cultivo de microorganismos del ambiente

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CURSO: Laboratorio de Microbiología

DOCENTE: Mblgo. Carlos Azañero Díaz

GRUPO: ¨D¨

ALUMNA: Aburto Rodríguez Ruddy

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA FACULTAD DE INGENIERÍA

E.A.P. INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

CULTIVO DE MICROORGANISMOS DEL

AMBIENTE

Microbiología General

1 Cultivo de Microorganismos del Ambiente

I. INTRODUCCIÓN

El control microbiológico del aire se integra como parte del proceso de

aseguramiento de la calidad, que tiene en cuenta un riesgo de naturaleza

microbiana, cualquiera sea el campo de actividad.

Los higienistas, en demanda de un dominio total del riesgo microbiológico, siempre

están consecutivamente interesados: En un producto en riesgo, En su medio

ambiente próximo, contaminante potencial por contacto Su medio el ambiente

lejano como el ordenamiento y los equipamientos de los locales. En este último

caso, el aire ambiente representa el vector principal de contaminación entre una

fuente contaminante y un receptor en riesgo.

Debido a los avances en el área técnica y científica nos lleva a cada vez más

situaciones con alto riesgo microbiológico: caso de un enfermo puesto bajo el

efecto de un tratamiento inmunodepresor o sufriendo una intervención quirúrgica

larga y arriesgada en el plano infeccioso; caso de una persona que trabaja en un

laboratorio con cepas microbianas altamente patógenas; caso de un producto

alimenticio ultra fresco donde solamente la preparación y acondicionamiento

aséptico garantizan la conservación.

Fuera de estos contextos de "alto riesgo microbiano" y de medio ambiente ultra

limpio, la medida exacta de la aérobiocontaminación interesa a los

epidemiologistas en los temas:

El estudio de la posible correlación entre la composición cuantitativa y cualitativa

de la flora microbiana (según la localización geográfica, de la urbanización, de la

estación, del confinamiento, etc.) y la emergencia de enfermedades respiratorias o

alergias. El conocimiento de las causas y los mecanismos de aparición y acción de

ciertas enfermedades profesionales, asociadas a la contaminación particular y

microbiana del aire respirado.

http://pdfcast.org/pdf/4-microorganismos-en-el-ambiente



II. OBJETIVO

Comprobar la ubicuidad de los microorganismos. Para ello se realizaran

análisis de diferentes ambientes que tienen que tienen incidencia en el

procesado de los alimentos, como son: Superficies de trabajo, aire y

manipuladores.

III. MATERIALES

Material de Laboratorio

Placas de agar para recuento en placa (PCA)

Placas de agar OGA

Placas de agar MacConkey

Hisopos estériles

Tubos con 10 ml de solución salina estéril

Papel de aluminio estéril con una abertura central de 9 cm2

IV. Fundamento teórico:

Análisis del Aire Mecanismo de acción:El aire, además de partículas en suspensión es

portador de bacterias o sus esporas. Por ello puede ser causa tanto de

contaminación de alimentos y superficies como de infecciones en el

hombre (patologías respiratorias, etc.). El método de sedimentación en

placa es uno de los más sencillos para la determinación de

microorganismos en aire. A pesar de ello, los resultados obtenidos son

orientativos de las cifras de microorganismos presentes en el aire, ya que

estos niveles varían en función de las corrientes de aire y del tamaño de las

partículas de suspensión.



Aplicaciones:Existen diversos métodos para el análisis de aire:

Sedimentación, filtración, choque en líquidos y precipitación electrostática,

entre otros.

Análisis de Superficies Mecanismo de acción: Para llevar a cabo una correcta manipulación de los

alimentos es necesario mantener una limpieza adecuada tanto en las

superficies de trabajo como en los utensilios que hay que emplear. A no ser

que los alimentos hayan sido esterilizados, todos los productos llevan

microorganismos. En la manipulación, el envasado y el almacenaje de los

alimentos, estos microorganismos se mantuvieron en todo momento en

niveles que aseguren la calidad microbiológica del alimento.

