科室管理诊疗规范文件 - yeec...文件编号：JRY-QMP-4-05 版序：A/O 金华市人民医院（检验医学中心）科室管理诊疗规范文件生效日期：2004年5月30日

文件编号：JRY-QMP-4-05

版序：A/O

金华市人民医院

（检验医学中心）

科室管理诊疗规范文件

生效日期：2004 年 5 月 30 日

责任部门：检验科页码：第 1 页共 275 页

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一、科室设置 1、科室各实验室设置及负责人 2、科室人员结构 3、检验中心平面图 4、检验中心工作流程图

二、检验中心工作职责（一）检验中心各级人员工作职责

1、检验中心主任、副主任工作职责 2、主任检验师工作职责 3、主管检验师工作职责 4、检验师工作职责 5、检验士工作职责

（二）检验中心各实验室工作职责 1、临检室人员岗位职责 2、生化室人员岗位职责 3、免疫室人员岗位职责 4、细菌室人员岗位职责 5、骨髓细胞室人员岗位职责 6、急诊检验人员岗位职责

三、检验中心各项规章制度 1、生物安全管理制度 2、检验质量管理制度 3、血型安全鉴定制度 4、差错事故登记制度 5、安全制度 6、急诊检验制度 7、技术管理制度 8、工作职责制度 9、试剂管理制度

10、天平称量制度 11、实习生管理制度 12、仪器管理制度 13、标本管理制度 14、档案管理制度


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15、为民服务公约 16、细菌培养室无菌制度 17、同位素实验室管理制度 18、会议学习制度 19、请示报告制度 20、保密守则 21、职工考勤制度 22、人事考核制度 23、治安保卫制度 24、消防安全制度 25、业务学习管理制度 26、物资报废制度 27、赔偿制度 28、奖罚制度 29、质量信息反馈制度 30、计算机使用管理制度 31、血常规复查制度 32、卫生制度

四、检验中心标准操作规程（一）检验中心各类仪器标准操作规程 1、BECKMAN CX9 生化操作规程 2、日立 7600 生化仪操作规程 3、RA-1000 生化仪操作规程 4、644 电解质仪操作规程 5、SP-4430 干式生化仪操作规程 6、拜耳 248 血气分析操作规程 7、ACCESS 化学发光操作规程 8、AXSYM 化学发光仪操作规程 9、Array 360 型全自动特定蛋白分析仪操作规程 10、BIO-RAD-Model 550 酶标仪操作规程 11、FJ 放射免疫γ计数仪操作规程 12、ACL200 自动血凝仪操作规程 13、CoAg-A-MTX 全自动血凝仪操作规程 14、HMX 全自动血细胞分析仪操作规程


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15、CD—1700 全自动血细胞分析操作规程 16、Coulter EPICS XL 流式细胞仪操作规程 17、MONITOR JI 红细胞沉降仪操作规程 18、NycoCard Reader II 型多功能全定量金标检测仪操作规程 19、UF-100 全自动尿液分析仪操作规程 20、盈东尿十一项化学分析仪操作规程 21、ATB 细菌鉴定仪操作规程 22、二氧化碳孵箱操作规程 23、BacTAlert120 全自动血培养操作规程 24、伟力彩色精子动态分析仪操作规程 25、DiaMed-ID Micro TyPing System 达亚美微量定型系统操作规程 26、1575 型微孔板清洗器操作规程（二）检验中心检测项目标准操作规程

A、临检室 A1、血常规检验标准操作规程 A2、嗜酸性粒细胞直接计数标准操作规程 A3、红细胞沉降率测定标准操作规程 A4、血型鉴定标准操作规程 A5、尿常规标准操作规程 A6、一小时尿沉渣计数标准操作规程 A7、尿乳糜定性检查标准操作规程 A8、大便常规标准操作规程 A9、虫卵及包囊浓缩检查标准操作规程 A10、隐血试验标准操作规程 A11、脑脊液检验标准操作规程 A12、浆膜腔积液检查标准操作规程 A13、精液检查标准操作规程 A14、前列腺液检查标准操作规程 A15、阴道分泌物检查标准操作规程 A16、胃液检查标准操作规程

B、生化室 B1、血氨测定标准操作规程 B2、17-KS 测定标准操作规程 B3、17-OH 测定标准操作规程


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B4、VMA 标准操作规程 B5、Insulin Autoantibadies(IAA) 胰岛素自身抗体标准操作规程 B6、Islet Cell Autoantibodies (ICA) 胰岛细胞自身抗体标准操作规程 B7、脯氨酸肽酶测定(Prolidase Test Kit) 标准操作规程 B8、I 型糖尿病检测（诊断酶联试剂盒）标准操作规程 B9、血清Ⅳ胶原蛋白（PANASSAY Ⅳ． C）标准操作规程 B10、血清蛋白电泳标准操作规程 B11、N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG) 标准操作规程 B12、腺苷脱氨酶(ADA) 标准操作规程 B13、尿肌酸测定标准操作规程 B14、肌钙蛋白(TNT)测定标准操作规程 B15，肿瘤相关物质测定标准操作规程

C、免疫室、发光、放免室 C1、HAVAbIgM 标准操作规程 C2、PreS1 标准操作规程 C3、HBSAg 标准操作规程 C4、HBSAb 标准操作规程 C5、HBEAg 标准操作规程 C6、HBcAb 标准操作规程 C7、HBcAbIgM 标准操作规程 C8、HCVIgG 标准操作规程 C9、HCVIgM 标准操作规程 C10、HDVAg 标准操作规程 C11、HDVIgG 标准操作规程 C12、HDVIgM 标准操作规程 C13、HEVAbIgG 标准操作规程 C14、HEVAbIgM 标准操作规程 C15、HGVAb 标准操作规程 C16、TTV-IgG 标准操作规程 C17、寒冷凝集反应标准操作规程 C18、ENA 多肽抗体谱标准操作规程 C19、ANA 标准操作规程 C20、ds-DNA 标准操作规程 C21、幽门螺杆菌抗体标准操作规程


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C22、嗜异性凝集试验标准操作规程 C23、肥达氏反应标准操作规程 C24、胰岛素测定标准操作规程标准操作规程 C25、C 肽测定标准操作规程标准操作规程 C26、胰高血糖素测定标准操作规程标准操作规程 C27、α1-微球蛋白测定标准操作规程 C28、β2-微球蛋白测定标准操作规程 C29、THP-蛋白测定标准操作规程 C30、抗 TG，TM 抗体测定标准操作规程 C31、抗 INS-抗体测定标准操作规 C32、人 III 型前胶原放射免疫测定标准操作规程 C33、逶明质酸放免测定标准操作规程 C34、Ⅳ型胶原放免测定标准操作规程 C35、内皮素放免测定标准操作规程 C36、肺肿瘤标记 CY21-1 放免测定标准操作规程 C37、T3 T4 TSH FT3 FT4 测定标准操作程序（SOP） C38、AFP、CEA、Fer、BR、OV、GI、PSA、 fPSA，Ca-125，Ca-

199，Ca-153 测定标准操作程序（SOP） C39、HCG、PRL、FSH、LH、E2、P(孕酮)、T(睾酮)测定标准操作

程序（SOP） C40、铁蛋白、叶酸、VitB12 测定标准操作程序（SOP） C41、CKMB、cTnI、MYO 测定标准操作程序（SOP） C42、IgE 测定标准操作程序（SOP） C43、地高辛、茶碱、皮质醇、卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠，

丙戊酸，安定，环胞霉素标准操作程序 C44、DPD 测定标准操作程序（SOP） C45、过敏原测定标准操作程序

D、血液、骨髓室、FCM D1、D-二聚体标准操作规程 D2、3P 试验标准操作规程 D3、骨髓细胞学检查标准操作规程 D4、过氧化物酶(POX)染色标准操作规程 D5、苏丹黑 B(SBB)染色标准操作规程


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D6、中性粒细胞碱性磷酸积分(NAP)染色改良 GOmorI 氏钙钴法标

准操作规程 D7、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法标准操作规程 D8、糖原(PAS)染色标准操作规程 D9、酯酶染色---中性非特异性脂酶(α-NAE)染色标准操作规程 D10、铁染色标准操作规程 D11、酸性磷酸酶(ACP)染色标准操作规程 D12、红细胞渗透脆性试验标准操作规程 D13、自体溶血试验标准操作规程 D14、血清酸化溶血试验(Ham 试验) 标准操作规程 D15、热溶血试验(定性) 标准操作规程 D16、蔗糖溶血试验(糖水试验) 标准操作规程 D17、变性珠蛋白小体检查(Heinz 小体染色) 标准操作规程 D18、血浆游离血红蛋白测定标准操作规程 D19、淋巴细胞亚群测定标准操作规程 D20、HLA B27 / HLA B7 测定标准操作规程 D21、活化细胞亚群测定标准操作规程 D22、活化血小板测定标准操作规程 D23、APO 2.7 测定标准操作规程 D24、CD25/CD3 测定标准操作规程 D25、MDR(P—gP)多药耐药基因）测定标准操作规程 D26、TdT(MRD 白血病残留病灶)测定标准操作规程 D27、血小板糖蛋白测定标准操作规程 D28、CD23(Ige 低亲和力受体)测定标准操作规程 D29、CD95 / Fas 测定标准操作规程 D30、FCM 试剂配制标准操作规程 D31、Bcl-2 测定标准操作规程 D32、ANNEXIN V 测定标准操作规程 D33、P53 测定标准操作规程 D34、λ链测定标准操作规程 D35、CD55 测定标准操作规程 D36、血小板抗体测定（PAIgG，PAIgM，PAIgA）标准操作规程 D37、DNA 测定标准操作规程 D38、干细胞 CD34 测定标准操作规程


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D39、CD34+ 细胞绝对计数标准操作规程 D40、纤溶酶原激活剂抑制物（PAI）活性测定(发色底物法) 标准操

作规程 D41、组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）活性测定（发色底物法）标

准操作规程 D42、血管性假血友病因子(vWF)含量测定（ELISA）标准操作规程

E、细菌室 E1、革兰氏阴性鉴定卡及药敏卡（GNI 及 GNS 卡的操作步骤）标准

操作规程

E2、革兰氏阳性鉴定卡及药敏卡（GPI 及 GPS 卡的操作步骤）标准

操作规程

E3、酵母菌鉴定卡(YBC 卡) 标准操作规程 F、血库

第一章临床输血技术规范第二章输血申请第三章受血者血样采集与送检第四章交叉配血第五章血液入库、核对、贮存第六章发血第七章输血

附件一成分输血指南附件二自身输血指南附件三手术及创伤输血指南附件四内科输血指南附件五术中控制性低血压技术指南附件六输血治疗同意书附件七临床输血申请单附件八输血记录单附件九输血不良反应回报单


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一、科室设置 1、科室各实验室设置及负责人

检验中心主任：

副主任：

质控组长：

秘书：

临检组

生化组

免疫组

细菌组

临检细胞组：

急诊组：

组长：

组长：

组长：


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2、科室人员结构姓名性别出生

年月学历毕业院校参加工

作时间

现任职称手机


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3、科室平面图


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4、检验中心工作流程图

各实验室接收各类标本并核对

定期检

验标本

特殊结果或疑难结

果，报各实验室组长

调整各类仪

器运行状态

检验分析

贴条码编号，并

处理标本按要求处理

标本、存放

当天检

验标本

记录仪器有关参

数室内质控结果

签发报告

室内质量控制

实验室技术主管核

准质控及分析结果


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住院病人就诊检验流程

送回各病房并签收

各实验室检验后签发报告单

检验中心各实验室

具体实验室进行检验

嘱病人按要

求留取标本按有关要求抽

取血液样本

护士工作站打印条码粘贴

穿刺标本按

要求处理

各类穿

刺液等

医生在电脑网络中申请检验项目

血液大小便

签收


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门诊病人就诊检验流程

大小便

到医生处诊疗

取回报告取回报告

体液实验室或相关

部门

各实验室检

验后并签发

到相应科室取标本病人留取标本病人凭就诊卡到门诊抽

血中心刷卡打印条码，

按有关要求抽血，嘱病人取报告时间

病人持就诊卡到收费处、记帐或交费

医生填写检验申请单输入电脑网络

体液血液标本

病人就诊卡

各实验室检验后并

签发


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二、检验中心工作职责（一）检验中心各级人员工作职责

1、检验中心主任、副主任工作职责 (1) 在院长、院党委领导下，负责本科的业务、教学、科研及行政管理工作 (2) 负责组织本科业务技术建设规划、年度工作计划和诊断质量监测控制方案

的制定、实施、检查和总结。 (3) 负责解决本科复杂、疑难的检验、诊断及仪器设备的使用等技术问题。参

加临床会诊、抢救和疑难病例的诊断。审签重要的诊断报告。 (4) 经常检查仪器、设备的使用、以及保管和维修的情况，指定人员负责登

记、统计、资料积累及保管工作。 (5) 负责本科的业务训练、人才培养和技术考核工作。安排进修、实习人员的

培训，并担任教学工作。 (6) 学习、运用国内外先进技术，组织开展新业务、新技术和科研工作。总结

经验，撰写学术论文。 (7) 督促检查本科人员履行各自的职责，认真执行规章制度及技术操作常规；

经常进行医疗安全教育，严防事故、差错。 (8) 负责本科医德医风建设。掌握所属人员的思想、业务能力和工作表现，提

出考核、晋升、奖惩和培养使用的意见。副主任协助科主任工作，在科主任领导下，按分工履行主任职责的相应

部分。 2、主任检验师工作职责

(1) 在科主任的领导下，负责本专业的业务、教学、科研和仪器设备的管

理工作。 (2) 负责本科主要仪器、设备的购置论证、验收、安装和调试，定期检查

和指导仪器、设备的使用和维修保养。解决本科复杂、疑难的技术问

题，并参加相应的诊断工作。 (3) 负责业务技术的训练和考核，担任教学工作，培养主管技师解决复杂

技术问题的能力。 (4) 掌握本专业国内外信息，指导下级技术人员开展科研和引用新业务、

新技术的工作，总结经验，撰写学术论文。 (5) 参加临床疑难病的会诊及讨论，负责疑难检验项目的检查与室内质控

及室间质评工作。


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3、主管检验师工作职责 (1) 在科主任领导和正(副)主任技师指导下进行工作。 (2) 熟悉各种仪器的原理、性能和使用方法，协同科主任制定技术操作规程

和质量控制措施。负责仪器的调试、鉴定、操作和维修保养，解决较

复杂、疑难的技术问题，参加相应的诊断工作。 (3) 担任教学工作，指导和培养技师解决较疑难技术问题的能力，担任进

修、实习人员的培训，并负责其技术考核。 (4) 了解国内外本专业信息，应用先进技术，开展科研和引用新业务、新技

术。总结经验，撰写学术论文。 (5) 参加科室值班。 (6) 负责疑难项目的检验及报告的审签，参加临床病例的讨论。

4、检验师工作职责 (1) 在科主任领导和上级技师的指导下进行工作。 (2) 参加本专业仪器、设备的调试、鉴定、操作、建档和维修保养。负责

仪器零配件或器材的请领、保管和建帐，并做好各种专业资料的积

累、保管，以及登记和统计工作。 (3) 根据科室情况,参加相应的检验工作，指导和培养技士及进修人员，并

负责其技术考核。 (4) 学习、应用国内外先进技术,参加科研和引用新业务、新技术。总结经

验，撰写学术论文。 (5) 参加本科值班。 (6) 负责菌株、毒种、剧毒药品和检验器材的管理，担任各种检验项目的

技术操作和特殊试剂的配制与鉴定。 5、检验士工作职责

(1) 在科主任领导和上级技师的指导下进行工作。 (2) 协同技师做好仪器、设备的安装、调试、操作、维修、保养、建档、建

帐和使用登记。 (3) 协同技师做好物品、药品、器材的请领和保管，以及各种登记、统计工

作。 (4) 钻研业务技术，引用新业务、新技术，指导进修、实习人员的工作。 (5) 参加本科值班。 (6) 负责收集、采取检验标本和进行一般检验工作，洗刷检验器材，做好消

毒、灭菌工作。


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（二）检验中心各实验室工作职责 1、临检室人员岗位职责（1）、体液岗位职责

1）每天早上 7:30 到岗负责把各种检验仪器启动待用，然后处理病房尿液

样本。

2）待准备工作完毕，按室各项操作规程对每台尿液分析仪进行工作前的

质控工作。如通过则进入日常样本的检验，如失控，则重做并检查

失控原因，向室主任汇报作好记录工作。未经允许任何人不得擅自改

动仪器的各种内参数，及时做好各种试剂的更换工作。

3）体液岗位负责尿液、大便、白带、胸腹水、脑脊液、精液、关节液等

各类体液的常规检验。严格按卫生部操作规程进行，如遇无法解决的

实际问题，应逐级向上反映解决，不得擅作主张，否则责任自负。沉

渣分析复检率按省临检中心 2000（6）文件。

4）按三乙医院标准做好窗口文明服务工作，具备良好的医德医风，杜绝

和病人争吵。

5）每天做好各类仪器质控及工作状态的记录，各种特殊样本的交接班，

处理及急诊检验结果均有书面记录备查，所有急诊项目均优先检验并

及时发出报告。 6）工作结束后，做好每日卫生及次日工作准备，保持实验室整洁、美

观。（2）、血常规岗位职责

1）按时到岗上班，启动各类血球分析仪，并做好工作前的准备工作，质

控工作，且做好书面记录。

2）如质控正常即按室规定进行样本检验，做好各样本的核对工作，尤其

是血型鉴定，严格按室规定进行，杜绝差错发生。记录工作应清淅，

详细。

3）血常规镜检按省临检中心 2000（6）文件，复检有明确标示，并做好登

记。

4）每天做好各类血球分析仪的质控及工作状态登记，特殊样本的交接保

存及处理。急诊项目优先检验及时报告。

5）严格按三乙医院标准搞好窗口服务工作，具备良好的医德医风，杜绝

和病人争吵。


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6）做好室内及仪器的卫生工作及次日工作准备，试剂更换，保持实验室

安静、整洁、美观。（3）、抽血岗位职责

1）无菌操作时应戴帽子，口罩，一次性手套。对病人操作前后勤洗手

2）严格执行消毒隔离措施，静脉抽血做到一人一针一筒一巾一带一消毒，

所用止血带及纸垫每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜绝交叉污染。医

用垃圾按要求分类处理.。针头置锐器盒内。针筒置黄色垃圾袋内。 3）严格按三乙医院标准搞好窗口服务工作，具备良好的医德医风，杜绝和

病人争吵。

2.生化室人员岗位职责（1）岗位一（服务台）

1) 负责全天的标本接收，分检。对于外单位送检的标本（如平安保险）在

特定的本子上作书面记录。应认真核对化验单和试管标签上的内容是否

一致，对于不符合要求的样本（如联号，姓名不一致，抽血不符合要求

等）应立即电话通知病房或抽血处，以便及时妥善处理，并作书面记

录。

2) 对于溶血或血清量太少等的标本，应立即电告病房或抽血处，建议重抽

并作书面记录。

3) 对于急诊标本，应马上送至急诊检验室，以保证急诊 30-60 分钟内报告.

4）下午四点以后送报告单回房，并签收。

5）负责邮寄各类报告单，并作书面记录。

(2)岗位二

1) 负责生化标本的编号，分离血清，输入，输入时应认真仔细，切忌只求

速度而忽视质量，对姓名，性别，年龄，住院号，病房，床号等应逐项

认真输入查对，确保病人资料的准确。所有化验单输入完毕后，应重新

核对一遍。

2) 必须认真核对医生所要求的检验组合和化验单上所贴的条码组合是否一

致，如果有误，应立即向医生反映，及时更正。

(3)岗位三


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主要负责 BECKMAN CX9 的每日保养及常规操作，鉴发大小生化，肝功能，肾

功能，电解质，血脂，心肌酶，糖耐量，血糖以及其他生化项目等审

核、签发报告。

1) 严格按照仪器操作规程操作，不可善自改变原设置。

2) 负责 BECKMAN CX9 的每日常规保养、定标、质控及样本检测及报告鉴发。

3) 如遇失控，仪器故障等情况，应立即向室主管同志反映，以便及时排除并

做好书面记录

4) 对于溶血,脂血标本,发报告时应在审核处说明.

5) 对于某些特别异常的结果应及时和临床联系,并向室组长汇报,必要时向科

主任记报并逐级作书面记录.

6) 每日工作结束后必须在维修保养记录本和仪器运行记录本上书面记录仪器

运行状况.如遇仪器重大故障,当天不能出报告时,应及时告诉主任,逐级汇

报医务部、院办、主管院长，以便通知临床;门诊病人应向门诊服务台出

具安民告示,耐心做好解释工作，并及时告诉设备科，做好检修工作。

7) 应特别注意电解质的报告。对于下列项目超过或低于以下要求时，要及时

电话通知有关科室，以便临床能及时处理。并做好记录。

血钾： ≤3.0mmol/l,或>5.5mmol/L

血钠： ≤130mmol/L,或>150mmol/L

血氯： ≤90mmol/L,或>115mmol/L

空腹血糖：<3.8mmol/L 或>11.1mmol/L

8) 做好每日室内质控工作。并在月底总结本月质控情况。对于更换质控品批

号，试剂或校准品批号等和室内质控有限关的事项应记录在册。对于失控

项目应认真填写失控报告。按期完成卫生部、省临检中心的室间质评。对

于不理想的项目，应注意总结，并保存资料且作好书面总结记录。

岗位四（机动） 1）一，三，五上午帮免疫室主要从事岗位（一）工作，下午帮生化室。 2）二，四协助岗位(二)(三)共同做好生化室的所有日常工作

3、免疫室人员岗位职责岗位一

1) 负责全天的标本接收，分检。①其它科室或部门的特殊标本，应马上口头

转告或者转送，并作书面记录。②对于外单位送检的标本，在特定的本子

上作书面记录。③应认真核对化验单或试管标签上的内容是否一致，对于


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不符合要求的样本，应立即电话通知病房或抽血处，以便及时妥善处理，

并作书面记录。 2) 离心分离血清：对于溶血或血清量太少等的标本，应立即电告病房或抽血

处，建议重抽并作书面记录。 3) 根据标本试管上的条码，对样品进行分类，并作好标本的前期处理，对当

天不能及时检验的标本应按规定留取血清，冷藏式冷冻、保存。 4) 负责免疫室杂项检查，如肥达氏反应（LPS-PHA）、外斐氏反应

（DX2OXDOX19）、优生优育，人乳头瘤病毒抗体，EB 病毒抗体，支原

体，衣原体，出血热抗体（EHFV）、智力筛查、过敏原，肿瘤相关物

质，蛋白电泳，自身抗体等项目的测定。 5) 协助（二）（三）岗位做好免疫室的所有日常工作

岗位二 1) 主要负责每天乙肝三系，输血前血清学检查的测定和报告。①标本的查对

和编号。②正规的试验操作过程。③结果的报告和审核。④可疑结果的复

查。 2) 协助岗位：进行样品的分检：标本的离心等，共同做好前期样本处理。 3) 做好标本测试项目的查对制度，对每只试管上的不同标签，做好标本的留

取工作，以防漏检。 4) 必须认真核对医生所要求的检验组合和试管上所贴条码组合是否一致，如

果有误，应立即向样本处理的同志反映，及时更正。 5）负责乙肝三系的室内，室间质控。

岗位三 1）主要负责 Access.AXSYM，特定蛋白等仪器的每日保养及常规操作、签发

甲状腺全套，肿瘤全套，性激素全套，药物浓度，特定蛋白以及其他免

疫项目的报告。 2)严格按照仪器操作规程操作，不可擅自乱改设置。 3）负责甲状腺，肿瘤，特定蛋白的室内，室间质控。

4、细菌室人员岗位职责

岗位一 1) 上班后先搞好室内卫生、核查各个培养箱、冰箱的工作温度是否在设定的范

围内，并做好记录。


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2) 从冰箱内取出当天所需的各种平板：5%绵羊血哥轮比亚平皿、沙保罗培养

皿、伊红美兰平皿、嗜血杆菌培养皿、淋病奈瑟菌培养皿、SS 平皿等。

同时检查各种培养基及试剂的库存量，做好需配制培养基或购买试剂的交

班工作。

3) 接收样本：核对各样本号与申请单联号是否一致，如不一致马上与病房联

系以便作出相应的处理，如退单或重送样本等，并做好联系情况的记录。

核查各送检样本是否符合要求。

① 痰液样本：先看外观、再直接涂片镜检，低倍镜下见白细胞>25 个，

>10 上皮细胞<25 个/每个视野，为合格痰液。

② 无菌体液样本：检查各种无菌体液样本的盛放器皿是否符合要求。

③ 容易干燥的样本：对一些容易干燥的样本如大便、咽拭子、脓液拭

子、泌尿生殖道拭子等是否已经干燥。

④ 对做厌氧菌培养的样本，其送检环境是否满足等等。

对不符合要求的样本必需与临床联系，以便作出相应处理，方法如联号不

符的样本,做好记录。对符合的样本进行原始单的登记。

4) 样本编号：对符合的样本作出编号，门诊标本编号为 A-n，病房标本编号为

B-n，以便查证。在各种培养基上及申请单上编号的同时均需明确标明接

种日期。各种涂片样本编号：抗酸染色编 T1-n；G-双球菌涂片写上病人姓

名、性别、年龄。

5) 样本接种：①痰液、咽拭子、脑脊液分别接种，血平皿、嗜血杆菌专用平

皿、伊红美兰平皿，脑脊液在接种平皿后将多余部分倒入增菌瓶增菌；②

尿液接种，血平皿 10ml，伊红美蓝平皿 10 ml；③各种无菌体液、脓液、

泌尿生殖道分泌物接种，血平皿，FM 平皿，伊红美蓝平皿；④大便致病

菌、三线，接种 SS 平板，伊红美蓝平皿，沙保氏平皿，血平皿；⑤分泌

物的淋球菌培养接种，淋球菌专用平板，JXX 平皿；⑥支原体培养+药敏，

按说明书接种支原体专用培养基；⑦厌氧菌培养，接种于已还原的血平

板，立即放于厌氧袋中，同时接种普通血平板；⑧真菌培养，各种标本均

接种沙保罗平板；⑨细菌 L型菌培养，接种于 L型细菌增菌肉汤。⑩对以

上接种样本的当前编号应记录。此外对脓液、脑脊液等在接种的同时应对

其沉渣进行革兰染色，如有细菌立刻通知临床，并做好记录。

6) 样本培养：①将接种过的嗜血杆菌平板、淋球菌平板置于 5%-10%CO2 孵箱

中，支原体培养基、L型细菌培养基均置于 35.5℃培养箱（SP-250A


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型）；②移种过的血平板、沙保罗平板、SS 平板、伊红美兰平板以及血液

增菌培养瓶均置于 35.5℃的培养箱（TABAI，EAN-140 型）。

7) 涂片染色：①抗酸染色严格按照操作规程，厚片法涂片痰液样本，胸腹

水、尿液、脑脊液等约 10ml 于试管中低速 1000 转/分离心 2分钟后取上

清于另一管中，5000 转/分高速离心 10 分钟，取沉淀涂厚片，自然干燥后

固定，按说明书染色后镜检。②G-双球菌涂片，应用滚动式涂片法从玻片

一端涂向另一端，反复几次，火焰固定后进行革兰染色。③脑脊液隐球菌

涂片，应快速离心后倒去上清液，沉淀涂片、固定；梅毒螺旋体涂片同 G-

双球菌涂片，两种涂片均用苯胺兰推片染色，暗视野检测。

8) 对需购买的试剂、平板、培养基、染色液以及需配置的培养基应及时交

班。申报室组长、及下午配制人员。

9) 对有新到岗的实习或进修人员时，应认真交代本岗位的一切事宜并且认真

作好带教工作。

10)协助岗位 2做好有关工作，岗位 2休息时由岗位 1承担一切工作。

(2) 岗位二负责菌株的纯化、鉴定、上机、药敏及其纸片的质控等。

1) 上班后首先检查 ATB-Moriemx 自动分析仪工作是否正常，并做好记录，

查看昨日上机结果并打印。 2) 查对昨天移种平板申请单及原始登记本，确定标本移种是否正确。观察血

液增菌培养瓶，如发现有细菌生长，马上涂片革兰染色，将细菌的染色特

性及形态报告给临床，并做好记录，同时继续下步工作。 3) 将阳性的血液增菌瓶连申请单交岗位 1 号进行移种。 4) 观察平板，挑取可疑菌落涂片革兰染色，如为革兰阳性菌或阴性杆菌，将

菌落纯化于普通血平板；如为真菌，将菌落纯化于沙博罗平板；如革兰阴

性双球菌，将菌落纯化于巧克力平板，并置于 CO2 气袋中；对嗜血杆菌

纯化于专用巧克力平板，并置于 CO2 气袋中。 5) 将前一天分纯的细菌严格按照 ATB 分析仪上机前各种试剂条的使用说明配

制菌悬液、抽样、上机操作。在从冰箱取出各种试剂条时应详细登记取条

的种类、数量、日期。 6) 对一些不适合用仪器检测药敏的细菌，改用标准的 K-B 法进行检测。碰到

异常的耐药模式应及时上报组长，如碰到耐万古霉素的葡萄球菌、粪肠球

菌，耐泰能的大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属等。并加做特殊的药敏

纸片，并改用纸片法加以比较。


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7) 对一些特殊细菌，如嗜血杆菌、棒状杆菌、李斯特菌属等用相应的 API 鉴定条进行鉴定，用相应的 ATB 药敏条进行耐药性检测（包括酵母菌药

敏），操作严格参照说明书。 8) 做好菌种的保存，对一些难得的菌株、标准菌株等要定期移种，一般二周

一次，并做好移种记录。 9) 定期做好本室所用药敏纸片的质控，二周一次，做好记录。

10)负责肠道门诊的处理、报告单的打印、审核、登记等。 11) 处理好肠道门诊工作，对前 24 小时接收或移种的样本按照肠道门诊细菌处

理的章程进行处理。核对报告单的有关信息，包括联号、编号、结果记录；对可

疑菌落进行霍乱多价血清的凝集、上报等；登记报告结果并签发报告。 12) 核对已打印的报告与原始报告的符合情况，对不符合的报告重新打印。 13) 每月做出受检各种样本的量、各种样本的阳性检出率、各种细菌对临床常

用药的耐药性、各类细菌检出的构成百分比的统计，并打印成文交科主任统一保

存备查。 14) 定期组织室内有关人员对上一周的工作情况进行讨论。定期对某一专题进

行讨论并记录。岗位一休息时由岗位二承担一切工作。

5、骨髓细胞室人员岗位职责 1）接受标本：填写收费单,若门诊病人先清病人交费。将不合要求(不填写姓

名、稀释片子太少)者退回去。在涂片上填补病人姓名，BM（或 B）采取

日期 2）标本染色： Wright 染色，染色固寂静半分钟加 Giemas 缓冲液，吹吸。

Fe 染色,所有贫血者做,取含骨髓小粒以涂片。 AL 组化,POX、SB、NSE、NaF、尿水解，方法见操作。特殊染色：NAP，先 95%的乙醇固定后冰箱

保存。PAS、ACP 见操作。 3)标本观察：先看涂片有无骨髓小粒、脂肪滴、有核细胞量,染色好坏,有无特异

常细胞。计数巨核细胞,细胞多者用 1 片,分类 25 只.分类计数 200 只骨髓

细胞,并注意其形态变化. 4）填写报告：在申请报告单写初稿,初学者在自已原始记录本上写初稿书写骨

髓报告单,至少审阅一次.。登记。填写档案袋。用乙醚轻轻擦洗涂片,装袋保

存 5）负责 ACL-200 血凝仪的每日常规保养、定标、质控及样本检测。要求 PT，

APTT 在抽血后 2 小时内完成检测。严格控制影响因素。不合格标本要退回 6）负责 PT .APTT .FIB .INR 的室内，室间质控工作。


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7）参加骨髓的室间质评工作。 8）7：30－9：00 门诊抽血帮班。 6. 急诊检验人员岗位职责

1. 急诊检验处于医疗的第一线，是抢救急危重患者的重要环节。必须强调优

质服务，及时准确地发出报告。 2、检验科值班人员，接到急诊检验通知或标本，应立即检查标本是否符合要

求，然后立即进行检验，对大出血等危及生命的急诊检验要优先从速。

3．各项检验结果应用电话向临床医生立即报告，并在化验单上记下电话

报告时间，报告单可随其它病房化验单一同送到病房。登记检验结果，以

备查询。报告时间：三大常规 30 分钟，生化 30 至 60 分钟。

4、急诊检验项目：

常规：血常规、大便常规，隐血，小便常规，各类穿刺液常规，涂片检

查、02 培养。

生化：钾、钠、氯、血气分析、血尿淀粉酶、尿素氮、肌酐、糖、肌钙蛋

白、心肌酶谱、胆碱酯酶。PT，APTT。

★其它项目根据临床病情需要，临床医师可向检验科值班人员联系。

5、急诊检验 24 小时运行，交接班时间如下：上午 7：30－11：30，倒连

11：30－6：00，夜班：6：00－次日 7：30。检验工作人员必须坚守岗

位，如因工作需要短暂离开岗位时，应用明显标志指明去向，交班时要填

好交班记录，对仪器运行情况和工作情况交代清楚。三、检验中心各项规章制度（一）生物安全制度

1、医务人员

1）每 1—２年做体检一次，并接受乙肝疫苗接种。

2）每 1—2 年检查乙肝病毒抗原抗体水平，发现乙型肝炎者应进行隔离治

疗。

3）检验人员进入实验室应穿好工作服，不允许在实验室进食和吸烟。

4）检验人员在工作前后和被污染后，应用肥皂和流水清洗，必要时由消

毒液浸泡双手，每季度抽查检验人员的手，并做细菌培养一次。

2、环境消毒隔离

1）实验室应分为清洁区和操作区，清洁区要注意保护不受污染。操作有

气溶胶可能的标本应配置生物安全柜及其它防护设置，如紫外线灯，排气


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扇等操作区的工作台及地面每日用消毒液擦拭一次，有污染时随时消毒，

每周大扫除一次。 2）采血室每日操作前用清水擦拭操作台一次，采血结束用消毒液擦拭操

作台、桌子和地面一次，紫外线每日照射消毒一次，每月空气细菌培

养一次，紫外线强度定期测定。并做记录。

3、各种检验标本的收集，送检必须用相应指定的容器留取，不得外溢污染。

4、静脉及末稍采血，应严格执行消毒隔离措施，静脉抽血做到一人一针一筒

一巾一带一消毒，所用止血带及纸垫每日消毒，末稍采血一人一片一管，

杜绝交叉污染。

5、一次性医用器具包括采血针，注射器、尿杯、血红蛋白微量吸血吸管，应

严格做好领发登记，注射器先浸泡消毒后由供应室一对一调换，统一处

理，其余一次性器具浸泡消毒后装入污物袋送焚烧炉焚烧。

6、检验人员在进行静脉抽血时应严格遵守无菌操作技术，操作前必须洗手必

须戴好帽子与口罩，操作台和手被污染时应用肥皂和流水认真洗手，必要

时用消毒液浸泡双手，酒精、碘酒瓶每周更换消毒两次。

7、凡是肝炎病人和透析病人的血液标本及疑有黄疸的血标本，都视为肝炎的

污染标本，应贴上红色危险标记，放在规定区域内，引起警惕和防止扩大

污染面。

8、溢出试管外的血液，应立即用碘酒棉签擦拭干净，注意防止玻璃碎片刺伤

手，并注意试管有无破裂。

9、当针头和碎玻璃刺伤手时,用流水冲洗,挤出血水,应立即用碘酒消毒局部。

10、实验室操作时应戴上手套。吸取标本，离心振荡等应严格按操作规程，防

止自身和实验室受污染。

11、已检查标本与容器分别浸泡于施康 1 号消毒液(2000mg/L)中两小时后，标

本倾弃，一次性容器送焚烧，重复使用的经清洗消毒和灭菌后再使用，均

要有记录。有毒化学试剂和放射性试剂使用后要经无害化处理，防止污染

环境。 12、菌种、毒种按《传染病防治法》进行管理。 13、三级医院必须设置清洁区，污染区，操作有气溶胶可能的标本应配置生物

安全柜及其它防护设置，如紫外线灯，排气扇等。 14、非科室工作人员不准进入实验室，外来人员参观需经科主任同意方可进入

（二）质量管理制度


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1、各专业实验室根据省临检中心的有关规定，开展实验室内的质量控制，并

制定有关措施。对室內质控应每日有记录，对失控情况有纠正方法，有预

防性措施，对于目前尚无完整的室内质控体系的实验室，应积极创造条

件，建立室内质量控制体系。

2、各专业实验室必须参加部、省的各次室间质控活动，对每次质控评价应有

记录。

3、计量仪器（包括分析天平，天平、分光光度计等）应定期校正，每年一

次。

4、大型分析仪器必须专人负责，有使用维修记录。

5、商品化的试剂盒的申购由各专业室的组长负责申报，每月一次报科主任审

批，不得使用过期，无批准文号的劣质试剂，进货统一由科室管理，自配

试剂须严格校正后方可使用。

6、各专业实验室必须建立完整的操作程序，并应严格按程序执行。

7、当日发出的全部检验报告单须经当日科室总值班人员严格审核后方可发

出。

8、科室在完成严格的室内、室间质量控制体系的同时，应逐步建立全面质量

控制体系，对标本的采集，运送，保存等纳入严格的管理之中。每日送检

的标本应签收。

9、急诊检验应严格按照急诊制度执行。（三）血型安全鉴定制度

1、认真核对病人样本，确保无误后进行鉴定。

2、加强血型试剂管理，室组长负责试剂质量把关，操作人员负责平时工作中的质量问题，鉴定完成必须放回冰箱。

3、鉴定后应把原始资料登记在本上备查，并详细记录病人姓名、科别、是否

送检、何型、检验者及检验日期，字迹必须清渐可查。

4、出报告前，必须核对原始报告单并进行电脑原始资料回顾。确认无误后签

发报告。

5、如遇技术上鉴定问题。应逐级向上反映，不得随意把结果报告给临床。

6、凡作血型鉴定的血样一律放置 7 天后处理。

7、发现未按科室规定进行血型鉴定而造成鉴定错误，责任由当事人负责，按

科室规定扣发奖金。（四）差错事故登记报告制度

1、科室应在月底上报差错事故登记报告到医教科。


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2、一般差错和医疗纠纷应积极妥善处理，并严格教育当事人和全科室同志吸

取教训，引以为戒，在三天内报告医教科。

3、严重差错和医疗事故必须在发生的当日上报医教科，并及时做好处理工

作，对当事人应填写书面材料、汇报事实经过，表明本人的态度及整改措

施，并在科室会议上讨论，做好讨论记录。重大事故应立即讨论，总结经

验教训，提出整改及防范措施，给当事人批评教育或必要的处理，给投诉

人以答复。

4、所有的医疗纠纷，差错、事故均应认真登记，讨论，做到不借故包庇、隐

瞒、弄虚作假，采取大事化小、小事化了的做法。

5、差错事故的定性，处罚措施应及时通报当事人和全科同志并做好记录。（五）安全制度

1、菌种、毒种、剧毒品及贵重仪器物品指定专人保管、有防盗措施，建立帐

册，记录进出数量，定期检查制度。剧毒药品专人保管，由科室主任，主

管试剂的同志负责，放保险柜，领用时须有主管同志在场，作好领用登

记。

2、易燃物品专柜存放，普通试剂按常规分类存放，并由科室主任和主管试剂

同志负责，注意用电安全，特别是电炉子、大烤箱、火焰光度计，由各科

使用同志负责安全，严防火灾。 3、对工作中可能发生的触电、失火、玻璃割伤、针头刺伤、烧伤、不慎中

毒、传染性标本的污染，各实验室应有应急处理的方法，有关人员均应熟

悉。

4、用电设备、电源线路、CO2 气体、给排水系统的安全性符合使用要求，不

能带电检修仪器。

5、使用强酸碱腐蚀品时，应在适当的环境下正确操作，防止腐蚀、灼伤、中

毒、火灾和爆炸等事件发生。

6、注意安全，随手随时关门，下班时要做好水，电，门的安全保卫工作，防

火防盗防水。

7、科室安全保卫负责：范波（六）急诊检验制度

1 急诊检验处于医疗的第一线，是抢救急危重患者的重要环节。必须强调优

质服务，及时准确地发出报告。 2、根据三乙综合性医院的要求承担急诊检验任务，配备必要的资深检验人员

和急诊检验设备，提高检验的工作效率。


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3、各科临床医生根据病情实际需要，填写急诊检验输入电脑，打好条码，可

用电话通知检验科值班人员，血、尿、脑脊液由护理人员或临床医生送到

检验科。

4、检验科值班人员，接到急诊检验通知或标本，应立即检查标本是否符合要

求，然后立即进行检验，对大出血等危及生命的急诊检验要优先从速。

5．各项检验结果应用电话向临床医生立即报告，并在化验单上记下电话报告

时间，报告单可随其它病房化验单一同送到病房。登记检验结果，以备查

询。常规 30 分钟，生化 30 至 60 分钟。

6、急诊检验项目：

常规：血常规、大便常规，隐血，小便常规，各类穿刺液常规，涂片检

查、02 培养。

生化：钾、钠、氯、血气分析、血尿淀粉酶、尿素氮、肌酐、糖、肌钙蛋

白、心肌酶谱、胆碱酯酶。PT，APTT。

★其它项目根据病情需要，临床医师可向检验科值班人员联系。

7、急诊检验 24 小时运行，检验工作人员必须坚守岗位，如因工作需要短

暂离开岗位时，应用明显标志指明去向，交班时要填好交班记录，对仪器

运行情况和工作情况交代清楚。（七） .技术管理制度

3、根据具体情况，确立业务，建立目标，制定长远发展规划和具体实施的年

度计划。

4、建立以责任制为中心的各项规章制度，明确各类人员职责，严格执行各项

技术操作规程，要积极预防和减少差错事故。

5、配合临床开展科学研究工作，为诊疗工作服务。

6、要切实做好新技术的开展，以及业务技术的保密工作。

7、根据现代医学科技的发展和实际工作需要，有计划的购置仪器设备，切实

加强管理。

8、大型精密仪器必须确定专人负责，建立管理档案，严格执行使用条例，定

期校正，维修、保养，实行专管其用，充分发挥工作效能。（八）工作职责制度

1、热爱党，热爱社会主义，坚持四项基本原则，全心全意为人民服务。

2、努力学习政治，刻苦钻研业务，发扬救死扶伤，实行革命人道主义，对病

人 vk 亲人，态度和蔼，有问必答。


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3、热爱本职工作，服从分配，遵守劳动纪律，做到不迟到、不早退，不擅自

离开工作岗位，不私自干私活。

4、严格执行规章制度，及时做好各项检验结果记录，尽职尽责，自觉抵制不

良之风。

5、识大体，顾大局，关心集体，团结友爱，不背后议论，搬弄是非。

6、讲究文明礼貌、积极参加爱国卫生运动，美化环境，保持医院科室整洁，

安静、大方。九）试剂管理制度

1、各专业实验室应根据各自的工作需要，按月向科主任申报所购试剂，并应

做到及时盘存清点，入库做到心中有数。

2、所有试剂的申请，进货一律由科室统一管理，严格按市卫生局招标要求执

行，做到三证齐全。无三无产品。

3、各专业实验室应对试剂库存定期检查，不使用过期变质的试剂。

4、自配试剂须以严格校正后方可使用。

5、试剂的保存应严格按照要求，以保证有效期内能有效地使用，杜绝浪费现

象。

6、试剂外借一律须经科主任同意方可执行。

7、剧毒试剂必须由科主任和负责科室保卫的同志负责保存，放保险箱内，使

用时应有两人在场，并做好登记。 8、易燃，易爆试剂应分开存放远离火源和电源。 9、科室试剂管理员：章勇。

10、供应商所送的试剂必须先经药库清点才能接受，检验科人员清点后必须在

货单上签字，有出入者必须向科主任或试剂管理员、组长报告，再将货单

交给试剂管理员，以便月底结帐。

（十）天平称量制度 1、非本室人员，一律不得私自入本室。

2、取试剂应先取已开封瓶内的，等开封的主试剂用完后，再另开新瓶。

3、试剂称取完毕后，应将试剂按序号放回原处。

4、试剂借出制度，普通试剂由保管人员视库存情况决定借否，借贵重试剂须

经科室主任同意，借出的试剂应立即登记或写借条。

5、分析天平、扭力天平使用。

（1）必须严格按操作规程进行。


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（2）保持天平箱内清洁、干燥，称取试剂过程中尽量避免试剂散落在天

平箱内，称取完毕，清理干净，注意天平复原，登记使用情况。 6、保管人员定期申报试剂购买计划及检查天平性能。

（十一）实习生管理制度 1、科室按实习大纲安排实习时间表，如遇特殊情况科室统一安排。

2、实习生必须服从实习单位和科室的直接管理，遵守实习单位的规章制度，

参加实习单位的政治、业务学习和有关活动、会议。

3、实习生必须加强医德医风修养，文明行医，礼貌待人，主动热情为病人服

务。

4、实习生应在指导老师指导下进行实习和工作，一切实验结果均须指导老师

签名后方能发出报告。不得擅自签名发出报告，指导老师应严格把关逐步

培养学生独立工作能力。

5、严格请假制度，学生一般情况下不得请事假，节假日按国家法定给与准

假，请假一律写报告，一天内经指导老师同意，科主任批准，报告交俞北

伟老师登记，三天内经医教科批准，三天以上经学校批准。

6、实习生必须准时上班，不迟到早退，要有严格的实习作风，不得离岗，为

了培养学生的应急处理能力，实习生必须每天晚上轮流跟班（6.00-9.00）

7、实习生必须严格保护实验仪器和公物，科室贵重仪器必须在指导老师具体

指导下进行操作。（十二）仪器管理制度

1、非本室人员未经允许不得入内，外来参观必须经院办或科领导同意方能参

观。

2、本室工作人员必须熟悉仪器性能方能操作，严格遵守操作规程。

3、仪器使用前必须检查是否完好，一旦发现问题，及时汇报责任人和科室领

导，不能私自乱动乱修。

4、注意保持仪器卫生整洁，严禁在室内抽烟，吃零食，非仪器操作人应尽量

少入。

5、注意仪器安全，防火防盗防水，随手关门。

6、责任人定期检查及纠正各种仪器，每天了解仪器运转情况及试剂使用情

况，负责仪器的整洁，安全，检查电源，水笼头。

（十三）标本管理制度一，标本采集


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1、按每个项目要求，告诉病人、病房护士或本室采血人员佳采血时间、采血

前空腹或饮食注意、用药情况、活动情况、体位等。

2、明确抗凝剂种类、抗凝剂与血的比例、抽血时注意事项。

3、体液、分泌物、细菌培养标本按要求留足量、及时送检。

二、标本运送

1、运送过程中，原则上带盖（不能用棉花等吸水物品），以防倒翻和溢出或雨

淋。凡含传染源的标本必须带盖，外套尼龙袋，以防溢出而污染环境。

2、不能剧烈振荡，以防标本溶血和有形成分破坏。

3、必须及时送检。

三、标本接收

1、必须认真核对标本上病人姓名、病区、床号、联号与申请单符合。

2、必须观察标本的量、标本类型、是否抗凝或有小凝块、细菌培养标本是否符

合无菌要求。是否有明显溶血或脂浊。

3、不符要求的标本，必须及时填写退回理由单，及时反馈临床。

四、标本检测

1、在检测每一过程中，都应复核标本接收过程中的每一步骤。

2、在标本足够的情况下，不能浪费、随意丢弃或损坏标本。

五、标本储存

1、当天不能完成的标本，必须分离血清，按要求储存在 2℃-8℃或-20℃。

2、当天检测完成的标本，血常规储存在 2℃-8℃3 天以上，生化免疫储在 2℃-

8℃7 天以上，脑脊液、胸腹水等重要标本储存在 2℃-8℃7 天以上。

3、特殊标本按要求保存。


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六、标本处理

检验标本先用含 2-3g/L 有效氯消毒灵浸泡半小时，再煮沸清洗试管，烘

干备用。用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾。送专门存放医

用垃圾处统一处理。并做好登记。 .

七．外单位标本

外单位送检的样本,一律由服务台同志登记后,再转交各实验室检测。实验

室保留原始申请单。

八、多张检验单标本

凡有两张以上的检验申请单( 包括其他实验室或外送兄弟医院)原则上

要分装各管, 随检验申请单一起分别放置各样本盒 ,对采样困难者要主动跟

踪样本,并作详细记录以免漏检,分清责任。

（十四）检验科档案管理制度 1、档案管理范围：包括科室人员业务技术情况、业务资料（含有检验操作规

程、质控资料、检验结果登记等）、仪器及试剂资料、财产情况、教育及

科研资料、医疗纠纷资料、管理制度等。 2、档案资料应注意完整、规范、保密、不得用圆珠笔书写、不得用热敏打印

低、不得任意抽样或遗失，不得向无关人员泄露。 3、所有档案资料应登记、分类、编号，由俞北伟专人保管。 4、归档资料中的质控资料、检验结果登记及操作规程至少应保存五年。销毁

前必须经科室领导审批。 5、档案资料多时，为便于查阅可建立索引。 6、外来人员须查阅档案资料均应经科主任同意。 7、上述档案亦可存入计算机，并按上述管理办法进行管理。未经允许，不得

任意打开。或用加密措施保护档案的安全。（十五）为民服务公约

1、文明行医，礼貌待人，对病人态度和蔼，认真解释。 2、外地病人免费代寄检验单。即时提供电话查询服务（2308607）。 3、按时发送报告单，急诊检验项目及时迅速。老.弱.幼.孕.重症病人优先。

（十六）细菌培养室无菌制度


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1. 提倡严肃的科学作风，工作时全神贯注，保证实验质量。 2. 进无菌室前先开紫外灯及电子消毒器至少半小时，并开回风机 3. 进无菌室必须先换室内消毒过的鞋。在更衣室中穿无菌衣裤，戴无菌帽

及口罩。 4. 在 1：1000 的新洁尔敏液中浸泡双手 5 分钟，做好严格消毒。 5. 在转角风淋室吹风 3 分钟，才能进入操作室。 6. 所用器材在进无菌室前均先经高压消毒，在更衣室内经紫外线照半小时

后打开第一层消毒包布，才能带入操作室。 7. 有关细菌培养的操作均在生物安全柜中进行，严格按程序操作。 8. 操作完成后，用 1：1000 的新洁尔敏溶液抹台面及地面等处。出门前注

意关闭酒精灯、照明灯，打开紫外灯，再照半小时消毒后，关风机及紫外

灯。 9. CO2 培养箱中的新洁尔敏液每月换一次，浸泡手的新洁尔敏液每周换一

次。 10. 室内严格注意防火。 11.

