医学免疫学实验

第 2 次 凝集反应与沉淀反应

1. 试管凝集（操作）2. 双向扩散（操作）、对流免疫电泳（示

教）3. 抽血（每组一人，下次实验用）

肥达反应• 原理• 方法

试管号 1 2 3 4 5 6 7

生理盐水 (ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

1:10 病人血清 (ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 -

菌液 (H) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

最终稀释度 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 对照

摇匀， 37C ， 18 ～ 24h

0.5弃去

•结果（下周观察）

注意注意：1 血清倍比稀释时，吹吸 3 次，从管底吸，沿管壁吹。2 血清稀释后，菌液要从低浓度加起

• 肥达反应结果（观察结果注意：勿摇；先看对照管）

- 不凝集+ 小部分凝集，管底小量凝集，上层液体较混浊++ 部分凝集，管底部分凝集，上层液体微混浊 +++ 大部分凝集，凝块非全部下沉于管底而是稍有铺开，上层

液体澄清++++ 完全凝集，管底有边缘不整齐的膜状凝集块，上层液体澄

清透明。

沉淀反应 Precipitation Tests

• Single immunodiffusion• Double immunodiffusion• Immunoelectrophoresis

Single immunodiffusion

Double immunodiffusion

双向免疫扩散法检测血清中 AFP

1. 制备琼脂板（ 5ml ），琼脂凝固后打孔。2. 加样 中间孔加抗中间孔加抗 AFPAFP 抗体抗体

11 、、 44 孔加孔加 AFPAFP 阳性对照阳性对照22 、、 33 、、 55 、、 66 孔加待检血清孔加待检血清

3. 置于湿盒， 37C 24h

抗 AFP 抗体

1

2

3

45

6

•结果下周观察结果下周观察

学号

对流免疫电泳检测血清中 AFP

• 1 、 3 孔加抗 AFP 抗体• 2 孔， AFP 阳性对照血清• 4 孔，待检血清

pH 8.6 巴比妥缓冲液

1 2

3 4

+ -

第 2 次 凝集反应与沉淀反应

1. 试管凝集（操作）2. 双向扩散（操作）、对流免疫电泳（示

教）3. 抽血（每组一人，下次实验用）

Macroscopic agglutination of latex( 乳胶颗粒 ) coated with human IgG serum from a patient with rheumatoid arthritis.

Normal serum Patient’s serum

类风湿因子的检测

RPR 是心脂质（而不是密螺旋体的）梅毒抗体试验，在疾病初期呈阳性。将病人血清与炭联心脂质抗原试剂混合，阳性血清显示凝集抗原颗粒。(4 分钟后观察颗粒凝集）

梅毒快速血清反应素 RPR试验

–检测抗原：尿液 HCG的胶乳凝集妊娠试验