Aplicaciones:El objetivo de los análisis microbiológicos de superficies es

comprobar el estado higiénico del lugar de trabajo, de modo que evitemos

la contaminación cruzada durante el procesado de los alimentos. Existen

distintos métodos para el examen microbiológico de las superficies:

Método del hisopo, de la placa de contacto, de la jeringa de agar, de la

lengüeta (o película pegajosa)

Análisis de Manipuladores Mecanismo de acción:Un alimento puede estar contaminado en su origen

o bien puede el manipulador quien lo contamine durante el procesado. L

persona que va manipular el alimento tiene una abundante carga

microbiana en la piel, por ello resulta evidente la necesidad de que el

manipulador mantenga unas perfectas condiciones de higiene durante el

procesado de los alimentos.

Aplicaciones:El objeto del análisis de manipuladores es comprobar que la

persona que procesa un alimento no es una fuente de contaminación de

éste. Se puede estudiar: manos, uñas, y fosas nasales.



V. procedimiento:

1. Análisis de aire por sedimentación:

Destapamos 2 placas de PCA y 2 placas de OGA en el lugar cuyo nivel de

contaminación deseamos examinar durante diferentes intervalos de

tiempo: 0,5 y 1,0 horas. Tapamos las placas de PCA e incubamos durante

24-48 horas a 370 C. las placas de OGA se incubaron a temperatura

ambiente durante 4 días

En las placas de PCA se determinaron las bacterias aerobias mesófilas

viables totales ambientales y en OGA se determinaron los hongos (mohos y

levaduras) totales ambientales

2. Análisis de Superficies Planas y no Planas: Método del Hisopo.

Delimitamos la superficie que analizamos mediante una plantilla de papel

de aluminio estéril con una abertura de dimensiones conocidas (Ej. 9 cm2).

Humedecimos el hisopo estéril en una solución de 5 a 10 ml de solución

salina estéril y restregamos varias veces sobre la superficie delimitada por

la plantilla. Introducimos el hisopo en el tubo con solución salina estéril y

dejar durante 15 a 30 minutos de manera que los microorganismos se

liberen del algodón al caldo.

Sembramos 0.1 ml de dicho caldo en una placa de PCA y Agar MacConkey

(medio selectivo y diferencial para Entereobacterias).

Incubamos durante 24 a 48 horas a 370C (Recuento expresado como

UFP/9cm2).

3. Análisis de Manipuladores:

El alumno no se lavó las manos, ya que la técnica consistía en pasar la mano

por la superficie de placas con PCA y MacConkey.

Incubamos las placas 24-48 horas a 370C.

Observamos el crecimiento de colonias características en cada medio de

cultivo.



VI. RESULTADOS:

1. Análisis de aire por sedimentación:

Muestras dePlaca PCA:

Técnica de placa descubierta: El análisis se

realizó en las Terrazas de Agroindustria

durante 15 minutos.

Cantidad de colonias: 2UHF

Descripción: Aspergillus, transporte circular

ondulatorio.


realizó en un Kiosco de la UNS durante 15

minutos.

Cantidad de colonias: 0

Descripción: ----


realizó dentro del Laboratorio de Microbiología

durante 15 minutos.

Cantidad de colonias: 1 UHF

Descripción: Aspergillus blanquecina.



Muestras de Placa OGA:

Técnica de placa descubierta: El análisis se realizó en las Terrazas de Agroindustria durante 30 minutos.


Descripción: hay presencia de estos organismos en abundancia, provenientes de árboles y los hongos, próximos al jardín. Bacterias Aspergillus, Penicillium.


realizó en un Kiosco durante 15 minutos.


Descripción: colonias de distintos tamaños

entre grandes y pequeñas color blancas.

Bacterias Aspergillus, Penicillium.

Técnica de placa descubierta: El análisis se realizó dentro del Laboratorio de Microbiología durante 30 minutos.


Descripción: pequeñas y blanquecinas; moho.



2. Análisis de Superficies Planas y no Planas:

Muestras de Placa PCA:

Técnica del Hisopo: El análisis se realizó en las

Terrazas de Agroindustria.

Cantidad de colonias: ninguna.

Descripción: ---

Método del Hisopo: El análisis se realizó dentro del Laboratorio de Microbiología.