（十七）同位素检测实验室管理制度 1、检测质量保证制度

1）每项检测项目应根据所选用试剂的说明书，制定本室的标准操作规程

（SOP），经科主任批准后使用，操作时须严格按照 SOP 执行。如需修改

SOP 须经科主任同意后，执行新的修订版本。

2）使用有效期内的试剂药盒。如需改动另外厂家的药盒，须报告科主任，

避免由于经常更换药盒而使检测结果波动甚大。

3）做好 RIA 检测的室内质控，药盒附有的质控品须在每次检测时做上，如

无药盒质控品可采用自制质控品或病人数据质控等方法进行室内质控

（IQC）。对可参加室间质评（EQA）的项目，应积极主动参加。

4）认真做好各项检测的原始记录，并妥善保存。所有报告结果均需存入电

脑。

5）做好移液器，连续加样器的定期校正工作。

6）γ计数器应严格按规程操作，做好使用，保养，维修记录。

2、放射防护保健制度

1)所有碘及其他放射性同位素标记物应放在铅盒或铅罐内。


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2)工作人员在从事 RIA 工作时应先做健康体检。女性工作人员应在妊娠期，

哺乳期停止 RIA 工作。RIA 工作人员应每二月检查血常规一次，每年全面体

检一次，体检资料要完善连续保存。

3)操作时应戴橡皮手套，铅玻璃保护镜，必要时应戴铅围勃，铅裙。

4)同位素实验室内设备器具单独使用，试剂单独存放，不得互用和混放。

5)同位素不慎污染时应及时报告，并作出明显标记，并及时处理。

6)同位素检测后的废弃物应集中存放，并送医院指定地点销毁。

7)工作人员应参加培训后执证上岗，掌握有关安全防护措施及质量保证措

施。

8)同位素工作人员的休假制度（每天工作时间及休假）按国家规定执行（进

修医师除外）

（十八）会议学习制度 1、会议、学习是提高职工思想政治素质和业务技术水平的必要手段，与工作

处于同样重要地位，参加对象不得无故缺席。 2、建立政治教育、行政管理、业务、生产、经营、教学、科研等各类学习或

专业会议制度，会议（学习）要求目的明确，内容简炼，时间保证，讲求

实效。 3、定期召开的会议和学习

1）会议 (1)每周星期－上午，科室早会，传达院周会精神。不定期科务会。

(2) 每季一次质控会议，组长以上人员参加。 (3)每半年（元月、七月）一次质量分析总结会，主管领导及有关人员参

加。 (4)每年（元月）一次全体职工大会（头年的工作总结，本年度工作计

划）。 2）学习

(1)每月 20 日晚上，科室职工业务学习，由科室安排，不少于二小时。 (2)每季政治学习一次，由院部统一安排。 (3)党、团、工会、妇女小组活动由各组织安排，一般占用工作时间。

4、党临时性必要召开的会议或学习由主管领导决定。 5、部门（班组）特殊性会议（学习）由各部门（班组）负责人安排，并向主

管领导报告。（十九）请示报告制度


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1、凡发生重大事件和严重差错要及时上报： 1)影响业务生产正常运转的事件； 2)人员伤亡事故，设备事故，交通事故，质量事故或严重差错； 3) 大批食物中毒，传染病，自然灾害和突发事件； 4)发生火情，失窃和泄密事件；

5)新技术，新工艺，新业务的开展，新产品试制的首次应用； 6)固定资产和技术转让，超出预算的财务支出； 7)职工严重违法乱纪，涉及政治法律的问题； 8)损坏或丢失贵重器材或贵重物品、剧毒试剂时； 2、凡自己职权范围内处理不了的事件要逐级上报。 3、年度（或半年）工作计划，总结及月（年）统计报表要按期上报。（二十）保密守则 1、不该说的机密绝对不说； 2、不该问的机密绝对不问； 3、不该看的机密绝对不看； 4、不该记录的机密绝对不记录； 5、不在非保密本上记录机密； 6、不在私人通信中涉及机密； 7、不在公共场所和家属、子女、亲友面前谈论机密； 8、不在不利于保密的地方存放机密文件资料； 9、不在普通电话、明码电话、普通邮件传达机密事项； 10、不携带机密材料游览、参观、探亲、访友和出入公共场所。（二十一）职工考勤制度 1、科室设考勤员一名，在科主任（负责人）领导下，逐日认真进行考勤制度登

记。 2、月考勤应在次月 5 日前将考勤表汇总，计算出勤率（年出勤率于每年 12 月底

前算出）经科室领导签阅后送交办公室。 3、考勤员应备有缺勤登记簿，详细记载职工迟到、早退、病事假去医院诊断等

内容。 4、职工因工作需要加班，应经科室领导同意并批准，由科室领导签发加班和补

休单，否则不记出勤。


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5、请假人员按《请假制度》执行，除急（重）病、急事可及时委托亲友或本医

院职工代办请假手续外，其余均需本人提前办理请假手续。公休、补休应事先得

到科主任同意，并交出公休补休单。 6、考勤人员必须秉公办事，如经查实有徇私舞弊现象，将扣发考勤员当月奖

金。 7、每年经评定的优秀考勤员，给予一定的物质奖励。（二十二）人事考核制度为了鼓励先进，鞭策后进，择优聘用、培训、晋升，并给予合理的待遇，大

限度地调动职工的积极性，形成平等竞争的机制，每年定期对职工进行全面的考

核评比工作。 1、考核内容：

1)考德。具体内容包括： (1)政治态度：忠于人民、热爱祖国；拥护和贯彻执行党的路线、方针和政策；

能正确处理国家、集体、个人三者间的利益关系。 (2)遵纪守法：自觉遵守国家的各项法律、法规，维护国家和人民的利益，遵守

社会主义公德。 (3)工作作风：实事求是，不弄虚作假；联系群众，关心群众疾苦，谦洁奉公，

不贪污受贿；处理问题公正，坚持原则，敢于同不良倾向作斗争。 2)考绩。具体内容包括： (1)工作质量：对工作认真负责、无差错、无事故、质量符合标准；工作令人放

心，经得起检查。 (2)工作效率：工作速度快，效率高，数量多，能完成或超额完成规定指标和工

作任务。 (3)工作成绩：工作出色，成绩突出，成果多，论文多；服务质量高。 3)考勤。具体内容包括： (1)事业心和勤奋精神：有事业心，热爱医院，热爱本职工作；平时能抓紧时间

学习和钻研业务；工作勤奋；有上进心。 (2)服务态度：全心全意积极主动为病人服务，态度和蔼；不同病人发生争吵。 (3)劳动纪律：自觉遵守医院的规章制度；不违反劳动纪律；上班时间不做私

活，不看与工作无关的书籍报刊；不迟到、早退；不乱放车辆（自行车）。 (4)团结协作：服从组织分配；新生上级；团结同志；能顾全大局，主动帮助上

级和同志做好各项工作；敢于挑重担。 (5)出勤率高：能出满勤或病事假不超过全年的工作天数的 3%。


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4)考能。具体内容包括：技术操作水平程度；工作经验是否丰富；能否带教新同

志；管理能力和计划性如何，能否解决工作中的难题；专业理论基础水平、知识

面如何；判断力和处理问题能力；能否主动提出合理化建议和改进措施等等。 5)分类考核标准：见附表一、二、三。

一)考核对象：检验科全体职工（科主任由院部组织考评）。二)考核方式：自我评价；组织考核（上级考核下级，逐级考核）。三）考核要求：

(1)本着“严格与公正”的原则“实事求是”的态度，不得感情用事、敷衍了

事，流于形式。 (2)考核结果要与本人见面并签署意见。

（二十三）治安保卫制度 1、全体职工自觉遵守国家的政策法令、市民公约、治安规定和本单位的规章

制度，严禁一切扰乱本单位工作秩序的行为。 2、严格执行门卫制度和值班制度。 3、认真遵守保密守则。 4、按职责保管好公共财产和个人的钱物。 5、严禁无理取闹、造谣生事、诽谤中伤他人，吵架骂人，流氓斗殴。 6、严禁用各种方式进行赌博活动。 7、严禁损坏公物及一切设施。 8、严禁盗窃公共财物和私人钱物。 9、机房和重要工作区，无关人员不得入内。

10、科室内严禁传播淫秽色情违禁的出版物和音像制品。 11、凡遇到正在发生的刑事犯罪案件，职工应见义勇为，挺身而出，特别是共

产党员。 12、职工家属及外来工作、学习进修人员均应遵守本制度。（二十四）消防安全制度 1、根据“谁主管、谁负责”的原则，实行科室负责制。 2、主管领导和保卫科对全体职工经常进行消防安全教育，提高思想认识，掌

握消防知识和消防器材的使用。


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3、严格执行《安全防火管理制度》各种火种与易燃易爆物品，必须保持一定

的安全距离。 4、禁火区域内严禁吸烟。 5、电器的安装与拆除，必须由电工进行，严禁乱接电源，乱后电线。 6、各种机电设备、高温电器设备、耐高压容器和设施，使用时，必须有专人

负责，随时检查，消除隐患，严防事故发生。 7、科室公区场所，通道不得乱堆放易燃爆物品和杂物。 8、各防火区域设置的消防器材和设备，应定期进行检查，维修和更换，随时

处于完好状态，并不得随便挪动。 9、任何人发现火、水灾等隐患者，必须及时向科领导报告。科主任及时向院

领导报告，及时做好善事处理工作。（二十五）业务学习管理制度

为了更新知识，适应业务、科学技术发展地需求，有计划地提高职工的业

务素质和管理水平，特制订本制度。 1、职工业务学习计划由科室主任统一制订并组织实施，由初级向高级循渐

进。 2、学习内容以全面质量管理、工艺规程、岗位操作和新工艺、新技术为主，

紧密结合本单位（部门、岗位）工作实际。 3、学习对象：全科工作人员及进修实习同志全部参加（值班人员除外）。 4、学习方式：采取自学和定期举办各类讲座、学习班（包括外单位主办的）

相结合的形式，分全科、部门（以组为单位）二种规模，注意理论联系实

际。 5、学习时间：每月二次，科室组织，每人签到，按规定必须参加学习的每位

职工全年参加学习时间不少于 48 小时（指参加讲座和学习班时间，不包括

自学时间）。由医教科统一印发业务学习登记卡，由部门（组）负责人登

记签章，并作为每年业务考核内容之一。 6、实行技术岗位考核，每年由分管院长会同办公室及有关科室实施，凡合格

者发给岗位合格证，不合格者给予补考，对技术性岗位，必须取得考核合

格证才能上岗。（二十六）物资报废制度 1、凡是仪器、设备、药品、器材、原辅材料等因故报废，须由使用科室填写

“物品报损报废单”。经办公室会同检定各有关部门共同鉴定，提出意见

报院领导批准后方可报废注销。


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2、一次性使用材料和消耗品、按日常使用损耗率处理，超过定额应说明原

因。 3、待报废或已报废物品，应注意修旧利废或改作他用，达到物尽其用。 4、报废仪器、设备及其它物品，由设备科、总务科统一处理。 5、不合格的报损报废，应先入库登记后再填写报损报废单，按规定程序办

理。说明报废原因。（二十七）赔偿制度 1、因工作失误，不负责任，或违反操作规程，致使国家财产受损失者，根据

其情节轻重，损失大小，给予批评教育和处分，直至赔偿。 2、按劳动合同为本单位服务规定年限未满的人员，必须按规定赔偿单位的损

失。 3、财务错帐、短款，按财务规定赔偿。 4、大批财物积压浪费或霉烂变质、丢失，经查明原因由有关科室提出处理意

见，报主管领导审查处理。 5、凡属使用太久，以及在使用中自然损坏的器材，经说明原因，可免予赔

偿，但须填写报损单。 6、凡借阅图书资料，污损或丢失者，应按规定赔偿。 7、赔偿细则见奖惩制度和有关规定。（二十八）奖罚制度 1、为了保证检验工作质量的准确性、科学性和服务性，激励全科人员的自觉

遵守院纪院规和岗位职责，特制订本制度。 2、对忠于职守，发现并防止质量事故的集体和个人给予奖励。 3、对在质量监测工作中有发明创造，科研成果，技术革新，提高实验准确

度、灵敏度的集体和个人，按其社会效益和经济效益，报单位主管批准给

予奖励。 4、在质量教育，标准化，计量测试，质量信息，质量责任制，设备与档案管

理等工作中作出成绩者应给予奖励。 5、对在质量监督和质量检验工作中，违反职业道德、弄虚作假，伪造实验数

据和报告者予以严惩不怠。 6、对不遵守院纪院规，违反操作规程和操作细则，粗心大意民造成事故或差

错者，视情节后果和本人态度，报单位行政主管批准后给予行政和经济处

罚。业务学习不到一次扣 50 元，政治学习不到一次扣 50 元，发现在工作

场所吸烟一次扣 50 元。


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7、违章使用精密、贵重设备仪器，工作不负责任或失误造成国家财产损坏，

重要零配件丢失者，视情节责令其检查并作出经济赔偿。 8、违反劳动纪律，未完成工作任务，服务态度差者按本科制订的有关规定处

理。迟到早退或擅自离岗锐岗者，造成不良影响者，每次扣当月奖 50-100元，并院部规定再加处理。

9、隐瞒事故差错或知情不报者，视情节后果予以相应的处理。 10、应逐步建立健全岗位工作质量评估标准，使奖惩工作逐步做到科学化、制

度化和经常化。（二十九）质量信息反馈制度 1、检验科对检验质量信息的反馈，要有专人负责，组长负责制，及时处理。 2、对检验质量及差错的反馈，任何个人不得有报复性质，对自己的不足要有

充分的认识，加强质量意识，避免差错。 3、对任何反馈的差错事故都应有原因分析和处理意见。 4、各室的反馈卡要及时交科室主任保存、处理。 5、检验科工作人员欢迎临床医生对检验质量信息的反馈。（三十）计算机使用管理制度 1、计算机室和科室设置的计算机由经过专业和上岗训练的专人负责管理和使

用，其他人员不得乱动设备或上机操作。 2、使用计算机严格执行操作规程，不得用于游戏。 3、定期做好清洁和维修保养工作，发生故障及时报修，保证计算机正常运

行。 4、注意信息，防止计算机病毒污染。 5、违反管理制度而造成事故损坏电脑者，经查实，按性质和情节严肃处理。（三十四）血常规复查制度 1、符合下列情况之一者作血涂片镜检复查： (1)WBC 总数>10.0×109/L; WBC 总数<4.0×109/L; (2)WBC 直方图显示单峰现象，分 GR 过高，LY 过高和 MO 过高；尤其是

MO 过高（MO>8%）； (3)重度贫血 Hgb<80g/L； (4)已确诊血液病病人的标本； (5)临床医生特别注明要求注意细胞形态的； (6)仪器测定分类不全者。


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2、PLT <100×109/L 或 PLT>300×109/L，应作血小板手工计数； 3、仪器提示有血小板凝块，检测结果 PLT<100×109/L 者，应重新采血复查。 4、对 WBC<4。0×109/L、 Hgb<80g/L、 PLT<100×109/L 作仪器重复测定。（三十一）卫生制度 1、每天早上上班，下午下班前，各包干区的工友应把卫生工作搞好，把该放

的清洁干燥的玻璃器皿放到规定的位置上放好，迎接工作人员准时上班。 2、工作人员每天早上上班，下午下班前要检查一下自己室内的卫生，是否整

洁干净，不整洁要做好，不干净告诉所包干的工友，要搞干净。 3、各室仪器的卫生必须每天搞一次，无灰尘，又整洁。

4、每月底前各室必须搞好卫生，彻底做好整洁工作，迎接医院的大检查。若

查到某室不整洁，不干净而造成扣分的，则扣罚当事室内工作人员奖金每人

50 元。 5、经一年的评比，卫生先进的室在年终进行表扬奖励。

（三十二）检验科内审制度

本科室施金俏.滕贤麟已取得国家认可的实验室内审员资格. 1、检验科质量管理小组

施金俏负责组织，滕贤麟负责记录。成员：施金俏，滕贤麟，周益

琴，范波，章勇，胡玲，王惠姣，章楠宁。负责督查室内质控检测、记录、

失控处理、月小结及质控图（生化、血凝、乙肝三系、特定蛋白及发光仪、

血球、尿化学、尿沉渣仪、血气），同类仪器比较情况记录。每二月一次，

检查内容可以分次、分项进行，检查结果有记录。

2、仪器试剂管理小组为了保证检验科仪器正常使用，维护保养，故障及时处理；检验试剂

的质量和价格以及出入库情况，保证试剂的及时供应，检验科决定成立仪

器试剂管理小组。

试剂管理小组：章勇负责，滕贤麟负责记录。成员：章勇，施金俏，周益

琴，滕贤麟。检查接收试剂后是否有签字、有效期及试剂保存是

否及时合理。每二月一次，检查有记录


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仪器管理小组：周益琴负责，滕贤麟负责记录。成员；周益琴，范波，章

勇，胡玲，王惠姣，章楠宁，俞北伟，滕贤麟。负责督查仪器使

用情况、维护、维修记录。每二月一次，检查有记录。

3、信息反馈管理小组

每组轮流，每月检查一次，包括病区各室、门诊、输液厅的医务人员

及病人和本科室人员的信息反馈，记录汇总。（★负责安排，记录）

★滕贤麟 ★俞北伟 ★ 周益琴 ★ 王惠姣

张永金胡玲何黎朱根林

翁巍何国丽章勇陈小平

范波章丽琴章楠宁沃关忠

四、检验中心标准操作规程（一）检验中心各类仪器标准操作规程

Beckman CX/CX9 生化仪操作规程 1、基本操作规程（1）开机准备 1)检查蒸馏水是否充足，不够应重新加入． 2)检查 Wash Concentrater(浓缩冲洗液)和 Probe Rinse Solution(探针

冲洗液)的量，并及时补充． 3)打开显示屏检查试剂存量，不够应及时加足。 4)检查液压系统的压力表指针，保持在绿色区内． 5)检查 CX3 部分的红色(C02 碱性缓冲液)和兰色(电机参比液)液体，应

维持，MAX 与 MIN 之间． 6)冲洗电解质部分的管道 4—5次，排去比例泵(Ratio Pump)及管道中的

气泡． 7)按 [F8]→[F7]，检查仪器工作状态，如有异常应没法排除，并向主管

同志汇报和作书面记录．（2）定标 1) 在主菜单胺 [F3]进入定标菜单 2) 凡带有*提示及昨日更换的非原装试剂均需定标． 3) 用 ↑↓选择所需定标的试剂，按[ select]确定．


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4) 各种项目的定标已经设置条码(CX4△设定的定标架子为 58 架，而CX7 △设的架子是 59.60 架)．根据项目所需的定标液的不同装好定标液，放入仪器可

5) 定标完成后，打印机会自动打印定标报告，仪器室工作人员应判断该定标否正常．并对定标内客作书面记录．如果定标弄常，应及时向主管同志反映作书面记录．

（3）质控 1)定标顺利完成后，就可以开始进行室内质控． 2)质控分析已作条码设置，在标有 CX4 △， CX7△记号试管中加入质控

品并放人任何一个样本架上，放人 Auto Loader 即可． 3)如质控结果良好，就可以进入样本分析．如果出现失控的结果，应及

时处理，并向主管同志汇报，直到找到原因并解决后方可进行该项目的样本测定．

4)在样本分析过半时，应再插入一质控品，以监测分析过程中出现的问题．

（4）样本分析 l) 普通样本的检验：

由于仪器采用了先进的 Barcode Mode，血样离心后可直接放入样品架上(条码须面对条码阅读器)放入 Auto Loader，按[Load]键即可．

2) 急诊样本检验：需手工编制程序，操作方法如下： a) 在主菜单，按[F1]键．再按[F1]键进入编程，先输入

Sample ID(样本号)，然后输入 Panel(组合号),也可不输Panel 号而直接在项目表中选择所测项目．再选择 Sample type(样本类型)，如样本经过稀释也可输入Dilutionfactor(稀释因子)，后按 tF4]→ tF8]．

b) 按[prev Screen]，进入样本编程菜单，按[F6]，设定该样本所在的样本架号，再按杯子的位置重复输一次 Sample ID，按[Enter]即可．

(5)病人资料输入：在中文系统中输入病人资料．

(6)数据传递按 [P4]，接着选择[2]，然后选择[1]，打人需要传递的架子号，后选择[3]将结果传到中文电脑，

(7)报告打印样本分析完毕后，就可以发病人报告单．每张报告单必须由仪器室人员审核并签名后方可发出．对于出现特别异常的结果，应及


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时和主管同志及生化室主任反映，在和临床联系后，再发报告，并作书面记录，必要时向料主任汇报．

(8)更换试剂一般情况下，样品分析完成后应进行试剂更换． (l)在主菜单，按[F2]键进入试剂菜单，按 [F5]键，检查试剂状况． (2)手工装载：用→←↑↓健将光标移到所需的试剂，按[ Select]再按[F2]键，选择安装试剂类型，自编程序试剂按[2]，原装试剂按[l]，打入所需试剂的名称等，然后打开冰箱盖，将试剂推入按[Fl]即可． (3)自动装载：先根据需要选择相应数目的空位置，然后按 [Fl]键，开冰箱，将试剂推入，听到鸣叫一声，关闭门即可．上述两种方式可以自由转换．

(9)仪器的简单保养及关机． (l)擦洗仪器表面 (2)用 70％酒精清洁两组探针和搅棒，然后按[homs]键复位． (3)清除当天数据并关闭显示屏． (4)中文电脑必须先进行工作结束，才可关机．

(10)注意事项 (l)断电后，不能马上启动，必须等 5分钟后方可启动． (2)装试剂前，必须先察看该试剂是否需要预处理，是否有气泡，装在哪个孔等， (3)平时运行时，应尽量连续运行，不要间断，不能随意按黄色紧急停机[Stop]健 (4)中文电脑关机前，一定要进行工作结束， (5)运行中出现故障时，应及时向主管同志汇报，以便及时排除故障，并作如书面记录． (6)每天必须在机器运行记录本上书面记录机器运行状况． (7)对于溶血，脂血标本，发报告时应在备注处说明．

2、保养程序 (1) 每日保养

1．检查 WaSh Concent rate 和 probe Rinse Solution 之存量． 2．检查 StatuS monitor 3．检查 Cuvette wipers 4．检查水运及空气压力系统 5．检查 Syringe plunger tips 6．清洁所有探针及搅拌棒之外部．


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7．检查试剂存量及效期 8．检查 Damper 内之液面高度． 9．清洁 CX3 检体探针 10．将 CX3 设定自动冲洗，观察试剂管路，反应杯，搅伴于是否有问题，并排除 Ratio pump 内气泡

(2)每周保养 1．清洁仪器表面 2．清洁 CX4 样本及试剂探针内部 3．清洁所有的 In line filter 4．移动，按摩电动阀内的管路(CX3 部分)

① E Cam pinch Value ② C Cam pinch Valus ③ Solenoid Valus

(3)每两周保养 1．更换试剂及样本注射器内的 tip 2．清洁 BUN 之电机头，反应杯及搅拌子， 3．更换 Glu 电极膜 4．清洁 TP 之反应杯及搅拌子 5．清洁 Cre 之反应杯及搅伴子 6．清洁 CX4． CX7 上所有的空气滤网．

(4)每月保养 1．检查冰箱风扇运转是否正常，是否有结冰现象． 2．清洁试剂读码器． 3．更换 Probe Rinse Solution 之 In—line filter． 4.清洁样本条码阅读器 5．清洁 FlOw cell 及 Electrolyte ln—jection cup 6．清洁 CL 电机 7．更换 Alkaline Buffer 之 peri—pump 管路 8．更换 Alkaline Buffer 9．清洁试剂置放处．

(5) 每两个月保养 1．检查所有的 Diluted Wash Botlles， Probe Rinse Botlle 及

液面感应器是否受污染， 2．更换 Cuvette 清洁之 Wipes 3．更换所有 CX3 上之 Peri—pump 管路 4．更换 Peri-pump 上之 In—line filter 5．检查 C Cam pinch Value Vent line#124


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(6) 每半年保养 1．更换 Wash Concent rate 之过滤器 2．清洗所有的 Diluted Bottles． Probe Rinse Bottle 及波面感

应器 3．更换 K， Ca 电机帽， 4．清洁电解质排液系统 5．更换五个 RatiO—pump 中之 Quad—Ring

(7) 视情况需要之保养 1．清洁 Cuvettes 及反应槽 2．清洁 Sample sectors． 3.清洁 CX7， CX4 仪器 4．更换试剂及样本搅拌棒． 5.更换 C02 电极膜 6.更换 Injection cup 中之 Quad—Ring 7.更换样本和试剂探针 8.清洁 C Cam Vent Line

详细操作方法请参阅保养手册根据样本的数量，对于某些保养可自行确定保养时间，保养后请作书面记录．

日立 7600-020 型自动生化分析仪操作规程

1、开机检查：确认样品针、试剂针无脏污或弯曲，确认各清洁剂是否充足，

样品、试剂吸量器无漏液、注射器内无气泡。 2、找开水源，仪器自动完成指定准备工作后呈待机状态，分析开始前，确认

有无报警发生，流路内有无气泡，发应槽温度及光度计光量的检查（检查值在

19000 以内）。 3、测定结果的删除；（因用与前一日的样品号测定，这次结果与前一日结果

产生记忆混乱。因此需删除前一次结果）。 1）一般样品的删除触摸常规操作“workplace”的测定结果“Data Review”键，测定结果画面打

开，触摸下面“Batch Delete”全部删除键窗口打开，选择样品种类全部，触摸

“OK”键确认以后，再按“yes”键结果全部删除。 2）日内质控样品测定结果删除触摸质控“QC”键，再按 Individual 日内键，日内画面打开，选择所有质控

样品。触摸删除 Delete 键，再按“yes”键确认，结果全部被删除。 4、试剂的准备：


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触摸试剂管理（Reagent）键，状况画面打开，确认和查看各检验项目的有效

数，试剂不足项目进行添加或更换。 5、标准液及质控样品测定： 1）校准项目的确认：触摸 Caibration 键，再按 status 状况键打开，触摸所需

项目及校准方法（1—4）按 save 登记键，再按 start up，登记的项目呈黄色。 2）标准液的设置：按标准“calibuation”再按 calibrator 键标准液画面打

开，标准物和架子号应相对应，将标准液装入（黑色）S 架。 3）样品供给部设置：按标准液用 S 架（黑色）质控样品用 C 架（白色）的

顺序装入样品传送架（也可从急查样品投入口进入）。 4）仪器起动：触摸主菜单开始键，开始窗口打开，触摸选择起始校准的变

更（select start up calibuation）“change”键，选择起始校准（带 √印）再按

OK 登记，触动摸索开始 start 键，测定开始。（结果查看：在 workplace 中的

Datareview 中）。 5）质控样品测定：项目的确认，触摸 QC 键，再按“status”状况键，画面

打开，触摸缺省 QC（DEFAULT QC）键的横向箭头（←）确认质控项目。质

控样品的设定：顺序按“QC”，质控“control”画面打开，按照架子号位置和

质控相对应位号，将质控样品装入 C 架（白色）。 6）一般样品的测定： (1)测定项目的登记：按顺序按键“workplace”、“test selection”、

Routine(一般)，一般画面打开，在样品号处输入样品号，确认。触摸要测定的

项目键（选定后以白色显示）再按 save 键登记。样品上升一位，以此类推，进

行多个样品连续登记。在多个样品登记同时，在进行完第一个样品登记后，触

摸“Repeat”键可进行批量登记，输入后的样品号为结束样品号，按登记

“OK”键。登记项目的修改：将要修改的样本号输入样本号，则登记项目显

示，触摸项目键，修改内容，按“save”键登记。 (2)一般样品的准备：分别按样品号顺序把样品装入架子（灰色），再按样品

号把架子装入样品架，放入样品供给部（样品回收部装上空的托盘）。 (3)测定开始：触样品开始号输入触摸“start”开始键，开始测定。 7、急诊样品的测定：顺序按“workplace”、“testselection”、急查“stat”画面，打开输入样品种类，将架子号及位置号输入选择项目，触摸登记

“start”键。将样品架 E 架（红色），再装入急查样品供给部（操作中时自动

加入测定）按主菜单开始“start”键，窗口打开再按“start”开始键，测定开

始。


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8、结束操作：关机检查，切断电源，关闭水源。 RA-1000 生化仪操作规程

1、打开仪器右下方的电源开关，然后扣上磁盘拴，仪器进入自检，输入时

间、日期、测定组合的选择。 2、经过预热，仪器在 STANBY 状态下按 23FUNCTION 检查暗电流读数，按

24FUNCTION 检查滤光片在空气中的读数，按 21 FUNCTION 将管道中的

气泡排去。 3、装入反应盘，按 30 FUNCTION，对反应盘进行扫描，仪器自动记录通不

过的杯子。 4、按 2 FUNCTION，输入盘号，输入相应的杯号的检测项目。 5、按 “xx”FUNCTION OPERATE ENTER(xx 代表相对应的盘号)，仪器进

行测定。 6、当某一盘测定未完成，而反应盘已满，换反应盘，参照步骤 3 在扫描新反

应盘，按 0 OPERATE ENTER 继续测定。 7、关机，打开磁盘拴，关闭电源。

644 电解质分析仪简要操作规程 1、开机。 2、仪器显示 ANALYZE BLOOD？按 NO 键，直至显示 CAL…，按 YES 定

标。 3、仪器显示 ANALYZE BLOOD？按 YES 键，提起吸样针，放入标本中，按

YES。屏幕显示 SAMPLING，等屏幕显示 RETUNE PROBE，拿开血样，

关闭吸样针。 4、读取结果。

SP-4430 干式生化仪简要操作规程 1、开电源。 2、预热 Warming up10 分钟。 3、显示主菜单：1、Measure 2、Submenu 3、Calibrate。 4、按〈START〉或〈1〉键，显示待机状态。 5、按放吸管头和样本，正确安放所测项目试纸条（复合试纸条放入横向槽，

单项试纸条放入纵槽）。 6、按〈START〉开始测试。 7、测试结束，打印结果并回到准备状态。 8、取出测试完的试纸条和标本，按〈STOP〉回到主屏幕。


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拜耳 248 血气分析仪规范操作

1、标本准备病人样本必须采用肝素抗凝血，采血器应密封，立即送检。操作前标本必须

充分混，排除采血器头上一部分血液后，打开进样品，推入血液，当听到嘟

声后关闭进样品。 2、标本检测仪器在准备状态下，掀开样品针，插入注射器标本，待屏幕显示“收回样

本”关闭进样口，按#键输入各种信息包括操作者编号，病区，标本类型，采

集时间，病人体温，血色素，病人编号，FIO2 等等。（FIO2＝21＋氧流量*4） 3、病人结果报告病人结果包括实际测定的三个值：PH，PCO2，PO2 及一些根据体温，血色

素等的计算参数。按#键可显示。 4、定标定标一般为自动定时定标，如需用，按如下操作：退回到主菜单，按

MENU，再按 CAL，在屏幕下方选择所需定标类型后进行定标。 5、病人结果的重新打印退回到主菜单，依次按 MENU，DATA，PATIENT REPORT，选择将要查找

的病人标本的编号，按 VIEW REPORT，显示病人报告结果。如需修改病人资

料按 ID，移动光标修改后按 RESULTS，再按 PRINT ，取出已做病人的结果报

告。

ACCESS 全自动微粒子化学免疫分析系统仪器操作规程

1、检查仪器上发光剂，反应杯，各种试剂的剩余量及废反应杯回收袋的情

况，如有不足应更换。 2、管路清洗，主屏下—F6—F4—输入 2.2.1 后按 F5。 3、样本测试过程。主屏下 F1—输入或扫描样本架号—手工输入样本架号编

号—手工输入样本号—把光标移至测试项目处。输入项目代码后按“+”（删除

项目可按“－”）输完测试项目后—输入放架子指令 F1—放入架子后按 F1 确

认—提示按回车—按 F11（RAN），—F8（仪器开始工作）。 4、查看测试结果或查看出结果的时间，只需在主屏下按 F2 即可。 5、在中文电脑中输入样品号和病人姓名，年龄，病区，床号及有关资料。


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6、测试完毕，在主屏下 F2—选定已测结果—F5 送至中文电脑，然后打印结

果报告。 7、主屏下 F1—F1（取出样本架）—F1 确认。 8、管路清洗，主屏下 F6—F4—键入 2.20 后按 F5。

AxSYM 化学发光仪操作程序一、开机开电源→开打印机→打开仪器电源→F3（startup）→等待温育一小时→查看库存

（INVENTORY）→倾倒废液、加好消耗品→更改库存→放 1 号液→

MAINTENANCE→PRIME AND FLUSH（冲洗管路）。二、申请病人样品测试 1、单个病人样品测试的申请

→ORDERLIST→F6（PATIENT）→输入样本蓝位置编号、样品编号→选择该样品要测的项目→F6（ADD）→输

入下一个样品申请→…→F1（EXIT）→核对病人项目申请表中项目→查看库存是

否足够（试剂、缓冲液、RV 杯、纤维杯）→RUN 2、病人样品测试的批处理申请

→ORDERLIST→F6（PATIENT）→F2（BATCH）→输入起始样本

蓝位置→输入起始样本编号→输入要测试的样品数→选择要测试的项

目→F6（ADD）→重复申请新的批处理病人样本→F1（EXIT）→核对病人项目

申请表中项目→查看库存是否足够（试剂、缓冲液、RV 杯、纤维杯）→RUN 三、定标申请（更换不同批号试剂时使用）主菜单→ORDERLIST→F4（CAL）→选项目（Index cal 单点、Master cal 两点、

Standard 六点）→ADD（F6）→F1（EXIT）→RUN 注：如为两点定标，还需加入定标值主菜单→STORD RESULTS→CALIRATION REVIEW→F4（NEW LOT）→F4（SCAN CURVE）→扫条码→F6（ADD）四、质控定义（添加新项目时使用）主菜单→CONFIGURATION→CONTROL→选项目→输入质控值水平→F2（ADD CONTROL）注：如为定量项目 →选相应质控水平→F6→输入水平值→F6 五、参数盘安装（添加新项目时使用）

主菜单

主菜单


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主菜单→CONFIGURATION→INSTALLATION→插入软盘→SCAN→选择要安

装的项目→安装六、关机主菜单→MAINTENANCE→PROBE CLEAN→在系统提示下在 LOAD STATION 位置放置 2 个 RV 杯→在 RV 杯的预稀释孔和缓冲液孔各加 1ml 探针清

洗液→OK→返回主菜单→F2（shutdown） Cyclo 样本预处理操作 1、准确吸取 Cyclo 全血（振摇混）150ul 于沉淀管中。 2、加 50ul 溶解剂，注意不要有气泡。 3、加 300ul 沉淀剂，注意不要有气泡，盖紧盖子。 4、振荡器上振摇 10 秒，使其充分混。 5、离心 10000 转 5 分钟。 6、取上清夜置样本管中，上机检测。

[注意事项]

1、抗凝剂常用 EDTA 或肝素。（常用 EDTA 抗凝管制备：每管分别取 0.2mol/L EDTA-2Na 溶液 50ul，烘干

即可。） 2、沉淀剂非常不稳定，用后及时保存，防止蒸发。 3、离心时间不能太短，至少 5 分钟。 4、定标和质控同法操作。

Array 360 型全自动特定蛋白分析仪操作规程 1、 Array360 各检测项目表编号中文名称英文缩写编号中文名称英文缩写 1 免疫球蛋白 G IgG 11 类风湿因子 RF 2 免疫球蛋白 A IgA 12 前白蛋白 PAB 3 免疫球蛋白 M IgM 13 转铁蛋白 TRF 4 补体 C3 C3 14 a1 微球蛋白 A1M 5 补体 C4 C4 15 尿微量白蛋白 MA 6 α1 酸性糖蛋白 AAG 16 尿转铁蛋白 TRU 7 触珠蛋白 HPT 17 轻链 KaPPa 链 KAP 8 铜兰蛋白 CER 18 轻链 Lamma 链 LAM


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9 C—反应蛋白 CRP 19 抗凝血酶Ⅲ AT-Ⅲ 10 抗 O ASO 20 尿免疫球蛋白 G IgU 1、标本准备（1）标本处理：

血标本 2-3ml。离心分离血清或血浆。尿液、脑脊液标本如有混浊，亦因离心吸取上清液。新鲜标本或分离后贮存于-20℃冰箱保存

（2）各检测项目标本及校正液用量：

种类小用量种类小用量种类小用量种类小用量

IgG Cal 1 200ul 血清/CSF

150ul RF Cal 5 900ul 血清 225ul IgA Cal 1 200ul 血清 150ul PAB Cal 3 200ul 血清 150ul IgM Cal 1 200ul 血清 150ul TRF Cal 1 200ul 血清 150ul C3 Cal 1 200ul 血清 150ul A1M upcal 450ul 尿液 250ul C4 Cal 1 200ul 血清 150ul MA upcal 450ul 尿液 250ul

AAG Cal 1 200ul 血清 150ul TRH upcal 300ul 尿液 250ul HPT Cal 1 200ul 血清 150ul KAP Cal 1 200ul 血清/尿液 150/250ul CR Cal 2 200ul 血清 150ul LAM Cal 1 200ul 血清/尿液 150/250ul

CRP Cal 2 300ul 血清 50ul AT-Ⅲ Cal 2 300ul 血浆 180ul ASO Cal 5 200ul 血清 200ul IgU upcal 300ul 尿液 250ul 3、试剂及仪器

1）试剂及试剂保存：试剂包括各检测项目的相应抗血清、定标液、质控液、稀释液、缓冲液。试剂保存于-4℃冰箱。应注意其保质期。存放于试剂室。由 Beekmom 公司产品。

2）仪器：Beckman 公司的 Array360 system。 4、Array360 的方法原理

1）速率散射比浊测定原理：待测抗原与相应抗体结合形成一个免疫沉淀反应。此反应形成的悬浮颗粒（即浊度）导致光路中散射光强度改变和抗原含量呈线性关系。

1）原过量检测（AgX 检测）因抗原和抗体的结合反应存在一个抗原过量或抗体过量的状态。速率散射比浊测定各特定蛋白要求在抗体过量情况下，抗原和一定量的抗体反应，其浊度才和浓度或线性关系。AgX 检测即检查某个反应是处在抗原过量状态下还是抗体过量状态下。即在待测物与抗体反应后再

项目校正液标本项目校正液标本种类


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加入少量的抗原（AgX）。如再度有浊度产生表示处在抗体过量的情况下，此时应该对该待测物进行更高稀释度的检测。

5、各检测项目的定标及定标盘设置（1）开机

1）启动仪器：先后打开显示屏、打印机和主机的电源开关，在屏幕出现提示后扦入启动软盘，按 ENTER 键。

2）光路校正 a. 在主菜单下按 F4 键（system setup）→F2（optics update）→F1（left

scatter）。 b. 等反应杯里的液体排空后，取出流动杯，放入 120 参比安瓿，按

ENTER 键。 c. 读完参比后，换墨棒，按 ENTER 键。 d. 读完后，换回反应杯，按 ENTER 键，这时屏幕上出现的结果应为

GAIN 1、2 和 3 是非曲直 120±3，GAIN 为 OVER。 e. 在主菜单下按 F4→F2→F2（Right Scatter）。以后 b-d.

3）定标 a. 在主菜单按 F2（Cal Status）,用 Setect 键选择所要的项目。 b. 按 F1（Read AB Card），插入抗体卡。 c. 按 F2（Cal Tray Set-up），输入杯号后钦 ENTER 键。 d. 按 F2（Read Cal cards）,插入定标卡。 e. 后按 F1(save cup). 此时显示 F-杯号，对于使用不同定标液的测试项

目，就另定杯位。请重复 C-E 步骤。 f. 当以上全部设定完毕，放好抗血清和标准品，连按二下 start 键，仪器

开始定标。

(2)定标后项目和盘号及相应和位置：盘号（Reagent Wheel）: 1 盘号（Reagent Wheel）：2 抗血清位置检测项目抗血清位置检测项目 1 IgG 1 A1M 2 IgA 2 Agx4 3 IgM 3 / 4 C3 4 / 5 C4 5 IgU 6 / 6 Agx1 7 AAG 7 MA 8 HPT 8 Agx3 9 CER 9 TRU 10 CRP 10 KAP


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11 ASO 11 LAM 12 RF 13 PAB 14 TRF 15 / 16 Agx1 以上为本室定标后目前的状况。 6、Array360 基本操作 (1)测定前的准备：

a. 检查所有试剂：稀释液、缓冲液的量是否足够。查看废液是否要倾倒。

b. 冲洗系统: 在主菜单下按 F4(System setup),后按 F1(Prime),用 Setect 键选择冲洗Mode 1。按 Prev Screen）键以确认。此时，检查管道有无阻塞或渗漏

(2)测定（以 IgG 检查为例）： a. 将抗 IgG 血清，Agx1，质控液，标本放在相应的位置上。 b. 在主菜单下按 F1（Sample Program）键。 C. 输入杯号 d. 用 SELECT 键选择所测项目（这里为 IgG） e. 按 F1（save cup）来确认。 f. 若继续编程，请重复 c-e 键。 g. 完成编程，连击 2 次 start 键，仪器开始检测。

(3)测定后的结果分析及报告： a. 质控：

质控品应与标本一起检测。检测后分析，判断当天的检测结果是否有控，若失控，因检查原因并重新检测。

b. 报告：在确认质控的情况，可将结果输入报告系统，经核对无误后方可发出。

c. 一些异常或值得怀疑结果因与临床联系或重新检测。

BIO-RAD-MODEL 550 酶标仪操作规程一．仪器的安装 1．仪器安放在清洁、稳固的操作台上，实验室注意防潮、防尘。 2．将电源线接在仪器的后面，请清单电源电压是否匹配并接上电源。 3．将仪器后板上的开关合上，仪器的液晶显示屏上出现版本号，然后

仪器自动自检，约 1 分钟，然后仪器预热 10 分钟。二．安装打印纸 1．打开仪器后盖。


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2．将打印纸起始剪成三角形，将热敏纸朝外，放入打印纸槽内。 3．按一下走纸键，打印机自动卷上热敏纸。 4．关紧后盖。三．操作程序 1．打开仪器后盖，检查所用的滤光片波长是否正常，位置是否放妥，

然后关上后盖。 2．打开电源开关，仪器自检 1 分钟，预热 10 分钟。 3．选择滤光片：按 “ MODE ” 一次，显示屏出现

“PRINTREPORT”，按向下键，当显示屏出现“SET ANALYSIS MODE”，按“ENTER”键，显示屏出现“SET ANALYSIS”。按向

下键，在 D/S 中选择双波长“D”或单波长“S”操作，在 1-4 号滤光

片中选择一个滤光片（1 号：405nm 波长，2 号:450nm 波长，3 号：

492nm 波长 ,4 号： 620nm 波长），选择所需的滤光片后，按

“SELECT”键选中后再按“ENTER”键，完成设定。 4．设定打印方式：按向下键，当显示屏出现 “ SET

REPORTTYPES”，按“ERTER”键，显示屏出现各种报告方式：原

始资料报告，光吸收值报告，矩阵报告，设限报告，阈值报告，浓度

报告：选择所需的报告方式显示后，再按“SELECT”键选中，按

“ENTER”键，完成设定。 5．设定空白对照：按向下键，当显示屏出现“SET BLANK”按

“ENTER”键，显示屏出现“[]CLEAR BLANK”空白设定重改，。

[]Co1 竖行，[]ROW 横行，[]Well 孔，按向下键和“SELECT”键选定

[]Well 孔，按“ ENTER ”键，显示屏出现 []A-1 ，按向下键和

“SELECT”键选中相应位置后，再按“ENTER”键，完成设定。 6．读板：完成上述设定后，按“MODE”键，屏幕显示进入“PLATE

READING”Single2 打开仪器前盖，将微孔板，放在置板架上，盖好前

盖。再按“START”键，仪器开始读板，然后就把结果打印出来。四．仪器保养 1．每次使用前后填写仪器使用登记本。 2．保持仪器室的清洁和相对湿度小于 90%及防震。

使用后盖上防尘罩。 BIO-RAD-MODEL 550 酶标仪操作规程


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五．仪器的安装 4．仪器安放在清洁、稳固的操作台上，实验室注意防潮、防尘。 5．将电源线接在仪器的后面，请清单电源电压是否匹配并接上电源。 6．将仪器后板上的开关合上，仪器的液晶显示屏上出现版本号，然后

仪器自动自检，约 1 分钟，然后仪器预热 10 分钟。六．安装打印纸 5．打开仪器后盖。 6．将打印纸起始剪成三角形，将热敏纸朝外，放入打印纸槽内。 7．按一下走纸键，打印机自动卷上热敏纸。 8．关紧后盖。七．操作程序 7．打开仪器后盖，检查所用的滤光片波长是否正常，位置是否放妥，

然后关上后盖。 8．打开电源开关，仪器自检 1 分钟，预热 10 分钟。 9．选择滤光片：按 “ MODE ” 一次，显示屏出现

“PRINTREPORT”，按向下键，当显示屏出现“SET ANALYSIS MODE”，按“ENTER”键，显示屏出现“SET ANALYSIS”。按向

下键，在 D/S 中选择双波长“D”或单波长“S”操作，在 1-4 号滤光

片中选择一个滤光片（1 号：405nm 波长，2 号:450nm 波长，3 号：

492nm 波长 ,4 号： 620nm 波长），选择所需的滤光片后，按

“SELECT”键选中后再按“ENTER”键，完成设定。 10．设定打印方式：按向下键，当显示屏出现 “ SET

REPORTTYPES”，按“ERTER”键，显示屏出现各种报告方式：原

始资料报告，光吸收值报告，矩阵报告，设限报告，阈值报告，浓度

报告：选择所需的报告方式显示后，再按“SELECT”键选中，按

“ENTER”键，完成设定。 11．设定空白对照：按向下键，当显示屏出现“SET BLANK”按

“ENTER”键，显示屏出现“[]CLEAR BLANK”空白设定重改，。

[]Co1 竖行，[]ROW 横行，[]Well 孔，按向下键和“SELECT”键选定

[]Well 孔，按“ ENTER ”键，显示屏出现 []A-1 ，按向下键和

“SELECT”键选中相应位置后，再按“ENTER”键，完成设定。 12．读板：完成上述设定后，按“MODE”键，屏幕显示进入“PLATE


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READING”Single2 打开仪器前盖，将微孔板，放在置板架上，盖好前

盖。再按“START”键，仪器开始读板，然后就把结果打印出来。八．仪器保养 3．每次使用前后填写仪器使用登记本。 4．保持仪器室的清洁和相对湿度小于 90%及防震。

使用后盖上防尘罩。

FJ γ—计数仪仪器操作规程 1、打开电源，打印机开关，及电脑主机开关。出现提示符：＼>再打开计数

器开关，键入字母“XH”后回车。 2、按 F1（程序页）—F5（远行程序）—F2（选择程序）—选定程序后按回

车，再按 Y 键确认—F3（进入测量）输入样品数，按回车，仪器开始工作。 3、工作结束，按 ESC 键，返回主菜单，再按 Y 键退出放免程序。 4、先关闭电脑主机电源，再关计数器及打印机开关，然后关闭总电源。

ACL200 血凝分析仪规范操作

1、打开 UPS 电源开关，再打开 ACL-200 开关，等待几分钟准备好标本，试

剂，反应盘。 2、根据屏幕显示，输入日，月，年及时间（时，分），每输一项数字按

ENTER 键进入。 3、轻按 PROG 键，使屏幕在 PROG 状态，按“↑↓”键移动光标至

PRIMING，再按 ENTER 键，使其自动冲洗。 4、按 PROG 键，至分析屏幕，移动光标选择测定项目，如“PT-FIB”“APT”“TT”等，按 ENTER 屏幕下转，按“↓”键开始分析。（注：根据屏幕提示，将标本，试剂，反应盘全放好，按操作规程进行分析测

试） 5、等待仪器自动打印报告，将结果填入报告单，做好结果查对后方能发出报

告单，（对严重异常的标本应重复一次测定，注明两次结果）。 CoAg-A-MTX 全自动血凝仪操作规程

1、标本准备

熟练取血 1.8ml,加 0.109mol/L 枸椽酸钠抗凝剂 0.2ml,1:9 准确混合。

若标本有微小凝块，溶血，抗凝比例不符，血量过多或过少，均不宜检测，

应重新取样。

采血后尽快分离血浆，3000rpm 15min 离心后取乏血小板血浆备用。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



需成批检测的样本，离心后装入塑料试管并加塞密封，于-20℃以下快速冷

冻。凝血因子检测若不冰冻保存应保证首先检测。

2、试剂

用仪器配套试剂

更换试剂，批号改变，均需重新定标，并用质控品

Verify1,Verify2,Verify3 多次测试，以保证结果准确。

3、操作

2）开机:

依次为主机→工作电脑→显示器→科室联网电脑→打印机. 开机后工作电脑

屏幕上出现 Do you want to work with the used →cuvette rings?选择

“Yes”。

2）换标本盘：

在 Preparation Menu 选择 Replace sample rotor,选择“Replace”.把测试完的检验

试管全部从样品盘中取出。

↓ 放置洗液，清洗。在 Preparation Menu 选择 Prime/Wash/clean,依次选择

Prime,wash,clean,Prime 进行清洗。

3）装试剂：

在 Preparation Menu 中选择 Load reagent,依屏幕显示把试剂放入试剂储存

槽内，按 End.

4）装载质控：

在 Routine Menu 选择 Load Control,依屏幕显示把 Controls

Verify1/Verify2/Verify3 放到 Sample rotor(样品盘)内，选择 Within run,

选择 End.

5）装载标本：在 Routine Menu 菜单选择 Load Sample,输入 Sample ID,选择所测试项目，按

Loaded。在样本资料输入电脑后，选择“OK”，则可利用 check/modify sample来更改。

↓

在显示的 Sample Loading 视窗上用<或>选择需修改的 Position 号码，然后增加

或除去测试项目。

↓


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



当所有样本输入完成后，按 start,屏幕显示 Measurement start 视窗，可以显示

试剂情况，如果试剂足够就按 start,仪器开始测试。

↓

一轮测试完毕，会发出“嘟嘟”声，按下 Done,有提示出现，若测量盘用完，按

Replace cuvette rings 更换，选择“Replace”. ↓

如果 reagent 不够而需加入，选择 Add reagent,添加所需试剂，然后选择

Continue Measurement 开始测试。

6）急诊样本：在测试过程中需测一个急诊标本时，按 Interrupt,出现提示：Do you really want to interrpt run?选择“Yes”.

