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DIVISIO N NUM ERO DE ESPECIES EJEM PLOS C A R A C TER ISTIC A S DIFERENCIALES ENFERM EDADES U SO S EN LA ECONOM IA Zygom ycota 600 M oho negro delpan Form ación de esporangiosporasy zigosporas Pocas Ninguno Ascom ycota 30.000 N eurospora Levaduras Esporassexualesen ascos Roya del castaño Alim entos Levaduras Basidiomycota 25.000 H ongosvenenosos Setas Tizones Esporassexualesen basidios Royas Tizones Alim entos (setas) D euterom ycota 25.000 A spergillus Penicillium F usarium Sin ciclo sexual conocido Tiña M uguet Q uesos Antibióticos REINO FUNGI REINO FUNGI

Lectura micotoxinas

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Lectura, micotoxinas

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Page 1: Lectura micotoxinas

DIVISION NUMERO

DE ESPECIES

EJEMPLOS CARACTERISTICAS

DIFERENCIALES ENFERMEDADES

USOS EN LA ECONOMIA

Zygomycota 600 Moho negro del pan Formación de esporangiosporas y zigosporas

Pocas Ninguno

Ascomycota 30.000 Neurospora Levaduras

Esporas sexuales en ascos

Roya del castaño

Alimentos Levaduras

Basidiomycota 25.000 Hongos venenosos Setas Tizones

Esporas sexuales en basidios

Royas Tizones

Alimentos (setas)

Deuteromycota 25.000 AAssppeerrggiilllluuss Penicillium Fusarium

Sin ciclo sexual conocido

Tiña Muguet

Quesos Antibióticos

REINO FUNGIREINO FUNGI

Page 2: Lectura micotoxinas

Los Hongos Imperfectos o Deuteromycota Los Hongos Imperfectos o Deuteromycota productores de Micotoxinasproductores de Micotoxinas

Aspergillus

Fusarium

Alternaria

Penicillium

Page 3: Lectura micotoxinas

Son metabolitos Son metabolitos secundarios de origen secundarios de origen fúngico, que causan fúngico, que causan efectos tóxicos en efectos tóxicos en

animales y el hombre animales y el hombre cuando son incorporados cuando son incorporados

por una vía naturalpor una vía natural

MICOTOXINASMICOTOXINAS

Son Son CONTAMINANTES INEVITABLESCONTAMINANTES INEVITABLES

de cereales y oleaginosasde cereales y oleaginosas

Page 4: Lectura micotoxinas

Aspergillus y PenicilliumOcratoxinas

Mismo hongo puede producir varias micotoxinas

Misma micotoxina puede ser producida por distintos géneros/especies fúngicos

Estructuras muy complejas de PM < 700

Gran estabilidad frente a agentes físicos y químicos

Zearalenona

TricotecenosFusarium graminearum

Acido tenuazónico

Alternariol

AAL toxinas

Alternaria alternata

Fumonisinas Fusarium proliferatum y F. verticillioides

Page 5: Lectura micotoxinas

TENIENDO EN CUENTA:

La gran estabilidad de estos metabolitos

Su síntesis esta condicionada a varios parámetros: pH, Tº, aw, O2 , CO2 , luz/oscuridad

No todas las cepas de una especie reportada toxicogénica lo son

LA PRESENCIA DE MOHOS EN UN ALIMENTO NO IMPLICA LA PRESENCIA

DE MICOTOXINAS Y VICEVERSA

Page 6: Lectura micotoxinas

Producto agrícola

Procesamiento

Almacenamiento

Infección fúngica Formación de Micotoxinas

Consumo por animales

Consumo por el hombre

Residuos en tejido Residuos en leche

Producto cárnico Producto lácteo

Consumo por el hombre

MICOTOXICOSIS SECUNDARIA

MICOTOXICOSIS PRIMARIA

Page 7: Lectura micotoxinas

daño hepdaño hepááticoticodaño renaldaño renaldaño neuroldaño neurolóógico gico daño hematoldaño hematolóógicogicodaño gastrointestinaldaño gastrointestinal

daño inmunoldaño inmunolóógicogico

mala absorcimala absorcióón de nutrientesn de nutrientestrastornos reproductivos trastornos reproductivos baja produccibaja produccióón (de leche, n (de leche, huevos)huevos)

tumores malignostumores malignos

Efectos TóxicosEfectos Tóxicos

LETALIDAD

INFECCIONES

GRAVE RIESGO EN SALUD HUMANA

PRODUCCION DEFICIENTE

Dosis Altas :Dosis Altas :

