu 90C selama 1 menit; meningkat di suhu 20C / menit hingga suhu
240C; kemudian meningkat di suhu 5 derajat celcius/menit hingga
300C dimana tinggal selama dua menit. Garis Transfer berada pada
suhu 280C. Total waktu adalah 23,5 menit. Deteksi telah selesai
beroperasi di MS / MS. Rincian prosedur dari deteksi yang
diterapkan ditunjukkan pada Tabel 1.Zat yang berbeda dan ion yang
digunakan dalam identifikasi oleh MS-MS ditunjukkan pada Tabel 2.
Batas deteksi (LOD) dan batas kuantifikasi (LOQ) nilai yang
digunakan dalam konfirmasi GC-MS / MS dan LOD dan LOQ ditetapkan
untuk GC / MS-MS ditunjukkan pada Tabel 3. Tidak ada upaya yang
dilakukan untuk menentukan nilai kuantitatif dalam hasil sampel
positif.