↓

约 20 秒后屏幕会跳到 Routine program,再选择 Load sample,继续操作。测

量结果，发出报告。

7）关机: 首先在主屏幕上选择 Preparation menu,再击 Prime/wash/cleaning/Prime,依次清

洗。

↓

后选择 Quit CAM—MTX software 后关机，与开机次序相反。

4、测试原理及临床意义

本仪器采用凝固法和产色底物法原理检测,主要项目临床意义如下：

⑴PT：凝血酶原时间

延长: 见于先天性Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症；获得肝脏

疾病、DIC、原发性纤溶症、维生素 K 缺乏症等，是监测口服抗凝治

疗，性见于作为口服抗凝药的可靠指标。

缩短: 见于先天性因子Ⅴ增多症、长期口服避孕药，血栓前状态和血栓性疾病

等。 ⑵FIB：纤维蛋白原

临床上主要用于手术前和血栓的溶栓、抗凝治疗、诊断局部缺血心脏疾

病的危险性，预防血栓形成等。

减少：见于先天性纤维蛋白原异常，DIC 和严重肝脏疾病。

增高：见于糖尿病，心脑血管病，手术后和某些急性传染病等。


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⑶APTT：活化部分凝血活酶时间

用于手术前检查内源性途径凝血因子—Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ；是监测肝素的首选

指标，凝血因子治疗以及检测狼疮抗凝物的主要手段。

⑷TT：凝血酶时间

延长见于肝素或类肝素物质增多，AT-Ⅲ活性增高，血中 FDP 增高，低纤维

蛋白原病和异常纤维蛋白原血症等。

⑸Factor:凝血因子

Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ因子等。可测定单一因子的缺乏和缺乏程

度，用于先天性或获得性因子缺乏疾病的检查。

⑹AT-Ⅲ：抗凝血酶—Ⅲ

活性减低见于先天性与获得性 AT-Ⅲ缺乏，见于肝脏疾病，外科手术后，DIC

及血栓前期和血栓性疾病活性增高见于血友病，口服抗凝剂，应用黄体酮等。

⑺其它抗凝系统检测：Pc、Ps 等

⑻纤溶系统检测：如 PLG、а-2-APL、PAI 等。

5、注意事项

1) 标本必须完全符合要求。

2) 按照操作说明认真操作，仪器在运行时不随便打开安全盖，以免发生故障。

3) 试剂批号改变，必须重新定标（由专门人员进行）

4) 定期维护，具体是每天清洗一次管道，清洁机器内部，消毒一次管道，每周

消毒机器内部清洁移液器末端，消毒样品孔及安全盖把手，每月清洗样品

盘，清洁试剂区。

5) 认真分析所测试结果与临床诊断是否符合，如有疑问及时与临床联系。出现

危险指标即刻通知临床并登记。

HMX 五分类血球仪操作规程 Ⅰ.打开电源

1.将插座插入电源 2.打开主机后主电源 3.如睡眠/测试键处于”O”位置,将其设置到”|” 4.打开 DMS 电源键和显示屏开关 5.打开打印机电源 Ⅱ.开机 1. 检查当前仪器状态


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(1) 是否打开电源 (2) 若主机处于睡眠状态，则转换至准备状态 (3)如果 DMS 屏幕不亮，则按空格键 (4) 若启动结果已通过则直接运行第三步；反之输入操作员编号

-主菜单上按[F5]键。 -输入操作员编号。 -按[Esc]键回到主菜单。

2、启动 (1)主菜单上选择 Diluter Functions/Start Up (2) 按[Enter]键。 3、检查结果

启动完成后浏览屏幕结果，有必要还可浏览系统状态屏，未通过结果

将以红色显示。若本底检测失败，按[F2]后查看系统状态屏，再按[F3]重新本底计数；若其

他检测失败，按[F2]查看系统状态屏并运行 System Test. 选择 Special Functions/ Diagnostics/Operator Options/System Test，按[Enter]键，然后按[F3]键运行后根

据提示进行操作。若上述操作无效,可参照特殊操作和维护手册或联系公司工程师。若启动结果不保存，将自动打印出来。保存启动屏及系统状态屏的打印件以

备文案。 Ⅲ 系统设置 1. 菜单选项设置在主菜单选择 Special Function/Set Up 进入此菜单，Set Up 子菜单包括下列

三个选项： -Control set up 质控设置 -Sample analysis set up 标本分析设置 -System set up 系统设置

2. 质控文件的建立在住菜单选择 Special Function/Set Up/Control set up


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可选择 20 种质控文件的任一个建立不同的质控文件，文件类型有 CBC/DIFF 文件(全血+分类)、Latex 文件(乳胶)、CBC 文件(全血)、RETIC 文件(网织红细

胞)。可选择自动停止功能，当出现质控错误信息时，仪器将自动停止并发出报

警，常见错误有：质控结果超出范围、质控品过期、质控文件已满、文件未找到

（只出现在 CBC/DIFF）、C 驱动盘太满如将自动停止功能关闭，质控出现错误信息时仪器仍继续分析。 1) 建立乳胶质控文件主菜单选择 Special Functions/Set Up/Control set up/Latex file，将光标移到

NOT SETUP 文件，按[ENTER]，手工输入文件名、操作者编号、批号和有效

期，并核对所有信息正确后，按[F10] 存盘退出。 2) 建立 CBC/DIFF 质控文件从主菜单选择 Special Function/Set Up/Control set up/CBC/DIFF file，将光

标移到 NOT SETUP 文件，按[ENTER] 将 5C 质控盘插入计算机软驱，按 F5 加载靶值，按功能键选择所要的质控水

平，输入相应信息，核对所有信息正确后，按 F10 存盘退出如果需要，建立另一种水平的质控文件，将光标移 NOT SETUP 文件，按回

车，重复第 2 到第 6 步所有设置完成后，取出磁盘 3) 建立网织红细胞质控文件从主菜单选择 Special Functions/Set Up/Control set up/Retic file，将光标移到

NOT SETUP 文件，按[ENTER] 从预期结果对照表输入批号、有效期、班次和操作员标号，以及红细胞靶值

和网织红细胞百分比核对所有输入信息正确后，按[F10] 存盘退出 3.标本分析设置从主菜单选择 Special Functions/Set Up/Sample analysis set up (1)XB 范围设置设置靶值和范围，用户可自己定义 (2)确定旗标范围产生的文字报警信息由用户定义的范围决定 (3)旗标的上限和下限旗标上下限根据用户定义的界限值产生


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(4)实验室正常参考范围设置 HmX 血液分析仪有默认的正常参考范围，实验室的自定义参考范围也在此

输入 4.打印选项 (1) 自动打印格式选择标签或图谱打印格式 (2) 标签打印选项选择适当的标签格式，这些选项包括单位（%或 103/uL）、参考范围、参数

标识以及怀疑性旗标和可定义性旗标是否打印 (3) 图谱打印选项选择适当的图谱打印格式，这些选项包括页面设置（宽度/字体），何种散点

图，统计量，怀疑性旗标和可定义旗标，单位，正常范围以及三维分类图 Ⅳ.每日质控一.乳胶质控乳胶质控品是用于监控 VCS 通道对白细胞分类和网织红细胞的检测质量。该

质控品可保存冰箱中或室温下，若为冰箱保存，测试前必须放至室温。乳胶质控包含两种试剂：

A.准备液含有一种表面活性剂，能清除气泡、清洗管路及整个标本通道。 B.质控液包含特定大小的乳胶颗粒，能监控流式通道对体积、传导性及激光散射性的

测定，用于流式通道的校准、调整增益和变异系数(CV%)。由于乳胶颗粒易沉淀到瓶底，使用时应轻微的翻转混，但过度的振荡会影

响测试结果。质控品应避免阳光直射或放于 30 摄氏度以上的环境中，远离窗户

和热源。 3)乳胶质控操作

a.操作状态 *确定启动已通过 *准备液和质控液必须放至室温 b.运行准备液在 DMS 屏 *从主菜单选择 Control/Control Run


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



*若文件未显示按[F2 ]选择所要的文件 *按[F4]充注准备液在稀释器 *手动吸样准备液 -将吸样针完全浸入准备液 -不要使吸样针碰到瓶壁 -按吸样开关 -当听到“哔噗”声或显示屏出现 Diluting 移开小瓶在 DMS 上查看准备液结果 *当分析完成后检查 DIFF 和 RETIC 计数 *如果结果都小于或等于 500，

-按 ESC 键，回到运行窗口

-转到第 3步，运行乳胶质控液

*如果其中一个或都大于或等于 500

-重复运行准备液

*如果仍有问题,重新开启一瓶或请工程师帮忙

c.运行质控液

在 DMS 屏

*如果需要可按 ESC 关闭准备液窗口 *按[F3] 运行质控液

在稀释器

*轻轻的颠倒混质控液 5-8 次 *手动吸样质控液（方法同上）在 DMS 屏查看质控结果 *检查质控结果 *如果结果出控，重复整个运行程序（包括准备液） *如果两次结果都有问题 -根据实验室规定或 -参考操作指南中乳胶出控的处理或请工程师帮忙 *选择 Controls/Graphs,查看 Levey-Jennings 曲线

2. 5C 质控


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1) 几点说明: *用于 CBC 和 DIFF 的质控品 *5C 质控只能使用自动进样方式 *三种不同水平的质控品：Normal，AbnormalⅠ和 AbnormalⅡ

储存

*2-8 摄氏度（35-46 华氏度）保存

*质控品不可颠倒存放

注意事项:

*不要在质控管条形码和瓶盖知之间的空白处填写开瓶日期和其他签字

-将导致不能正确的识别条形码

-如果条形码不被识别，质控将会作为标本储存在标本的数据库

*混前室温放置 10-15 分钟

*按 8*8*8 方式轻轻混两次

-两次混后，检查质控管壁和底部确认完全混

-过度混可导致溶血

*不要使用自动混器或其他混装置

*30 分钟内放回冰箱

注:对条形码标签损坏或无条形码标签的质控品

我们建议参照操作指南第 2节无条形码标签的质控品操作运行质控

5C 质控运行介绍

各质控管可同标本一块随意放置

*在 Sample Analysis 菜单下自动吸样

-标本测试屏将不显示质控结果

-继续显示后一个标本过程

-条形码标签自动将质控结果存入质控文件

*如果使用手动进样方式运行 5C 质控，实验室必须重新制定每个参数的均

值和期望范围，并根据这些值建立质控文件 2) 5C 质控操作 a. 根据包装说明准备质控 *将质控品室温放置 10-15 分钟 *能够质控品按 8×8×8 式混两次 -不要使用混器 -不要在条形码和瓶盖的空白处填写开瓶日期和任何签字


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b.按检测标本的方式运行质控 *将质控品装入标本架 -可同标本混合放置 -确认条形码朝上放置 *将标本架放入装载槽 *在主屏幕选 Sample Analysis/Run Sample d.查看质控结果 *确认质控结果是否储存在质控文件，选 Controls/Review or Report *如果条形码没有正确放置或条形码损坏而没有被识别，则质控结果将被储

存在患者数据库 -如果条形码没有朝上放置，放正位置，重新测试 -如果条形码损坏，参照操作指南启动和质控章节无条形码质控品的操作 e.质控品的稳定性

开瓶稳定性

*开瓶稳定性为 13 天或 13 次测试

*每次测试，操作员必须按照下列顺序

-从冰箱拿出质控品

-室温放置 10-15 分钟

-按 8×8×8 方式轻轻混两次

-吸样

-30 分钟内放回冰箱

*MCV 和/或 RDW 可能表现一定的趋向性，这是质控品本身成分决定的，不能

认为已不稳定或已变质

不稳定的指征

*上清液为轻微的粉红色为正常

*在已知仪器正常的情况下不能获得正常的质控结果或已溶血（上清液为黑

色）表明质控品已变质 3.RETIC-C 质控 *三种水平：LevelⅠ,Ⅱ和 Ⅲ

*在使用 COULTER ReticPrep™试剂制备的样品完成后才可进行网织红细胞

质控分析

*用于监控流式通道分析网织红细胞的质量

*不能用于控制手工方法


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



1)储存

*2-8 摄氏度保存

*已开瓶质控品应垂直存放，不可颠倒

-若颠倒可能需要特殊的混合方式才能完全混

2）按包装说明准备质控品

*从冰箱拿出质控品

*混前室温放置 10-15 分钟

*按 8×8×8 方式轻轻混一次

-混后，检查质控管壁和底部确认完全混

-过度混可导致溶血

*不要使用自动混器或其他混装置

*30 分钟内放回冰箱 3）稳定性

打开稳定性

*开瓶稳定性为 30 天或 30 次测试

*每次测试，操作员必须按照下列顺序

-从冰箱拿出质控品

-室温放置 15 分钟

-按 8×8×8 方式轻轻混一次

-从质控瓶中吸取质控标本

-30 分钟内放回冰箱

注：*粉红到微红色上清液为正常

*适度的溶血可能是过度震荡导致，而不是质控品变质

4）运行 RETIC-C 质控

*使用 Control Run 选项运行质控

*分析前，用 ReticPrep 试剂盒准备稀释溶液

*使用手动进样模式

RETIC 质控分析的专用试剂

试剂

成分作用 CBC DIFF RETIC 开瓶稳定

性

网织红细

胞 A 液新亚甲蓝

染色剂 • 使红细胞内的网状

组织着色

√ 60 天


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网织红细

胞 B 液漂洗剂

（很稀的

硫酸）

• 冲去红细胞的血红

蛋白，保留着色的

RNA 复合物

• 保持细胞膜的完整

性

√ 60 天

a.制备网织红标本 *每分质控品准备两个 12×75mm 试管，分别标记“A”和“B” *向 A 管加入 4 滴试剂 A *再加入 50uL 混质控品 *轻轻混 -室温放置 5-60 分钟 b.DMS 准备 *主菜单选 Controls/Control Run *按[F2] 选择所要的文件 *按[F3] 手动运行质控 c. 按标本方式运行质控 *轻轻混 A 管 *从 A 管取出 2uL 质控液/混合染色液放入 B 管底部 *将 B 管成一定的角度放到 B 试剂下 *向 B 管加入 2ml B 试剂 *不要混合 *等待 30 秒后手动进样分析 d.查看结果 * 如果结果出控 -按照实验室规定或 -参照操作指南网织红出控的处理方案 *如果需要比较以前的质控结果 -在 Controls/Review or Report 屏分析储存的结果 -在 Controls/Graphs,分析 Levey-Jennings 曲线的变化和走势


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质控样品表推荐的质控品作用 CB

C DIFF

RETIC 开瓶稳定性

LATRON Primer （乳胶准备液）

质控液测试前路径的

清洁和冲洗 √ √ 30 天

LATRON Control （乳胶质控液）

监控流式通道的检测

质量 √ √ 30 天

5C 细胞质控监控 CBC 和 DIFF 的检测质量

√ √ 13 天/次

网织红细胞质控监控 RETIC 检测质量 √ 30 天/次 S-CAL®校正品调整 CBC 参数的准度 √ 1 小时 LIN-C®质控品监控 CBC 参数的线性 √ 7 天 IQAP（实验室间的质量保证体系）库尔特 IQAP 为所有使用 4C 4C PLUS ，5C 和 RETIC 质控品以及 LIN-C 线形质

控的用户提供免费服务（详见 IQAP 操作指南）

V 标本检测 1．标本要求

1） HmX 可进行以下操作

*自动进样 *手动进样 *预稀释标本测试 2）标本要求 EDTA-K2抗凝，先配成 15%的 EDTA-K2溶液，一般 10uL 可抗

凝

0.5-1.0ml 全血(1.50±0.25mg/ml). 3）样本管要求清洁,光滑,带盖的试管

4）全血标本,室温加盖保存,要求 24 小时内检测

5）预稀释标本,室温保存,5 分钟～5 小时内检测

6) RETIC 标本,室温保存,8 小时内检测,2～8℃储存,24 小时内检测


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2. 条形码的粘贴 1)条形码必须与瓶塞平行,倾斜超过 5 度,将不能阅读 2)标签不能覆盖试管底部

3.标本检测 1) 自动进样

a 在主屏幕选择 Sample Analysis /Run Sample b 在 SAMPLE MODE 选择[F2] Start Primary c. 将标本插入进样架 d.按[F3] Run

2) 手动进样

.a 在主屏幕选择 Sample Analysis/Run Sample b 在 SAMPLE MODE 选择[F3] Secondary c.按[F3] Run d.将标本管拿到条形码阅读器前进行识别 e.或手工输入 1-16 位标本编号 f.标本充分混 ,手动吸样

3) 预稀释标本

当标本量不足 125uL 时,可使用预稀释模式,将标本进行 1:3 稀释,手动进样分析,仪器将自动计算后结果. 预稀释模式只能检测 CBC 结果 a. 准确加入一份全血标本,两份稀释液,轻轻混

b.在主菜单选 Sample Analysis/Run Sample c 在 SAMPLE MODE 选[F4] Predilute d.按[F3] RUN e.手工输入 1-16 位标本编号 c 手动吸样检测

每次检测结束后,均要进行核对,对可疑或有旗标的结果进行选择性手工复查. VI 关机 *确保仪器使用 24 小时要运行一次清洗循环或关机 *清洗液浸泡不少于 30 分钟，以清除仪器内部的蛋白沉积。 1．清洗循环


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



1）执行清洗循环从进入屏按 F3，再按回车即可 2 ）保持仪器的以下状态 *清洗剂浸泡仪器 *使仪器保持供电状态 *清洗剂浸泡 30 分钟后，仪器将自动启动 3）检查结果 *启动完成后浏览屏幕结果。（有必要还可浏览系统状态屏）

-若本底检测失败，按[F2]后查看系统状态屏，再按[F3]重新本底计数。 -若其他检测失败，按[F2]查看系统状态屏并运行 System Test. Special Functions/Diagnostics/Operator Options/System Test

按[Enter]键，然后按[F3]键运行后根据提示进行操作。 *若启动结果不保存，将自动打印出来。 *保存启动屏及系统状态屏的打印件以备文案 2．关机说明 1）运行关机操作 *确认状态行显示选择功能 *从主菜单选择 Diluter Functions/Shut Down *按回车 2）使仪器保持以下状态 *清洗剂浸泡至少 30 分钟 *电源保持接通，仪器将在 24 小时后自动冲洗 3．延迟关机程序如果仪器准备停机 48 小时以上，请执行以下操作 -主屏幕选择 Shut Down,让清洁剂浸泡至少 30 分钟 -主屏幕选择 Start Up,让稀试剂浸泡管道 -保持电源或关闭电源

-使用时按开机操作即可

VCS 的应用问题影响 VCS 分类质量的因素有以下几个问题：

标本本身的干扰因素。


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静脉采血、试管、抗凝比例。

标本的运输温度。

标本的静置时间。

仪器本身的因素。

1．抗凝剂(EDTA-K2 或 EDTA-K3)过浓(应以 1.5g/L 为宜)

血细胞遇抗凝剂先有一个短暂的收缩过程（1-2 分钟）。因为 K+离子加入血

浆后，改变了渗透压，，细胞内的水份将渗出。随后，K+离子将逐渐透过细胞膜，进入细胞内，细胞又恢复原态。绝大部分

人这个过程只需几分钟，但也有人需要 20-30 分钟。抗凝剂过浓会延长这个平衡时间。如果在收缩状态下检测，V 减少，S 减

少。LY 、BA 和 NE 的区分受到影响。 2．标本静立 3~4 小时以上标本静立将导致细胞份层，RBC、WBC、PLT(WBC+PLT=buffy coat)由上而下

排列。分层的细胞代谢，产生不同的代谢物，造成层微环境。WBC 与它的层

微环境（WBC 代谢产物+扩散过去的其他物质）相适应。重新混合后细胞需要重新建立平衡。初的 1~2min 内收缩，达到平衡需要

30min。血脂高的标本变化犹为明显，V 和 S 减少幅度大，达到平衡的时间更长。纠正的方法：对静置的标本进行间隔性混，或在放置后混，等 30 分钟再

测。（有直方图和点分布图可显示） 3．能量白细胞（衰老、温度影响、获生理异常）

这类细胞与 scatterpak 双试剂反应后，不能很快从肿胀状态恢复到原态，比起

新鲜标本，其 V 变大 S 减少。 4．标本冰箱储存

冰箱储存过的细胞收缩并抑制细胞膜的离子泵，导致 V 和 S 减少,细胞不易分

开，回温并等待一段平衡时间，可纠正。 *有的用户根据经验，把低能量标本（肿胀）放到冰箱一段时间再测，会得到

一张正常的分布图。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



5．温度的影响(对溶血素对红细胞溶解影响大)

温度过低时(如冬天早上刚开机)，溶血素与红细胞反应不充分，导致红细胞溶

解不完全，出现 PC2 报警；温度过高时(如夏天)，溶血素与细胞反应过快，导致部分白细胞也被溶解，只

剩细胞核；适温度为 21～25 摄氏度

6．标本化学成分的影响

VCS 白细胞五项分类原理、技术特点和应用问题

VCS 原理和技术特点在一个流式通道内,对单个白细胞进行直接、同时、三重测量,然后再进行三维分

析。 1. Scatterpak 试剂保证”接近原态”分析,避免化学方法对细胞特性的破坏

Scatterpak(Erythrolyse—低渗、低 pH、具表面活化性) (Stabilyse—高渗、高 pH) WBC EL 肿胀 ST：恢复等渗、生理 pH 接近原态 RBC----------------- 肿胀---------------------------------------去除 debris-------流式通道 PLT 肿胀 El 的表面活化作用继续发挥去除 debris (28μL) (300μL×2) (133μL) 2. 流体动力聚焦细胞,令其在流式通道内作适的单细胞排列

ISOTON III 作为鞘流 3.VCS 检测-视角与手工相似 VCS 技术检测细胞的角度与镜检血片相似,都是从体积、核质比、颗粒特性、膜

特性和形态等方面观察。但检测工具的敏感度大大提高,描绘程度上更精细,细胞

的状态比染色情况下的更自然。 Volume

运用低频电流准确分析细胞体积


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



体积是区分白细胞亚群一个很重要的参数,它能有效区分 LY 和 MO。但仍然存

在一定程度的混淆,如：LY 和 BA(φ同在 9-12μm 范围);不成熟 LY 和 NE(φ同在

12-14μm 范围) 该技术 1967 年开始使用

库尔特专利

Conductivity-Opacity

运用高频电磁探针检测细胞内含物(细胞核、颗粒和其他化学组份)的特性。

细胞膜对高频电流具传导性,当电流通过细胞时,细胞核、颗粒和细胞内的化学

组份令电流的传导产生变化,其变化量(RF)可以用来反映细胞内含物的信息 RF=f(细胞体积,细胞内含物传导性)

Opacity(阻光性)是指将细胞体积对 RF 的影响去除后的高频传导数据,可以更确

切地描述细胞内含物

Opacity≅RF/DC 该参数可用来进一步区别体积差不多的细胞,如：LY 和 BA(φ同在 9-12μm 范

围),由于它们的核质比不同而在 C 参数上有所区别

库尔特先生在 60 年代着手研究该项技术,1970 年获美国专利

Light Scatter-RLS

运用一个氦氖激光源发出的单色激光扫描细胞,收集细胞多角度(20-70 度)的散

射光(MALS),提供关于细胞形态,膜结构和颗粒性的信息

MALS=f(细胞体积、细胞膜结构和颗粒性)

Rotated Light Scatter=Log(LS)/DC,减少细胞体积的影响 S 在根据细胞的颗粒类型和颗粒数量区分细胞时十分有用,VCS 成功之处在

于它对 EO 的识别能力和计数


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



其它五分类仪器对 EO 的分辨往往不够成功或精度不高,因为很难将它与其它

粒细胞区分完全库尔特先生对流式光感应系统的研究可以追溯到 20 多年前的 Fulwyler 前辈时

代,同时库尔特公司在流式细胞仪的制作过程中积累了丰富的激光技术经验。

4.三维分析

根据每个细胞的 V、C、S 检测量,将她们分布到一个三维坐标(256×256×

256=16,777,216)上,用数学公式计算出各白细胞亚群的分布区,其分辨率是至今

为止高的

高分辨率不仅令五项分类清晰,还令异常得以敏感特异的显示,原始细胞可以进

一步区分是淋巴区、单核区、还是粒细胞区

高分辨率提供科研潜力

5.VCS 统计量达到 8000 个细胞,保证一定的精度 6.VCS 分类与手工分类的相关系数：LY>0.9; NE>0.9; MO>0.7 7.流式通道有进一步发展的潜力

MAXM：RET%

STKS：RET%、CD4、CD8

8.清晰的白细胞分布图

在仪器屏幕和打印报告上,我们可以看到三维座标有代表性的三个侧面：

DF1-V 和 S 座标面,可观察到 LY、NE、EO 和 MO 4 个细胞亚群 DF2-V 和 C 座标面,可观察到 LY、MO 和颗粒细胞 DF3-V 和 C 座标面,是 DF-2 去除 NE 和 EO 后的画面,可观察到 LY、MO 和 BA细胞

另外还有一个汇总了 V、C、S 三种技术的直方图,可协助进行数据判断


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点分布图上用各种颜色代表不同细胞浓度：

黄>红>绿>蓝

CD—1700 全自动血细胞分析操作规程

1、打开电源 2、出现主菜单画面时，按 Prime/run 键作空白试剂检测，如通过则画面出现

Ready 状态。 3、按上下左右和数字键输入待查标本号、床号，充分混标本，置进样针

下，按进样阀，进行测定。 4、自动打印报告。 5、每日清洗程序：回主屏幕，按 Daily Shutdown 键，屏幕显示 Process

Active…再按 Prime/Run 即可回准备状态。 6、关机

COULTER EPICS XL 型 FCM 流式细胞仪操作规程

（1）开机

1）开机之前，分别将鞘液盒及清洁液盒加满

2）打开 UPS

3）开启计算机，自动进入程序，启动流式细胞仪

4）打开电源箱门，检查 WATER TRAP 、 AIRFILTER 、

VACUUM FILTER ，如有下列情况通知工程师：

<1>TRAP 超过 1 ／ 3

<2>FILTER 有液体

<3>SYSTEM VACUUM 表超过－ 17 至－ 25 英寸

<4>SYSTEM PRESURE 表如超过 8 － 23psi 之间

<5>VACUUM TRAP 如有超过 0 ． 5 英寸液体

5）预热三十分钟，仪器提示插入标本

6）选择需要的 Protdcol 或 Panel

（2）光路流路校准

1）将 DNA check 放在室温下 10 分钟


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



2）选择 FLOW CHECK （ Protocol）

3）取 0 ． 5ml DNA Check 放在塑料试管内

4）将试管放在进样台上，取数 5000 （ FS ）

5）核查 FS 及所有荧光信号的 HPCV 是否与以前的记录相符

（3）清洗

1）准备清洗液：

<1>次氯酸钠 1ml+ 双蒸水 1ml 等量混

<2>双蒸水 5ml

2）在仪器上选择 PANEL 中的 CLEANING

3）将试管放置标本台上

4）按提示，用次氯酸钠一次，双蒸水三次依次放入标本台

（4）真空管清洗

1）按 RUN 键， RUN 键指示闪烁

2）真空清洗器内加入 5ml 双蒸水（黑色管）

3）将清洗器放置于样品台上，水被吸入

4）拿下清洗器，按 CLEANSE 键，当清洗循环结束， RUN 键指示灯亮，仪器

显示 Cytometer Ready,RUNo 灯亮

（5）关机

1）用 70 ％酒精清洗标本台

2）将有双蒸水的试管放在样品台上

3）用 Applications 中的 EXIT 关闭仪器

4）出现 XL 后，键入 XLOFF 后

5）分别关闭计算机屏幕和打印机

6）关闭 UPS

（6）注意事项

1）出现下述情况后必须立即进行清洗：

<1>使用以下染料后如 PI 、 EB 、 AO 、 TO 、 Coriphosphine-

0 FITC`Fura3 、 Fiuorescein Diacetate

<2>使用以上染料，进行免疫分型前

<3>如果有碎片或计数有明显增加

2）工作 24 小时至少关机一次

3）重新启动必须在仪器关闭 30 分钟之后


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



4）每月清洗一次空气滤膜

5）每月清洗鞘液盒一次

6）每 60 天清洗清洁液盒一次

MONITOR JI 红细胞沉降仪操作规程 [原理]

离体抗凝血液置于特制刻度测定管(魏氏法血沉管)内，垂直立于室温中，一定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。

[仪器及试剂] MONITOR JI 血沉仪、专用血沉管 109mmoI／L(32g/L)枸橼酸钠溶液：取含二分子结晶水的枸橼酸钠(分子量 294．12)3．28，用蒸馏水溶解，稀释至 100ml。此液在室温保存不得超过 2周。

[操作] 1．专用血沉管 1支，加抗凝剂 0．2ml。 2．静脉采血后，取下针头，加血至刻度，颠倒混。 3．用血沉管(300mm×2．5mm)吸取上述混血液至“0”刻度处，拭去管外

附着的血液，将血沉管直立在血沉架上。 4．记时，室温中静置 lh，读出血沉仪上的读数即是血沉值。

[参考值] 男:＜15mm／60min 女：＜20mm／60min

[附注] 1．红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量和质，血浆中脂类的量

和质，红细胞的大小与数量，是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。

2．要求 (l)标本采集时避免脂肪血。 (2)血液和抗凝剂比例要准确。 (3)血沉管内径要标准(2．5mm)，放置要垂直。 (4)做血沉的标本要在采集后 3h 内测定，并充分混。

3．室温过低、过高和贫血时，对结果都有影响。为此，血沉应尽量放在 18—25℃室温下测定。室温过高时血沉加快，可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢，无法校正。

Nycocard ReaderⅡ


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



多功能全定量特种蛋白金标检测仪操作规程 1、开机，等待仪器进入准备状态。 2、根据仪器提示，定标。 3、取全血 5ul，加入样品稀释液中。 4、在反应板中加入稀释后的样品 50ul，待渗透。 5、垂直滴入一滴金标记抗体，待渗透。 6、垂直滴入一滴洗涤液，待渗透。 7、 5 分钟内用 Nycocard ReaderⅡ读数比色，定量测定结果。

U F —100 操作规程

1、打开电源开关。 2、打开 sysmer 的 power。 3、打开 spectra-physics 中的开关。 4、旋转 idec24401 钥匙至 ON。 5、等待至 READX 灯亮（即绿灯亮）。 6、按 sampter 7、按 Tube 中的数字（此数字与试管架上的序号一致）。 8、按 sample NO（输入标本序号）。 9、按 start 即开始标本测定。 10、质控品测定应按 Nanual ModE. Qcol 或 Qco2、ENTER、OD、放入质控

品至吸针，再按 START 等测定结束后按 QC、按 File，按上下键送文件号，

OK。 11、需更换试剂报警时，按屏幕左上角的 Sysmex 停止报警，更换所缺试剂，

按 Replaur Reasent，按相应的更换试剂名称。 12、每天测试结束后，按 More，按 shutelown，用冲洗液进行冲洗。 13、关机：冲洗结束后，旋转 ielec.24401 钥匙至 OFF、关掉 spetra-physics 中的开关，关掉 sysmex 的 power 开关，关掉总电源开关。

盈东 Uriscan－尿十一项化学分析仪操作规程

1、打开电源，仪器自检后进入准备状态。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



2、取刻度离心管，倒入混合后的新鲜尿液 10ml。 3、取出密封保存的尿分析试纸条，插入尿液中，使尿液浸湿每一块反应区，

半分钟后取出，用滤纸拭去多余的尿液。 4、置于尿分析仪的底板上，仪器感应灯亮，仪器自动进行分析。 5、将试管置于 1500 转/分钟×5 分钟。 6、弃去上清液，留取尿沉渣 0.2ml，倒在玻片上，进行镜检。

ATB Expression 全自动鉴定及药敏测试仪操作规程

1、开要 1）检查电源是否正常，电源正常方可开机。 2）打开多用电源插座开关，再打开 UPS 电源开关。 3）按顺序打开打印机—显示屏—电脑主机—ATB Expression 测试仪开关。 2、测试操作 1）显示屏显示“C：＼>”，按键“ATB”“ENTER”进入 ATB 鉴定及药

敏测试系统； 2）选择菜单“标本”一栏，输入标本的相关资料； 3）进入“细菌鉴定”，按“F1”自动读入或者“F2”人工输入； 4）按 ATB Expression 测试仪的“↓”键，试剂船移出，放置好鉴定试剂

条，去年试剂条盖子，并仔细检查试剂条，保持清洁，避免污染； 5）在键盘上按“ENTER”键，仪器进入主动测试，注意先做好每日质控，

再做病人标本测试。 6）选择细菌鉴定结果按“ENTER” 键，注意结果要与标本的来源，细菌的

基本形态、培养特性做对照，切忌盲目迷信仪器的测试结果，如结果不符，应

仔细查找原因，必要时重做测试。 7）进入“第三试验”，按“F1”自动读入或者“F2”人工输入。 8）在试剂船上放置好药敏试剂条，操作同第“4”步。 9）按“ENTER”，仪器进入自动测试，测试完毕按“ENTER”显示测试结

果，再按“F1”接受测试结果或者“F2”修改测试结果。本软件配有“专家系

统”可自动调整药敏测试结果，但仍需仔细对照结果，在结果可疑时应查找原

因，必要时重做测试，再用“K—B”法作对照。 10）按“ENTER”保存测试结果。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



11）选择菜单“查阅”一栏，按“ENTER”，输入记录编号查出所需的测

试结果，按“F6”打印报告。 3、关机 1）按“ESC”键，退出操作程序。 2）按“DELETE”键退出软件程序。 3）关机顺序按照 ATB Expression 测试仪—电脑主机—显示屏—打印机关闭

开关。 4）先关掉 UPS 的电源开关，再关掉多用插座开关。 4、搞好仪器清洁卫生工作，罩上护套。在贵重仪器使用手册上登记仪器运行

情况。 5、每隔二周清洁一次试剂船，应彻底清洁，晾干后放回原处。

二氧化碳孵箱的操作规程

1、二氧化碳孵箱 24 小时开机。 2、每日检查孵箱工作情况： 1）CO2浓度在 5—7%范围内； 2）温度，应保持孵箱内温度为 35±1℃； 3）湿度，孵箱内有一小烧瓶，应盛有水，以确保孵箱内的湿度。 3、孵箱每日工作情况应登记在册。

BACTALert120 全自动血培养仪操作规程及注意事项

一．开机显示屏→打印机→主机→电脑自动进入监视屏幕二、输入操作者密码三、每日做仪器质控四、每周做一次数据备份五、出现断电现象，及时按关机步骤关闭计算机，来电后打开六、每日做培养箱内温度计录七、培养并放在室温阴凉处保存，严禁放入冰箱保存八、每天保持仪器外表面清洁九、每月用清洁刷清洁培养孔一次十、每半年用酒精沙布清洁培养孔一次十一、关机退出 ESC→输入密码→F5→OFF→CD 待显示屏显示根目录，关

电脑主机→显示屏→打印机


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



伟力彩色精子动态分析仪操作规程

1、打开电源开关。 2、伟力彩色精子质量检测系统中的 power(在键盘下面)。 3、打开显微镜温控仪开关、显微镜开关和显微镜上拉杆、打印机开关、VCD中按 power 键使显示 AU：0：00。 4、双击伟力彩色精子动态分析。 5、输入项目（姓名、年龄、病历号、送检时间、精液颜色、气味、精液量、

液化程度、液化时间、检验医生）后按确定。 6、按活动显示。 7、按停止显示。 8、按计算分析。 9、按右侧的确定、确定。 10、在屏幕上点击鼠标，锁住屏幕。 11、修改重新分割中的新阈值（90—120），按重新分割。 12、输入除去的圆细胞数（数屏屏幕上的，一般 3—5 个），按开始计算。 13、按采用此组数据。 14、再进行下一场分析中的 Y（是）。重复 10-13 步骤，一般分析 3 场以

上。 15、再进行下一场分析中的 N（否）。 16、打印（上打印纸），打印完后，重新上原打印纸反面，按直方图，打

印。 17、全部保存，确定，关闭，打印选择中的报告中的轨迹图，预览，选①视

野，打开，保存，确定，取消，结果浏览，全部保存，分析结果是否履盖中的

Y（是），关闭，退出系统。

DiaMed-ID Micro Typing System 达亚美微量定型系统操作规程 1、简介:

1) 1984 年 Yves Lapierre 发明了凝胶测试法。1988 年瑞士达亚美将专利产品推向市场。

2) 原理：基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。当抗原抗体反应，抗人球试验时，血细胞发生凝聚。离心时凝聚块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应。未凝聚血细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部，呈阴性反应。


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3) 达亚美凝胶测试产品用途 i. ABO/D 血型反定型交叉配血

ii. 抗体筛查 Rh 分型 iii. 抗体鉴定稀有血型 iv. 抗体滴定

4) 瑞士达亚美公司已获 GMP, ISO9001 认证。 2、特点:

1) 结果清楚明确。凝聚在上层为阳性，沉积在下层为阴性，血型配血结果清晰明了，结果易判定。

2) 结果稳定，可保存, 可拍照, 可存入计算机。可复检。 3) 操作简明。凝胶卡中已有抗血清, 加入样本细胞即可定型。 a) 避免因忘加抗血清引起的错误。 4) 一卡六管，减少标记，减少错误发生环节。利于正定反定对比。 5) 简化了操作程序，减少接触玻璃用品，提高了操作安全性。 6) 达亚美凝胶测试抗人球配血可检出不完全抗体，避免了 ABO 以外血型抗

体引起的输血溶血。同时达亚美卡不存在抗人球被中和问题，避免了费时费力的洗涤过程和假阴性。

7) 达亚美的抗体筛查可检出临床意义抗体，避免了盲目的配血，提高了安全输血水平。

8) 样本用量少。有利于新生儿及少血液量样本的检测。 9) 结果重现性好。血型配血操作可实现标准化。 10) 血型配血可自动化。 11) 达亚美产品齐全。用途广泛。

3、注意事项: （1）血型鉴定

1) 每日实验前，先取出小瓶 2 号稀释液及标准细胞，放置一段时间至室温，以防冷凝集。

2) 必须标记卡。 3) DiaMed 卡封口已损坏时，管中干涸，或有气泡时，卡不可使用。 4) 用 2 号稀释液保证反应结果可靠，细胞浓度要在 5%左右，不可太浓太

稀。 5) 纤维蛋白可吸附部分红细胞，呈假阳性。应将血样离心。 6) 反定管先加样，以便标准细胞与血清血浆反应。 7) 正反定型对照，确定结果及 A 亚型。正定型结果若为弱阳性，应怀疑

为 ABO 亚型，可重做完全测试。正反结果不符时，请设计实验分析。 8) 质控（Ctl）为阳性时，请先用生理盐水洗细胞，再做血型。 9) 严格按标准程序操作可检出弱抗原，血型亚型。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



10) 某些药物、疾病可导致弱阳性及正反定型不符。 11) 细菌及异常血清蛋白可影响结果。

（2）注意事项: （交叉配血） 1) 每日实验前，先取出小瓶 2 号稀释液及标准细胞，放置一段时间至室

温，以防冷凝集。 2) 必须标记卡。 3) DiaMed 卡封口已损坏时，管中干涸，或有气泡时，卡不可使用。 4) 必须用 2 号稀释液保证反应结果可靠，细胞浓度要在 0.8%左右，不可太

浓太稀。 5) 纤维蛋白可吸附部分红细胞，呈假阳性。应将血样离心。 6) 液体应加至卡反应室中。 7) 严格按标准程序操作可检出弱抗原抗体反应，弱凝集。 8) 某些药物、疾病可导致血液不配合。 9) 细菌及异常血清蛋白可影响结果。

4、异常情况分析 1) 假阳性发生原因分析：①干卡；②过期卡；③密封不严；④胶中气泡⑤

直接抗球蛋白实验 DAT 阳性；⑥凝聚性细胞；⑦酶引起自身凝聚⑧抗血清交叉污染，加样器问题 ⑨细胞悬液不正常；⑩Rouleaux 多细胞排列（先细胞重做）Wharton’s Jelly

2) 疑难结果：①离心机问题；②凝胶在反应腔内。 3) 假阴性：①没加血浆血清；②量相差太大；③抗体失活，病人抗体极低

或无抗体病；④弱/无凝集素；⑤弱/无抗原；⑥细胞污染、失效。 4) 双细胞样本：①输血后样本；②BMT 骨髓移植后样本；③大量胎儿母亲出

血症；④亚型 A3、Am 等；⑤Chimerism 嵌合体；⑥样本污染；⑦纤维蛋白；⑧弱化抗原（白血病、新生儿、高龄老人） 1：⑤⑦⑩温生理盐水洗涤后，用卡重做。 2：①请与销售人员联系，检查离心机。②离心可使凝胶复位。卡应正立

放置。 3：③新鲜样本可避免此现象。④⑤参阅病历分析。可能因病理、治疗及

年龄原因发生无抗体弱抗体，及弱/无抗原，亚型也可引起弱反应结果。

5) 多发性骨髓瘤，慢性髓白血病，淋巴瘤可发生正反定型不符，可在 5分钟 37℃反应后反定型

5、ABO 正反定型和抗-D 1) 准备样本。A1,B 细胞室温平衡。标记达亚美 DiaMed ID 卡。 2) 50ul A1,B 细胞（0.8%）加入 A1,B 管中。

50ul 血清或血浆加入 A1,B 管中。


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3) 样本压积红细胞 25ul 或 50ml 全血悬浮于 0.5ml 2 号稀释液（Dil 2）溶液中，得到 5%样本红细胞。

4) 10ul 5% 样本红细胞加入 A, B, D, Ctl 管中。 5) 离心 10 分钟。 6) 读结果。 7) 记录。

6、交叉配血 1) 准备样本。标记达亚美 DiaMed ID 卡。 2) 10ul 样本压积红细胞悬浮于 1ml 2 号稀释液（Dil 2）溶液中，得到

0.8%样本红细胞。 3) 1 号管中（主侧）加入 50ul 0.8%献血者细胞。25ul 受血者血浆、血

清。 4) 2 号管中（次侧）加入 50ul 0.8%受血者细胞。25ul 献血者血浆、血

清。 5) 37℃ 15 分钟。 6) 离心 10 分钟。 7) 读结果。 8) 记录。

7、抗体筛查 1) 准备样本。抗体筛查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ细胞室温平衡。 2) 标记达亚美 DiaMed ID 卡。姓名，病历号。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。 3) 抗体筛查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ细胞各 50ul （0.8%） 4) 25ul 待检样本血浆或血清。 5) 37℃ 15 分钟。 6) 离心 10 分钟。 7) 读结果。 8) 记录。

8、 BO 血型基础

与抗血清反应与 A1,B 细胞反应血型抗原

抗-A 抗-B 抗-A，抗-B A1 B A A 反应 -- 反应 -- 反应 B B -- 反应反应反应 -- AB AB 反应反应反应 -- -- O H -- -- -- 反应反应


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抗-A 抗-A1 抗-H A ++++ ++++ - A2 +++ -- ++/+++ O -- -- ++++

1) Rh 血型 2) 主要抗原：C ,c,E,e,D 。 Cde=R1 cde=r CDE=R2

CcDdee=R1r 与抗-D 阳性反应的红细胞为 Rh+ 3) 不完全抗体筛查 4) ABO 系统抗体以外其他血型抗体可通过抗体筛查来检查。用 O型细胞可检

查血浆、血清样本有无其他血型抗体。 5) 交叉配血 6) 用交叉配血方法可考察细胞与血清血浆的相容性。不完全抗体可引起输

血反应, 而传统配血方法不能检出不完全抗体. 传统抗人球配血可检出不完全抗体,但操作复杂.

下列情况建议做抗体筛查 1) 需大量输血病人 2) 反复输血病人 3) 血色素很低，红细胞压积比例低，严重贫血病人。 4) 有溶血症状病人。

1575 型微孔板清洗器操作规程

一．概述 1575 型微孔板清洗器主要用于 ELISA 实验中清洗微孔板，具有多个程

序，自动、精确、安全的功能。二．主要技术性能和指标 1．电源电压：220V+10%，47-63HZ 2．操作温度：5-35C 3．仪器存放温度：-20-50C 4．相对湿度：0-95% 5．清洗程序：1-75（其中 1-8 仪器内已备） 6．液体注液容量：50-3000ul 7．液体浸泡时间：0-10 秒 8．每孔清洗次数：高可调至 9 次 9．吸针的移动位置：0-2mm（横向）


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10． 10 吸液的深度位置：0.1-15mm 三.操作方法 1.主操作单

SELECT: RUN 操作 IN YES OUT

SELECT:CONFIGURETION 程序编制 IN YES OUT

SELECT: SERVICE/VER 仪器维护 IN YES OUT

2 操作程序接通电源，显示器显示： SELECT: RUN IN YES OUT

RUN: PO4 IN YES OUT LAST STRIP 12 IN YES OUT

按键头选择所需的操作规

程按键头选择后第几条要

清洗 RUN: PO4 STRIP 12 YES OUT

RUN: PO4 WASH+ASP ESC

按 YES 就进行

WASH+ASP 清洗 SELECT PRINSE/RINSE IN YES OUT

CONNECT YHE RINSE IN YES OUT

清洗完以后管道冲洗

PRIMING/RINSE ESC

SELECT: PRINSE/RINSE 充盈/冲洗 IN YES OUT

SELECT: DISINFECTION 消毒部件 IN YES OUT


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



SELECT: RUN IN YES OUT

四.仪器的维护保养 1．切记不得在无水情况下将输液泵启动，那会使泵的阀门受损，并影响

分液的准确性。 2．仪器应放在通风、避光、稳固的台子上。 3．当管道及清洗部件内有清洗液时，不要将清洗机关闭。 4．在注液针骨有可能清洗液会形成结晶，每次清洗结果后要用蒸馏水冲

洗一遍。 5．当消毒结束后，必须用蒸馏水彻底冲洗留下的微量消毒液。 6．通常清洗器在使用之前或每次操作之前都要消毒。

（二）检验中心检测项目标准操作规程 A、检室 A1、血常规检验（1）标本

用 EDTA-K20.2ul 抗凝静脉血 1ml,门诊病人在 CD-1700 仪器上做三分类测定,住院病人在 COULTER HMX 仪器上做五分类测定。

（2）试剂及仪器 COULTER HMX 五分类血球分析仪及配套试剂，质控用 COULTER 4C PLUS全血质控品，COULTER HMX 五分类血分析仪及配套试剂，质控用COULTER 5C 全血质控品。（血液细胞自动化分析仪介绍）

（3）操作 1）门诊：

a) 收到血常规标本后，查看核对检验项目，立即编号，放混器上混3 分钟。

b) 如有血型立即用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。 c) 血标本在 ABBOT CD-1700 上检测，结果入库。 d) 对于中间细胞比较多的应当手工涂片染色分类，对于血小板等图形不

好或结果异常较大的应手工复查。 e) 结果核对后，在半小时内报告。

2）病房： a) 采集血常规标本后，立即编号，试管加盖后放于专用试管架上放入

HMX 上自动混，


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b) 如有血型用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。 c) 血标本在 COULTER HMX 上机检测，结果入库。 d) 对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类，对于血小板等结果

图形不好或结果异常较大的应手工复查。（复查条件） e) 结果核对后，签发报告单。如果急诊则电话报告，有血型的话，通知

病房来拿报告单。（血液项目）（4）项目

代号中文名单位

WBC 白细胞计数 ×109/L LY%(LY) 淋巴细胞分类 %

MO% 单核细胞分类 %

NE%(GR) 中性细胞分类 %

LY# 淋巴细胞计数 ×109/L MO# 单核细胞计数 ×109/L NE# 中性细胞计数 ×109/L RBC 红细胞计数 ×1012/L HGB 血红蛋白 g/L HCT 红细胞压积

MCV 平均红细胞体积 fl MCH 平均红细胞血红蛋白含量 pg MCHC 平均红细胞血红蛋白浓度 g/L RDW 红细胞分布宽度

PLT 血小板计数 ×109/L MPV 平均血小板体积 fl PCT 血小板比积 %

PDW 血小板分布宽度

EO% 嗜酸性细胞分类 %

BO% 嗜碱性细胞分类 %

EO# 嗜酸性细胞计数 ×109/L BO# 嗜碱性细胞计数 ×109/L

（5）特殊规定在检验血常规时,科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低,务必作登记,复查和及时报告,以备查询。


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1.血红蛋白低于 100g/L. 2.白细胞低于 3000/ul. 3.血小板低于 8万/ul. 4.发现白细胞分类异常图形时. 5.发现其中一项过高时,或是临床指定要镜检时.

（6）临床意义（6．1）WBC 计数

参考范围 4-10 × 10

9/L

1、增加 (l)生理性：初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。 (2)病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。 2．减少病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、X线及镭照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。

（6．2）白细胞分类计数 (6.2.1)染色液 1.瑞氏—姬姆萨复合染色液

I 液取瑞氏染粉 lg、姬姆萨染粉 1g，加入甲醇(分析纯)，充分振摇，第二天加甘油 10ml,混即能使用。

Ⅱ液 pH6．4—6．8 磷酸盐缓冲液（或用 H2O 替代缓冲液）磷酸二氢钾(无水)6．648 磷酸氢二钠(无水)2．56g 加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整 pH，加水至 1000ml。

染色置玻片于染色架上，滴加染液 3—5 滴，使其迅速盖满血膜，约 1min后，滴加缓冲液 5 一 10 滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5 一 10min 后用水冲去染液，待干。或染色液盖满血片后半分钟即可水洗镜检。


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2．快速染色液

I 液: 磷酸二氢钾 6．648 磷酸氢二钠 2．56g 水溶性伊红 Y 4g(或伊红 B2．5g) 蒸馏水 1000ml 石炭酸 40ml 煮沸，待冷备用。

Ⅱ液亚甲蓝 4g 蒸馏水 1000m1 高锰酸钾 2．48g 煮沸，待冷备用。

染色把干燥血片浸入快速染色液的 I 液中 30s，水洗，再浸入Ⅱ液 30s，水洗待干。注：本染色法除了能快速用于急症外，对玻片质量要求也不高。随着染液多次使用，可适当延长染色时间或更换新液。

3．30s 快速单一染色液瑞氏染粉 2．0g 姬姆萨染粉 0．68 天青 E 0．6g 甘油 10．0ml

贮存液

聚乙烯 D 比咯烷酮(PVP) 20．0g


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甲醇 1000mI 磷酸二氢钾 6．648 磷酸氢二钠 0．268 石炭酸 4．0ml

磷酸盐缓冲液(pH6.2-6．8)

蒸馏水加至 1000mI 应用液 l 液、2 液按 3：1 比例混合放置 14 天后备用。染色将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30s 后用自来水冲洗。

注：加表面活性剂 PVP 可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天青 E 可缩短染色时间。 (6.2.2)参考范围

LY: 18．7％-47％ LY#：(1．0—3．3)×109／L MO: 3．5％-7．9％ MO#：(0．2—0．7)×109／L GR: 46．0％一 76．5％ GR#：(1．8—6．4)×109／L

1．增多 (l)中性粒细胞：急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术

后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。 (2)嗜酸性粒细胞：变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、某些血液

病、手术后、烧伤等。 (3)嗜碱性粒细胞：慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及

铋中毒等。 (4)淋巴细胞：百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白

血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。 (5)单核细胞：结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热

病、单核细胞白血病、急性传染病的恢复期等。 2．减少 (l)中性粒细胞：伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X

线和镭照射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再障、粒细胞缺乏等。

(2)嗜酸性粒细胞：伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。 (3)淋巴细胞：多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。

（6.3）常见的异常白细胞形态的变化在外周血象中，除了各类白血病幼稚细胞外，通常能见到一些细胞形态上的异常变化。 (6.3.1)中性粒细胞 1．核象变化：反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约占 1：13。


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(1)核左移：是指杆状核细胞增多，常见于感染。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血病。 ① 伴白细胞总数增高的核左移：称再生性左移，常见于

急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。 ② 白细胞总数不增加或减低的核左移：称退行性左移，

常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。

(2)核右移：是指不仅分叶核粒细胞增多，且分叶过多，常见 4叶、5叶(正常时多分 3叶)，这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于营养性巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，表示预后不良。

2.毒性变化：严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症时，中性粒细胞可出现形态变异。 (l)细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。 (2)毒性颗粒：胞浆中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小

不等。可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。 (3)空泡：可在胞浆或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未

能着色所致。 (4)Dohle 体：脑浆内出现嗜碱性点、线、梨形或云雾状物质，可能为核

浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现。 (5)核棘突：胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与

中毒、癌转移、严重放射损伤等有关。 3.退行性变：

表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行变可以是细胞衰老死亡的表现。

(6.3.2)淋巴细胞淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增多症为常见。此外，疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见，统称为异型淋巴细胞。传染性单核细胞增多症患者血液中常可出现 3种异型淋巴细胞，即空泡型、不规则型和幼稚型。

（6.4）血红蛋白 [参考值]

男:120-160g/L 女:110-150g/L


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（6.5）红细胞分布宽度 RDW 为反映红细胞体积异质性的参数，常以所测得红细胞体积大小的变异系数(CV％)来表示。它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观、准确。 RDW 增大时有临床意义。 (l)用于缺铁性贫血(IDA)的诊断与疗效观察：

缺铁性贫血时 RDW 增大，尤其是 MCV 尚处于参考值范围时(缺铁性贫血时 MCV 应下降)RDW 增大更是早期缺铁的指征；MCV 减小时，RDW 增大更为显著，当给予铁剂治疗有效时， RDW 将比给药前更大，以后逐渐降至正常水平。产生这种现象的原因，主要是因补铁后产生网织红细胞，及正常红细胞生成并释放人血与给药前的小红细胞并存，故 RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少， RDW 便逐渐降至参考范围。

(2)用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断： IDA 和轻型地中海性贫血时，MCV 均可减小。但 IDA 时 RDW 增大，而轻型地中海性贫血时 RDW 正常。

(3)用于贫血的分类(Bessman 分类法)： MCV 只能反映红细胞平均体积的大小，不能代表红细胞体积大小的异质性，对红细胞体积大小的评价，过去靠血涂片上红细胞形态的观察，这种观察常受血涂片制作以及观察者的主观因素的影响较大，而且不能定量，RDW 能较好地反映红细胞体积的异质性，把 MCV 和 RDW 结合用于对贫血的分类将更为完善(表 l—l—2)。

表 l-1-2 Bessman MCV／RDW 贫血分类

类别 MCV RDW

正常 → →

缺铁性贫血 ↓ ↑ 巨幼细胞性贫血 ↑ ↑ 溶血性贫血 ↑ ↑ 铁粒幼细胞贫血 → ↑ 再生障碍性贫血 → →

单纯小细胞性贫血 ↓ →

注：→无变化;↑增大;↓减少（6.6）平均血小板体积

MPV 的临床意义要结合 PLT 变化才有价值。 (1)鉴别血小板减少的原因：


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① 当骨髓造血功能损伤致血小板减少时， MPV 减少； ② 当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少， MPV

增大； ③ 血小板分布异常致血小板减少时，MPV 正常。

(2) MPV 增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：骨髓造血功能衰竭时，MPV 与 PLT 同时持续下降；造血功能抑制越严重，功能恢复时，MPV 增大常先于 PI。T 升高。 MPV越小；当造血

(3)其他方面应用： ① MPV 增大：见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫痰

(ITP)、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。

② MPV 减小：见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。（6.7）.血小板比积(plateletcrit，PCT)

参考范围男 0．108％ -0．272％女 0．114％一 0．282％

PCT 与 PLT 和 MPV 正相关，所以 PLT、MPV 的增减均可使 PCT 发生变化。增高：见于骨髓纤维化、脾切除、慢粒等。减低：见于再障、化疗后、血小板减少症等。

（6.8）血小板体积分布宽度(platelet volume distribution width，PDW )

参考范围 0．155-0．181(15．5％-18．1％)

(以血小板体积变异系数 CV％表示)PDW 是反映血小板体积大小的异质性参数。增大：急非淋化疗后、巨幼细胞性贫血、慢粒、脾切除、巨大血小板综合征、血栓性疾病等。

（6.9）血细胞体积分布直方图的应用 (l)红细胞体积分布直方图：将 MCV 和 RDW 配合直方图分析，可直接观察红细胞体积的分布情况。 ① 只现一个峰：见于正常人、缺铁性贫血(峰左移)、巨幼细胞性贫血

(峰右移)。


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② 可现两个峰：缺铁性贫血给予铁剂治疗有效时，可出现一个小红细胞峰和另一个正红细胞(或网织红细胞)峰。巨幼(红)细胞性贫血给予叶酸、维生素 Bl2 治疗有效时亦可见两个峰。

(2)白细胞体积分布直方图：静脉血比毛细管血白细胞数量略低。中档的血细胞分析仪一般为三分群，它是根据加入溶血剂后，白细胞膜通透性改变而发生皱缩，不同类型的白细胞皱缩后体积有明显差别，每个皱缩白细胞通过血细胞分析仪的微孔时产生的脉冲信号经放大、甄别后，微机处理数据得到其体积分布直方图。

淋巴细胞群为 35—90 fI 大小中间细胞群为 90 一 160 fl 大小粒细胞群为 160—450 fI 大小

三群细胞的百分比与白细胞数量的乘积为其绝对数正常人白细胞体积分布直方图，可见两个明显分离的峰，左峰为小细胞群(淋巴细胞)，右峰为大细胞群(粒细胞)，两峰之间为中间细胞群的分布。急性白血病时，由于异常的原始、幼稚细胞增多，可见中间细胞明显增高，这时直方图上见一个峰，峰值常在 90 一 160 fl 之间。这时必须推片染色镜检。

(3)血小板体积分布直方图：正常人血小板体积主要分布在 2—20 fl 之间，21—30 fI 之间有少量大血小板，一般仪器以 30 fI 为大的分析界标。血小板体积增大时，直方图会出现明显拖尾现象。有小红细胞或红细胞碎片干扰时，直方图尾部会抬高。

（6.10）三种红细胞参数平均值的计算 1、原理

根据红细胞、血红蛋白浓度和红细胞比积，计算红细胞平均容量、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度，用作贫血的形态学分类。

2、计算方法（1）平均红细胞体积(mean corpuscularvolume， MCV)：是指每个红细胞的平均体积，以飞升(fI)为单位。

每 L 血液中红细胞体积(L)×1015 MCV＝ ────────────── ＝××fl 每 L 血液红细胞数(个)


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（2）平均红细胞血红蛋白含量(mean Corpuscular hemoglobin，MCH)：是指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量，以皮克(pg)为单位。

每 L 血液中血红蛋白浓度(g)×1012 MCH＝ ────────────── ＝××pg 每 L 血液红细胞数(个)

（3）平均红细胞血红蛋白浓度(mean Corpuscular hemoglobin concentration，MCHC)：是指平均每 L 红细胞中所含血红蛋白浓度(g/L)。

每 L 血液中血红蛋白 g 数(g/L) MCHC＝ ────────────── ＝××g/L 每 L 血液红细胞比积(L/L)

3、临床意义正常人和各型贫血时红细胞平均参考值表

平均值 MCH(pg) MCV(fl) MCHC(g/L) 正常 27-31 82-95 320-360

大细胞性贫血 ↑ ↑ - 正常细胞性贫血 - - - 单纯小细胞性贫血 ↓ ↓ - 小细胞低色素性贫血 ↓ ↓ ↓

注：- 正常;↑增大;↓减少（6.11）红细胞参数

1、红细胞(red blood ceII，RBC) 男 (4．0-5．5)×10

12／L

女 (3．5-5．0)×1012／L

2、血红蛋白(hemoglobin，HGB) 男 120 一 160 g／L 女 l10-150 g／L

3、红细胞比积(hematocrit，HCT) 男 0．40—0．50 (40％一 50％) 女 0．35—0．45 (35％一 45％)


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A2、嗜酸性粒细胞直接计数

[标本]

EDTA-K2 10ul 抗凝静脉血 1ml

[原理]

手工法

血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色，而红细胞及其

他白细胞破裂或溶解。

仪器法（VCS 原理）

[试剂]

手工法

嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液种类较多，各有一定的优缺点，尚待大家

继续实验，找出佳配方。下列 3种稀释液供参考。

1． Hinkelmann 液

伊红 0．2g

95％石炭酸 0．5m1

40％甲醛 0．5ml

蒸馏水加到 100m1

2．乙醇—伊红稀释液

90％乙醇 30ml

甘油 10ml

碳酸钾 lg

枸橼酸钠 0．5g

20g 几伊红液 10ml

蒸馏水加至 100m1

本配方背景清晰，嗜酸性粒细胞着色鲜明，缺点是含 10％甘油，比较粘

稠，细胞不易混，故计数前必须充分振摇。

3．伊红—丙酮稀释液

20g/L 伊红液 5mI

丙酮 5mI

蒸馏水 90ml

新鲜配制效果好，每周配 1次。

仪器法


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COULTER HMX 五分类血细胞仪及专用试剂

[操作]

手工法

1．小试管中加稀释液 0．38mI。

2．常法取末梢血 20μl，加入管内混，待红细胞溶解后两侧充池。

3．静置 3—5min，用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数 10 个大方格内

嗜酸性粒细胞数。

仪器法

操作同血常规

[计算]

10 个大方格内嗜酸性粒细胞数×20× lO＝嗜酸性粒细胞/L

[参考值]

(50-300)×106／L(50-300／μl)

[附注]

l. 血液稀释后应于 1h 内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏，使结

果偏低或不易辨认。

2. 充池前要充分混，但又不宜用力过猛，特别是使用含甘油的稀释液要

适当延长混时间。

3. 注意与中性粒细胞区别,以免误认,中性粒细胞一般不着色,但也有着浅红

色的,其颗粒较小。

4．住院病人采标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。

5．用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。

[临床意义]

1．直接计数主要用于观察传染病预后、手术和烧伤病人的预后及测定肾上

腺皮质功能。

2．其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。


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A3、红细胞沉降率测定 [标本]

200ul 枸橼酸钠抗凝静脉血 1.1ml，颠倒混。 [原理]

离体抗凝血液置于特制刻度测定管(魏氏法血沉管)内，垂直立于室温中，一定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。

[仪器及试剂] MONITOR JI 血沉仪、专用血沉管 109mmoI／L(32g/L)枸橼酸钠溶液：取含二分子结晶水的枸橼酸钠(分子量 294．12)3．28，用蒸馏水溶解，稀释至 100ml。此液在室温保存不得超过 2周。

[操作] 1．专用血沉管 1支，加抗凝剂 0．2ml。 2．静脉采血后，取下针头，加血至刻度，颠倒混。 3．用血沉管(300mm×2．5mm)吸取上述混血液至“0”刻度处，拭去管外

附着的血液，将血沉管直立在血沉架上。（MONITOR JI 操作） 4．记时，室温中静置 lh，读出血沉仪上的读数即是血沉值。

[参考值] 男:＜15mm／60min 女：＜20mm／60min

[附注] 1．红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量和质，血浆中脂类的量

和质，红细胞的大小与数量，是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。

2．要求 (l)标本采集时避免脂肪血。 (2)血液和抗凝剂比例要准确。 (3)血沉管内径要标准(2．5mm)，放置要垂直。 (4)做血沉的标本要在采集后 3h 内测定，并充分混。

3．室温过低、过高和贫血时，对结果都有影响。为此，血沉应尽量放在 18—25℃室温下测定。室温过高时血沉加快，可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢，无法校正。

[临床意义] 增快：

(l)生理性：年幼小儿、经期、妊娠 3个月至产后 1个月。

(2)病理性：急性炎症、结缔组织病、活动性结核、风湿热活动期、组织严重破坏、贫血、恶性肿瘤、高球蛋白血症、重金属中毒等。


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A4、血型鉴定

（1）ABO 血型鉴定

根据红细胞上有或无 A抗原或／和 B抗原，将血型分为 A型、B型、AB 型及 O型

4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定 ABO 血型。所谓正定

型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的 A抗原或／和 B

抗原；所谓反定型，是用已知 A细胞和 B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或

／和抗—B。

[试剂和材料]

1．抗—A(B 型血)、抗—B(A 型血)及抗—A十 B(O 型血)分型血清，制备方

法见本节附注；

2．5％A、B 及 O 型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；

3．受检者血清；

4．受检者 5％红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。

[方法]

1．试管法

(1)取洁净小试管(内径 10mm×60mm)3 支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A

十 B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十 B。分型血清各 l滴于试管

底部，再以滴管分别加入受检者 5％红细胞盐水悬液 1滴，混和。

(2)另取洁净小试管(内径 10mm×60mm)3 支，分别标明 A、B和 O细胞。用

滴管分别加入受检者血清 l滴于试管底部，再分别以滴管加入 A、B和 O

型 5％试剂红细胞悬液 l滴，混和。

(3)立即以 1000r／min 离心 lmin。


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(4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集

(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检

查。

(5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于 A、B亚

型、类 B或 cisAB 的发现。

(6)凝集强度判断标准

4 十红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。

3 十红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。

2 十红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。

1 十肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞

土镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞

MF 混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集，而极

大多数红细胞仍呈分散分布。

一表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均分布。

2．玻片法

(1)取清洁玻片 1张(或白瓷板 1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B

和抗-A 十 B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B 和抗-A 十 B 分型血清 l 滴

于标明的方格内，再各加受检者 2％红细胞悬液 1滴，混和。

(2)另取洁净玻片一张(或白瓷板 1块)，用蜡笔划成方格，标明 A细胞、

B细胞和 O细胞，用滴管各加受检者血清 1滴，再分别用滴管滴加

A、B和 O型试剂红细胞悬液 1滴。

(3)将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与细胞充分混，连续约

15min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。如以玻片作试验时，也

可用低倍镜观察结果。

[结果判定]

ABO 血型正反定型结果

分型血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试剂红细胞


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抗-A 抗-B 抗-A 十 B A 细胞 B 细胞 O 细胞

十 ─ 十 A ─ 十 ─ ─ 十十 B 十一 ─ ─ ─ ─ O 十十 ─ 十十十 AB ─ ─ ─

注：十为凝集；一为─不凝集。

[附注]

1．分型血清质量性能符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。

2．试剂红细胞以 3个健康者同型新鲜红细胞混和，用生理盐水洗涤 1次，以除

却存在于血清中的抗体及可溶性抗原。

3．试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。

4．操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实

是否漏加血清。

5．按理 IgM 抗-A 和抗-B 与相应红细胞的反应温度以 4℃为强，但为了防止

冷凝集现象的干扰，一般仍在室温(20—24℃)内进行试验，37℃可使反应

减弱。

6．离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结

果。

7．观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。

8．判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。

[正反定型结果不一致的原因]

有技术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种：

1. 分型血清效价太低、亲和力不强。如抗—A血清效价不高，可将 A亚型误

定为 O型，AB 型误定为 B型。


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2．红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显，误判为阴

性反应。

3．受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于白血病或恶性

肿瘤：以及类 B或 cisAB 等。

4．受检者血清中蛋白紊乱(高球蛋白血症)，或实验时温度过高，常引起红细

胞呈缗钱状排列。

5．受检者血清中缺乏应有的抗-A 及或抗—B抗体，如丙种球蛋白缺乏症。

6．各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集。部分溶血时，可溶性血型物

质中和了相应的抗体.