Dosis Bajas:Dosis Bajas:

Page 8: Lectura micotoxinas

AflatoxinasAflatoxinas AspergillusAspergillus

Aspergillus y PenicilliumAspergillus y PenicilliumOcratoxinasOcratoxinas

ZearalenonaZearalenona

TricotecenosTricotecenos

FumonisinasFumonisinas

FusariumFusarium

PatulinaPatulina Aspergillus y PenicilliumAspergillus y Penicillium

Page 9: Lectura micotoxinas

Toxinas producidas por las especies del Género Aspergillus

• A.. flavus• A.. parasiticus• A.. nomius

Aflatoxinas

Son contaminantes de:MaizManíLeche

Derivadas del núcleo Furano-Cumarina

Page 10: Lectura micotoxinas

Alrededor del 1% de la aflatoxina B1 consumida con el forraje es excretada en leche como M 1

Tienen acción sinérgica con el virus de la hepatitis B, por lo que la reducción de la ingesta de estas toxinas disminuye la tasa de cáncer de hígado en individuos portadores del virus

Son hepatotóxicas y cancerígenas

Actuan como mutágenos al unirse a la guanina y generar un sitio apurínico (transversión a adenina)

Page 11: Lectura micotoxinas

Actuales lActuales líímites sobre micotoxinas en Argentina mites sobre micotoxinas en Argentina AflatoxinasAflatoxinas

Harina de sojaHarina de soja B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2 30 µg/Kg30 µg/Kg

Maní y sus proctosManí y sus proctos B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2B1B1

20 µg/Kg20 µg/Kg5 µg/Kg5 µg/Kg

Maíz y sus productosMaíz y sus productos B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2B1B1

20 µg/Kg20 µg/Kg5 µg/Kg5 µg/Kg

Leche fluídaLeche fluídaLeche en polvoLeche en polvo

M1M1M1M1

0.5 µg/Kg0.5 µg/Kg5 µg/Kg5 µg/Kg

Alimento para bebesAlimento para bebes B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2 00

Leche fluídaLeche fluídaLeche en polvoLeche en polvo

M1M1M1M1

0.5 µg/Kg0.5 µg/Kg5 µg/Kg5 µg/Kg

Maíz en granoMaíz en granoharina de maíz o sémolaharina de maíz o sémola

B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2

20 µg/Kg20 µg/Kg20 µg/Kg20 µg/Kg

ManíManíPasta o manteca de Pasta o manteca de manímaní

B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2B1+B2+G1+G2

20 µg/Kg20 µg/Kg20 µg/Kg20 µg/Kg

Mercosur

Codigo Alimentario Argentino

Page 12: Lectura micotoxinas

OcratoxinasOcratoxinas

Alimentos contaminadosAlimentos contaminados::• café

• vino

Toxinas producidas por las especies del Género Penicillium y

Aspergillus

Derivadas de Isocumarina y L-Fenilalanina

Page 13: Lectura micotoxinas

*) Producida principalmente por P. verrucosum y P. carbonarius (uvas) y

A. ochraceus, A. niger.

*) Nefrotóxicas y Hepatotóxicas, Enterotóxicas y Teratógenas para animales.

*) Se ha clasificado como posible carcinógeno para humanos.

*) Mostos de uva y Vinos (principalmente tintos).

*) Codex Alimentarius propone que el vino es la segunda fuente de exposición a las OTA después de los cereales.

