LAPORAN SPEKTRO

5/21/2018 LAPORAN SPEKTRO

1/22

SPEKTROFOTOMETER Page 1

KATA PENGANTAR

Puji syukur Alhamdulillah kami panjatkan kepada Allah swt atas segala rahmat dan hidayah-Nya

kepada kita semua, sehingga kami dapat menyusun laporan ini dengan judul LAPORAN

LABORATORIUM KLINIK LANJUT SPEKTRO FOTOMETER.

Dalam penyusunan laporan ini tidak jarang kami mengalami berbagai kesulitan dan halangan.

Namun, atas perhatian dan dukungan dari berbagai pihak sehingga kami dapat menyelesaikan makalah

ini.

Dan kami menyadari bahwa dalam penyusunan laporan ini masih banyak kekurangan. Hal

tersebut dikarenakan keterbatasan pengetahuan dan pengalaman kami, untuk itu kami mengharap

kritik dan saran yang dapat membangun dari semua pembaca demi sempurnanya laporan ini.

Akhirnya kami mengharapkan semoga laporan ini bisa bermanfaat bagi semua.

Surabaya,3 Maret 2014

Penyusun


2/22


DAFTAR ISI

Kata Pengantar...............................................................................................1

Daftar Isi..........................................................................................................2

BAB I PENDAHULUAN

1.1Latar Belakang.....................................................................................31.2Rumusan Masalah................................................................................31.3Tujuan..................................................................................................3

BAB II PEMBAHASAN

2.1Pengertian spektrofotometer42.2Bagian-bagian spektrofotometer..82.3Blok diagram dan cara kerja92.4Cara pengoperasian.112.5Kalibrasi spektrofotometer..112.6Maintenance spektrofotometer....15

BAB III PENUTU

Kesimpulan.21

Saran...21

Daftar Pustaka...22


3/22


BAB I

PENDAHULUAN

1.1Latar BelakangSpektrofotometer merupakan suatu alat yang berfungsi untuk mengukur suatu panjang

gelombang. Alat ini juga sangat berhubungan dengan pengukur jauhnya pengabsorbansian energi

cahaya oleh suatu sistem kimia sebagai fungsi panjang gelombang dengna absorban maksimum

dari suatu unsur atau senyawa.

K o n s e n t r a s i u n s u r a t a u s e n y a w a d a p a t d i h i t u n g d e n g a n m e n g g u n a k a n

kurvastandar yang diukur pada panjang gelombang absorban tersebut, yaitu panjang

gelombang yang diperoleh dari hasil nilai absorbansi yang tertinggi. Spektrum

absorban selain bergantung pada sifat dasar kimia, juga bergantung pada faktor-faktorlain. Perubahan pelarut sering menghasilkan pergesaran dari pta absorbansi. Larutan pembanding

dalam spektrofotometri pada umumnya adalah pelarut murniatau suatu larutan blanko yang

mengandung sedikit zat yang akan ditetapkan atautidak sama sekali (Day & Underwood 1994).

1.2 Rumusan masalah1.2.1 Apa pengertian dari spektrofotometer?1.2.2 Apa bagian-bagian spektrofotometer?1.2.3 Bagaimana blok diagram dan cara kerja blok diagram dari spektrofotometer?1.2.4 Bagaimana cara pengoperasian spektrofotometer?1.2.5 Bagaimana cara kalibrasi spektrofotometer?1.2.6 Bagaimana cara perawatan dari spektrofotometer?1.2.7 Apa yang mempengaruhi pengukuran spektrofotometer?

1.3Tujuan1.2.1 Untuk mengetahui pengertian dari spektrofotometer1.2.2 Untuk mengetahui bagian-bagian spektrofotometer1.2.3 Untuk mengetahuiblok diagram dan cara kerja blok diagram dari spektrofotometer1.2.4 Untuk mengetahui cara pengoperasian spektrofotometer1.2.5 Untuk mengetahui cara kalibrasi spektrofotometer1.2.6 Untuk mengetahui cara perawatan dari spektrofotometer1.2.7 Untuk mengetahui apa yang mempengaruhi pengukuran dari spektrofotometer


4/22


BAB II

PEMBAHASAN

2.1Pengertian SpektrofotometerSpektrofotometer sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri dari spektrometer dan fotometer.

Spektrometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer

adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang diabsorpsi. Jadi

spektrofotometer digunakan untuk mengukur energi

secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan,

direfleksikan atau diemisikan sebagai fungsi dari

panjang gelombang.Spektrofotometer merupakan alat yang digunakan

untuk mengukur absorbansi dengan cara melewatkan

cahaya dengan panjang gelombang tertentu pada suatu

obyek kaca ataukuarsa yang disebutkuvet.Sebagian

dari cahaya tersebut akan diserap dan sisanya akan

dilewatkan. Nilai absorbansi daricahaya yangdilewatkan akan sebanding dengankonsentrasi larutan di dalamkuvet.

Spektrofotometer bekerja berdasarkan penyerapan sinar yang dihasilkan oleh sampel yang

bewarna pada panjang gelombang tertentu. Spektrofotometer dapat mengidentifikasi logam yang ada

dalam sampel bila sampel itu bewarna, namum sulit diidentifikasi pada sampel yang tidak

menghasilkan perubahan warna atau kadar logam dalam sampel sangat kecil sekali.