7．由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。

8．血清中有意外抗体，如自身抗—I，常引起干扰。

9．老年人血清中抗体水平大幅度下降正反定型结果不一致的解决办法如发现

ABO 正反定型结果不一致，先要重复作试验 1次。严格执行操作规程，使

用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果，就可解决明显的问题，

对一些疑难问题月必须进一步研究。

[检查步骤]

1．另从受检者采取 l份新鲜血液标本这样可以纠正因污染或搞错样本造成的

不符合。

2．将红细胞洗涤数次，配成 5％盐水细胞悬液，用抗—A、抗—B、抗—Al，

抗—A十 B及抗 H做试验可以得到其它有用的信息。

3．对受检红细胞作直接抗球蛋白试验，如结果呈阳性，表示红细胞已被抗体

致敏。

4．用 Al、Az、B、O 红细胞及自身红细胞检查受检血清。如果怀疑是抗—I，

用 O型(或 ABO 相合的)脐血红细胞检查。


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5．如果试验结果未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和 4℃放置

30min，用显微镜检查核实。

6．如疑为 A抗原或 B抗原减弱，则可将受检红细胞与抗—A或抗—B血清作

吸收及放散试验以及受检者唾液作 A、B、H血型物质测定。后者只对 80

％HAB 分泌型的人有用。

7．如试验结果红细胞呈绢钱状排列，加等渗盐水 l滴，混和，往往可使绢钱

现象消失。应注意不应先加盐水 l滴于受检者血清中而后和红细胞作试

验，以免使血清中抗体被稀释。

8．如受检者为 A型血而疑为有类 B抗原时，可用下列方法进行鉴别：

(1)观察细胞与抗—A及抗—B的凝集强度，与抗—A的反应要比与抗—B

的反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。

(2)用受检者红细胞与自身血清作试验，血清中的抗—B不凝集自身红细

胞上的类 B抗原。

(3)检查唾液中是否有 A、B物质，如果是分泌型，可检出 A物质而无 B物

质。

(4)核对患者的诊断，类 B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴性杆菌

感染有关。

9．如发现多凝集现象，应考虑由遗传产生的 Cad 抗原活性；被细菌酶激活的

T或丁 K受体；或产生机制不太明了的丁 n受体所引起。多凝集红细胞具

有以下特点：

(1)能被人和许多家兔的血清凝集。

(2)能与大多数成年人的血清凝集，不管有无相应的同种抗体。

(3)不被脐带血清凝集。

(4)通常不与自身的血清凝集。


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A5、尿常规

（1）尿液标本处理

[收集]

1．应留取新鲜尿，以清晨第一次尿为宜，较浓缩，条件恒定，便于对

照。急诊患者可随时留取。

2．使用清洁有盖容器(一次性容器为好)。

3．容器上应贴上检验条码。

4．尿标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。此外，还应注意避免

烟灰、糖纸等异物混入。

5．标本留取后，应及时送验，以免细菌繁殖、细胞溶解等。

6．尿胆原等化学物质可因光分解或氧化而减弱。

[防腐与保存]

1．冷藏：防腐剂随检验目的而定，一般放 4℃冰箱可保存 6h。

2．甲醛：用于管型、细胞的防腐，按 400g 儿甲醛 0．5ml／100ml 尿加

入。由于甲醛具有还原性，不适于尿糖等化学成分检查。

3．甲苯(或二甲苯)：用于尿糖、尿蛋白的防腐，按甲苯 0．5ml／100m1

尿加入。

4．麝香草酚：用于检查尿中化学成分及细菌的防腐剂，每 100ml 加入＜

0．18。

[标本处理]

收到门诊标本后，核对检验项目后，倒入普通长试管内。液面距管中约 1cm

收到病房标本后，核对检验项目后，倒入普通长试管内约 10ml。液面距管中约

1cm，放于 UF-100 专用试管架上。


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[检验后处理]

标本检验后，必须经过消毒处理后才能排放入下水道内。所用盛尿容器及

试管等须经 30—50g 儿漂白粉澄清液或 10g/L 次氯酸钠液中浸泡 2h，也可

用 5g／L 过氧乙酸浸泡 30—60min，再用清水冲洗干净。

（2）常规检查

(一)、尿量

随气候、出汗量、饮水量等不同而异，一般健康成人约为 1．0—1．5L／

24h，即 1m1／(h/kg 体重)；小儿按 k8 体重计算尿量较成人多 3—4倍。

(二)、颜色

根据尿的颜色进行报告：淡黄色、深黄色、褐黄色、红色、乳白色、深红

如浓茶、红茶色、乳白色

(三）、透明度

分为透明、微浑、浑浊、明显浑浊、乳糜状等。

（3）生化检查

[仪器及试剂]

仪器盈东 URISCAN

试剂盈东尿十一联试纸

[操作]

把试纸条全部浸没于尿液中约 3-5 秒后，取出放于盈东 URISCAN

的试纸条架上测定。

（4）尿沉渣检查

1）非染色尿沉渣镜检（门诊）


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1．取刻度离心管，倒入混合后的新鲜尿液 10ml，1500r／min 离心 5min。

2．待离心停止后，取出离心管，弃去上层清液，留下 0.2m1 沉渣，轻摇

离心管，使尿沉渣有形成分充分混。

3．取尿沉渣 0．02m1，滴在载玻片上，用 18mm×18mm 的盖玻片覆盖。

4、结果判断

尿沉渣镜检观察，用 10×10 镜头，观察其中有形成分的全貌及管

型。用 10×40 镜头观察鉴定细胞成分和计算数量，应观察 10 个视

野所见低和高值，记录结果。管型用低倍镜鉴定，但计数数量

应低倍镜观察 20 个视野，算出一个视野的平均值，记录结果。

2）UF-100 尿沉渣分析（病房）

在尿生化检查完成后，立即把试管架放于 UF-100 的进架仪上，进行尿沉

渣分析。如果结果发现以下情况者应手工镜检。（镜检条件）

3）特殊规定

在检验尿常规时,所有工作人员及进修实习同志,如发现以下情况者,当用

显微镜进行复检,登记备查.

1.未用 UF-100 尿沉渣分析时所有样本必须做镜检.

2.尿常规如发现尿干化学和尿沉渣结果发生偏差.

3.尿 UF-100 正常,但尿蛋白为阳性或尿 NIT 为阳性时.

4.尿干化学和尿 UF-100 均正常,但病人是肾科或泌尿科时.

5.其他临床指定必须镜检的.

（5）临床意义

1）、颜色


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



正常尿液因含尿色素可呈淡黄色，尿液浓缩时，颜色可呈深黄色，并受某

些食物及药物的影响。病理性尿色可呈褐黄色、红色、乳白色等，均应报

告。尿色深红如浓茶样见于胆红素尿；红茶色见于血尿、血红蛋白尿；乳

白色可能为乳糜尿、脓尿。

2）、尿量

增多见于：

1．生理性：饮水过多，饮浓茶、咖啡及酒精类或精神紧张等。

2．病理性：常见于糖尿病、尿崩症、慢性肾炎及神经性多尿等。

减少见于：

1．生理性：饮水少、出汗多等。

2．病理性：常见于休克、脱水、严重烧伤、急慢性肾炎、心功能

不全、肝硬变腹水等。流行性出血热少尿期、尿毒症、急慢性肾功

能衰竭等。

3）、非染色尿沉渣镜检

(1)．尿内白细胞增加，表示泌尿系统有化脓性炎症。红细胞增加，常见

于肾小球肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤。

(2)．透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中；当有轻度或暂时性肾或循

环功能改变时，尿内可有少量透明管型；在肾实质性病变如肾小球肾炎

时，可见较多的颗粒管型。

(3)．红细胞管型的出现常见于急性肾小球肾炎等。颗粒管型的出现，提

示肾单位有淤滞的现象。脂肪管型的出现，见于慢性肾炎肾病型及类脂性

肾病。

(4)．在慢性肾功能不全时，尿内出现肾衰竭管型，提示预后不良。

(5)．蜡样管型的出现提示肾脏有长期而严重的病变，见于慢性肾小球肾

炎的晚期和肾淀粉样变时。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



A6、一小时尿沉渣计数

[标本收集]

患者先排尿弃去，准确收集 3h 尿液于清洁干燥容器内送检(标本留取时间

5：30-8：30)。

[操作]

手工法

准确测量 3h 尿量，充分混合。取混尿液 10m1，置刻度离心管中，1500r

／min 离心 5min，用吸管吸弃上层尿液 9m1，留下 lm1，充分混。吸取

混尿液 1滴，注于血细胞计数板内。细胞共数 10 个大方格，管型计数

20 个大方格。

仪器法（UF-100 操作）

准确测量 3h 尿量，充分混合。取混尿液 10m1，倒入 UF-100 专用的试管

内，直接上机测定，读出定量的尿液细胞数。乘以 1000 除以 3即得 1小

时细胞数。

[计算]

1000 3 小时尿总量 ml 数

1 小时细胞数＝ 10 大方格细胞总数×──×─────────

10 3

20 大方格管型总数 1000 3 小时尿总量 ml 数

1 小时管型数＝ ─────────×──×────────

2 10 3

式中：1000 为μl换算成 m1 数；10 为尿液浓缩倍数。

[参考值]

红细胞: 男性＜3万／h; 女性＜4万／h

白细胞: 男性＜7万／h; 女性＜14 万／h

管型: ＜3400／h


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



[附注]

1．尿液应新鲜检查，pH 应在 6以下，若为碱性尿，则血细胞和管型易溶

解。

2．被检尿液比重好在 1．026 以上，如小于 1．016 为低渗尿，细胞易

破坏。

3．如尿中含多量磷酸盐时，应加入少量稀醋酸液，使其溶解；但切勿加

酸过多，以免红细胞及管型溶解；含大量尿酸盐时，应加温使其溶解，以

便观察。

[临床意义]

1．急性肾炎患者红细胞增加。

2．肾盂肾炎患者白细胞可明显增加。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



A7、尿乳糜定性检查

脂肪尿是指混有脂肪的尿液。而乳糜尿是指乳糜微粒与蛋白质混合，致使呈乳化

状态的浑浊的尿液。

[原理]

脂肪可溶解于乙醚中，而脂肪小滴可通过染色识别。

[试剂]

1．乙醚(AR)；

2．苏丹 m醋酸乙醇染色液：5％乙醇 10m1，冰醋酸 90m1，苏丹 m粉末一

药匙，先将乙醇与冰醋酸混合，再倾入苏丹 m粉末，使之

充分溶解；

3．猩红染色液：先配 70％乙醇和丙酮 1：1溶液，后将猩红加入至饱和为

止。

[操作]

1．取尿 5一 10m1，加乙醚 2—3m1，混合振摇后，使脂肪溶于乙醚。静置

数分钟后，2000r／min 离心 5min。

2．吸取乙醚与尿液的界面层涂片，加苏丹 m醋酸乙醇染色液或猩红染色

液 1滴。

3．镜检观察是否有红色脂肪小滴。

[结果判断]

1．浑浊尿液因加乙醚而澄清，则为脂肪或乳糜尿。

2．镜检下可见红色脂肪滴。

[附注]

1．尿液中加少量饱和氢氧化钠，再加乙醚，有助于澄清。

2．将分离的乙醚层隔水蒸干，若留有油状沉淀，也可加苏丹 m，镜检证实

有无脂肪小滴。

[临床意义]

1．正常人为阴性。

2．因丝虫或其他原因阻塞淋巴管，使尿路淋巴管破裂而形成乳糜尿。丝

虫病患者的乳糜尿的沉渣中常见红细胞，并可找到微丝蝴。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



A8、大便常规

（1）标本采集

1．采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别，如一般检验留取新鲜

指头大小(约 5g)即可，放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送

检，标本容器好用内层涂腊的硬纸盒，便于检查后焚毁。血吸虫毛

蝴孵化则留全量新鲜便(不少于 30g)。细菌检查的粪便标本应收集于灭

菌封口的容器内，勿混入消毒剂及其它化学药品。

2．检查蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子，在清晨排便前由肛门四周拭取标

本，也可用棉拭子拭取，但均须立即镜检。

3．检查阿米巴滋养体，应于排便后立即检查。冬季需采取保温措施，迅

速送检。

4．不应该采取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液，可使柔弱

的原虫致死。用白明胶膜法检查粪便中的胰蛋白酶活性时，可因尿液

中存在溶解白明胶的物质而导致其检查结果错误的增高。粪便标本中

也不可混入植物、泥土、污水等，因腐生性原虫、真菌抱子、植物种

子、花粉易混淆实验结果。

5．盛粪便标本的容器必须有盖，有明显标记。粪便标本应选择其中脓血

粘液等病理成分，若无病理成分，可多部位取材。采取标本后，应在

一小时内完成检查，否则可因 9H 及消化酶等影响，而使粪便中细胞成

分破坏分解。

6．检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数，应收集 24h 粪便送验。

7．隐血试验，应嘱患者收集标本前 3日禁食动物性食物。连续检查 3

天，并选取外表及内层粪便。收集标本后须迅速进行检查，以免因长

时间放置使隐血反应的敏感度降低。

8．粪胆原定量检查应收集二天的粪便，混合称量，从其中取出约 20g 送

验。查胆汁成分的粪便标本不应在室温中长时间放置，以免阳性率减

低。

9．脂肪定量检查时，应先食定量脂肪食，每天进食脂肪 50—1508，连续

6天。从第三天起，收集 72h 粪便，也可定时口服色素(刚果红)，作为

留取粪便的指示剂，将收集的粪便混合称量，从中取出 608 左右送

检。简易法为在正常膳食情况下，收集 24h 的全部粪便，混合称量，

从其中取出约 60g 送检，测脂肪含量。

10．细菌检验用标本应全部用无菌操作收集。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



（2）常规检验

1）颜色

可根据观察所见报告，如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。

正常粪便因粪胆素而呈棕黄色，但可因饮食、药物或病理原因影响而改变

粪便颜色。灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疽、胆汁减少或缺

乏。绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时。红色见于下消化道出

血、食用西红柿、西瓜等。柏油样便见于上消化道出血等。酱色常见于阿

米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。米泔水样见于霍乱。

2）性状

可报告为软、硬、糊状、泡沫样、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘

液脓样、有不消化食物等。正常时为有形软便。

1．球形硬便：便秘时可见。

2．粘液稀便：见于肠壁受刺激或发炎时，如肠炎、痢疾和急性血吸虫病

等。

3．粘液脓性血便：多见于细菌痢疾。

4．酱色粘液(可带脓)便：多见于阿米巴痢疾。

5．稀汁样便:可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及隐孢子虫感

染。

6．米泔样便并有大量肠粘膜脱落，见于霍乱、副霍乱等。

7．扁平带状便：可能因直肠或肛门狭窄所致。

3）寄生虫虫体

蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体，肉眼即可分辨。钩虫虫体常需将粪便

冲洗过筛后方可看到。服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。驱绦虫后应仔

细寻找有无虫头。

4）直接涂片镜检

1．洁净玻片上加等渗盐水 1—2滴，选择粪便的不正常部分，或挑取不同部

位的粪便做直接涂片检查。

2．好取大玻片，制成涂片后，应覆以盖片。涂片的厚度以能透过印刷物字

迹为准。

3．在涂片中如发现疑似包囊，则在该涂片上加 1滴碘液，在高倍下仔细鉴

别，如仍不能决定时，可取全量粪便浓缩法检查。

4．虫卵的报告方式：未找到者注明“未找到虫卵”，找到一种报告一种，找

到几种报告几种，并在该虫卵后面注明数量若干，以低倍视野计算。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



5．应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别，并应注意有无肌

纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。若大量出现，则

提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。

6．细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染

色)、上皮细胞、巨噬细胞等。

7．夏科—雷登(Charcot—Leyden)结晶：为无色或浅黄色两端尖而透明具有

折光性的菱形结晶，大小不一。常见于肠道溃疡，尤以阿米巴感染粪便中

易检出。过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。

8．细菌：占粪便净重的 l／3(4000 亿／g干粪)，正常菌群主要是大肠杆菌

和肠球菌，占 80％；而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过

10％；芽胞茵(如梭状菌)和酵母菌为常住菌，但总量不超过 10％。正常菌

群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致，除涂片染色找细菌外，应采

用不同培养基培养鉴定。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



A9、虫卵及包囊浓缩检查

（1）漂浮法

本法适用于钩虫卵等线虫类虫卵。

操作

取拇指(蚕豆)大小粪便 1块，放于大号青霉素瓶或小酒杯内，先加入少量

饱和盐水(粗食盐 400g 加水 1000m1，应成饱和液，煮沸、冷却后，取上清

液)，用玻棒将粪便充分混合，再加入饱和盐水至瓶口。也可用硫酸镁浮

聚液，即硫酸镁 1858、食盐 2908 溶于 1L 水中，比重为 1，230，用洁净

载玻片覆盖瓶口，静置 30 一 40min 后，平执载玻片向上提拿，翻转后镜

检。

（2）清水沉淀法

1．取粪便 208 左右，置小搪瓷杯中，加水少许，并用竹签捣碎使成糊

状。

2．用 16 孔／cm 或 40 孔／寸之铁筛或纱布过滤，除去粗糙粪质，滤入三

角烧瓶内。再加清水约 500m1，静置 20、30min，小心倾去上面 3／4的液

体。

3．再加清水 500m1，混后静置 30min，小心倾去上面 4／5液体。

4．再加清水 500m1，静置 30min，倾去上面的水，留下底部沉淀，混合后

用吸管取沉淀镜检。

（3）原虫及包囊碘液染色法

染剂 D’Antoni 氏碘液：取碘化钾 1．Og，溶于 100m1 蒸馏水中，再加入

碘 1．58 溶解。

操作


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



1．用生理盐水涂布粪便于载玻片上，再滴加碘液 1—2滴混，覆以盖

片。

2．病理粪便查滋养体时，应尽可能在 15min 内检查完毕。

3．包裹染色后，包囊壁、包涵体、细胞核均清楚可见。

（4）血吸虫卵沉淀孵化法

操作

1．取新鲜标本约 308，放入广口容器内，加入少量清水，用长柄搅拌器将

粪调成糊状。

2．通过金属纱网(40 孔／寸)或两层纱布滤去粪渣，将滤液放入 500m1 尖

底量杯或三角烧瓶内。

3．加清水至容器口，静置 20 一 30min，倾去上层清液，将沉渣移入三角

烧瓶内，加清水至接近瓶口，静置 15min。

4．如此操作共 3次，待上层液体澄清即可，勿超过 2h。

5．也可用自动换水装置小心地洗至上液澄清，不冲去沉淀。

6．放入 25—30℃温箱或温室中，孵化 4—6h，观察有无作一定方向运动

的毛蚴。

7．次晨复查，出具报告。

8．孵化阴性应吸取沉渣涂片，注意有无寄生虫卵。

报告方式

“毛蚴沉孵阳性”或“毛蚴沉孵阴性”。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



附注

1．自来水中如含氯含氨浓度较高者应将水预先煮沸，或用大缸预先将水

储存以去氯。也可在水中加硫代硫酸钠(120kg 水中加 50g／L 硫代硫酸钠

6m1)以除去水中的氯或氨。

2．农村如使用河水者，应防止水中杂虫混入，对所换的水应先煮沸，冷

却后使用。

3．如水质浑浊，可先用明矾澄清(100k8 水约用明矾 38)。

4．毛蚴孵出时间与温度有密切关系，高于 30℃仅需 1—3h，25—30℃4—

6h，而小于 25℃应过夜观察。如室温过高，为防止毛蚴逸出过早，可用

108／I，盐水换洗，但后换水孵化时，必须用淡水，不可含盐。

A10、隐血试验

上消化道有少量出血时，红细胞被消化而分解破坏，由于显微镜下不能发现，故

称为隐血。

（1）免疫学检测法

[原理]

大便隐血的免疫一步检验法是一个高灵敏度的夹心式酶联免疫测定法。该

法采用抗人血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，特异地针对粪便样品中

的人血红蛋白。因此，本试验不受动物血红蛋白的干扰，试验前不须禁食

肉类。

[操作]

取一片洁净干燥的载玻片，滴加 2—3滴蒸馏水，取粪便小许，调成均

混悬液。取便隐血试纸条，按说明书操作，将试纸条的反应端浸湿。在

5min 内观察结果。若反应线(T)和质控线(C)同时呈蓝色色带即为阳性；若

只有 C线呈色为阴性；若丁线与 C线均不显色，说明试验无效。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



[附注]

1．敏感性和特异性

(1)敏感性：

样品中血红蛋白浓度超过 0．2μg／m1，就可得到阳性结

果。

(2)特异性：

便潜血免疫一步检验法是特异对人体血红蛋白的检验，样品

中若含有如下干扰物，实验结果不会受影响：

鸡血红蛋白 500μg／ml

牛血红蛋白 500μg／m1

马血红蛋白 500μg／ml

猪血红蛋白 500μg／m1

羊血红蛋白 500μg／m1

兔血红蛋白 500μg／m1

辣根过氧化酶 200μg／m1

2．试验局限性

(1)本法可以帮助医生早期发现胃肠道病变，然而，由于家族性息肉或直

肠癌可能不出血，或间断性出血，或出血在粪便中分布不均，都可造成

阴性结果。

(2)本法对正常人检验有时也会得到阳性结果，这是由于某种刺激胃肠道

的药物造成便潜血所至。

(3)本检验法只能作为筛选或辅助诊断用，不能替代胃镜、直肠镜、内窥

镜和 X光检查。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



[临床意义]

1．消化道出血时(如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等)本试

验可阳性。

2．消化道恶性肿瘤时，粪便隐血可持续阳性，溃疡病时呈间断性阳性。

3．本法可作为消化道恶性肿瘤普查初筛试验。

（2）试带法

国内外生产以四甲基联苯胺为显色基质的隐血试验试带，使用方便，患者

也可自留标本检测。

（3）邻甲联苯胺法

[原理]

血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化过

氧化氢，放出新生态氧，将受体邻甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝

色。

[试剂]

1．10g／L 邻甲联苯胺(o-tolidine)溶液：

取邻甲联苯胺 18，溶于冰醋酸及无水乙醇各 50m1 的混合液中，置

棕色瓶中，保存于 4℃冰箱中，可用 8—12 周，若变为暗色，应重

新配制；

2．3％过氧化氢液

[操作]

1．用竹签挑取少量粪便，涂在消毒棉签上或白瓷板上。

2．墒加 0．15L/L 邻甲苯胺冰乙酸溶液 2—3滴于粪便上。

3．滴加 3％过氧化氢 2—3滴。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



4．立即观察结果，在 2min 内显蓝色为阳性。

[结果判断]

阴性：加入试剂 2min 后仍不显色。

十，加入试剂 10s 后，由浅蓝色渐变蓝色。

2 十：加入试剂后初显浅蓝褐色，逐渐呈明显蓝褐色。

3 十：加入试剂后立即呈现蓝褐色。

4 十：加入试剂后立即呈现蓝黑褐色。

[附注]

1． O—tolidine[3，3’-Dimethyl-(1，1’-biphenyl)—4，4’-

Diamine， Cl4 Hl6 N2,MW212．3]，中文名称邻甲联苯胺，亦称邻联甲苯

胺。另有，O—toluidine(2-Aminot01uene，C7H9N，MWl07。2)，中文名

称邻甲苯胺，可用于血糖测定，两者应予区别。

2．粪便标本必须及时检查，以免灵敏度降低。

3．3％过氧化氢必须有效，应进行阳性对照试验，将过氧化氢滴血片上，

产生泡沫，或滴加于重铬酸钾硫酸液，显褐色示有效。

4．强调实验前三天内禁食动物血、肉、肝脏及富含叶绿素食物、铁剂、

中药，以免假阳性反应。齿龈出血、鼻出血、月经血等均可导致阳性反

应。

5．用具应加热处理(如试管、玻片、滴管等)，以破坏污染的过氧化物

酶。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



A11、脑脊液检验

（1）标本处理

1．标本送验必须及时，收到标本后应立即检验。久置可致细胞破坏，影响细

胞计数及分类检查；葡萄糖分解使含量降低；病原菌破坏或溶解。

2．细胞计数管应避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用 EDTA 盐抗凝。

（2）一般性状检查

主要观察颜色与透明度，可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄

浑浊、灰白浑浊等。脓性标本应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌，并应

及时接种培养基。

1）红色：

如标本为血性，为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤，应注意：

(1)将血性脑脊液试管离心沉淀(1500r／min)，如上层液体呈黄

色，隐血试验阳性，多为蛛网膜下腔出血，且出血的时间已超

过 4h。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿刺损伤

或因病变所致的新鲜出血。

(2)红细胞皱缩，不仅见于陈旧性出血，在穿刺外伤引起出血时也

可见到。因脑脊液渗透压较血浆高所致。

2）黄色：

除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时，也可呈黄色。黄

疸患者的脑脊液也可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。

3）米汤样：

由于白(脓)细胞增多，可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎。

4）绿色：


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。

5）褐或黑色：

见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。

（3）潘氏(Pandy)球蛋白定性试验

[原理]

脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊

或沉淀。

[试剂]

5％苯酚溶液：

取纯苯酚 25m1，加蒸馏水至 500m1，用力振摇，置 37℃温箱内 1—2天，

待完全溶解后，置棕色瓶内保存。

[操作]

取试剂 2—3m1，置于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液 l一 2滴，衬以黑

背景，立即观察结果。

[结果判断]

阴性：清晰透明，不显雾状。

极弱阳性(土)：微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。

弱阳性(十)：灰白色云雾状。

阳性(2 十)：白色浑浊。

强阳性(3 十)：白色浓絮状沉淀。

强阳性(4 十)：白色凝块。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



[临床意义]

正常时多为阴性。有脑组织和脑膜疾患时常呈阳性反应，如化脓性脑膜

炎、结核性脑膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰白质炎、流行性脑

炎等。脑出血时多呈强阳性反应，如外伤性血液混入脑脊液中，亦可呈阳

性反应。

（4）细胞计数

1）细胞总数

[器材及试剂]

1．细胞计数板；

2．红细胞稀释液(配法同血液红细胞稀释液)。

[操作]

1．对澄清的脑脊液可混后用滴管直接滴入计数池，计数 10 个大方

格内红、白细胞数，其总和即为每μl的细胞数。再换算成每升脑

脊液中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞×10，即得

每μl脑脊液中细

胞总数。如用升表示，则再乘以 10。

2．浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混的脑脊液 20μl，

加入含红细胞稀释液 0．38m1 的小试管内，混后滴入计数池内，

用低倍镜计数 4个大方格中的细胞总数，乘以 50，即为每μl脑脊

液的细胞总数。

2）白细胞数

1．非血性标本：

小试管内放入冰乙酸 1—2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去

之，然后滴加混的脑脊液 3—4滴，数分钟后，混充入计数池，按

细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



2．血性标本：

将混的脑脊液用 1％冰乙酸溶液稀释后进行计数。为剔除因出血而来

的白细胞数，用下式进行校正。

每μl脑脊液内白细胞校正数＝

每μl脑脊液内白细胞未校正数

每μl脑脊液内内红细胞数×每μl血液内白细胞

- ──────────────────────

每μl血液内红细胞

[参考值]

正常人脑脊液中无红细胞，仅有少量白细胞。

成人：(0—8)×106/L

儿童：(0 一 15)×106/L

多为淋巴细胞及大单核细胞，两者之比约为 7：3，偶见内皮细胞。

[附注]

1．计数应及时进行，以免脑脊液凝固，使结果不准确。

2．细胞计数时，应注意新型隐球菌与白细胞的区别。前者不溶于乙酸，

加优质墨汁后可见不着色的荚膜。

3．计数池用后，应用 75％乙醇消毒 60min。忌用苯酚消毒，因有损计数

池的刻度。

3）细胞分类

<1>．直接分类法：

白细胞计数后，将低倍镜换为高倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核的

形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞，应

数 100 个白细胞，并以百分率表示。若白细胞少于 100 个，应直接写

出单核、多核细胞的具体数字。

<2>．染色分类法：

如直接分类不易区分细胞时，可将脑脊液离心沉淀，取沉淀物 2滴，

加正常血清 l滴，推片制成均薄膜，置室温或 37℃温箱内待干，进

行瑞氏染色后用油镜分类。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



如见有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤时。

4)、临床意义

1．中枢神经系统病变的脑脊液，细胞数可增多，其增多的程度及细胞的

种类与病变的性质有关。

2．中枢神经系统病毒感染、结核性或霉菌性脑膜炎时，细胞数可中度增

加，常以淋巴细胞为主。

3．细菌感染时(化脓性脑膜炎)，细胞数显著增加，以中性粒细胞为主。

4．脑寄生虫病时，可见较多的嗜酸性粒细胞。

5．脑室或蛛网膜下腔出血时，脑脊液内可见多数红细胞。

(5)细菌直接涂片检查

临床怀疑流行性脑脊髓膜炎或化脓性脑脊髓膜炎时，应作细菌学涂片检查。

操作如下：

1．将脑脊液立即离心沉淀，取沉淀物涂片 2张。

2．涂片应在室温中，或置 37℃温箱中干燥，切勿以火焰烘烤。

3．经火焰固定后，一张涂片用亚甲蓝染色 30s，另一张作革兰染色。

4．注意细胞内外的细菌形态，报告时应予以描述。

(6)真菌检查-新形隐球菌检查

[操作]

1．取脑脊液，以 2000r／min 离心 10min，以沉淀物作涂片，加阿利新兰染

液 l滴，混合，加盖玻片检查。

2．先用低倍镜检查，如发现有新形隐球菌，内部结构清晰，用高倍镜仔细

观察结构，新形隐球菌直径 5—20μm，可见明显的厚膜，并有出芽的球

形孢子。

[报告方式]

涂片找到“隐球菌属”。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



A12、浆膜腔积液检查

（1）标本的收集

1．由穿刺取得的标本为防止细胞变性出现凝块或细菌破坏溶解等，送检及检

查必须及时。

2．为防止凝固，好加入 1008／L 乙二胺四乙酸二钠(EDTA 钠盐)抗凝，每

0．1m1 可抗凝 6m1 浆膜腔积液，及时完成细胞涂片检查。

（2）理学检查

1．记录标本送检量、颜色及透明度，有无凝固物质或沉淀物，可按浆液性、

粘液性、黄色透明、脓样浑浊、乳糜样、血样等报告。

2．测比重前，标本应充分混，其方法与尿比重测定相同。量少时，可用微

量法测定。

（3）浆膜粘蛋白定性试验(Rivalta 反应)

原理

渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。

操作

取 100m1 量筒，加蒸馏水 100m1，滴入冰醋酸 0．1m!(pH3—5)，充分混

，静止数分钟，将穿刺液靠近量筒液面逐滴轻轻滴下，在黑色背景下，

观察白色雾状沉淀的发生及其下降速度等。

结果判断

阴性：清晰不显雾状；

(土)渐呈白雾状；

(十)加后呈白雾状；


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



(2 十)白薄云状；

(3 十)白浓云状。

附注

在滴下穿刺液后，如见浓厚的白色云雾状沉淀很快地下降，而且形

成较长的沉淀物，即 Rivalta 反应阳性。如产生白色浑浊不明显，

下沉缓慢，并较快消失者为阴性反应。

临床意义

1．渗出液中含较多浆膜粘蛋白，故呈 Rivalta 阳性，而漏出液为阴性，

但如漏出液经长期吸收蛋白浓缩后，也可呈阳性反应。

2．炎症性疾患(化脓性、结核性等)蛋白含量多为 408/L 以上 3恶性肿瘤

为 20-40g／L；肝静脉血栓形成综合征为 40—60g／L;淤血性心功能

不全、肾病变患者的胸腹水中蛋白浓度低，为 l一 108／L；肝硬

变的腹水多为 5—20g 儿。

（4）细胞学检查

(一)细胞总数及有核细胞计数

计数方法基本与脑脊液相同，漏出液中有核细胞数量常在

100×106/L 以下；渗出液中有核细胞数量较多，常在 500×106/L

以上。

(二)细胞分类

穿刺液应在抽出后立即离心，用沉淀物涂片后以瑞氏染色法进行分

类。必要时制备稍厚涂片，在干燥前放置乙醚乙醇等量混合液中固

定 30min，用苏木素—伊红(HE)或巴氏法染色查找癌细胞。

(三)临床意义

1．穿刺液中以多形核白细胞为主，提示化脓性炎症或早期结核性积液。

在结核性渗出液的吸收期可见嗜酸性粒细胞增多。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



2．以淋巴细胞增多为主，提示慢性炎症。可见于结核性渗出液、病毒感

染、系统性红斑狼疮的多发性浆膜炎等。

2．以间皮细胞及组织细胞增多为主，提示浆膜上皮脱落旺盛，可见于

淤血、恶性肿瘤等。

五、渗出液与漏出液的鉴别

渗出液与漏出液的鉴别

鉴别点漏出液渗出液

原因非炎症所致炎症、肿瘤或物理、化学刺激所致

外观淡黄浆液性不定，可黄色、脓性、血性、乳糜性

透明度透明或微混大多浑浊

比密低于 1．018 高于 1．018

凝固性不自凝能自凝

粘蛋白定性试验阴性阳性

蛋白总量常小于 25g/L 常大于 30g/L

蛋白总量／血清总蛋白＜0．5 ＞0．5

LD 总活性／血清 LD 总

活性＜0．6 ＞0．6

葡萄糖定量与血糖相近常低于血糖水平

蛋白电泳以白蛋白为主，白

／球比高于血浆电泳谱与血浆相似

有核细胞计数常小于 100×106/L 常大于 500×10

6/L

细菌检查无细菌发现可找到病原菌


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



A13、精液检查

（1）标本收集

用清洁干燥小瓶收集精液，不宜采用避孕套内的精液。

（2）检查内容

记录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。显微镜检查包括精子计

数、活动力、活动率、形态。

1)精子活动率

操作

取新鲜标本混后，在温玻片上用高倍镜观察 100 个精于，计数活

动精于与不活动精子的比例，计算精子活动的百分率。

精子活动率＝ ×100％

参考值

在排精 30—60min 内，应有 70％以上精子为活动精子。

附注

如室温低于 10℃时，应将标本先放入 37℃温育 5—10min 后

镜检。

2)精子活力，取上述新鲜湿片标本，观察精于的活动力，可按下列 5级报

告：

0 级：无活动力，加温后仍不活动。

I 级：不良精子、摆动或抖动，运动迟缓。

Ⅱ级：较好，精子活动方向不明确，不呈直线运动，也不活泼。

Ⅲ级：为中速运动。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



Ⅳ级：良好，为快速直线运动，很快超越一个视野，运动活泼。

3)精子计数

试剂

精子稀释液：碳酸氢钠 58，40％甲醛溶液 1ml，蒸馏水 100m1，待完

全溶解过滤后使用，

操作

1．于小试管内加精子稀释液 0．38m1，吸液化精液 20μl，加入稀释

液内摇。

2．充分摇后，滴入血细胞计数池内，静置 1—2min，待精子下沉

后，以精子头部作为基准进行计数。

3．如精子数少，可计数 2个大方格内精子数，数得总数乘 10 万即为

每毫升精液内精子数，再换算成×109/L 报告。

4．如精子数多，可计数 5个中方格内精子数，加 6个零，即为每 ml

精液内精子数，再换算成×109/L 报告。

参考值

正常男性(10—130)×109/L，

附注

1．收集精液前避免性生活 3—7天。收集精液标本后应在一小时内检

验，冬季应注意保温。

2．出现一次异常结果，应隔一周后复查，反复查 2—3次方能得出比

较正确的结果.

3．如低倍镜、高倍镜检查均无精于，应将精液离心沉淀后再涂片检

查，如两次均无精于，报告“无精子”。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



4)精子形态观察

革兰或瑞氏染色后用油镜观察。

异常精子可有：头部过大、过小、尖细、外缘不齐、双头等；中部消

失、分枝或肿胀；尾部呈双尾，卷曲度短或消失(缺尾)。

参考值

正常人精液中异常精子应少于 20％，如超过 20％为不正常。

5)细胞

正常人精液中：红、白细胞＜5／高倍视野。

6)pH

正常 7．2—8．0(平均 7．8)

7)其他成分

精液中可以有结晶体、卵磷脂小体、淀粉样体、脂滴、脱落上皮细胞

等。

（3）临床意义

1．正常精液呈灰白色，久未排精者可呈淡黄色，离体 30min 后，完全液化。

根据精液检查结果，临床上常用于诊断男子不育症及观察输精管结扎术后

的效果。

2．正常精子活动力一般在Ⅲ级以上，如 0级和 I 级精子＞40％，可成为男性

不育的原因。

3．精索静脉曲张症患者精液中常出现形态不正常的精子。

4．血液中有毒性代谢产物、接触铅等污染物、应用大剂量放射线及细胞毒药

物等可使精子形态异常。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



A14、前列腺液检查

（1）标本收集

临床医师作前列腺按摩术后，采集标本于清洁玻片上，立即送检。

（2）检查内容

记录液体颜色、是否混有血液、粘稠度(有无脓块)。湿片镜检，高倍镜下

观察白细胞、红细胞、卵磷脂小体，其次为上皮细胞、精子、淀粉样体

等。革兰染色后检查细菌。

（3）报告方式

1．卵磷脂小体：报告在高倍视野中分布数量。

2．白细胞、红细胞：报告方式与尿液同。

3．如找到精于、上皮细胞应报告。

（4）参考值

正常人卵磷脂小体为多量或满视野，白细胞＜10／HP，红细胞＜5／HP。

（5）临床意义

前列腺炎时，白细胞增多，可找到细菌，卵磷脂小体常减少。前列腺癌

时，可有血性液体，镜检见多量红细胞、可见癌细胞。

A15、阴道分泌物检查

阴道分泌物是女性生殖系统分泌的液体，其中主要是由阴道分泌的液体。

（1）PH 值

收到标本（干棉拭子），先用 PH 试纸测 PH 值，并记录。

（2）清洁度


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



取阴道分泌物，用生理盐水涂片，高倍镜检查，根据所含白细胞(或脓细

胞)、上皮细胞、杆菌、球菌的多少，分成 I—Ⅳ度，判定结果见表

阴道涂片清洁度判定表

清洁度杆菌球菌上皮细胞脓细胞或白细胞

I 多 - 满视野 0-5／高倍视野

Ⅱ 少少 1／2 视野 5—15／高倍视野

Ⅲ 少多少 15—30／高倍视野

Ⅳ - 大量 - 大于 30／高倍视野

临床意义

清洁度 Ⅰ—Ⅱ度内视为正常，Ⅲ、Ⅳ度量为异常，多数为阴道炎。可

发现阴道霉菌、阴道滴虫等病原体。单纯不清洁度增高而不见滴虫、

霉菌者，可见于非特异性阴道炎，

（3）滴虫检查

阴道滴虫呈梨形，比白细胞大 2倍，顶端有鞭毛 4根，在 25—42℃温度

下可活动。因此，在寒冷天气，标本要采取保温措施。滴虫活动的适

pH 值为 5．5—6．0。

（4）霉菌检查

在湿片高倍镜下见卵圆形抱于，革兰染色油镜下可见革兰阳性孢子或假

菌丝与出芽细胞相连接，成链状及分枝状。找到阴道霉菌是霉菌性阴道

炎的诊断依据。

（5）线索细胞检查

为阴道鳞状上皮细胞黏附多数加德纳菌所致，生理盐水涂片可见细胞边

缘呈锯齿状，细胞已有溶解，其上附着大量加德纳菌及厌氧菌，表面毛

糙，有斑点和大量细小颗粒。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



A16、胃液检查（1）基础胃酸分泌量及大胃酸分泌量测定

1）标本收集：先将晨间空腹残余胃液抽空弃去。连续抽取 l 小时胃液放入瓶内，作为一个标本计胃液量。用酸度计准确测定氢离子浓度(也可用 pH 纸测定，或做胃酸浓度滴定)。一次皮下注射五肽胃泌素(Pentagas—trin)6μg／kg，注后每 15min 收集一份标本，连续抽 4次，分别用上法测胃液量、胃酸氢离子浓度。

2）胃酸浓度滴定：

取澄清胃液 5m1，加 0．02％苯酚磺酞指示剂(苯酚磺酞 50mg，加0．01m01 儿氢氧化钠 14．1m1，研磨溶解，加蒸馏水至 250m1)2 滴，如呈黄色，则表示有胃酸存在。用 0．1mo!／L 氢氧化钠溶液滴至粉红色为止(终点 pH7．0)，所耗去氢氧化钠毫升数乘 20，即为胃酸浓度 mm01儿。

3）计算方法:

(1)基础胃酸分泌量(BAO):注射胃泌素前 1h 胃液总量乘胃酸浓度(mm01／L)。

(2) 大胃酸分泌量(MAO)：取注射五肽胃泌素后的 4 次标本，分别记录其胃液量和胃酸浓度，其胃酸浓度之和即为：_MAOmmol／h

4）参考值 BAO：2-5mm0l／h； MAO：15-20mmol／h

（2）pH 值测定可先用 pH 试纸测定，凡 pH 值＞3者，用 pH 计测定氢离子浓度。

参考值正常时 pH 为 0．8。1．8；pH3．5。7．0 时为酸度过低 3pH＞7．0为真性胃酸缺乏。

临床意义 1．胃酸增高可见于十二指肠球部溃疡、胃泌素瘤、幽门梗阻、慢性胆囊炎等。 2．胃酸减低可见于胃癌、萎缩性胃炎、继发性缺铁性贫血、口腔化脓感染、胃扩张、甲状腺功能亢进和少数正常人。 3．胃酸缺乏是指注射五肽胃泌素后仍无盐酸分泌，常见于胃癌、恶性贫血及慢性萎缩性胃炎。 4．影响胃液酸度有多种原因，如患者精神状态、神经反射、烟酒嗜好、便秘及采集方法等，因此，解释实验结果应综合分析。

（3）常规镜检镜检胃液，报告镜检的结果 A17。白带检查


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B1、血氨测定

[测定步骤]

① 打开后盖，放进 4节电池按 ON 键。

② 定标按 FACT 键至 CHE 按 START 键。

③ 180 秒后，将黑色条放进、定标，测试面均朝下，关上盖。

④ 20 秒后，显示数值，91~111 之间为状态佳。

⑤ 用玻璃细管套上塑料头，吸一管血清，用纸擦净管外多余血清。

⑥ 把样本注入试纸条。同时按 START 键，开始计时。看清试纸条型号

（如 F4），按 FACT 键调至所需型号。

⑦ 180 秒后，放入糟，盖上。20 秒后，即读数为测得值，单位为 ug/dl.

⑧ 按 OFF 键，电池取出。

[参考范围]

140ug/dl 以下


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B2、17—KS 测定

[试剂]

试剂名成份及贮存量

Reagent 1 KOH(1mol/L 、5.6%) 550ml

Reagent 2 96%乙醇 165ml

Reagent 3 显色剂（1.3 一二硝基酚）2~8℃保存 40ml

Reagent 4 KOH(6mol/L、26.8%) 100ml

DHEA 标准液 2-8℃贮存 2ml

滤柱 50 支

试管带盖玻璃试管 54 支

25%HCL

乙醚

[试剂准备]

乙醚每个试验 4ml，分离漏斗中放入 200ml 乙醚和 50ml 蒸馏水.