Descripción: ---

Técnica del Hisopo:El análisis se realizó a

kiosco de venta de alimentos envasados.


Descripción: ---



3. Análisis de Manipuladores:

Muestra Placa PCA:

Muestra Placa MacConkey:

Técnicadel Hisopo:El análisis se realizó a una

compañera del aula, Nadia Mendoza.


Descripción: Se observó el crecimiento de

colonias transparentes.

Técnica del Hisopo: El análisis se realizó a una

compañera del aula, Nadia Mendoza.


Descripción: Se observó el crecimiento de

colonias pequeñas, blancas, uniformes algunas

esféricas y en forma ondulatoria. Bacterias

mesófilas.



VII. DISCUSIÓN:

Según Morris 2000, JHI Estandarizar la medición deesporas de Aspergillus en

el aire. Se requieren sistemas de altovolumen de medición; los niveles de

esporas varíandurante el día.

El aire además de partículas en suspensión, es portador de bacterias en forma

vegetativa o esporulados, esporos de hongos y virus. Por ello puede ser causa

tanto de contaminación de alimentos como de infecciones en el hombre

(patologías respiratorias, etc.).Los microorganismos se encuentran presentes

en todos los ambientes: en el aire, en el agua, en la superficie de los objetos e

incluso sobre nuestra piel. Un alimento puede estar contaminado en su origen

o bien puede ser el manipulador quien lo contamine durante el procesado. La

persona que va a manipular un alimento tiene una abundante carga

microbiana en la piel, pero nunca deberán aislarse de ellas bacterias

patógenas. Por lo tanto resulta evidente la necesidad de que el manipulador

mantenga una perfecta condición de higiene durante el procesado de los

alimentos. Cuando se trabaja en Microbiología de los alimentos es importante

determinar el grado de contaminación ambiental, ya que de las condiciones

higiénicas del lugar de trabajo (utensilios, superficies, etc.) y del propio

manipulador van a depender en parte el número y tipo de microorganismos en

el alimento.

El agar MacConkey se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de

fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar

bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos.

Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

En este medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para

el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la



mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que

inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.

Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto

produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en

las colonias, y la precipitación de las sales biliares.

Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias

incoloras.

Agar selectivo según Mossel y Col. (1970), este agar permite la demostración

y numeración de mohos y levaduras en todo tipo de material de investigación

(alimentos, material clínico, etc.).El agar-oxitetraciclina-glucosa-extracto de

levadura ha sido recomendado como medio de rutina para la investigación de

mantequilla.En la investigación de muestras de heces procedentes de

pacientes tratados con Tetraciclina, las Enterobacteriáceas sólo son inhibidas

de manera insuficiente. En tales casos, es preferible el empleo de Gentamicina

en vez de la Oxitetraciclina.



VIII. CONCLUSIÓN:

Se comprobó la ubicuidad de los microorganismos, como por ejemplo: en las

Terrazas que están cerca de la Planta Piloto o el Kiosco que está en la UNS,

hay presencia de hongos, ya que al realizar el Análisis de Aire, se obtuvo

crecimiento en el agar OGA. También se determinó la presencia de bacterias

aerobias viables mediante al Análisis de Aire realizado en el Laboratorio, esto

debido a que como siempre se trabaja con cultivos de microorganismos estos

se van al aire lo cual se puede evitar teniendo una correcta ventilación del

ambiente ya mencionado.

El Análisis de Superficies indica presencia de bacterias, esto comprueba que

tan importante es el saneamiento en todos los ambientes habitables por las

personas.

En el Análisis de Manipuladoresse comprueba que todo las personas

presentan bacterias como es el caso de nuestra compañera solo que en

pequeñas cantidades, lo cual demuestra que la asepsia es indispensable para

conservar las salud.

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

MIDIGAN/ PARKERA/ MARTINKO, Broock – Biología de los Microorganismos,

Editorial Mc Graw Hill,10ma Edición, Impreso en España 1998. Capítulo 20,

pág.: 689-691,692.

http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20MAC%20CONKEY.pdf

http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm

http://pdfcast.org/pdf/4-microorganismos-en-el-ambiente

Education

cultivo de microorganismos del ambiente