االخحبارات اىعامة ىيبروجيه

اخحبار اىبيوريث

Biuret Test

ىطيبة ميمياء حيوي عميي

دكتور وسف الشرك

البورت بطرقة البالزما ف البروتن كمة تقدر• -:الطرقة أساس•

الروابط مع النحاس أونات تفاعل الطرقة هذه ف تم• .البنفسج أو األزرق اللون لتعط للبروتن المكونة الببتدة

لتكون أكثر أو ربتطتن وجود من البد التفاعل هذا لحدوث• .البنفسج أو األزرق اللون

العنة ف البروتن تركز على اللون شدة أو تركز تأثر•

التجهزات• أونات من قاعدي محلول استخدام تم البروتنات عن للكشف•

بورت، محلول سمى باهت أزرق لون ذو ( (Cu+2 النحاس الكربون ذرات مع ترتبط عندما النحاس أونات اختزال تم حث

مع األمنة األحماض تربط الت الببتدة الرابطة على الموجودة لون غر المختزل التفاعل وهذا البروتنات ف البعض بعضها

.الداكن األزرق اللون إلى الباهت األزرق اللون من المحلول

شراءه مكن ( (Biuret solution بورت محلول•

ترتارات جم 12 و النحاس كبرتات من جم 3 بإذابة تحضره أو • على ضاف ثم مقطر ماء مل 100 ف والبوتاسوم الصودوم

التحرك مع الصودوم هدروكسد % 10 مل 600 مهل .(الحامض باستخدام عار) المستمر

.للدن وكفن للوجه واق ستخدم المحلول هذا تحضر أثناء •

تكوين الربطة اليبلتيدية•

Hydrated Copper sulphateوظفة كبرتات النحاس •

ربط أون النحاس الببتدات مع بعضها كما موضح ف

: الشكل التال

Cu+2 أيون اىنحاس

ال يشحرك محيوه هيدرومسيد اىبوجاسيو في اىحفاعو وىنه •

.ينون جو قاعدي فقط

Potassiumوظيفة صوديو بوجاسيو جرجريث •

sodium tartrate (KNaC4H4O6·4H2O) يثبث

مسل اىروابط اىببحيدجية بأيون اىنحاس

: األدوات والمواد المستخدمة• (طالب بمجموعات من طالبن لكل مجموعة 30)•

ملعقة 115.

أاللبومن 2.

الحلب 3.

علبة تونا4.

صفار البض5.

سكر السكروز6.

100انابب اختبار عدد 7.

15أوعة ماء صغرة عدد 8.

مع عاري صودوم هدروكسد 6بتركز ( 1)محلول بورت 9. قطارة

مع قطارة CuSO4% 1( 2)محلول بورت10.

مالحظات للطالب•

للسالمة ارتدا نظارات واقة ومرول المختبر وقفازات •

. بالستكة

.رجى ربط الشعر الطول خلف الرأس•

الطرقة• .6إلى 1رقم انابب االختبار من 1.

20 – 10ف أنبوب اختبار وضع بعضا من أاللبومن وأضافة 2. .مع التحرك بلطف( 1)نقطة من محلول بورت

مع التحرك ( 2)نقطة من محلول بورت 20 – 10ضاف 3. .بلطف

.دقائق ف نفس درجة حرارة الغرفة 5ضع األنبوبن لمدة و4.

تعاد الخطوات السابقة مع الحلب والتونا و صفار البض وسكر 5. .السكروز المذاب ورقم أنابب االختبار

تعاد الخطوات السابقة مع أاللبومن ولكن باستخدم نفس الحجم 6. .مع التحرك بلطفمن الماء بدل محالل بورت

النتائج• :تسجل النتائج ف الجدول كالتال•

إضافة محول الماء النتائج

بورترقم محتوات األنبوب

األنبوب

1 أاللبومن + _ بنسفج

2 الحلب + _ بنسفج

3 التونا + _ بنسفج

4 البض صفار + _ بنسفج

5 السكروز + _ بنسفج

6 أاللبومن - + أزرق

النقاش•

اللون؟ ف تغر هناك كان اختبار أنبوب اي ف1.

والماء السكروز سكر استخدام من الهدف ما2.

بورت؟ محلول بدل

الناتج اللون شدة بن مباشرة عالقة هناك3.

فهل البروتنات ف الببتدة روابط وعدد

من خاللها من تمكن تجربة اقتراح باإلمكان

.محلول ف الموجودة البروتن كمة حساب

اإلجابات• اللون ف تغر هناك كان 4 إلى 1 االختبار انابب ف1.

إلثبات سلب كمرجع السكروز سكر بودرة استخدام تم2. سكر مع بورت محلول لون على تغر اي وجد ال انه

.ببروتن لس ألنه السكروز

محلول ف الموجودة البروتن كمة حساب مكن3. الضوئ الطف مقاس جهاز باستخدام

وهو Spectrophotometer السبكتروفوتومتر عنة ف الممتصة االضاءه مقدار قس جهاز

الموجة طول معلوم ضوئ مصدر مسار ف موضوعة .اللون شدة مع زداد الممتصة الضوء كمة فمقدار