加盖振摇.避免压力过高.应开盖几次然后将水除去。

[标本收集及准备]

需 24h 尿液，加 25%乙酸可延长稳定性（这样保持 PH5）充分混

尿液记录尿量，留取 100ml 以备分析。

[分析步骤]

A.第一次测试前仔细阅读手册。

B.在开始第 3步骤时.17-OH 和 17-KS 可同时平行操作。

C.一次测定不能超过 20Tests。

D.第 4 步骤之后实验中断、标本需 2~8℃过夜。

E.标本避免光线直照。

F.为保持较好的实验，每次试验中应带质控。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



[操作步骤] 1. 水解

1.1 每支试管标记实验号及质控,外加试剂空白和标准。 1.2 每管加 5ml 标本和质控。 1.3 空白和标准管加 5ml 蒸馏水。 1.4 每管加 1.0ml 25%HCl 混。 1.5 沸水浴 10 分钟,10 分钟后冷却至室温。 1.6 测定管水解之后如沉淀出现,则应离心。

2. 滤柱准备 2.1 滤柱标记:测定、质控、空白及标准。 2.2 去盖、加 7ml 蒸馏水、加盖，混，不让树脂下沉，去盖，扭去头让柱流入到废液溶器中。

3. 柱的吸附 3.1 柱中加入水解标本，让其完全流经，去除洗出液。 3.2 每柱加 2×5.0ml Reagent 1 . 加第二次前,须完全流经.去除柱头的水滴.去除洗出液。

4. 洗涤 4.1 将柱放入标记好的收集管中。 4.2 每柱加 3×1.0ml Reageut 2.每次须完全流经,去柱。 4.3 充分混洗出液,沉定物不影响测定。注意:此步骤后中断,2℃~8℃过夜

5. 标准及试剂空白 5.1 每个标本、质控、3标准及空白准备一根抽提试管。 5.2 分别吸取 1.0ml 洗出液到相应的抽提管中。 5.3 标准管中加 10、20、50ul DHEA 标准溶液。

6. 显色反应和乙醚抽提 6.1 每管中(标本、质控、标准和试剂空白) 0.5ml Reagent 3 和 1.5ml Reageut 4。 6.2 盖紧,混。 6.3 35℃孵育 30′(避光、不超过 35℃)。 6.4 以冰或冷水浴迅速冷却至室温。 6.5 开盖加 4.0ml 水洗过乙醚,立即盖紧盖子。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



6.6 混架上振动抽提管 3-4′注意:充分混 ,重复性取决于提抽效果,乙醚层变为粉红色(混后 2分钟),立即将乙醚层比色。 6.7 上层粉红色乙醚层含 17-KS。

测定: 520nm 波长、比色 [计算]

A=20/S×u (ug17-ks/ml) Mg17-ks/24h=A/1000×3/5×24h 尿量 Umol17-ks/24h = mg17-ks/24h×3.467

[参考范围]

<8 岁儿童 0-3mg17-ks/24h (0-10.4umol/24h)

女 7-20mg17-ks/24h (24.3-69.3umol/24h)

男 10-25mg17-ks/24h (34.7-86.7umol/24h)

<1>水解:

U S B

量 5ml 尿 5mlD.water 5mlD.water

25%HCL 1.0ml 1.0ml 1.0ml

───────────────────────

沸水浴 10ˊ

<2>滤柱准备：

去盖+7mlD.water 加盖、混、去盖、去头、去除废液

<3>吸附：

U S B

加入水解标本 √ √ √去除洗出液

Reagent 12×5.0ml √ √ √ 去除洗出液

<4>洗涤：（准备收集）

U S B

Reagent 2 3×1.0ml √ √ √ 收集洗出液

───────────────────────

充分混合，此步中断 2℃-8℃过夜


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



<5>标准及空白：

U S B

洗出液 1ml 1ml 1ml

DHEA 标准溶液 / 20ul /

<6>显色反应：乙醚抽提

U S B

Reageut 3 0.5ml 0.5ml 0.5ml

Reageut 4 1.5ml 1.5ml 1.5ml

───────────────────────

35℃避光孵育 30′

───────────────────────

水洗乙醚 4ml 4ml 4ml

振动混 3-4 分钟将乙醚层比色、波长 520nm


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B3、17—OH 测定

[试剂]

试剂名成份量

Reagent A NaBH4 5g

Reagent B 24%乙酸 50ml

Reagent C NaIO4 20g

Reagent D 10mol/L,30%NaOH 50ml

Reagent 1 1mol/L,5.6%KOH 550ml

Reagent 2 96%乙醇 165ml

Reagent 3 显色剂：1.3 一二硝基苯 40ml

Reagent 4 6mol/L,33.7%KOH 100ml

DHEA 标准 1mg/ml =3.5mmol/L 2ml

滤柱 50 支

提抽管 54 支

另外试剂 0.1N NaOH 乙醚

[试剂准备]

10% NaBH4 溶液 2.0gNaBH4+20ml 0.1N NaOH

10% NaIO4 溶液 5.0gNaIO4+50ml D.water

水洗乙醚(同 17-KS)

[标本收集及分析前准备]

同 17-KS

[分析步骤]

同 17-KS

[操作步骤]

1. 浓缩

1.1 使用 50ml 或 100ml 烧杯、标记标本、质控、标准及空白

1.2 吸 5ml 尿液及质控至烧杯中

1.3 加 5mlD.water 至标准及空白杯中

1.4 用 NaOH 或 HCl 调整标本和质控的 PH 值至 7.0—8.0


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



1.5 每杯中加 1.0ml 新配 10%NaBH4,混

注意:若泡沫过多,加 1—2滴乙醚

1.6 用薄膜盖住烧杯,黑暗中,室温孵育 2h 或过夜

1.7 每杯中加 0.5ml Reagent B ,混

1.8 黑暗中室温孵育 15′

2. 氧化

2.1 每杯加 4ml 新配 10%NaIO4

2.2 用 1.5ml 1N NaOH 调整 PH 至 7.0,混

2.3 35℃避光孵育 60′,其间应混数次

2.4 每杯加 0.5ml Reagent D 35℃ 15′

2.5 水浴冷却,离心 1500×g 2′—3′

3. 柱准备:

同 17—KS

[测定]：

同 17—KS

[计算]

A=20/S×U

Mg17—KS/24h=A/1000×3/5×24h 尿量

Umol7—KS/24h=mg17—KS/24h×3.467

[参考范围] <1y 儿童 <1mg17-OH/24h (<3.5umol/24h)

<10y 儿童 <5mg17-OH/24h (<17.3umol/24h)

男 5—23mg 17-OH/24h (17.3-79.7umol/24h)

女 3—5mg 17-OH/24h (10.4-52.0umol/24h)

>70y 3—12mg 17-OH/24h (10.4-41.6umol/24h)


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B4、VMA

试剂：

Reagent B 1M Tris 75ml

Reagent C 0.2N 醋酸钠冲洗液 550ml

Reagent 1 0.2N 醋酸钠微柱缓冲液 550ml

Reagent 2 4M 碳酸钾缓冲液 30ml

Reagent 3 2 瓶、每瓶 0.4 克 NaIO4

Reagent 4 2 瓶、每瓶 2.5 克 Na2S2O5

VMA 标准 1 瓶

树脂柱 50 支

另外试剂乙醇（分析纯）

1N 乙酸：57.1ml 冰醋酸

+D.water 至 1000ml

试剂准备:

Reagent B. C. 1. 2: 如提供的使用

NaIO4 溶液: 4%Reaent 3+10ml D.water 2-8℃ 稳定 2周

Na2S2O5 溶液:10% Reagent 4+25ml D.water 2-8℃稳定 2周

VMA 标准液:1N 乙酸 5ml 加至 VMA 标准瓶中浓度为 1.2mg

VMA/ml 2-8℃稳定 4周,-20℃稳定 3月

注意:

收集标本前 3天、病人禁食香蕉、香草、巧克力、咖啡、茶及呋喃嘧啶类

药物、包括 2,5 一二羟基苯甲酸和 2,5 一二羟基苯乙酸。

收集:干净容器，加入 15ml 20%HCl(或 12ml 25%HCl)作稳定剂

重要：调整标本 PH 值 1.5~3.5


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



注意: 用尿液质控必须用 0.1N HCl 溶解,若用 D.water 则需加 10ul6N HCl/2.0

ml

操作步骤:

A. 在第一次操作分析前须完整仔细阅读操作手册

B. 让所有试剂和标本到达室温

C. 在非常熟练之前,所有试验必须双份

D. 为有良好的实验操作,每次操作须携带质控

操作过程:

1. 准备标准:

Tube 1:standard So: Oul(=Omg VMA/L) +2.0ml urine

Tube 2:standard S1:25ul(=15mg VMA/L)+2.0ml urine

2. 吸 2.0ml 标本和质控到标记的试管中。

3. 用试剂 B调至 PH 大约 5.5~7.5(PH 指示纸)接近或超过 PH7.5 时会出现

混浊,加少许 1N 乙酸。

4. 准备标准、质控、标本的过滤柱。摇动柱使树脂完全悬浮，让树脂下

沉（避免气泡），去帽、除滴头，让柱完全在架上下流。

5. 加标准、质控、标本到相应的柱中，让其完全流经，去除洗出液。

6. 转移柱子到相应试管中（16×160mm）,每柱中加 10ml Reagent

1 收集洗出液,去除过滤柱。

7. 每管准备测定和空白,测定和空白管加 2.0ml 洗出液。

8. 加 0.2ml Reagent 2 到每管中,混 3~5 秒。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



9. 每支测定管加 0.1ml Reagent 3,每支空白管加 0.2ml Reagent 4,充分

混。

10. 37℃水浴 30′

11. 未冷却测定管中直接加 0.2ml Reagent 4,空白管中加 0.1ml Reagent

3 充分混 .

测定:

在 360nm 波长以 D.water 为空白测出吸光度在 380nm 波长以 D.water 为空

白测出吸光度

计算:

a. △Eso(380)=Eso(380)-EBo(380)△Eso(360)=Eso(360)-EBo(360)

△Es1(380)=Es1(380)-EB1(380)△Es1(360)=Es1(360)-EB1(360)

△ Et(380)=Et(380)-EBt(380) △Et(360)=Et(360)-EBt(360)

b. Net Eso=△Eso(360)-△Eso(380)

Net Es1=△Es1(360)- △Es1(380)

Net Et=△Et(360)- △Et(380)

c. Corr.Es1=Nets1-Netso

d. VMAt(mg/L)=15mg/corr.Es1×NetEt

e. MgVMA/24h = mgVMA/L×24h 尿量

正常范围:

mg VMA/24h:1-8 mg VMA/24h

VMA

So: Oul 标准+2.0ml 尿液

S1: 25ul 标准+2.0ml 尿液

↓

用 B 试剂调整每管 2.0ml 尿液的 PH:5.5-7.5,出现混加少许 1N 乙

酸

↓

摇动使柱完全悬浮,脂下降(无气泡),去帽,去滴头


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



↓

相应标本加入柱中,余液用 3ml D.water 冲洗加入+10ml Reagent

C

到柱中,完全流经,去除洗出液

↓

移柱至相应管中+10ml Reagent 1.收集洗出液,去除柱

↓

每管均设定测定和空白,且每管加 2.0ml 洗出液

↓

“B”和“T”+0.2ml Reagent 2 混 3-5 秒

↓

T B

Reagent 3 0.1ml /

Reagent 4 / 0.2ml

↓

充分混 ,37℃水浴 30 分钟

↓

T B

Reagent 3 / 0.1ml

Reagent 4 0.2ml /

↓

充分混 ,360nm 、380nm 波长比色


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B5、Insulin Autoantibadies(IAA) 胰岛素自身抗体

（1）试剂准备：

1．IAA—IgG 酶标液：1瓶 IAA—IgG 酶标浓缩液(lml)+5ml 稀释液。配制后有

效期 30 天。

2．IAA 标本稀释缓冲液：浓缩的 IAA 标本稀释液(50ml)+200ml 蒸馏水，2—

8℃放置。

3．IAA 冲洗液：浓缩冲洗液(20ml)+蒸馏水(480ml)，2—8℃放置．

4．血清标本准备：25ul 血清+2.5ml 标本稀释液(实际操作

20ulsample+2.0mldelution)

5．显色剂准备：使用前临时配制，显色剂片剂(l 片)+6ml 显色剂缓冲液，放

置于一空瓶中，溶解后 60min 有效．

（2）操作：

1、按需取出包被孔，固定．分别加入阴，阳性质控及已稀释的标本血清

100UL(留取相应的空白孔)封板，留置 2—8℃过夜(12—16h)。

2、取出反应板置室温于纸巾上拍干后，冲洗，每次加 300ul IAA 冲洗液重复

3次，轻拍干．

3、加 l00UL IAA—IgG 酶标液(不包括空白孔)封板室温(25℃土 1℃)放 1h.

4、准备显色荆(见标本准备 5)

5、到时重复 2步骤冲洗．

6、各孔加显色剂 l00ul(包括空白孔)操作按—定节律，不得间断。

7、避光 25℃士 l℃放置 30min．

8、到时加中止液 50ul 连续不间段。

9、比色波长 405nm。

（3）计算

Cut0ff=(N—B)×2．5+B


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B6、Islet Cell Autoantibodies (ICA) 胰岛细胞自身抗体

（1）试剂准备：

1、ICA—IgG 酶标液：1 瓶 ICA—IgG 酶标浓缩液(1ml)+5ml 稀释液。配制后有

效期 30 天。

2、ICA 标本稀释缓冲液：浓缩的 ICA 标本稀释液(50ml)+200ml 蒸馏水，2—

8℃放置．

3、ICA 冲洗液：浓缩冲洗液(20ml)十蒸馏水(480ml)．2—8℃放置．

4 、血清标本准备 :25ul 血清十 2 ． 5ml 标本稀释液 ( 实际操作

20ulsample+2.0ml delution)。

6．显色荆准备：使用前临时配制，显色剂片剂(1 片)+6ml 显色剂缓冲液，放

置于一空瓶中，溶解后 60min 有效。

二．操作:

1、按需取出包被孔，固定，分别加入阴，阳性质控及已稀释的标本血消

100ul(留取相应的空白孔)封板，留置室温(26℃±1℃)lh．

2、取出反应板置室温于纸巾上拍干后，冲洗，每次加 300ul ICA 冲洗液重复

3次，轻拍干．

3、加 100ul ICA—Ig6 酶标液(不包括空白孔)封板室温(25℃士 1℃)放 lh

4、准备显色剂(见标本准备 5)

6、到时重复 2步骤冲洗。

6、各况加显色剂 100ul(包括空白孔)操作按一定节律，不得间断。

7、避光 26℃士 1℃放置 30min.

8、到时加中止液 60ul 连续不间段)。

9、比色波长 405nm．

（3）计算：

Cut0ff＝(N—B)×2．5+B


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B7、脯氨酸肽酶测定(Prolidase Test Kit)

脯氨酸肽酶(PLD)是参与胶原蛋白胞内后一步降解的酶，将富含(羟)脯氨酸的

末端氨基二肽水解，富含于肝细胞浆中临床与实验研究均证实，血清 PLD 活性与

肝纤维化有关，同时肝细胞炎症坏死时释放该酶，因而又可反映肝损害程度．故

广泛用于各类急，慢性肝病的诊断和预后观察．

（1）试剂组成：

1) 样品稀释液：7Oml

2) 基质液：使用前加 5ml 稀释液溶解

3) 终止液：100ml

4) 标准脯氨酸溶液：3ml

5) 显色液：100ml 1 瓶使用前摇。

二、操作方法：

1）样品稀释：取 0．1ml 血清加 0.5ml 稀释液，37℃水浴 24h(稀释血清)

2）活性测定(单位： ul)

试剂空白管标准管测定管对照管

稀释血清／／ 100 100

终止液／／／ 1000

基质液／／ 10O 100

37℃水浴 30’(准确计时)

终止液 500 ／ 1000 ／

离心(2500r／Pm×5min)，取上清液测定

上清液 500 ／ 500 500

标准液／ 500 ／／

显色液 2000 200O 2O0O 2000


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



充分混，88—90℃水浴 10min(准确计时)冷水冷却至室温用空白管调

零，在分光光度计 515nm 比色(A)

3）活性计算：

A 测定管—A对照管

血清 PLD 活性(U/L)= ─────── × [标准浓度] ×2400

A 测定管（0.65）

4）正常人参考值：

932 土 236U/L,无明显性别，年龄差异。

（3）注意事项：

1)由于对照管 A值平均 0.010 土 0．005，常规检测时可免设讨对照而按 0.01

计；

2)空腹静脉血清，—20℃保存半个月活性无变化，溶血标本结果偏高；

3)当 A 测定管＞1．8时，血清宜用冰醋酸倍比稀释后再测定.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B8、I 型糖尿病检测（I 型糖尿病预测，诊断酶联试剂盆）

谷氨酸脱羧酶(GAD)是糖代谢过程中的一种酶，经研究发现其血清中抗体(抗—

GAD，抗—DM— I)升高，影响糖代谢，容易引起 I型糖尿病。本试剂盒采用间接

EIA 法测定血清中 GAD 抗体，用于预测 I 型糖尿病的发生，提前预防，以及用于

糖尿病的分型诊断。

（1）试剂盒组成：

1.抗原包被板(活板条) 6.HRP 稀释液

2.阴阳对照血清 7.显色剂 A

3.阳性对照血清 8.显色荆 B

4.样本稀释液 9.终止液

5.酶结合物 10.洗涤液(30×0．01M PBST)

（2）操作步骤：

1) 按所需人份取出预包被板条放在板架上，剩余板条放回袋中封口

备用．

2) 用去离子水或蒸馏水将 1瓶洗涤液全部稀释至 6O0ml。

3) 样本稀释：先将样本 1：10 稀释，取 1001ul 生理盐水于小塑料

管中，再加 10ul 样本。阴，阳性对照已 1:lO 稀释可直接使用。

4) 加样:每孔加 2滴样本稀释液，分别加 10ul 阴，阳对照和稀释过

的样本于各自孔中。43℃水浴反应 46min，用洗涤液洗孔 4次，

每次静置片刻，在面巾纸上轻轻拍干.

5) 加酶：打开酶结合物内盖，将一瓶 HRP 稀释液全部挤入酶结合物

瓶中，盖上瓶盖，混．每孔加 2滴．空白孔不加．43℃水浴反

应 30min，洗板同上．拍干．

6) 显色：每孔先加 l滴显色剂 A，然后加 l滴显色剂 B(包括空白

孔)，室温避光显色 10—15min 每孔加 l滴终止液反应。肉眼判

定不终止。

三、结果判定：

1) 肉眼判定：无色为阴性，兰色为阳性

2) 仪器测定：空白孔调零，在波长 450nm 下分别测各孔 O.D 值．

Cut 0ff 值＝0．2 + 阴性对照值

凡样本值大于 Cut off 值者为阳性


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B9、血清Ⅳ胶原蛋白（PANASSAY Ⅳ． C）

IV 胶原蛋白被认为是形成基底膜的骨架，是基底膜的主要成分，形成体

内存在纤维的胶原蛋白有多种多样，根据各个分子两端的 2个不同总位来形

成网络结构的．

在正常的肝脏的窦间隙周围缺乏基底膜结构，但是，肝炎至肝硬化的肝

纤维化发展过程中，肝淋巴间隙中引起基底膜增生，因此，肝组织以及血中

的 Ⅳ型胶原蛋白量也随着增加，血清中Ⅳ型胶原蛋白测定作为一个检查肝纤

维化程度的有用指标引起人们的关注．

PANASSAY Ⅳ C 试剂盒采用一步夹心固相酶免疫法，用两种单克隆抗体

识别 IV 型胶原蛋白分子上不同部位．能简便，准确的测定血清中Ⅳ型胶原蛋

白的浓度．

[成分]

抗体被包珠 Mouse 抗人Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体包被珠 100 粒

酶标抗体液过氧化物酶标记 Mouse 抗人 Ⅳ型胶原蛋白单克隆抗体 35ml

显色剂 3，3’，5，5’—四甲基联苯胺 40ml

显色剂溶解辅助液 N， N—二甲基联苯胺 1ml

色剂溶液 100ml 醋酸缓冲液 40ml

底物液含有 0.015％过氧化氢 10mM 醋酸缓冲液 15ml

终止液 1.33N 硫酸 70ml

标准品稀释液 10mM 硫酸缓冲液 15ml

CL—Ⅳ标准品人Ⅳ型胶原蛋白 1ml

浓缩缓冲液 0．1M 碳酸缓冲液 lL

[测定方法]：

一步夹心固相酶免法(EIA 法)

[测定原理]:

PAHASSAY IV. C 试剂盒用两种单克隆抗体识别Ⅳ型胶原蛋白分子上不同部位，采

用一步夹心固相酶免疫法测定血清中Ⅳ型胶原蛋白的浓度．

1）第一项反应：

样品中的 CL—Ⅳ、抗体包被珠及酶标抗体同时反应，形成 3相复合体。

2）第二项反应:

在显色刑(四甲基联苯胺)存在下，以过氧化氢为底物，测定与 CL-Ⅳ反应，

结合抗体包被珠的酶量．


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



因为酶量依存于样品中 CL—Ⅳ的浓度，用已知浓度的标准液制成的标准曲线，

能求出血清中Ⅳ型胶原蛋白浓度．

[特点]：

1) 采用合有固相抗体及标记抗体的单克隆抗体，对血清Ⅳ型胶原蛋白有

特异性．

2) 酶标抗体对 Fab’ hinge 领域的—SH 基标记，能抑制非特异性的结

合．

3) 显色剂使用四甲基联苯胺，与原来的 0PD 方法相比，灵敏度及显色后

的稳定性良好，无致癌性．

[使用方法]：

（1）试剂的配制方法:

1）标准曲线用标准液:

CL—IV 浓度(ng／ml) 500 250 125 62 0

标准液(ul)[2000ng/ml] 50 吸 100 吸 100 吸 100

──→ 100 ──→ 100 ──→ 100 适量

标准品稀释液(ul) 150

2）显色液:

以显色剂溶解液与显色剂溶液(显色剂加显色剂溶解辅助液 500ul)

为 1：100 的比例按实际需要配制.

3）洗液：

浓缩洗液用蒸馏水稀释其比例为 1:9．

上述试剂配制后 2—8℃稳定 2个月．

（2）操作方法: 准备好标准曲线用的试管 5根，取各浓度的 CL—Ⅳ标准液50ul；(0ng／ml 只用稀释液)，样品试管里加入样品 50ul．

↓ 加酶标抗体液 300ul

↓ 用小钳子取出抗体包被珠，用滤纸吸去沾附的液体，逐个放入试

管立即混在 10—30℃下，准确静放 l小时， ↓

按一定间隔时间加洗液 l.0ml,终止反应. ↓

洗净：用吸管吸去反应液，加洗液 3.5ml 进行吸除，此操作反复3次 ↓


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



加显色液 300ul，按一定间隔加底物液 100ul，混后，在 10—30℃情况下，准确静放 30min．

↓ 按一定的间隔加终止液 1.0m1，终止酶反应.

↓ 用水作对照，测定 450nm(7)处波长的吸光度值

[计算方法]：

a) 付上图表用纸(双对数)的攒轴上取 CL—IV 浓度(16—1000ng／

ml)，纵坐标取吸光度．用各个标准品的吸光度扣除 0nm／ml 的吸

光度后的测值画出曲线.

b) 画出通过 4点的光滑的标准曲线.

c） L—Ⅳ浓度与扣除 0nm／ml 的吸光度后的各个标本的吸光度相对

应，可从标准线上求得.

[注意事项]：

1) 标本请使用新鲜血清

2) 血清分离后不能马上检测的场合，样品按如下保存：

冷藏保存一周稳定；冷冻保存 6个月稳定

3) 请避免标本的反复冷冻复溶,

4) 标准曲线请双重测定，每次测定帽成，每次测定时，配制标准曲线标

准液，能得到较高的灵敏度.

5) 请使用抗体包被珠能完全浸透在反应液里的塑料试管．(内径 10—

18mm，长 60—75mm)

6) 不要让抗体包被珠干燥，不要直接用手触模或强力刮搓。

7) 完全吸咐沾付在抗体包被珠上的液体。

8) 配制显色液时,请严格遵守操作规程。

9) 洗净操作时，请连续操作，不要中断。

10) 多标本测定时，请注意统一各步骤规定的反应时间。

11) 样品的浓度超过检测范围时，调用标难品稀释液稀释后重测。

12) 干扰物质：

胆红素＜20mg／dl；血红蛋白＜500mg／dl;Intralipos ＜2％对测值无影

响。

[参考正常值]:

99.3 士 22.8 ng／ml(平均值±SD)

参考正常值上限：140 ng／ml


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B10、血清蛋白电泳

（1）试剂:

1． PH 8.6 M=0.06 巴比妥缓冲液：

巴比妥 2．21g 巴比妥钠 12．36g 加热溶解后加蒸水至 lL 冷却．

2．丽春红 S染色液：

称丽春红 S0.4g,三氯醋酸 6g，用蒸馏水溶解并稀释到 100m1．

3.漂洗液：3%(v／v)醋酸溶液：适用丽春红染色的漂洗

4．透明液：液体石蜡+氢萘

5．洗脱液：0.4M NAOH

（2）操作:

a) 取醋纤膜，粗面编号后，浸入巴比妥缓冲液，浸透后取出，用吸

水纸吸去缓冲液．

b) 加样：用加样器取血清约 3ul 加到薄膜上(粗面)，垂直点样于粗

面上，距端是 2.5cm.

c) 电源：将已加样的薄膜附贴在电泳糟支架上(粗面朝下)，要求中

部悬空平直，平衡 6—10 分钟，将电泳仪的正负极与电泳糟的正负极连

接，点样端为负极端，通电源，调电压为 80-120V，电流强度为 0.4-

0.6mA／cm，通电 40—50 分钟.

d) 染色与漂洗：通电毕，立即将薄膜取出，浸于染液中 5—10 分

钟，取出，用漂洗数次到背景完全漂净呈白色为止，后于蒸馏水中漂

洗半分钟，如不立即定量，可保存于漂洗液中。

（3）定量：

1）光密度计扫描法：


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



吸去薄膜上液体，待干燥后，将薄膜浸入十氢萘中，待完全透明后，放入

光密度计内，扫描求得各组百分含量。

2）洗脱法：

将漂洗的薄膜用吸水纸吸干后，将各色带剪下，白蛋白强入加有 0.4M

NaOH6ml 管中，其它各部份分别浸入有 0．4 M NaOH3ml 管中，振摇数次，

待色泽完全浸出后，即可在 600—620nm 比色，空白管用 0.4MNa0H

（4）计算：

白蛋白％=白蛋白管吸光度×2/ T× l00

α1 球蛋白％= Αα1×100/ T

α2 球蛋白％= Aα2/ T×100

β球蛋白％=β/T×lO0

γ球蛋白％=γ/ T×100

(T＝ Aa1b 十 Aα1 十 Aα2 十 Aβ 十 Aγ)

（5）参考值：

ALB: 55—74％

α1： 0.8—3.2％

α2： 4.5—9％

β： 5.8—12％

γ： 10-19%


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



B11、N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)

（1）试剂配制：

1） NAG 缓冲液： PH5．0 +β糊精含量 10％

2）基质干粉(CNP—NAG):5mg 十 6mlNAG 缓冲液(PH6.0，柠檬酸缓冲液)．

（2）方法：

Beckman 分析仪上操作．

（3）计算公式：

NAG 测—NAG 空

NAG= ─────── ×100(U／g.Cr)

Cr×50/88.4

注:此尿肌酐为 50 倍稀释．

B12、腺苷脱氨酶(ADA)

（1）试剂:宁波新芝

（2）操作:

BECKMAN CX9 生化仪上自动检测，仪器参数按试剂说明书。

（3）计算：

ADA＝Au—Aub／As—ab×30

（4）参考植：

0—25 单位

（5）临床意义：

1.肝硬化，原发性肝癌，ADA 均可升高。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



2.测定胸水 ADA 及与血清 ADA 的比值对诊断结核性胸膜炎有很大的诊断价

值，积液中的 ADA 活性结核的明显高于癌性和心衰性的，比值大于 l是诊

断结核性的一项可靠指标．

3.伤寒病的 ADA 的活性显著升高，明显高于非伤寒的发热患者，据报道，

ADA 的敏感性达 100%，特异性为 92.3%，伤寒的发病初期可高于正常人 2-

4 倍，极期及缓解期持续处于高水平，至病程第 4周逐渐降低，所以 ADA

检测对伤寒病的早期诊断很有价值。

4．血液病血细胞中的 ADA 活性比血清中的 ADA 活性大 40-70 倍，在慢淋

及白血病性网状内皮增生病，淋巴细胞中 ADA 活性明显下降，而急淋和急

粒患者，其淋巴细胞中 ADA 活性比正常高 1-10 倍，各类恶性肿瘤患者，

外周血淋巴细胞 ADA 活性明显降低。

5．其他一些疾病，如传单、栗粒性结核、风湿热、溶血性贫血、白血

病、及部分肿瘤病人，血清 ADA 呈不同程度升高。

6.结核性脑膜炎 ADA 活性升高，其他脑膜炎不升高。

B13、尿肌酸测定

[原理]

血清(浆)的无蛋白滤液或稀释尿液中的肌酸经酸及加热后罴转变成肌酐.然

后测肌酐总量.同时测未经处理标本中肌酐量.两则相减即得标本中肌酐的量.

此值以肌酐计算.换算成肌酸应乘以转换字数

1.16.(C4H9O2N3/C4H7ON3=1.16)

[试剂]

1.0.036M 苦味酸:取饱和苦味酸用 0.4NNa 滴定,酚酞作指示剂,根据浓度稀释.

2.1.4NNaoH.

3.肌酐标准液(1.5mg/dl):上海生物所,北化厂产.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



4.制作无蛋白滤液的钨酸蛋白沉定剂:钨酸钠 5.55g, NH2SO4 37ml,

H3PO4.0.15ml,加水至 500ml.

5.无蛋白滤液的制作:取血清(浆)0.5ml,加钨酸蛋白沉定剂 3.5ml,放置 5 分钟,

离心后取上清液备用.

[步骤]

肌酸肌酐标准空白

1:100 稀释尿液

3 3

1N H2SO4 0.7

高压 15 磅 30分钟

+ / / /

1N NaoH 0.7

标准液 0.3

H2O 2.7 3

碱性苦味酸 3 1.5 1.5 1.5

H2O 1.6

37℃ 10 分钟 721 比色,510nm 波长

[计算]

肌酸量=肌酸管/标准管*1.5*2

肌酐量=肌酐管/标准管*1.5

肌酸=(肌酸量-肌酐量)*1.16

[正常范围]

肌酸 mg/dl

血:3-7mg/dl

尿:<100mg/24h 尿

[附注]


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



1.肌酸肌酐同时测定,先把肌酐管放冰箱, 等肌酸高压后一起用碱性苦味

酸测定.

2.尿液标本要新鲜,可按 1:200 稀释

B14、肌钙蛋白(TNT)测定

[试剂与材料]

1. 亲和素包被塑料管

2. TNT 标准(3a,3b,3c,3d,3e)

3. TNT 质控品(4a,4b)

4. pod 标记抗 TNT 抗体

5. 缓冲液

6. 洗涤液

7. 显色液

[ 测定方法]

1) 每次测定均设标准管和质控管,标准管一般可做 3a-3d,标准管视具体情

况而定,4a.4b 同时做或仅做一份.

2) 准备好亲和素包被管.编号.标准管. 质控管及样本管分别加标准液,质控

品及标本 0.1ml,室温放置 30min.

3) 配制酶标抗体应用液.根据测定管数(0.5ml/管)配制,缓冲液 100 份+POD

标记抗 TNT 抗体 1份,混 .

4) 上述各管中每管加酶标抗体应用液 0.5ml,充分混 , 室温 1小时.

5) 洗涤,用洗涤液每管 2ml 左右,洗涤 4次,每次间隔 2-3min.

6) 加显色剂:每管 0.5ml.室温,避光放置约 20-30min.

7) 将显色后各管液体加入干净的酶标板中,每孔 200ul.

8) 在酶标仪上直接读数,一般程序已编好,如酶试剂标准浓度有变,则检测程

序应作调整.

[参考范围]

< 0.2ng/ml

[临床意义]

1) 用于急性心肌梗塞的实验室诊断.

2) 用于不稳定心绞痛的预后判断.

3) 用于 AMI 后溶栓药物的治疗监测.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



4) 对于其它心肌细胞损害的疾病有一定的诊断价值.

B15、肿瘤相关物质测定

测定原理本试剂采用生化方法联合检测血清中恶性肿瘤相关物质（TSGF），由于对

多种肿瘤相关物显色进行了叠加，大大提高了检测灵敏度，因而能检测多种早期

恶性肿瘤。试剂盒组份

1．检测试剂 1ml 乘 20 人份

2．标准品 20U/ml、40Uml 、60U/ml、 80U/ml 、100U/ml 五个浓度各 400ul

样品的收集和处理采血后（勿需空腹）应尽快分离血清。若当日不能检测，应将血清样品从

全血中分离出来，置于-10 摄氏度以下冷冻保存，用时须复温溶解并充分摇，

尽量避免反复冻融。明显溶血、黄疸或高脂标本将影响测定。试验仪器

可见分光光度计、定时器、40ul 移液器、水浴锅、反应架。操作步骤

1．加样：准确吸取 40ul 待测血清及五个浓度的标准品，加入盛有 1ml 试剂的反应管中，盖紧盖子，充分混。

2．显色：将反应管插入试管架，置 100 摄氏度沸水浴中加热 15 分钟，迅

速取出并置冷水中冷却 5 分钟以终止反应。 3．比色：将反应液倒入 0.5cm 光程比色杯中，在 470nm 波长处，以蒸馏

水为空白调零后，测定各管样本的吸光度值，结果计算与判断

1． TSGF 标准品共有五个浓度，分别为 20U/ml、 40U/ml、 60U/ml、 80U/ml、 100U/ml(1U=1.268ugTSGF 物质)。用标准浓度作横坐标，所

对应的吸光度值为纵坐标制作标准曲线。 2．在标准曲线上查得血清标本吸光度值所对应的浓度单位。 3．参考值：TSGF 小于 64u/ml 阴性；64u/ml 小于或等于 TSGF 小于

71u/ml 为可疑阳性；TSGF 大于等于 71u/ml 阳性。 4．部分急性炎症、自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮、类风湿等病症可


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



产生交叉反应，引起假阳性。晚期癌症患者 TSGF 值可能低于临界值（64u/mi）。

注意事项 1、比色波长必须保证 470nm 准确，误差范围 2nm。 2、加样量 40ul 须严格控制，误差范围 1ul。 3、反应时间 15 分钟许多方面严格控制。 4、血清加入反应管后，必须盖紧盖子，充分摇后尽速进行加热显

色。 5、水面高度应达到反应架脚部水位线，同管内反应液高度一致。 6、比色要求在反应终止后 1 小时内完成。 7、若检测样品过多，冷却水应及时更换或加冰袋，以确保反应终止。 8、空白蒸馏水需澄清、透明，必须每天更换。 9、水浴锅不应该用钢精锅和电炉替代，以免各管受热不均。 10、反应液若产生褐色絮状物，请充分摇后再比色。 11、尚未使用完的标准品需密封、低温保存。

方法学参数 1、精密度：批间及批内 CV 小于等于 5%。 2、回收率：为 100+-5%。

3、特异性：与常规肿瘤标志物为发现交叉反应。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C1、HAVAbIgM

[标本准备]

检样的稀释:取 1ml 生理盐水加 5ul 检样振荡,混 (即作 1:200 稀释).

[步骤]

1) 检样孔加 100ul 样品稀释液+5ul 稀释检样(1:200)，对照孔分别加阴性,阳性

对照品 100ul 封板,混 2) 40℃水育 30 分钟后,洗板 6 次 3) 加 50ul 酶标物及 A 型肝炎试剂,混 4) 40℃水育 40 分钟,洗板 6 次 5) 加显色剂 A,B 各一滴,室温放置 10 分钟

6) 终止液 50ul,混后于 450nm 处测 OD 值

[结果计算与判断]

临界值 (Cut-off)=阴性对照 OD 值+0.25

检样孔 OD 值<临界值为阴性

检样孔 OD 值大于或等于临界值为阳性


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C2、PreS1

[原理]

采用双抗夹心 ELISA 法，在微孔条上预包被纯化乙肝表面抗体（抗-

HBs），捕获待检标本中的乙肝病毒表面抗原，用酶标抗 PreS1 抗原单抗

（抗-PreS1-HRP）作为检测抗体，根据酶-底物反应后的颜色变化，测定

血清中乙肝病毒 PreS1 抗原。

[试剂]

厂家：上海阿尔法物物技术有限公司。

1.预包被反应板 8 孔*6 条 48 人份 5.洗涤液(浓缩液)

2.酶标液滴瓶 1 瓶 3ml 6.显色剂 A 滴瓶 1瓶 3ml

3.阳性对照 1 支 150ul 7.显色剂 B 滴瓶 1瓶 3ml

4.阴性对照 1 支 150ul 8.终止液滴瓶 1瓶 3ml

[步骤]

1. 待检标本(50ul)，阴性对照,阳性对照各 50ul，空白 1孔不加任何溶液

2. 酶标物 50ul,混，封板。37℃水浴 60 分钟

3. 弃去液体，板用洗涤液注满每孔，静置 5 秒后，弃去液体，在吸水纸上

尽量吸干，反复洗板 5次

4. 加显色剂 A,B 各 1 滴（50ul），混后，置 37℃暗置 15 分钟。

5. 加终止液 1滴，于单波长 450nm 或者说双波长 450/630nm 处测 OD 值。

[结果判断]

1) 所有阴性对照、阳性对照和标本的读数值减去空白对照孔读数即为计算

值。

2) 阳性对照读数必须比阴性对照读数大 0.300。

3) 目测：


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



在白色背景下观察各孔显色情况，有明显桔黄色蓝色，明显穿深于阴性对

照者为 PreS1 阳性：无色者或极浅黄色者为 PreS1 阴性。

4）酶标仪检测：

临界值（C.O.）= 阴性对照×2.1

检样 OD/临界值 ≥ 1 为阳性 (TOD/TON（S/N）≥ 2.1)

检样 OD/临界值 < 1 为阴性 (TOD/TON（S/N）< 2.1)

注：阴性对照平均 O.D.值≤0.05 时,按 0.05 计算:≥0.05 时,按实测值计

算.

[注意事项]:

1) 试剂盒在 2-8℃避光保存.

2) 待测标本不可用 NaN3 防腐.

3) 加样后,轻摇反应板,充分混 .

4) 温育反应板温度和时间必须严格控制.

5) 试剂盒中阳性对照仅用于判断试剂盒内的包被微孔板和酶是否有效,不是

临界值的标志.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C3、HBSAg

[原理]

在微孔条上预包被纯化乙肝表面抗体（抗-HBs），配以酶标抗体（抗-

HBs-HRP）及 TMB 显色剂等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血

浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。

[试剂]

厂家：厦门新创科技有限公司

1.预包被微孔条 6.显色剂 A (Color A)

2.酶联试剂 7.显色剂 B (Color B)

3.HBsAg 阳性对照 8.终止液(2M H2SO4)

4.HBsAg 阴性对照 9.封板胶

5.PBST 洗涤液(浓缩液) 10.塑料袋

[步骤]

1. 标本(50ul)，阴性对照,阳性对照各 1滴

2. 酶标物 1d,混，封板。43℃水浴 40 分钟

3. 洗板 5次

4. 加显色剂 A,B 各 1 滴，置 37℃暗置 15 分钟。

5. 加终止液 1滴，于单波长 450nm 或者说双波长 450/630nm 处测 OD 值。

[结果判断]

目测：

在白色背景下观察各孔显色情况，有明显蓝色者为 HBsAg 阳性：无色者为

HBsAg 阴性。

酶标仪检测：




[灵敏度]

≤ 1ng


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C4、HBeAb

[原理]

在微孔条上预包被纯化乙肝 e 抗原（HBeAg），配以酶标抗体（HBeAg-HRP）

及 TMB 显色剂等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝 e

抗体（HBeAb）。

[试剂]




3.HBeAb 阳性对照 8.终止液(2M H2SO4)

4.HBeAb 阴性对照 9.封板胶

5.PBST 洗涤液(浓缩液)

[步骤]


2. 酶标物 1d,混 43℃水浴 40 分钟

3. 洗板 5次

4. 加显色剂 A,B 各 1 滴,置 37℃暗置 15 分钟。

5. 加终止液 1滴，于 450nm 处测 OD 值

[结果判断]

目测：

在白色背景下观察各孔显色情况，有明显无色者为 HBeAb 阳性：蓝色者为

HBsAb 阴性。

酶标仪检测：




[灵敏度]

≤ 30mIU


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C5、HBEAg

[原理]

在微孔条上预包被纯化乙肝病毒 e 抗体（抗-HBe），配以酶标抗体（抗-

HBe-HRP）及 TMB 显色剂等其它试剂，采用双抗夹心法原理检测人血清

（或血浆）中乙肝病毒 e抗原（HBeAg）。

[试剂]




3.HBeAg 阳性对照 8.终止液(2M H2SO4)

4.HBeAg 阴性对照 9.封板胶


[步骤]


2. 酶标物 1d,混 43℃水浴 40 分钟

3. 洗板 5次



[结果判断]

目测：

在白色背景下观察各孔显色情况，有明显蓝色者为 HBeAg 阳性：无色者为

HBeAg 阴性。

酶标仪检测：





版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C6、HBcAb

[原理]

在微孔条上预包被纯化乙肝核心抗原（HBcAg），配以酶标特异抗体（抗-

HBc-HRP）及 TMB 显色剂等其它试剂，采用竞争抑制法原理检测人血清

（或血浆）中乙肝核心抗体（HBcAb）。

[试剂]




3.HBeAg 阳性对照 8.终止液(2M H2SO4)

4.HBeAg 阴性对照 9.封板胶


[步骤]

1. 稀释：用 PBST 洗涤液作 1：30 稀释（10ul 样品加 290ul 洗涤液）


3. 酶标物 1d,混。

4. 混 43℃水浴 40 分钟

5. 洗板 5次



[结果判断]

目测：

在白色背景下观察各孔显色情况，无色或比阳性对照孔蓝色明显更浅者为

HBeAg 阳性：与阴性对照孔颜色相近或深于对照者为 HBeAg 阴性。

酶标仪检测：

临界值(C.O.) = 阴性对照孔 OD×0.2

样品 OD/C.O. ≤ 1.0 为阳性 (TOD/NOD≤0.2)

样品 OD/C.O. > 1.0 为阴性 (TOD/NOD > 0.2)

[灵敏度]

≤ 2NCU


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C7、HbeAb

[原理]

采用抗人类 IgG 包被酶标板，再配以酶标记特异性抗-HBc,缓冲液及其它试

剂组成。采用双层三明治法检测人血清，血浆或其它样品中的抗-HBcIgM。

[试剂]


1.抗人 IgG 酶标板 6.显色剂 A (Color A)

2.抗-HBe 酶标记液 7.显色剂 B (Color B)

3.乙型肝炎病毒核心抗原试液 8.样品稀释液

4.抗-HBe 阳性对照血清 9.终止液(2M H2SO4)

5.抗-HBe 阴性对照血清 10.PBST 洗涤液(浓缩液 20×)

[步骤]

1. 取所需包被孔加稀释过被测血清 100ul(1:30)，阴性对照,阳性对照各两

滴

2. 温育 43℃20 分钟

3. 甩干,洗板 5次扣干

4. 每孔 HBcAg,酶标试剂 1滴，混

5. 水育 43℃30 分钟

6. 洗板 6次,扣干

7. 加显色剂 A,B 各 1 滴,混后室温放置 15 分钟

8. 终止液 100ul,混，于 450nm 处测 OD 值

[结果判定]

目测：

在白色背景下观察各孔显色情况，无色或比阳性对照孔蓝色明显更浅者为 HBeAg

阳性：与阴性对照孔颜色相近或深于对照者为 HBeAg 阴性。

酶标仪检测：

临界值(cut off)=阴性对照 OD+0.25

样品 OD 小于临界值为阴性

样品 OD 大于临界值为阳性


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C8、HCVIgG

[步骤]

1、稀释：样品稀释液 100ul 加待检标本 10ul,阴性对照,阳性对照各两滴,

封板混 .

2、温育 37℃30 分钟

3、甩干,洗板 5次扣干

4、加酶标试剂 100ul，封板混

5、水育 37℃20 分钟

6、洗板 6次,扣干

7、加显色剂 A,B 各 1 滴,混后室温放置 10 分钟

8、终止液 100ul,混，于 450nm 处测 OD 值

[结果判定]

目测：

在白色背景下观察各孔显色情况，无色或比阳性对照孔蓝色明显更浅者为

HBeAg 阳性：与阴性对照孔颜色相近或深于对照者为 HBeAg 阴性。

酶标仪检测：





版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C9、HCVIgM

[试剂]

底物液的配制:OPD 半片+底物缓冲液 5ml 溶解,混 .

[步骤]

1、取所需包被孔，各孔加样品稀释液 100ul，阴性对照，阳性对照，检

样各 5ul 混 ,封板

2、37℃, 30 分钟

3、洗板 6次, 扣干

4、每孔加(1:101) 酶标记物 100ul,封板

5、37℃, 30 分钟


7、TMB A 液,B 液各 1滴,放室温 15 分钟

8、终止液 50ul,混于 450nm 处测 OD 值

[结果判断]





版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C10、HDVAg

[步骤]

1、取所需包被孔，待检样品，阴性对照，阳性对照各 50ul

2、加入脱壳剂 25ul(1 滴),混 ,45℃, 60 分钟


4、每孔加入酶标记物 50ul(1 滴),混封板 ,45℃, 30 分钟


6、底物,显色液各 1滴


[结果判断]





版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C11、HDVIgG

[步骤]

1、待检标本(50ul)，阴性对照,阳性对照各 1滴

2、酶标物 1d,混，封板。45℃水浴 30 分钟

3、洗板 5次

4、底物、显色液各 1滴（或 25ul），置 37℃暗置 15 分钟。

5、加终止液 1 滴（或 50ul），于单波长 450nm 或者说双波长 450/630nm

处测 OD 值。

[结果判断]

目测：

在白色背景下观察各孔显色情况，有明显天蓝色者为 HBsAg 阴性：无色者

为 HBsAg 阳性。

酶标仪检测：

临界值（C.O.）= 1/2×(阴性对照 OD + 阳性对照 OD)

检孔 OD 值 < 临界值为阳性

检孔 OD 值 > 临界值为阴性


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C12、HDVIgM

[步骤]

1、取所需包被孔，各孔加(1:100)稀释样品 5ul 加入样品稀释液 50ul，阴

性对照，阳性对照各 50ul

2、加入抗原 50ul(1 滴),混 ,45℃, 30 分钟


4、每孔加入酶标记物 50ul(1 滴),混封板 ,45℃, 30 分钟


6、底物,显色液各 1滴


[结果判断]





版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C13、HEVAbIgG

[步骤]

1、取所需包被孔，各孔样品稀释液 100ul 加入样品 5ul，阴性对照，阳性

对照各 100ul

2、封板混 ,37℃, 30 分钟


4、每孔加入酶标记物(1:100 稀释)100ul

5、混封板 ,37℃, 30 分钟


6、底物,显色液各 1滴（100ul）

7、37℃水浴 15 分钟

8、终止液 100ul,混。于 450nm 处测 OD 值

[结果判断]





版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C14、HEVAbIgM

[步骤]

1、取所需包被孔，各孔样品稀释液 100ul 加入样品 5ul，阴性对照，阳性

对照各 100ul

2、封板混 ,37℃, 30 分钟


4、每孔加入酶标记物(1:100 稀释)100ul

5、混封板 ,37℃, 30 分钟


6、底物,显色液各 1滴（100ul）

7、37℃水浴 15 分钟

8、终止液 100ul,混。于 450nm 处测 OD 值

[结果判断]





版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C15、HGVAb

[步骤]

1、取所需包被孔，各孔样品稀释液 100ul 加入样品，阴性对照，阳性对

照各 10ul

2、封板混 ,37℃, 20 分钟

3、洗板 6次, 每次置 1分钟，扣干

4、每孔加入酶标记物 100ul（2 滴）

5、混封板 ,37℃, 20 分钟

5、洗板 6次, 每次置 1分钟，扣干

6、加入底物液 A，B各 1滴（100ul）

7、室温避光反应 10-15 分钟

8、终止液 50ul（1 滴）,混。于 450nm 处测 OD 值

[结果判断]

阴性对照 OD 值 <0.2,阳性对照 OD 值比阴性对照 >0.5 方可认为测定有效





版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C16、TTV-IgG

[原理]

采用抗人类 IgG 包被酶标板，再配以酶标记特异性 TTV 抗体,缓冲液及其

它试剂组成。采用双层三明治法检测人血清，血浆或其它样品中的 TTV-

IgG 抗体。

[试剂]

厂家：北京医科大学肝病研究所北京肝炎研制中心

1、包被板 4×12 孔 5、酶结合物液 1 瓶

2、阳性对照 1 支 6、洗涤夜 1 瓶

3、阴性对照 1 支 7、底物液 A＆B 备 1 瓶

4、标本稀释液 1 瓶 8、终止液 1 瓶

[操作]

1. 标本稀释液 100ul(或 2 滴)加入包被板孔内(阴、阳性对照孔直接加入

100ul 对照血清)，将待检血清各取 5u1 加入反应孔内，置 37℃温箱

反应 60 分钟。

2. 用蒸溜水将洗涤液洗释至 200ml 后洗板 5次，每次放置 5—10 秒钟。

3. 每孔加入 100ul(或 2 滴)酶结合物液，置 37℃温箱反应 20 分钟后，

洗板 5次，操作同步骤 2。

4. 将底物 A、 B 液各 50ul(或 1 滴)加到反应孔内，37℃避光显色 10 分

钟。

5. 每孔加入终止液 50ul(或 1 清)终止反应。

[结果判定]

临界值＝阴性对照(N) OO 值十 0．15

标本 OD 值≤临界值为阴性，标本 OD 值＞临界值为阳性。

[注意事项]

1．试剂盒置 2-8℃保存，有效期 6个月。

2．不同批号试剂请勿混用。

3．严格按说明书操作。

4．反应温度和时间必须严格控制。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C17、寒冷凝集反应

[原理]

原发性非典型性肺炎为肺炎支原体所引起,病人血清中常可出现高滴度的

寒冷凝集素,能与自身或 O 型人的红细胞于 0-4℃寒冷情况下产生凝集现象,

可用以对原发性非典型性肺炎辅助诊断.

[试剂]

1.生理盐水

2.2%血球或"O"型 RBC

[方法]

管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

N. S 0.75 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

血清 0.25 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 -

2%RBC 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

稀释倍数 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 1/2048

第 1 孔 0.75mlN.S+0.25ml 血清,混后吸 0.5ml 至第 2 孔混 ,再从第 2 孔吸

0.5ml 至第 3 孔,如此第 9 孔,混后吸 0.5ml 弃去,10 号管不加血清.放冰箱

过夜

[观察结果]

如有凝集者,按++的高血清稀释倍数报告,再放 37℃水浴 15-30'观察凝

集有无消退

[正常参考值]

1:32 以下


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C18、ENA 多肽抗体谱 [原理]

本试剂盒采用国际先进的生物技术 --- 免疫印迹技术（Immunoblotting），将具有多种抗原性的细胞核盐水可提取性抗原（ENA），经凝胶电泳分离后，转印于硝酸纤维膜上，可一次检测 8-10 种自身抗体，用于系统工斑狼疮（SLE）、混合性结缔组织病(MCTD)硬皮病(PSS),干燥综合症(SS)和多发性肌炎/皮肌炎(PD/DM)、类风湿性关节炎等六种不同风湿性疾病的诊断和鉴别诊断。

[试剂] 1.浓缩洗涤液 25ml×2 4.显色液 B25ml×1

2.酶标抗体 0.6ml×2 5.终止液 25ml×1

3.显色液 A25ml×1 6.膜条 8条×5

[步骤]

1. 将浓缩洗涤液用蒸馏水作 1：10 稀释。

2. 每槽各加 0.5ml 洗涤液,然后加待测血清 10ul,充分混 ,置 37℃孵育 30 分

钟.

3. 取出反应槽,弃去槽中液体,在吸水纸拍干,用洗涤液洗涤 4 次,每次 1ml,摇

动,每次 1分钟.

4. 每槽加入洗涤液 0.5ml,再加酶标抗体 20ul,混后置 37℃孵育 30 分钟.

5. 同(3)洗涤

6. 加入显色剂 A0.5ml+显色剂 B0.5ml,室温反应 10 分钟.

7. 待阳性带显色清晰,即加终止液 0.5ml,终止反应 1 分钟后弃去液体,用自来

水洗涤后取出薄膜,待干后即可判定结果.

[结果观察]

检测膜上显色区带与自身抗体检测判断显色区带位置

代号

检测抗体说明

29 KD B' 抗 Sm 主要看 D,D 总与 B一起出现单独出现 B'/B 无 D,不能判断抗 Sm 阳性

28 KD B 13.5 KD

D

73 KD

抗 U1RNP

73KD(即国外报道的 70KD), 和 A 可同时出现,也可分别出现,C 常伴上述二区带一起出现,单独出现少见, 抗 U1RNP有时也可与 B'.B 反应出现显色区带

32 KD A 17.5 C


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



KD 52 KD 抗 SSA 本试剂盒用兔胸腺为抗原来源,因此缺 60KD 蛋白多肽

48 KD 抗 SSB 三区带不仅同时出现,也与 52KD 区带同时出现, 但48/47KD 有时很弱, 不易分辨

47 KD 45 KD

86 KD 抗 Scl-70 两区带同时出现,在两区带间有时可见到两条较弱的区带,它们都是 100KD 的降解产物

70 KD

55 KD 抗 Jo-1 确定 55KD 需慎重,因临床意义不明的 54.56KD 和 55KD 在位置上相差不到 1毫米

38 KD 抗核糖体三区带同时出现,但有时 16.5 ,15KD 区带较弱 16.5 KD

15 KD

[注意事项]

1. 结果判断请参看标准谱带图，零位线(兰线)下约 2mm 处的第一条显色带为试剂质控线，此显色带若不出现，说明试剂失效。

2. 本试剂盒放 4℃保存。酶标抗体勿放—20℃保存。取膜条时。剪开铝塑外包装，剩余的膜条须放入自封袋中，仔细封好自封袋口，以防膜条被潮湿，并将其置 4℃保存。

3. 浓缩洗涤液需临用前稀释，整个操作中，洗涤液用量大约为每人份 1伽l，可参照此量稀释。未用完的洗涤液弃之，不可留作下次用。

4. 全部操作好在生化摇摆平台上摆动进行，改用手工间隙晃动也可检测，但敏感性会有所下降。

5. 显色液 A、B需恢复至室温方可使用。显色液有棕色颗粒时，不影响检测结果。

6. 标准带谱为根据相应标准血清定位后，用电脑制作，每个试剂盒对应一张标准带谱，进行结果判断时，不同试剂盒间的标准带谱不能混用，要注意膜条铝塑袋上批号与标准带谱下方批号一致。

7. 判断结果时，要注意将谱带定位与带型结合起来。带型指一种抗体有多条区带时，区带间相对不变的位置关系构成的图型。如抗 Scl-70 常出现 4条；抗 SSB 常出现 2条，且总是与抗 SSA 同时出现；抗 Sm 常出现 2-3条；抗 D’E(抗 Ijl4)常出现 5—6条等等。谱带定位时与标准带相差 1mm内属允许范围。

8. 本试剂盒也可作抗 DM—53、抗 RA—54 检测，类风关病人除有 54KD 抗体外，也可出现 36KD 抗体。

9. 不同血清标本，不同带型，显色强度会不一致，遇到弱阳性结果时，请仔细观察。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C19、ANA

[步骤]

1) 按 1:41 稀释待测血清,阳性对照和校正液(5ul 上述样品加入到 200ul 的样

品稀释液中混 )

2) 取 100ul 已稀释的上述样品加入到相应的微孔中,空白对照孔加样品稀释

液 100ul.

3) 置 20℃-28℃,30 分钟.

4) 洗涤 6次.

5) 每孔加酶结合物 100ul.

6) 置 25℃-28℃,30 分钟,洗涤 6次.

