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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS Facultad de ciencias químicas Campus IV (Extensión Ocozocoautla) UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS Facultad de ciencias químicas Campus IV (Extensión Ocozocoautla) Práctica 4 “Oxidación de la glucosa” Bioquímica Profesor: Dra. Ana Cañas Olivia Cañas Urbina Licenciatura: Químico Farmacobiólogo Integrantes: Espinoza López Yuridia Gómez Pérez Maritza Elizabeth Morales Gonzales Ana Laura Hernández Nigenda Diana Laura Zamayoa Espinosa Aida Patricia Cuarto semestre Extensión Ocozocoautla de Espinosa Chiapas, A 30 de septiembre del 2015

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Facultad de ciencias químicasCampus IV (Extensión Ocozocoautla)

Práctica 4“Oxidación de la glucosa”

BioquímicaProfesor: Dra. Ana Cañas Olivia Cañas Urbina

Licenciatura: Químico Farmacobiólogo

Integrantes:

Espinoza López YuridiaGómez Pérez Maritza ElizabethMorales Gonzales Ana Laura

Hernández Nigenda Diana LauraZamayoa Espinosa Aida Patricia

Cuarto semestre

Extensión Ocozocoautla de Espinosa Chiapas,

A 30 de septiembre del 2015

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Introducción.

El proceso a través del cual la energía de la glucosa u otra moléculas

combustibles es capturada por la célula en la forma de ATP se conoce con el

nombre de respiración celular. Se pueden distinguir dos tipos de respiración en la

materia viviente: anaeróbica y aeróbica.

La respiración aeróbica incluye la ruptura de la glucosa a través de una serie de

reacciones en las cuales finalmente interviene el elemento oxígeno. El oxígeno no

reacciona directamente con las moléculas de glucosa en las células vivientes. Sin

embargo es una parte importante en la reacción total de ruptura. Con excepción

de ciertos microorganismos como son algunos tipos de bacterias, la respiración

aeróbica ocurre en células de todos los animales y plantas. La siguiente es una

ecuación general para la respiración aeróbica.

MOLECULA DE COMBUSTIBLE + 02 ------~ FRAGMENTOS DE COMBUSTIBLE

+ H2O + ENERGIA.

Los fragmentos de combustible de la respiración aeróbica son generalmente

anhídrido carbónico. .

La respiración anaeróbica ocurre en ausencia de oxígeno y es típica de muchos

microorganismos. Sin embargo, las células de organismos superiores son también

capaces de llevar a cabo respiración anaeróbica, cuando la cantidad de oxígeno

es limitada. Las células musculares en el hombre, por ejemplo, efectúan

respiración anaeróbica durante los períodos de ejercicio extenuante. El patrón de

respiración anaeróbica se da en la siguiente ecuación :

MOLECULA DE COMBUSTIBLE ------~ FRAGMENTOS DE COMBUSTIBLE +

ENERGIA.

El proceso clave de liberación de energía tanto en la respiración aeróbica como

anaeróbica, es el transporte de electrones desde la molécula de combustibles a un

Práctica 4“Oxidación de la glucosa”

BioquímicaProfesor: Dra. Ana Cañas Olivia Cañas Urbina

Licenciatura: Químico Farmacobiólogo

Integrantes:

Espinoza López YuridiaGómez Pérez Maritza ElizabethMorales Gonzales Ana Laura

Hernández Nigenda Diana LauraZamayoa Espinosa Aida Patricia

Cuarto semestre

Extensión Ocozocoautla de Espinosa Chiapas,

A 30 de septiembre del 2015

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aceptor de electrones. La molécula de combustible se oxida; el aceptor reduce. A

medida que los electrones se transfieren caen desde niveles de energía más altos

a niveles de energía más bajos. La energía que pierden al caer se incorpora a los

enlaces fosfato de alta energía. (González, s.f.)

Las reacciones de óxido-reducción, también conocidas como reacciones redox,

son procesos donde se produce un intercambio de electrones. Para que esta

reacción tenga lugar debe existir una especie que ceda los electrones (reductor) y

otra que los acepte (oxidante). Este tipo de reacciones tienen gran importancia

tanto desde un punto de vista industrial como desde un punto de vista biológico.