Penyerapan oleh perpindahan muatan.Interaksi antara energy cahaya dan molekul dapat

digambarkan sbb :

E = hv

Dimana: E = energy (joule/second) v = frekuensi foton

h = tetapan plank

Beer Lambert Law dikenal sebagai hukum Beer Beer atau Hukum Lambert Bouguer, itu

mengidentifikasi hubungan antara konsentrasi sampel dan intensitas cahaya, selain itu ada dua konsep

implisit: transmitansi [T] dan absorbansi [A]. Transmitansi [T] adalah sebagian kecil dari cahaya yang

terkait dari ditentukan panjang gelombang melewati sampel. Cahaya yang diserap diukur sebagai

absorbansi (A) sedangkan cahaya yang hamburkan diukur sebagai transmitansi (T), dinyatakan dengan

hukum lambert-beer atau Hukum Beer, berbunyi:
http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Absorbansi&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Kuarsahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Kuvet&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Cahayahttp://id.wikipedia.org/wiki/Cahayahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Konsentrasi&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Kuvet&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Kuvet&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Konsentrasi&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Cahayahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Kuvet&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Kuarsahttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Absorbansi&action=edit&redlink=1


5/22


jumlah radiasi cahaya tampak (ultr aviolet, inframerah dan sebagainya) yang diserap atau

ditr ansmisikan oleh suatu l aru tan merupakan suatu fungsi eksponen dari konsentr asi zat dan tebal

larutan.

Korespondensi transmisi dan absorbsi

Didasarkan pada Hukum BeerLambert, apabila seberkas cahaya monocromatic dengan intensitas

awal I0dijatuhkan pada kuvet (wadah sample) berukuran dalam D, berisi larutan dengan konsentrasi

C, maka setelah berkas tersebut menempuh jarak d, intensitas cahaya akan turun sampai It.

Hubungan I0dan Itsecara exponensial menurut persamaan :

It = I0x 10-kdC

Log (It / I0) = -kdC, dimana k = konstanta ..(1)

Cahaya yang di absorbsi (A) adalah kdC dan Transmisi (T) tidak lain adalah perbandingan

antara intensitas akhir dengan intensitas awal.

Jadi secara sistematis dituliskan sebagai berikut :

A = kdC .............................................................................................(2)

T = It/ I0 ............................................................................................(3)

Transmisi diprosentasikan menjadi :

T =

%T = T / 100

%T = (It/ I0) / 100

%T = It/ I0x 100

It/ I0 = %T / 100 ................................................................................(4)

Logaritma transmisi dari persamaan (1) dan substitusi pers. tersebut ke dalam persamaan (2)


6/22


Log (It/ I0) = -kdC

A = kdC

A = -Log (It/ I0)

A = -log (%T / 100)

A = -log %T + log 100

A = log 100log %T

Absorbsi = 2log %T

dimana:

It = Intensitas radiasi yang ditransmisikan

Io = Intensitas radiasi insiden

%T = Konsentrasi molekul menyerap cahaya dalam sampel

A = absorbansi diukur

= Molekul absorbansi koefisiensi [liter / mol / cm]

l/d = Jarak dari lintasan yang dilalui (panjang jalan) oleh cahaya dalam sampel

c = konsentrasi Contoh [mol / liter]


7/22


Grafik yang disajikan selanjutnya menunjukkan bagaimana absorbansi [A] dan transmisi [T]

bervariasi sebagai fungsi dari konsentrasi [C] menurut hukum Beer Lamber

Dalam Kesimpulan Ini dapat disimpulkan bahwa dengan meningkatkan konsentrasi zat,

transmitansi menurun dan, setelah meningkatkan konsentrasi substansi, absorbansi meningkat.

Linieritas hukum Beer Lambert dipengaruhi jika kondisi terjadi.

1. Pergeseran dari keseimbangan kimia sampel sebagai fungsi dari konsentrasi.2. Penyimpangan dalam koefisien absorbansi, lebih besar konsentrasi dari 0,01 M karena

elektrostatik interaksi antara molekul di dekatnya.

3. Perubahan indeks refraksi pada konsentrasi tinggi analisis.4. Difusi cahaya karena partikel dalam sampel.5. Fluoresensi atau fosfor sampel.6. Non-monokromatik radiasi.Secara eksperimen hukum Lambert-beer akan terpenuhi apabila peralatan yang digunakan

memenuhi kriteria-kriteria berikut:

1. Sinar yang masuk atau sinar yang mengenai sampel berupa sinar dengan dengan panjanggelombang tunggal (monokromatis).

2. Penyerapan sinar oleh suatu molekul yang ada di dalam larutan tidak dipengaruhi olehmolekul yang lain yang ada bersama dalam satu larutan.

