Metodologa para la curva de azcares por HPLC-LESDPARA LAS SOLUCIONES INDIVIDUALESSolucin de glucosa.0.4 g de glucosa grado reactivo2.5 mL de metanol grado HPLCAforar a 10 mL con agua grado HPLCConcentracin: 40,000 ppmSolucin de fructosa.0.4 g de fructosa grado reactivo2.5 mL de metanol grado HPLCAforar a 10 mL con agua grado HPLCConcentracin: 40,000 ppmSolucin de sacarosa.0.05 g de sacarosa grado reactivo2.5 mL de metanol grado HPLCAforar a 10 mL con agua grado HPLCConcentracin: 5,000 ppmSolucin de maltosa.0.03 g de maltosa grado reactivo2.5 mL de metanol grado HPLCAforar a 10 mL con agua grado HPLCConcentracin: 3,000 ppmPARA LA SOLUCIN MADRE Y SUS DILUCIONES PARA LA CURVA DE CALIBRACINSolucin madre.2 g de glucosa, 2 g de fructosa, 0.25 g de sacarosa, 0.15 g de maltosa6.25 ml de metanol grado HPLC.Se afora a 25 ml con agua grado HPLC.Concentraciones: Fructosa = Glucosa = 80,000 ppmSacarosa = 10,000 ppmMaltosa = 6,000 ppm

1 Dilucin.Se toman 18.75 ml de la solucin madre y se le agregan 1.5625 ml de metanol grado HPLC y se afora a 25 ml con agua grado HPLC.Las concentraciones quedan como sigue:Fructosa = glucosa = 60,000 ppmSacarosa = 7,500 ppmMaltosa = 4,500 ppm

2 Dilucin.Se toman 16.5 ml de la 1 dilucin y se le agregan 2.125 ml de metanol grado HPLC y se afora a 25 ml con agua grado HPLC.Las concentraciones quedan como sigue:Fructosa = glucosa = 39,600 ppmSacarosa = 4,950 ppmMaltosa = 2,970 ppm

3 Dilucin.Se toman 12.5 ml de la dilucin 2 con 3.125 ml de metanol grado HPLC y se afora a 25 ml con agua grado HPLC.Las concentraciones quedan como sigue:Fructosa = glucosa = 19,800 ppmSacarosa = 2,475 ppmMaltosa = 1,485 ppm

4 Dilucin.Se toman 12.5 ml de la 3 dilucin con 3.125 ml de metanol grado HPLC y se afora a 25 ml con agra grado HPLC.Las concentraciones quedan como sigue:Fructosa = glucosa = 9,900 ppmSacarosa = 1,237.5 ppmMaltosa = 742.5 ppm

Preparacin de muestras:Se midi 5 g de miel en un vaso de vidrio y se disolvi en 40 mL de agua para HPLC, esta solucin fue transferida a un matraz volumtrico de 100 mL Se midi por aparte 25 mL de metanol y se mezcl con la solucin de miel, la cual fue finalmente aforada a 100 mL con agua para HPLC. Esta solucin final de miel fue filtrada a travs de un filtro millipore PTFE 0.045 mm y colectada en un vial de 2.5 mL. HPLCPara la determinacin de azucares (glucosa, fructosa, sacarosa y maltosa) se utiliz un anlisis por HPLC con LESD. Se inyectaron 10 l del estndar (volumen del lazo) y de solucin muestra. Los picos mximos son identificados en base a los tiempos de retencin. La cuantificacin de los azcares de las muestras es por medio de la comparacin de las reas de los picos de los estndares.

Mieles para trabajarNmero de muestraAoFloraRegin

12006MultifloraEspita

22006MultifloraMaxcan

32006EnredaderaValladolid

42006Yax aak, Dzolen uukMotul

52006TzitzilcheHunucma

62006MultifloraPachi Pachi

72007Jabn tzalan tzitzilcheEspita

82007JabnMaxcan (San Fernando)

92007Tajonal tzitzilcheHunucma

102007Jabn tzitzilcheKinchil

112007MultifloraHunucma

122007TzitzilcheMuna

132007TzalanKinchil

142007JazmnPeto

152007CatznHunucma

162007Tajonal tzitzilcheConkal

172007Palo de tinteMaxcan

182007CatznMuna

192007EnredaderaMaxcan

202007BojnHunucm

212007Jabn tzitzilcheDzidzantn

222007TzitzilcheHoctn

232007Tajonal tzitzilcheCenotillo

242007JabnHunucm

252007TzitzilcheMaxcan

262007TzitzilcheCelestn

272008Tajonal enredadera huanoCalakmul (Las Orquideas)

282008TzitzilcheCalkin

292008Huano enredaderaTizimn

302008TajonalHopelchn

312008TajonalCalakmul (Las Orquideas)

322008Enredadera tajonalCenotillo

332008TzitzilcheHopelchn

342008TzitzilcheXcucul, sur, Cab-Balam

352008Cascarilla o tajonalCalakmul (Las Orquideas)

362008TajonalCalkin

372008PuctEscrcega

382008Enredadera tajonal jabnCenotillo

392008Tajonal tzitzilcheXcucul

402007TzitzilcheConkal (Cholul)

412007Tajonal tzitzilcheConkal

Las marcadas no se encuentran.