Concretamente, en los seres vivos existen algunos procesos metabólicos, como

es el caso de las reacciones químicas de la fotosíntesis y de la respiración celular,

que no son más que secuencias de reacciones redox acopladas (en cascada).

(Herradon & Miranda, 2015).

La entropía es un estado o condiciones no solo de la energía sino también de la

materia. Los organismos aerobios (heterótrofos), extraen energía libre de la

glucosa que obtienen de sus alrededores al oxidarla con O2, que también obtienen

de los alrededores. Los productos finales de este metabolismo oxidativo el CO2 y

H2O se regresan a los alrededores. En este proceso los alrededores sufren de un

incremento en la entropía mientras que el organismo permanece en un estado

estacionario t no presenta un cambio en su orden interno. A pesar de que existe

un cambio en la entropía debido a la desaparición de calor, la entropía también

está relacionada con otro tipo de orden, como es la oxidación de la glucosa.

(Vázquez, 2003)

La oxidación de la glucosa involucra un conjunto de reacciones enzimáticos,

ligadas una de la otra y vigiladas por un estricto control metabólico, todo con el

único fin, de hacer disponible para célula, la energía química contenida en la

glucosa. La reacción global es:

Glucosa CO2+H2O+ATP

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La formación de CO2 + H2O + ATP a partir de la glucosa, se lleva a cabo, porque

existe una disponibilidad de O2 y que aunado a la necesidad de energía, se

inducen los procesos enzimáticos claramente definidos por sustratos y productos,

ellos son: glucólisis, transformación del piruvato en acetil CoA, ciclo de Krebs y

fosforilación oxidativa.

La glucolisis es una secuencia de 10 electrones catalizadas por enzimas, a través

de la cual una molecula de glucosa se convierte en 2 de piruvato con la

producción neta de 2 ATP y la reducción de 2 NAD a 2 NADH. (Voet, Voet &

Pratt, 2009).

El piruvato es un intermediario clave que, según las condiciones de la celula

puede reducirse a lactato u oxidarse y descarboxilarse a acetil Co-A.

Si el piruvato de convierte en lactato que esto se da en condiciones anaeróbicas

en esta ni se porduce ni se consume NADH, y al no haber aceptor electrónico

externo, no hay oxidación neta de la glucosa.

En condiciones aerobicas el piruvato es oxidado y descarboxilado para formar un

grupo acetil, el cual se combina con el Coenzima A para formar acetil CoA y entrar

en el ciclo de Krebs. (Garrido, s.f).

acetil CoA y entrar en el ciclo de Krebs. (Garrido et al, s.f)

Objetivos Demostrar la oxidación química de la glucosa por el oxígeno, haciendo uso

de un indicador redox.

Observar in vitro el comportamiento de la glucosa e investigar basándose

en esto, lo que ocurre en los sistemas biológicos.

Materiales y métodos

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Materiales Vaso de precipitado de 100ml Espátula Agitador Papel PH Glucosa en polvo NaOH Azul de metileno Agua destilada

Métodos y técnicas

Agregar 25ml. De agua destilada

Agregar 5grs. De glucosa hasta

disolverla

Añadir una cantidad igual

a la anterior de NaOH

Verificar el PH de la solución quede

altamente alcalino

Agregar 1 gota de azul de metileno,

agitando la solución

La solución tomara una

coloración azul brillante

Detener la agitación

Repetir la operación dos veces aumentando la

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Resultados

PH de la solución no alcalinaSoluciones PH

Glucosa con agua destilada (agitación constante) 8.8Glucosa con agua destilada (agitación intermitente) 7.6

suero glucosado con agua destilada7.5

PH de la solución alcalinaSoluciones PH

Glucosa con NaOH (agitación constante) 10.5Glucosa con NaOH (agitación intermitente) 10.2suero glucosado con NaOH 10.1