3. Penyerapan terjadi di dalam volume larutan yang luas penampang (tebal kuvet) yang sama.
http://wanibesak.wordpress.com/2010/09/19/senyawa-hidrat-dan-tatanama-senyawa-hidrat/http://wanibesak.wordpress.com/2010/09/19/senyawa-hidrat-dan-tatanama-senyawa-hidrat/http://wanibesak.wordpress.com/2010/09/19/senyawa-hidrat-dan-tatanama-senyawa-hidrat/http://wanibesak.wordpress.com/2010/09/19/senyawa-hidrat-dan-tatanama-senyawa-hidrat/http://wanibesak.wordpress.com/2010/09/19/senyawa-hidrat-dan-tatanama-senyawa-hidrat/http://wanibesak.wordpress.com/2010/09/19/senyawa-hidrat-dan-tatanama-senyawa-hidrat/


8/22


4. Penyerapan tidak menghasilkan pemancaran sinar pendafluor. Artinya larutan yang diukurharus benar-benar jernih agar tidak terjadi hamburan cahaya oleh partikel-partikel koloid

atau suspensi yang ada di dalam larutan.

5. Konsentrasi analit rendah. Karena apabila konsentrasi tinggi akan menggangu kelinearangrafik absorbansi versus konsentrasi.

2.2 Bagian-bagian spektrofotometerSecara umum Spektrofotometer memiliki 4 bagian penting, yaitu:

a. Sumber Cahaya

Sebagai sumber cahaya pada spektrofotometer, haruslah memiliki pancaran radiasi yang stabil

dan intensitasnya tinggi. Sumber energi cahaya yang biasa untuk daerah tampak, ultraviolet

dekat, dan inframerah dekat adalah sebuah lampu pijar dengan kawat rambut terbuat dari

wolfram (tungsten). Lampu ini mirip dengan bola lampu pijar biasa, daerah panjang gelombang

(l) adalah 3502200 nanometer (nm).

b. Monokromator

Monokromator adalah alat yang berfungsi untuk menguraikan cahaya polikromatis menjadi

beberapa komponen panjang gelombang tertentu (monokromatis) yang bebeda (terdispersi).

c. Cuvet

Cuvet spektrofotometer adalah suatu alat yang digunakan sebagai tempat sampel contoh atau

cuplikan yang akan dianalisis. Cuvet biasanya terbuat dari kwars, plexigalass, kaca, plastic

dengan bentuk tabung empat persegi panjang 1 x 1 cm dan tinggi 5 cm. Pada pengukuran di

daerah UV dipakai cuvet kwarsa atau plexiglass, sedangkan cuvet dari kaca tidak dapat dipakai

sebab kaca mengabsorbsi sinar UV. Semua macam cuvet dapat dipakai untuk pengukuran di

daerah sinar tampak (visible).

d. Detektor

Peranan detektor penerima adalah memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang

gelombang. Detektor akan mengubah cahaya menjadi sinyal listrik yang selanjutnya akan

ditampilkan oleh penampil data dalam bentuk jarum penunjuk atau angka digital.
http://wanibesak.wordpress.com/2010/09/19/menguji-kepolaran-molekul/http://wanibesak.wordpress.com/2010/10/02/emas-emas-putih-proses-pengolahan-bijih-emas-sifat-dan-pemakaian-emas/http://wanibesak.wordpress.com/2010/10/02/emas-emas-putih-proses-pengolahan-bijih-emas-sifat-dan-pemakaian-emas/http://wanibesak.wordpress.com/2010/09/19/menguji-kepolaran-molekul/


9/22


2.3Blok Diagram dan cara kerja blok diagram spektrofotometer

Cara kerja blok diagram :

Lampu halogen sebagai sumber cahaya merupakan cahaya Polychromatic yang mempunyai

panjang gelombang 400-800 nm memancarkan cahayanya yang masuk ke Monochomator.

Monochomator disini merupakan alat untuk menguraikan spektrum warna dari cahaya. Di dalam

Monochomator ini,cahaya Polychromatic diuraikan menjadi Monochromatic. Selanjutnya dari

Monochromator, cahaya masuk ke Filter. Filter ini berfungsi memilih atau melewatkan hanya 1

spectrum cahaya saja sesuai dengan unsur yang akan diukur. Karena setiap atom hanya akan menyerap

spectrum yang sesuai dengan energi atom itu sendiri. Cahaya yang keluar dari Filter ( I0) menyinari

cuvette,sehingga molekul di dalam cuvette akan mengabsorbsi sebuah eneri cahaya(foton) dengan

jarak gelombang tertentu dan menghasilkan It. Cuvette disini merupakan tempat menaruh sample yang

akan diperiksa Cahaya yang keluar dari cuvette (It) ditangkap oleh detektor. Detektor disini

merupakan sensor untuk merubah energi cahaya menjadi bentuk energi(sinyal-sinyal) listrik yang


10/22


selanjutnya dikuatkan oleh Amplifier lalu diconverter oleh ADC, dimana ADC disini berfungsi

mengubah data analog menjadi data digital. Kemudian dari ADC diolah oleh Microcontroller dan

ditampilkan ke display.

Kajian ringkas masingmasing komponen dapat diuraikan sebagai berikut :1. Sumber Sinar

Sumber sinar yang baik untuk pengukuran absorbans harus memancarkan spectrum yang kontinue dan

merata di daerah panjang gelombang yang di kehendaki.