Page 14: Lectura micotoxinas

PatulinaPatulina

Efectos congestivos Efectos congestivos (pulmones, ri(pulmones, riññon y bazo)on y bazo)

DegeneraciDegeneracióón neuronasn neuronas

Alimentos contaminadosAlimentos contaminados::• manzanas

• jugos

El Codex alimentarius estableces como límite: 50 μg/kg de patulina en el zumo de manzana,

Page 15: Lectura micotoxinas

•F. graminearumF. graminearum

•F. culmorumF. culmorum

Toxinas producidas por especies del género FusariumFusarium

ZearalenonaZearalenona

TricotecenosTricotecenos

FumonisinasFumonisinas

Presentes en cereales pre y pos cosecha: maiz

En frutas durante la refrigeración: manzanas

Page 16: Lectura micotoxinas

TricotecenosTricotecenos

Existen 45 compuestos de origen natural DON y NIVDON y NIV son los más importantes

InmunosupresoresInmunosupresores

Inhiben la síntesis de Inhiben la síntesis de proteínasproteínas

Alimentos contaminadosAlimentos contaminados::

• trigo

• maíz

Page 17: Lectura micotoxinas

FumonisinasFumonisinas

Ocurrencia natural: FB1- FB1- FB2 - FB3FB2 - FB3

Toxicidad variable Toxicidad variable

según lasegún la especieespecie

Alimentos contaminados:Alimentos contaminados:

• maíz (a nivel mundial)

interfieren en el metabolismo de los esfingolípidos,asociadas al cáncer esofágico humano y la leucoencefalomalacia equina y el edema pulmonar porcino.

Page 18: Lectura micotoxinas

ZearalenonaZearalenona

EstrogénicaEstrogénica

Alimentos contaminadosAlimentos contaminados::• trigo

• maíz

produce hiperestrogenismo y problemas reproductivos en el ganado y animales de experimentación.

Lactona del Acido Resorcílico

Page 19: Lectura micotoxinas

Problematica en ArgentinaProblematica en Argentina

• Maiz y sus productos: Aflatoxinas, Fumonisinas, Tricotecenos, Zearalenona

Jugo de manzana: Patulina

Vino: Ocratoxina

• Trigo y sus productos: Tricotecenos (DON), Zearalenona

• Mani y sus productos: Aflatoxinas

Leche: Aflatoxina M1

Basilico J.C., CASLAN, 2004

Page 20: Lectura micotoxinas

Obtención de una muestra representativa del lote

EXTRACCION Separar la micotoxina de compuestos insolubles en la sc. de extracción

CLEAN-UP Separar la micotoxina de compuestos acompañantes en el extracto

Extracción líquido- líquido

Columnas pre-empacadas con silica gel, Florisil, intrecambio iónico (SPE)

Columnas de Inmunoafinidad

MUESTREO

ANÁLISIS DE MICOTOXINAS

Page 21: Lectura micotoxinas

CONCENTRACION Concentrar la micotoxina que está en bajas concentraciones

SEPARACION DETECCION Y DETERMINACION

Separar los componentes remanentes del extracto. Detección y medida de la respuesta (TLC, HPLC, CG).

TLC HPLC

Page 22: Lectura micotoxinas

TLC: TECNICA DE PREFERENCIA EN PAISES EN DESARROLLO ECONÓMICAS, RÁPIDAS Y PRÁCTICAS PERMITE LA MULTIDETECCION NO PERMITE LIMITES DE DETECCION MUY BAJOS

HPLC NO SON RAPIDAS Y SON CARAS EN POCOS CASOS PERMITEN LA MULTIDETECCION MUY BUENAS PURIFICACIONES MUY BAJOS LIMITES DE DETECCION

ELISA DIRECTO E INDIRECTO: EXISTEN KITS DE DETECCIÓN ESPECIALMENTE USADOS PARA AFLATOXINAS Y M1 EN LECHE

COLUMNAS DE INMUNO-AFINIDAD: POR UNIÓN A ANTICUERPOS ESPECÍFICOS

ESTADO ACTUAL DE LA METODOLOGÍA DE ANALISIS