Detener la agitación

Repetir la operación dos veces aumentando la

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Tiempo (min)

glucosa con agitación constate

glucosa con agitación intermitente

color PH color PH 1 – agitar/ 0- sin agitar

0 amarillo 10.5 amarillo 10.2 11 verde claro 10.9 verde claro 10.3 12 verde claro 10.5 verde claro 10.9 13 verde claro 10.5 verde claro 9.6 04 verde claro 10.9 verde claro 9.8 05 verde claro 10.9 verde claro 10 012 verde claro 10.2 verde claro 10.3 114 verde claro 10.2 verde claro 9.3 116 verde claro 10.2 verde claro 9.8 118 verde oscuro 9.8 verde oscuro 9.7 120 verde oscuro 10 verde oscuro 9.2 025 verde oscuro 10.2 verde oscuro 9.7 130 verde oscuro 9 verde oscuro 10.1 0

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0 5 10 15 20 25 309

9.29.49.69.810

10.210.410.610.8

11

variacion del PH en glucosa con agi-tacion constante

tiempo

PH

0 5 10 15 20 25 308

8.5

9

9.5

10

10.5

11

11.5

variación del PH en glucosa con agitacion intermitente

tiempo

PH

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tiempo (min)

Suero glucosado con agitación intermitente color PH 1 – agitar/ 0- sin agitar

 0 azul 10.1 11 azul 11.1 12 azul 11.1 13 azul 11.3 04 azul 11.3 05 azul 11.1 012 azul 11.3 114 azul 11.4 116 azul 11.2 118 azul 10.9 120 azul 11 025 azul 11.1 130 azul 10.9 0

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0 5 10 15 20 25 30 359

9.5

10

10.5

11

11.5

12

variacion del PH en suero glucosado con agitacion intermitente

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Discusión:

Fleming en el 2014 nos dice que la demostración de la oxidación de la glucosa es

una de las demostraciones de química más conocida, en donde se puede estudiar

la cinética de reacción.

Básicamente en la teoría esta demostración se explica en un matraz que contiene

un líquido, que consiste en una solución alcalina de glucosa y azul de metileno,

tornando de incoloro a azul; después de agitarse. El consiguiente aumento de la

concentración de oxígeno disuelto oxida la forma incolora del colorante de nuevo

(forma reducida) a la forma azul (forma oxidada), hasta que la glucosa reduce una

vez más (mar sureste, 2011).

Cosa que no sucedió en nuestro experimento, ya que no torno de azul a incoloro.

La pregunta ahora ¿Qué sucede en la reacción? ¿Porque que no torno a

incoloro? ¿Habría suficiente concentración de oxígeno disuelto?

Esta reacción de reducción-oxidación se conoce comúnmente como una reacción

redox. En una reacción redox del número de oxidación de los átomos se cambian.

Esto puede ser un proceso redox simple tal como la oxidación de carbono para

producir dióxido de carbono, o puede ser un proceso complejo tal como la

oxidación del azúcar en el cuerpo humano a través de una serie de procesos de

transferencia de electrones muy complejas (Harper, 2008)

La reacción que debió suceder en este experimento es la siguiente; la glucosa

(un aldohexosa) en una solución alcalina se oxida lentamente por el oxígeno,

formando ácido glucónico:

Se oxida a O2

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En presencia de hidróxido de sodio, (KOH) que es un compuesto inorgánico y

"base fuerte" y utilizada en este experimento como un nucleófilo, que sirvió como

una fuente de OH- para atacar a la enlaces polares del azul de metileno. La

velocidad del azul de metileno en la reacción actúa como un agente de

transferencia de oxígeno, cuando existe oxígeno presente en la solución toma una

coloración azul brillante; cuando el oxígeno se agota el indicador sufre una

reducción, y la solución se torna incolora. Como la glucosa se oxida por el oxígeno

disuelto, el azul de metileno en sí se reduce, formando el metileno incoloro blanco,

y el color azul desaparece de la solución (Baker, 2006). Se encontró que la

constante de velocidad para este paso de primer orden es de aproximadamente

2,3 × 10 -3 min -1 con respecto a la concentración total de azúcar en las

condiciones utilizadas para tornarse a incoloro, por ejemplo 0.184 M de glucosa,

pH 13,3, 25 ° C (Anderson, et al., 2012).