Sumber sinar untuk uv digunakan lampu awan muatan hidrogen atau deuterium. Lampu ini terdiri dari

sepasang elektroda yang dipatri di dalam tabung kaca tertutup yang salah satu bagian dindingnya

tersebut dari bahan kuarsa dan diisi dengan gas hidrogen/deuterium pada tekanan rendah. Bila terhadap

kedua elektroda dihubungkan dengan tegangan listrik stabil maka antara kedua elektroda terjadi awanmuatan elektron (elektron discharge). Elektron tersebut akan bertumbuh dengan molekul gas H2atau

D2 . Akibatnya elektron elektron gas H2/D2 akan tereksitasi. Pada saat turun kembali ke keadaan

asas seraya memancarkan sinar yang membentuk spektrum yang kontinue yang meliputi daerah

panjang gelombang antara 180 350 mm sebagai sumber sinar tampak biasa digunakan lampu kawat

wolfram.

2. MonokromatorMonokromator berfungsi menguraikan berkas radiasi dari sumber yang kontinue menjadi sinar yang

monokromatis (panjang gelombang tunggal). Unsur penting sebuah monokromator adalah sistem celah

dan sistem dispersif. Radiasi dari sumber difokuskan ke celah masuk kemudian dikumpulkan oleh

sebuah lensa sehingga sinar paralel jatuh pada unsur dispersi yang merupakan sebuah prisma atau

sebuah kisi difraksi. Dengan pemutaran prisma. Bermacam macam bagian spektrum yang dihasilkan

oleh unsur dispersi difokuskan ke celah keluar menuju ke sel cupikan atau blanko.

3. Cuvet atau SelSel atau cuvet ialah wadah untuk menempatkan cuplikan maupun blanko. Tebal cuvet umumnya

bernilai 1 cm. Analisis dengan sinar uv cuvet yang dipakai harus terbuat dari kuarsa. Sedangkan bila

menggunakan sinar tampak, selain kuarsa bisa juga dipakai cuvet yang terbuat dari plastik atau gelas.

4. DetektorSuatu detektor berfungsi menyerap sinar yang mengenainya dan mengubahnya menjadi suatu besaran

yang dapat diukur. Detektor yang digunakan pada spektrofotometer uv-vis berupa alat foto-listrik.

Yang mengubah energi sinar menjadi energi listrik atau isyarat listrik. Isyarat yang dihasilkan

berbanding lurus dengan intensitas sinar yang mengenalnya.

5. Amplifier (penguat)Suatu amplifier menangkap isyarat masuk (input) dari rangkaian detektor dan melalui beberapa

proses elektronik tertentu menghasilkan suatu isyarat keluar (output) yang beberapa kali lebih besar

dari isyarat imput.


11/22


2.4 Cara pengoperasianSebelum kita membahas cara pengoperasian dari alat spektrofotometer, terlebih dahulu kita

mengenal alat dari spektrofotometer. Dan yang akan dibahas kali adalah salah satu macam alat

spektrofotometer yaitu Spectronic-20.

Spectronic-20 adalah spectrofotometer absorpsi sinar tampak berkas tunggal. Spektrofotometer

merupakan alat yang digunakan untuk mengukur absorbansi dengan cara melewatkan cahaya

dengan panjang gelombang tertentu pada suat objek/kuvet yang berisi larutan blanko/sampel.

Spektronik-20 merupakan spektrometer visible yang susunannya menggunakan satu berkas

tunggal (single beam). Spektrofotometer jenis ini memiliki susunan paling sederhana yang terdiri

dari sumber sinar, monokromator, kisi difraksi dan sistem pembacaan secara langsung.

Cahaya putih dari lampu wolfram difokuskan oleh lensa A ke celah masuk; lensa B

mengumpulkan cahaya dari celah masuk itu dan memfokuskan ke celah keluar setelah dipantulkan

dan didespersikan oleh kisi difraksi untuk memperoleh berbagai panjang gelombang. Cahaya

monokromatik yang menembus celah keluar melewati sampel yang akan diukur dan jatuh ke

tabung foto.

Cara mengoperasikan spectronic-20 :

1. Hubungkan alat dengan arus listrik AC 220V.2. Nyalakan alat spectronic-20 dengan tombol saklar atau pengatur 0 %T. Nyala merah dari

lampu indikator menandakan adanya arus yang mengalir. Biarkan lebih kurang 15 menit.

3. Pilih panjang gelombang yang akan digunakan dengan cara memutar pengatur panjanggelombang.

4. Atur meter ke pembacaan 0 %T.5. Masukkan larutan blanko (biasanya aquades) ke tempat sampel kuvet.6. Atur meter ke pembacaan 100 % T.7. Ganti blanko dengan larutan berwarna yang lain dan baca absorbans or transmitansi yang

ditunjukan oleh jarum pada pembacaan A/T.