7) 每孔分别加入 100ul 溶液 A和 B.

8) 20℃-28℃ 30 分钟.

9) 每孔加入 50ul 2NHCL 终止反应混 ,于 450nm 处测 OD

[结果判定]

待测血清 OD

────── <1.0 为阴性

校正液 OD

待测血清 OD

────── =1-2.0 为不明确阳性需重测

校正液 OD

待测血清 OD

────── >2.0 为阳性

校正液 OD

[质量控制]

空白 OD 必须<0.10，若校正液的 OD<0.08，则检测结果无效,须重做.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C20、ds-DNA

[步骤]

1. 按需取包被孔，每孔加稀释液 100ul，检样, 校正液,阳性各 5ul 混封板

2. 置于 21-25℃,30 分钟


4. 每孔加酶结合物 100ul,封板

5. 置于 21-25℃,30 分钟


7. TMB 100ul,置于 21-25℃5 分钟

8. 终止液 100ul 混 ,于 450nm 处测 OD 值

[结果判定]

检样 OD

检样指数值(SIV) = ───────

校正液 OD×*系数

SIV<0.90 阴性

SIV 在 0.91-0.99 之间可疑

SIV>1.10 为阳性

附注:*系数(Factor)由厂家通过分析数据提供，不同批号试剂盒的系数不

能进行替用.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C21、幽门螺杆菌抗体

[步骤]

1. 按需取包被孔，每孔加 100ul 零缓冲液，分别加已稀释的样品(1;101,即

1ml 样品稀释液加 10ul 样品)和 100ul 标准品(单孔,20u/ml 或 25u/ml 或

35u/ml 者)到相应孔中,混

2. 置室温(20-25℃)30 分钟洗涤 5次扣干

3. 每孔加 100ul 酶结合物

4. 置室温 30 分钟洗涤 5次,扣干

5. 每孔加入 TMB 液置室温 30 分钟

6. 各加 50ulHcl 中止反应轻混 30 秒，在 450nm 处(模式 3)测 OD 值

[结果计算]

TOD

━━━━ × C(浓度)

SOD

TOD

━━━━ × C<20u/ml 为阴性

SOD

TOD

━━━━ × C≥ 20u/ml 为阳性

SOD


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C22、嗜异性凝集试验

[原理]

传染性单核细胞增多症患者血清中常产生高滴度的嗜异性抗体,能与绵羊

红细胞发生凝集.

[试剂]

1、生理盐水

2、百分之二的血球(羊,鸡,猴血球均可)

[方法]

灭活血清:血清在 56℃下放置 30 分钟

试管号 1 2 3 4 5 6 7

N . S 0.60 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25

血清 0.10 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 弃去

2%RBC 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10

室温 2h,再放冰箱过夜(4℃)

稀释度: 1/7 1/14 1/28 1/56 1/112 1/224

第 1 孔 0.60mlN.S+0.10ml 血清,混后吸 0.25ml 至第 2 孔混 ,再从第 2

孔吸 0.25ml 至第 3 孔,如此第 6 孔,混后吸 0.25ml 弃去,7 号管不加血清.

放冰箱过夜

[正常参考值]

据统计正常值如下:

羊血球 1:56 以下

豚血球 1:28 以下

猴血球 1:28 以下

鸡血球 1:28 以下

超过 1:56 以下者具有临床诊断价值


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C23、肥达氏反应

[原理]

本法是以伤寒"O","H";甲,乙,丙副伤寒分别培育,经甲醛处理杀死后,做

成菌液供肥达氏应用,用以伤寒的辐助诊断.

[操作方法]

取试管,排成 5 × 6 形式,5 排分别编成 O,H;甲,乙,丙,另取大试管一支,

加入病人血清 0.25ml,用 4.75ml 生理盐水作 1:20 稀释,再取 2.5ml 生理盐

水分别注入每排第一管内,每管 0.5ml;再取 2.5ml 生理盐水把血清作 2 倍

稀释,每排后一管加 0.5ml 生理盐水作阴性对照,然后逐管加入各菌液

0.05ml.

各稀释度:1/20,1/40,1/80,1/160,1/320

充分振荡混 ,于 37℃放置 16-20 小时判定结果.

[结果判定]

根据凝集反应的强弱和有无,分别以 4+,3+,2+,1+,±,-记录,以呈现(+)的

血清高稀释度为终点效价.

[注意事项]

1) 应在光亮处观察管底凝集状态,轻轻摇动判定结果,不能剧烈振荡.

2) 菌液稀释后应及时使用.

3) 菌液中有摇不散的凝块时,不能使用.

4) 应在标签载明的有效期内使用.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C24、胰岛素测定标准操作规程

（1）产地：中国原子能科学研究院，北京。

（2）用途：定量测定血清或血浆中胰岛素含量。临床糖尿病的分类，胰岛素瘤鉴别诊断。

（3）试剂： 1. 标准品六瓶,浓度 5,10,20,40,80,160miu/L,使用时加温育液 1.0ml。放置 10 分钟，充分溶解后，分装，每管 0.1ml,零下 20℃保存，一个月内用完。

2. 125I-胰岛素一瓶，使用时加温育液 11ml。 3. 胰岛素抗体一瓶，使用时加温育液 11ml。 4. 温育液一瓶,分离试剂一瓶，使用前一定要充分摇。 5. 质控品；使用时加水 0.5ml 溶解，分装，每管 0.1ml,零下 20℃保存，一个月内用完。

（4）曲线范围： 5-160Miu/L 灵敏度：<5 Miu/L

（5）方法分析见表单位：ml

组别标准曲线组

名称

T 管

N 零管标准

待测组

温育液 0.2 0.1

标准品 0.1

样本 0.1

抗体 0.1 0.1 0.1 125I-INS 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1

充分摇放 37℃2 小时

分离剂 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

充分摇放室温 15 分钟

充分摇后 3500 转/分离心 15 分钟，弃上清液后测沉淀计数

（6）标准曲线：

NSB<5%,B0/T=40-70%,ED50=25.6miu/L.

（7）参考范围

92 名正常人空腹胰岛素 4.0-16.8miu/L。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C25、C 肽测定标准操作规程


（2）用途：

定量测定血清 C-肽含量，临床了解胰岛β细胞功能，糖尿病分型及用药指

导。

（3）试剂

a) 标准品六瓶,浓度 0.2,0.6,1.5,3.0,6.0,12.0ng/ml,使用时加温育液 1.0ml。

放置 10 分钟，充分溶解后，分装，每管 0.1ml,零下 20℃保存，1个月内用

完。

b) 125I-C 肽一瓶，使用时加温育液 11ml。

c) C 肽抗体一瓶，使用时加温育液 11ml。

d) 温育液一瓶。

分离试剂一瓶，使用前一定要充分摇。

（4）曲线范围：

0.1-8ug/L 灵敏度：0.08ug/L.

（5）方法

分析见表单位：ml 组别标准曲线组名称

T 管 N 零管标准

待测组

温育液 0.2 0.1 标准品 0.1 样本 0.1 抗体 0.1 0.1 0.1 125I-C 肽 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1

充分摇放 4℃24 小时分离剂 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 充分摇放 4℃60 分钟



NSB<1.2%,B0/T=30-45%,ED50=1.19ug/L.

（7）参考范围

100 名正常人空腹 C肽 0.6-3.8ng/ml。均值为 1.82ng/ml。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C26、胰高血糖素测定标准操作规程


（2）用途：定量测定血清胰高血糖素含量，临床了解胰岛α细胞功能，胰高血

糖素瘤及胰岛素瘤的鉴别诊断。

（3）试剂

1) 标准品 2瓶,每瓶加温育液溶解，配制成

25,50,100,200,400,1000pg/ml,溶解后的标准，只使用一次。

2) 125I-胰高血糖素一瓶，使用时加温育液 11ml。

3) 胰高血糖素抗体一瓶，使用时加温育液 11ml。

4) 温育液一瓶。

5) 分离试剂一瓶，使用前一定要充分摇。

（4）样本处理

加入抑肽酶 10000/20ul 和 50ulEDTA, 加入 2ml 血样本充分摇离心，-

20℃保存。（本室用 50ulEDTA 抗凝 2ml 全血，用于测定 INS，C 肽和胰

高血糖素。）


25-100ng/L 灵敏度：18.3ng/L.

（6）方法：

分析见表单位：ml 组别标准曲线组名称

T 管 N 零管标准

待测组

温育液 0.3 0.2 标准品 0.2 样本 0.2 抗体 0.1 0.1 0.1 充分摇放 4℃4小时 125I- 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1

充分摇放 4℃24 小时分离剂 0.5 0.5 0.5 0.5 充分摇放 4℃60 分钟



NSB<5%,B0/T=25-45%,ED50=183±40ng/L.

（8）参考范围：

40 名正常人空腹血浆<200pg/ml。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C27、α1-微球蛋白测定标准操作规程（1）产地：

中国原子能科学研究院，北京（2）用途：

定量测定尿液中的α1-微球蛋白含量。临床肾脏疾病，肾小管功能鉴别诊断。

（3）试剂： 1) 标准 6瓶，每瓶加水 0.5ml 溶解。25,50,100,200,400,800ug/L。 2) 抗体 1瓶，加缓冲液 22ml 溶解。 3) 125

I-α1-MG 1 瓶，加缓冲液 11ml 溶解。高浓度缓冲液 1瓶，加水 135ml 稀释。

4) PR 1 瓶，使用前充分摇。（4）曲线范围：

25—800ug/L 灵敏度：1.6ug/L （5）分析步骤：

首先将尿液 41 倍稀释。(2ml 应用缓冲液加入 50ul 尿样，混 ) T 管 NSB 零管标准管样品管缓冲液 50 50

标准 50 样品 50 125I-α1-MG 100 100 100 100

100 NSB 200

α1-MG 抗体 200 200 200 摇，37℃3 小时 PR 500 500 500 500

摇，室温 15 分钟，离心 3500rpm15 分钟。弃上清液后测沉淀计数。结果乘

以 41。


NSB<3%,B0/T=40%,ED50=90-100ug/L。

（7）正常参考值：

5.86±4.50mg/L


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C28、β2-微球蛋白测定标准操作规程

（1）产地：

中国原子能科学研究院，北京。

（2）用途：

定量测定血和尿液中的β2-微球蛋白含量。临床肾脏疾病，某些恶性肿瘤鉴

别诊断。

（3）试剂： 1) 标准 7瓶，每瓶加水 0.5ml 溶解。

1. （浓度：0,0.2,0.5,1.0,2.0,5.0,10.0mg/L。）

2) 抗体 1瓶，加水 24ml 溶解。

3) 125I-β2 -MG 1 瓶。PR 1 瓶，使用前充分摇。


0.2-10mg/L 灵敏度：0.05mg/L

（5）分析步骤：

单位：ul。尿样不用稀释 T 管 NSB 零管标准管

血样管尿样管零标准 250

标准 50 样品 50 200 125I-β2 -MG 100 100 100 100 100

100 混

β2-MG 抗体 200 200 200 200 摇，室温 0.5-1 小时 PR 500 500 500 500 500

摇，室温 15 分钟，离心 3500rpm15 分钟。


NSB<5%,B0/T=50-80%,ED50=1.17mg/L


血清：1.615±0.335mg/L

尿样：0.091±0.068mg/L


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C29、THP-蛋白测定标准操作规程（1）产地：

中国原子能科学研究院，北京。（2）用途：

定量测定血清或尿液中的 THP 糖蛋白含量。临床肾脏疾病，肾小管功能鉴别诊断。

（3）试剂： 1) 标准 6瓶，50,100,200,500,1000,2000ng/L。 2) 抗体 1瓶，加缓冲液 23ml 溶解。 3) 125

I-THP1 瓶，11ml。高浓度缓冲液 1瓶，加水 25ml 稀释。 PR 1 瓶，使用前充分摇。

（4）曲线范围： 50—2000ug/L 灵敏度：20ug/L

（5）分析步骤：首先将尿液 51 倍稀释。(必须用双蒸水稀释，100ul 尿样 5ml 双蒸水) 血样不用稀释。 T 管 NSB 零管标准管样品管缓冲液 100 100

标准 100 样品 100 125I-THP 100 100 100 100

100 NSB 200

THP 抗体 200 200 200 摇，37℃3 小时 PR 500 500 500 500

摇，室温 15 分钟，离心 3500rpm15 分钟。


NSB<7%,B0/T=50-80%,ED50=309-330ug/L。


24 小时尿液：28.84±14.99mg/24h。

喝水后尿样：28.96±19.3ug/ml。

血清：159.89±51.57ng/ml.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C30、抗 TG，TM 抗体测定标准操作规程

（1）产地：

中国原子能科学研究院，北京

（2）用途：

半定量检测 TG，TM 抗体。临床诊断甲状腺自身免疫疾病。

（3）试剂：

1. 125I-TG，

125I-TM 各 1 瓶，加 10ml 稀释液溶解。

2.零值血清，正常血清，阳性血清，缓冲液，稀释液各 1瓶。

3.PR 试剂 2瓶。

（4）分析步骤：

T 管零管正常管阳性管样品

管

零值血清 20

正常血清 20

阳性血清 20

血样

20

缓冲液 200 200 200

200 125I-TG 或 100 100 100 100

100 125I-TM

摇，37℃1 小时

PR 500 500 500

500

摇，室温 30 分钟，离心 3500rpm20 分钟，弃上清液测沉淀

cpm


TGAb<30%,TMAb<20%。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C31、抗 INS-抗体测定标准操作规

（1）产地：

中国原子能科学研究院，北京。

（2）用途：

定性检测血清胰岛素抗体。临床诊断胰岛素依赖型糖尿病并指导用药。

（3）试剂:

1.125I 一瓶,加温育液 11ml.

2.阴性,阳性血清各一瓶,

3.温育液,PR 各一瓶.

（4）分析步骤:

T 管 NSB 阴性管阳性管样品

管

零值血清 20

阴性血清 50

阳性血清 50

血样

50

缓冲液 100 100 100

100 125I-ins 100 100 100 100

100

摇，37℃3 小时

PR 500 500 500

500

摇，，离心 3500rpm20 分钟，弃上清液测沉淀 cpm


S/N<5%.


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C38、人 III 型前胶原放射免疫测定标准操作规程

（1）产地：

上海海军医学研究生物技术中心。

（2）原理及用途：

本试剂用人 III 型前胶原（Procoll en Type III,PC III）为抗原，

免疫新西兰大兔得相应抗体；用125I 标记抗原；采用非平衡、双抗体

+PEG 的 RIA 法测定人血清中 PC III 含量。本试剂主要用于诊断肝纤维

化和早期肝硬变、疗效观察、药物筛选等。研究结果显示，血清 PC

III 水平与肝活检显示的肝纤维化严重程度呈高度正相关。

（3）试剂：

1) 标准品：6瓶，浓度分别为 0，40，80，160，320，640ug/L。

2) PBS 1 瓶

3) 125I- hpc III 2 瓶

4) hpc III 抗体 3瓶

5) 沉淀剂 3 瓶由二抗和 PEG 组成，使用前应混。


排列放免管 T 管 NSB 标准管标本质控

待测血清 100

质控血清 100

标准液 100

PBS 200

HPC III 抗体 200 200 200

4 摄氏度放置 18~24 小时 125I-hpcIII 100 100 100 100 100

4~10 摄氐度放置 4~6 小时。

分离剂 500 500 500 500

室温放置 30 分钟；3500rpm,离心 20 分钟;吸(1)弃上清;测沉淀物放射

性计数(B).


〈120ug/L。


1）反应时间一定要按要求进行。

2）离心分离沉淀以 4-8 摄氏度。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C39、逶明质酸放免测定标准操作规程

（1）产地：



血清 HA 主要由肝内皮细胞摄取分解，少量小分子亦由肾小球滤过，当肝、

肾功能受损时，血清 HA 升高，且随病变加剧而呈升高趋势。HA 预测肝硬化

优于现有常规肝功指标。本测定盒采用放免分析法，第二抗体作为分离剂，

测定量值范围为 0-800ng/ml。

（3）试剂：

1) HA 标准 6瓶（0,50,100,200,400,800ng/ml）

2) 试剂 1 瓶

3) 125I-HA 1 瓶冻干品用 10ml 生理盐水溶解

4) 第一第二抗体各一瓶，冻干品用 10ml 生理盐水溶解

5) 质控血清使用前加 0.5ml 双蒸水溶解，分装冷冻保存。允许范围：

L:85.8-116.5ng/ml,

M:158.1-215.8ng/ml,

H:389.3-526.8ng/ml。

（4）操作步骤：试剂 NSB 标准样品标准 150 50 样本 50 试剂 1 100 100 125I-HA 100 100 100

混，37 度水浴 60 分钟一抗 100 100 100 混，37 度水浴 30 分钟二抗 100 100 100 混，37 度水浴 30 分钟，3500 转/分离心 15 分钟弃上清液，测沉淀 CPM

（5）数据处理：

以 HA 标准浓度为横座标，B/B0 为纵坐标，用 Logit-Log 方式拟合标准曲

线。

（6）正常参考：

2-110ng/ml。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C40、Ⅳ型胶原放免测定标准操作规程

（1）产地：



Ⅳ型胶原是基底膜网状结构的主要组成成份。其反映胶原的合成，与纤维

化程度正相关。本测定采用竞争放射免疫分析方法，固相第二搞体作分离

剂，测定血清，体液及组织中的Ⅳ-C 含量。

（3）试剂:

1）Ⅳ-C 标准液:7 瓶(0,20,40,80,160,320,640ng/ml)

2）125I-Ⅳ-C:1 瓶，冻干品则加 10.5ml 缓冲液溶解。

3）抗Ⅳ-C 血清：1瓶，冻干品则加 10.5ml 缓冲液溶解

4）第二抗体：1瓶，用前充分混。

5）缓冲液：1瓶，加双蒸水 10 倍稀释后备用。

（4）操作步骤（单位：ul）

试剂 NSB 标准液标本

标准 200

标本 200 125I-Ⅳ-C 100 100

100

抗血清 100 100

缓冲液 200

混，4摄氏度反应>16 小时

第二抗体 1000 1000 1000

4 摄氏度反应约 60 分钟后离心（3500rpm,10 分钟），弃上

清，测定沉淀放射性。用 Logit-log 法拟合。

（5）参考值：

49.77±15.0ug/L。


1．溶液操作宜 10 度以下，宜低温离心。

2．试剂盒有效期一个月。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C41、内皮素放免测定标准操作规程（1）产地：

东亚免疫技术研究所中国北京（2）用途：

测定血浆或体液内皮素，了解血管内皮功能。（3）样品收集：

静脉血 2ml,注入含 10%EDTA 二钠 30ul 和抑肽酶 40ul 的试管中，混，4 摄氏度，3500rpm 离心 10min,分离血浆。-20 摄氏度可保存二个月，测定前，室温复融，再次 4摄氏度，3500rpm 离心，取上清测定。

（4）试剂： 1）缓冲液 1瓶：用双蒸水稀释至 50ml.

2）ET-Ab1 瓶:加缓冲液至 11ml. 3）125I-ET1 瓶：加缓冲液至 11ml. 4）ET 标准 5瓶：用前加 PBS1ml 溶解，浓度为：

0,60,180,500,1000pg/ml. 5）抑肽酶，10%EDTAF 二钠各 1瓶。 6）PR 试剂：1瓶。

（5）测定步骤： ET RIA 加样程序列(ul)

T NSB S0 S1-S6 U0 U 缓冲液 200 100 100 标准液 100 样品 100 抗血清 100 100 100 摇 4 摄氏度 24h 以上

125I-ET 100 100 100 100 100 100 摇 4 摄氏度 24h 以上

PR 试剂 500 500 500 500 500 混，室温 15min, 3500rpm 离心 20min，测沉淀 cpm。

（6）正常血浆参考值：

X±SD：50.8±7.58pg/ml。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C43、肺肿瘤标记 CY21-1 放免测定标准操作规程

（1）产地：

天津新传生物技术有限公司，（022）8343217，300221

（2）用途：

CYFRA211-1 用于评价肺癌及其它恶性和良性肺部疾病。

（3）试剂：

1） KS19.1 鼠单克隆抗体包被珠：100 粒。稀释液 1瓶：100ml。

2）标准品：5瓶，冻干品，用 1 ml 双蒸水复溶。浓度分别为

0,3,15,25,50ng/ml.

3） 125I 标记 BM19.21 鼠单克隆抗体:2 瓶，5ml/瓶。

4）质控血清：2瓶分别用 1ml 双蒸水复溶，高值约为 13ng/ml,低值约为

5ng/ml。


1) 在反应盘各孔内分别加入 0.1ml 标准品，质控血清及待测血清。

2) 每孔加入一粒包被小珠。

3) 每孔各加入 0.1ml251I 标记物。

4) 混后在 2-8℃后应约 20 小时。

5) 用自动洗珠器洗 4次，每次 2ml 水。

6) 在放免测量器上测量放射强度。

（5）参考值：

CYFRA21-1 在肺良恶必性疾病的临界值为 3.3ng/ml。

C45、T3 T4 TSH FT3 FT4 测定标准操作程序（SOP） 1．目的 ⑴检查甲状腺功能 ⑵检查垂体—甲状腺轴调节关系 ⑶其它：垂体分泌功能等 2．该 SOP 变动程序本 SOP 因试剂说明、仪器操作程序的修改或其他原因所致的改动，可由化学发光免疫测定技术主管修改，并报经科主任批准签字。 3．操作方法

（1）样品收集和处理样品类型：血清至少 500μl


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



保存方法：血清室温下放置不超过 8小时，2-8℃冷藏不超过 48 小时，超过应在-20℃以下冷冻。样品只能冷冻 1次，且复融后应彻底混。

（2）试剂 (试剂、定标液、质控品均由 BECKMAN 公司提供) ⑴ T3 T4 TSH FT3 FT4 液相、固相试剂 ⑵ 辅助试剂：T3 T4 释放试剂冲洗试剂 1 ⑶ 非必需试剂：T3、T4 稀释液稀释液 1 保存方法：液相、固相试剂在 2-8℃至失效期，在室温下累计不超过 40 小

时，T3 、T4 释放试剂室温下累计不超过 8小时。（3）定标当使用新批号的试剂时需先定标。T3 T4 FT3 FT4 用定标液 A定标，TSH 用定标液 B定标。事先将标准曲线条码和定标液浓度条码扫描入仪器。

（4）质控定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控。使用 Ligand

Plus 1.2.3 质控物，事先将质控物浓度输入仪器。（5）上机检测参见 ACCESS 仪器标准操作程序。

4.参考值 T3 0.6-1.81μg/L T4 45-109μg/L TSH 0.35-5.5 mIU/L FT3 2.3-4.2 ng/L

FT4 8.9-18.0 ng/L 5.相关技术指标

项目 T3 T4 TSH FT3 FT4 测定范围 0.2-8.0 5-300 0.01-150 0-20 1-130 灵敏度 0.2 5 0.01 0.5 1.0

6．本 SOP 不尽之处请详阅相关项目试剂说明书。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C46、AFP、CEA、Fer、BR、OV、GI、PSA、 fPSA 测定标准操作程序

（SOP） 1.该 SOP 变动程序

本 SOP 因试剂说明、仪器操作程序的修改或其他原因所致的改动，可由化

学发光免疫测定技术主管修改，并报经科主任批准签字。

2．操作方法

（1）样品收集和处理

样品类型：血清

样品量： AFP 至少 200μl 血清（下同），AFP CEA Fer GI 300μl,

PSA fPSA 300μl, 肿瘤标志物全套 600μl。

保存方法：血清室温下放置不超过 8小时，2-8℃冷藏不超过 48 小时，超过

应在-20℃以下冷冻。样品只能冷冻 1次，且复融后应彻底混

。

（2）试剂 (试剂、定标液、质控品均 AXSYM 由公司提供)

⑴ AFP CEA Fer BR OV GI PSA fPSA 液相、固相试剂

⑵ 辅助试剂：AFP：AFP 冲洗试剂，CEA：冲洗试剂 1，BR：BR 预处理试

剂。

⑶ 非必需试剂：稀释液 1、2、8，CEA 稀释液，GI 稀释液。

保存方法：液相、固相试剂在 2-8℃至失效期，在室温下累计不超过 40 小

时。

（3）定标

当使用新批号的试剂时需先定标，详见附表。事先将标准曲线条码和定

标液浓度条码扫描入仪器。

项目 AFP CEA Fer BR OV GI PSA fPSA

定标液 D D C G X W D fPSA

（4）质控

定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控。使用 Tumor

Marker Plus 1、2 质控物，事先将质控物浓度输入仪器。

（5）上机检测

参见 AXSYM 仪器标准操作程序。

3.参考值

AFP 0-20.0μg/L

CEA 0-5.0μg/L


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



Fer 男性 22-322μg/L, 女性 10-291μg/L

BR 0-35.0U/ml

OV 3.4-68.6 U/ml

GI 0-37.0U/ml

PSA 0-4.0μg/L

fPSA 0-2.5μg/L

fPSA/PSA 0.16-1.0

1.相关技术指标

项

目

AFP CEA Fer BR OV GI PSA fPSA

测定

范围

1.0-

1000

0.5-

100

0.5-

1650

3.5-

450

1.7-900 0.42-

500

0.06-

135

0.1-20

灵敏

度

1.0 0.5 0.5 3.5 1.7 0.42 0.06 0.1

5．本 SOP 不尽之处请详阅相关项目试剂说明书。 C47、HCG、PRL、FSH、LH、E2、P(孕酮)、T(睾酮)、HGH 测定标准操作程序（SOP） 1.该 SOP 变动程序

本 SOP 因试剂说明、仪器操作程序的修改或其他原因所致的改动，可由化学发光免疫测定技术主管修改，并报经科主任批准签字。

2．操作方法（1）样品收集和处理样品类型：血清样品量： hCG 至少 200μl 血清（下同），PRL 200μl,性激素全套 500μ

l。保存方法：血清室温下放置不超过 8小时，2-8℃冷藏不超过 48 小时，超过

应在-20℃以下冷冻。样品只能冷冻 1次，且复融后应彻底混。（2）试剂（试剂、定标液、质控品均由 BECKMAN 公司提供）

HCG、PRL、FSH、LH、E2、P(孕酮)、T(睾酮)、HGH 检测试剂。（3）定标

当使用新批号的试剂时需先定标，详见附表。事先将标准曲线条码和定标液浓度条码扫描入仪器。

（4）质控


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控。事先将质控物浓度输入仪器。

（1）上机检测参见 ACCESS 仪器标准操作程序。

3.参考值 hCG 0-10.0IU/L PRL、FSH、LH、E2、P、T、HGH 详见报告单所附的参考值表

4.相关技术指标项目 hCG PRL FSH LH E2 P

T 测定范围 2.0-1000 0.3-200 0.3-200 0.07-200 10-1000 0.1-40

0.1-15 灵敏度 2.0 0.3 0.3 0.07 10.0 0.1

0.1 5．本 SOP 不尽之处请详阅相关项目试剂说明书。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C48、铁蛋白、叶酸、VitB12 测定标准操作程序（SOP） 1.该 SOP 变动程序


2．操作方法（1）样品收集和处理

样品类型：血清，至少 400μl。严重溶血标本拒收。保存方法：血清室温下放置不超过 8小时，2-8℃冷藏不超过 48 小时，超过

应在-20℃以下冷冻。样品只能冷冻 1次，且复融后应彻底混。

（2）试剂 (试剂、定标液、质控品均由 BECKMAN 公司提供) 铁蛋白、叶酸、VitB12 检测试剂。

（3）定标当使用新批号的试剂时需先定标，详见附表。事先将标准曲线条码和定

标液浓度条码扫描入仪器。（4）质控

定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控，事先将质控物浓度输入仪器。


3.参考值铁蛋白男性：22-322μg/L 女性：10-291μg/L 叶酸 2.6-20.0μg/L VB12 211-911ng/L

4.相关技术指标项目铁蛋白叶酸 VB12 测定范围 0.5-1650 0.25-20 20-2000 灵敏度 0.5 0.25 20



版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C49、CKMB、cTnI、MYO 测定标准操作程序（SOP） 1.该 SOP 变动程序本 SOP 因试剂说明、仪器操作程序的修改或其他原因所致的改动，可由化学发光免疫测定技术主管修改，并报经科主任批准签字。

2．操作方法（1）样品收集和处理样品类型：血清，至少 300μl。严重溶血标本拒收。保存方法：血清室温下放置不超过 8小时（cTnI 不超过 4小时），2-8℃冷藏

不超过 48 小时（cTnI 不超过 24 小时），超过应在-20℃以下冷冻。样品只能冷冻 1次，且复融后应彻底混。

（2）试剂 (试剂、定标液、质控品均由 BECKMAN 公司提供) CKMB、cTnI、MYO 检测试剂

（3）定标当使用新批号的试剂时需先定标，详见附表。事先将标准曲线条码和定

标液浓度条码扫描入仪器。（4）质控

定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控。事先将质控物浓度输入仪器。


3.参考值 CKMB 0-5μg/L CTnI 0-0.15μg/L MYO 0-110μg/L

4.相关技术指标项目 CKMB cTnI MYO 测定范围 0.18-300 0.01-50 0-1000 灵敏度 0.18 0.01 3



版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C50、IgE 测定标准操作程序（SOP） 1.该 SOP 变动程序


2．操作方法（1）样品收集和处理样品类型：血清，至少 200μl。保存方法：血清室温下放置不超过 8小时，2-8℃冷藏不超过 48 小时，超过

应在-20℃以下冷冻。样品只能冷冻 1次，且复融后应彻底混。（2）试剂 (试剂、定标液、质控品均由 BECKMAN 公司提供)

IgE检测试剂（3）定标

当使用新批号的试剂时需先定标。IgE 用 B 定标液定标。事先将标准曲线条码和定标液浓度条码扫描入仪器。

（4）质控定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控，事先将质控物浓

度输入仪器。（5）上机检测

参见 ACCESS 仪器标准操作程序。 3.参考值

IgE <1 岁 0.0178-0.6784nmol/L 1-4 岁 0.0051-4.4837nmol/L 5-10 岁 0.0064-5.0116nmol/L

11-15 岁 0.0242-2.1730nmol/L >15 岁 0.0000-4.8204 nmol/L

4.相关技术指标项目 IgE 测定范围 0.0191-38.2569 灵敏度 0.0191

5．本 SOP 不尽之处请详阅相关项目试剂说明书。 C51、地高辛、茶碱、皮质醇、卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠、丙戊酸、安

定、环胞酶素标准操作程序 1.该 SOP 变动程序


2．操作方法（1）样品收集和处理样品类型：血清。24 小时尿游离皮质醇留 24 小时尿，并记录尿量，10g 硼酸

防腐，混。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



采样时间：皮质醇抽血时间为 7-9AM 和/或 3-5PM。样本量：每个项目至少需血清 200μl，24 小时尿游离皮质醇至少需尿 200

μl。保存方法：血清和尿室温下放置不超过 8小时，2-8℃冷藏不超过 48 小时，

超过应在-20℃以下冷冻。样品只能冷冻 1次，且复融后应彻底混。尿标本复融混后，使用前需离心取上清液测定。

Cyclo 样本预处理操作

1、准确吸取 Cyclo 全血（振摇混）150ul 于沉淀管中。 2、加 50ul 溶解剂，注意不要有气泡。 3、加 300ul 沉淀剂，注意不要有气泡，盖紧盖子。 4、振荡器上振摇 10 秒，使其充分混。 5、离心 10000 转 5 分钟。 6、取上清夜置样本管中，上机检测。

[注意事项]

1、抗凝剂常用 EDTA 或肝素。（常用 EDTA 抗凝管制备：每管分别取 0.2mol/L EDTA-2Na 溶液 50ul，烘干

即可。） 2、沉淀剂非常不稳定，用后及时保存，防止蒸发。 3、离心时间不能太短，至少 5 分钟。 4、定标和质控同法操作。

（2）试剂 (试剂、定标液、质控品均由 BECKMAN 公司提供) 地高辛、茶碱、皮质醇、卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠、丙戊酸、安定、

环胞酶素检测试剂（3）定标

当使用新批号的试剂时需先定标，详见附表。事先将标准曲线条码和定标液浓度条码扫描入仪器。

（4）质控定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控，事先将质控物浓

度输入仪器。（3）上机检测参见 AXSYM 仪器标准操作程序。 3.参考值

地高辛 0.8-2.0μg/L 茶碱 10-20mg/L


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



皮质醇 7-9AM：43-224μg/L 3-5PM：30.9-166.6μg/L 24 小时尿游离皮质醇 28.5-213.7μg/24h 卡马西平 4-10 mg/L 苯巴比妥 15-40 mg/L 苯妥英钠 10-20 mg/L 安定 0-100μg/L 丙戊酸 50-100 mg/L

4.相关技术指标项目地高辛茶碱皮质醇卡马西平苯巴比妥苯妥英钠测定范围 0.1-5.0 0.3-40 2-750 0-18 0.15-80 0.15-40 灵敏度 0.1 0.3 2.0 0.25 0.15 0.15 5．本 SOP 不尽之处请详阅相关项目试剂说明书。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



C52、DPD 测定标准操作程序（SOP）

1.该 SOP 变动程序

本 SOP 因试剂说明、仪器操作程序的修改或其他原因所致的改动，可由化

学发光免疫测定技术主管修改，并报经科主任批准签字。

2．操作方法

（1）样品收集和处理

样品类型：第 2次晨尿，至少 1ml。

保存方法：尿液避光保存，2-8℃冷藏不超过 48 小时，超过应在-20℃以下

冷冻保存，可保存 2年。样品可冷冻复融 5次，复融后应彻底

混，离心取上清液测定。

样品拒收标准：非第 2次晨尿，长时间暴露在强光下。

（2）试剂 (试剂、定标液、质控品均由 AXSYM 公司提供)

⑴DPD 液相和固相试剂

⑵非必需试剂：DPD 稀释液。

保存方法：液相、固相试剂在 2-8℃至失效期，在室温下累计不超过 40 小

时。

（3）定标

当使用新批号的试剂时需先定标。DPD 用 P 定标液定标。事先将标准曲

线条码和定标液浓度条码扫描入仪器。

（4）质控

定标后必须做质控，判断样品测值是否准确也可做质控。使用 DPD A、

B、C 质控物，事先将质控物浓度输入仪器。

（5）上机检测参见 AXSYM 仪器标准操作程序。尿 Cr 送生化室测定

3.参考值

DPD/Cr 男性：2.3-5.4 女性：3.0-7.4

（DPD nmol/L, Cr mmol/L）

4.相关技术指标

项目 DPD

测定范围 0-350

灵敏度 5

5.本 SOP 不尽之处请详阅相关项目试剂说明书。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



过敏原检测操作规程

QD 过敏原检测原理：

当具有过敏抗原固化于表面的载体与病人血清培养在一起后，血清中特异性

IgE（一抗）就会特异地结合到抗原上，此特异结合的抗体可被酶联的二抗所识

别，加入显色剂后，二抗所联的酶使显色剂由橘黄色变成蓝色。显色的深度与血

清中特异性 IgE 成正比；能定性/半定量地检测血清中特异性 IgE 的浓度。

一、检测盒组成

1． QD 过敏原检测板：5 支，每支检测板中的各个无色检测片段之间

均有白色隔离片段分开，在这些无色检测片上，分别结合了各种

不同过敏原。例如：猫狗毛皮屑，螨虫，屋尘，霉菌，各种花草

树，鱼虾蟹，牛奶，蛋，肉类，花生大豆小麦等。其中二片分别

为阳性和阴性对照反应片，用以鉴定终结果的可靠性。

2． QD 洗涤缓冲液（试剂 1）：一瓶，60 毫升，白色大瓶。

3． QD 酶联抗体（试剂 2）一瓶，4毫升，红色。

4． QD 显色剂（试剂 3）：五瓶，2.5 毫升/瓶，橘黄色（如发现本试

剂呈浅兰色，应弃去，不能使用）。

5． 1 毫升一次性注射器：5 支；与检测板末端连接，用于吸入血

清、试剂和清洗剂。

6． 10 毫升一次性塑料杯：5 只；用于清洗操作过程分装清洗剂。

7．说明书一份。

本盒未提供大所需材料：自来水及水槽，吸水纸或纱布，定时钟。

二、操作步骤

操作前准备：（1）按常规获得 1 毫升病人的血清。（2）测试前把所有试剂

和检测板平衡到室温（20-25℃）.(3)操作时戴上橡胶手套。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



1．除去检测板两端密封塞，装上 1ml 注射器，推出管内液体，然后

将病人血清吸入检测板，如发现检测板有气泡，排出后重吸，

在室温下培养 100 分钟 200 分钟。

2．推出检测板内血样，拉出注射器推杆，用 1 号试剂（白色大瓶）

灌满注射器，任试剂流尽，装入注射器推杆，用自来水冲洗检测

板尖端并用纱布或吸水纸擦干尖端。

3．吸入二号试剂（红色），检查无气泡，在室温下培养 100 分钟-

200 分钟。

4．用注射器推出检测板内试剂，拉出注射器推杆，用 1 号试剂灌满

注射器，任试剂流尽（步骤 1）。装入注射器推杆，将少量 1 号

试剂装入小塑料杯，用注射器将其吸入检测板后，拉出注射器推

杆，任试剂流尽（步骤 2）。重复洗涤步骤 1 和 2 一次后，再用

1 号试剂灌满注射，任其流尽。（共洗五次！）装入注射器推

杆，用自来水冲洗检测板尖端并用纱布或吸水纸擦干尖端。

5．吸入三号试剂（橘黄色），检查无气泡在室温下培养 30 分钟后

观测结果。

试剂盒储存及注意事项

1．本试剂盒应保存在 2-8℃，仅供体外检测用。失效期后的产品请

勿使用。

2．试剂盒使用前，从冷藏环境中取出，应先置室温平衡后方可使

用。

3．检测板不能重复使用，也不能供一个以上的样品同时使用。

4．所有操作均应按照本说明书的步骤进行，固相酶联反应中抗原抗

体反应是不可逆的，要严格注意加样顺序，不能颠倒。

5．在检测操作过程有 3 次加样步骤，即加标本（血清），加酶联抗

体，加显色剂，每次加样均用与检测板相连接的 1 毫升注射器平


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



稳吸入，一般加样至注射器接口，加入标本或酶联抗体后应仔细

检查，如发现在检测片段表面有气泡，应将试剂排回试剂瓶后直

接重新加样。

6．检测过程靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物目的，通过

洗涤以清除残留在检测板中的没能与固相抗原或抗体结合的物

质，以及在反应过程中吸附于固相载体的干扰物质（蛋白质

等），洗涤是检测操作的关键步骤，为防止因清除不彻底导致游

离酶残留在管内，而造成非特异性显色，操作者应严格按要求洗

涤。


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D1、D-二聚体

[原理]

以抗 D-二聚体单克隆抗体标记固相载体胶乳颗粒，在此胶乳颗粒抗体结合物中加

入受检血浆，如血浆中含 0.5mg/L 以上的 D-二聚体,胶乳颗粒则发生凝集反应.

[标本与试剂准备]

0.109M 枸椽酸钠抗凝剂与血液以 1:9 混 ,2500g 10 分钟离心。试剂在室温平

衡 15 分钟后摇使用.

[操作]

在黑色纸片上的每个圈内各放入 15ul 未稀释样本血浆,阳性对照和阴性对照血

浆，依次于每个圈内加摇后的胶乳试剂 15ul(与标本等量),用塑料棒搅 ,轻轻

摇动纸片 2~3 分钟后观察，如未稀释血浆呈阳性,可继续将样本用标本稀释液作

倍比稀释。

[结果]

根据阳性结果的倍比值作半定量结果报告.

[临床意义]

DIC 时,血浆 D-二聚体明显升高,呈阳性反应,是诊断 DIC 的重要依据.D-二聚体在

原发性纤溶症时正常,继发性纤溶亢进则显著增高,是二者鉴别的重要指标,此外,

各型白血病,急性心肌梗死、脑血管疾病、肺脏疾病、外科手术等均可见血浆 D-

二聚体水平增高。


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D2、3P 试验

[原理]

在凝血酶作用下，纤维蛋白原释出纤维蛋白肽 A、B 后，转变为纤维蛋白单体

（FM）；纤维蛋白在纤溶酶降解下产生 fdp。FM 与 fdp 形成可溶性纤维蛋白单体

复合物。

硫酸鱼精蛋白及乙醇可使该复合物中 FM 游离，然后又自行聚合呈肉眼可见的纤

维状、絮状或胶冻状，反映 fap 尤其是碎片×的存在。

[操作]

1. 取 0.5ml 贫含血小板的枸椽酸抗凝血浆放入试管中

2. 置 37℃水浴中 3min

3. 加 10g/L 硫酸鱼精蛋白溶液 0.05ml,混，置 37℃水浴中 15min,立即观

察结果。

[结果判断]

阴性：血浆清晰不变，无不溶解物产生

阳性：血浆中如有细或粗颗粒沉淀出现，或有纤维蛋白丝（网）或有胶冻形

成

[临床意义]

3P 阳性：见于 DIC 早期或中期，但在大出血或样本置冰箱后可呈假阳性。 3P 阴性：见于 DIC 晚期和原发性纤溶症。


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D3、骨髓细胞学检查

骨髓细胞学检查应抽取骨髓少量制成薄片。采用骨髓小粒丰富、制片厚薄均的

涂片，经瑞氏—姬姆萨混合染色后，于显微镜下检查细胞质和量的变化。

[试剂]

1) 瑞氏染色液：瑞氏染粉 18，置洁净干操的研钵内，加甘油 3.5ml，研磨片

刻，使瑞氏染粉充分溶解，加甲醇约 50ml，继续研磨片刻后，收集上层染

液；残余部分再加甲醇 50ml 研磨：再收集上层染液，重复几次后，用甲醇冲

洗研钵，倒入同一瓶内，后加甲醇至 500mi。开始几周应经常振摇染色

液。染色液存放的时间越长，染色效果也越佳。此外，研磨时染粉内应先加

甘油，、以免染粉在研磨过程中结成块，更易溶解。染粉未经研磨配成的染

液不宜用作骨髓片染色。

2) 姬姆萨浓缩染液：将姬姆萨染粉 3．8g 放入纯甘油 250ml 中，置 60℃水浴 2

小时，溶解后力口 60℃预热的甲醇 250m1 混，于室温、棕色瓶内保存，配

后数天即可使用，可长期保存。

3) pH6．5 磷酸盐缓冲液：磷酸二氢钾 1．5g，磷酸氢二钠 1．0g、加蒸馏水到

5000ml。后纠正 pH6．5。

4) 姬姆萨稀释液：取姬姆萨溶液 50m1，加 pH6．5 磷酸盐缓冲液到 500ml，混

。此液为姬姆萨应用液，可直接作涂片复染用。作瑞氏稀释液时，取此液

10 一 20mL 加蒸馏水至 100ml，混即可。

[操作]

4．骨髓取材：

取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等。两岁以内小孩好用胫骨，

成人常取髂后上棘，此部位穿刺方便，病人也易接受．穿刺前要求严格消

毒，杜绝细菌感染，除穿刺室紫外线消毒和皮肤消毒外，还应注意穿刺包

和手套消毒时间有否过期。戴手套要熟练，避免手套接触来消毒物品。穿

刺针进入髓腔时常有脱空感，吸取前针筒内应留有 1m1 左右的空隙，否则

髓液很快进入针筒空隙而无法取出。针筒内若有水份也要用消毒纱布擦

干，以免溶解细胞。吸液量一般控制在 0．2m1 左右。因吸量过多，易被

外周血稀释。部分病人干抽或吸出量太少时，不要将针头立即拔出，可边

抽边调节针头深浅，或边抽边缓慢外移针头，后将针头内可能残留的髓

液尽量推出、制片，以减少病人痛苦。

5．涂片：


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选两块小粒较多、厚薄均的骨髓片，自然干燥后在较厚的头端髓膜上写

上病人姓名、日期及“BM”标记。加瑞氏染色液 8—12 滴，用吸球吹吸并

使其布满整张涂片，约半分钟后，加姬姆萨稀释液 5-10 滴，再用吸球吹

吸气，使两液充分混，若有金黄色油膜出现，染色效果更佳。染色时间

一般为 10 一 20 分钟，夏天可缩短些、冬天则可延长些。冲洗时应乎放玻

片让流水缓慢冲洗。另外，因手拿玻片处可能会有染料残留，应更换手拿

位置再予冲洗。染色太淡的涂片，可用姬姆萨稀释液复染 3分钟；着色太

深时，可用瑞氏

染液滴加于涂片上。立即冲洗即可。各实验室好能摸索出自己的染色经

验，尽量做到一次性染色成功。没有姬姆萨染液的单位，可用蒸馏水加少

量天青(或美蓝)代替，但染色效果没有前者好。染好的涂片要自然干燥，

切忌加热烘干，否则细胞退色而影响观察。

6．染色

选两块小粒较多、厚薄均的骨髓片，自然干燥后在较厚的头端髓膜上写

上病人姓名、日期及“BM”标记。加瑞氏染色液 8—12 滴，用吸球吹吸并

使其布满整张涂片，约半分钟后，加姬姆萨稀释液 5-10 滴，再用吸球吹

吸气，使两液充分混，若有金黄色油膜出现，染色效果更佳。染色时间

一般为 10 一 20 分钟，夏天可缩短些、冬天则可延长些。冲洗时应乎放玻

片让流水缓慢冲洗。另外，因手拿玻片处可能会有染料残留，应更换手拿

位置再予冲洗。染色太淡的涂片，可用姬姆萨稀释液复染 3分钟；着色太

深时，可用瑞氏

染液滴加于涂片上。立即冲洗即可。各实验室好能摸索出自己的染色经

验，尽量做到一次性染色成功。没有姬姆萨染液的单位，可用蒸馏水加少

量天青(或美蓝)代替，但染色效果没有前者好。染好的涂片要自然干燥，

切忌加热烘干，否则细胞退色而影响观察。

[分析要点]

(1) 骨髓片观察的内容:

1) 肉眼观察涂片有无骨髓小粒、脂肪滴制片、染色是否良好。

2) 低倍镜下观察骨髓增生情况(主要分为 5级)，标本有否稀释，并计数

全片的巨核细胞，了解有无特殊异常细胞。

3) 高倍镜下观察巨核细胞形态及巨核细胞分类计数(一般被分类的巨核

细胞应不少于 25 个)，并进一步观察低倍镜下看到的可疑细胞。


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4) 油镜下明确在低、高倍镜发现的异常或可疑细胞的性质，并作骨髓细

胞分类和全面的细胞形态分析。

骨髓细胞分类计数的正常范围较难制定。因为分析骨髓像是以骨髓细胞变化为基

础，并结合临床表现和血像的综合性分析，不能只以单一的比例作为是否正常的

标准。另外，个体差异、穿刺是否成功和分类部位等，都会影响细胞分类的结

果。

（2）正常骨髓主要指标及其分类原则：

1．正常骨髓像主要指标：

(1) 骨髓增生程度呈增生活跃。

(2) 有核细胞量中等，小粒内细胞较丰富。

(3) 涂片无脂肪滴，或在中老年者见少量脂肪滴。

(4) 粒、红细胞比例约 2—4：1，粒细胞可占 50％，淋巴细胞约占 20％(小儿

可高达 40％)，单核细胞、浆细胞、网状细胞一般＜3％。

(5) 巨核细胞在 1．5×3cm2 涂片上可找到 20—100 只。若小于 20 只，排除因

标本稀释原因外，可结合临床考虑巨核细胞减少。产血小板巨核细胞应不

少于总巨核细胞的 1／3，成按血小板易见到。

(6) 嗜酸性粒细胞小于 5％。嗜碱性粒细胞＜1％。

(7) 原始细胞中，原故细胞和原红细胞均小于 2％。

(8) 偶尔可见内皮细胞、组织嗜碱细胞、组织嗜酸细胞、成骨细胞、破骨细胞

和脂肪细胞等。

2．观察骨照片应注意的事项：

(1) 对介于上、下两阶段的同一系细胞，应按划下不划上的原则分类。对分类

曲线出现不明原因的畸形分布时，介于上、下阶段的细胞可适当调整其阶

段性；

(2) 一般病人的骨髓片中，偶见或为疑似的原始单核细胞、原始淋巴细胞(小

儿除外)及原始浆细胞，可不作报告或归于原始粒细胞中，以减少分类出

现的混乱。

(3) 骨髓细胞分类计数不应少于 200 个，否则分类误差太大，较难反映细胞的

其实分布情况。

(4) 书写报告时要对粒、红、巨三系细胞比例、形态变化分别描写，有特殊变

化的情况，尤其对临床诊治有价值的细胞应另加说明。骨髓报告的结论应

结合临床和其他实验室检验加以考虑，对尚不明确的结果只须描写看到的

内容，不要任意下结论。


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(5) 骨髓片若出现下列情况，则提示标本全部或部分稀释。

① 无骨髓小粒或有少量骨髓小粒，小粒内细胞丰富，但涂片有核细胞量减

少。

② 外周血中血小板量正常或增多，但涂片巨核细胞量减少。

③ 成熟阶段粒细胞比例明显增高，而有核细胞量却减少。

(6) 当怀疑骨髓有转移性肿瘤时，不管涂片是否稀释，应看完所有涂片，尤其

要注意涂片的头尾及两侧部位，是否有成堆排列的肿擅细胞。

常见血液病骨髓像诊断要点：

1)缺铁性贫血(IDA)：

成熟红细胞体积偏小，幼红细胞呈现核固缩和胞浆量少及着色偏蓝等核老、浆幼

的核浆发育不平衡现象。外铁明性，含内铁细胞减少。此类贫血常见，临床上

常有胃病、痔疮和月经多等病史。

2)巨幼细胞性贫血(MA)：

成熟红细胞体积偏大，可见巨大的红细胞，幼稚红细胞常呈核染色质疏松、浆量

增多、着色偏红等核幼、浆老的核浆发育不平衡现象。且可找到巨大晚幼粒和杆

状核粒细胞，分叶核粒细胞分叶也偏多。巨核细胞核分叶增多，但不出现多个小

核的巨核细胞，巨核细胞浆内易见由核染色质脱落下来的核小体(该类细胞约占

巨核细胞 20—30％)。临床上常有胃肠手术、营养不良和妊娠等情况。外周血像

常出现 3系减少。

3)溶血性贫血(HA)：

骨髓幼红细胞显著增生，其总比例常大于 50％，但以中、晚幼红细胞增生为主，

并可见球形红细胞、椭圆形红细胞等特殊形态的变化。此病临床资料对诊断尤为

重要，病人常出现黄疽、尿胆原和间接胆红素增高，网织红细胞常大于 5％。急

性溶血时，外周血像可出现幼红细胞。抗人球蛋白试验和酸溶血试验常出现阳

性。

4)再生障碍性贫血(AA)：

骨髓小粒呈空架状，脂肪球增多。粒、红、巨三系细胞减少，其中以巨核细胞减

少更为明显，成熟淋巴细胞比例相对增高，网状细胞、浆细胞、嗜碱组织细胞常

偏多。血像 3系减少，但脾脏不肿大。

5)骨髓增生异常综合征(MDS)：

红细胞可见多核、核碎裂及巨幼样变，成熟粒细胞分叶减少(或增多)，粒细胞脑

浆颗粒减少或无或过大而多，核浆发育不平衡。易见多个小核的颗粒巨核细胞和

微小型巨核细胞。此类病人外周血像易见幼稚红细胞和幼稚粒细胞，成熟单核细


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胞常增多。临床抗贫血治疗效果差。诊断 MD3 后，按骨髓和外周血像中原始细胞