Entonces podemos decir que debido al efecto de la concentración de glucosa y

azul de metileno afecto la realización del cambio de azul a incoloro aunque esta

estuviera en constante o ausencia de agitación. Pudimos obtener la reducción de

la glucosa pero no la forma oxidada, debido a lo mencionado antes. Podemos

confirmar con lo que nos mencionaba Harper en el 2008 sobre la reacción

química puede ocurre a diferentes velocidades dependiendo a la temperatura o la

concentración, o la introducción de un catalizador, pueden alterar estos. Aunque el

cambio de la naturaleza de los reactivos es decir si estaban o no caducados no

afectaba a esto; ya que se realizó una prueba con suero glucosado en condiciones

perfectas y no sucedió el cambio a incoloro. La concentración de la solución vario

muy poco, es decir se encontraba altamente alcalino, deducimos entonces que fue

la concentración de glucosa y de azul de metilo por el cual no se llevara acabo

este cambio.

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CONCLUSIONES:

En conclusión, la glucosa puede oxidarse tanto biológica como químicamente, cuando sucede biológicamente entonces significa que estamos hablando de metabolismo, oxidar la glucosa para así obtener energía, pero para ello se necesitan enzimas cumpliendo la siguiente reacción.

, químicamente, en una reacción redox esto no es posible, si, se puede oxidar la glucosa pero no para obtener energía, si no para convertirlo en un ácido glucónico, el azul de metileno sirve como agente de transferencia de oxígeno reduciéndose, y el NaoH alcaliniza la disolución para tener la óptima condición de la oxidación de glucosa.

Cuestionario

1.- Define una oxidación.

La oxidación es una reacción química donde un elemento cede electrones, y por lo

tanto aumenta su estado de oxidación.

Perdida de electrones (o aumento en el número de oxidación).

2. Define una reducción. La reducción es el proceso electroquímico por el cual

un átomo o un ion ganan electrones. Implica la disminución de su estado de

oxidación. Este proceso es contrario al de oxidación

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Ganancia de electrones (o disminución en el número de oxidación).

3. Escribe un texto de máximo 100 palabras explicando qué es la glucólisis (rxs, enzimas, DG, regulación)

Vía metabólica encargada de oxidar la glucosa a piruvato y así, obtener energía

para la célula, regulada por la insulina, cuando la glucosa entra en la célula la

hexoquinasa convierte a la glucosa en glucosa-6-fosfato, luego comienzan una

serie de reacciones hasta llegar a la reacción 5, donde después obtener

dihidroxiacetona fosfato y Gliceraldehido-3-fosfato por la aldosa, siguen

reaccionando hasta llegar hacer piruvato por acción del piruvatoquinasa, siendo un

total de 10 reacciones con 10 enzimas, y una producción de 10 ATP, 2 NADH y 4

De ATP por glucosa.

4. ¿Qué destinos puede tener el piruvato?

Puede transformarse a acetaldehído (Fermentación alcohólica), a lactato

(Fermentación láctica) y a acetil-CoA (al ciclo de Krebs). Las primeras dos se dan

en condiciones anaerobias y la tercera en condición aerobia.

5.- ¿Qué es la fermentación?

Es un proceso catabólico (rompimiento de compuestos complejos a compuestos

sencillos) oxidativo (intercambio de electrones) de cuyo resultado obtendremos un

compuesto orgánico. El producto final varía según el sustrato.

6.- ¿Qué es la respiración?

Conjunto de mecanismos por los cuales las células toman oxigeno (O2) y eliminan

el dióxido de carbono (CO2) que producen. Puede dividirse en cinco sucesos

funcionales importantes:

A) ventilación alveolar

B) hematosis o intercambio de gases

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C) transporte de gases

D) difusión de gases

E) respiración real

7. Explica ¿por qué se dice que la reacción experimentada se ve favorecida a un pH alcalino? Ya que el pH es importante para favorecer la ruta metabólica que lleva a la

producción de ácido glucónico ya que se produce casi exclusivamente en medios

alcalinos. Además de que reaccionan rápidamente con el oxígeno.