8. Kalau sudah selesai, matikan alat.

2.5 Kalibrasi alat spektrofotometerTujuan kalibrasi

Agar alat spektrofotometer dapat digunakan dengan baik (menghasilkan data yang handal danvalid) dan awet

Untuk mengetahui letak kesalahan atau kerusakan secara dini sehingga dapat diperbaikisebelum alat mengalami kerusakan berat

Sesuat persyaratan ISO/IEC 17025 (klausal 5.5)


12/22


Kalibrasi

1. Panjang gelombang (presisiakurasi)2. Absorban (presisiakurasi)3. Sinar sesatan

Verifikasi (unjuk kerja) alat : pengecekan secara rutin

1. Panjang gelombang (presisiakurasi)

Ada tiga metode kalibrasi

1. a. Lampu lucutan bertekanan rendah (Hg; Cd atau Zn)Tabel 1. Garis emisi lampu Hg, Cd dan Zn

Unsur (nm) Unsur (nm)

Hg 185,0 Hg 435,8

Zn 213,9 Cd 467,8

Cd 228,8 Cd 480,0

Hg 253,7 Hg 546,1

Hg 365,0 Hg 579,1

Hg 404,7 Cd 643,8

1. b. Gelas filter Holmium atau DidimiumTabel 2. Data maks terseleksi dari Holmium dan Didimium

Filter Holmium

maks (nm)

Filter Didimium

maks (nm)

241,5 0,2 573 3,0

279,4 0,3 586 3,0

287,5 0,4 685 4,5

333,7 0,6

360,9 0,8

418,4 1,1

453,2 1,4

536,2 2,3

637,5 3,8


13/22


1. c. Larutan Halmium oksida dalam HClO4Tabel 3. Panjang Gelombang Maks Larutan Holmium Oksida

Panjang Gelombang Maks Larutan Holmium Oksida (nm)

241,1 0,1

278,2 0,5

287,2 0,2

361,2 0,2

Pengecekan panjang gelombang

1) Keterulangan panjang gelombang / wavelength repeatability

Adalah ukuran kemampuan suatu spektrofotometer untuk kembali pada posisi spektral yang sama yang

ditentukan berdasarkan pita absorpsi dari suatu pita (band) dari panjang gelombang yang telah

diketahui bila alat di reset atau dibaca pada panjang gelombang yang telah ditentukan.

2) Akurasi panjang gelombang / wavelength accuracy

Adalah besarnya penyimpangan (bias) dari rata-rata pembacaan panjang gelombang pada suatu pita

(band) absorpsi dari panjang gelombang yang telah ditentukan.

2. Absorban (presisiakurasi)

Kalibrasi absorbansi

Konsentrasi analit yang mengabsorpsi berbanding lurus dengan absorbansi yang terukur Linearitas skala fotometrik harus diperiksa Stabilitas pembacaan fotometrik harus cukup baik sehingga variansi selama pengukuran tidak

berpengaruh pada ketelitian

Bahan yang dapat digunakan untuk kalibrasi absorban sbb

- Larutan dikromat

Larutan K2Cr2O7dalam 0,005 M H2SO4(direkomendasikan untuk daerah UV)


14/22


Tabel 4. Harga absorban K2Cr2O7dalam 0,005 M H2SO4

(nm) Larutan A Larutan B

235 (Min) 0,626 0,009 1,251 0,018

257 (Maks) 0,727 0,007 1,454 0,014

313 (Min) 0,244 0,004 0,488 0,008

350 (Maks) 0,536 0,005 1,071 0,010

Kalibrasi absorban dilakukan pada suhu : 2030oC

- Asam kromat

- Tembaga sulfat

Larutan CuSO4dalam H2SO41 % (direkomendasikan untuk daerah Vis)

Tabel 5. Nilai absorbansi larutan CuSO4dalam H2SO41%

Panjang Gelombang (nm) Absorbansi

600 0,068

650 0,224

700 0,527

750 0,817

Catatan :

Pengukuran dilakukan dengan kuvet 10 mm Lebar pita (bandwidths) lebih kecil dari 10 nm Penyimpangan absorban maksimum 2 %

3. Sinar sesatan

Untuk mengetahui unjuk kerja sinar sesatan dianjurkan menggunakan metoda ASTM dengan cara :

Pada 220 nm: ukur transmitansi dari 10 g/L NaI dengan kuvet 1 cm %T < 10 -10

Pada 340 nm: ukur transmitansi dari 50 g/L NaNO3dengan kuvet 1 cm %T = ?


15/22


Tabel 5.

Ring spectral (nm) Filter cairan Panjang sel (mm)

165173,5 Air 0,10

170183,5 Air 10,0

175200 KCl encer (12 g/L) 10,0

195223 NaBr encer (10 g/L) 10,0

210259 NaCl encer (10 g/L) 10,0

250320 Aseton 10,0

300385 NaNO3encer (50 g/L) 10,0

2.6MAINTENANCE SPECTROFOTOMETERFrekuensi: Setiap tahun

Daerahdi manaspektrofotometerdipasangharusdiperiksasecara visualdan diujielektrikuntukmenjamin keselamatan operator. Pemeriksaan meliputi instalasi listrik dan instalasi wilayah

(infrastruktur fisik yang berkaitan dengan spektrofotometer).