多少，有否环状铁粒幼红细胞可分为难治性贫血(RA)、难治性贫血伴环状铁粒幼

红细胞增多(RAS)、伴原始细胞增多的难治性贫血(RAEB)、转化中原始细胞片增

多的难治性贫血(RABBT)4 型，至于授性粒单细胞性白血病(CMMl)已属白血病可不

再列入 MDS。

RA：外周血原始细胞无或＜1％，骨髓原始细胞＜5％。

RAS：同 RA，但骨髓中环形铁粒幼细胞，为铁粒细胞的 15％以上。

RAEB：外周血原始细胞＜5％，骨髓原始细胞 5-20％。

良 AEBT：外周血原始细胞＞5％，骨髓原始细胞 20、30％。

6)慢性粒细胞性白血病(CML)：

粒系极度增生，以晚幼粒细胞和杆状粒细胞增生为主，嗜碱性粒细胞易见。血片

中白细胞增多并出现中、晚幼粒细胞，嗜碱性粒细胞比例增高。临床上出现乏

力，巨脾等。碱性磷酸酶(NAP)积分明显减低。

7)慢性淋巴细胞性白血病(CLL)：

成熟淋巴细胞明显增多，其比例占 50％以上。原始和幼稚的淋巴细胞少见，不出

现异型淋巴细胞。其他各系细胞增生情况不一。血像白细胞增高，成熟淋巴细胞

明显增多。发病年龄较大，常伴有乏力、脾脏肿大。

8)急性淋巴细胞性白血病(ALL)：

区分是 ALL 还是急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)，对临床用药和病人的预后有重

要意义，因此，报告时应慎重。ANLL 可分为 M0、M1、M2、M3、M4、 M5、 M6 和

M7 等亚型。 M0 为极低分化的髓性白血病，其诊断与 M7 一样要结合免疫标记和

电镜、组化。ALL 分 L1、L2、L3 3 亚型，其各亚型特点见表。与急非淋巴细胞相

比，原始和幼稚淋巴细胞体积小，胞浆量少，较

透明，无颗粒及奥氏小体，核染色质粗，排列致密，着色深紫红色，核仁小而

少，组织化学染色的 POX(或 SB)阳性率＜3％。此型白血病以儿童多见，预后较

好。

L1 L2 L3

细胞大小小细胞为主大细胞为主，大小

不一

大细胞为主，大小

较一致

核形规则，偶有凹陷折叠规则，偶有凹陷折

叠不规则

核染色质细、分散结构较一致细、分散或粗而浓粗点状，均均一致


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



集，结构不一致

核仁小，不清楚少或不能见清楚 1-多个明显 1-多个泡状

胞浆量少不一定，常较多较多

胞浆嗜碱性轻、中度不一定，有些细胞

深染深蓝

胞浆空泡不定，较少不定常明显蜂窝状

9)急性粒细胞性白血病(AGL)：

原始粒细胞、异常早幼粒细胞或中性中幼粒细胞显著增多。其白血病细胞浆较丰

富，着色灰蓝，可见较粗大的非特异性颗粒(单核细胞的颗粒常较细小)，易见粗

大奥氏小体。核染色质粗颗粒状，排列较规则。核仁清晰，数目 1—4个。急性

粒细胞性白血病又分为 Ml、 M：(包括 M：．和 M2b 亚型)、 M：(包括 M3n 和 M：

b 亚型)3 型。 M，的骨馈原始粒细胞≥90％(非红系分类，即 NEC)。M2l 的骨髓

原始粒细胞＞30 一＜90％(NEC)，单核细胞＜20％，早幼粒及其以下各阶段细胞

＞10％。M2b 以异常中性中幼粒细胞增生为主，该类细胞核浆发育不平衡，可见

核仁，数量＞30％，原始或早幼阶段细胞也同时增多。M”的早幼粒细胞布满粗

大的非特异性颗粒，该类细胞大小不一，核形态不规则，可见内、外浆。M3b 的

早幼粒细胞布满细小的非持异性颗粒，形态变化同 M30。该类白血病细胞数量＞

30％(NEC)， POX(或 SB)染色常强阳性。

10)急性单核细胞性白血病(AMOL)：

该型的白血病细胞脑浆丰富，着色灰蓝，可有细小、散在颗粒，奥氏小体较细

长，核形态不规则，有外折内切现象，核染色质呈细沙状，排列成疏松租网状，

着色偏淡。核仁较大，数量少。根据白血病细胞分化程度，又可分为 M5t 和 M5b

型。 M50 的骨髓

原始单核细胞＞80％(NEC)，为未分化型。 Msb 的骨髓原始单核细胞＜80％

(NEC)，但原始和幼稚单核细胞＞30％(NEC)，为部分分化型。与粒细胞区别的组

织化学染色是非特异性脂酶(NSE)阳性，且受氟化钠(NaF)抑制，而粒细胞的 NSE

阴性(或弱阳性)且不受 NaF 抑制。

11)真性红细胞增多症(PV)：

红系增生活跃，幼红细胞形态正常，各期幼红细胞比值可有不同程度的增高，

Hb＞180 g／L，红细胞量＞7×1012/L。皮肤和粘膜呈暗红色，脾肿大。

12)红(白)血病(M6)：


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骨髓中红系＞50％，且伴有形态学的异常，骨髓中原始粒细胞(或原始、幼稚单

核细胞)＞30％(NEC)；若外周血中原始粒细胞(或原始、幼稚单核细胞)＞5

％，骨髓原始粒细胞(或原幼单核细胞)＞20％ (NEC)；单纯原始红细胞，早幼红

细胞显著增多者。

13)巨核细胞白血病(M7)：

骨髓原始巨核细胞＞30％，该类细胞为原粒或原淋细胞大小，胞浆丰富，常有

伪足状突起。此型易与 ALL 混淆，诊断时要结合电镜组化和免疫标记测定。

14)粒细胞缺乏症：

粒细胞显著减少，早期阶段，中性粒细胞可示“左移”现象。典型发作时，各

阶段的中性粒细胞极度减少，但各阶段的红、巨两系细胞常无明显改变。临床

上常伴有感染、高热等症状。外周血中性粒细胞极度减少或消失。

15)粒细胞减少症：

粒系统增生不良，成熟障碍，部分粒细胞可出现空泡、中毒性颗粒。外周血中

性粒细胞绝对值常在(1—1．8)×109/L 之间。可由感染、化学或物理损伤、造

血系统疾病、巨脾、胶原性疾病等所致。

16)原发性(或免疫性)血小板减少性紫癜(ITP)：

骨髓巨核细胞量明显增多，少数病人可正常或轻度减少。产血细胞。瘤细胞分

布常为弥漫性的，可引起广泛的骨路破坏和骨髓功能抑制，故有核细胞量常偏

少。临床上常有骨痛史，X 片示骨质虫蚀样改变。并免疫球蛋白测定异常，成熟

红细胞在涂片上呈串钱状排列，血沉明显加快，部分病人尿中可检出本周蛋

白。

17)急性粒、单核细胞性白血病(AMML)：

此白血病同时含有原始或早幼粒细胞和原始或幼稚单核细胞。根据两系血小板

巨核细胞比例减低，病人常出现脾肿大、血小板抗体增高、皮肤有出血点等。

18)传染性单核细胞增多：

骨髓中可见淋巴细胞稍增多，有少量异形淋巴细胞。主要表现在血片中成熟淋巴

细胞在 40 一 90％之间，其中多数细胞为胞浆增多，并有空泡的异形淋巴细胞，

该类细胞易误认为单核细胞或原始细胞，但其核的变化小于胞浆的变化，结合临

床上有发热、脾肿大及以青少年多见等，可作出判断。

19)脾功能亢进：

骨髓增生明显活跃，粒、红、巨 3系均示明显增生，粒系成熟障碍，巨核细胞

系的产血小板巨核细胞减少，晚幼红细胞比例偏高，外周血有两系或三系减少，

脾脏肿大。


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20)骨髓纤维化：

骨髓有核细胞偏少，骨髓和血片中均可见到泪滴状红细胞，骨髓穿刺时常为干

抽，临床上脾明显肿大，贫血，外周血易见幼稚红细胞和幼稚粒细胞。此病诊断

应结合骨髓活检。

21)纯红细胞再生障碍性贫血(PRAA)：

幼红细胞显著减少，(常小于 5％)，但粒系和巨核细胞系无明显异常。外周血中

单纯红细胞减少或血红蛋白降低，白细胞和血小板多正．常或略低,网织红细胞

明显减低。此病常与免疫功能紊乱有关。

22)多发性骨髓瘤(MM)：

原始浆细胞、幼稚浆细胞或成熟浆细胞明显增多，该类细胞为恶性的浆细胞，即

骨髓瘤的白血病细胞比例不一，又分 M4a、M4b、M4c、M4EO4 型。m4a 是以原始和

早幼粒细胞为主，原始单核细胞加幼稚单核细胞＞20％(NEC)； M4b 以原始、幼

稚单核细胞增生为主，原始．粒细胞和早幼粒细胞＞20％(NEC)； M4c 的原始细

胞既具有粒系细胞特征又具有单核细胞特征的细胞＞30％(NEC)，此型细胞形态

较难识别，要结合免疫标记测定； M4EO 除上述特征外，嗜酸性粒细胞占 5—30

％。

23)骨髓转移性肿瘤：

以成堆出现的肿瘤细胞为特征，该类细胞核染色质疏松，有核仁，脑浆量多少不

一，但胞界常不清。转移到骨髓的神经母细胞瘤，可见菊花状排列。此类病人的

骨韶有核细胞量常明显减少或伴标本稀释，可找到坏死成分，个别病人涂片需找

许多张才能发现堆集的肿瘤细胞。临床上常有骨痛、低热和消瘦等病史。

24)恶性组织细胞病：

除可找到较多吞噬细胞、淋巴样、单核样组织细胞外，还可见到巨大的恶性组织

细胞和多核巨组织细胞，该类细胞体积大(可达 30-40um)，胞浆多，着色深蓝，

核大，染色质粗、着色深紫红色，核仁大。血 3系减少，持续高热，脾肿大。

NAP 积分减低。部分恶性组织细胞要与大恶性淋巴细胞瘤相鉴别。

25)其他不明原因发热的病人骨髓像：

常以反应性骨髓像报告之。主要特征有粒细胞成熟障碍，毒性变；网状细胞增

多，有时可见少量吞噬型网状细胞和淋巴样、单核样组织细胞；易见浆细胞、单

核细胞。特殊情况下，可找到疟原虫或伤寒特征细胞等。此类病人常为各类微生

物(细菌、病毒、立克次体等)感染或免疫系统疾病所致，控制病因后，骨髓像可

自然好转。个别病人的发热可能是恶性淋巴瘤所致，但可找到淋巴母细胞(或淋

巴瘤细胞)，但其诊断应结合病理活检再确定。


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D4、过氧化物酶(POX)染色 [原理]

粒细胞和单核细胞脑浆内含过氧化物酶，能借助受体(联苯胺)脱氢催化过氧化氢而释放新生氧。受体被氧化成联苯胺蓝。再与亚硝基铁氰化钠结合成稳定的蓝色颗粒而沉淀于脑浆内。

[试剂] 1．联苯胺溶液：联苯胺 0．38，加 36％亚硝基铁氰化钠溶液 1ml，再取 95％

乙醇加到 100ml，水浴加热助溶。贮于棕色瓶中，可保存数月。工作时应小心溶液污染皮肤。

2.稀双氧水：临用前将 30％双氧水用蒸馏水 1：80 稀释。 [操作]

(1)新鲜干燥血片或骨髓片，加联苯胺液 5—8 滴，使布满整张涂片，固定 1—2 分钟。 (2)加等量稀双氧水，用吸球吹吸，使两液混，作用 4—8 分钟。 (3)涂片用流水冲洗。待干后再用瑞氏染液复染，复染时间约 30 分钟。

[结果观察] 可报告阳性程度或阳性细胞％。阴性：无蓝色颗粒和蓝色物质。弱阳性：蓝色颗粒量少且细小，相当于(十)。阳性：‘蓝色颗粒量多，粗细不一。相当于(++)。强阳性：细胞充满粗大紧密蓝色颗粒。相当于(+++）。

[临床意义] (1)粒系统细胞除早期原粒细胞阴性外，晚期原粒细胞及以下各阶段细胞均含

有不同程度的蓝色颗粒。嗜酸性粒细胞颗粒更粗大，呈深蓝色。嗜碱性细胞为阴性。

(2)单核细胞中，除早期原始阶段外，皆呈弱阳性反应，其颗粒细小稀疏。 (3)某些网状细胞及吞噬细胞可呈不同程度的过氧化物酶阳性反应。 (4)所有淋巴细胞过氧化物酶染色皆为阴性。 (5)该化学染色是区别急性淋巴细胞性白血病和急性非淋巴细胞性白血病的关

键化学染色。FAB 分型规定前者阳性率＜3％。 [附注]

(1)联苯胺溶液若明显变色发绿，应重新配制。 (2)亚硝基铁氰化钠溶液也可在临用前取 0．368 溶解于 1ml 蒸馏水中，加热助

溶后应用。 (3)双氧水浓度若过高，则有抑制酶作用。双氧水浓度太高、制片太厚、涂片

冲洗不净以及粒细胞破坏过多，可造成假阳性。涂片中粒细胞若看不见阳性颗粒，红细胞呈棕色或绿色，即示双氧水过浓。若双氧水加于血片上不产生气泡，则示失效，应重做试验。

(4)在涂片上两液混时，动作要轻，以免将阳性颗粒吹散到阴性细胞上； (5)制片不能太厚，涂片要新鲜。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D5、苏丹黑 B(SBB)染色 [原理]

苏丹黑为一种能溶解于脂肪中的色素。因此可使细胞内的中性脂肪、碘脂和类固醇着色。 [试剂]

(1)40％福尔马林。 (2)苏丹黑 B 备用液，取苏丹黑 B 粉剂 0，68 溶于 200ml 纯酒精中，用研钵慢

慢研溶，并在室温下搁置 1。2 天，待充分溶解，可冰箱保存 1 年。苏丹黑 B也可用苏丹黑代替。

(3)缓冲液，苯酚 16g 加纯酒精 30m1，碘酸氢二钠(Na：HPO12HIO)0．38，加蒸馏水 100m1，将两份溶液相混而制成，可保存 1年。

(4)染色液，以苏丹黑 B 备用液 30m1，缓冲液 20ml，两液混合后过滤配成，可保存数周。

[操作] (2)血片或骨髓片干后，用福尔马林蒸气固定 10 分钟(或直接染色)。 (3)浸入苏丹黑 B染液中 37℃水浴 30、60 分钟。 (4)求出后立即用 70％酒精洗片约 10 秒钟，水洗。 (5)自然干燥，瑞氏染液复染 20。30 分钟。

[结果观察] 阴性：胞浆内无棕色颗粒。弱阳性：细小、分布稀硫的棕黑色颗粒。强阳性：颗粒粗大，呈黑色，充满整个细胞，常盖到核上。

[临床意义] (1)本试验与 POX 反应平行。POx 染色要求涂片新鲜，而苏丹黑 B 染色则无此

要求。临床意义与 POX 染色相似或能相互弥补。（2)尼曼-匹克细胞及高雪细胞的苏丹黑 B染色均呈阳性反应。

[附注] (1)苏丹黑 B 备用液和缓冲液可保存放长时间，但要避光，并密封。以减少蒸

发。染色液用后放盐水瓶中加盖保存。染色欠理想时，应及时更换。 (2)70％酒精冲洗时，时间不能太长，否则会将阳性颗粒脱去。 (3)冬天或从冰箱取出的染色液应先放 37℃水浴预温 5 分钟后，再进行涂片染

色。 (4)骨髓制片要厚薄得当。太厚的涂片会影响细胞的观察。 (5)放置时间较长的涂片，应选用 SBB 染色，不宜作 POX 染色，因脂类较稳定

存在于细胞中。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D6、中性粒细胞碱性磷酸积分(NAP)染色改良 GOmorI 氏钙钴法

[原理]

细胞内的碱性磷酸酶在碱性环境中，可水解 β-甘油磷酸钠，释放的磷酸

根离子与钙离子作用而生成磷酸钙沉淀，与硝酸钴作用后生成磷酸钻，后

与硫化铵作用生成黑色稳定的硫化钴原粒，而定位于胞浆中。

[试剂]

(1)孵育液；由 20g/L 巴比妥钠 1Oml，20g/LMgSO4 2ml，30g／L 甘油磷酸铀

10ml，20g／LCaCl2 20ml，再加蒸馏水 20ml 配成。Mg2+起酶激活作用，

巴比妥钠提供碱性环境，PH 为 8.4-8.6。

(2)20g/L 硝酸钴，可重复使用或长期保存。

(3)硫化铵溶液，由硫化铵 1—2ml 加水到 100ml 配成。

(4）10g／L 伊红，作复染用，使红细胞和粒细胞核显红色，有利于结果观

察。

[操作]

(2)新鲜、干燥涂片用 95％乙醇固定 10 分钟。

(3)水洗后，将涂片浸于孵育液中，37℃水浴 4小时后再水洗。

(4)20g/L 硝酸钴溶液作用 4分钟。

(5)流水充分洗净多余的硝酸钴后，浸入硫化铵溶液中 3分钟。

(6)流水洗去硫化铵，10g/L 伊红水溶液复染 5分钟。

(7)流水冲洗，待干燥，油镜观察。

[结果观察]

(一)：胞浆无灰黑色成分。

(十)：胞浆呈浅灰色或部分胞浆有灰色沉淀。

(++)：脑浆呈均棕色或棕黑色沉淀，但着色较淡。

(+++)：胞浆内充满黑色颗粒。

(++++)：胞浆内充满黑色颗粒，而且沉淀掩盖到核上。

[报告方法]

报告阳性率和积分值。

阳性率：计数 100 个成熟中性粒细胞，求得阳性细胞的百分率。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



积分值：将所有阳性反应的细胞均换算为 1个(十)强度后的总和。

例如：(十)有 20 个细胞，(++)有 10 个细胞，(+++)有 5 个细胞，(++++)有 2

个细胞，则其积分值为(20×1)十(10×2)十(5×3)十(2×4)＝63 分。

[参考值]

其正常参考值因实验室条件不同和个体差异等因素而影响，变化较大。

一般界线，阳性串为 20 一 40％，平均积分为 20—60 分。

[临床意义]

NAP 主要用于下列几组疾病的鉴别：①恶性组织细胞病与反应性网状细胞

增多。②慢性粒细胞性白血病与类白血病反应。③病毒性感染与细菌性感

染。④急性非淋巴细胞性白血病与急性淋巴细胞性白血病。⑥阵发性睡眠性

血红蛋白尿与再生障碍性贫血。这 5 组病中，前者病情往往比后者重或更为

复杂，则 NAP 活性也就减低，而后者则相反， NAP 活性也就升高，如此分组

鉴别可便于记忆。

[附注]

见 NAP 染色偶氮偶联法。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D7、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法

[原理]

中性粒细胞胞浆中的碱性磷酸酶在碱性环境中，能水解磷酸萘酚钠，释放

的萘酚与重氮盐作用生成不溶性有色的偶氮染料，定位于胞浆中。

[试剂]

(1)固定剂，为 40％甲醛 25m1，加无水乙醇至 100m1。

(2)丙二醇缓冲液。①贮备液(0．2mol/L 2—氨基-2-甲基-1，3-丙二醇液)为

2-氨基-2-甲基-1，3-丙二醇 10．5g，蒸馏水加至 500ml。②应用液

(0.05mol/L pH9.75)，为 0．2mol/L 贮备液 25m1， o.1mol/L 盐酸 5m1，

蒸馏水加至 100m1。

(3)基质孵育液 pH9.5-9．6(用前临时配制)，α—磷酸萘酚钠 20mg 溶于

0.05mol/L 丙二醇缓冲液 20m1，再加坚牢蓝 RR(或坚牢紫酱)20mg，混合

后用滤纸过滤，立即应用。

(4)10g/l 亮绿。

[操作]

(1)新鲜血片或骨髓片用 4-10℃的固定剂固定 30 秒。

(2)在涂片上滴加新配过滤的孵育液，在室温下作用 10-15 分钟。

(3)水洗，10g/L 亮绿复染 2分钟。

(4)水洗，晾干镜检。

[结果观察]

(-)：阴性反应。

(+)：胞浆中含少量紫黑色，无紫黑色颗粒或红色物质。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



(++)：胞浆中含有中等量紫黑色颗粒或呈弥漫红色。

(+++)：胞浆中有丰富的紫黑色颗粒或弥漫较深红色。

(++++)：有极丰富的大紫黑色颗粒或弥漫深红色。

[参考值]

中性粒细胞碱性磷酸酶活性积分值为 10—50 分。

[临床意义]

基本同改良 Gomor；氏钙钻法。

[附注]

(1)若涂片不能及时测定，可固定干燥后放冰箱 4℃保存。

(2)在甘油磷酸钠和巴比妥钠应临用前称取，分别为 0．38 和 0．28，再加蒸

馏水 20m1 即配成。配制后的β-甘油磷酸钠不宜久放。

(3)涂片从孵育液拿出可不用水洗，直接加硝酸钻，但与硝酸钴作用后，应反

复水洗，以免残留的硝酸钻与硫化胺作用后使整个涂片变黑，造成假阳

性。

(4)每次染色时，应同时做 1 份感染思者的血片为阳性对照，以增加结果的可

靠性。对照片可 1次涂几十片，固定干燥后，放冰箱可保存几个月。

(5)硫化胺试剂本身黄色很谈，若变深黄色，应及时更换。试剂放置时间越长

黄色越深。这说明硫大量析出，硫离子浓度大大减少。易引起假阴性。这

是试验成功与否的关键。操作时释放的 H2S 较臭，应注意室内通风。

(6)送检时应送血片或骨髓片至少两张，以备复查。涂片要厚薄均，太厚的

涂片会造成 NAP 积分偏高。

(7)不要与生化碱性磷酸酶(AKP)混淆，而错送静脉血。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D8、糖原(PAS)染色

[原理]

含有乙二醇基的多糖类，被过碘酸氧化产生醛基，此醛基与雪夫氏试剂

(Schiff’s 液)作用，使无色的品红变成紫红色染料，而沉积于含有多糖类的

细胞内。

[试剂]

1．雪夫氏试剂：400m1 蒸馏水煮沸除去 C02，逐渐加碱性品红 2．08 溶解

后，待冷却至 60℃，加 1mm01 儿 HCl40ml，再加偏重亚硫酸钠

(NaHSO：)4g，次日加活性碳 1．5g，放置半天后过滤。配好后液体为无

色透明，保存于 4℃冰箱中。

2．过碘酸作用液：过碘酸 1g 溶于蒸馏水 100ml 中，或取过碘酸钾

(1tI04)0。698 加蒸馏水 100ml，微加热使溶解，再加浓硝酸 0．3m1，置

冰箱中保存。

3．固定液：95％乙醇 90ml 与甲醛 10m1 混。

4．20g/l 甲基绿：甲基绿 2g 溶于 100m1 蒸馏水。

[操作]

(1)新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内 10 分钟。

(2)水洗数次后，对照片先用唾液消化 30 分钟，也可在同一片，在其中间用

蜡笔划界，一半做对照，另一半做测定。

(3)水洗后，滴加过碘酸数滴于涂片上，作用 10 分钟后，再水洗数次。

(4)浸入 Schiff's 液 30 分钟。

(5)自来水冲洗约 2分钟，然后用 208 儿甲基绿复染 20 分钟，再水洗晾干。

[结果观察]

糖原在细胞浆内可染成红色，其判断标准随细胞不同而异。

有核红细胞判断：

(-)：无红色阳性颗粒和浅红色物质。

(+)：胞浆中有少数分散红色阳性颗粒，或呈浅红色反应，比正常红细胞色

深。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



(++)：胞浆中有 1 或 2 个浓的红色颗粒环，或胞浆中有 1 一 10 个中等大的颗

粒，或弥漫的红色物。

(+++)：脑浆中有 11—20 个红色中粗颗粒或染深红色。

(++++)：胞浆中红色颗粒明显增多且较粗，致密或呈紫红色物质。

淋巴细胞的判断:

(一)：胞浆内无粉红色颗粒。

(十)：胞浆内有 1一 10 个红色小颗粒或弥漫的浅红色物质。

(++)：10 个以上红色颗粒。

(+++)：脑浆中含有较多红色颗粒及小块紫红色物质。

(++++)：脑浆中含许多红色颗粒及小块紫红色物质。

[临床意义]

(2)用于营养性巨幼细胞贫血与红(白)血病的鉴别，前者的正常红细胞及有

核红细胞常为阴性，而后者可呈强阳性反应。

(3)用于鉴别急性淋巴细胞性白血病与急性非淋巴细胞性白血病，前者的原

淋巴细胞和幼稚淋巴细胞可见大块红色物质。后者的原始阶段细胞常为

阴性。

(4)高雪氏细胞呈强阳性，而尼曼匹克氏细胞呈微弱阳 9．49g 溶解于 1L 水

中 80ml,再加 0．07MKH2PO4(即 9．08g 溶解于 1L 水中)20ml，混。

[附注]

(1) Schiff’s 液变红即不能再用，以免细胞出现假阳性。

(2) 配制 Schiff’s 液器具需十分清洁干燥。配好的 Schiff's 液应于棕

色瓶内暗处保存。

(3) 用唾液水解是为了明确阳性物质是否为糖原所致，若水解后为阴

性，则证明是糖原物质，若仍阳性，则为其他多糖。

(4) 已染色的标本不能久置，应尽早观察结果。

(5) 报告阳性率与积分值，其计数方法与 NAP 相同。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D9、酯酶染色---中性非特异性脂酶(α—NAE)染色 [方法学]

酯酶染色的方法很多，根据与 pH 底物等不同作用，将常用的酯酶染色法分为两大类，即特异性酯酶染色和非特异性酯酶染色。后者又可分为 3 类：①中性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酚酯酶、乙酸菜酚酯酶和乙酸菜酚AS-D 酯酶。②酸性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酯酶和 α—丁酸菜酯酶。②碱性非特异性酯酶染色法：α—丁酸菜酯酶。中性非特异性酯酶染色是单核细胞与粒细胞白血病区别的重要方法，一般实验室可选用此法。

[原理] α—乙酸萘酚经酯酶水解产生萘酚，萘酚与重氮盐偶联，生成灰黑或棕黑色沉淀物，定位于胞浆中。

[试剂] 1．α—醋酸萘酯丙酮液：α—醋酸萘酯 1g，加丙酮和蒸馏水混合液 100m1，

溶解后贮于磨口带塞三角瓶内，4℃保存，可使用半年。 2.pH7．4 磷酸盐缓冲液：0．07MNa2HPO4(即 Na2HPO4) 3．基质液：磷酸盐缓冲液 82ml，缓慢滴加 α-醋酸萘酯丙酮液 1．6ml(滴速

约每分钟 40 滴)，边加边用力振摇。根据 5 分钟后，加坚牢蓝 B80mg，剧烈振摇 10 分钟，立即过滤，滤液两杯，各 40ml。

4．氟化钠基质液：称取氟化钠(NaF)61mg 加入上述其中基质液 1 杯内，混后，标上标记。

[操作] (1)新鲜涂片两张，分别标上 NSE 和 NaF 记号，滴加 10％甲醛生理盐水，固定

5分钟，用自来水轻轻冲洗，当心血膜脱落，晾干。 (2)两张涂片同时放入各自染色杯内，37℃水浴 1小时。 (3)取出后水洗，晾干后镜检。不用复染。

[结果观察] 在胞浆内若有棕黑色或灰黑色弥漫性颗粒沉淀者为阳性，细胞脑浆为黄色者为阴性。

[临床意义] 1．阳性：单核细胞和组织细胞呈强阳性，但可被氟化钠抑制；巨核细胞及

血小板呈阳性；早幼粒细胞白血病时早幼粒细胞可阳性，且不受氟化钠抑制。

2．弱阳性及阴性：粒细胞、淋巴细胞一般为阴性，若有弱阳性也可被氟化钠抑制。

3．临床鉴别：主要用于鉴别急性单核细胞性白血病与急性粒细胞性白血病，前者 NSE 阳性，且受氟化钠(NaF)抑制；而后者 NSE 阴性，若有阳性也不受氟化钠抑制。

[附注] (1)坚牢蓝 B和氟化钠可小包分装后干燥器保存 (2)基质液配制过程中要振摇，以促使基质溶解。冬天配制时应适当加温(置

于 37℃水箱操作)。基质液现配现用，不能保存，过滤后应尽快试验，以免大量沉淀物析出，影响染色效果。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D10、铁染色

[原理]

骨髓细胞外铁和有核红细胞中的铁粒，在酸性环境下与亚铁氰化钾作用，呈

阳性普鲁士蓝反应。

[试剂]

(1)200g/L 亚铁氰化钾溶液，溶液可保存数周，明显发绿和较多沉渣时应重

配。

(2)浓盐酸，可取少量贮存于油瓶内备用。放置时间太长或用时未见冒烟现

象，应即更换。

(3)铁染色应用液，即加浓盐酸约 20 滴于干净的 10mL 离心管(或小量杯)中，

再加 200g 儿亚铁氰化钾溶液少量，混合液变泥浊，然后缓慢再滴加双铁

氰化钾溶液’，使混浊消失即可。此液不必过滤，也不用离心。但应现配

现用，不能保存.

[操作]

(1)取骨髓小粒较多的涂片 1 张，用铅笔写上姓名、时间。好用蜡笔在涂片

体、尾部划两条线，以防做细胞内铁染料复染时液体渗出。

(2)使应用液盖满涂片，于室温作用 30 分钟，冬天可适当延长，后以自来水

轻轻冲洗，以免髓膜脱落。

(3)待干后，在蜡笔线中间区加 0．5％伊红乙醇溶液复染 2 分钟。水洗，待

干。

(4)在骨髓小粒内观察细跑外铁，在伊红复染区镜检红细胞内铁。

[结果观察]

1．细胞外铁：常用低倍镜观察

(-)：骨髓小粒呈黄色，无蓝龟成分。

(+)：小粒网架中分布较淡的蓝色成分。

(++)：有较多蓝色铁粒和深蓝色的圆形小珠。

(+++)：肉．眼可观察到小粒变为蓝色;镜下有许多铁粒、小珠和少数蓝色

小块。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



(++++)：肉眼可观察到小粒明显变蓝色。有大量的铁粒、小珠和许多蓝色

小块。

2．细胞内铁：

计数 100 个有核红细胞，记录阳性细胞(胞浆中有蓝色颗粒)的百分

率。同时注意细胞内铁颗粒数目、大小、染色深浅，特别应注意有无环状

铁粒幼红细胞。

[参考值]

细胞内铁：各人变化较大，一般在 O．10—0．80(10—80％)。

换算系数：=％×0.01

细胞外铁：(+)一(++)

[临床意义]

(1)缺铁性贫血的外铁阴性：内铁平均 6％，其铁粒细小，数目 4—2 个。此类

贫血约占总贫血病人的 80％以上。

(2)铁粒幼细胞性贫血，环形铁粒(环核排列的粗大铁粒 5 个以上或铁粒排列

在核周 1／3以上)的幼红细胞占总有核红细胞的 15％以上。

(3)其他贫血的铁染色情况不一，如巨幼细胞性贫血可伴有缺铁。也可以出现

正常或增多。

[附注]

(1)铁染色用的玻片、杯子、试剂等应避免受铁剂污染。玻片事先应作好除铁

处理，不能放有铁锈的烤箱内烘烤。

(2)亚铁氰化钾消除混浊时，因反应较慢，后期滴加速度不宜太快。

(3)反应时间不宜太长，否则析出的结晶会沉积在涂片上，较难冲洗之。

(4)伊红易结晶析出，故复染时间太长或浓度太高，均会影响细胞内铁的观

察。

(5)铁染色作为一种简便的常规组化，有助于各种贫血的诊断和鉴别诊断，

当涂片无骨髓小粒，虽无法观察外铁，但内铁的观察对贫血的诊断也可起

决定性的作用。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D11、酸性磷酸酶(ACP)染色

[原理]

酸性磷酸酶在酸性环境中水解甘油磷酸钠，产生磷酸根。磷酸根与硝酸铅

作用生成磷酸铅，定位于胞浆中的磷酸铅再与硫化铵反应生成棕黑色硫化铅

沉淀。

[试剂]

1． 2mol/L 乙酸缓冲液(pH4．7)：1mol／L 乙酸 100ml 加 1mol/L 氢氧化钠

54．4ml，再加蒸馏水至 500mL。

2．孵育液：乙酸缓冲液 12m1，508／L 硝酸铅 2m1，32g／L β—甘油磷

酸钠 4ml，蒸馏水 74ml。

3．硫化铵溶液：硫化铵 1—2ml 加蒸馏水到 100m1。

4． 4．28／L 甲基绿：甲基绿 2g 加蒸馏水 100ml。

[操作]

(1)新鲜涂片滴加 95％乙醇 10 滴，固定 10 分钟。

(2)水洗后晾干。放入孵育液 37℃2—4 小时。

(3)水洗数次，置于 10g/L 硫化铵染色 3分钟；

(4)自来水冲洗后，用 20g/L 甲基绿复染 10 分钟，水洗，待干后镜检。

[临床意义]

(1)单核细胞和组织细胞呈阳性反应。

(2) Gaucher3 细胞呈强阳性反应，而尼曼—匹克(Nie-mann-Picks)氏细

胞为阴性。

(3)毛细胞性白血病常为阳性反应(加 1—酒石酸后不被抑制)。

(4) T 淋巴细胞为阳性。且被酒石酸抑制；而 B淋巴细胞为阴性。

[附注]

(1)涂片要新鲜，并应尽早固定染色。若不能及时测定，应固定后放冰箱保

存。

(2)硫化铵试剂出现深黄色，提示有大量硫离子消耗，若染色效果不佳，应先

考虑硫化铵试剂变质，应予更换后再做试验。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D12、红细胞渗透脆性试验

[原理]

本试验是测定红细胞对不同浓度低渗盐水溶解的抵抗力。当红细胞置于低

渗盐水中，水逐渐渗入细胞内，使红细胞膨胀成球形，当到达一定限度后，

细胞内的血红蛋白便开始漏出。其抵抗力与红细胞表面积和体积比值有密切

关系，表面积大而体积小者，对低渗盐水抵抗力较大(渗透性减低)；反之，

则抵抗力较小(渗透性增强)。球形细胞表面积和体积比值减小，渗透脆性增

强；球形细胞表面积和体积比值增大，则渗透脆性也明显降低。

[试剂]

1．双草酸盐抗凝剂：草酸铵 1．28．，草酸钾 0．88，加蒸馏水至 100ml。每

管加 O．2ml，100℃烘干备用。

2．18／d1 氯化钠溶液(NaCl)：准确称取经 100℃烘干的分析纯氯化钠，置于

100m1 容量瓶内，先加少量的蒸馏水溶解后，再加双蒸馏水至刻度。

[操作]

(1)取 12 支清洁干燥试管，编号排列，然后分别取 1g/dlNaCl 溶液和蒸馏

水，按表 1-3-1 加入试管中。

(2)取静脉血’2m1，以双草酸盐抗凝或不用抗凝剂直接就原针头加血于不同

浓度的氯化钠试管中，每管 1 滴(约 0．05ml），轻轻摇，然后置室温 2

小时，各管离心沉淀；观察上清液开始溶血管和无细胞的完全溶血管。

(3)如需作孵育红细胞渗透脆性试验，可多取血 2ml，置于另一双草酸盐抗凝

试管内，加塞后置 37℃孵箱内培育 24 小时，取出再按上述操作程序胁定

开始溶血管和完全溶血管氯化钠浓度。

(4)每次试验应同时作正常对照。

[结果观察]。

室温静置 2 小时，离心观察结果，从高浓度管开始逐管观察：上层溶液开

始出现透明红色、且管底有红细胞管，为开始溶血管；溶液透明红色、管底

完全无红细胞管，为完全溶血管。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



[ 参考值]

开始溶血：0．0044—0．0048(0．44—0．48％)。

完全溶血：0．0024-0．0028(0．24—0．28％)。

换算系数：＝％×0．01

[临床意义]

1．红细胞渗透脆性增高：见于遗传性球形红细胞增多症，也见于自身免硅性

溶血性贫血或伴有球形红细胞增多症。

2.红细胞渗透脆性降低：见于各种地中海贫血，包括轻型、重型及地中海贫

血、血红蛋白 H 病。此外，也可见于缺铁性贫血及其他红细胞表面积／体

积比值赂有增大的情况，如肝病等。

3．孵育红细胞渗透脆性增高：见于轻型遗传性红细胞增多症、遗传性椭圆型

细胞增多症和遗传性非球形细胞溶血性血。

[附注]

(1)1 g／dl 氯化钠溶液配制必须准确，每次配制量不宜过大，多一、二月

即应更换 1次试剂，因水蒸发可致氯化钠浓度增加。

(2)取血时应防止红细胞破坏，取耳血要求血液流出通畅，取静脉血应注意注

射器干燥。

(3)严重贫血者(Hb＜58)应加血 2 滴，黄疽较探者，可用生理盐水洗涤红细胞

后配制 5g／dl 悬液后再试验。

(4)如开始和完全溶血的结果不易判断，可以离心沉淀后再进行判断。

(5)地中海贫血病入的红细胞渗透脆性降低，应进行低浓度氯化钠溶液的检

查。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D13、自体溶血试验 [原理]

血液经 37℃孵育，如果红细胞存在酶缺陷，使糖酵解发生障碍而导致溶血，并通过能否被葡萄糖和 ATP 纠正而可进一步予以分型。

[试剂] (1)100g/L 无菌葡萄糖。 (2)无菌等渗盐水。 (3)0．48／L 氨水(浓氨水 0．16m1 加蒸馏水到 100m1 或用 HiCN 转化液。 (4)0.4mol/L ATP 生理盐水溶液。

[操作] (1)取 4 支小试管，每管加 1g/L 肝素 0．02m1，8 磅 5 分钟高压灭菌后，置

50℃以下烘干。 (2)抽静脉血 4m1，无菌手续按表 1—3—2 操作。血液加入后稍振摇混。

以冷藏离心后之血浆 0．2ml，加 0．4g/L 氨水(或转化液)4．8ml作空白，540nm 比色求吸光度 A。

测定管溶血=A 测定管×(1 一红细胞压积)／(A 溶血对照管×4) [结果观察]

计算各测定管的溶血率(相当于空白对照管 100％的比值)，其公式如下：

测定管的溶血率＝测定管 A×(1 一红细胞压积)／溶血对照管 A×4 式中分于是将测定管 A 值乘以血浆比值，换算成稀释到全血量时的吸光

度；分母乘 4 是溶血对照管稀释 100 倍,即测定管稀释 25 倍的系数。若溶血明显，A值过大，可以增加稀释倍数。

[参考值] 正常人血液在无菌条件下孵育 24 小时(或 48 小时)后，溶血率很低，一般

＜4．0％，加葡萄糖或 ATP 后，溶血率更低(＜O．6％)。各类溶血性贫血。 [临床意义]

遗传性球形红细胞增多症自身溶血加快，但能够被葡萄糖纠正；遗传性非球形红细胞溶血性贫血自身溶血增快，其中 I 型由于 6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性下降可被葡萄糖和 ATP 纠正， Ⅲ型因丙酮酸激酶缺乏，溶血不被葡萄糖纠正，但能被 ATP 纠正；PNH、自身免疫性溶血性贫血和药物性溶血等，均不能被葡萄糖纠正。

[附注] 应严格遵守无菌操作


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D14、血清酸化溶血试验(Ham 试验)

[原理]

阵发性睡眠性血红蛋白尿症的患者，因其红细胞本身有缺陷，故对补体敏

感性增高，在酸化的自身血清中，经 37℃孵育，易破坏产生溶血。此法比较

敏感，特异性也高。

[试剂]

(1)0．2mol 儿盐酸(盐酸 1．4m1，蒸馏水加至 100m1 即成，应新鲜配制)。

(2)8．5g/L 儿氯化钠溶液。

(3)50％红细胞悬液制备，用 10ml 离心管 1 支，加入 8．5g／L 氯化钠溶液

4—5ml，再直接加入患者血液 3—4 滴，混后离心，弃去上清液。如此

反复洗涤红细胞 2次，配成 50％红细胞悬液。

(4)抽取思考静脉血 3—5ml，待其自然凝固；分离出血清。

[操作]

(1)取 2 支清洁干燥小试管，编号,按表 1—3—4步骤进行操作。

表 1-3—4 酸化血清溶血试验操作

加入物(ml) 第 1 管第 2 管

患者血清 O．5 0．5

0．2mol／LHCl 0．05

8．5g／LNaCL - 0．05

50％患者红细胞 0．05 0．05

(2)轻轻混，加塞，置于 37℃水浴中 24 小时。

[结果观察]

第 1 管溶血，第 2管不溶血者为阳性。

[临床意义]

阳性见于阵发性睡眠性血红蛋白尿症和某些严重发作的自身免疫性溶血性贫

血。

[附注]

(1)所用器皿必须清洁干燥，操作过程要避免发生溶血，否则可导致假阳性。

(2)血清酸化后，试管必须塞紧，否则二氧化碳逸出，可使血清酸度下降。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D15、热溶血试验(定性)

[原理]

患者的红细胞在自己的血清中(含补体)，经 37℃孵育后，由于葡萄糖分

解产酸使其血清酸化，从而导致有内在缺陷的红细胞溶解，而产生溶血现

象。

[操作]

取患者静脉血 2ml，取下针头，缓慢将血沿管壁注入洁净的试管中，避免

产生气泡，然后加塞，置于 37℃孵箱中，保温 24 小时，到时取出离心后，观

察其上清液有无产生溶血现象。

[结果观察]

观察上清液颜色，如出现溶血者为阳性。正常人为阴性。

[临床意义]

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)者为阳性

[附注]

(1)注射器必须干燥，试管要清洁。整个操作过程应避免因操作引起溶

血，而造成假阳性。

(2)若置于保温箱 24 小时血块仍未退缩，可用一小玻棒沿试管壁轻轻分

离，然后离心，再观察结果。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D16、蔗糖溶血试验(糖水试验)

[原理]

由于阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者红细胞膜有缺陷，对补体较为敏感，

在小量血清存在时。因蔗糖发酵而改变了氢离子的浓度，加强了补体与红细

胞膜的结合，以致红细胞膜出现小孔而发生溶血。

[试剂]

100g/L 蔗糖溶液。[结果判断]上清波呈红色者为阳性(溶血)，上清液无色者

为阴性。

[操作]

取新鲜抗凝血(枸橼酸盐或草酸盐抗凝)0．5m1，加入 4．5m1 100g/L 蔗糖

溶液中，混，置于 37℃孵箱中 30 分钟后取出离心，观察结果。

[临床意义]

(1)阵发性睡眠性血红蛋白尿症为阳性，因此它为该病的简易过筛试验。

(2)再生障碍性贫血、巨幼红细胞性贫血和免疫性溶血性贫血思者也可偶有阳

性。

[附注]

所用器皿应清洁干燥，以免溶血而造成假阳性结果。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D17、变性珠蛋白小体检查(Heinz 小体染色) [原理]

变性珠蛋白小体，实际上是一种变性血红蛋白颗粒(又称血红蛋白包涵体)附着于红细胞膜上；由于红细胞缺乏 G—6PD，使转变还原三磷嘧啶核苷酸生成减少，导致红细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)也减少，从而使能量代谢障碍而变得不稳定。将患者血液在体外孵育，使珠蛋白变性而生成 Heinz 小体，被碱性染料染成蓝紫色或蓝黑色小点。

[试剂] (1)O.5％耐尔蓝乙醇溶液。 (2)10g/L 结晶紫生理盐水液，即取结晶紫 1．0g，NaC1 0．85g，加蒸馏水

100ml，用研钵研磨溶解后过滤配成备用。 [操作]

耐尔蓝法 (1)置 0．5％耐尔蓝乙醇溶液 1滴于洁净玻片上，待干。 (2)取患者血液 1 滴置于已干的染料玻片上，另用推玻片一角轻轻搅拌。混

。 (3)加薄盖玻片，静置 5-8 分钟。 (4)油镜镜检，可见红细胞呈黄绿色，变性珠蛋白染成蓝黑色小点，Heinz 小

体呈圆形、多角形，且大小不等、数目：不一、分布不，直径0．3—2um；一般位于红细胞边缘。

(5)计数 1000 个红细胞，记下 Heinz 小体阳性的红细胞数，以百分率报告。结晶紫法 (1)吸取 1 小滴结晶紫液于洁净玻片上，加血液 1 滴，使其与染料混，覆盖

玻片，5分钟后用油镜检查。 (2)或取结晶紫盐水液 0．5ml，置于小试管中加末梢血(或静脉血)3-5 滴，混

，置 37℃水浴 5 分钟后，取出 1 滴于玻片上，加盖玻片后用油镜观察结果。

(3)计数 1000 个红细胞，记录 Heinz 小体阳性的红细胞数，以百分率报告结果。

[参考值] 正常人红细胞不含有 Heinz 小体，或仅偶见细小、量少的变性珠蛋白小体

(为提高检出率，必要时可采用乙酰苯肼体外生成法)。 [临床意义]

增多，可见于 G—6PD 缺乏所致的蚕豆病、伯氨喹啉类药物引起的溶血性贫血和血红蛋白 H病等。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D18、血浆游离血红蛋白测定

[原理]

血红蛋白中亚铁血红素具有类似过氧化物酶的作用，使联苯胺(或邻甲苯

胺)氧化，在醋酸溶液中变成绿色、黄色，紫红色。当血管内溶血时，血浆游

离血红蛋白可明显增高。

[试剂]

(1)联苯胺(或邻甲苯胺)0．1g，加冰醋酸 2ml，加蒸馏水 3ml，溶解后加 95％

乙醇至 10ml 置于 4℃冰箱内保存可用 1-2 周。

(2)取 30％H2O2 0．5ml，加蒸馏水 14．5ml(新鲜配制)。

(3)10％(v／v)醋酸溶液。

(4)Hb 标准液，即用 HiCN 法精确测得 Hb 含量，然后配成 100mg/L 的 Hb 水溶

液.

[操作]

取大试管(容量为 30—50m1)3、支，依次加入下列各液见表(1—3—5)。

表 1-3-5 血浆游离血红蛋白测定

加入物(m1) U(测定

管) ) S(标准管) B(空白管）

血浆(清) O．02 - 0．02(水)

标准液 0．02 -

联苯胺试剂 1 1

1％H202 1 1

混 37℃水浴 10 分钟

1O％醋酸 10 10 10

用波长 515nm 比色，以空白调零，读取各管吸光度。

[计算]

游离血红蛋白(mg／L)＝测定管吸光度／标准管吸光度×100。

[参考值]


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



正常人血浆游离血红蛋白＜100mg/L(10mg／dl)。

换算系数：mg／L=mg／d1×10

[临床意义]

血管内溶血性贫血、PNH 及输不合型的血液后均明显增高，尤其后者可高达

5000mg／L 以上。

[附注]

(1)本法系测定细胞溶解，抽血后分离过程应特别注意红细胞破坏而导致结果

升高。

(2)显色受温度干扰，要严格遵守测定条件，注意标准管与测定管的比色时

间。

(3)由于灵敏度较高，当肉眼见到溶血现象时，标本就应稀释，必要时同时应

作 1管稀释 5倍标本。

(4)因联苯胺具有毒性；测定时可用邻甲苯胶或四甲基联苯胺替代。

(5)纯品联苯胺为无色结晶，纯度不好但可提纯。联苯胺 10g 溶于 lmol 儿

HCl 200ml 中，加活性炭 1—2g，用力振摇(可稍加热)后过滤，滤液一般

无色，否则继续再振摇 1—2 分钟后，向滤液中加入浓 HCl 30ml，混置

于冰箱过夜即可见大量白色结晶析出，用滤纸过滤后，再用乙醇—乙醚等

量混合液洗涤结晶数次，后用乙醚洗 2次即可。

(6)测定管为 U，测定管吸光度为 UA；标准管为 S，标准管吸光度为 SA；空白

管为 B，空白管吸光度为 BA,以下均同此不另说明


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D19、淋巴细胞亚群测定 (1)试剂

1) CD4 F / CD8 P Cat NO 0747

2) CD3 F / CD16+56 P Cat NO 2076

3) CD19 P Cat NO 1285

4) 同型对照 F IgG1/IgG1 P Cat NO 1203

(2)方法

1) 取试管各加上述单抗 10ul 于管底

2) 加 50ul EDTA K2 抗凝血,混

3) 室温暗处放置 15 分钟

4) Q-PREP 仪上溶血、固定

5) FCMW 仪上分析 10000 个以上细胞

(3)参考范围

CD3 60 — 85 %

CD4 24.5 — 48.8 %

CD8 18.5 — 42.1 %

NK 8.0 — 20.0 %

CD19 7.0 — 23.0 %


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D20、HLA B27 / HLA B7 测定

(1)试剂

1.HLA B27 F/ HLA B7 P Cat NO 1502

2.同型对照 IgG 2a F / PIgG1 P Cat NO 1255

（2）方法

1. 取试管各加上述单抗 10ul 于管底

2. 加 EDTA K2 抗凝血 50ul，混

3. 室温暗放置 15 分钟

4. Q-PREP 仪上溶血、固定

5. 用 PBS 洗涤细胞 2次

6. 在 FCM 仪上数细胞 10000 个以上，设门在淋巴区域

7. 记录阳性百分度及相应的平均荧光强度和荧光峰值

（1）参考范围

阴性


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D21、活化细胞亚群测定

（1）试剂

1.CD3 P Cat NO 1282

2.CD3 p Cat NO 0449

3.CD3 p Cat NO 0452

4.HLA - DR F Cat NO 1638

5.同型对照 F IgG1/P IgG1 Cat NO 1203

（2）方法

1）加试剂于下列各管：

CD3/HLA-DR CD3 5ul + HLA-DR 5ul



同型对照 10ul

2）加 50ul ESTA K2 抗凝血或其他细胞悬液 2.5×105细胞，混

3）室温暗处放置 15 分钟

4）Q-PREP 仪上溶血、固定

5）FCM 仪上进行分析 10000 个以上细胞

（3）参考范围

CD3/HLA-DR 4.1 — 17.7

CD4/HLA-DR 1.8 — 7.0

CD8/HLA-DR 1.3 — 13.4

HLA-DR 15.4 — 38.6


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D22、活化血小板测定

（1）试剂

1.CD62p P Cat NO 1759

2.CD63 P Cat NO 1165

3.同型对照 IgG1 F/IgG1 P Cat NO 1203

（2）方法

1）固定血小板：

EDTA K2 抗凝血 500 转/分钟离心 3-5 分钟，取富含血小板血浆 200ul 加

入 1ml TEN 缓冲液中，混后吸取 200ul 加入 200ul 2%多聚甲醛中，室

温暗入放置 15 分钟

2）各加入上述单抗 10ul 于试管底部

3）各加入 50ul 固定血小板混，室温暗处放置 15 分钟

4）各加入 1ml TEN 缓冲液

5）在 FCM 仪上计数 10000 个血小板，记录阳性百分度及平均荧光强度、荧

光峰值（阴性对照控制在 0.4%左右）

（3）参考范围

CD62p 0.1 – 1.41 %

CD63 0.6 – 5.2 %


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D23、APO 2.7 测定

（1）试剂

1）APO 2.7 P Cat No 2088

2）同型对照 IgG1 P

3）PBSF PBS 内含 2.5%的 FCS 及 0.01%NaN3

（2）方法

1．取被检标本 25ul 或 0.5*106细胞于试管底部，加 100ul 100ug/ml 的

洋地黄(digitonin)，轻轻摇，冰浴 20 分钟

2．加 2ml 冷的(4°C)PBSF,200g 离心 6分钟

3．弃去上清液，分别加入 10ul 的单抗和同型对照混，室温放置 5分钟

4．加 2ml 的 PBSF，200g 离心 6分钟

5．弃上层后加 1ml 的 PBSF

6．在 FCM 仪上计数 10000 个以上的细胞记录百分率及平均荧光强度，荧

光峰值

（3）参考范围

0 — 2.49 %


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D24、CD25/CD3 测定

（1）试剂

1）D25 F Cat No 0478

2）CD3 P Cat No 128

3）同型对照 IgG 2a F / IgG1 P

（2）方法

1）取试管加下述单抗于管底：

<1> CD25 5ul / CD3 5ul

<2> 对照 IgG 2a F 5ul / IgG1 p 5ul

2）加 EDTA K2抗凝全血 50ul 或 2.5×105个细胞混，室温暗处放置 15 分钟

3）在 Q—PREP 仪上溶血、固定后用 PBS 洗两遍

4）在 FCM 仪上计数 10000 个以上的细胞，记录百分率及平均荧光强度和荧

光峰值强度

（3）参考范围

CD25 0.6 — 5.1%

CD25/CD3 0.4 — 2.5%


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D25、MDR(P—gP)多药耐药基因）测定

（1）试剂

1） P—gP P Cat No 2370

2）同型对照 IgG 2a P Cat No 0617

（2）方法

1）取试管加上述单抗和同型对照 10ul

2）加 50ul 全血或 2.5×105 个细胞混，室温放置 15 分钟

3）加 3ml 含小牛血的 PBS 1200 转/分离心 5分钟，弃上清液

4）在 Q—PREP 仪上溶血、固定

5）在 FCM 仪上计数 10000 个以上的细胞，记录百分率及平均荧光强度和荧光

峰值

（3）参考范围

全血 5.8—22.0%


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D26、TdT(MRD 白血病残留病灶)测定

（1）试剂

1）TdT (pool) F Cat No 1136

2）同型对照 F IgG 2a + F IgG1

（2）方法

1）取 50ul 全血或 5×105个细胞到测定管和对照管

2）每管加入透膜剂 I （Intraprtp Reagent I）100ul，混（18OC-

25OC）室温放置 15 分钟

3）BS4ml 洗一次，（300g 离心 5分钟），弃上层

4）管加入透膜剂 II (Intraprep Reagent II)100ul 室温放置 5分钟

后，轻摇 1-2 秒钟

5）分别加 10ul TdT-F 单抗和同型对照至测定管和对照管中，轻轻摇

，室温避光放置 15 分钟

6）各管加入 PBS 4ml 300g 离心 5分钟，洗一次，弃上层

7）各管加入 PBS 0.5ml，在 FCM 仪上计数 10000 个以上细胞，记录百分率

及平均荧光强度和荧光峰值强度

8）必要时结合白血病的免疫标志双色分析（方法见膜/膜内同时直标法）

（3）参考范围

0 — 0.86%


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D27、血小板糖蛋白测定

CD41 / CD61 （GPⅡb / Ⅲa 复合物） CD42a / CD42b （GP Ⅰb / Ⅸ 复合物） CD36 / TSP （GPⅣ / 凝血酶敏感蛋白） CD31 （GPⅡa）

（1）试剂 1）CD41 P Cat NO 1416 2）CD61 F Cat NO 1758 3）CD42a F Cat NO 1757 4）CD42b P Cat NO 1417 5）CD31 F Cat NO 1431 6）CD36 F Cat NO 0765 7）TSP P Cat NO 1499 8）同型对照 F IgG1 / P IgG1 （CD42A 为 IgG 2a F 对照）

（2）方法 1）血小板固定：

EDTA K2 抗凝全血 500 转/分钟，离心 3-5 分钟。取富含血小板血浆200μl 加入 1ml TEN 中，吸取 200μ2%多聚甲醛中，室温放置 15 分钟

2）加单抗于下列试管底部 <1> CD41 P / CD61 F 各加 5μl <2> CD42b P / CD42a F 各加 5μl <3> TSP P / CD36 F 各加 5μl <4> cd31 F 各加 5μl <5> 同型对照 10μl 必要时加 IgG2a f/IgG P 10μl(用于 CD42a/CD42b 对照)