8. Explica la diferencia que hay entre la oxidación de glucosa con oxígeno molecular observada en ésta práctica y la oxidación  observada en la práctica 2

En la 2 al ser biológica, la oxidación de glucosa genera energía, Las levaduras son

organismos anaeróbicos facultativos, que significa que pueden vivir sin oxígeno.

Cuando hay oxígeno lo utilizan para la respiración, es decir para oxidar la glucosa

completamente y así obtener ATP.  En cambio, en esta práctica el resultado fue

gluconato o ácido glucónico, no energía, oxidando la glucosa siendo este un

proceso redox y no una reacción biológica.

9.- ¿Qué destinos puede tener la glucosa?

De acuerdo al tejido que pertenezca, la glucosa sigue distintos caminos:

* En el musculo se fosforila para dar glucosa-6-fosfato

* Exceso de glucosa forma glucógeno

*en situación contraria la glucosa se degrada produciendo ácido pirúvico

* En condiciones de baja concentración de O2, se transforma en ácido láctico

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* En condiciones aerobias, la glucosa se oxida hasta CO2 y agua

10.- ¿Cuáles son las dos principales formas de oxidación de la glucosa?

*glucolisis

*transformación del piruvato en acetil CoA

*ciclo de Krebs

*formación de lactato

*glucogénesis

*vías de las pentosas fosfatos.

Referencias Bibliográficas

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Baker, C. (2006). The 'blue bottle' reaction. Recuperado el 29 de Septiembre de 2015, de ROYAL SOCIETY OF CHEMISTRY: http://www.rsc.org/Education/EiC/issues/2006Nov/Exhibitionchemistry.asp

Fleming, D. (06 de Mayo de 2014). Más allá de la 'botella azul'. Recuperado el 29 de Septiembre de 2015, de http://www.rsc.org/eic/2014/05/indigo-carmine-traffic-light-demonstration

Garrido, A. (s.f). Destinos del piruvato. En Bioquímica metabólica. (p.15). Casa editorial mares. Recuperado de: https://books.google.com.mx/books?id=zMn8DlO6YLUC&pg=PA15&dq=destinos+del+piruvato&hl=es&sa=X&ved=0CCgQ6AEwAmoVChMItfb2p-KdyAIVAX6SCh2c6QfD#v=onepage&q=destinos%20del%20piruvato&f=true

González, C. (s.f). Respiración celular. Recuperado de: http://www.botanica.cnba.uba.ar/Pakete/6to/Respiracion6to/Respiracion.htm

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Harper, A. (2008). BLUE BOTTLE EXPERIMENT. Recuperado el 29 de Septiembre de 2015, de https://cms.qut.edu.au/__data/assets/pdf_file/0014/24008/blue-bottle-experiment-teacher-worksheet.pdf

sureste, M. (24 de Marzo de 2011). Oxidacion de la glucosa. Recuperado el 29 de Septiembre de 2015, de http://es.slideshare.net/MaribelCarmen/oxidacin-de-la-glucosa

Vázquez, E. (2003). La oxidación de la glucosa. En Bioquímica y biología molecular en línea. Recuperado de: http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/oxidacion%20glucosa.html

Voet, D., Voet, J. & Pratt, C. (2009). Bioquímica en la salud y la enfermedad. En Fundamentos de Bioquímica. (p. 469). China: Editorial Medica panamericana. Recuperado de: https://books.google.com.mx/books?id=FXDiqLK6GmAC&pg=PA468&dq=velocidad+de+reaccion+de+la+glucosa&hl=es&sa=X&ved=0CBsQ6AEwAGoVChMImfa3mdmdyAIVSgmSCh37EgsJ#v=onepage&q=velocidad%20de%20reaccion%20de%20la%20glucosa&f=false