Instalasi listrik Ini harus diverifikasi dan diuji untuk memastikan hal-hal berikut:

1. Ada outlet listrik atau wadah dengan tiang tanah.2. Stopkontak dalam kondisi baik dan tidak lebih dari 1,5 m dari spektrofotometer.3. Tegangan dari tingkat yang sesuai dan tidak boleh bervariasi lebih dari 5% dari tegangan

yang ditentukan di piring peralatan itu.

4. Polaritas wadah adalah benar.Tes ini harus dilakukan oleh seorang teknisi listrik atau insinyur dan hasil harus dicatat untuk

memungkinkan tindak lanjut dari waktu ke waktu.

InstalasiDaerah1. Periksa apakah ada ruang bebas sekitar spektrofotometer untuk dua tujuan. Pertama, untuk

menghubungkan kabel untuk lulus tanpa hambatan dan untuk komponen lain atau peralatan

pendukung (misalnya penstabil tegangan). Kedua, untuk memungkinkan ventilasi yang

memadai dari peralatan ketika beroperasi.

2. Menguji integritas meja, negara dan kebersihan.3. Pastikan tidak ada peralatan yang terpasang yang dapat mengirimkan getaran dalam jarak.

(Mis sentrifugal).


16/22


4. Pastikan bahwa itu tidak terpengaruh oleh kondisi yang terlalu lembab, debu atau suhutinggi. Suhu kamar yang sesuai untuk pengoperasian spektrofotometer umumnya berkisar

antara 10 dan 40 C.

5. Hindari memasang peralatan di mana ia menerima radiasi matahari langsung.6. Jangan memasang peralatan di mana terdapat medan magnet atau radiasi elektromagnetik

intens.

7. Pastikan daerah instalasi bebas dari pengaruh gas dan zat korosif.Visual pemeriksaan peralatan

Frekuensi: Setiap enam bulan

Spektrofotometer harus diperiksa secara visual untuk memverifikasi bahwa negara dan integritas

komponen perusahaan diselenggarakan sesuai dengan spesifikasi pabrik. Aspek yang paling

penting yang dikutip berikutnya:

1. Periksa bahwa struktur meja kerja pendukung spektrofotometer berada dalam kondisi baik.2. Uji struktur umum spektrofotometer. Pastikan tombol atau switch kontrol dan penutupan

mekanik dipasang tegas dan bahwa label identifikasi mereka jelas.

3. Pastikan bahwa aksesoris adalah bersih, tidak menunjukkan retak dan bahwa negarafungsionalnya adalah optimal.

4. Konfirmasikan bahwa bagian penyesuaian mekanik (mur, sekrup, baut, dll) disesuaikan danberada dalam kondisi baik.

5. Periksa apakah konektor listrik tidak memiliki retak atau pecah, bahwa mereka bergabungdengan benar ke baris.

6. Pastikan kabel tidak menunjukkan tanda-tanda splicing, bahwa mereka tidak usang danbahwa mereka tidak memiliki usang isolasi.

7. Periksa kabel mengamankan perangkat dan terminal bebas dari debu, kotoran atau korosi.Kabel ini sama tidak harus dikenakan keluar atau menunjukkan tanda-tanda kerusakan.

8. Periksa bahwa sistem grounding (internal dan eksternal) adalah standar, dari jenis yangdisetujui, fungsional dan benar diinstal.

9. Pastikan bahwa sirkuit switch atau interrupters, kotak sekering dan indikator bebas dari debu,kotoran dan korosi.

10.Periksa komponen listrik eksternal untuk tanda-tanda overheating.

A. PEMELIHARAAN UMUMPembersihan tumpahan

Dalam kasus kebocoran di pemegang sampel atau carrier, tumpahan harus dibersihkan sesuai

dengan prosedur berikut:

1. Matikan spektrofotometer dan lepaskan kabel dari umpan listrik.


17/22


2. Gunakan alat suntik untuk membersihkan pemegang sampel. Menyerap cairan sebanyakyang mungkin dapat diekstraksi.

3. Keringkan pemegang sampel dengan cotton bud obat.4. Gunakan kertas lensa atau sepotong kain bersih bertekstur lembut atau cotton buds untuk

membersihkan jendela fotosel.

5. Bersihkan bagian luar instrument dengan sepotong kain dibasahi dengan ir suling termasuklayr, control dan keyboard dalam pembersian.

Membersihkan cuvettes kuarsa dianjurkan untuk melaksanakan prosedur berikut untuk menjaga

cuvettes kuarsa dalam kondisi baik:

1. Cuci cuvettes menggunakan larutan alkali encer seperti NaOH 0,1 M dan asam encer sepertiHCl, 0,1 M.

2. Bilas cuvettes beberapa kali dengan air suling. Selalu gunakan cuvettes bersih untukmelakukan pengukuran absorbansi.

3. Melakukan prosedur pembersihan ketat dan hati-hati pada cuvettes jika sampel yangdigunakan dapat menyimpan film. Beberapa produsen merekomendasikan menggunakan

deterjen khusus untuk membersihkan cuvettes.