3）各加固定血小板 50μl 于上述试管中，室温暗处放置 15 分钟 4）加 TEN 缓冲液 ml 于上述各试管中混 5）在 FCM 仪上计数 10000 个以上的血小板，记录各自的百分率及平均荧光强

度、荧光峰值。（阴性对照控制在 0.5%左右）（3）参考范围 CD41 87.1 — 100% CD61 92.5 — 100 % CD42a 84.9 — 100% CD42b 92.0 — 100 % CD42a/CD42b 84.1— 100% CD36 73.3 — 91.3% CD41 /CD61 92.1 — 100% TSP 61.0 — 78 % CD31


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D28、CD23(Ige 低亲和力受体)测定（1）试剂

1）CD23 F Cat NO 0529

2）同型对照 IgG1 F

（2）方法

1) 取上述单抗 10μl 加入试管底部

2) 加 50μl 全血或 2.5×105/ml 混 ,室温暗处放置 15 分钟

3) 在 Q-PREP 仪上溶血、固定

4) 用 PBS 洗涤两次，后加 1ml PBS 上机

5) 在 FCM 仪上计数 10000 个以上的细胞，记录百分率、平均荧光强度及荧光

峰强度

6) 如需要检测 T、B细胞上的 CD23 表达，可与 CD3 PE 或 CD19 PE 配色分

析

（3）参考范围

1．9 -- 4.4 %


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D29、CD95 / Fas 测定

（1）试剂

1）CD95 P Cat NO 2446

2）同型对照 IgM PE Cat NO 1269

（2）方法

1) 取试管各加上述单抗 10μl 于管底

2) 各加 EDTA K2 抗凝血 50μl 或 2.5×105细胞, 室温暗处放置 15 分钟

3) 在 Q-PREP 仪上溶血、固定

4) 用 PBS 洗涤两次，后加 1ml PBS 上机

5) 在 FCM 仪上计数 10000 个以上的细胞，记录百分率、平均荧光强度和峰

值(设门在淋巴细胞)

6) 如需要研究多种淋巴细胞和 Fas 表达，可结合 F CD4 或 F CD8 等双色分

析

（3）参考范围

全血 18.7 – 49.9 %


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D30、FCM 试剂配制（1） PB 贮存液 (PH 7.4 0.1 mol/L) KH2PO4 2.61 g

Na2HPO4·12H2O 28.94 g H2O 1000 ml 贮存冰箱保存

（2） PBS (PH 7.4 0.01mol/L) 100ml PB 贮存液 900ml 生理盐水（3） TEN 缓冲液 PH 7.4 Tris (50mmol/L) 3 g Nacl (150mmol/L) 4.5 g EDTA K2 1.21 g H2O 500ml 用 1mol/LHCL 调节 PH (约 25ml) （4）标本抗凝剂 10% EDTA K2

（5）. Q – prep 处理剂 A: 甲酸 1.2 ml H2O 1 L B: 碳酸钠 6.0 g 氯化钠 14.5 g 硫酸钠 31.5 g H2O 1 L C: 10% 多聚甲醛上述试剂冰箱保存（6） Digitonin (洋地黄试剂) 1）贮存液 500μl/ml

Digitonin 5 mg PBS 10 ml

微微加热至溶解,置冰箱贮存,半衰期为 3个月 2）应用液 100μl/ml 用 PBSF 稀释 5 倍（7）. 2.5% PBSF

PBS 96.5 ml 小牛血清规戒律 2.5 ml 1%NaN3 1.0 ml

（8）. PBS – 蔗糖 (Bcl – 2 用) 蔗糖 1 g PBS 99 ml 1%NaN3 1 ml


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D31、Bcl-2 测定

（1）试剂

1） Rat Bcl-2 单抗

Cat NO 2207

2）羊抗鼠 IgG(H+L)-FITC Cat NO

0819

3）含 1 ％蔗糖的 PBS （内含 0 ． 01 ％ NaN3）

4）透膜试剂 Cat NO

2388

（2）方法

1）在测定管和对照管中加 5 － 10 ＊ 10 5 细胞（或实体组织、骨髓细胞等

到），离心，弃上层

2）各加 100ul 透膜试剂 I ，轻轻混，室温 18 － 25 ， 15 分钟

3）各加 PBS －蔗溶液 4ml ， 300g 离心 5 分钟，弃上层

4）各加 100ul 透膜剂 II ，轻轻混，室瘟 18 － 25 ， 5 分钟

5）轻轻摇 1 － 2 秒

6）测定管加 10ul Rat Bcl-2 单抗工作液（原液放在低温冰箱中，用时用

PBS －蔗糖 1 ： 10 稀释），轻轻混，室温 18 － 25 ， 15 分钟

7）测定管加 4ml PBS －蔗糖， 300g 离心 5 分钟，弃上层

8）各加 30ul 单抗鼠 IgG-FITC 工作液（用 PBS －蔗糖 1 ： 20 稀

释），室温 18 － 25 暗处放置 15 分钟

9）各加 4ml PBS- 蔗糖， 300g 离心 5 分钟，弃上层

10）加 PBS －蔗糖 600ul ，在 FCM 仪上计数 10000 个以上细胞，记录阳

性百分为率及平均荧光峰值、荧光峰值。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D32、ANNEXIN V 测定

（1）试剂

1）ANNEXIN V F Cat NO 2375

2）10× 浓缩结合缓冲液

3）PI 冻干粉 1ml 蒸馏水复溶待用

4）羊抗鼠 IgG(H+L)-FITC Cat NO 0279 按说明书复溶，置－ 30 贮存

（2）方法

1）用冰 PBS 或培养基洗涤样本细胞， 4 ， 2000 转／分离心 5 分钟

2）弃上清，悬浮于冰的稀释结合缓冲液（用蒸馏水 1 ： 10 稀释），调整

细胞浓度 10 5 － 10 6 ／ ml

3）取 490ml 上述细胞悬液到对照管、测定管底部，测定管加

5ul ANNEXIN V-FITC 及 5ul PI, 混，避光冰浴 10 分钟

4）在 FCM 上计数 10000 个以上细胞记录 ANNEXIN ＋／ PI

＋、 ANNEXIN

＋／ PI

－细胞百分率


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D33、P53 测定

（1）试剂

1） p53 冻干粉 Cat NO2553 1ml 蒸馏水复溶待用

2）羊抗鼠 IgG(H+L)-FITC Cat NO0279 按说明书复溶，置－ 30 贮

存

3）纯甲醇－ 20℃ 保存

（2）方法

1）PBS 洗涤细胞，离心后弃上清，用冰甲醇悬浮细胞（边加边摇，以免形

成絮状沉淀），冰浴 5 分钟

2）2000 转／分离心 5 分钟后弃上清，另 3ml PBS ／ BSA ／ NaN3 洗涤

一次

3）PBS ／ BSA ／ NaN3 调整细胞 107 ／ ml

4）吸 100ul 上述细胞悬液到对照管、测定管底部

5）测定管加 10ul p53 单抗，混，室温 15 分钟，加 3mlPBS ／ BSA ／

NaN3 洗涤一次

6）在测定管和对照管中加入羊抗鼠荧光单抗（用 PBS 1 ： 20 稀释）

30ul ，室温避光 20 分钟，用 PBS ／ BSA ／ NaN3 离心 5 分钟洗

涤一次后，再加 0.5 mlPBS ／ BSA ／ NaN3 。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D34、λ链测定

（1）试剂

1）鼠抗人λ链 Cat NO 0174 蒸馏水复溶后分装，每支 5ul，

置-30℃贮存

2）羊抗鼠 IgG（H+L）-FITC cat NO O279 按说明书复溶，置-30℃

贮存

（2）方法

在测定管和对照管各加 5-10*105细胞或加 50ul 全血

测定管加 10ul 鼠抗人λ链单抗（原液放在低温冰箱中，用时用 PBS1：

50 稀释液）轻轻混，室温放置 15 分钟。加 2mlPBS，离心 5分钟，弃

上清液

在测定管和对照管各加 30ul 羊抗鼠 IgG-FITC 工作液（用 PBS1：20 稀

释），室温避光 15 分钟

在 Q-PREP 仪上溶血、固定、

用 PBS 洗涤一次，弃上清

加 PBS 800 ul，在 FCM 仪计数 10000 个以上细胞，记录阳性百分率及平

均荧光峰值、荧光峰值


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D35、CD55 测定

（1）试剂

1）CD55 P Cat NO 2726

2）同型对照 IgG1 P

（2）方法

取 5 ul 全血到 2ml 生理盐水，洗涤 2次（1500 转/分，离心 3-5 分钟）。

用 1ml 生理盐水悬浮细胞。

分别加 10ul CD55 单抗和同型对照于试管。

加 50 ul 细胞悬液混，室温避光放置 15 分钟。

加 1ml 生理盐水。

在 FCM 仪上计数 10000 个以上细胞记录百分率及平均荧光强度、荧光峰

值。

（3）参考范围

CD55 38.3 — 85.9%


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D36、血小板抗体测定（PAIgG，PAIgM，PAIgA）

（1）试剂

1）鼠抗人 IgG 多抗 cat NO 0279 蒸馏水复溶后分装，每支

50ul，置-30℃贮存

2）鼠抗人 IgM 多抗 cat NO 0285 同上

3）鼠抗人 IgA 多抗 cat NO 0278 同上

4）FITC 羊抗鼠荧光单抗 cat NO 0279 按说明书复溶，置-30℃贮

存

（2）方法

血小板固定：取富含血小板的血浆 0.4ml 加 1mlTEN 缓冲液中。再取上述稀

释血浆 0.4ml 加等量 2%的多聚甲醛，室温固定 15 分钟。

洗涤：在已固定的血小板试管中加 2mlTEN 缓冲液，3000 转/分，离心 5分

钟，洗涤 2次。弃上清液，加 TEN 缓冲液 0.4ml。

测定：测定管中分别加入 IgG、IgM、IgA 单抗 50ul，将固定血小板 50ul 分

别加入测定管和对照管。室温 20 分钟，用 2mlTEN 3000 转/分离心

5分钟洗涤一次后，再加 0.6mlTEN。

上机：用各自的阴性对照。阴性对照值在 1.0 左右，计数 1万个血小板。

( 3 ) 参考范围

PAIgG 6.3-20.3%

PAIgM 2.6-14.5%


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D37、DNA 测定

（1）试剂

1）DNA---Prep LPR PN 6607055

2）DNA---Prep stain

（2）方法 1

1）方法 1

取试管加 50ul EDTA K2 抗凝全血于管底加 100ul DNA-Prep LPR,混几

秒钟,加 DNA-Prep stain 1ml，混室温避光 15 分钟,FCM 仪上检测

2）方法 2

<1>0．5-1.0*106/ml，细胞用 70%酒精固定过夜

<2>用 PBS 洗涤细胞两次

<3>加 1mlDNA-Prep stain，混

<4>室温避光放置 15 分钟

<5>FCN 仪上检测


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D38、干细胞 CD34 测定

（1）试剂

1．CD34 PE Cat NO 1871

2．同型对照 PE IgG1

（2）方法

取试管加上述单抗 10ul 于管底

加 EDTA K2 抗凝全血 50ul 或 0.5-1.0*106个细胞

混

室温避光放置 15 分钟

PBS 洗涤两次

FCM 仪上计数细胞 10000 个以上（设门在淋巴细胞与单核细胞交界区域

记录阳性百分率


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D39、CD34+ 细胞绝对计数

1、试剂

1) StemTrol 用于 CD34+ 细胞绝对计数内参照

2) CD45-FITC CatNO 0782

3) CD34-PE CatNO 1871

4) IgG1-FITC CatNO 0639

5) FlowCount 荧光微球一瓶

2、方法

1) 标记 3管全血表本：Tube1(Trol/45/34)加 10 ul CD45-FITC、10 ul

CD34-PE ；Tube2(45/34)加 10 ul CD45-FITC、10 ul CD34-PE ；

Tube3(Trol/45/34)加 10 ul CD45-FITC、10 ul IgG1-FITC；三管都加

50 ul 全血标本。然后在 Tube1、Tube2 中加入 10 ul StemTrol。混后

室温避光 15min,Q-Prep 溶血。

2) 振荡混 FlowCount，加 100 ul FlowCount 到三反应管，注意不要带入

气泡，并混。上机前必须重复振荡混一次。

3) 上 FCM 分析，并计算各类 CD34+ 细胞，包括内参照及全血标本。

4) StemTrol 结果经标准化因子（100 ul/20 ul=5）校正，与 StemTrol 提供

的标准值比较，差异在±15%以内通过。这样 Tube2 测得的 CD34+ 细胞数为

全血标本的绝对 CD34+ 细胞数。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D40、纤溶酶原激活剂抑制物（PAI）活性测定(发色底物法)

（1）原理：

定量 t-PA 加到待测血浆中，与血浆中的 PAI 作用，形成无活性的复

合物，剩余的 t-PA 作用于纤溶酶原（Plg）,激活为纤溶酶（Plm），

后者水解发色底物 S2251，释放出对硝基苯胺（PNA），它在 405nm 有强吸收

峰。由测出剩余 t-PA 量，间接测出 PAI 活性。

PAI 活性单位定义为：在 25℃、20 分钟内抑制 1.0 国际单位 t-PA 的

PAI 酶量为 1.0 AU。

（2）标本处理：

静脉采血 2ml 置于含 200ul 抗凝剂（0.109mol/L 枸橼酸钠）的塑料

管或硅化管中,3000 rpm 离心 10 分钟,收集上清液置于 2～8℃,可保存

12 小时,-20℃可保存一个月。

（3）方法：

1）准：第一步，用 1.1ml 稀缓冲液溶解标准品；第二步，再稀

释 100 倍（取 50ul，加稀缓冲液 4950ul）；第三步，用稀缓冲液等量

稀释第二步。

2）释血浆制备：待测血浆 50ul+稀缓冲液 950ul( 稀 20 倍)—取

200ul+等量第二步稀释标准液——混 (又稀 2倍)，25℃放置 20 分

钟。

3）测定：


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



孔号 1 2 3 4 5 6 7 测

定管

第三步标准液(ul) 0 20 40 60 80 100

稀缓冲液(ul) 100 80 60 40 20 0

PAI 相对活

（AU/ml）

0.02

5

0.02

0

0.01

5

0.01

0

0.00

5

0

稀释待测血浆(ul) 100

发色底物(ul) 100

37℃湿盒中保温 150～180 分钟

终止液( ul) 20

以 1 号孔调零点，在酶标仪上测定各孔 A405值


A405

PAI 相对活性

从标准曲线上查出 PAI 相对活性×40×1.1

[正常值] 0.35～0.8AU/ml


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D41、组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）活性测定（发色底物法）

（1）原理：

纤溶酶原———————→纤溶酶

t-PA ↓ 水解释放

发色底物（S2251）→ 硝基苯胺（PNA）—405nm

（2）标本处理：

2ml 血置于含 200ul 抗凝剂（0.109 mol/L 枸橼酸钠）的硅化管或塑料

管中，3000ｒpm 离心×10 分钟—立即取 200ul 血浆+等量酸化剂—混 —置

2-8℃（保存 12 小时）；或置-20℃保存一个月

（3）方法：

标准品的制备：t-PA 标准品用 2.2ml 稀释缓冲液溶解，然后再稀释

100 倍(取 50ul，加稀缓冲液 4950ul)此时 t-PA 标准品活性为 2.5×10-

2IU/ml。按下表加入到平底酶标板上。（浓缓冲液，用 24ml 蒸馏水稀

释）。

稀释血浆的制备：用缓冲液将经酸化的待测血浆再稀释 15 倍。（50ul

酸化血浆，加 700ul 稀缓冲液）。

发色底物的制备：用 2ml 稀缓冲液将发色底物、共价物、纤溶酶原混

合溶解在一起。

孔号 1 2 3 4 5 6 测定孔

t-PA 标准品

（ul）

0 20 40 60 80 100

稀缓冲液（ul） 100 80 60 40 20 0

t-PA 浓度

（IU/ml）

0 0.005 0.010 0.015 0.020 0.025

稀释血浆(ul) 100

发色底物液(ul) 100

在 37℃湿盒中保温约 150-180 分钟

终止液(ul) 20

以 1 号孔调零点,在酶标仪上测定各孔 A405 值


以 A405 对 t-PA 标准品活性作标准曲线，待测样品 t-PA 活性可从标准

曲线上查出乘以 15，再乘以 2，再乘以 1.1。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



A405

t-PA 活性(×10-2IU/ml)

[正常值]

0. 3～0.6IU/ml


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



D42、血管性假血友病因子(vWF)含量测定（ELISA）（1）原理：

双抗体夹心法。抗 vWF 与待测血浆中 vWF 结合，加入酶标抗体形成复合物，后者与底物作用呈现色反应。

（2）标本处理：静脉采血 2 ml 置于含 200 ul 抗凝剂（0.109mol/L 枸橼酸钠）的塑料试管

中,3000rpm 离心 10 分钟,取上清液，2～8℃，保存 24 小时；-20℃可保存一个月。

（3）标准制备： 1）浓稀释液用蒸馏水稀释到 150ml。 2）浓稀涤液用蒸馏水稀释到 500ml。 3）酶标抗体用 2ml 稀释应用液溶解。 4）底物配制（临用前），每瓶+5ml 蒸馏水溶解——加入 35ulH2O2——混

。 5）标准血浆+2ml 稀释应用液准确复溶——1:20；然取 500ul 用稀释应用液

作 5次倍比稀释各得 1:40；1:80；1:160；1:320；1:640 六个标准点。（4）测定：

待测血浆 1:40 稀释（25ul 待测血浆+975ul 稀释应用液）孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 稀释应用液(ul) 100 标准血浆（ul）

1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640

100 待测稀释血浆 (ul)

100

37℃孵育 90 分钟洗涤三次，甩干酶标抗体（ul）

100

37℃孵育 60 分钟洗涤三次，甩干

底物液（ul） 100 37℃ 15～20 分钟终止液（ul） 50

A492比色、1 号空白调零。 [正常值] 60～150%


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



117、革兰氏阴性鉴定卡及药敏卡 GNI 及 GNS 卡的操作步骤

EOSm Methylene Blue agar Mac Conkey agar Blood agar

Sample ①样本作划线培养分纯 ②培养时间性 18hr 至 24hr, 不要超过，以防老化。

分纯菌落 ①革兰氏染色试验确定是革兰氏阴性

②氧化酶试验

GNS 卡上填上 AMS.NO

稀释比浊

①如果氧化酶试验是正反应，

则在图内的 31 处填黑

②如果是负反应则不用填

③AMS NO 完全与 GNI 的相同

GNI 试卡上填上 AMS。

① 如果氧化酶试验是正反

应，则在图内的 31 处

填黑

②如果是负反应则不用填

① 0.45%至 0.5%盐水

②用消毒的接种环

挑取纯菌落

鉴定试验药敏试验

① 从菌液（1McFarland）

抽取 50uL 放入试管内

② 加入 1.8mL 盐水均

①菌落放入 1.8ml 盐水

内均

②浓度：1McFarland

③ 好用电子比色器量

充填充填时间

切割封口

①封口器要预热约 3分钟，直至

“Ready”灯亮

②用力将架子及试卡推入，直至切

割声音停下

③检查卡片是否有气泡，将气泡摔

入气孔内


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



(革兰氏阳性鉴定卡及药敏卡) GPI 及 GPS 卡的操作步骤

放入培养/读数箱内

①放入快被读数的架子上

②GNI 及 GNS 要放在同一个架子上

③放好后尽快将门关上

④再将资料从键盘及荧光幕输入

Tryticase Say agar +5% blood Blood agar

Sample ①样本作划线培养分纯 ②培养时间性 18hr 至 24hr, 不要超过，以防老化。

分纯菌落 ①革兰氏染色试验确定是革兰氏阴性

②触酶试验

④催化酶试验不要沾到 blood agar

GNS 卡上填上 AMS.NO 稀释比浊

①如果催化酶试验是正反应，

则在图内的 31 处填黑

②若凝固酶是+反应或溶血酶

是+反应则将 32 标记填黑

③AMS NO 完全与 GNI 的相同

GNI 试卡上填上 AMS。

① 如果催化酶试验是正反

应，则在图内的 31 处

填黑

② 若凝固酶是+反应或溶

血酶是+反应则将 32 标

记填黑 ① 0.45%至 0.5%盐水

②用消毒的接种环

挑取纯菌落

鉴定试验药敏试验

① 从菌液（1McFarland）

抽取 200uL 放入试管内

② 加入 1.8mL 盐水均

①菌落放入 1.8ml 盐水

内均

②浓度：1McFarland

③ 好用电子比色器量

+反应 ③作凝固酶试验 -反应 ③作溶血酶试验（β-溶血）


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



充填充填时间约 3分钟

切割封口

①封口器要预热约 3分钟，直至

“Ready”灯亮

②用力将架子及试卡推入，直至切

割声音停下

③检查卡片是否有气泡，将气泡摔

放入培养/读数箱内

①放入快被读数的架子上

②GNI 及 GNS 要放在同一个架子上

③放好后尽快将门关上

④再将资料从键盘及荧光幕输入


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



YBC 卡(酵母菌)

Sample ① 在法国甘露醇葡萄糖琼脂或马玲

薯葡萄糖琼脂上作划线培养 ② 18hr 至 48hr,28~30 摄氏度

分纯后选取纯菌落 ①选取纯菌落,3 至 4 个独立

稀释比浊 ①1.8mL 的 0.45%-0.9%盐水 ②约 2至 3mm 直径

②浓度=2McFarland ③用电子比浊器量度充填

① 若试卡要在普通培养箱再次 24hr

培养即共 48hr 培养,则在图 6的

31，48hr 培养标记处填黑. ② 第一次的 24hr 不用填

放入普通培养箱

②即此试卡总共在 30℃培养箱内 48hr

平放在 30 摄氏度的培养箱内

充填时间约 3分钟

未能显示终结果终结果

②一次阅读后马上自动将报告打印出来

①待读数器阅读终放入 AMS 培养/读数

终结果

①再次放入 30℃的培养箱内

放入普通培养箱子

放入 AMS 培养/读数

①若未有终结果,打印出来的报告直会

①待读数器阅读终

③将试卡上 48hr 培

②一次阅读后马上自动将报告打印出来


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



第一章临床输血技术规范

第一条为了规范、指导医疗机构科学、合理用血，根据《中华人民其和国献血

法》和《医疗机构临床用血管理办法》（试行）制定本规范。

第二条知液资源必须加发保护、合理应用，避免浪费，杜绝不必要的输血。

第三条临床医师和输血医技人员应严格掌握输血适应证，正确应用成熟的临床

输血技术和血液保护技术，包括成分输血和自体输血等。

第二章输血申请

第五条申请输血应由经治医师逐填写《临床输血申请单》，由主治医师核准签

字，连同受血者血样于预定输血日期前送交输血科（血库）备血。

第六条决定输血治疗前，经治医师应向患者或其家属说明输同种异体血的不良

反应和经血传播疾病的可能性，征得患者或家属的同意，并在《输血治

疗同意书》上签字。《输血治疗同意书》入病历。无家属签字的无自主

意识患者的紧急输血，应报医院职能部门或主管领导同意、备案，并记

入病历。

第七条术前自身贮血由输血科（血库）负责采敌国和贮血，经治医师负责输血

过程的医疗监护。手术室内的自身输血包括急性等容性血液稀释、术野

自身血回输及术中控制性低血血压等医疗技术由麻醉科医师负责实施。

第八条亲友互助献血由经治医师等对患者家属进行动员，在输血科（血库）填

写登记表，到血站或卫生行政部门批准的采血点（室）无偿献血，由血

站进行血液的初、复检，并负责调节器配合格血液。

第九条患者治疗性血液成分去除、血浆置换等，由经治医师申请，输血科（血

库）或有关科室参加制定治疗方案并负责实施，由输血科（血库）和经

治医师负责患者治疗过程的监护。

第十条对于 Rh(D)阴性和其他稀有血型患者，应采用自身输血、同型输血或配合

型输血。

第十一条新生儿溶血端正如需要换血疗法的，由经治医师申请，经主治医师核

准，并经患儿家属或监护人签字同意，由血站和医院输血科（血库）

提供适合的血液，换血由经治医师和输敌国科（敌国库）人员其同实

施。

第三章受血者血样采集与送检


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



第十二条确定输血后，医护人员持输血申请单和巾好标签的试管，当面核对患

者姓名、性别、年龄、病案号、病室/门急诊、床号、血型和诊断，采

集血样。

第十三条由医护人员或专门人员将受血者血样与输血申请单送交输血科（血

库），双方进行逐项核对。

第四章交叉配血

第十四条受血者配血试验的血标本必须是输血前 3天之内的。

第十五条输血科（血库）要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查

受血者和供血者 ABO 血型（正、反定型），并常规检查患者 Rh（D）血

型（急诊抢救患者紧急输血时 Rh(D)检查可除外），正确无误时可进行

交叉配血。

第十六条凡输注全血、浓缩红细胞、经细胞古巴液、光涤红细胞、冰冻红细

胞、浓缩白细胞、手工分离浓缩血小板等患者，应进行交叉配血试

验。机器单采浓缩血小板应 ABO 血型同型输注。

第十七条凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操作规程》有关规定作抗体筛

选试验：

① 交叉配血不合时；

② 对有输血史、妊娠史或短期内需要接收多次输血者。

第十八条两人值班时，交叉配血试验由两互相核对；一人值班时，操作完毕后

自已复核，并填写配血试验结果。

第四章血液入库、核对、贮存

第十九条全血、血液成分入库前要认真核对验收。核对验收内容包括：运输条

件、物理外观、血袋封闭及包装是否合格，标签填写是否清楚齐全

（供血机构名称及其许可证号、供血者姓名或条形码编号和血型、血

液品种、容量、采血日期、血液成分的制备日期及时间，有效期及时

间、血袋编号/条形码，储存条件）等。

第二十条输血科（血库要认真做好血液出入库、核对、领发的登记，有关资料

需保存十年。

第二十一条按 A、B、O、AB 血型将全血、血液成分分别贮存于血库专用冰箱不

同层内或不同专用冰箱内，并有明显的标识。

第二十二条保存温度和保存期如下：

品种保存温度保存期

1．浓缩红细胞 4±2℃ ACD：21 天、CPD：28


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



天、CPDA：35 天

2．少白细胞红细胞（LPRC） 4±2℃ 与受血者 ABO 血型相同

3．红细胞悬液（CRCs） 4±2℃ （同 CRC）

4．洗涤红细胞（WRC） 4±2℃ 24 小时内输注

5．冰冻红细胞（FIRC） 4±2℃ 解冻后 24 小时内输注

6．手工分离浓缩血小板（PC-

1）

22±2℃

（轻振荡）

24 小时（普通袋）或 5

天（专用袋制备）

7．机器单采浓缩血小板（PC-

2）

（同 PC-1）（同 PC-1）

8．机器单采浓缩白细胞悬液

（GRANs）

22±2℃ 24 小时内输注

9．新鲜液体血浆（FLP） 4±2℃ 24 小时内输注

10，新鲜冰冻血浆（FFP） -20℃以下一年

11．普通冰冻血浆（FP） -20℃以下四年

12．冷沉淀（Cryo） -20℃以下一年

13．全血 4±℃ （同 CRC）

14．其他制剂按相应规定执行

当贮血冰箱的温度自动控制记录和报警装置发出报警信号时，要立即检查原

因，及时解决并记录。

第二十三条贮血冰箱内严禁存放其他物品；每周消毒一次；冰箱内空气培养每

月一次，无霉菌生长或培养皿（92mm）细菌生长菌落<8CFU/10 分钟

或<200CFU/m3 为合格。

第六章发血

第二十四条配血合格后，由医护人员到输血科（血库）取血。

第二十五条取血与发血的双方必须其同查对患者姓名、性别、病案号、门急诊

/病室、床号、血型、血液有效期及配血试验结果，发及保存血的

外凤等，准确无误时，双方其同签字后方可发出。

第二十六条凡血袋有下列情殂之一的，一律不得发出：

1．标签破损、字迹不清；

2．血袋有破损、漏血；

3．血液中有明显凝块；

4．血浆呈乳糜状或暗灰色；

5．血浆中有明显气泡、絮状物或粗大颗粒；


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



6．未摇动时血浆层与红细胞的界面不清或交界面上出现溶血；

7．红细胞层车紫红色；

8．过期或其他须查证明情况。

第二十七条血液发出后，受血者和供血者的血样保存于 2-6℃冰箱，至少 7

天，以便对输血不良反应追查原因。

第二十八条血液发出后不得退回。

第七章输血

第二十九条输血前由两名医护人员核对交叉配血报告单及血袋标签各项内容，

检查血袋有无破损渗漏，血液颜色是否正常。准确无误码率方可输

血。

第三十条输血时，由两名医护人员带病历共同到患者床旁核对患者姓名、性

别、年龄、病案号、门急诊/病室、床号、血型等，确认与配血报

告相符，再次核对血液后，用符合标准的输血器时行输血。

第三十一条取回的血应尽快输用，不得自行贮血。输用前将血袋内成分轻轻混

，避免剧烈震荡。血液内不得加入其他药物，如需稀释只能用静

脉注射生理盐水。

第三十二条输血前后用静脉注射生理盐水冲洗输血器，再接下一袋血继续输

注。

第三十三条输血过程中应先慢后快，再根据病情和年龄调整输注速度，并严密

观察受血者有无输血不良反应，如出现异常情况应及时处量：

1．减慢或停止输血，用静脉注射生理盐水维持静脉通路；

2．立即通知值班医师和输血科（血库）值班人员，及时检查、治

疗和抢救，并查找原因，做好记录。

第三十四条疑为溶血性或细菌污染性输血反应，应立即停止输血，用静脉注射

生理盐水维护静脉通路，及时报告上级医师，在积极治疗抢救的同

时，做以下核对检查：

1．核对用血申请单、血袋标签、交叉配血试验记入：

2．核对受血者及供血才 ABO 血型、Rh(D)血型。用保存于冰箱中的

受血者与供血者血样、新采集的受血者血样、敌国袋中血样，

重测 ABO 血型、Rh(D)血型、不规则抗体筛选及交叉配血试验

（包括盐水相和非盐水相试验）；

3．立即抽取受血者血液加肝素抗凝剂，分离血浆，观察血浆颜

色，测定血浆游离血红蛋白含量；


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



4．立即抽取受血者血液，检测血清担红素含量、血浆游离血红蛋

白含量、血浆结合珠蛋白测定、直接抗人球蛋白试验并检测相

关抗体效价，如发现特殊抗体，应作进一步鉴定；

5．如怀疑细菌污染性输血反应，抽取血袋中血液做细菌学检验；

6．尽早检测血常规、尿常规及尿血红蛋白；

7．必要时，溶血反应发生后 5-7 小时测血清胆红素含量。

第三十五条输血完毕，医护人员对有输血反应的应逐项填写患者输血反应回报

单，并返还输血科（血库）保存。输血科（血库）每月统计上报医

务处（科）。

第三十六条输血完毕后，医护人员将输血记录单（交叉配血报告单）贴在病历

中，并将血袋送回输血产（血库）至少保存一天。

第三十七条本规范由卫生部负责解释。

第三十八条本规范自 2000 年 10 月 1 日起实施。

附件一成分输血指南

附件二自身输血指南

附件三手术及创伤输血指南

附件四内科输血指南

附件五术中控制性低血压技术指南

附件六输血治疗同意书

附件七临床输血申请单

附件八输血记录单

附件九输血不良反应回报单


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件一成分输血指南

一、成人输血的定义血液由不同血细胞和血浆组成。将供者血液的不同成应用科学方法分开，依据患者病情的实际需要，分别输入有关血液成分，称为成分输血。二、成分输血的优点成分输血具有疗效好、副作用小、节约血液资源以及便于保存和运输等优点，各地应积极推广。三、成分输血的临床应用

（一）红细胞品名特点保荐期作用及适应证备注浓缩每袋含 200ml 全血中全部 4±2℃ 作用：增强运氧能力。交叉配合试验℃ 红细胞 RBC，总量 110ml~120ml, ACD：21 天适用： (CRC) 红细胞压积 0.7~0.8。 CPD：28 天 ①各种急性失血的输含血浆 30ml 及抗凝剂 8~10ml, 血；运氧能力和体内存活率等同 ②各种慢性贫血一袋全血。 ③高钾血症、肝、肾、规格：110~120ml/袋心功能障碍者输血； ④小儿、老年人输血。少白细胞过滤法：白细胞去除率 4±2℃ 作用：（同 CRC）与受血者 ABO 红细胞 96.3~99.6%,红细胞回收 24 小时适用：型相同（LPRC）率>90%; 1.由于输血产生白细胞抗体, 手工洗涤法：白细胞去引起发热等输血不良反应除率 79±1.2%，红细胞的患者; 回收率>74±3.3%; 2.防止产生白细胞抗体的输血机器洗涤法：白细胞去除血 (如器官移植的患者). 率>93%,红细胞回收率>87%。红细胞悬 400ml 或 200ml 全血离心 (同 CRC) (同 CRC) 交叉配合试验液(CRCs) 后除去血浆,加入适量红细胞添加剂后制成,所有操作在三联袋内进行. 规格:由 400ml 或 200ml 全血制备


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洗涤红细 400ml 或 200ml 全血经离心 (同 LPRC) 作用:增强运氧能力. 主侧配血试验胞(WRC) 心去除血浆和白细胞,用无适用: 菌生理盐水洗涤 3~4 次, ①对血浆蛋白有过后加 150ml 生理盐水悬浮. 敏反应的贫血患者; 白细胞去除率>80%,血浆去 ②自身免疫性溶血性除率>90%,RBC 回收率>70% 贫血患者; 规格;由 400ml 或 200ml 全血 ③阵发性睡眠性血红制备蛋白尿症; ④高备战血症及肝肾功能障碍需要输血者. 冰冻红细去除血冰的红细胞加甘油保作用：增强运氧能力加原血浆悬浮胞(FTRC) 护剂,在-80℃保存,保存期适用：红细胞要做交 10 年,解冻后洗涤去甘油, 解冻后 ①同 WRC；叉配血试验。加入 100ml 无菌生理盐水 4±2℃ ②稀有血型患者输血；加生理盐水悬或红细胞添加剂或原血冻. 24 小时 ③新生儿溶血病换血；浮只做主侧配白细胞去除率>98%;血冻去 ④自身输血。血试验。除>99%;RBC 回收>80%;残余甘油量<1%.洗除了枸椽酸钠盐或磷酸盐、K

+、NH3等.

规格:200ml/袋. （二）血小板手工分离由 200ml 或 400ml 全血制备。22±2℃ 作用：止血。需做光叉配合试验，浓缩血小血小板含量为（轻振荡）适用：要求ABO 相合，板（PC-1）≥2.0ml×10

10/袋 20~25ml 24 小时（普 ①血小板减少所一次足

量输液注。 ≥4.0ml~50ml 通袋）或致的出血；规格：20 ml~25ml/袋 5 天（专用袋 ②血小板功能障碍所致


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



40~50ml/袋制备）±±℃℃℃2 的出血。机器单采用细胞分离机单采技术从浓缩血小单个供血者循环血液中（同 PC-1）（同 PC-1） ABO血型相同板（PC-2）采集，每袋内含血小板≥2.5×10

11,红细

胞含量<0.4ml. 规格：150ml~250ml/袋。（二）白细胞机器单采用细胞分离机单采技术作用：提高机体抗感必须做义叉浓缩白细由单个供血者循环血 22±2℃ 染能力。配合试验。胞悬液（液中采集。每袋内含 24 小时适用：中性粒细胞低 ABO血型相同 GRANs）粒细胞≥1×10

10。于 0.5×10

9/L, 并发细

菌感染，抗生素治疗 48 小时无效者。（从严掌握适用症）（四）血浆新鲜液体含有新鲜血液中全部作用：补充凝血因子，血浆凝血因子扩充血容量（PLP）血浆蛋白为 6~8g% 4±2±±℃℃适用：要求与受血者纤维蛋白原 0.2~0.4g% 24 小时 ①补充全部凝血因子 ABO血型相同其他凝血因子 0.7~1 单（三联袋）（包括不稳定的凝血或相容位/ml 因子Ⅴ、Ⅷ）；规格：根据医院需要而定。 ②大面积烧伤、创伤新鲜冰冻含有全部凝血因子。作用：扩充血容量，要求与受血者血浆血浆蛋白为 6~8%; 补充凝血因子。 ABO血型相同


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



（FFP）纤维蛋白原 0.2~0.4%； -20℃以下适用：或相容其他凝血因子 0.7~1 单一年 ①补充凝血因子； 37℃摆动水浴位/ml （三联袋） ②大面积创伤、烧伤融化规格：自采血后 6-8 小时内（ACD 抗凝剂：6小时内；CPD 抗凝剂：8小时内）速冻成块规格：200ml,100ml，50ml， 25ml 普通冰冻 FFP 保存一年后即为普通作用：补充稳定的凝血要求与受血血浆冰冻血浆 -20℃以下因子和血浆蛋白。者 ABO 血（FP）规格：200ml，100ml 四年适用：型相同 50ml。25ml ①主要用于补充稳定的凝血因子缺乏，如Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子缺乏； ②手术、外伤、烧伤、肠梗阻等大出血或血浆大量丢失。冷沉淀每袋由 200ml 血浆制适用：要求与受血者（Cryo）成。含有： -20℃以下 ①甲型血友病； ABO血型相 Ⅷ因子 80-100 单位；一年 ②血管性血友病（vWD）同或相容纤维蛋白原约 250mg; ③纤维蛋白原缺乏症。血浆 20ml 规格：20ml


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件二

自身输血指南

自身输血可以避免血源传播疾病和免疫抑制，对一时无法获得同型血的患者

也是唯一血源。自身输血有三种方法；贮存式自身输血、急性等容血液稀释

（ANH）及回收式自身输血。

一、贮存式自身输血

术前一定时间采集患者自身的血液进行保存，在手术期间输用。

1．只要患者身体一般情况好，血红蛋白>110g/l 或红细胞压积

>0.33，行择期手术，患者签字同意都适合贮存式自身输血。

2．按相应的血液储存条件，手术前 3天完成采集血液。

3．每次采血不超过 500ml（或自身血容量的 10%）。两次采血间隔不少

于 3天。

4．在采血前后可给患者铁剂、维生不比 C及叶酸（有条件的可应用重组

入红细胞生成素）等治疗。

5．血红蛋白<100g/L 的患者及有细菌性感染的患者不能采集自身血。

6．对冠心病、严重主动脉瓣狭窄等心脑血管疾病及重症患者慎用。

二、急性等容血液稀释（ANH）

ANH 一般在麻醉后、手术主要出血步骤开始前，抽取患者一下量自身血在室

温下保存备用，同时输入胶体液或等渗晶体液补充血容量，使血液适度稀

释，降低红细胞压积，使手术出血时血液的有形成份丢失减少。然后根据术

中失血及患者情况将自身血回输给患者。

1．患者身体一般情况好，血红蛋白≥110g/L（红细胞压积≥0.33）,

估计术中有大量失血，可以考虑进行 ANH。

2．手术需要降低血液粘稠度，改善微循环灌流时，也可采用。

3．血液稀释程度，一般使红细胞压积不低于 0.25。

4．术中必须密切监测血压、脉搏、血氧饱和度、红细胞压和和尿量

的变化，必要时应监测中收静脉压。

5．下列患者不宜进行血液稀释：血红蛋白<110g/L，低蛋白血症，凝

血机能障碍，静脉输液通路不畅及不具备监护条件的。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



三、回收式自身输血

血液回收是指用血液回收装置，将患者体腔积血、手术中失血及术后引流血

液进行回收、抗凝、滤过、洗涤等处理，然后回输给患者。血液回收必须采用合

格的设备，回收处理的血必须达到一定的质量标准。体外循环后的机器余血应尽

可能回输给患者。

回收血禁忌证：

1．血液流出血管外超过 6小时。

2．怀疑流出的血液被细菌、粪便、羊水或消毒液污染。

3．怀颖流出的血液含有癌细胞。

4．流出的血液严重溶血。

注：

① 自身贮血的采血量应根据患者耐受性及手术需要综合考虑。有些行自身

贮血的患者术前可能存在不同程度的贫血，术中应予重视。

② 适当的血液稀释后动脉搏氧含含量降低，但充分的氧供不会受到影响，

主要代偿机制是心输出量和组织氧摄取率增加。ANH 还可降低血液粘稠度

使组织灌注改善。纤维蛋白原和血小板的浓度与红细胞压积平行性降

低，只要红细胞压积>0.20，凝血不会受到影响。与自身贮血相比，ANH

方法简单、耗费低；有些不适合自身贮血的患者，在麻醉医师严密监护

下，可以安全地进行 ANH；疑有菌血症的患者不能进科教片在身贮血，而

ANH 不会造成细菌在血内繁殖；肿瘤手术不宜进行血液回收，但可应用

ANH。

③ 回收的血液虽然是自身轿，但血客内的血及自身贮存和血仍有差别。血

液回收有多种技术方法，其质量高低取决于对回收血的处理好霈，处理

不当的回收血输入体内会造成严重的后果。目前先进的血液回收装置已

达到全自动化程度，按程序自动过滤、分离、洗涤红细胞。如出血过快

来不及洗耳恭听涤，也可直接回输未洗涤的抗凝血液。

④ 术前自身贮血、术中 ANH 及血液回收可发联合应用。


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件三

手术及创伤输血指南

一、浓缩红细胞

用于需要提高血液携氧能力，血容量基本正常或低血容量已被纠正的患者。

低血容量患者可配晶体液或胶体液应用。

1．血红蛋白>100g/L，可以不输。

2．血红蛋白<70g/L，应考虑输。

3．血红蛋白在 70~100g/L 之间，根据患者的贫血程度、心肺代偿功能、有

无代谢率增高以及年龄等因素决定。

二、血小板

用于患者血小板数量减少或功能异常伴有出血倾向或表现。

1．血小板计数>100×109/L，可以不输。

2．血小板计数<50×109/L，应考虑输。

3．血小板计数在 50~100×109/L 之间，应根据是否有自发性出血或伤口渗

血决定。

4．如术中出现不可控渗血，确定血小板功能低下，输血小板不受上述限

制。

三、新鲜冰冻血浆（FFP）

用于凝血因子缺乏的患者。

1． PT 或 APTT>正常 1.5 倍，创面弥漫性渗血。

2．患者急性大出血输入大蛳库存全血或浓缩红细胞后（出血量或输血蛳相当于

患者自身血容量）。

3．病史或临床过程表现有先天性或获得性凝血功能障碍。

4．紧急对抗华法令的抗凝血作用（FFP：5-8ml/kg）。

四、全血


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生效日期：2004 年 5 月 30 日



用于急生大血液丢失可能出现低血容量休克的患者，或患者存在持续活动性

出血，估计失血量超过自身血容量的 30%，

回输自体全血不受本指征限制，根据患者血容量决定。

注：

①红细胞的主要功能是携带氧到机体的组织细胞。贫血及血容量不足都会影

响机体氧输送，但这两者的生理影响是不一样的。失血达总血容量 30%才会有明

显的低血容量表现，年轻体健的患者补充足够液体（晶体液或胶体液）就可以完

全纠正其失血造成的血容量不足。全血或血浆不宜用作扩容光焕发剂。血容量补

足之后，输血目的是提高血液的携氧能力，首选红细胞制品。晶体液或并用脱胶

体液扩容，结晶合红细胞输注，也适用于大蛳输血。

②在器官器技性病变的患者，只要血容量正常，红细胞压积达 0.20（血红蛋

白>60g/L）的贫血不会影响组织氧合。急性贫血患者，动脉血氧会含水量量的降

低可以被心输出量的增加及氧离曲线右移而代偿；当然，心肺功能不全和代谢率

增高的患者应保持血红蛋白浓度>100g/L 以保证足够的氧输送。

③手术患者在血小板>50×109/L 时，一般不会发生出血增多。血小板功能低

下（如继发于术前阿斯匹林治疗）对出血的影响比血小板计数更重要。手术类型

和范围、出血速率、控制出血的能力、出血所致后果的大小以及影响血小板功能

的相关因素（如体外循环、肾衰、严重肝病用药）等，都是决定是否输血小板的

指征。分娩妇女血小板可能会低于 50×109/L（妊娠性血小板减少）而不一定输

小板。因输血小板后的峰值决定其效果，缓慢输入的效果较差，所以输血小板时

应快速输注，并一次性足量使用。

④只要纤维蛋白原浓度大于 0.8g/L，即使凝血因子只有正常的 30%，凝血功

能仍可维持正常。即患者血液置换量达全身血液总量，实际上还会有三分之一自

体成分（包括凝血因子）保留在体内，仍然有足够的凝血功能。应当注意，休克

没得到及时纠正，可导致消耗性凝血障碍。FFP 的使用，必须达到 10~15ml/kg,

才有有效。禁止用 FFP 作为扩容剂，禁止用 FFP 促进伤口愈合。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件四：内科输血指南一、红细胞：

用于红细胞破坏过多、丢失或生成障碍引起的电性贫血并伴缺氧症状。血红蛋白<60g/L 或红细胞压积<0.2 时可考虑输注。

二、血小板：血小板计数和临床出血症状结合决定是否输注血小板，血小板输注指征；血小板计数>50×10

9/L 一般不需输注

血小板计数 10-50×109/L 根据临床妯血情况决定，可考虑输注。

血小板计数<5×109/L 应立即输血小板防止出血

预防性输注不可滥用，防止产生同种免疫导致输注无效。有出血表现时应一次足量输注并测 CCI 值。 CCI=（输注后血小板计数-输注前血小板计数）（10

11）×体表面积（M

2）/

输入血小板总数（1011）

注：输注后血小板计数为输注后一小时测定值。CCI>10 者为输注有效。三、新鲜冰冻血浆：

用于各种原因（先天性、后天获得性、输入大量陈旧库血等）引起的多种凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ或抗凝血酶Ⅲ缺乏，并伴有出血表现时输注。一般需输入 10~15ml/kg 体重新鲜冰冻血浆。

四、新鲜液体血浆：主要用于补充多种凝血因子（特别是Ⅷ因子）缺陷及严重肝病患者。

五、普通冰冻血浆：主要用于补充稳定的凝血因子。

六、洗涤红细胞：用于避免引起同种异型白细胞抗体和避免输入血浆中某些成分（如补体、凝集素、蛋白质等），包括对血浆蛋白过敏、自身免疫性溶血性贫血患者、高钾血症及肝肾功能障碍和阵发性睡眠性血红蛋白尿症的患者。

七、机器单采浓缩白细胞悬液：主要用于中性粒细胞缺乏（中性粒细胞<0.5×10

9/L）、并发细菌感染且抗

菌素治疗难以控制者，充分权衡利弊后输注。八、冷沉淀：

主要用于儿童及成人轻型甲型血友病，血管性血友病（vWD），纤维蛋白原缺乏症及因子ⅫⅠ缺乏患者。严重甲型血友病需加用Ⅷ因子浓缩剂。

九、全血：用于内科急性出血此起的血红蛋白和血容量的迅速下降并伴有缺氧症状。血红蛋白<70g/L 或红细胞压积<0.22，或出现失血性休克时考虑输注，但晶体液或并用胶体液扩容仍是治疗失血性休克的主要输血方案。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件五

术中控制性低血压技术指南

术中控制性低血压，是指在全身麻醉下手术期间，在保证重要脏器氧供情况

下，人为地将平均坳脉压降低到一定水平，使手术野出血量随血压的降低而相应

减少，避免输血或使输血需要量降低，并使术野清晰，有利手术操作，提高手术

精确性，缩短手术时间。

一、术中控制性低血压主要应用于①血供丰富区域的手术，如头颈部、盆腔

手术；②血管手术，如主动脉瘤、动脉导管未闭、颅内血管畸形；③创面较大且

出血可能难以控制的手术，如癌症根治、髋关节断离成菜、脊柱侧弯矫正、巨大

脑膜瘤、颅颌面整形；④区域狭小的精细手术，如中耳成形、腭咽成形。

二、术中控制性低血压技术的实施具有较大的难度，麻醉医师对该技术不熟

悉时应视为绝对禁区忌。对有明显机体、器官、组织氧运输降低的患者，或重要

器官严重功能不全的患者，应仔细衡量术中控制性低血压的利弊后再酌情使用。

三、实施术中控制性低血压应尽可能采用扩张血管的方法，避免抑制心肌功

能、降低心输出量。

四、术中控制性低血压时，必须进行实时监测，内容包括：动脉血压、心电

图、呼气末 CO2、脉搏、血氧饱和度、尿量。对出血量较多的患者还应测定中心

静脉压、血电解质、红细胞压积等。

五、术中控制性低血压水平的“安全限”在患者之间有较大的个体差异，应

根据患者的术前基础血压、重要器官功能状况、手术创面出血渗血状况来确定该

患者适低血压水平及降压时间。

注：

组织灌流量主要随血压和血管内径的变化而变化，血坟降低，灌流量也降

低。如组织血客内么蔷加，尽管灌注压下和，组织灌流蛳可以不变甚至增加。理

论上，只要保证毛细血管前血压在于临蜀闭合压，就可保证组织的血流灌注。器

官对血流的自身调节能力在一定血压范围内发挥作用，不同的器官发挥自身调节

血流作用的血压范围亦不同。手术创面的血流漠注降低、出血蛳减少时，重要器

官血管仍具有较强的自主调节器节能力，维持足够的组织血供。另一方面，器官

血压的自身调节低限并不是该器官缺血阈，器官组织丧失自身调节血流能力的

低压高于该组织缺血的临界血压。所以，如果术中控制性低血压应用正确，则可

以安全有效地发挥他减少出血、改善手术视野的优点。


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件六：

××××医院

输血治疗同意书

姓名:______ 性别:（男/女）年龄：_____ 病案号：______ 科别:______

输血目的：_______________________ 输血史：有/无孕___ 产___

输血成分：______________ 临床诊断：

输血前检查：ALT___ U/L;HbsAg____;Anti—HBs____;HbeAg______;

Anti-Hbe____;Anti—HBc___;Anti—HCV_____;Anti—HIV1/2____;

梅毒______;

输血治疗包括输全血、成分血，是临床治疗的重要措施之一，是临床抢救急

危重患者生命行之有效的手段。

但输血存在一定风险，可能发生输血反应及感染经血传播疾病。

虽然我院使用的血液，均已按卫生部有关规定进行检测，但由于当前科技水

平的限制，输血仍有某些不能预测或不能防止的四舍五入血反应和输血传染病。

输血时可能发生的主要情况如下：

1．过敏反应 2。发热反应

3．感染肝炎（乙肝、丙肝等） 4。感染艾滋病、梅毒

4．感染疟疾 6。巨细胝民病毒或 EB 病毒感染

7．输血引起的其他疾病

在您及家属或监护了解上述可能发生的情况后，如同意输血治疗，请在下面

签字。

受血者（家属/监护人）签字：_________,_____年____月____日

医师签字：_________,_____年____月____日

备注：


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件七：

××××医院

临床输血申请单 No.0000000

预定输血日期：____________年_________月__________日_________

受血者姓名：______________________________________________________性

别：（男/女）

年龄：____________病案号：____________科别：_______ 病区：______ 床

号：____

临床诊断：

___________________________________________________________________

输血目的：

___________________________________________________________________

继往输血史：（有/无）：孕______ 产______

受血者属地：（本市/外地）

预定输血成分：___________________________________________

预定输血量：____________________________________________

受血者：

血型：______________________ 血红蛋白：____________________

HCT：________________________ 血小板：__________________

ALT： U/L HBsAg：_________________________

Anti-HCV：_____________ Anti-HIV1/2：______________

梅毒：_________________________

申请医师签字：___________

主治医师审核签字：________

申请日期：上/下午时

（备注：请医师逐项认真准确填写，请于输血日前送输血科/血库。

…………………………………………………………………………………

受血者姓名：_____________________ 受血者姓名：___________________

病案号：_____________________ 病案号：病区床号

血型： No. 0000000 血型： No. 0000000


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件八

××××医院输血记录单

病案号姓名性别年龄

血型科别病区床号

输血性质：常规紧急大量特殊

---------------------------------------------

供血者姓名：血型：

供血者血袋号：血量：

复检血型结果：

交叉配血试验结果：

不规则抗体筛选结果：

其他检查结果：

复检者：______ 配血者：______ 发血者：______ 取血者：______

发血时间：年月日上/下午时


版序：A/O




生效日期：2004 年 5 月 30 日



附件九：

××××医院患者输血不良反应回报单 No. 0000000

患者姓名________性别_______年龄_________科室_________病案号

_____________

血型____________________________诊断

____________________________________

供血者________________血型______储血号__________输血量

_________________ ml

___________________________________________________________________

输用何种血：1.红细胞悬液于单位 2.浓缩血小板袋子 3.冷沉淀

袋， 4.全血 ml 5.血浆 ml 6.其他：

不良反应：无有（发热，过敏，溶血，细菌，血红蛋白尿其他）

输血史：无有次数其他

孕____ 产____

—————————————————————————————————

注本回报单务必请临床医师认真填写，及时送回输血科/血库。

发血日期年月日

填报人

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科室管理诊疗规范文件 - yeec...文件编号：JRY-QMP-4-05 版 序：A/O 金华市人民医院 （检验医学中心） 科室管理诊疗规范文件 生效日期：2004年5月30日

科室管理诊疗规范文件 - yeec...文件编号：JRY-QMP-4-05 版序：A/O 金华市人民医院（检验医学中心）科室管理诊疗规范文件生效日期：2004年5月30日