Penggantian Baterai

Berbagai model spektrofotometer menggunakan baterai untuk menghafal data yang berhubungan

dengan analisis, seperti tanggal dan waktu. Prosedur untuk mengubah baterai serupa dalam berbagai

peralatan. Mengikuti prosedur ini dianjurkan:

1. Pastikan bahwa indikasi baterai rendah muncul di layar instrumen.2. Matikan spektrofotometer.3. Lepaskan kabel listrik pakan.4. Membuka kompartemen baterai dan keluarkan baterai usang.5. Bersihkan titik kontak listrik.6. Pasang baterai baru dengan spesifikasi yang sama seperti aslinya.7. Tutup kompartemen.8. Hubungkan kembali peralatan.9. Sesuaikan informasi tanggal dan waktu.

Perubahan bohlam / lampu

Bola lampu adalah konsumsi dengan umur produktif yang terbatas. Ini harus meramalkan bahwa

pada suatu titik waktu, maka akan diperlukan untuk menggantinya. Kemungkinan besar akan terbakar,

atau menderita metallization internal dan penguapan dan cahaya yang dipancarkan tidak akan lagi

memenuhi spesifikasi proses spektrofotometri. Lampu langkah perubahan berbeda untuk setiap model


18/22


dan salah satu harus selalu mengikuti instruksi dari pabriknya. Langkah-langkah umum adalah sebagai

berikut:

1. Pastikan bahwa bola lampu tidak berfungsi atau bahwa ada beberapa indikasi fl aw. Dalamperalatan modern, tanda akan muncul di layar atau kode kesalahan. Dalam peralatan tua,

cahaya hanya tidak akan bekerja lagi.

2. Matikan spektrofotometer.3. Lepaskan kabel pakan.4. Undo sekrup mengamankan bagian atas kompartemen lampu.5. Buka sekrup menjaga mekanisme lampu tetap.6. Buka sekrup pengikat kabel sambungan listrik ke lampu (dalam beberapa peralatan, ini

mungkin tidak diperlukan, sebagai dasar perakitan memiliki mekanisme kontak langsung ke

terminal kontak lampu).

7. Pasang lampu baru dengan karakteristik yang sama seperti aslinya. Gunakan sarung tanganuntuk menghindari mendapatkan sidik jari pada permukaan lampu.

8. Hubungkan kembali kabel listrik ke pakan lampu.9. Pasang kembali sekrup menjaga lampu di tempat.10.Pasang kembali sekrup penutup kompartemen lampu itu.11.Hubungkan kembali spektrofotometer.12.

Hidupkan peralatan ON dan melaksanakan prosedur kalibrasi ulang peralatan yangditetapkan oleh produsen.

Maintenance Preventive

Pemeliharaan preventif spektrofotometer harus sesuai dengan rutinitas dan frekuensi yang

direkomendasikan oleh produsen. Serangkaian rutinitas dasar yang dapat dilakukan di laboratorium

disajikan berikutnya:

1. Bersihkan spektrofotometer secara eksternal, termasuk, layar kontrol atau pengukuran meter.Hal ini dapat dilakukan dengan menggunakan sepotong kain halus (mirip dengan tekstur

yang digunakan dalam saputangan) dibasahi dengan air suling.

2. Periksa dan bersihkan kabel listrik pakan.3. Pastikan lampu yang bersih dan dalam kondisi baik. Jika tidak berfungsi, menginstal yang

baru dengan spesifikasi yang sama seperti aslinya. Dalam spektrofotometer modern, negara

lampu terdeteksi secara otomatis oleh perangkat lunak yang mengontrol negara dan fungsi

dari peralatan sehingga mudah untuk menentukan kapan perlu mengganti lampu. Mengubah

lampu dan melaksanakan penyesuaian berikutnya setelah rekomendasi pabrikan.

4. Periksa sekering perlindungan. Sebelum membuka kompartemen di mana sekeringditempatkan, periksa spektrofotometer dimatikan dan periksa bahwa kontak yang bersih dan


19/22


dalam kondisi baik. Jika perlu, ganti dengan yang baru dengan karakteristik yang sama

seperti yang direkomendasikan oleh produsen.

5. Taruh instrumen dalam konfigurasi operasional.6. Aktifkan "pada" saklar dan memungkinkan untuk pemanasan selama lima (5) menit.

Verifikasi bahwa:

a. Lampu indikator atau percontohan bekerja.b. Indikator membaca tinggal di nol (0).c. Sumber cahaya bekerja.

7. Melakukan tes saat melarikan diri dalam "on" dan posisi "off"a. Verifikasi tiang tanah dan polaritas yang benar.b. Verifikasi polaritas yang benar tanpa tiang tanah.c. Verifikasi polaritas terbalik tanpa tiang tanah.

8. Kalibrasi panel depan spektrofotometer sesuai dengan instruksi dari pabriknya.9. Ukur sensitivitas peralatan itu.10.Melakukan tes sesuai dengan hukum Beer.11.Kembali spektrofotometer ke konfigurasi awal jika kalibrasi telah berhasil diselesaikan.

2.7 REAGENReagen atau dikenal juga dengan Reaktan merupakan istilah yang sering digunakan didunia

kimia. Reagen memiliki banyak kegunaan dan sebagian besar melibatkan menyelamatkan nyawa

aplikasi. Zat atau dua zat membuat, mengukur atau membangun keberadaan reaksi kimia dengan

bantuan reagen. Kimia organik mungkin juga menetapkan reagen sebagai campuran atau zat-zat

yang berbeda yang akan membuat perubahan pada substrat pada kondisi tertentu.

Contoh reagen alami:

* Fenton reagen - reagen gaya analitis reagen dimanfaatkan untuk membasmi tertentu alami dan

organik bahan kimia seperti tetrakloroetilena (PCE) dan trichloroethylene (TCE).

* Grignard reagen - reagen dalam semacam ini khusus dibuat ketika menggunakan respon yang

dihasilkan dari campuran alkil dan magnesium. Senyawa organik semua perlu ini reaksi kimia

tertentu untuk membuat ikatan karbon-karbon

* Collins reagen - reagen ini digunakan untuk membantu beberapa zat-zat yang kompleks danalkohol untuk mengoksidasi.

* Fehling reagen - ini adalah suatu larutan natrium hidroksida, tembaga sulfat dan kalium natrium

tartrat yang khusus digunakan untuk menguji kehadiran aldehida dan gula dalam zat tertentu,

seperti yang urin.


20/22


* Dihasilkan dari reagen - hanya-put, ini merujuk kepada ammoniacal perak nitrat.

* Millon reagen - reagen investigasi dalam jenis ini unik dibuat oleh mencairkan logam Merkurius

dengan asam nitrat dan kemudian menyiram turun untuk mendapatkan kepadatan yang

diinginkan.Reagen adalah zat yang digunakan untuk mendeteksi larut protein.

Kata-kata, "reagen" dan "reaktan" dapat digunakan secara bergantian. Reaksi kimia terjadi ketika

dua atau lebih reaktan digabungkan bersama-sama. Reaktan harus hadir untuk menciptakan reaksi

kimia, tanpa mereka, tidak akan ada reaksi. Untuk proses kimia yang terjadi, pelarut dan katalis

yang diperlukan. Katalis tetap tidak berubah setelah setiap reaksi tapi benar-benar mengubah

waktu reaksi akan terjadi. Pelarut adalah zat yang mengurangi padat dan menghasilkan jenis solusi.

Reagen ini juga dapat digunakan dalam pengujian dan menganalisis bahan kimia. Bermutu tinggi

reagen mematuhi Testing harus dianggap sebagai murni. Minum air dapat menetapkan sebagai

contoh karena itu harus mengikuti kriteria tertentu untuk dianggap berkualitas tinggi.

Beberapa reagen juga digunakan sebagai komponen dasar dalam biologi molekuler yang spesifik

jenis aplikasi yang klien dikembangkan dalam program penelitian ilmiah mereka. Beberapa reagen

juga digunakan dalam kit dan tes yang digunakan untuk mendeteksi organisme yang lain sulituntuk menemukan di bawah pencitraan perangkat yang biasa. Reagen dan bahan-bahan lain yang

digunakan sebagai kunci produk dalam menciptakan alat untuk diagnosis. Reagen biasanya

dimaksudkan untuk tujuan penelitian, bahan baku dalam biologi molekuler, penggunaan forensik,

ayah tes, tes darah atau serologi, gram pengujian, imunologi, dan farmasi proses; untuk beberapa

nama.


21/22


BAB III

PENUTUP

KESIMPULANAlat spektrofotometer ini alat yang digunakan untuk mengethui suatu konsentrasi

larutan yng atau senyawa logam yang terdapat dalam darah manusia, alat ini sangat

terpengaruh oleh suhu sehingga tidak bisa ditempatkan di tempat yang lembab atau panas

melaqinkan di tempatkan di tempat yang ber AC, dan pembersian tempat sempel tau cuvet

harus dilkukn dengan hati-hati karna mudah pecah.

SARANGunakan reagen yang sesuai dengan larutan agar alat bisa berusia lama dan jaga

kebersihan body alat, perhatikan kebersihan cuvet, jangan simpan di tempat yang lembab

usahak disimpan di tempat yang ber AC.


22/22


DAFTAR PUSTAKA

Day, R.A,J.R dan A.L Underwood. 1986. Analisis Kimia Kuantitatif edisi kelima. Jakarta :

Erlangga.

Hafnimardiyanti dan Martalius. 2009. Penuntun Praktikum Instrumen Analisis I.

Padang : ATIP.

Khopkar, S.M. 2003. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta : UI Press.

Sastrohamidjojo, Hardjono. 1992. Spektroskopi Inframerah. Yogyakarta : Liberty

Yogyakarta.

Blaschke,Gottfried, Roth, Hermann J.1998. Analisis Farmasi edisi kedua. Yogyakarta:GajahmadaUniversity Press. hal.367-373.

Fessenden&Fessenden. 1982 . Kimia Organik edisi kedua. Jakarta: Erlangga. hal.436-437.

Kosasih, Satiadarma, etal. 2004. Asas Pengembangan Prosedur Analisis edisi pertama. Jakarta:

Erlangga. hal.87-97.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. FARMAKOPE INDONESIA EDISI IV 1995.

Jakarta: Kementrian Kesehatan Republik Indonesia.

http://en.wikipedia.org, diakses pada tanggal 10 Maret 2010 pukul 18.15

Documents

LAPORAN SPEKTRO